NL195096C - Farmaceutisch preparaat dat ciclosporine bevat in een voor topische toepassing karakteristieke vorm en/of samenstelling. - Google Patents

Description

« 1 195096 , Farmaceutisch preparaat dat ciclosporine bevat in een voor topische toepassing karakteristieke vorm en/of samenstelling

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op een farmaceutisch preparaat dat ciclosporine als actief 5 bestanddeel bevat in een voor topicale toepassing karakteristieke vorm en/of samenstelling. Een dergelijk preparaat is bekend uit The Lancet, april 4, 1987, blz. 806. Ciclosporine of cyclosporine A is een bekend schimmelmetaboliet met waardevolle farmaceutische bruikbaarheid. Ciclosporine is een cyclisch poly-N-gemethyleerd undecapeptïde met formule

1Q p MeBmt-aABu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal -J 2 3 4 567 89 10 II

, waarin -MeBmt- een N-methyl-(4R)-4-but-2E-en-l-yl-4-methyl-(L)-threonylrest voorstelt.

15 Ciclosporine, evenals methoden voor de bereiding ervan, zijn bijvoorbeeld beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4.117. 118. Het belangrijkste gebied van klinische onderzoekingen voor ciclosporine is als immunosuppressief middel geweest, in het bijzonder in verband met de toepassing ervan ter behandeling van ontvangers van getransplanteerde organen, bijvoorbeeld hart, longen, gecombineerd hart-longen, lever, nieren, pancreas, beenmerg, huid en hoornvliestransplantaties en, in het bijzonder, allogene 20 orgaantransplantaties. Op dit gebied heeft Ciclosporine een opmerkelijk succes geboekt en reputatie gekregen en wordt nu op grote schaal toegepast in ziekenhuizen en is in de handel verkrijgbaar onder het ingeschreven merk SANDIMMUNR of SANDIMMUNE”, bijvoorbeeld in de vorm van een geconcentreerd infuuspreparaat, van een orale oplossing en van een in gelatine ingekapselde oplossing, welke laatste twee varianten bijvoorbeeld beschreven zijn in het Amerikaanse octrooischrift 4.388.307.

25 Tegelijkertijd was er een intensief onderzoek naar de toepasbaarheid van Ciclosporine bij verschillende autoimmuunziekten en bij ontstekingsaandoeningen.

In vaste toestand komt Ciclosporine zowel in amorfe als kristallijne vorm voor. tn kristallijne toestand zijn zowel een tetragonale als een orthorhombische modificatie bekend.

De tetragonale modificatie (P41), eveneens hierin ter wille van het gemak met ”Cy-A/X-l” aangeduid, is 30 tezamen met werkwijzen voor de bereiding ervan bijvoorbeeld beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 4.117.118. Cr-A/X-I heeft een rooster a=b=13,8 A c= 41,2 A, volume per asymmetrische eenheid van = 1974 A3 een smeltpunt bij ongeveer 140-150°C en bevat ongeveer 2 mol water per Cilosponne molecuul.

Een eerste orthorhombische modificatie (P21,21,21) kan verkregen worden door herkristallisatie uit di-isopropylether, zoals is beschreven in een artikel getiteld ’’Total synthesis - change in molecular structure 35 - biological effect: Ciclosporin as example” van R. Wenger, in ’’Sandorama” 1984/111. Deze speciale modificatie betreft een Ciclosporine-di-isopropylether (ongeveer 1:2) solvaat, met een kristal rooster van a = 12,5 A, b = 22,9 A, c = 28,4 A, volume per asymmetrische eenheid = 2027 A3 en een smeltpunt van ongeveer 150°C. Orthorhombische Ciclosporine solvaatkristallen kunnen worden verkregen door herkristallisatie van oververzadigde Ciclosporine-oplossingen in een geschikt oplosmiddelmedium gedurende 40 langdurige tijdsperioden. De orthorhombische Ciclosporine-di-isopropylethersolvaatmodificatie bereid volgens Wenger wordt dus verkregen door toevoeging van een geconcentreerde oplossing van Ciclosporine in methyleenchloride (waarin Ciclosporine tamelijk goed oplosbaar is) aan di-isopropylether (waarin Ciclosporine betrekkelijk minder oplosbaar is) en verdamping van het methyleenchloride. Men laat daarna de kristallisatie uit de overgebleven di-isopropylether gedurende ongeveer 7 dagen bij de omgevings-45 temperatuur verlopen. Orthorhombische kristalvormen betreffende dergelijke Cyclosporine solvaten worden ter wille van het gemak eveneens hierin in het algemeen aangeduid als ’’CY-A/X-H”.

Een andere orthorhombische (P212121) modificatie is nu geïdentificeerd, welke gekenmerkt is door de afwezigheid of het vrijwel afwezig zijn van enig oplosmiddelbestanddeel, dat wil zeggen dat zij vrijwel geheel of nagenoeg uit vrij Ciclosporine bestaat.

50 De afmetingen van het kristalrooster voor de oplosmiddelvrije of niet-solvaat, orthorhombische Ciclosporine modificatie zijn a = 12,7 A, b = 15,7 A, c = 36,3 A, vol. per asymmetrische eenheid = 1804 A3. Het smeltpunt is van de orde van 180 tot 195°C, bijvoorbeeld afhankelijk van de mate van zuiverheid-bron, zoals blijkt uit de hiernavolgende voorbeelden 1 en 2, waarin specifieke methoden ter verkrijging van deze modificatie zijn beschreven. Ciclosporine in deze niet gesolvateerde (of geen oplosmiddel bevattende) 55 orthorhombische kristalvorm wordt hierin voor het gemak eveneens aangeduid als ’’CY-A/X-III”. Verdere kenmerkende (röntgenstralendiffractie waarden voor ’’CY-A/X-III” zijn opgenomen in de hierna volgende tabel III en figuur IV, tezamen met overeenkomstige gegevens voor CY-A/X-I en CY-A/X-II.

« 195096 2

In weerwil van het zeer grote succes en de faam die Ciclosporine had verkregen en van de grote bijdrage aan de medische wetenschap, in het bijzonder op het gebied van orgaantransplantaties, die het reeds had verkregen, was de toepassing ervan in de praktijk nog niet ideaal en verliep niet zonder moeilijkheden. Een bijzonder gebied waarop zich moeilijkheden voordeden waarmede men te kampen had 5 was het verschaffen van galenische vormen die een geschikte of volledig bevredigende toediening mogelijk maakte, of het best geschikt was voor de behandeling van specifieke ziekten of aandoeningen waarvoor Ciclosporine reeds een potentieel gekozen geneesmiddel had blijken te zijn.

Zo was bijvoorbeeld gevonden dat Ciclosporine doeltreffend was bij de behandeling van psoriasis na orale toediening. Psoriasis is een op grote schaal voorkomende ziekte die aanzienlijk veel leed bij patiënten 10 veroorzaakt en waarvoor tot op heden geen algemeen aanvaardbare, doeltreffende therapie is gevonden.

Lijders aan psoriasis vormen duidelijk een patiëntenpolulatie die hulp kan gebruiken. Hoewel uit beschikbare gegevens zou kunnen blijken dat Ciclosporine deze hulp zou kunnen bieden, is het onwaarschijnlijk dat een orale Ciclosporine therapie een geschikt middel ter behandeling van psoriasis zou kunnen zijn. Overeenkomstige overwegingen gelden voor de behandeling van bijvoorbeeld oogziekten, zoals posterior uveitis en 15 keratoconjunctivitis sicca.

Men heeft vele systemen voor de toediening van Ciclosporine voorgesteld, waaronder galenische vormen bestemd voor plaatselijke dermale of opthalmische toediening, bijvoorbeeld voor mogelijk gebruik ter behandeling van psoriasis, atopische dermatosis en alopecia, of ter behandeling van uveitis. Dergelijke systemen hebben tot nu toe echter niet tot enig opmerkelijk gunstig effect geleid of bleken niet volledig 20 bevredigend te zijn.

Verschillende beschreven pogingen psoriasispatiënten te behandelen door toediening van de bekende orale oplossing direct aan het aan het oppervlak gelegen gedeelte van de psoriasislesie hebben een minimaal succes of in het geheel geen succes opgeleverd en succes wat betreft patiënten die lijden aan atopische dermatosis is uiterst beperkt gebleven. Terwijl plaatselijke toediening aan het oog op grote schaal 25 doeltreffend bleek te zijn als middel ter verhindering van bijvoorbeeld afstoting van hoornvliestransplantaties, of ter behandeling van ziekten in het anterior gedeelte van het oog, is evenmin een preparaat voor plaatselijke toediening tot nu toe beschreven dat een snelle, veilige of doeltreffende behandeling van ziekten of aandoeningen mogelijk maakt, aangezien ze een werking uitoefenen op diepere gedeelten in het oog, bijvoorbeeld voor de algemene behandeling van uveitis, waaronder posterior uveitis.

30 Tot nu toe hebben pogingen Ciclosporine te formuleren gebruik gemaakt van de verbinding in oplossing, of, minder gebruikelijk, in amorfe of Cy-A/X-I vorm, welke laatste vorm bijvoorbeeld de kristalvorm geïdentificeerd voor bijvoorbeeld geneesmiddelregistratie doeleinden is. Ondanks de zeer uitgebreide pogingen die zijn verricht naar het zoeken van nieuwe of verbeterde alternatieven, bleef de orale oplossing en het geconcentreerde infuuspreparaat, die hiervoor reeds zijn vermeld, de enige op grote schaal toegepaste 35 afgiftesystemen voor Ciclosporine.

Volgens de onderhavige uitvinding werd nu verrassenderwijze gevonden dat een orthorhombische kristalvorm van Ciclosporine, Cy-A/X-lll bijzondere voordelen bezit en gunstig is ter bereiding van Ciclosporine galenische preparaten voor topicaal gebruik.

De uitvinding heeft derhalve betrekking op een farmaceutisch preparaat zoals in de aanhef is omschre-40 ven en wordt gekenmerkt door dat cyclosponine een orthochromische kristalvorm aangeduid als Cy-A/X-lll.

De uitvinding heeft derhalve betrekking op een farmaceutisch preparaat. een orthorhombische kristalvorm aangeduid ais Cy-A/X-lll, heeft aanwezig is met een gehalte van minimaal 0,1 gew.%.

Met name werd gevonden dat door het gebruik van dergelijke kristalmodificaties, geschikt zijn voor plaatselijke dermale toepassing of voor plaatselijke toepassingen bij het oog, ter behandeling van ziekten of 45 aandoeningen die de huid of het oog aantasten, in het bijzonder ter behandeling van psoriasis, atopische dermatitis, contactdermatitis, occulaire symptomen van de ziekte van Behchet’s, uveitis en keratoconjunctivitis sicca.

Voor dergelijke doeleinden bleek de orthorhombische kristalvorm CY-A/X-III inherent veel beter geschikt te zijn dan de andere beschikbare vormen, in het bijzonder amorf Ciclosporine of CY-A/X-I, bijvoorbeeld wat 50 betreft fysico-chemische eigenschappen, in het bijzonder stabiliteit en afgifte-eigenschappen.

Een werkwijze voor de bereiding van CY-A/X-III, omvat het kristalliseren van Ciclosporine uit een CY-A/X-III vormend medium en winning van het aldus verkregen CY-A/X-III.

Geschikte Cy-A/X-lll vormende media om bij in hiervoor beschreven werkwijze te worden toegepast zijn in het bijzonder oplosmiddelmedia voor Ciclosporine die oplosmiddelbestanddelen met een mol. gew. >200, 55 bevatten. Bijzonder geschikt zijn media die ethers met een hoog mol.gew. bevatten, in het bijzonder polymeerethers, zoals polyalkyl-ethers, bijvoorbeeld polyethyleen-en polypropyleen-glycolen. Voorbeelden van polymeerethers die geschikt bleken te zijn zijn polyethyleen- en polypropyleenglycolen, bijvoorbeeld met 3 195096 « een mol.gew. van >200, glycerol-polyethyleenglycolethers, bijvoorbeeld glycerol-polyethyleen- glycolricinoleaten en glycerol-polyethyleenglycoloxystearaten, zoals bijvoorbeeld verkregen onder de handelsmerken "Cremophor EL” een ’’Cremophor RH” (zie Fiedler, ’’Lexikon der Hilfstoffe” 2® deel, Vol, I, blz, 257 - 258), polyoxyethyleen-sorbitanesters, bijvoorbeeld verkrijgbaar onder het handelsmerk ’Tween” 5 (zie Fiedler, 2, blz, 972-975), polyoxyethyleen-esters, bijvoorbeeld polyoxyethyleen-stearinezuuresters, bijvoorbeeld verkrijgbaar onder het handelsmerk ”Myrj” (zie Fiedler, 2, blz, 636) en transveresteringsproduc-ten van natuurlijke olie triglyceriden en polyalkyleenpolyolen, waaronder de transveresteringsproducten van de maïsolie, kernpitolie, amandelolie, gemalen notenolie, olijfolie, palmolie en mengsels daarvan met polyethyleenglycolen, in het bijzonder polyethyleen-glycolen met een mol.gew. tussen 200 en 800, 10 bijvoorbeeld verkrijgbaar onder het ingeschreven handelsmerk ’’Labrafil” (zie Fiedler, blz. 539). Bijzonder geschikt zijn media die polyethyleenglycolen met een mol.gew. van 200 tot 600, in het bijzonder van 300 tot 400, bevatten. Opgemerkt wordt dat Cremophor EL en Labrafil bestanddelen zijn van ciclosporine bevattende preparaten, die instabiel kunnen zijn waarbij dan ciclosporine kristalliseert. Zoals duidelijk zal zijn kan het CY-A/X-III voortbrengende medium behalve de hiervoor genoemde één of een aantal bestanddelen 15 bevatten, bijvoorbeeld alcoholen met laag mol.gew. en/of water, als middel ter modificering van de oplosmiddel-kristallisatie-eigenschappen. Een bijzonder geschikt CY-A/X-III vormend medium bleek een medium te zijn dat 0,5 vol. dln ethanol, 8,0 vol. dln polyethyleenglycol (300) en 1,0 vol.deel water bevat.

Onder de werkwijze valt allereerst het oplossen van Ciclosporine, bijvoorbeeld in amorfe of tetragonale vorm, in het gekozen CY-A/X-III vormende medium bij een verhoogde temperatuur. De oplostemperatuur zal 20 natuurlijk variëren, afhankelijk van het gekozen, speciale medium, doch zal in het algemeen > 40°C , in het bijzonder > 50°C, zijn, In het geval van media op basis van polyethyleenglycol zal de oplostemperatuur in het algemeen > 70°C, bijvoorbeeld 75 - 130°C zijn. Geschikt zal de verkregen oplossing > 5%, bij voorkeur > 10%, bijvoorbeeld tot 40-60%, bij voorkeur tot een maximum van 20 gew.%, Ciclosporine, op basis van het totaalgewicht van de oplossing, bevatten. Het is daarna mogelijk Ciclosporine uit te laten kristalliseren 25 onder koeling, geschikt gedurende een betrekkelijk lange tijdsperiode, bijvoorbeeld van de orde van 10-35 min. of meer, afhankelijk van de gewenste kristalgroei.

Desgewenst kunnen methoden voor de vorming van kernen worden toegepast, bijvoorbeeld door toepassing van geluidsgolven of enten. Worden ethanol-polyethyleenglycol-water kristalvormende media toegepast, bijvoorbeeld zoals hiervoor beschreven, dan werd bijvoorbeeld gevonden dat de kernvorming 30 gemakkelijk bij temperaturen van 60 - 90°C, bijvoorbeeld 65 - 85°C, kan worden geïnitieerd door toepassing van sonische vibratie bij ongeveer 20.000 c.p.s (cycli per seconde). Zoals hierna in voorbeeld 2 zal worden toegelicht, worden bij het voortzetten van de behandeling met geluidsgolven op deze wijze tijdens het verloop van de kristallisatie, microkristallen met een zeer kleine en betrekkelijk constante deeltjes-grootte verkregen.

35 De snelheid van de kristalgroei en de afmeting van de verkregen kristallen zullen natuurlijk afhangen van het speciale, gekozen medium en de omstandigheden waaronder de kristallisatie wordt uitgevoerd, bijvoorbeeld of al of niet behandelen met geluidsgolven wordt toegepast en indien wel met welke frequentie. Voor de onderhavige uitvinding zal CY-A/X-III in het algemeen met een gemiddeld deeltjesgrootte van < 200 pM, bijvoorbeeld van 0,5 tot 200 μΜ worden toegepast. Hoewel de aanvankelijk verkregen kristallen 40 een betrekkelijk grote afmeting hebben, kunnen deeltjesvormige preparaten met de gewenste afmeting natuurlijk worden verkregen met behulp van de gebruikelijke methoden voor het fijnmaken, bijvoorbeeld door malen, fijnmaken, verpulveren, microniseren of op een andere wijze doen afbreken tot een kleinere afmeting. Hoewel deeltjesvormige preparaten die op deze wijze zijn verkregen volkomen geschikt voor enkele doeleinden kunnen zijn, bijvoorbeeld ter bereiding van preparaten voor plaatselijke toepassing op de 45 huid, wordt gebruik van fijnmakings- of maalmethoden of overeenkomstige technieken in vele gevallen niet aanbevolen, De reden hiervoor is dat de producten verkregen volgens deze methoden de neiging hebben een betrekkelijk grote verdeling van de deeltjesgrootte te vertonen en een betrekkelijk grove of afgesleten structuur, ten gevolge van kristalbreuk te hebben. Bovendien zal het fijnmaken ertoe kunnen leiden dat de fysische eigenschappen en het natuurlijke kristaloppervlak teniet worden gedaan en het is in elk geval 50 moeilijk of kostbaar uit te voeren terwijl men de vereiste omstandigheden wat betreft steriliteit handhaaft.

Om deze redenen verdient het gewoonlijk aanbeveling de kristallisatie op een dusdanige wijze uit te voeren dat kristallen, bijvoorbeeld microkristallen met afmetingen binnen het gewenste uiteindelijke deeltjes-afmetingstraject worden verkregen,

Ter verkrijging van CY-A/X-III microkristallen die direct in een niet fijngemaakte toestand op de hiervoor 55 beschreven wijze kunnen worden toegepast, zal de kristallisatie geschikt onder beweging worden uitgevoerd bijvoorbeeld door roeren, bijvoorbeeld met 200 - 300 omw/min. oplopende tot bijvoorbeeld 700 omw/min. en in het bijzonder door toepassing van ultrasone vibratie, bijvoorbeeld in het traject van 195096 4 10.000-30.000 cycli per seconde, geschikt van de orde van 20.000 cycli per seconde. ,

Door variatie van het CY-A/X-III vormende medium en instelling van de koelsnelheid en mate van beweging tijdens herkristallisatiewerkwijzen volgens uit de stand der techniek bekende methoden, zoals hierna zal worden toegelicht, kunnen CY-A/X-III microkristallen met een variërende gemiddelde deeltjes-5 grootte worden verkregen.

Zoals hiervoor reeds werd vermeld zal de kristallisatie volgens de werkwijze van de uitvinding geschikt onder steriele omstandigheden worden uitgevoerd. Het zuiveren van het verkregen CY-A/X-III kan op gebruikelijke wijze geschieden, bijvoorbeeld door spoelen met polyethyleenglycol (300): water, bijvoorbeeld in een verhouding van(3 - 4) : 1 p.p.w./wassen met warm water, zoals in de voorbeelden is beschreven. Het 10 verkregen CY-A/X-III zal geschikt zonder of vrijwel zonder Ciclosporine in elke andere vorm worden gewonnen, bij voorkeur in een zuivere of vrijwel zuivere vorm. De hiervoor beschreven spoelstap bevordert de verhindering van de aanwezigheid van amorf Ciclosporine.

Hoewel Ciclosporine in de preparaten volgens de uitvinding in vaste (kristallijne) vorm aanwezig is, kunnen de preparaten zelf elke voor topicale toepassing geschikte constitutie hebben.

15 De preparaten volgens de uitvinding bevatten geschikt ten minste één fase of compartiment, dat

Ciclosporine in orthorhombische kristalvorm, CY-A/X-III, bevat, waarin deze kristalvorm uniform is verdeeld of kan worden verdeeld. Onder dergelijke systemen vallen bijvoorbeeld homogene crèmes, zalven, gelen evenals vloeibare systemen, waarin het aanwezige kristallijne Ciclosporine is of gemakkelijk kan worden verdeeld, bijvoorbeeld door schudden met de hand.

20 Preparaten volgens de uitvinding zijn geschikt voor plaatseiijke toepassing, bijvoorbeeld toediening aan de huid of plaatselijk aan het oog

Het verdient aanbeveling dat orthorhombisch kristallijn Ciclosporine, CY-A/X-III, in de preparaten volgens de uitvinding aanwezig zal zijn in een fijne deeltjesvorm, bijvoorbeeld in een gemicroniseerde, microdeeltjes vormige of niet fijngemaakte microkristallijne vorm, zoals hiervoor is beschreven. De geschikte deeltjes-25 grootte zal natuurlijk variëren, afhankelijk van de speciale aard van het preparaat, de beoogde toepassing ervan en de wijze van toediening en het gewenste effect. In het algemeen zal de gemiddelde deeltjesgrootte echter geschikt van de orde van 0,5-200 μΜ zijn. Speciale trajecten zullen hierna worden besproken.

Psoriasis of atopische dermatose of van ziekten of aandoeningen van de ogen die een immunosuppres-sieve therapie nodig maken, bijvoorbeeld uveitis, conjunctivitis, waaronder keratoconjunctivitu sicca of 30 vernale keratoconjunctivitis of hoornvliestransplanten zijn aandoeningen die met een preparaat volgens de uitvinding kunnen worden behandeld.

Gels, crèmes en zalven voor plaatselijke of dermale toediening kunnen volgens elk van de bekende en algemeen in de stand der techniek gebruikte methoden worden vervaardigd bijvoorbeeld door Ciclosporine in orthorhombische kristalvorm te verwerken met een geschikt, vloeibaar basemateriaal, bijvoorbeeld 35 waterige gel, bijvoorbeeld een waterige gel op cellulose-etherbasis, onder toevoeging van geschikte oppervlakte- actieve middelen, verdikkingsmiddelen enz., waaronder bijvoorbeeld aerosil.

Bij voorkeur is de gemiddelde deeltjesgrootte van Ciclosporine < 60-80 pM, in het bijzonder < 20 μΜ.

Het is gunstig indien de deeltjes een zo nauw mogelijke verdeling van de deeltjesgrootte hebben. Het verdient aanbeveling dat vrijwel alle aanwezige deeltjes kleiner dan 80 μΜ zijn.

40 Preparaten volgens de uitvinding voor topische ophthalmische toepassing, dat wil zeggen toediening aan het oog, kunnen bijvoorbeeld geschikte verdikte suspensies of dispersies zijn, die bijvoorbeeld in de vorm van visceuze oogdruppelpreparaten of crèmes of gelen voor toediening aan het oog zijn. In het geval van preparaten die aan een oog moeten worden toegediend, zal de gemiddelde deeltjesgrootte van het aanwezige kristallijne Ciclosporine materiaal geschikt < 25 pM zijn. Het is nog meer aanbevelingswaardig 45 indien alle aanwezige deeltjes kleiner zijn dan 25pM. De gemiddelde deeltjesgrootte voor dergelijke oogdruppelpreparaten zal geschikt van 0,1, bijvoorkeur van 0,5, tot 20 pm liggen, of bij voorkeur ongeveer 10 pM zijn.

Het hydrofiel-lipofielgehalte van het dragersysteem dat in vormen voor dermale toepassing of voor toepassing in preparaten ter toediening aan het oog wordt toegepast kan variëren, bijvoorbeeld afhankelijk 50 van het speciale oppervlak waaraan het preparaat moet worden toegediend, bijvoorbeeld afhankelijk van de eigenschappen van het betreffende huidoppervlak dat moet worden behandeld.

Preparaten voor plaatselijke dermale toepassing zullen een dragermedium bevatten waarin het Ciclosporine bestanddeel slechts in geringe mate oplosbaar is. Geschikt is de oplosbaarheid van het CY-A/X-III in dergelijke preparaten < 10%, bij voorkeur < 1,0% (gew.). Het is aanbevelingswaardiger indien de oplosbaar-55 heid < 0,1 % gew.% en in het bijzonder < 0,001 gew.% is.

Onder geschikte dragermedia vallen hydrofiele, met water mengbare, dragers, alsmede hydrofobedra-gers.

5 195096 , Hydrofiele, met water mengbare, dragerbestanddelen hebben geschikt een betrekkelijk geringe vluchtigheid. Voorbeelden van geschikte dragerbestanddelen die tot deze klasse behoren zijn bijvoorbeeld vloeibare polyalkyleenglycolen, propyleenglycol, glycerol en ethyleenglycol. Geschikte polyalkyl een glycolen zijn in het bijzonder vloeibare polyethyleenglycolen, bijvoorbeeld met een gemiddeld mol.gew. tot ongeveer 5 600, bijvoorbeeld met een gemiddeld mol.gew. van 250 tot 450, in het bijzonder van ongeveer 300. Representatieve preparaten volgens de uitvinding, voor plaatselijke toediening, omvatten derhalve: C1a) Ciclosporine in orthorhombische kristalvorm,Cy-A/X-lll, zoals hiervoor gedefinieerd, b) een hydrofiele, met water mengbare, drager, bijvoorbeeld zoals hiervoor beschreven, en, desgewenst, c) water van farmaceutische kwaliteit.

10 De hoeveelheid aanwezig bestanddeel (a) zal geschikt van de orde van 0,1 tot 30,0%, in het bijzonder van 0,5 of 1,0 tot 20%, bijvoorbeeld 1,0, 2,0, 5,0 of 10,0%, op basis van het totale gewicht van het preparaat zijn. De bestanddelen (b) en (c) zullen geschikt in de verhouding van 1:0 tot 1:20 p.p.w, aanwezig zijn. Het is nog geschikter indien de bestanddelen (b) en (c) in een verhouding van 1:0,5 tot 1:5, bijvoorbeeld van 1:1 tot 1:3, het meest geschikt tussen 1:1,5 tot 1:2,5 p.p.w, aanwezig zijn.

15 Dergelijke preparaten zullen geschikt bovendien nog bevatten: d) Een oppervlakteactief middel.

Onder geschikte bestanddelen (d) vallen onder andere d1 Transveresteringsproducten van natuurlijke, plantaardige olietriglyceriden en polyalkyleenpolyolen. Dergelijke transveresteringsproducten zijn bekend uit de stand der techniek en kunnen bijvoorbeeld volgens de algemene methoden beschreven in het Ameri-20 kaanse octrooischrift 3.288.824 worden verkregen. Hieronder vallen transveresteringsproducten van verschillende natuurlijke (bijvoorbeeld niet-gehydrogeneerde) plantaardige oliën, bijvoorbeeld maïsolie, kernolie, amandelolie, gemalen notenolie, olijfolie en palmolie en mengsels daarvan met polyethyleenglycolen, in het bijzonder polyethyleenglycolen met een gemiddeld mol. gew. van 200 - 800. Aanbeveling verdienen producten verkregen door transverestering van 2 mol delen van een natuurlijk plantaardige 25 olietriglyceride met één mol deel polyethyleenglycol (bijvoorbeeld met een gemiddeld mol. gew. van 200 - 800.) Vele vormen van de transveresteringsproducten van de gedefinieerde klasse zijn bekend en in de handel verkrijgbaar onder het handelsmerk Labrafil, [zie Fiedler, ’’Lexikon der Hilfstoffe”, 2® revised and expanded edition (1981) Vol, 2, blz. 539]. Bijzonder bruikbaar als bestanddelen van de preparaten volgens de uitvinding zijn de producten: Labrafil M 1944 CS (zie: US-A 4388307), een transveresteringsproduct van 30 kernpitolie en polyethyleenglycol met een zuurgetal van ongeveer 2, een verzepingsgetal van 145 - 175 en een joodgetal van 60 - 90, Labrafil M 2130 CS, een transveresteringsproduct van een glyceride met 12-18 koolstofatomen en polyethyleenglycol met een smeltpunt van ongeveer 35 - 40°C, een zuurgetal van < 2, een verzepingsgetal van ongeveer 185 - 200 en een joodgetal van < 3.

d2 Reactieproducten van de natuurlijke of gehydrogeneerde ricinusolie en ethyleenoxide. Dergelijke 35 producten kunnen op bekende wijze worden verkregen, bijvoorbeeld door reactie van een natuurlijke of gehydrogeneerde recinusolie met ethyleenoxide, bijvoorbeeld in een molverhouding van ongeveer 1:35 tot ongeveer 1:60, desgewenst onder verwijdering van het polyethyleenglycolbestanddeel uit het product, bijvoorbeeld volgens de methoden beschreven in de Duitse Auslegeschriften 1.182.388 en 1.518.819. In het bijzonder geschikt zijn de verschillende oppervlakteactieve middelen, verkrijgbaar onder het handelsmerk 40 Cremophor. Bijzonder geschikt zijn de producten Cremophor RH 40 met een verzepingsgetal van 50 - 60, een zuurgetal < 1, een joodgetal < 1, en een watergehalte (Fischer) < 2%, een nD60 van 1,453-1,4578 en een HLB van 14-16, Cremophor RH60 met een verzepingsgetal van 40 - 50, een zuurgetal < 1, een joodgetal < 1, een watergehalte (Fischer) 4,5- 5,5%, een nD25 van 1,453-1,57 en een HLB van 15 - 17, en Cremophore EL (bestanddeel van Sandimmun®) met een mol.gew. (door stoomosmometrie) van 1630, een 45 verzepingsgetal van ongeveer 65 - 70, een zuurgetal van ongeveer 2, een joodgetal van ongeveer 28 - 32 en een nd2S van 1,471. Eveneens geschikt om in deze categorie te worden toegepast zijn de verschillende oppervlakteactieve middelen die verkrijgbaar zijn onder het handelsmerk Nikkol, bijv. Nikkol HC0-60. Het betreffende product Nikkol HC0-60 is een reactieproduct van gehydrogeneerde recinusolie en ethyleenoxide met de volgende eigenschappen: zuurgetal 0,3, verzepingsgetal 47,4, hydroxylgetal 42,5, pH (5%) 4,6, kleur 50 APHA = 40, smeltpunt 36,0 °C, vriespunt: 32,4°C, watergehalte (% KP) = 0,03.

d3 Polyoxyethyleen-sorbitan-vetzuuresters of polysorbaten van bijvoorbeeld het bekende type die in de handel verkrijgbaar zijn onder bijvoorbeeld de handelsmerken Tween en Armotan (zie Fiedler, 2, blz. 745 - 746 en 972 - 975), waaronder de producten Tween.

20 [polyoxyethyleen(20)sorbitanmonolauraat], 55 40 [polyoxyethyleen(20)sorbitanmonopalmitraat], 60 [polyoxyethyleen(20)sorbitanmonostearaat], 65 [polyoxyethyleen(20)sorbitantristearaat], 195096 6 80 [polyoxyethyleen(20)sorbitanmonoo]eaat], 85 [polyoxyethyleen(20)sorbitantrioleaat], 21 [polyoxyethyleen(4)sorbitanmonolauraat], 61_ [polyoxyethyleen(4)sorbitanmonostearaat] en 5 81_ [polyoxyethyleen(5)sorbitannonooleaat].

d4 Polyoxyethyleenvetzuuresters, bijvoorbeeld Polyoxyethyleenstearinezuuresters van het bekende type en in de handel verkrijgbaar onder het handelsmerk Myrj (zie Fiedler, 2, blz. 636), evenals bekende polyoxyethyleenvetzuuresters die in de handel verkrijgbaar zijn onder het handelsmerk Cetiol HE (zie Fiedler, 1_, blz. 228) en polyoxyethyleen hogere alcoholethers, bijvoorbeeld polyoxyethyleenstearylether, 10 oleylether, of cetylether, bijvoorbeeld van het type bekend onder het handelsmerk Brij (zie Fiedler, λ, 184-186), bijv. Brij 78 en 96 en Cetomacrogel 1000 (zie Fiedler, 1_, 229).

d5 Polyoxyethyleenpolyoxypropyleen copolymeren, bijvoorbeeld van het bekende type en in de handel verkrijgbaar onder de handelsmerken Pluronic en Emkalyx (zie Fiedler, 2, blz. 720-722.

d6 Sorbitanvetzuuresters, bijvoorbeeld van het bekende type en in de handel verkrijgbaar onder 15 handelsmerk Span, waaronder bijvoorbeeld sorhitan-monolauryl-, -monopalmityl-, -monostearyl-, -tristearyl-, -monooleyl- en -trioleylesters, zie Fiedler, 2, blz, 850-851.

d7Partiële glyceriden, bijvoorbeeld producten waaronder mono- en/of di-glyceridebestanddelen vallen, bijvoorbeeld oppervlakteactieve middelen op basis van gemengde mono-/di-/tri-glyceride/ vrije glycerolbasis, alsmede glycerolmonostearaten en glycerolmono-oleaten. Onder voorbeelden van dergelijke producten 20 vallen die welke bekend zijn en in de handel verkrijgbaar zijn onder de handelsmerken Imvitor (zie Fiedler, 1,491), bijvoorbeeld Imvitor 191 en Imvitor 780< en Softigan (zie Fiedler, 2, 833) bijvoorbeeld Softigen 70).

d8 lonogene oppervlakteactieve middelen of emulgeermiddeien, zoals natriumlaurylsulfaat en natriumke-tostearylsulfaat.

Indien bestanddelen (d) aanwezig zijn, is dit geschikt in een hoeveelheid tot maximaal 30%, in het 25 bijzonder maximaal 15%, op basis van het totale gewicht van het preparaat. Het is het meest geschikt indien de bestanddelen (d) aanwezig zijn in een hoeveelheid van 0,5 tot 10%, bijvoorbeeld ongeveer 1,0%, op basis van het totale gewicht van het preparaat.

Dergelijke preparaten zullen geschikt eveneens bevatten: e) Een verdikkingsmiddel, 30 Onder geschikte bestanddelen (e) vallen bijvoorbeeld: e1Polymethylacrylaatharsen, bijvoorbeeld van het bekende type en in de handel verkrijgbaar onder het handelsmerk Eudispert (zie Fiedler, 1_, 371-372), e2 Cellulosederivaten waaronder bijvoorbeeld ethyl-, propyl-, methyl-, hydroxypropylmethyl- en carboxymethyl-cellulose.

35 e3 Polyvinylharsen, waaronder bijvoorbeeld Polyvinyl-alcoholen en polyvinylpyrrolidonen, alsmede andere polymeermaterialen, waaronder gelatine, alginaten, pectinen, tragacantgom, arabische gom, xanthan gom en polyacrylzuren, zoals van het bekende type die in de handel verkrijghaar zijn onder het handelsmerk Carbopol (zie Fiedier, 1_, 206-207), e4 Materialen, zoals silicagel, bentoniet en magnesiumaluminiumsilicaat.

40 De verbindingen (e), indien aanwezig, zijn geschikt aanwezig in een hoeveelheid van maximaal 20%, meer in het bijzonder tot 10%, op basis van het totale gewicht van het preparaat, Het meest geschikt zijn de bestanddelen (e) aanwezig in een hoeveelheid van 0,5 tot 15%, bijvoorbeeld van 1,0 tot 3,0.%, op basis van het totale gewicht van het preparaat.

Bovendien kunnen dergelijke preparaten eveneens geschikt een anti-microbieelmiddel, zoals methylpara-45 ben, propylparaben, benzylalkoniumchloride of benzylalcohol, bijvoorbeeld in een hoeveelheid van 0,05 tot 0,5%, of, in het geval van benzylalcohol, tot 2,0%, bijvoorbeeld ongeveer 0,1%, of, in het geval van benzylalcohol, ongeveer 1,0%, op basis van het totale gewicht van het preparaat, bevatten.

Onder alternatieve dragermedia vallen hydrofobe materialen, bijvoorbeeld die welke voldoen aan de oplosbaarheidcriteria betreffende het hiervoor beschreven actieve bestanddeel. Andere aanbevolen 50 preparaten volgens de uitvinding, bijvoorbeeld voor plaatselijke toepassing, bevatten dientengevolge C2 a) Ciclosporine in een orthorhombische niet gesolvateerde kristalvorm, Cy-A/X-lll, zoals hiervoor gedefinieerd en f) Een hydrofobe drager, zoals bijvoorbeeld hiervoor is vermeld.

De hoeveelheid bestanddeel (a) die aanwezig is zal geschikt een hoeveelheid zijn als hiervoor is vermeld 55 in verband met preparaten zoals gedefinieerd onder C1. Onder geschikte bestanddelen (f) vallen bijvoorbeeld aardoliederivaten, waaronder minerale oliën, vetten en geleien, zoals bijvoorbeeld petrolatum (mineraal vet of aardolie gelei), vloeibaar petrolatum (witte minerale olie of vloeibare paraffine), of elk van de 7 195096 . bekende producten die in de handel verkrijgbaar zijn onder het handelsmerk Vaseline [zie Fiedler loc. cit. 2, 986], evenals niet-ionogene derivaten op lanoline basis, zoals onder de handelsnaam Amerchol, bijvoorbeeld Amerchol CAB [Fiedler, 1^, 119 — 120] verkrijgbaar.

Onder andere geschikte bestanddelen (f) vallen bijvoorbeeld natuurlijke of verzadigde plantaardige oliën 5 en vetten, bijvoorbeeld gefractioneerde kokosnootoliën die in de handel verkrijgbaar zijn onder het handelsmerk Miclyol, bijvoorbeeld Miglyol 812 (zie Fiedler, 2, 616) en aardnotenolie en verzadigde aardnotenoliën, evenals hogere vetalcoholen of alcoholen met een vertakte keten en hogere esters, zoals stearine-alcohol, cetylpalmitaat en 2-octyldodecanoi, van het bekende type en in de handel verkrijgbaar onder het handelsmerk Eutanol G (zie Fiedier, 1_, 375).

10 Dergelijke preparaten kunnen eveneens één of een aantal van elk van de hiervoor beschreven bestanddelen (d) en (e) bevatten, alsmede één of een aantal anti-microbiële middelen, bijvoorbeeld zoals hiervoor beschreven.

In het bijzonder kunnen dergelijke preparaten bovendien één of een aantal bestanddelen (d), geschikt in een hoeveelheid tot ten hoogste 30%, meer in het bijzonder ten hoogste 20%, geschikt in een hoeveelheid 15 van 1 tot 15 gew. %, op basis van het totale gewicht van het preparaat, bevatten.

Preparaten op hydrofobe basis volgens C2 die een emulgator-bestanddeel (d) bevatten, kunnen eveneens door verdere toevoeging van water in de vorm van crèmes of emulsies worden verkregen. De verkregen crèmes of oplossingen kunnen zowel van het olie-in-water als water-in-olietype zijn. De in dergelijke preparaten aanwezige hoeveelheid water kan dus variëren van bijvoorbeeld 5 tot 80%, op basis 20 van het totale gewicht van het preparaat, geschikt van 20 tot 70 gew.%.

De hoeveelheden bestanddelen (e)/antimicrobieel middel, indien dat wordt opgenomen, zal van dezelfde of overeenkomstige orde zijn als die vermeld in verband met de preparaten van de uitvinding volgens C1 hiervoor.

De hoeveelheid van elke toegepaste topische vorm zal natuurlijk variëren, afhankelijk van de concentratie 25 van het preparaat, de te behandelen aandoening en het gewenste effect, evenals, in het geval bij toepassing op de huid, van het te behandelen oppervlak. In het geval van preparaten voor dermale toepassing, bijvoorbeeld ter behandeling van psoriasis of atopische dermatose, zullen de toegepaste hoeveelheden in het algemeen voldoende zijn om een Ciclosporine dosering van de orde van 0,1 tot 5mg/cm2, bijvoorbeeld 0,5mg/cm2, met de toediening van bijvoorbeeld 2 x daags op de gewenste plek, te geven. Bij oogheelkun-30 dige preparaten, kan het toedienen geschikt geschieden onder toepassing van preparaten die 0,1 tot 10%, bijvoorbeeld 1,0 of 2,0 gew,% Ciclosporine bevatten, 1 tot 3 malen daags in druppelvorm aan elk oog toegediend.

De bestanddelen die hierin zijn genoemd of zijn gedefinieerd als bestanddelen van de farmaceutische preparaten volgens de uitvinding zullen natuurlijk geschikt zijn voor de gewenste farmaceutische toepassing, 35 farmaceutisch aanvaardbaar zijn en plaatselijk, bijvoorbeeld dermaal of occulair, toepasbaar, aanvaardbaar of verdraagbaar zijn.

Bereiding 1 van Cy-A/X-lll a) Men loste 100 g Ciclosporine in amorfe vorm onder roeren bij 50°C op in 400 g polyethyleenglycol 300.

40 De vorming van CY-A/X-III begon kort nadat alles was opgelost. Men liet de oplossing 24 - 48 uren bij 35 - 40°C staan ter voltooiing van de kristallisatie en verdunde daarna onder krachtig roeren met 1000 ml water. Het verkregen neerslag werd af gefiltreerd, gewassen met water ter verwijdering van overgebleven polyethyleen-glycol en gedroogd, waardoor CY-A/X-111 in een vrijwel zuivere vorm met een smeltpunt van 195°C, deeltjesgrootte 100-200 μΜ werd verkregen.

45 CY-A/X-III vormen kunnen analoog aan de hiervoor beschreven werkwijze, echter onder toepassing van de volgende materialen als oplosmiddel in plaats van polyethyleenglycol 300 worden verkregen.

50 Oplosmiddel Smeltpunt van het verkregen CY-A/X-III (°C) b) Polyethyleenglycol 300/ Cremophore RH 40 (1:1 vol) - c) Cremophore EL 190 55 d) Solutol HS 15 188 e) Gelucire 44/14 180 195096 8 «

Oplosmiddel Smeltpunt van het verkregen CY-A/X-III (°C) 5___ f) Myrj 52 184 g) Tween 80 186 h) Cremophor RH40 190 10

Telkens is de verkregen gemiddelde deeltjesgrootte van de orde van 50 tot 200 pM. De bepaalde rooster-structuur is die welke hiervoor werd beschreven. De röntgendiffractiewaarden zijn die welke hierna in verband met tabel III en fig. IV zijn genoemd.

15 Bereiding 2 van CY-A-/X-III

Men loste 20 g Ciclosporine als CY-A/X-I op in 60 ml ethanol en concentreerde deze oplossing door destilleren onder verminderde druk bij een temperatuur van > 60°C tot 1/6e van het oorspronkelijke volume.

Daarna voegde men langzaam, bij 50 - 85°C en onder roeren met 300 omw/min.160 ml poiyethyleenglycol (mol.gew. 300) + 20 ml water toe. Een ultrasone vibrator-menginrichting werd geïnstalleerd, die werkte met 20 20.000 c.p.s. De vorming van kernen werd gedurende 3-5 min, geïnitieerd bij 65 - 75°C. De verkregen dispersie werd daarna lineair gedurende 10-20 min. afgekoeld tot 40°C, waarbij voortdurend met 700 omw/min. en ultrasone vibratie werd geroerd. Het verkregen, dikke, pasteiachtige mengsel werd gefiltreerd, gespoeld met poiyethyleenglycol (mol.gew. 300) - water (3:1, p.p.vol.), gewassen met warm water bij 30°C en onder hoog vacuüm bij 50°C gedroogd, waardoor CY-A/X-III in zuivere vorm met een 25 smeltpunt van 192°C werd verkregen. De deeltjesgrootte bedroeg 3-15 pM. De bepaalde roosterstructuur was die welke hiervoor is gedefinieerd. De röntgendiffractiewaarden zijn die welke hierna in tabel III en figuur IV zijn beschreven.

Uit herhaalde proeven blijkt dat de kristalgrootte wordt beïnvloed door de temperatuur bij de kernvorming en de snelheid van de kristalgroei, meer dan de duur van de werkwijze. Door dus de kernvorming bij 30 ongeveer 75°C te laten beginnen en de kristallisatie bij dezelfde temperatuur te laten verlopen, wordt een gemiddelde deeltjesgrootte van ongeveer 50pM verkregen,

Voorbeeld 1: Bereiding van galenische vormen voor plaatselijke toepassing

35 Gel preparaat I

Men microniseerde Cy-A/X-111 verkregen volgens de methoden van bereiding 1 onder toepassing van een met lucht aangedreven maalinrichting. Het gemicroniseerde product met een maximale deeltjesgrootte van 60-70 pM en een gemiddelde deeltjesgrootte van 2-10 pM werd op een gebruikelijke wijze gecombineerd en gemengd met de bestanddelen vermeld in de hierna volgende tabel, waardoor een waterige gel 40 bevattende 10 gew.% Ciclosporine (als Cy-A/X-lll) werd verkregen die geschikt is voor plaatselijke toepassing, bijvoorbeeld ter behandeling van psoriasis. 1

Bestanddeel Gew.% a) CICLOSPORINE(gemicroniseerd Cy-A/X-lll) 10,0 b) Polyacrylzuur (Carbopol 934P) 0,5 c) NaOH-oplossing (5%) 3,0 50 d) Methylparaben 0,07 e) Propylparaben 0,03 f) H20 (farmaceutische kwaliteit) tot 100,0% 9 195096 t Voorbeeld 2

Gelpreparaat II

5 Bestanddelen Gew.%

Preparaat A Preparaat B

a) CICLOSPORINE (gemicroniseerd Cy-A/X-lll) 10,0 1,0 10 b) Polyethyleenglycol 300 30,0 30,0 c) Labrafil M 2130 CS 1,0 1,0 d) Carbopol 934 P 1,0 1,0 e) Natriumhydroxide 5% 6,0 6,0 f) Methylparaben 0,07 0,07 15 g) Propylparaben 0,03 0,03 h) H20 (p.g.) 51,9 60,9 100,0% 100,0% 20 a) werd bereid op de wijze zoals hiervoor voor gelpreparaat I is beschreven. Men loste c), f) en g) onder verwarmen op in b) en koelde het verkregen mengsel af tot kamertemperatuur. Deze oplossing werd vervolgens gedispergeerd in water h). Men voegde d) toe en homogeniseerde het geheel teneinde dispergeren tot stand te brengen. Daarna voegde men a) toe en homogeniseerde opnieuw het mengsel.

25 Tenslotte voegde men e) toe voor het neutraliseren, onder roeren, en bracht de verkregen gel in samendrukbare buisjes voor plaatselijke toepassing, bijvoorbeeld ter behandeling van psoriasis.

Voorbeeld 3 30 Zalfpreparaat

Bestanddelen Gew.%

Preparaat A Preparaat B

35 - a) CICLOSPORINE (gemicroniseerd Cy-A/X-lll) 1,0 10,0 b) Amerchol CAB 2,0 2,0 c) Vloeibare paraffine 42,0 37,5 d) Wit petrolatum 55,0 50,5 40 - 100,0% 100,0% a) werd bereid zoals voor B gelpreparaat I. Men smolt b), c) en d) samen en roerde en voegde bij ongeveer 45 30°C a) toe, waarbij de deeltjes onder toepassing van een homogenisator werden verdeeld. De verkregen zalf werd afgekoeld en gebracht in samendrukbare buizen voor plaatselijke toepassing, bijvoorbeeld ter behandeling van psoriasis.

Voorbeeld 4 50

Crèmepreparaat I

Bestanddelen Gew.% 55 a) CICLOSPORINE (gemicroniseerd Cy-A/X-lll) 1,0 b) Polysorbaat 60 5,0 195096 10

Crèmepreparaat I (vervolg) <,

Bestanddelen Gew.% 5 c) Cetylstearylalcohol 10,0 d) Glycerol 85% 10,0 e) Wit petrolatum 24,0 f) Methylparaben 0,07 g) Propylparaben 0,03 10 h) H20 (p.g.) 49,0 100,0% 15 Men bereidde a) zoals voor gelpreparaat I is beschreven, combineerde dit met de bestanddelen b) - h), analoog aan zalfpreparaat hiervoor en bracht dit mengsel in samendrukbare buizen voor plaatselijke toepassing, bijvoorbeeld ter behandeling van psoriasis.

Voorbeeld 5 20

Bereiding van een zalf.

Men maalde een suspensie bevattende 20 gew,% Cy-A/X-lll (verkregen volgens de werkwijzen van bereiding 1) in polyethyleenglycol 300 in vochtige toestand totdat de gemiddelde deeltjesgrootte van Cy-A/X-111 van de orde van 2-10 μΜ was. Daarna mengde men 10 g van het verkregen, fijngemaakte 25 product op een gebruikelijke wijze met 50 g polyethyleenglycol 300 en 40 g gesmolten polyethyleenglycol 1500, waardoor een vloeibare pasta werd verkregen die 10 gew.% Ciclosporine (als Cy-A/X-lll) bevatte en geschikt was voor plaatselijke toepassing, bijvoorbeeld ter behandeling van psoriasis.

Gelpreparaat III

30 -

Bestanddelen Gew.% a) CICLOSPORINE (gemicroniseerd CY-A/X-III) 1,0 b) Labrafil M 1944 CS 1,0 35 c) Polyethyleenglycol 300 30,0 d) Benzylalcohol 1,0 e) Hydroxypropylmethylcellulose (Methocel E4M) 2,5 f) H20 (p.g.) 64,5 40 100,0%

Men bereidde a) op de wijze als hiervoor gelpreparaat I is beschreven. Men mengde b), c) en d), voegde f) toe en mengde. Daarna suspendeerde men a) in het verkregen mengsel door homogeniseren. Vervolgens 45 voegde men onder roeren langzaam e) toe, totdat de vorming van de gel is voltooid. Daarna werd de gel gebracht in samendrukbare buizen voor plaatselijke toepassing, bijvoorbeeld ter behandeling van psoriasis.

Voorbeeld 7

50 Gelpreparaat IV

Bestanddelen Gew.% a) CICLOSPORINE (gemicroniseerd CY-A/X-III) 5,0 55 b) Polyethyleenglycol 300 30,0 c) Glycerylmonostearaat 5,0 11 195096 , Gelpreparaat IV (vervolg)

Bestanddelen Gew.% 5 d) Methylparaben 0,07 e) Propylparaben 0,03 f) Carbopol 934 P 1,0 g) Natriumhydroxide 5% 6,0 h) H20 (p.g.) 52,9 10---- 100,0%

Men bereidde a) volgens gelpreparaat I hiervoor. Men loste c), d) en e) op in b) onder verwarmen. Het 15 warme mengsel werd door homogeniseren gedispergeerd in h) en afgekoeld tot kamertemperatuur. Daarna werden a) en f) toegevoegd en het gehele mengsel werd gehomogeniseerd. Vervolgens werd g) toegevoegd en de vorming van de gel voltooid. De verkregen gel werd gebracht in samendrukbare buizen voor plaatselijke toepassing, bijvoorbeeld ter behandeling van psoriasis.

20 Voorbeeld 8

Crèmepreparaat (water in olie) II

Bestanddelen Gew.% 25 —--- a) CICLOSPORINE (gemicroniseerd CY-A/X-III) 2,0 b) Amerchol CAB 5,0 c) Miglyol 812 10,0 d) Wit petrolatum 53,0 30 e) H20 (p.g.) 30,0 100,0% 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21

Men bereidde a) zoals voor gelpreparaat I hiervoor en dispergeerde dit met b) in e) onder verwarmen en 2 homogeniseren. Men smolt c) en d) tezamen, mengde en voegde het mengsel onder intensief homogenise 3 ren toe aan de reeds eerder verkregen dispersie en voegde daarna het geheel af, waardoor een vetachtige, 4 witte crème werd verkregen. Deze werd in samendrukbare buizen voor plaatselijke toepassing gebracht, 5 bijvoorbeeld ter behandeling van psoriasis.

6 7

Voorbeeld 9 8

Gel-cremepreparaten 9

Men herhaalde de voorbeelden 1-8 hiervoor, doch paste nu het kristallijne product van bereiding 2. direct 10 als CICLOSPORINE bestanddeel toe.

11 12

Allergische contactdermatitis bij een Guinees biggetje (DTH-proef).

13

Guinese biggetjes (Hartley, 6, 400-500 g) werden gesensibiliseerd door toediening van 50 pl 2% dinitrof- 14 luorbenzeen (DNFB) in een mengsel van gelijke delen aceton en olijfolie aan de binnenkant van het rechter 15 oor. De dieren werden 7 dagen later weer behandeld met 20 pl van een 0,5%-ige oplossing van DNFB in 16 een mengsel van aceton en olijfolie (4:1) aangebracht op gemarkeerde oppervlakken van de geschoren, 17 linker en rechter flank. Deze tweede provocatie induceerde een allergische ontsteking, die leidde tot rood 18 worden en celinfiltratie (verdikking) van de huid. Het te onderzoeken preparaat, in een hoeveelheid van 19 200 - 250 mg, werd met een spatel aangebracht op het met DNFB behandelde oppervlak van de rechter 20 flank, De linker flank werd op overeenkomstige wijze behandeld met een placebo als controle. Het 21 aanbrengen van het te onderzoeken preparaat/placebo werd 5x met tussenpozen van 20 min., 8 uren, 24 uren, 32 uren en 48 uren na de provocatie uitgevoerd. De dikte van de huid op de plaats van aanbrengen werd voor elke toediening en weer 8 uren na de laatste toediening, door optrekken van de huid tot een 195096 12 vouw en meting van de dikte hiervan, bepaald. De mate van rood worden of ontsteking werd eveneens visueel volgens een schaal van 0 - 4 bepaald. De doeltreffendheid van het te onderzoeken preparaat ter verhindering van de ontstekingsrespons werd bepaald door vergelijking met de resultaten verkregen bij de met placebo behandelde flanken.

5 De resultaten die bij het hiervoor beschreven onderzoekmodel onder toepassing van preparaten volgens de voorbeelden 1 en 5 hiervoor, doch bevattende 0,1 gew.% Ciclosporine als CY-A/X-III, vergeleken met een placebo en met piaatselijk toegediende 0,1%-ige Ciclosporine in een gebruikelijke orale oplossingsvorm werden verkregen, zijn weergegeven in de figuren I, II en III behorende tot de onderhavige aanvrage. (Er werd gebruik gemaakt van 0,1%-ige CY-A/X-III concentratie bij dit onderzoekmodel met het oog op de 10 extreme sensitiviteit ervan. De te onderzoeken preparaten werden geheel analoog aan de voorbeelden 1 en 5 bereid, afgezien van de vermindering van het ciclosporinebestanddeel tot 0,1 g en compensatie door toevoeging van 9,9 g water in het geval van voorbeeld 1 en polyethyleenglycolbestanddelen in het geval van voorbeeld 5).

In elke figuur is de gemeten huiddikte uitgezet tegen de tijd. In figuur 1 zijn de resultaten onder 15 toepassing van 0,1 gew,% Ciclosporine in de gewoonlijk toegepaste vorm van een gebruikelijke, in de handel verkrijgbare, orale, drinkbare, opgeloste vorm vergeleken met een placebo. Een geringe doch onbetekende vermindering van de reactie ten opzichte van de placebo werd ondervonden voor de orale oplossing. In figuren II en lil zijn de resultaten onder toepassing van 0,1 gew.% Ciclosporine bevattende preparaten volgens respectievelijk de voorbeelden 1 en 5 vergeleken met de placebo. In beide gevallen 20 werd een aanzienlijke vermindering van de verdikking van de huid vergeleken met de placebo verkregen na de eerste toediening en vervolg van de behandeling ten opzichte van de placebo na de eerste toepassing en voortzetting ervan totdat het experiment was beëindigd.

De bruikbaarheid van de preparaten volgens de onderhavige uitvinding kan eveneens worden aangetoond door klinische onderzoekingen, die bijvoorbeeld als volgt werden uitgevoerd: 25

Klinisch onderzoek: Behandeling van psoriasis door plaatselijke (dermate) behandeling.

Het onderzoek werd uitgevoerd op een gerandomiseerde, aan de hand van een placebo, vergeleken, dubbelblinde wijze. Elke patiënt ontving gelijktijdig het actieve preparaat en de placebo (alleen de drager) op twee symmetrische kwetsuren, Het toepassen van de actieve en placebopreparaten werd gerandomiseerd 30 over de linker en rechter kwetsuren.

Geselecteerde patiënten werden opgenomen in groepen van 12 tot 24 patiënten, met een leeftijd van 18 tot 70 jaren, waaronder mannen en vrouwen die postmenopausaal, chirurgisch steriel of onder toepassing van orale contraceptiva met een negatieve zwangerheidsproef waren.

De criteria voor het aannemen omvatten: a) een geschreven toestemming en b) klinisch gedefinieerde, 35 stabiele chronische plaque psoriasis. Tenminste twee matig tot ernstige, bilateraal symmetrische, kwetsuren, elk met een oppervlak van 4 tot 25 cm2 en een beoordeling van de ernst van > 5: volgens een schaal van 0-9 waren aanwezig. Deze beoordeling is een samenvatting van individuele beoordelingen van 0 (minst ernstig) tot 3 (het ernstigst) voor elk van de 3 parameters: erytheem, schilfering en huiddikte, De kwetsuren aan beide kanten moeten bij dezelfde patiënt vergelijkbaar zijn (dat wil zeggen geen verschil hebben van 40 meer dan 20% wat betreft de ernst van de beoordeling of het oppervlak)

De volgende uitsluitingscriteria werden toegepast: a) Elke medische conditie die, volgens de onderzoeker, het onderzoek zou kunnen benadelen.

b) Systemische psoriasis therapie. (PUVA, methotrexaat, steroiden, retinoiden, ciclosporine) binnen de laatste twee maanden.

45 c) Specifieke plaatselijke behandeling, behalve indifferente producten (bijvoorbeeld witte vaseline) of preparaten die salicylzuur bevatten (niet meer dan 10%) op kwetsuren die voor het onderzoek werden uitgekozen, binnen de laatste 2 weken voor de aanvang van het onderzoek. Deze verzachtende middelen kunnen echter wel worden toegepast op kwetsuren die niet voor het onderzoek waren uitgekozen.

d) Patiënten waarvan de posriasis spontaan verbeterend, snel opkomend zonder behandeling of weer 50 terugkomend na beëindiging van de therapie schijnt te zijn.

e) Bekende hypersensibiliteit voor elk van de bestanddelen van het te onderzoeken geneesmiddel.

f) Patiënten die niet willen meewerken waarvan het onwaarschijnlijk is dat ze nauwkeurig de medische voorschriften zuilen volgen en patiënten die niet willen of in staat zijn regelmatig visites bij te wonen.

g) Behandeling met een te onderzoeken geneesmiddel binnen een maand voor de registratie van het 55 onderzoek.

h) Een ernstige, daarbij optredende ziekte, in het bijzonder slecht functioneren van de nieren met serumrea-tinine boven 130 pMol/.

13 195096 t i) Hypertensie (diastolisch BD> 95mm Hg na 5 min. zitten) Patiënten met een via een geneesmiddel beheerste hypertensie werden bij het onderzoek opgenomen.

j) Maligniteit of een maligniteitgeschiedenis, waaronder huidkanker.

k) Acute bacterieel-, viraal- of fungicidaal geassocieerde huidkwetsuren.

5 I) Zwangerschap, lactatie.

m) Patiënten met een geschiedenis van alcoholisme, drugsgebruik, psychose of emotionele of intellectuele problemen.

n) Patiënten die behoefte hebben aan een continue, begeleidende therapie met andere immunosuppres-sieve, chemotherapeutische middelen, verbindingen met een nefrotoxische potentiaal (bijvoorbeeld 10 aminoglycosiden) en geneesmiddelen waarvan bekend is dat ze de farmacokinetica van Ciclosporine beïnvloeden (ketoconazool, erythromycine, fenytoine, fenobarbiton, rifampicine, INT, carbamazepine, natriumvalproaat.

' o) Patiënten met abnormale basislijn laboratoriawaarden > 15% buiten de normale grenzen van het onderzoeklaboratorium.

15 p) Patiënten met klinisch significante onderzoekresultaten bij fysisch onderzoek.

De bij het onderzoek betrokken preparaten zijn die volgens één van de hiervoor beschreven voorbeelden 3.1 - 3.9, bijvoorbeeld het 1%-ige preparaat B van voorbeeld 3.2 of het 10%-ige preparaat B van voorbeeld 3.3.

Elke patiënt ontving een paar van 20 g gecodeerde buizen met een 2-panel label. De label is blauw voor 20 het materiaal dat zal worden toegediend aan de rechter kant en rood voor de linker kant. Bovendien is de te behandelen zijde, links of rechts, de onderzoekcode, de naam van de onderzoeker, het patiëntengetal en de datum van de eerste behandeling, op elke panel van de label geschreven. Het af te trekken panel van de label is bevestigd aan het onderzoekformulier,

De behandeling met het te onderzoeken preparaat geschiedde twee maal daags, ’s morgens en 25 ’s avonds, waarbij de toegepaste hoeveelheid afhing van de afmeting van de kwetsuur, ter verkrijging van een dagelijkse Ciclosporine dosering van 0,2 tot 2,0 mg Ciclosporine/cm2, bijvoorbeeld bij een reeks proeven ongeveer 0,5 mg Ciclosporine/cm2. De placebo werd in een overeenkomstige hoeveelheid toegepast. Noch het te onderzoeken preparaat, noch de placebo werden op een oppervlak van het lichaam >25 cm2 aangebracht en niet meer dan 1 g Ciclosporine werd per week toegediend. Bij elke klinische visite 30 werden de geneesmiddel-placebobuizen gewogen en de plaatselijk aangebrachte dagelijkse dosis bepaald. Patiënten mochten kort voor het toepassen van de medicatie baden. Weg te werpen handschoenen werden aangedaan en verwisseld bij het aanbrengen van elk te onderzoeken preparaat en placebo, teneinde kruislingse besmetting te vermijden. Men liet ten minste 3 uren verlopen tussen het toedienen en het wassen van de behandelde oppervlakken. Bij het eerste maal toedienen werd toezicht gehouden en een 35 instructieformulier voor de patiënt werd verschaft. De duur van de behandeling was 4 weken. Vond een volledige genezing van de kwetsuren eerder plaats, dan werd de behandeling voortgezet tot week 4. Patiënten werden voor het begin van het onderzoek onderzocht (week-1), bij het begin van de proef (week 0) en na 1, 2, 3 en 4 weken. De dermatologische beoordeling (local psoriasis index of LPSI) geschiedde door dezelfde onderzoeker, die niet betrokken was bij de medicatie, onder toepassing van de volgende 40 getalschaal van 0-3.

Erytheem Afschilferen Dikte van de huid 45 - 0 = geen 0 = geen 0 = geen 1 = Minimaal moeilijk aan te 1 = Minimaal moeilijk te 1 = Minimaal nauwelijks waar te tonen erytheem; zeer licht rose definiëren schilfers nemen verhoging 2 = Matig donkerrood dat kan 2 = Matig goed gedefinieerde 2 = Matig een duidelijk waar te 50 worden onderscheiden schilfers die zich beginnen op te nemen verhoging hopen 3 = Ernstig diep/helder rood 3 = Ernstig goed gedefinieerde 3 = Ernstig grote verhoging schilfers die zich compact ophopen 55 - 195096 14

Het totale LPSI traject = waarde van het erytheem plus het afschilferen plus de dikte van 0-9 werd beoordeeld. Om bij het onderzoek te worden opgenomen moeten ten minste 2 aspecten matig tot ernstig voor beide gekozen kwetsuren zijn (LPSI >5)

Bij het begin en bij elke klinische visite, werd het oppen/lak van de behandelde kwetsuren beoordeeld 5 (beginafmeting: 4 tot 252 cm voor elke plaque). Het onderzoek van het oppervlak heeft betrekking op de aanwezigheid van één of een aantal van de drie criteria erytheem, afschilferen en dik worden. Pigmentering in het kwetsuuroppervlak wordt niet bij de beschouwing van het oppervlak betrokken.

De plaque’s worden door foto's voor (week -1) en na de handeling (week 4) geregistreerd. Er werden drie foto’s genomen, één van beide kwetsuren tezamen en één voor elke kwetsuur.

10 Pruritus werd beoordeeld aan de hand van een interview van de patiënten, onder toepassing van de volgende schaal: 0 = geen 1 = minimaal: soms neiging tot krabben 2 = matig: aandrang om vaak te krabben 15 3 = ernstig: aandrang om zeer vaak te krabben, mogelijke slaapstoornissen.

Aan het einde van het onderzoek werd een globale beoordeling van de respons op de therapie volgens de volgende criteria opgesteld: - genezing = 100% verdwijning.

- duidelijke verbetering = ten minste 66% vermindering van LPSI en/of ten minste 66% vermindering van 20 het gebied met plaque.

- matige verbetering: tussen 65 en 35% vermindering van LPSI en/of tussen 65% en 33% vermindering van het oppervlak met plaque - slecht: minder dan 32% vermindering van LPSI en/of minder dan 32% vermindering van het oppervlak met plaque.

25 - Nog slechter: verergering van de ziekte.

Therapeutisch succes wordt gedefinieerd als elke kwetsuur die was "cleared” of genezen of die een duidelijke verbetering vertoonde.

De arts en patiënt geven eveneens hun voorkeur voor de medicatie aan de linker of rechter kant volgens de volgende criteria aan: 30 - de linker kant is duidelijk beter, - de linker kant is enigszins beter, - geen verschil kan worden waargenomen, - de rechter kant is enigszins beter en - de rechter kant is duidelijk beter.

35 Teneinde de doeltreffendheid aan het einde van de behandeling te onderzoeken, werden de LPSI waarden van de patiënten en de oppervlakken van de lesies met behulp van de WILCOXON-Sign Rank proef voor gepaarde behandelingen tussen met Ciclosporine behandelde plaatsen en met placebo behandelde plaatsen wat betreft de verandering van de beoordeling van de basislijn tot na 4 weken behandelen vergeleken.

40 Alle verdere vergelijkingen (op andere tijdstippen en voor de overige parameters wat betreft de doeltreffendheid), waaronder de er aan gehechte p-waarden, werden genomen als beschrijving van de voortgang van het onderzoek.

Bij het hiervoor beschreven onderzoek, vertoonden de patiënten een duidelijke verbetering van de psoriatische kwetsuren, bijvoorbeeld LPSI beoordelingen voor erytheem, afschilferen en de dikte van de 45 huid, op plaatsen waar de te onderzoeken verbinding die Ciclosporine bevatte werd aangebracht, vergeleken met plaatsen die de placebo ontvingen. Eveneens werd een subjectieve verbetering geregistreerd, tezamen met een verbetering van de geregistreerde waarden voor jeuk op de met Ciclosporine behandelde plaatsen, ten opzichte van die behandeld met placebo.

Positieve resultaten werden eveneens verkregen bij proeven van parallelle opzet op patiënten die 50 contactdermatitis zoals gediagnostiseerd via 3 of neer van de volgende criteria hebben: - Prutitus of jeuk - Typische-morfologie en verdeling: - Flexurale lichenificatie of lineariteit bij volwassenen - Faciale en extensor betrokkenheid bij baby’s en kinderen 55 - Chronische of chronisch terugkerende dercliatitis - Persoons- of familiegeschiedenis van atopie (astma, allergische rhinitis, atopische dermatitis), plus 3 of meer kleine kenmerken, waaronder: Xerosis, ichthyosis/palmaire hyperlineariteit/keratosis 15 195096 4 pilaris, directe (type 1) huidproefreactiviteit, verhoogd serum IgE, jeugdige leeftijd bij het begin (< 5 jaar), neiging tot cutane infecties (vooral Staph, aureusen Herpes simplex aangetaste, via de cel verlopende, immuniteit, neiging tot niet-specifieke hand- of voetdermatitis, tepeleczeem, cheilitis, herhaald terugkerende conjunctivitis, Dennie-Morgan infraorbitale plooien, keratoconus, anteriore subcapsulaire cataracten, orbitaal 5 donker worden, faciale bleekheid faciale erytheem, pityriasis alba, anteriore nekplooien, jeuk bij zweten, intolerantie voor wol en oplosmiddelen voor vetten, perifolliculaireaccentuatie, voedselintolerantie, gedrag beïnvloed door factoren van de omgeving of emotionele factoren en witte dermograrische late verbleking.

De onderzoekperiode bedroeg 3 weken, met een beoordeling op een schaal van 0 tot 3 voor de volgende parameters: pruritis, erytheem, exudatie, excoriatie en lichenificatie.

10 Preparaten voor plaatselijke toepassing, zoals hiervoor beschreven in de voorbeelden 1 - 9, die 1-10% Ciclosporine bevatten, bijvoorbeeld het 5,0%-ige preparaat volgens voorbeeld 7, bleken eveneens doeltreffend te zijn bij allergische contactdermatitis, evenals alopecia.

Ter bevordering van de identificatie van Cyclosporine in de orthorhombische kristalvorm CY-A/X-III, zijn röntgenstralen poederdiffractiewaarden, voor CY-A/X-III en voor de twee, eveneens hierin, aangeduide, 15 vormen CY-A/X-II en CY-A/X-I gegeven de volgende tabellen I - III. In de bijgesloten figuur IV is het röntgenstralen poederdiffractiediagram weergegeven waaruit de waarden van de tabellen I - III werden verkregen. Het diffractiediagram werd verkregen met een Guinier-DeWolff II camera onder toepassing van CuKa-straling, Y= 1,542 A,

20 TABEL I

Tabel Röntgenstralingsdiagram van CY-A/X-I

Lijn No. d (A) Intensiteit

25 1. 13,0 VS

2. 11,4 VS

3. 10,3 VS

4. 9,7 VS

5. 9,4 VS

30 6. 8,25 VS

7. 7,1 S

8. 6,1 M

9. 5,85 S

10. 5,6 S

35 11. 5,25 VS

12. 4,81 S

13. 4,58 S

14. 4,25 M

15. 4,0 M

40 16. 3,67 M

17. 3,45 M

TABEL II

Röntgenstralingdiagram van CY-A/X-II

45 ______

Lijn No. d (A) Intensiteit

1. 17,9 S

2. 11,4 VS

50 3. 11,0 S

4. 10,6 M

5. 10,2 S

6. 8,9 M

7. 8,7 M

55 8. 8,1 M

Claims (1)

195096 16 TABEL II (vervolg) Röntgenstralingdiagram van CY-A/X-II Lijn No. d (A) Intensiteit 5 - 9. 7,2 VS 10. 6,3 M 11. 5,95 M 12. 5,7 M 10 13. 5,95 M 14. 5,7 S 15. 4,85 S 16. 4,8 M 17. 4,55 M 15 18. 4,4 M TABEL ill Röntgenstralingsdiagram van CT-A/X-III 23 Lijn No. d (A) Intensiteit 1. 12,0 M 2. 10,4 VS 3. 9,6 S 25 4. 8,7 S 5. 7,9 M 6. 7,7 S 7. 6,7 M 8. 6,0 M 30 9. 5,83 S 10. 5,3 M 11. 5,2 M 12 4,92 S 13. 4,88 S 35 14. 4,58 M 15. 4,48 M 16. 4,0 M 17. 3,59 M 18. 3,38 M 40 _ VS = zeer sterk S = sterk M - matig 45 Farmaceutisch preparaat omvattende ciclosporine als actief bestanddeel in een voor topicale toepassing karakteristieke vorm en/of samenstelling, met het kenmerk, dat het ciclosporine een orthorhombische 50 kristalvorm aangeduid als CY-A/X-III heeft en aanwezig is met een gehalte van minimaal 0,1 gew. %. Hierbij 4 bladen tekening