PL239843B1 - 3β-Hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en-17-on i sposób wytwarzania 3β-hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en- 17-onu - Google Patents
3β-Hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en-17-on i sposób wytwarzania 3β-hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en- 17-onu Download PDFInfo
- Publication number
- PL239843B1 PL239843B1 PL429380A PL42938019A PL239843B1 PL 239843 B1 PL239843 B1 PL 239843B1 PL 429380 A PL429380 A PL 429380A PL 42938019 A PL42938019 A PL 42938019A PL 239843 B1 PL239843 B1 PL 239843B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- homo
- oxa
- hydroxy
- norandrost
- chloroform
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 20
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000006220 Baeyer-Villiger oxidation reaction Methods 0.000 claims abstract description 6
- 241001302652 Bassiana Species 0.000 claims abstract description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 claims abstract description 4
- 229950005326 prasterone acetate Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 16
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract 2
- 150000003431 steroids Chemical group 0.000 claims description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 7
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 6
- 230000009466 transformation Effects 0.000 claims description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 5
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 9
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 6
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 3
- 239000000047 product Substances 0.000 claims 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims 1
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 claims 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 claims 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 claims 1
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 abstract description 5
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 abstract description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 6
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 4
- 241000751139 Beauveria bassiana Species 0.000 description 3
- 239000003886 aromatase inhibitor Substances 0.000 description 3
- 229940046844 aromatase inhibitors Drugs 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 3
- 102000014654 Aromatase Human genes 0.000 description 2
- 108010078554 Aromatase Proteins 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000002280 anti-androgenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000051 antiandrogen Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 201000000079 gynecomastia Diseases 0.000 description 2
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 2
- 150000004965 peroxy acids Chemical class 0.000 description 2
- BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N testolactone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(OC(=O)CC4)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N 0.000 description 2
- 229960005353 testolactone Drugs 0.000 description 2
- DNXHEGUUPJUMQT-UHFFFAOYSA-N (+)-estrone Natural products OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC2=C1 DNXHEGUUPJUMQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 17-β-hydroxy-5-α-Androstan-3-one Chemical compound C1C(=O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 0.000 description 1
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 1
- GLVYLTSKTCWWJR-UHFFFAOYSA-N 2-carbonoperoxoylbenzoic acid Chemical compound OOC(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O GLVYLTSKTCWWJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- 206010004446 Benign prostatic hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N Dehydroepiandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N Estrone Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N 0.000 description 1
- 208000004403 Prostatic Hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 102000001307 androgen receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010080146 androgen receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010068168 androgenetic alopecia Diseases 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229940030495 antiandrogen sex hormone and modulator of the genital system Drugs 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 230000002210 biocatalytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000039 congener Substances 0.000 description 1
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 1
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 description 1
- 229960003399 estrone Drugs 0.000 description 1
- 238000004880 explosion Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 238000007273 lactonization reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229960002847 prasterone Drugs 0.000 description 1
- 208000006155 precocious puberty Diseases 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 238000007157 ring contraction reaction Methods 0.000 description 1
- -1 steroid lactones Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J69/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton has been modified by contraction of only one ring by one atom and expansion of only one ring by one atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J73/00—Steroids in which the cyclopenta[a]hydrophenanthrene skeleton has been modified by substitution of one or two carbon atoms by hetero atoms
- C07J73/001—Steroids in which the cyclopenta[a]hydrophenanthrene skeleton has been modified by substitution of one or two carbon atoms by hetero atoms by one hetero atom
- C07J73/003—Steroids in which the cyclopenta[a]hydrophenanthrene skeleton has been modified by substitution of one or two carbon atoms by hetero atoms by one hetero atom by oxygen as hetero atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P33/00—Preparation of steroids
- C12P33/06—Hydroxylating
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P33/00—Preparation of steroids
- C12P33/12—Acting on D ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P33/00—Preparation of steroids
- C12P33/20—Preparation of steroids containing heterocyclic rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Wynalazek dotyczy 3ß-hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en-17-onu i sposobu wytwarzania 3ß-hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en-17-onu. Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach szczepu Beauvera bassiana KCH1065 na octan B-nor-dehydroepiandrosteronu, o wzorze 1, następuje hydroliza wiązania estrowego oraz utlenienie typu Baeyera-Villigera grupy karbonylowej substratu do laktonu, o wzorze 2. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą (chloroform) i oczyszcza chromatograficznie.
Description
PL 239 843 B1
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest 3e-hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en-17-on i sposób wytwarzania 3e-hydroksy-17a-oksa-D- homo-B-norandrost-5-en-17-onu.
Sposobem według wynalazku, można otrzymać steroidowy lakton - B-nor strukturalny analog antynowotworowego i antyandrogennego testolaktonu, o potencjalnie podobnej aktywności. Może on znaleźć wykorzystanie w wytwarzaniu terapeutyków stosowanych w leczeniu chorób hormonozależnych.
Układy steroidowe z ugrupowaniem laktonowym w pierścieniu D wykazują różnorodną aktywność biologiczną. Jako inhibitory 5a-reduktazy - enzymu odpowiedzialnego za przekształcenie testosteronu do 5a-dihydrotestosteronu, mogą być stosowane w terapii chorób androgenozależnych takich jak łagodny przerost prostaty, trądzik, łysienie typu męskiego (M. Garrido, E. Bratoeff, D. Bonilla, J. Soriano, Y. Heuze, M. Cabeza. 2011. New steroidal lactones as 5a-reductase inhibitors and antagonists for the androgen receptor. Journal of Steroid Biochemistry and Molcular Biology, 127, 367-373). Mogą również inhibować aktywność steroidowej aromatazy - enzymu przekształcającego testosteron do estradiolu, tym samym ograniczając syntezę estronu. Ma to znaczenie w terapii zaburzeń równowagi hormonalnej, której skutkiem jest ginekomastia lub przedwczesne dojrzewanie (G.D. Braunstein. 1999. Aromatase and gynecomastia. Endocrine-Related Cancer, 6, 315-324; P. Feuillan, D. Merke, E.W. Leschek., G.B. Cutler. 1999. Use of aromatase inhibitors in precocious puberty. Endocrine-Related Cancer, 6, 303306). Steroidowy testolakton stosowany jest w klinicznym leczeniu zaawansowanego stadium raka piersi (H.M Brodie, V.C.O. Njar. 1998. Aromatase inhibitors In advanced breast cancer: Mechanism of action and implications. Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology, 66, 1-10; J. Balunas, B. Su, R.W. Brueggemeier, A.D. Kinghorn. 2008. Natural products as aromatase inhibitors. Anticancer Agents in Medicinal Chemistry, 8, 646-682). Modyfikacja szkieletu steroidowego związana z kontrakcją pierścienia B, zwykle nie zmienia aktywności biologicznej takich cząsteczek w stosunku do ich naturalnych kongenerów. Jednakże aktywność hormonalna B-nor analogów testosteronu czy dehydroepiandrosteronu jest znacząco niższa (S.R. Ramadas, P.K. Sujeeth, T.R. Kasturi, F.M. Abraham. 1976. Chemistry & Biological activity of B-norsterods. Journal of Scientific & Industrial Research, 35, 571-586), a związki te uważane są za antyandrogeny - substancje zmniejszające oddziaływanie męskich hormonów na organizm.
Chemiczny sposób otrzymywania steroidowych laktonów w reakcji utlenienia typu Baeyera-Villigera grupy karbonylowej substratów za pomocą nadkwasów napotyka szereg utrudnień. Jednym z nich jest toksyczność i niestabilność stosowanych utleniaczy oraz ich skłonność do eksplozji, co dla procesów prowadzonych w skali przemysłowej w połączeniu z wykorzystywanymi w reakcji palnymi rozpuszczalnikami, jest szczególnie istotne. Ważne jest również powstawanie produktów ubocznych w reakcjach, w których substratem jest związek zawierający inne wrażliwe na utlenianie grupy funkcyjne (np. nadkwasy utleniają także wiązanie podwójne). Produkty uboczne powstają również w reakcjach, w których jako czynnik utleniający stosuje się sól magnezową kwasu mononadftalowego (MMPP). Przyjazną dla środowiska alternatywą staje się więc selektywne utlenianie enzymatyczne.
W literaturze nie ma doniesień dotyczących otrzymywania 3e-hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandost-5-en-17-onu, zarówno metodą utleniania enzymatycznego jak i chemicznego.
Szczep Beauveria bassiana KCH1065 był wcześniej ujawniony w literaturze (A. Świzdor, T. Kotek, A. Panek, A. Białońska, 2011. Microbial Baeyer-Villiger oxidation of steroidal ketones using Beauveria bassiana: Presence of an 11a-hydroxyl group essentials to generation of D-homo lactones. Biochimica et Biophysica Acta - Molecular and Cell Biology of Lipids, 1811,253-256; A. Świzdor, A. Panek, N. MileckaTronina, 2014. Microbial Baeyer-Villiger oxidation of 5a-steroids using Beauveria bassiana. A stereochemical requirement for the 11a-hydroxylation and the lactonization pathway. Steroids, 82, 44-52).
Z opisów patentowych PL214913 oraz PL215117, znane są jego biokatalityczne właściwości w jednoczesnej reakcji utlenienia typu Beayera-Villigera oraz 11a-hydroksylacji szeregu steroidów typu androstanu do odpowiednich 11a-hydroksylakonów.
Istotą wynalazku jest 3e-hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en-17-on.
Z kolei istotą sposobu według wynalazku jest to, że do podłoża odpowiedniego dla wzrostu grzybów strzępkowych wprowadza się zawiesinę komórek Beauvera bassiana KCH1065 i hodowlę prowadzi się przez kilka dni przy stałym wstrząsaniu w temperaturze 20-26°C. Po upływie co najmniej 48 godzin do hodowli dodaje się substrat o wzorze 1, którym jest octan B-nor-dehydroepiandrosteronu, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą. Transformację prowadzi się w temperaturze od 20°C do 26°C, przy ciągłym wstrząsaniu, co najmniej 4 doby. Uzyskane roztwory
Claims (7)
- PL 239 843 B1 transformacyjne ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą a ekstrakty osusza. Po odparowaniu rozpuszczalnika otrzymuje się surowy produkt, który oczyszcza się chromatograficznie.W wyniku hydrolizy wiązania estrowego w pierścieniu A oraz utlenienia typu Baeyera-Villigera grupy karbonylowej w pierścieniu D szkieletu steroidowego substratu otrzymuje się 3e-hydroksy-17a-oksa-D- homo-B-norandrost-5-en-17-on, a reakcję prowadzi się w wodnej kulturze szczepu Beauvera bassiana KCH1065.Korzystnie jest, gdy stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,35 g : 1 L.Korzystnie także jest, gdy transformację prowadzi się przez 5 dni.Korzystnie jest również, gdy proces prowadzi się w temperaturze 23 stopni Celsjusza.Korzystnie jest także, gdy ekstrakcję wykonuje się chloroformem.Korzystnie jest również, gdy jako eluent stosuje się mieszaninę heksan : chloroform : izopropanol w proporcji objętościowej składników 2:1:0,5.Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach szczepu Beauvera bassiana KCH1065, następuje hydroliza wiązania estrowego oraz utlenianie typu Baeyera-Villigera grupy karbonylowej substratu. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą (chloroform). Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 3e-hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en-17-onu, z wydajnością 63%, w temperaturze pokojowej i przy pH naturalnym dla szczepu.Wynalazek jest bliżej objaśniony na przykładzie wykonania.P r z y k ł a d. Do kolby Erlenmajera o pojemności 300 cm3, w której znajduje się 100 cm3 sterylnej pożywki zawierającej 1 g aminobaku i 3 g glukozy, wprowadza się szczep Beauvera bassiana KCH1065. Po 72 godzinach jego wzrostu do hodowli dodaje się 35 mg octanu B-nor-dehydroepiandrosteronu o wzorze 1, rozpuszczonego w 0,5 cm3 acetonu. Transformację prowadzi się w 23°C przy ciągłym wstrząsaniu przez 5 dni. Następnie mieszaninę poreakcyjną ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymany ekstrakt oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaniny heksan : chloroform : izopropanol w proporcji objętościowej składników 2:1:0,5. Na tej drodze otrzymuje się 21 mg 3e-hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en-17-onu, (wydajność izolowana 63% mol.), o wzorze 2.Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:1H NMR (300 MHz) (CDCI3) δ (ppm): 0,88 (s, 3H, 19-H); 1,34 (s, 3H, 18-H); 2,59-2,63 (m, 1H, 16a-H); 2,66-2,71 (m, 1H, 16p-H); 3,56-3,61 (m, 1H, 3a-H); 5,38 (s, 1H, 6-H).13C NMR (75 MHz, CDCI3) δ (ppm): 170,6; 149,9; 123,3; 85,1; 71,4; 61,4; 45,5; 44,8; 44,7; 40,1; 36,8; 36,3; 34,9; 28,8; 21,8; 20,7; 20,4;15.0.Zastrzeżenia patentowe1. 3e-Hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en-17-on o wzorze 2.
- 2. Sposób wytwarzania 3e-hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en-17-onu, znamienny tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Beauvera bassiana KCH1065, następnie po upływie co najmniej 48 godzin do hodowli dodaje się substrat, którym jest octan B-nor-dehydroepiandrosteronu, o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą, transformację prowadzi się w temperaturze od 20°C do 26°C przy ciągłym wstrząsaniu co najmniej 4 doby, po czym produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
- 3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,35 g : 1 L.
- 4. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że transformację prowadzi się przez 5 dni.
- 5. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 23 stopni Celsjusza.
- 6. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że ekstrakcję wykonuje się chloroformem.
- 7. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że jako eluent stosuje się mieszaninę heksan : chloroform : izopropanol w proporcji objętościowej składników 2:1:0,5.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL429380A PL239843B1 (pl) | 2019-03-25 | 2019-03-25 | 3β-Hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en-17-on i sposób wytwarzania 3β-hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en- 17-onu |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL429380A PL239843B1 (pl) | 2019-03-25 | 2019-03-25 | 3β-Hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en-17-on i sposób wytwarzania 3β-hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en- 17-onu |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL429380A1 PL429380A1 (pl) | 2020-10-05 |
| PL239843B1 true PL239843B1 (pl) | 2022-01-17 |
Family
ID=72669272
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL429380A PL239843B1 (pl) | 2019-03-25 | 2019-03-25 | 3β-Hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en-17-on i sposób wytwarzania 3β-hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en- 17-onu |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL239843B1 (pl) |
-
2019
- 2019-03-25 PL PL429380A patent/PL239843B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL429380A1 (pl) | 2020-10-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mehta et al. | Enantioselective total synthesis of epoxyquinone natural products (−)-phyllostine,(+)-epoxydon,(+)-epiepoxydon and (−)-panepophenanthrin: access to versatile chiral building blocks through enzymatic kinetic resolution | |
| PL242468B1 (pl) | Sposób wytwarzania 6-metylo-4’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu | |
| PL239843B1 (pl) | 3β-Hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en-17-on i sposób wytwarzania 3β-hydroksy-17a-oksa-D-homo-B-norandrost-5-en- 17-onu | |
| JP2564576B2 (ja) | ブラシノステロイド誘導体およびそれを用いる植物生育調節剤 | |
| PL242333B1 (pl) | 4’-Hydroksy-6-metyleno-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawanon i sposób wytwarzania 4’-hydroksy-6-metyleno-O- -β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawanonu | |
| PL242335B1 (pl) | 6-Hydroksymetylo-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawanon i sposób wytwarzania 6-hydroksymetylo-3’-O-β-D-(4’’- O-metyloglukopiranozylo)-flawanonu | |
| Khripach et al. | Preparation and synthetic application of partially protected brassinosteroids | |
| PL235286B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-17a-oksa-D-homo-androst- 5-en-7,17-dionu | |
| PL237709B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu | |
| PL237135B1 (pl) | 3β,17α-Dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan i sposób wytwarzania 3β,17α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostanu | |
| PL237710B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu | |
| PL239564B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-17a-oksa-Dhomo- 6,19-oksidoandrostan-17-onu | |
| AU7327798A (en) | 4-aza-steroids | |
| PL239563B1 (pl) | 3β-Hydroksy-5α-chloro-17a-oksa-D-homo-6,19-oksidoandrostan- 17-on i sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-17aoksa- D-homo-6,19-oksidoandrostan-17-onu | |
| PL237134B1 (pl) | 3β,11α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17- on i sposób wytwarzania 3β,11α-dihydroksy-5α-chloro-6,19- oksidoandrostan-17-onu | |
| PL236834B1 (pl) | 3β,11α-dihydroksy-5α-chloro-17a-oksa-D-homo-6,19- oksidoandrostan-17-on i sposób wytwarzania 3β,11α-dihydroksy- 5α-chloro-17a-oksa-D-homo-6,19-oksidoandrostan-17-onu | |
| PL228764B1 (pl) | Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionu | |
| PL246071B1 (pl) | Sposób wytwarzania 11α-hydroksy-19-nortestosteronu | |
| PL442097A1 (pl) | Sposób wytwarzania 19-nortestololaktonu | |
| PL242334B1 (pl) | 4’-Hydroksy-6-metylo-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawanon i sposób wytwarzania 4’-hydroksy-6-metylo-3’-O-β-D-(4’’- -O-metyloglukopiranozylo)-flawanonu | |
| PL219992B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3ß,7ß-dihydroksy-5α-androst-17-onu | |
| PL247869B1 (pl) | Sposób wytwarzania 2’-Metylo-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu | |
| PL242469B1 (pl) | 3’,4’-Dihydroksy-6-hydroksymetyloflawanon i sposób wytwarzania 3’,4’-dihydroksy-6-hydroksymetyloflawanonu | |
| PL215117B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3p,11a-dihydroksy-17a-oxa-D-homo-5a-androstan-17-onu | |
| PL248133B1 (pl) | Sposób wytwarzania 2’-metylo-6-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu |