<Desc/Clms Page number 1>
EMI1.1
1AÍ La. société dite JI.!#RCX Aktiengese11sohatt - 41 , à Barmotadt - Allemagne - procêdd de préparation de ? 6,l6-diméthyl-15-déehydro-BtroTdee. / 1 -.<###### ###- Convention Internationale Demandes de breveta de la Républi- que Fédérale allemande M 50 979 déposée le 24 novembre 1961, 51 015 déposée le 29 novembre 1961, 51 048 déposée le 2 décembre 1961 et 51 103 déposée le 7 décembre 1961,
EMI1.2
######## On vient de découvrir que 18 6,l6-diméthyl-ib*'-déshydro- stéroïdes de formule r'
EMI1.3
Chez dans laquelle 1 . ' 00' Ost 1 w a ou? - y e C3 Y = t H, OI ou 0 1 Z m groupe hydroxyle libre ou t 1 estérifié, 1 CH3
EMI1.4
Ainsi que leurs drivée Al,,:
,j et ,0,.1,6, possèdent des propriétêa antiinf3.ammatoires remarquables.
<Desc/Clms Page number 2>
EMI2.1
Les nouveaux composés <ont préparables par les proo4df connut en chimie des etérotdoge Une matière première appropriée est par exemple la 6,16dméthyl-16 A,l?'GlQxydo-progeetron, décrite dans J. Chem. 800* 1961, p. 2821, à partir de laquelle les composée de formule 1 peuvent être préparés par une série de réactions qui peuvent',.. suivre dans un ordre presque quel- conque
EMI2.2
On peut par exemple scinder la G.16-dill1éthyl-16ct,1- oxydo-progestérone de manière connue en sol en 6,16-diméthyl'- 15-déhydxo-1TC(-hydroxr.pogestdroze. Le -ddahydro-oompoad ainsi obtenu peut ensuite être hydroxylé de manière connue en soi en position 11 ou déshydrogéné en position 1 et/ou 6.
La succession de ces réactions-peut varierde manière quelconque, mais on exécute en général la 1,2-déshydrogénation en tant que dernier stade réactionnel, La conversion de l'un des produits
EMI2.3
intermédiaires tinsi obtenus en le composé correspondant 21- hydroxylé ou 21-0-acylé se fait de même à un stade de réaction quelconque et s'exécute de manière particulièrement avantageuse
EMI2.4
en passant par le 21..i.odostéraïdo correspondant* A partir des produits 11-hydroxyléa on peut préparer en
EMI2.5
outre de manière connue en soi les 9Ci-tluoro-dérivés corres- pondanteu Le groupe 11-hydroxylé d'un produit intermédiaire ou final peut de plus Stre oxydé à un stade de réaction quelconque n groupe 11-cétonique.
En outre, avantageusement dans les pro- duits finaux, les groupes 21-acyle présents à la position 21 peuvent être saponifiés par-dès méthodes conventionnelles, ou bien les groupes 21-hydroxyle peuvent être estérifiés suivant les procédés usuels à cet effet.
Les divers procédés sont expliqués ci-après.
EMI2.6
a scission du 160(.170t-époxyde t La scission se fait par traitement d'un .6-mthy3-.
17e<-oxydo-stéroÏde avec un'acide en présence d'eau et d'un
<Desc/Clms Page number 3>
EMI3.1
solvant miscible à 1*eau* En tant qu'acides peuvent être empldy de par exemple l'acide perchlorique, l'acide chlorhydrate l'acide bromhydrique, l'acide fluorhydrique, l'acide aulfurique
EMI3.2
et autres acides forts.
Comme solvants on envisage par exemple
EMI3.3
l'acétone, le tétrahydrofurane, le méthanol, l'éthanol, Ilac6to- nitrile, la diméthylformamide, le dioxane eu l'acide acétique glacial. ta scission est avantageusement exécutée dans un inter- valle de température de 0 à 10000. la conversion exige géai- rani environ 30 minutes à 24 heures, suivant le et4r*lde de 44-- part* l'acide et le solvant que l'on utilise* Sans de &e&1;!:p!K cas il suffit d'abandonner au repos le mélange de réaction |t la
EMI3.4
température ordinaire.
EMI3.5
b) 11-DZIroZylalion la ll-hydroxylation est effectuée pitr voie mitro3..cus, On peut faire intervenir tous les microorganianee employés cou*'
EMI3.6
ramment pour de telles réactions.
Conviennent en particulier
EMI3.7
notamment les Nicroorganiamos de 11/3-hydroxylation des genres Absidia, Coniothyriump Ounninghamellat O"vulariat Xue0ro Otachylidium et Streptomyces.
EMI3.8
Pour la ll -hydroxylation conviennent par exemple les
EMI3.9
microorganismes des genres Absodiat Asperillua, Coryneuatf Puaarium, Glomerella, Motarrhizîum, Mucor ( et autres genres de l'ordre Muaaral.ea, Pénicillium et Rhizopua.
La fermentation est effectuée suivant lee méthodes usuelles et demande environ 10 à 48 heures. Le 11-hydroxy-stéroïde obtenu est extrait du mélange de réaction par extraction avec un sol-
EMI3.10
vant approprié, par exemple avec du chloroforme ou du chlorure de méthylène*
EMI3.11
o) 3.-idehvdrprcdnation s ta l'-déshydrogénation peut se faire par voie chimique ou microbiologique et à un stade quelconque de réaction. En tant
EMI3.12
qu'agent de déshydrogénation chimique convient par exemple la '
<Desc/Clms Page number 4>
EMI4.1
;i,3 y ohloro-5,6-diysnotensoquinons.
La réaction est avants,- gaui 0 oent effectuée an présence d'un solvant ayant un point 406 ulition entre environ 0 et 15000* Comme solvants peuvent ue par exemple convenir s étheiol, butanol, butanol tertiaire, ,Ï't4r .utylaotate de roéthylé, acétate de méthyle, dioxane, go acétique glaciale benzène, tétrahydrôfuranep acétone, tto . 1 cet avantageux de mélanger de faibles quantités de #nitrobenzène au mélange de réaction. Les durées de réaction se ait4ent entre 5 et 48 heures Avantageusement on effectue la conversion à la températured'ébullition dik solvant employé.
EMI4.2
Pour la 1,2-déshydrogénation microbiologique on peut uti- liser due mioroorganiemes qui appartiennent par exemple aux
EMI4.3
te-ide suivante s Altemariat galoneotrlat Colletotriohum,
EMI4.4
EMI4.5
gylândrocarpons Didymella, Fusarium, Ophiobolua, Septomycat Yeimiculariai Micrctmonosporat Nocardia# Streptomyceai 7.seigenea, Bacillue, Coryhsbaoterium, Mycobacterlum, Protami- notjaûter, Faeudoraonae.
Conviennent particulièrement le Bacillus aphaerioua var. tudiformiop le Corynebecterium simplex et le Fusarium aolani,
EMI4.6
:Pour la déshydrogénation on ajoute la matière première à une culture submergée du microorganisme envisagé, lequel se développe dans une solution nutritive appropriée à une tempéra-
EMI4.7
tu.fe!optîma et en aérant fortement suivant les méthodes usuel- les de la technique de fermentation. Au lieu de cultures en oroiaaanoe on peut utiliser, la technique restant la même pour 'la Matant, des suspensions des mioroorsaniamea en solution
EMI4.8
tampon* La conversion est contrôlée par chromatographie et la
EMI4.9
solution de fermentation, après conversion complète de la matie- ra première, est extraite par exemple avec du chloroforme.
4) 6-déshydroération La déahydrogénation an position 6 est effectuée avec du
<Desc/Clms Page number 5>
EMI5.1
cbloranile. Il est avantageux d'opérer en présence d'un solvant inerte comme le benzène, le toluène, le xylène, le chloroforme, le chlorure de méthylène, l'acétone, le méthanol, l'éthanol, le butanol tertiaire,le tétrahydrofurane ou l'acide acétique gla-
EMI5.2
cipal. On exécute la conversion avantageusement à chaud, éventu- olle7'7mont à la température d'ébullition du solvant utilisé. Le ohloranile est employé le plus souvent dans le rapport molaire
EMI5.3
1 : 1* Un excès n'est pas nuisible. e) 21-cYlt1ol\ .
La 21-acylation d'un :1-ddsaxy-stdrode peut ne faire par toutes les méthodes usuelles.et a des etades de réaction quel- conques. Ainsi. un 3.-déeoxy.stéroïde se laisse transformer dané,un mélange tétrahydrofurane/méthanol par traitement avec une solution d'iode alcaline tout d'abord en le 21-iodo-ateroX- de correspondant, que l'on fait réagir par la suite avec un aoylate alcalin, de préférence avec de l'acétate de potassium, par exemple dans l'acétone.
f) introduction- d'un atome de fluor en 9Ó,
EMI5.4
-.Cette réaction a lieu en passant par les 9,ll-déshydr i stérÓldes correspondants qui peuvent être obtenus à partir des 11--hydroxy-st6roidss par une déshydratation courante, Les .3 hydroxy-stêroldes peuvent par exemple être déshydratés par Irai' tement avec de l'oxychlorure de phosphore ou du chlorure de thionyle dans de la pyridine. les 11/9-hydroxy-stéroïdes ee laissent convertir le plus simplement par extérification avec de l'acide p-toluène-aulfonique et scission ultérieure de l'aci-
EMI5.5
de dans les 9,ï1-dshyàro.-etdroïdes.
Un traitement aucoesaif avec HOBr ou la N-bromosucoinimide et avec des agents alcalines par exemple de l'acétate de potassium, fournit les 9ss, 11ss- époxydes correspondants, qui donnent par réaction avec l'acide
EMI5.6
fluorhydrique les 9<a(-fluoro-ll/3-hydroxy-stéroÏdes apparentés, La réaction avec l'acide fluorhydrique se fait avantageusement
<Desc/Clms Page number 6>
EMI6.1
, n sno4 de sol vanta inertes, par exemple le 4hlocaa ou 14,4 ure de méthylène le tétrahydrofurane ou le dioxane. llèfc qdraturee de réaction appliquées se situent entre -70 jet f c .
g t b'r 7 > ion 8 bzz v 6 *16-diméthyl-1-désshydro-sitéralcea, obtenue ooame px'id t intermédiaires ou finaux, qui contiennent un groupe 11-hyïxyle, ne laissent convertir par traitement avec un = a,on *oxydation doux, par exemple par réaction avec 1 'acide cho4duoq un mélange d'acide ohromique et de pyridine, ou Id'aclâie- chromique et d'acétone, ou avec de l'acide Nulfoohromi*- jquei, pu. avec de l'acide hypobromeux, en les 11-oéto-stéroïdes rrr pondantef, f H) Isa1t>oaiii*ication ! ' 1 groupes.ester se 'trouvant en position 23i dans les pro- aUj<t< \ Intermédiaires ou finaux peuvent être saponifiés par les faj±$iëi#8 standards* Comme -agenta de saponification on envisage piat < pla les olutiona ,aquauses de bicarbonate de sodium de #. o'eàÛ ad te de sodium ou d'hydroxyde de sodium, en opérant aanta- gous 4nt en l'absence d'oxygène.
i) erificati0!i s 9'a Sroupea hydroxyle existant dans les produite intense- dig ou finaux peuvent -3tre estérifiés par les méthodes aue31<a. En tant qu'agents d'eotérifioation sont utilisables * tous lèa acides, ou leurs dérivés convenant pour l'eatérifioa- ,tion qui donnent des esters physiolosiqueaent acceptables, par exemple des acides carboxyliques comme l'acide acétique, l'aci- de ptogionîquop l'acide butyrique, l'acide triméthylacétique, l*aci;
d cyclopentylpropioniquo, l'ecide phénylpropionique, l'acide phénylacétique, l'acide caproïque, l'acide oaprylique, l'aoid palmitique, l'acide undécylénique, l'acide benzoïque, I!aoid4 hexahydrobenzoïque ou l'acide chloracétique, Eventuel-
<Desc/Clms Page number 7>
lement aussi, pour la préparation de dérivas hydrosolubles, on peut estérifier le groupe 21-hydroxyle avec des acides dicarbo-
EMI7.1
xyliques, des acides aminocarboxyliquea ou des alcoyiaminoaar" boxyliquea, eu avec de l'acide phosphorique ou sulfurique.
Sui- vant ce mode on peut par exemple préparer les aucc3n.tes, les exalates ou les sels d'addition acides d'esters d'acides emino- carboxyliques, comme par exemple l'ester aspartique ou diéthyl- a.nlatiqu9. les nouveaux composée peuvent être employés en mélange avec des véhicules pharmaceutiques usuels en médecine humains ou vétérinaire. En tant que substances véhiculantes on envisage toutes les matières auxiliaires couramment employées,par exem-
EMI7.2
ple-leeaue les huiles, les polyéthylène glycols, la gélatine, le lactose, l'amidon, le stéarate de aafjnéaiua, le talc, la vaseline, la cholestérine, etc.
Pour l'tidrainifitration parenté- raie servent particulièrement les solutions, suspensions ou émulsions huileuses ou aqueuses. En vue de l'application enté- rale on peut employer les tablettes ou dragées, pour l'applica- tion topique les onguents ou crânes, qui sontle cas échéant stérilisés ou additionnés d'agents auxiliaires comme des agents
EMI7.3
da conservation, de stabilisation ou des agents mouillants, ou encore des sala pour influencer la pression osmotique, ou des
EMI7.4
sucetaneea tampons.
Au, cas où les produite finaux conformes à l'invention sont appliqués sous des formes de préparation solides, les desse individuelles sont comprises entre 0,1 et 10 mg. Dans l'appli,;- eat 'en de solutions à infecter, les doses Individuelles sont
EMI7.5
comprises ent4 2 et 25 me. xem le.",",3." a) On laissé reposer a la température ordinaire pendant 24 heures i0 g de 6Û<,l6/3-diméthyl-160(,170(-oxydo*-4-pï'égnëne-. 3,20-dione dans 500 cm3 de diméthylformamide avec 10 om3 d'ab*4.
<Desc/Clms Page number 8>
0 il de chlorhydrique concentre* On verse inculte le mélange de réaction dans de l'eau et on sépare par filtration le précipité
EMI8.1
de 60:,1fidiméthyl-4,.5iPré,nadiène-1"T-ol-3,2Gwdioue brute. max 241 mps 31 ci 95 ; .'*#*# 2fl1-2fl5 Q. b) Dans un petit fermentateur on inocule 15 litres d'une solu-
EMI8.2
tion nutritive à 5e de glucose, 0,2% d'extrait de levure, ti96 de nitrate de sodium, 0,05 % de sulfate de- magnésium, 0,001 % de sulfate de fer(II) et 1130,mole de tampon phosphate de Sörensen (pH 5,6)
avec 800 om3 de culture agitée de Metarrhizium aniso- bilae La culture se développe tout en agitant et en aérant fortement et l'on fait après 24 heures une addition de 5 g de
EMI8.3
6,16-diméthyl-4,1'S-Prdgn,di,ène 1701-oZ-,fl.dione dans 40 om3 de dimétbylforraamlde. L'hydrox1latln est contrôlée par chroma- tographie sur papier. Après achevèrent de la conversion on ex- trait le mélange de réaction avecdu chloroforme.Après évapo-
EMI8.4
ration du solvant, on obtient par recr1atallleation à partir d'acétone la 60,16-diméthyl-4,15-F''aà3.na.3.lK',.'âiol- 3,20-dione. l'mu 242 mur.
El om 412. ou 9,2 g de 6 Q,16-diméti,yl-4, l.pz6gac.n.e.l1 X,1?t3-si3ol.. 3,20-dione sont dissous après séchage dans 40 cm3 de chlorofor- me et 55 cm3 de pyridine et on y ajoute tout en refroidissant avec de la glace et en agitant 11,2 g de chlorure de p-toluène- r
EMI8.5
aultonyle. On laisse reposer le mélange de réaction durant une nuit, on le verse dans de l'eau, on l'extrait avec du ohloro-
EMI8.6
forme et on le traite de la manière courante. Le 11-toaylate cristallise à partir de l'extrait ohloroforaique it on le rem sristalliae à partir de méthanol.
On chauffe 11 g du tosylate dans 125 cm3 d'acide acétique glacial conjointement avec 10,3 g d'acétate de sodium anhydre pendant 30 minutes à reflux. On verse le'mélange de réaction
EMI8.7
dans de l'eau, on sépare avec succion la bt,l6-.di.aéyi- 4,9 (y1j,15N;prBtüânel'lCol-3 2ü-dione précipitée et on la
<Desc/Clms Page number 9>
EMI9.1
reorietalliee à partir d'ester acétique, Amax 258 V1' Bï 53 # d) On dissout 6,5 g de 6,.6-diméihyl-$r9i.lj,l-rgnatr.ns io3..-,t-.d.ons dans 250 om3 de dioxane et 27,2 ct43 d'eau et on y ajoute 4,4.5 g de N-bromosucoinimide à 9893% et 1#75 ça? d'acide perchlorique à 70%.
Lorsque la réaction est termina on verse le mélange de réaction dans de l'eau, on sépare avec succion le précipite, on le lave à l'eau et on le sedhe La
EMI9.2
9C-broao-6 ,16-dimthy.-4,15-prgnad.èna-ï1*â.fi-diol-,ti= dioné brute obtenue est soumise à la réaction ultérieure sans autre purification.
EMI9.3
0) On chauffe à reflux pendant 2 heures 9,8 g de 9ôf-brorao¯ 5#,i6d.mthyâ.-4,15-prgnad3ne-ll,l?Ct. dio.-,2ldiane brute avec 20 g d'acétate de potassium dans 550 om3 4#éthanol absolu. Puis on dilue le mélange avec de l'eau et on extrait a fond,avec du chloroforme. On lave les extraits oh3.octor.cte$ avec de l'eau, on les sèche et on les concentre par évaporatioa La 9/3 1 11/3 -oxydo-6 Ci , l6¯diméthyl-4 , 15-présnadiène-17 fl(*ol- 3,20-diono cristallise à partir de méthanol. m 23a m.a 480. f) Dans 30To!n3 de méthanol contenant 0,6 g de chlorure .de cel- crum anhydre, on met en suspension 6 g de 6L,16d.3.mthr1--, ll-.oxydo-4,15-prégnadi6ne-17-ol-3,20-dione et on y ajoute 3 g d'oxyde de calcium.
En l'espace de30 minutes on ajoute goutte à goutte tout en agitant une solution de 9 g d'iode dans
EMI9.4
30 em3 de méthanolg qui contient également 0,6 g de chlorure de calcium anhydre, la température étant maintenue à 228''t. On agite pendant 30 minutes de plus, on refroidit à 0 C et on ver- se le mélange dans un mélange de 150 cm3 d'eau glacée et de
EMI9.5
4(5 ,om3 d'acide acétique glacial* On sépare avec succion l'io- dure précipité* on le lave à l'eau et on le sèche à 50 C
EMI9.6
On dissout le produit obtenu à 4000 dans 100 ont? d'acétone
<Desc/Clms Page number 10>
EMI10.1
ui contient 1 OM3 d'eau, 0,5 em3 d'acide acétique glacial et 20 g dfacétate de potassium,
on chauffe pendant 2 heures à re- flux oi on introduit le tout dans 1,5 litres d'eau glacée tout en agitant. On filtre avec"succion et on lave avec 200 om3 4'oau."On dissout à chaud le produit humide dans 120 em3 de
EMI10.2
méthanl et, après addition d'une solution de 3,1 g de pyroeul-
EMI10.3
fite de sodium dans 45 om3 -d'eau, on fait Bouillir a reflux pen- dant 2' heures. Puis on chasse par distillation 35 om3# après quoi 10 composé 21-acétoxyé se sépare par cristallisation.
Aprï'a séparation par filtration et séchage on récupère le 81'- acétatb de 601,16-ciiméthyi-,9p9llj9-oxydo-4#15-prégnadiène- 17C,2.-diol-3,2-diane pu%-par recristallïsation à partir d'ester acétique. #aX 243- nyu, E 430. g) On; dissout 5,45 g de 21*acétate de 601-dimkthyl-9%,,. oacydo-.,1-prkgnadina-1?p,21-diol-3,20-dions dans 55 om3 de chloroforme absolu et on l'ajoute à -40*0 & 32 cm3 d'un mélange de 52 |a3 de tétrahydrofurohev 20 em3 de chloroforme et 32 om3
EMI10.4
d'acide fluorhydrique. On laisse reposer la solution de réac-
EMI10.5
tion pendant 6 heures à -20'C puis on la verse dans une solu-
EMI10.6
tion de bicarbonate de sodium.
EMI10.7
On extrait le 21-acétate de 60(,16-diméthyl-90(-fluoro- 4915-prépnadiène-llt3,17 .#l-triol-5,20-dione précipité avec du chloroforme. On lave les'extraits Jusqu'à neutralité, on les aeche et'on les concentre par évaporation;'on recristallîse le
EMI10.8
r résidu'ainsi obtenu à partir de méthanol*
EMI10.9
aax 9.5 m/u, El 403" .
1)' On dissout à chaud 1,0 g de 21-acétate de Q,16-diméthy..
1 -fli,loro-4915-prégnadièno"lli.,fAj ,l?0,21-tx'.ol-3,20-dions dans 25 cz3,de méthanol. On chauffe à l'ébullition cette solution après addition de 0,36 g de"bicarbonate de sodium dans 5 em3 d'eau pendant 10 minutes, puis on la verse dans environ 300 cri3.
EMI10.10
d'eau. le produit de saponification brut eat séparé avec succion
<Desc/Clms Page number 11>
EMI11.1
et reeristallise à partir d'un mélange de chloroforme et de méthanol. la 6#,l6-diméthyl-9C¯fluoro-4 15-prégnadiène-liyS 3'7i,2..trio..3,2fi.-dione pure ainsi obtenue présente un maxi== en m à 239 MPI El 9' 425.
i) Un fermentateur de 10 litres contenant une solution nutri-' tive à 0,1% de Basamin Bush, tamponnée avec le tampon phosphate
EMI11.2
de Sorensen à un pH de 6,8, est inocule avec 500 cm3 d'une culture agitée de Corynebacterium simplex. lia culture est dev&"' loppée à 2800* Après 16 heures on ajoute à la solution de fer- mentation 5 g de 9t-i'3uoro-&0,7.&-dimëGhylw,ï5-prégns,di i3.,.'t3,'.-tr.o-3,2i-dions dans 200 cm3 de méthanol*, Par, oliromatographie en couche mince on ne décelé après 14 hxt. res de matière première à cote du produit de conversion. On- extrait la solution de culture trois fome par agitation, avec chaque fois 10 litres de chloroforme.
On concentre les extraits réunis et on recristallise le résidu à partir d'ester acétique.
EMI11.3
On obtient la 9 t51'-luoro-6 , 3.6-dimétby..1,4,15prégnatrize.
,.%,7,21-tria.-,ü-dione pure. m 23J m El % 410.
... 1... a) Un fermentateur dgoissai de 10 litres contenant une solution nutritive à 3% d'extrait de malt, 0,59 de glucose et 0,3 de peptone de caséine est inocula avec 500 cm3 d'une suspension de spores de Curvularia lunata. Le champignon se développe en aérant fortement et en agitant à 28 C et on y ajoute après 24
EMI11.4
heures 5 g de É,,6-.ditndthyl-,15-prgnadièneI7X-o.3,g- dione dans 200 cm3 de méthanol. On contrôle la conversion par chromatographie en couche mince. Apres 30 heures on ne décèle plus la matière .première.
On extrait trois fois la culture avec chaque fois 10 litres de chloroforme. On concentre les extraite
EMI11.5
réunis et on les fait passer sur une petite colonxrs de eilioa" gel active. Apres recristallisation à partir d'acétone, on ob-
<Desc/Clms Page number 12>
EMI12.1
tient la 6,1-ditéthyz-4,15-prégnadiéna-.1,1?t'-diol3p20- dione pure. "max 242 M/ui Êl % z32..
b) Dans un petit fcrmentaeur on inocule 12 litres d'une solu- tion nutritive à 1% d'extrait de levure (pH 6,8) avec 0,5 litre de culture agitée de Bacillus sphaericus. La culture se déve-
EMI12.2
loppe à 28'C eoust fort aérage et en agitant, et elle reçoit - après 9 heures une addition de 6 g de 6 16-diméthyl-4el5- pr;nadiéne-11,1? (x-dicl s2-dion$ da.ns 200 cm3 de méthanol.
On contrôle la déshydrogént10n par ehroaategraphie en couche mince et elle est terminée 'après 25 à 30 heures. Le bouillon de -fermentation est extrait trois fois par agitation avec chaque fois .12 litres de chloroforme. On concentre par évaporation les extraits réunis, on fait digérer le résidu avec de l'éther de pétrole et on le recristallise à partir dacétone. On obtient
EMI12.3
la ,36-diméthy.-1,4,15-prérnatrié e-11,1?(-diol,2C-- ;! 41op pure. Araax 243 mu, El om 405.
, 1 o) 1 une suspension de 6,5 g de 6,16-di,méthyl1,4e.5-pr.a- tri,èa-11,1?Of.-diol-3,20-dione dans 98 om3 de tétrabydrofura- ne et 59 cm3 de méthanol on avouée par portions en 3 heures 9,8 g d'iode et 9,8 g d'oxyde de calcium. Ensuite on verse le mélange de réaction dans 2 litres d'eau glacée qui contient 32 cm3 d'acide acétique glacial, on sépare le précipité avec suc- cion et on le sèche.
Les 11 g ainsi obtenue de 21-iodure brut sont dissous dans
550 cm3 d'acétone et on les fait bouillir aveo 33 g d'acétate de potassium pendant 20 heures à reflux. Ensuite on chasse l'acétone sous pression réduite et on dilue le mélange avec de ; l'eau. On sépare avec succion le précipité et on le fait bouil- lir à reflux pendant 2 heures, alors qu'il est encore humide, dans un mélange de 130 cm3 de méthanol, 3,2% g de pyrdsulfite
EMI12.4
de nédîum et 48,5 om3 d'eau. Après refroidissement on dilue le mélange de réaction avec de l'eau, on sépara avec succion le
<Desc/Clms Page number 13>
précipité obtenu et on le sèche.
Par recristallisation à par- tir d'un mélange acétone/éther on obtient le 21-acétate de
EMI13.1
6,16-d.méthy.-.,,15-prgnatrine-ll,l70(,21-triol-3,20- dione. Max 241 mpt 3P*3?* 255-257*0, (0()D + 32* (chloroforme). d) 'On dissout 2 g de 6O(,l6-<diméthyl-l,4,15*-prégnatriène ll$ .?.tr.oir 2E3-dions dans 10 om3 de pyridine et oit y ajoute 0,36 g d'anhydride acétique.
Après repos de 15 heures à la température ordinaire, on verse le mélange de réaction dans de l'eau, on l'extrait trois fois avec du chloroforme, ou neutrra-
EMI13.2
lise la solution chloroforaique par agitation avec une solution de b4oarbonate de sodium, on sèche et on concentre p évapora- tien, sous vide Le résidu amorphe de 21-acétate de â0,1daa.- thy,ir,.-prégnatriéne11,1?0(,2,tx,ol-,20-dionA est dissous dans 70 cm3 d'acétone et ony ajoute goutte à goutte 10 C tout en agitant 1,5 cm3 d'une solution oxydante la solu- tion oxydante est préparée par dissolution de 5 g de rioxyde de chrome dans 4,4 cm3 d'acide sulfurique concentré et on com- plète à 20 cm3 avec de l'eau).
On agite le nélange de réaction pendant 30 minutes à la température ordinaire et on traite avec le chloroforme et l'eau comme à l'ordinaire. La solution chloro- formique lavée à neutralité et séchée est portée à sieité sous pression réduite. On obtient à partir de méthanol le al-acétage
EMI13.3
de 6,.-dimthyl.,4,15-prnatriè2e1?C7,21-d.o1-;11r2C trione. . max4Q nyu, 9 El % 367, ?.Y. 244-246 C (c()b + 112* (chloroforme).
Exemple 3. a) On dissout 4,6 g de 6 pj,l-.diméthyl-4,15-prégnadinew3?tJ- 01-' ,20-diode dans un mélange de 10 cm3 de tétrabydrorurane et de 12 cm3 de méthanol et on ajoute à 0 C tout en agitant 7,3 g d'iode. En l'espace d'une heure on ajoute goutte à goutte une solution aqueuse à 10% d'hydroxyde de sodium, jusqu'à ce que la couleur de l'iode ait disparu. Après une heure de plut on verse
<Desc/Clms Page number 14>
le mélange de réaction dans de l'eau, on reprend le précipite résineux dans de l'éther, on lava les extraits étherés réunis avec de l'eau, on les sèche sur du sulfate de sodium et on les
EMI14.1
concentre à siccité à la température ordinaire sous vide. Le composé 21-iodé brut est chauffé à reflux pendant 24 heures dans 300 cm3 d'acétone avec 13,5 g d'acétate de potassium an- hydre.
On concentre ensuite par évaporatiôn la solution de réaction à un petit volume et on y ajoute de l'eau. Le 21-acé-
EMI14.2
tate de 6p1,1G-dimdthyl-4,15-préBnadiène-tl,Cl-d.o3.-3r0 diono précipité est séparé- avec succion et recristallisé à par- tir d'acétone ou de méthanol.
EMI14.3
Amax 240 mu, 9 E1 ém *12' *#*# 226-228000 (0<)p + 40, 7" (chloroforme). b) Dans un petit fermentateur on inocule 15 litres d'une solu- tion nutritive à 5 d'extrait de malt, 1% de saccharose, 0,2%
EMI14.4
de nitrate de sodium, 0,1%,de phosphate dipotaeoiquet bzz de sulfate de magnésium, 0,05% de chlorure de potassium et 0,005% de sulfate de fer(II) (pH réglé à 7,0) avec 800 cm3 d'une cul- ture agitée de Curvularia lunata (Wakker) Boadijn et on fait 'fermenter tout en agitant et en aérant fortement à 28'Ce Apres
EMI14.5
croissance pendant 24 heures, on ajoute 5 g de BfI,l6-dimth.yl- 4e.5-prgnadine-ifiCE,I-diol-3,
20-dioua ou de son 21-acétate dans 40 cm3 de diméthylfor#anide. On contrôle la réaction par chromatographie sur papier.- Lorsque dans le ehromatogramme sur papier on ne naît plus décaler la matière première, on extrait la solution de culture trois fois avec le même volune de chloro- forme. On concentre les solutions chloroformiques réunies par vaporation et on chromatographie le résidu sur silica gel.
L'éluat obtenu avec un mélange chloroforme-ester acétique (1:3)
EMI14.6
contient la 60(,16-diéthyr-4,1.5-prégnadïnellf,l?G1,1-triol- 3,20-dione désirée, que l'on recristalli6 à partir d'un mélan- ge acétone/éther.
<Desc/Clms Page number 15>
EMI15.1
Anax 241 V1' Sî Sm 412, P.P. 238-24000t (0(),) + q,5s(éthtno.j o) On fait bouillir à reflux pendant 10 heures 10 g de 21- acétate de 60,l6-diméthyl-4,15-pregnadiene-ll/3,170,21-triol* 3"20"dîone dans 300 em3 d'acétate d'éthyle et 3tut em3 d'acide acétique avec 7 g de chloranile. On refroidit le mélange de
EMI15.2
réaction, on le verse dans de l'eau et on l'extrait avec du chloroforme.
On lave l'extrait d'abord avec de l'eau, puis avec une solution de bicarbonate de sodium, jusqu'à ce que tout l'acide acétique soit éliminé, puis de nouveau à l'eau et en'*
EMI15.3
suite on agite avec 225 cm3 de NaOH à 1%, on lave de nouveau
EMI15.4
à le¯eau et on sèche sur du sulfate de sodium. Après concentra-
EMI15.5
tison, le 21-acdtate de 6,l6-dimëthyl-4-,6,l5-prëgnatri&ne-'ll/, 1T!,l..tr.oï-3,2a-dions cristallise à partir d'ester acétique* Âmax 288 M/Ut B bzz', P.P. 201-202'C, it''7D + 111' .
EMI15.6
(dioxane).
EMI15.7
Par une saponification usuelle on cbtient la ,16-dimétY,r.
4,6,.5-prénatrine-.3.3. ,lT4f.2-triol-3,0-dione. i'*F. 235-23900# (0()D + 68* (dïoxane)t X max 288 A Ei m 630.' dl) Dans un petit fermeK.tateur on inocule 15 litres d'une solu- tion nutritive à 1% d'extrait de levure, pK 6, 8, avec bzz litr* d'une culture agitée de Baoillus sphaericus. La'culture se* développe tou en agitant constamment et en aérant fortement à 2800 et on y fait après environ 10 minutes une addition de 7jr$ g de 1-aoetate de 6 #l.d.utétï,y..., 6,15-pr8natrièue-13y.17 II r tciô3-3'Wdioie dissous dans 300 cm3 de Méthanol* On suit la . dëshydrogénation par chromatographie sur papier et-elle en't complète après 23 à 36 heures. On extrait la solution de etiltu- re trois fois ev-ge le môme volume de chloroforme et on conconi- tre les solutions dhloroformiques réunies par évaporation .
A partie d'aoétonei la ,16 .diwéth,yl-1,4rr15-prêgnutétrans 11/9,17,21-.trlol.3,20'.dione cristallise.
<Desc/Clms Page number 16>
EMI16.1
'22je 254t 304 "/*# El 402, 260, 332, P.F. 251-253*09 <:0|) t(dioxane).
112 <? fait bouilli---*à reflux pendant 20 heures 5 g de 21-aoé- ae de Qt,l6-dimthtl°,,,5-pr;natrine-.1,1T,21-trio.- s0d.oa avec 4,8 g de 203-dichloro-5#6-dieyanQ-p-benzoquno- aedàna 5 om3 de dioxane. Ensuite on dilue le mélange de réac- t3n'awe du chloroforme, on. extrait par agitation successive- meît ae 'd6 l'eau, une solution diluée d'hydroxyde de sodium <3t-|ae weau avec de l'eau,' on sèche la solution chlroformi- qup et o .a concentre. A partir du résidu cristallise le 2l- acf taie'iie 6,.6-d.m&thy3.-.f,&,15-prdfnat°traéne..1,1TG r2.- trol3 t-dione, que l'on purifie par recristallisation à par- tir < 4 thanole % Max 227, 254,, 304 " u 9 31 1 m 370, 240, 307.
0), On 41seout 5,8 g de 21-acétate de 60t,16-diméthy. 1,4,6,15- prégn.ttraéne-11,1TG1,2triol-3,24-dione dane 160 om3 de m4tato 4t, après addition d'une solution chaude de 1,28 g de b* ,r04aie de sodium dans 19 om3 d'eau, on fait bouillir à re- t pendant 14 minutes. On incorpore tout en agitant le mélan- eÉ$r.eridi dans 900 cm3 d'eau à laquelle on a ajouté 3 om3 acie?aétique glacial et on extrait avec du chloroforme. On 1. e iel extraite ohloroformiquea réunis avec de l'eau et on
EMI16.2
les concentre sous pression' réduite.
On reoristallise le résidu
EMI16.3
'partie $e méthanol, et l'on obtient ainsi la 6,16..diutéthy.- ,6,1-rdgnattraène-.1,1TQ,2.-triah,2Udions in cria- ux inoorea. max 227, 254, 304 nyu, El â 402, 260, 3321 3?Jf. 25.-253"0; (OiD 12 (dioxane). t 1 s) On àisout 3 g de 21-acétate de 6(,ls-diméthy3.-4,r-prég..
EMI16.4
dans 90 om3 de dioxane
EMI16.5
e on fait bouillir avec 2 il g de chlorahile pendant 7 heures xQlux.x On verse après refroidissement la solution brun clair
EMI16.6
dans de 1 eau, on extrait par agitation avec du chloroforme et
<Desc/Clms Page number 17>
EMI17.1
on lave l'extrait ohloroformique d'abord avec de l'eau, ensuite
EMI17.2
avec j!10 ont3 de soude caustique n/10 et finalement de nouveau
EMI17.3
avec,de l'eau, on sèche sur du sulfate de sodium et on distille*
EMI17.4
le Si-acétate de 6,l6-diméthyl-4,6,15'-prégnatriënell/3,17,
EMI17.5
21-triol-3,20-dione cristallise à partir de méthanol.
EMI17.6
XmaJP287 5 Eî cm â60i P.P. 200-201*0, (00 -t. iioe (dioxane).
b) On dissout 2,5 g de 21-acétate de o0(,l6-diméthyl-4,6,15- prénn,triène-11,17C,21-triol-3,20-dione dans 300 emb de pyridine, on y ajoute 4925 em3 de chlorure de thionyle et on chauffe pendant 30 minutes à 100 C. On verse alors le ï4élartg*
EMI17.7
de réaction dans de l'eau, on sépare avec succion le précipite,
EMI17.8
on le lave et le sèche. le 21-acétate de &,16-diaitkr..4,, ' (ll),5-'prégnatetraene-170,21-diol-3,20-dione obtenu 'est re- cristallisé à partir d'ester acétique. max 283 bai.
EMI17.9
c) Comme à l'exemple 1 d), on prépare à partir du 21-acétate '
EMI17.10
de 6,1-diméthyi-4.16r i),.5-prédnatétraène-17r21-diol-3r20 dione le 21-acétate de 6#16-diméthyl-90(-bromo-4p6o9(ll)9l5- prégnb,tétrane-11,17t,21-triol-3,20-dione, que l'on conver- tit par traitement avec de l'acétate de potassium comme à l'ex- emple.'1 e) en le 21-acétate de 6916-diméthyl-9 tllp¯*Qxydo- 4t6,15-prégnatriène-17Cf|21-diol-3t20-dione, . 2a m/u.
15-prégnatriène-17 121-diol-3,2 z9' d) On dissout 2,42 g de 21-acétate de 6,16.-c,m,éthyi9,11- oxydô-4,6,1-prdnatriène-l'p(,21-dio.-3,20d.one dana 25 cm3 de chloroforme absolu et on l'ajoute à -50*0 à 14,5 cm3 d'un mélange de 27 cm3 de tétrahydrofurane, 8,7 om3 de chloroforme et 145 g d'acide fluorhydrique. On laisse reposer la solution de réaction pendant 8 heures à 040 puis on la verse dans une
EMI17.11
solution de bicarbonate de sodium* On extrait le stérolde avec
EMI17.12
du chloroforme, on sèche la solution chloroformique et on la concentre par évaporation. Le résidu consiste en 21-acétate de 6#16"dimdthyl-90(-fluoro-496915-prégnatriéne-1-à"'#17 #21-triol.
3t20'*dione$ que l'on purifie par recristallisation à partir
<Desc/Clms Page number 18>
EMI18.1
dliagd 0406 Max 85 mju e) Dn un petit formentattur on inocule 15 litres d'une solu- tion nutritive a 1% d'extrait de levure, pH 6,8, avec 0,5 litre &d'une?culture agitée de Buoi-Ilue aphaerious. La culture se dé- woloppe tout en agitant constamment et en aérant fortement à 26*6 ftgelle reçoit après environ 10 heures une addition de 7,5 Sf4 9-fluoro-6,l6-diméthyl-4,6,15-prégnatriène-ll, tlrtriol-3,20-dionel dissoute dans 300 em3 de méthanol* On su|t la déshydrogénation par chromatographie sur papier et esl3e a terminée après 28 a 36 heures.
On extrait la solution
EMI18.2
de culture trois fois avec le même volume de chloroforme, puis
EMI18.3
.on concentre les solutions chloroformiques réunies par évapora- tien* 9p-tluoro-b,7.6-dimétl,yl-1t,6,15-pré8'natétraène-13, =1? a,l-triol-3,20-dione orfutalliae à partir d'acétone.
>exemple,, 5 On dic.sout 5 g de 6 16-diméthyl-1,4,.5-prdgnatriéne lli,q,.?,,21-triol-3,20-dion dans 120 cm3 de dioxane absolu, on y ajoute 1,55 em3.de chlorure de ohloradétyle et 1,5 om3 de pyridine et an laisse reposer pendant une auit à la température
EMI18.4
ordinaire. On verse ensuite le mélange de réaction dans de
EMI18.5
lleau. on sépare avec succion le précipitée on le lave à l'eau et on, hr s-Lche. Le 21-chlora'cétate de 60,3G-dimthyl-1,,15- ,prd,,-,n4t,yiène-11 9170(921-triol-3#20-dione 'brut ainsi obtenu
EMI18.6
est dissous dans 400 om3 d'acétone et on laisse reposer avec
EMI18.7
55 emb de diéthylamine et 4 cm3 d'eau pendant une nuit à la
EMI18.8
température ordinaire. On concentre le mélange de réaction sous
EMI18.9
vide à 20'C.
Il y a cristallisation ainsi du 21-diéthylamino- Métate de 6E,16-dimthyl.,,4,15-prénatrine ll,l?,Zl-
EMI18.10
EMI18.11
triol;-3t,20-dione, m 242 'S M/ut E1 cm 400.
On? dissout 0,7 g de codîéthylaminoucétate dans 17 cm3 de tétrahydrofurane absolu et on y ajoute 15 dm3 de chloroforme sature 'd'acide chlorhydrioueo Il y a ainsi précipitation du .
<Desc/Clms Page number 19>
EMI19.1
chlorhydrate de SldIéthlamiMaoëtate de 6(,16-diméthyx. l,4tl5-prégnatriene-ll/3,170t21-'triol-3t20-dione, qu'on t*vt avec du tétrahydrofurane et qu'on sèche ensuite, Exemple 6. @
On laisse reposer en enceinte fermée pendant 10 jours 10 g
EMI19.2
de 6l,1,i6-d3cnéthyl-1,4,6,15-Irdnatétrans-3ï,I?t,21 triol..
3,20-dione dans 20 cm3 de pyridine absolueavec 9<3 g de ch. rure de phoophoryl-dîmorpholidee On verse le mélange de ru'ac- tion dans la quantité calculée d'acide sulfurique dilué et ett extrait le 21-dimorpholie-phosphate avec du chloroforme.
On dissout le résidu chloroformique dans 40 em3 d'éth=ol ' on y ajoute de l'eau jusqu'à premier trouble permanent, cuis en agite durant 36 heures après addition de 110 g d'une résine d'échange de cations aulfonique. On sépare par filtration, on lave l'éohangeur avec de l'éthanol, on neutralise le filtrat avec de l'hydroxyde de sodium et on concentra fortement sous pression réduite.
Après refroidissement on extrait avec du
EMI19.3
chloroforme; on acidifie la phase aqueue.) avec cte 1'acide aul- furique dilué et on extrait avec du n-butanol. On sèche l'ex- trait avec du sulfate de sodium, on neutralise avec du méthyla- te de sodium et on concentre. Lors du refroidissement le sel sodique se sépare par cristallisation. On le sépare par filtra-
EMI19.4
tion, on l'extrait à chaud avec du méthanolt on ajoute à l'ex" trait du butanol et on concentre fortement, et ainsi le 21-* orthophosphate sodique pur de 6,l6-diméthyl-l,4t6,15"P!*CM' tétrana-11,1?t721-triol-3,0-diona précipite.
Exemple 7 On dissout C,5 g de Oi-luoro.6Ct,16-étimcthyl-.1,,15- . piénatri.ène-il.f,.7p(,2.-trial-,20-dione dans 10 cm3 de 0 .hlb-. rdforme absolu et 3 cm3 de pyridine absolue et on y ajoute 0 C eh l'espace de 5 minutes, tout en agitant, une solution de
EMI19.5
0;5 om3 de chlorure de tert.-butyiacétyle dans 5 em3 de chloro-
<Desc/Clms Page number 20>
forme. On agite encore pendant 5 minutestout en refroidissant à la glace, puis pendant 4 Heures à la température ordinaire On verse le mélange de réaction sur de la glace et on l'extrait avec du chloroforme, On lave l'extrait avec de l'acide sulfuri- que dilué et une solution de bicarbonate e sodium, on sèche et on concentre par évaporation.
On filtre le résidu dans du chloroforme sur 10 g de Plorieil et on porte à siccité par
EMI20.1
évaporation. Le 21-terto-butyl-aoétate pur cristallise à partir de méthanol.
REVENDICATIONS.
EMI20.2
1.- 6#16-diméthyl-15-déshedro-etéroldes de formule générale :
EMI20.3
EMI20.4
ainsi que leurs dérives 2!, QS et ÀCbl,6, dans laquelle t R" Q-H, -OH ou 0 X=X H ou F y = groupe hydrcxyle libre ou estérifiée
EMI20.5
8. - 6 O( 1 16-iUraé thyl-lg-déahydro-hydrooortleone 3.- 6 O,i6-diméthyl-15-déehydro-prddniaoï.oxa.
4.- 6 i,16-dlméthyl-15-déahydro-pred.i.eone, 5.- 6<3(,:f-diméthyl-90-3.aoro-15-déehydro-predniao,ote.
6 . 6,16-dicéthyZ-6,15-biadéhy dra-hytErtcortisona 7e- 6,16-diméthy7.-6,..biadéanydxo- pradh.eolon. ee- 6,16diméthy.-6,1-biadéshydro-xed,eane.
9.- 6,16-dlméth3.-g0.luoro-6,15-b.adëahydra-pgd,ni.solona.
<Desc/Clms Page number 21>
10- Procède de préparation de 6,16-diméthyl-15-déshydro- stéroïdes de formule 1:
EMI21.1
en2y dans laquelle 00' OR R O(-H,/9-0H ou -0 ;, f S.SLk.I X E ou y .L.JL-J! ï groupe hydroxyle librli ou x eatérifié 0H3 ainsi que leurs dérivés #1, #6 et #1,6 caractérisé en ce que dans un 6,16-diméthyl-15-déshydro-stérolide de formule 11
EMI21.2
?!12Yl dans laquelle 00' dans laquelle R1 CE3 X a n ou r -1Ri - Y, m H ou un groupe hydroxyle 1 libre ou l)atérif1é 0 il R1 - HOHI, H,OH ou .0 &3 on introduit par traitement avec des agents déshydrogéhants en position 1 et/ou 6 une ou deux doubles liaisons et, lorsque F1 représente de l'hydrogène,
on introduit par traitement avec un microcorganisme 11-hydroxylant un groupe 11-hydroxyle et, lors- que Yi est de l'hydrogène, on introduit par traitement succès- sif aveo une solution d'iode alcaline et un acylate alcalin un groupe 21-ester ainsi qu'éventuellement, lorsque X représente de l'hydrogène, on introduit par scission du 9ss,11ss-époxyde correspondent avec de l'acide fluorhydrique un atome de fluor en 9Ó et convertit éventuellement un 11-hydroxy-stéromde ainsi obtenu, par traitement avec un agent oxydant doux, en le 11- céo-stéroïde correspondant, et en ce qu'éventuellement on esté- rifie un groupe 21-hydroxyle ou saponifie un groupe 21-ester..
@