JPH0331179B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明はカワラタケ属に属する担子菌由来の蛋
白多糖体を主成分とする抗血栓症剤に係り、詳し
くはクレスチンよりなる抗血栓症剤に関する。該
クレスチンは、抗腫瘍剤として既に社会に提供さ
れており、極めて低毒性で、且つ腸内菌叢攪乱な
どの心配がなく、長期投与が可能である。また、
変異原性やアレルギー反応などにも影響を与え
ず、したがつて、健康な人に対する催奇形成や、
アレルギー反応の危険もなく、極めて安全な物質
である。 近年、生活様式や食生活の変化などの原因で血
栓症の頻度はわが国でも増加の傾向がみられ、ま
た脳梗塞や心筋梗塞、さらに腎炎に至るまで病態
の進転因子としての血栓形成が問題とされ、それ
に対する対策が求められている。 抗血栓療法としては、抗凝固療法、血栓溶解療
法および抗血小板療法が行なわれている。抗凝固
療法剤としてはヘパリンやワーフアリンが、血栓
溶解剤としてはウロキナーゼなどが用いられ、一
部の血栓症に対して効果をあげている。これら薬
剤は二次的血栓形成において凝固防止や血栓の溶
解に有効であるが、血小板凝集によりひきおこさ
れる一次的血栓にはほとんど無効である。心筋梗
塞や脳血栓症などの動脈血栓症の大部分は、血小
板凝集によりひきおこされる一次的血栓であり、
近年、これに対する治療が重要視されるようにな
つてきた。抗血小板療法剤としてはチクロピジン
やアスピリンなどが用いられているが、肝障害や
出血などの副作用があり、安全に長期間投与する
のに問題があつた。 本発明者等は、本発明の前記蛋白多糖体が抗腫
瘍効果に加えて抗血栓作用の薬理効果をも有して
いることを知見し、本発明に至つたものである。 本発明抗血栓症剤の活性成分である蛋白多糖体
は、例えば特公昭46−17149号公報，特公昭51−
36322号公報，特公昭56−14274号公報，特公昭56
−14276号公報，特公昭56−39288号公報などに記
載されている公知の物質であり、カワラタケ属に
属する担子菌を培養して得られる菌糸体、培養物
（Broth）又は子実体の熱水又はアルカリ性水溶
液による抽出物であつて、約18〜38％の蛋白質を
含み、5000〜300000（超遠心分離測定法）の分子
量を有するものである。本発明の蛋白多糖体のう
ち、カワラタケ菌糸体［FERM−P2412
（ATCC20547）］由来の蛋白多糖体は、前記した
とおり、クレスチンという商品名で市販されてい
るものであり（最近の新薬第28集14〜16ページ，
1977年及び第29集96〜101ページ，1978年、医薬
品要覧第1346ページ，昭和54年５月第６版，薬業
時報社発行、医療薬日本医薬品集第７版第240ペ
ージ，1983年，薬業時報社発行）、PS−Ｋとも呼
称されているものであつて、その性状の一端を示
せば次のとおりである。 主要画分の糖部分はβ−Ｄ−グルカンで、この
グルカン部分の構造は１→３，１→４および１→
６結合を含む分枝構造であり、蛋白質の構成アミ
ノ酸は、アスパラギン酸，グルタミン酸等の酸性
アミノ酸とバリン，ロイシン等の中性アミノ酸が
多く、リジン，アルギニン等の塩基性アミノ酸は
少ない。水に可溶で、メタノール，ピリジン，ク
ロロホルム，ベンゼン，ヘキサンには殆んど溶け
ない。約120℃から徐々に分解する。 本発明の蛋白多糖体は、その毒性が極めて低く
且つ副作用も殆んど生起しないなど、生体に対し
て非常に安全な物質であると知られている。本発
明の蛋白多糖体の急性毒性値を下記表−１に示
す。

【表】

【表】 なお、上掲表−１に示される急性毒性値は、下
記試験法により調べたものである。 マウスはICR−JCL系、４〜５週令、体重21〜
24ｇのものを、ラツトは呑竜系、４〜５週令、体
重100〜150ｇのものを用いた。本発明蛋白多糖体
の投与経路は、静脈内、皮下、腹腔内および経口
の四経路の投与を実施した。本発明の蛋白多糖体
を生理食塩水に溶解して投与し、７日間にわた
り、一般症状、死亡ならびに体重について観察
し、観察期間終了後に屠殺剖検した。 表−１に示されるように、ラツト、マウスとも
投与可能な最大投与量においてもまつたく死亡例
は認められず、LD₅₀値の算定が事実上不可能な
程に、本発明の蛋白多糖体は生体に対して極めて
安全である。 次に本発明の蛋白多糖体の抗血栓作用について
説明する。 血小板凝集抑制作用 動脈硬化や血管内皮の損傷により、内皮下のコ
ラーゲンなどが血流にされされると、そこに血小
板の粘着、次いで凝集が生ずる。コラーゲンによ
る凝集は血小板のdense bodyからアデノシンジ
ホスフエート（ADP）やセロトニンなどの放出
を起こす。ADPは強力な血小板凝集作用を有し、
非可逆的な二次凝集をひきおこす。 本発明物質は血小板の凝集を抑制する作用がみ
られた（実施例１参照）。 血栓塞栓死抑制作用 マウスに血小板凝集物質ADPまたは可溶性コ
ラーゲンを静脈内投与すると、血流中で血小板が
凝集し、毛細血管がつまり、最終的に肺塞栓をお
こして５分以内に死亡する。 本発明の活性物質を血小板凝集物質の注射前に
投与すると、血栓塞栓死防御効果がみられた（実
施例２参照）。 すなわち、本発明の蛋白多糖体は急性毒性も極
めて低く、安全な医薬品であり、血小板凝集抑制
作用や血栓塞栓死抑制作用を示すことより抗血栓
症剤として有用である。 本発明の蛋白多糖体は、抗血栓症剤として用い
る場合、任意の剤型にすることができる。又、投
与も各経路で行なわれる。また、従来の抗血栓症
剤と併用することにより、その効果の増強が期待
される。 経口投与の場合には、それに適用される錠剤、
顆粒剤、散剤、カプセル剤などは、それらの組成
物中に製剤上一般に使用される結合剤、包含剤、
賦形剤、潤滑剤、崩壊剤、湿潤剤のような添加物
を含有していてもよく、又経口用液体製剤として
用いる場合は、内用水剤、振とう合剤、懸濁液
剤、乳剤、シロツプ剤の形態であつてもよく、又
使用する前に再溶解させる乾燥生成物の形態であ
つてもよい。さらに、このような液体製剤は普通
用いられる添加剤、保存剤のいずれを含有しても
よい。注射用の場合には、その組成物は安定剤、
緩衝剤、保存剤、等張化剤などの添加剤を含んで
いてもよく、単位投与量アンプル、又は多投与量
容器中で提供される。なお、上記組成物は水溶
液、懸濁液、溶液、油性または水性ビヒクル中の
乳液のような形態であつてもよく、一方活性成分
は使用する前に適当なビヒクルたとえば発熱物質
不含の滅菌した水で再溶解させる粉末であつても
よい。 本発明の抗血栓症剤は人間及び動物に経口的ま
たは非経口的に投与されるが経口投与が好まし
い。経口的投与は舌下投与を包含する。非経口的
投与は注射、例えば皮下、筋肉、静脈注射、点滴
などを含む。 本発明の抗血栓症剤の投与量は動物か人間によ
り、また年齢、個人差、病状などに影響されるの
で、場合によつては下記範囲外の量を投与する場
合も生ずるが、一般に人間を対象とする場合、本
発明活性物質の経口投与量は体重１Kg、１日当り
10〜1000mg、好ましくは20〜600mgを１回から３
回に分けて投与する。 実施例 １ クレスチンを用いて血小板凝集抑制試験を行な
つた。抗凝固剤として血沈用テトラート液を用
い、これの１に対して、ヒト静脈血９を採取し
た。これを400×ｇ、６分間遠心分離し、上清を
採取し、ヒトPRP（Platelet Rich Plasma）を調
整した。上清採取後の残渣を、更に700×ｇ、20
分間遠心分離し、上清をPPP（Platelet Poor
Plasma）とした。このPRPの透過率の変化をア
グリコメーター（バイオデータ社製，PAP−３
型）により測定し、血小板凝集の度合を測定し
た。 凝集剤としてアラキドン酸（1.64mM）、コラ
ーゲン（0.26mg／ml）、ADP（50μM）を用い、ク
レスチンを凝集剤添加２分前にPRPに添加した。 その結果、いずれの凝集剤に対してもクレスチ
ンは血小板凝集抑制効果を示した。結果を対照
（クレスチンの代わりに生理的食塩水を添加）の
最大凝集度に対する凝集抑制率で表わし、表−２
に示す。 実施例 ２ クレスチンを用いて、血栓塞栓死に対する抑制
試験を行なつた。 １群10匹のddYマウス（雄性、体重20〜22ｇ）
にクレスチン１ｇ／Kgを経口投与し、３時間後に
ADP400mg／Kg量又は可溶性コラーゲン（Sigma
社）0.21ml／匹量を静脈内投与し、10分後の死亡
率を測定した。対照としてクレスチンの代わりに
蒸溜水を経口投与した。 その結果、表−３に示すようにクレスチンは血
栓塞栓死防止作用を示した。 実施例 ３ 圧力式自動充填機を用い、０号硬カプセルにク
レスチンを330mg充填し、カプセルを作製した。

【表】

【表】

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ カワラタケ属に属する担子菌を培養して得ら
   れる菌糸体又は子実体の熱水又はアルカリ性水溶
   液による抽出物であつて、約18〜38％の蛋白質を
   含み、分子量が5000〜300000（超遠心分離測定法）
   である蛋白多糖体を活性成分とする抗血栓症剤。 ２ 前記蛋白多糖体がカワラタケより得られるも
   のであることを特徴とする特許請求の範囲第１項
   に記載の抗血栓症剤。