JPS5951277B2 - 新規な微生物 - Google Patents
新規な微生物Info
- Publication number
- JPS5951277B2 JPS5951277B2 JP12486679A JP12486679A JPS5951277B2 JP S5951277 B2 JPS5951277 B2 JP S5951277B2 JP 12486679 A JP12486679 A JP 12486679A JP 12486679 A JP12486679 A JP 12486679A JP S5951277 B2 JPS5951277 B2 JP S5951277B2
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- JP
- Japan
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- acid
- arthrobacter
- dihydroxy
- cholate
- keto
- Prior art date
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はアルスロバクタ−属に属する新規な微生物に関
し、詳しくは高濃度コール酸塩を含む培地で生育するア
ルスロバクタ−・エスピーに関する。
し、詳しくは高濃度コール酸塩を含む培地で生育するア
ルスロバクタ−・エスピーに関する。
本発明に係る微生物は以下に述べるとおり新菌種であり
、本発明者らはこれをアルスロバクタ−ＣＡ−３５と命
名する。
、本発明者らはこれをアルスロバクタ−ＣＡ−３５と命
名する。
アルスロバクタ−ＣＡ−３５菌株の採集地及び菌学的性
質を次に示す。
質を次に示す。
■ 採集地
アルスロバクタ−ＣＡ−３５菌株は岡山県倉敷市の土壌
より分離した。
より分離した。
ＩＩ 菌学的性質
アルスロバクタ−ＣＡ−３５菌株の菌学的性質をアルス
ロバクタ−・シンプレックス ＩＡＭ１６６０菌株の菌学的性質と対比して次表に列挙
する。
ロバクタ−・シンプレックス ＩＡＭ１６６０菌株の菌学的性質と対比して次表に列挙
する。
コール酸ナトリウム塩に対する態度
アルスロバクタ−ＣＡ−３５菌株は唯一の炭素源として
コール酸ナトリウム塩を約２０〜５００ｇ月の高濃度で
含む培地で生育可能であり、しかもコール酸ナトリウム
塩を基質として７α−ヒドロキシ−３・１２−ジケト−
５β−コラン酸及び／又はそのナトリウム塩、３α・７
α−ジヒドロキシ−１２−ケト−５β−コラン酸及び／
又はそのナトリウム塩並びに７α・１２α−ジヒドロキ
シ−３−ケト−５β−コラン酸及び／又はそのナトリウ
ム塩を主要な代謝産物として生産することができる。
コール酸ナトリウム塩を約２０〜５００ｇ月の高濃度で
含む培地で生育可能であり、しかもコール酸ナトリウム
塩を基質として７α−ヒドロキシ−３・１２−ジケト−
５β−コラン酸及び／又はそのナトリウム塩、３α・７
α−ジヒドロキシ−１２−ケト−５β−コラン酸及び／
又はそのナトリウム塩並びに７α・１２α−ジヒドロキ
シ−３−ケト−５β−コラン酸及び／又はそのナトリウ
ム塩を主要な代謝産物として生産することができる。
一方、アルスロバクタ−・シンプレックス
ＩＡＭ１６６０菌株は唯一の炭素源としてコール酸ナト
リウム塩を１０ｇハ含む培地で生育困難であ。
リウム塩を１０ｇハ含む培地で生育困難であ。
る。
上記の菌学的性質を有するアルスロバクタ−ＣＡ−３５
菌株の分類学上の位置をバーシーズ・マニュアル・オブ
・デターミネイティブ・バクテリオロシー第７版及び第
８版により検索した。
菌株の分類学上の位置をバーシーズ・マニュアル・オブ
・デターミネイティブ・バクテリオロシー第７版及び第
８版により検索した。
アル。スロバクターＣＡ−３５菌株は特に色素生産性、
糖の資化性及びコール酸ナトリウム塩に対する態度にお
いて明らかにアルスロバクタ−・シンプレックスＩＡＭ
１６６０菌株と異なる。
糖の資化性及びコール酸ナトリウム塩に対する態度にお
いて明らかにアルスロバクタ−・シンプレックスＩＡＭ
１６６０菌株と異なる。
アルスロバクタ−ＣＡ−３５菌株は黄色〜クリーム色の
色素を生産す：るが、アルスロバクタ−属に属する菌で
色素生産菌としてはアルスロバクタ−・オキシダンス、
アルスロバクタ−・オキシダンス及びアルスロバクタ−
・ウレアファシェンスが存在する。
色素を生産す：るが、アルスロバクタ−属に属する菌で
色素生産菌としてはアルスロバクタ−・オキシダンス、
アルスロバクタ−・オキシダンス及びアルスロバクタ−
・ウレアファシェンスが存在する。
しかし、アルスロバクタ−・オキシダンス及びアルスロ
バクター・オキシダンスは通常ダラム染色が陰性である
こと及びテ゛ンプンの加水分解性を有していることより
、本菌のアルスロバク’）−ＣＡ−３５菌株とは異なる
。
バクター・オキシダンスは通常ダラム染色が陰性である
こと及びテ゛ンプンの加水分解性を有していることより
、本菌のアルスロバク’）−ＣＡ−３５菌株とは異なる
。
また、アルスロバクタ−・ウレアファシェンスは通常ダ
ラム染色が陰性であること及び硝酸塩の還元性を有して
いないことより、本菌のアルスロバクタ−ＣＡ−３５菌
株とは異なる。
ラム染色が陰性であること及び硝酸塩の還元性を有して
いないことより、本菌のアルスロバクタ−ＣＡ−３５菌
株とは異なる。
従って、本菌のアルスロバクタ−ＣＡ−３５菌株はアル
スロバクタ−属に属するいずれの標準様の菌とも異なっ
ていることより、アルスロバクタ−属に属する新菌種を
構成する微生物であると判定した。
スロバクタ−属に属するいずれの標準様の菌とも異なっ
ていることより、アルスロバクタ−属に属する新菌種を
構成する微生物であると判定した。
上記した新菌株、アルスロバクタ−ＣＡ−３５（Ａｒｔ
ｈｒｏｂａｃｔｅｒ ＣＡ−３５）菌株は工業技術院微
生物工業技術研究所に菌寄第５１４５号として受託され
た。
ｈｒｏｂａｃｔｅｒ ＣＡ−３５）菌株は工業技術院微
生物工業技術研究所に菌寄第５１４５号として受託され
た。
上記アルスロバクタ−属に属する本発明の微生物は、こ
れをコール酸塩を高濃度で含む栄養培地で培養すること
により、７α−ヒドロキシ−３・１２−ジケト−５β−
コラン酸及び／又はその塩、３α・７α−ジヒドロキシ
−１２−ケト−５β−コラン酸及び／又はその塩並びに
７α・１２α−ジヒドロキシ−３−ケト−５β−コラン
酸及び／又はその塩を代謝生産することができる。
れをコール酸塩を高濃度で含む栄養培地で培養すること
により、７α−ヒドロキシ−３・１２−ジケト−５β−
コラン酸及び／又はその塩、３α・７α−ジヒドロキシ
−１２−ケト−５β−コラン酸及び／又はその塩並びに
７α・１２α−ジヒドロキシ−３−ケト−５β−コラン
酸及び／又はその塩を代謝生産することができる。
コール酸塩は具体的にはコール酸のナトリウム、カリウ
ムなどのアルカリ金属の塩又はカルシウム、マグネシウ
ムなどのアルカリ土類金属の塩であるが、好ましくはコ
ール酸のアルカリ金属塩である。
ムなどのアルカリ金属の塩又はカルシウム、マグネシウ
ムなどのアルカリ土類金属の塩であるが、好ましくはコ
ール酸のアルカリ金属塩である。
コール酸塩はそのまま所定濃度の水溶液に調整してそれ
を基質として用いてもよいし、或いは水に予めコール酸
と塩を形成し得る所定量のアルカリ金属化合物又はアル
カリ土類金属化合物を溶かしたのち、その水溶液にコー
ル酸を加えて所定濃度に調整したコール酸塩を基質とし
て用いてもよい。
を基質として用いてもよいし、或いは水に予めコール酸
と塩を形成し得る所定量のアルカリ金属化合物又はアル
カリ土類金属化合物を溶かしたのち、その水溶液にコー
ル酸を加えて所定濃度に調整したコール酸塩を基質とし
て用いてもよい。
コール酸塩の濃度は代謝生産される３α・７α−ジヒド
ロキシ−１２−ケト−５β−コラン酸及び／又はその塩
などの収量、培養条件及び操作性などの経済的観点から
約２０〜５００ｇ ／ Ｉの範囲が好ま已く、さらに５
０〜３００ｇハの範囲がより好ましい。
ロキシ−１２−ケト−５β−コラン酸及び／又はその塩
などの収量、培養条件及び操作性などの経済的観点から
約２０〜５００ｇ ／ Ｉの範囲が好ま已く、さらに５
０〜３００ｇハの範囲がより好ましい。
培養方法は原則的には一般微生物の培養で採用される方
法と同じであるが、通常は液体培地による振盪培養法ま
たは通気攪拌培養法が用いられる。
法と同じであるが、通常は液体培地による振盪培養法ま
たは通気攪拌培養法が用いられる。
培地としては上記の高濃度コール酸塩を基質として３α
・７α−ジヒドロキシ−１２−ケト−５β−コラン酸及
び／又はその塩などを生産する細菌が資化利用できる栄
養源を含有するものであればよい。
・７α−ジヒドロキシ−１２−ケト−５β−コラン酸及
び／又はその塩などを生産する細菌が資化利用できる栄
養源を含有するものであればよい。
炭素源としてはコール酸塩を単一炭素源としてもよく、
或いはコール酸塩にアラビノースなどのペントース類；
グルコース、マンノース、フラクトース、ガラクトース
などのヘキソース類；マルトースなどの二糖類；澱粉分
解物、糖アルコール類、グリセリンなどの多価アルコー
ル類；又はポリペプトン、ペグ１ヘン、肉エキス、麦芽
エキス、コーンステイープリカー、酵母エキス、各種ア
ミノ酸などを併用してもよい。
或いはコール酸塩にアラビノースなどのペントース類；
グルコース、マンノース、フラクトース、ガラクトース
などのヘキソース類；マルトースなどの二糖類；澱粉分
解物、糖アルコール類、グリセリンなどの多価アルコー
ル類；又はポリペプトン、ペグ１ヘン、肉エキス、麦芽
エキス、コーンステイープリカー、酵母エキス、各種ア
ミノ酸などを併用してもよい。
また窒素源としては、例えば硫酸アンモニウム、塩化ア
ンモニウム、燐酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、硝
酸ナトリウム、硝酸カリウムなどが用いられる。
ンモニウム、燐酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、硝
酸ナトリウム、硝酸カリウムなどが用いられる。
また、この他に燐酸水素２カリウム、燐酸２水素カリウ
ム、硫酸マグネシウムなどの無機塩が添加される。
ム、硫酸マグネシウムなどの無機塩が添加される。
培養条件に特徴はないが、通常２５〜３５℃で６時間〜
５日間振盪培養又は通気攪拌培養を行なう。
５日間振盪培養又は通気攪拌培養を行なう。
このようにして培養液中に蓄積された３α・７α−ジヒ
ドロキシ−１２−ケト−５β−コラン酸及び／又はその
塩などを分離・採取するには、まず培養液中の菌体その
他の不溶成分を濾過又は遠心分離などにより分離除去し
、得られた培養濾液又は上滑に例えば塩酸を加える。
ドロキシ−１２−ケト−５β−コラン酸及び／又はその
塩などを分離・採取するには、まず培養液中の菌体その
他の不溶成分を濾過又は遠心分離などにより分離除去し
、得られた培養濾液又は上滑に例えば塩酸を加える。
このようにして培養濾液又は上清を酸性とすることによ
り３α・７α−ジヒドロキシ−１２−ケト−５β−フラ
ン酸をはじめとするコール酸塩の変換物が沈澱する。
り３α・７α−ジヒドロキシ−１２−ケト−５β−フラ
ン酸をはじめとするコール酸塩の変換物が沈澱する。
なお、この際、未変換のコール酸塩はコール酸として沈
澱する。
澱する。
沈澱物を除去した液に例えば酢酸エチルを加えて残存す
る上記のコール酸塩の変換物並びに未変換のコール酸及
び／又はその塩を抽出し、しかるのち酢酸エチルを溜去
することにより・はぼ完全に３α・７α−ジヒドロキシ
−１２−ケト−５β−コラン酸をはじめとするコール酸
塩の変換物を採取し、未変換のコール酸及び／又はその
塩を回収することができる。
る上記のコール酸塩の変換物並びに未変換のコール酸及
び／又はその塩を抽出し、しかるのち酢酸エチルを溜去
することにより・はぼ完全に３α・７α−ジヒドロキシ
−１２−ケト−５β−コラン酸をはじめとするコール酸
塩の変換物を採取し、未変換のコール酸及び／又はその
塩を回収することができる。
このようにして得られたコール酸塩の変換物並びに未変
換のコール酸及び／又はその塩を例えばメチルエステル
に変換後、シリカゲルカラムに吸着させ、クロロホルム
、クロロホルム／エタノールの９９／１容量比の混合液
及びクロロホルム／エタノールの９７／３容量比の混合
液により順次溶出させる。
換のコール酸及び／又はその塩を例えばメチルエステル
に変換後、シリカゲルカラムに吸着させ、クロロホルム
、クロロホルム／エタノールの９９／１容量比の混合液
及びクロロホルム／エタノールの９７／３容量比の混合
液により順次溶出させる。
すなわち、クロロホルムにより７α−ヒドロキシ−３・
１２−ジケト−５β−コラン酸メチルエステルを溶出さ
せ、クロロホルム／エタノールの９９／１容量比の；混
合液によりまず７α・１２α−ジヒドロキシ−３−ケト
−５β−コラン酸メチルエステルを溶出させ、ついで３
α・７α−ジヒドロキシ−１２−ケト−５β−コラン酸
のメチルエステルを溶出させる。
１２−ジケト−５β−コラン酸メチルエステルを溶出さ
せ、クロロホルム／エタノールの９９／１容量比の；混
合液によりまず７α・１２α−ジヒドロキシ−３−ケト
−５β−コラン酸メチルエステルを溶出させ、ついで３
α・７α−ジヒドロキシ−１２−ケト−５β−コラン酸
のメチルエステルを溶出させる。
さらに、クロロホルム／エタノールの９７／ ３容量比
の混合液によりコール酸メチルエステルを溶出させる。
の混合液によりコール酸メチルエステルを溶出させる。
得られた３α・７α−ジヒドロキシ−１２−ケト−５β
−コラン酸メチルエステルなどは常法により加水分解す
ることにより３α・７α−ジヒドロキシ−１２−ケト−
５β−コラン酸などの遊離の酸とすることができる。
−コラン酸メチルエステルなどは常法により加水分解す
ることにより３α・７α−ジヒドロキシ−１２−ケト−
５β−コラン酸などの遊離の酸とすることができる。
本発明の方法により得られる３α・７α−ジヒドロキシ
−１２−ケト−５β−コラン酸はファン・ミンロン還元
反応に供することにより胆石溶解剤として有用なケノデ
オキシコール酸（ＣＤＣＡ）に容易に変換できる。
−１２−ケト−５β−コラン酸はファン・ミンロン還元
反応に供することにより胆石溶解剤として有用なケノデ
オキシコール酸（ＣＤＣＡ）に容易に変換できる。
また、７α−ヒドロキシ−３・１２−ジケト−５β−コ
ラン酸は常法により脱水反応ついで水素添加反応に供す
ることにより、プロゲステロン又は副腎皮質ステロイド
誘導体の原料として有用なデオキシコール酸に容易に変
換できる。
ラン酸は常法により脱水反応ついで水素添加反応に供す
ることにより、プロゲステロン又は副腎皮質ステロイド
誘導体の原料として有用なデオキシコール酸に容易に変
換できる。
以下実施例によって本発明をさらに詳細に説明する。
実施例 １
アルスロバクタ−ＣＡ−３５菌株（工業技術院微生物工
業技術研究所、菌寄第５１４５号）を次に示す方法で培
養した。
業技術研究所、菌寄第５１４５号）を次に示す方法で培
養した。
コール酸１００ｇ、硝酸アンモニウム２．０ｇ、燐酸２
水素カリウム２．０ｇ、燐酸水素２カリウム５．０ｇ、
硫酸マグネシウム・７水和物０．２ｇ、酵母エキス０．
１ｇ及び水酸化ナトリウム１０ｇに蒸留水を加えて容量
を１１に調整し、これを培地とした。
水素カリウム２．０ｇ、燐酸水素２カリウム５．０ｇ、
硫酸マグネシウム・７水和物０．２ｇ、酵母エキス０．
１ｇ及び水酸化ナトリウム１０ｇに蒸留水を加えて容量
を１１に調整し、これを培地とした。
この培地を５００ｍ１容坂ロフラスコに１００ｍ１宛１
０本に分注し、１２０℃で１５分間、蒸気殺菌を行なっ
た。
０本に分注し、１２０℃で１５分間、蒸気殺菌を行なっ
た。
予め上記の培地と同じ培地で試験管振盪機にて２日間増
殖させた種菌を上記の５００ｍｌ容坂ロフラスコあたり
１０ｍ１宛添加し、２日間振盪培養した。
殖させた種菌を上記の５００ｍｌ容坂ロフラスコあたり
１０ｍ１宛添加し、２日間振盪培養した。
培養後、これらの培養液を集め、遠心分離機で菌体を除
去後、得られた培養上清に塩酸を添加して該上清を塩酸
酸性にするとコール酸塩の変換物及び未変換コール酸が
沈澱した。
去後、得られた培養上清に塩酸を添加して該上清を塩酸
酸性にするとコール酸塩の変換物及び未変換コール酸が
沈澱した。
この沈澱物を採取し、残りの溶液を酢酸エチル１１で抽
出し、ロータリー・エバポレーターで酒せ酸エチルを流
去後、得られた残存物を先の沈澱物と合わせることによ
り、８５ｇのコール酸塩変換物及び未変換コール酸の混
合物を得た。
出し、ロータリー・エバポレーターで酒せ酸エチルを流
去後、得られた残存物を先の沈澱物と合わせることによ
り、８５ｇのコール酸塩変換物及び未変換コール酸の混
合物を得た。
この混合物の極く一部を取り、これにメタノールを加え
て１％溶液とし、この溶液１０μｍをミクロボンダパッ
クＣ−１８カラムを備えた高速液体クロマ１〜グラフイ
ー（米国ウォーターズ社製、ＨＬＣ−ＧＰＣ−２４４型
）に注入した。
て１％溶液とし、この溶液１０μｍをミクロボンダパッ
クＣ−１８カラムを備えた高速液体クロマ１〜グラフイ
ー（米国ウォーターズ社製、ＨＬＣ−ＧＰＣ−２４４型
）に注入した。
移動相としてｐＨ２，５に調整した水／メタノールの３
０／７０容量比の混合液を流速１ｍ１／分で流し、検出
を屈折率方式で行なったところ第２図のクロマトダラム
が得られた。
０／７０容量比の混合液を流速１ｍ１／分で流し、検出
を屈折率方式で行なったところ第２図のクロマトダラム
が得られた。
このクロマトグラムにおけるピークＡ、ピークＢ、ピー
クＣ及びピークＤは標準品のピークと照合することによ
り各々７α−ヒドロキシ−３・１２−ジケト−５β−・
コラン酸、３α・７α−ジヒドロキシ−１２−ケト−５
β−コラン酸、７α・１２α−ジヒドロキシ−３−ケト
−５β〜フラン酸及びコール酸のものと一致した。
クＣ及びピークＤは標準品のピークと照合することによ
り各々７α−ヒドロキシ−３・１２−ジケト−５β−・
コラン酸、３α・７α−ジヒドロキシ−１２−ケト−５
β−コラン酸、７α・１２α−ジヒドロキシ−３−ケト
−５β〜フラン酸及びコール酸のものと一致した。
また、これらのピークＡ、ピークＢ及びピークＣの各々
の部分に相当する化合物を分取し、マススペクトル、赤
外線吸収スペクトル及びＮＭＲスペクトルにより化合物
の構造確認を行なったところ、それぞれ上記の７α−ヒ
ドロキシ−３・１２−ジケト−５β−コラン酸、３α・
７α−ジヒドロキシ−１２−ケト−５β−コラン酸及び
７α・１２α−ジヒドロキシ−３−ケト−５β−コラン
酸であった。
の部分に相当する化合物を分取し、マススペクトル、赤
外線吸収スペクトル及びＮＭＲスペクトルにより化合物
の構造確認を行なったところ、それぞれ上記の７α−ヒ
ドロキシ−３・１２−ジケト−５β−コラン酸、３α・
７α−ジヒドロキシ−１２−ケト−５β−コラン酸及び
７α・１２α−ジヒドロキシ−３−ケト−５β−コラン
酸であった。
なお、ピークＡ、ピークＢ及びピークＣの各々の部分に
相当する化合物の赤外線吸収スペクトル（Ａ、 Ｂ及び
Ｃ）はメチルエステル化後の化合物についてのものであ
り、それらを標準品の赤外線吸収スペクトル（Ａ’、Ｂ
′及びＣ′）と対比してそれぞれ第３図、第４図及び第
５図に表示する。
相当する化合物の赤外線吸収スペクトル（Ａ、 Ｂ及び
Ｃ）はメチルエステル化後の化合物についてのものであ
り、それらを標準品の赤外線吸収スペクトル（Ａ’、Ｂ
′及びＣ′）と対比してそれぞれ第３図、第４図及び第
５図に表示する。
さらに、分取したクロマトグラムのピークＡ、ピークＢ
及びピークＣの部分に相当する化合物及びそれらのメチ
ルエステルの融点を測定すると次表に示すとおりであっ
た。
及びピークＣの部分に相当する化合物及びそれらのメチ
ルエステルの融点を測定すると次表に示すとおりであっ
た。
第２図のクロマトダラムの面積比から得られたコール酸
塩変換物の収量及び未変換コール酸の残存量を算出する
と次表に示すとおりである。
塩変換物の収量及び未変換コール酸の残存量を算出する
と次表に示すとおりである。
実施例 ２
アルスロバクタ−ＣＡ−３５菌株（前述に同じ）を用い
、実施例１におけるコール酸の濃度を変化させ、かつ水
酸化ナトリウムを使用するコール酸の１７１０重量加え
る以外は実施例１と同様の方法により培養を行ない、各
々の基質濃度における３α・７α−ジヒドロキシ−１２
−ケト−５β−コラン酸、７α−ヒドロキシ−３・１２
−フケ１−−５β−コラン酸及び７α・１２α−ジヒド
ロキシ−３−ケト−５β−コラン酸の収量並びに未変換
コール酸の残存量を求めて次表に示した。
、実施例１におけるコール酸の濃度を変化させ、かつ水
酸化ナトリウムを使用するコール酸の１７１０重量加え
る以外は実施例１と同様の方法により培養を行ない、各
々の基質濃度における３α・７α−ジヒドロキシ−１２
−ケト−５β−コラン酸、７α−ヒドロキシ−３・１２
−フケ１−−５β−コラン酸及び７α・１２α−ジヒド
ロキシ−３−ケト−５β−コラン酸の収量並びに未変換
コール酸の残存量を求めて次表に示した。
参考例 １
３α・７α−ジヒドロキシ−１２−ケト−５β−コラン
酸１０ｇを三ツロ丸底フラスコに入れ、ついでエチレン
グリコール１００ｍ１及び水酸化カリウム水溶液（水酸
化カリウム１０ｇ ＋７Ｊ（２０ｍｌ）を注入した。
酸１０ｇを三ツロ丸底フラスコに入れ、ついでエチレン
グリコール１００ｍ１及び水酸化カリウム水溶液（水酸
化カリウム１０ｇ ＋７Ｊ（２０ｍｌ）を注入した。
ついで８５％ヒドラジンハイドレート１０ｍ１を添加し
、得られた混合液を１００℃で２時間還流した。
、得られた混合液を１００℃で２時間還流した。
温度を次第に上げ、１８５〜１９０℃の温度で４時間還
流することによりヒドラジンハイドレートを溜去した。
流することによりヒドラジンハイドレートを溜去した。
得られた反応混合液を冷却後、過剰の水を加えて希釈し
、攪拌しながらｐ）］を３に調整すると沈澱が生じた。
、攪拌しながらｐ）］を３に調整すると沈澱が生じた。
これを濾過し、得られた沈澱物を水洗し、風乾すること
により３α・７α−ジヒドロキシ−５β−コラン酸（Ｃ
ＤＣＡ）を８．５ｇ得た。
により３α・７α−ジヒドロキシ−５β−コラン酸（Ｃ
ＤＣＡ）を８．５ｇ得た。
参考例 ２
２００ｍ１容三つロフラスコ中で７α−ヒドロキシ−３
・１２−ジケＩ・−５β−コラン酸３ｇをピリジン７０
ｍ１に溶解させ、この溶液にトシルクロライド１モルを
添加して０℃で１時間反応させ、さらに５時間還流した
。
・１２−ジケＩ・−５β−コラン酸３ｇをピリジン７０
ｍ１に溶解させ、この溶液にトシルクロライド１モルを
添加して０℃で１時間反応させ、さらに５時間還流した
。
還流後、この反応液に３規定の塩酸水溶液を注入し、つ
いでエーテル１００ｍ１で抽出した。
いでエーテル１００ｍ１で抽出した。
エーテル層から減圧蒸溜によりエーテルを溜去して△６
及び／又は△７−３・１２−ジケト−コレン酸を２．５
ｇ得た。
及び／又は△７−３・１２−ジケト−コレン酸を２．５
ｇ得た。
ついで、得られた△６及び／又は△７−３・１２−ジケ
ト−コレン酸２ｇを１規定の水酸化ナトリウム１０ｍ１
に溶解し、この溶液にラネー・ニッケル０．１ｇを添加
したのち、水素ガス０．０１モルを注入し、一夜反応さ
せることにより、３α・１２α−ジヒドロキシ−５β−
フラン酸（デオキシコール酸）及び３α・１２β−ジヒ
ドロキシ−５β−コラン酸を得た（収率：９０％）。
ト−コレン酸２ｇを１規定の水酸化ナトリウム１０ｍ１
に溶解し、この溶液にラネー・ニッケル０．１ｇを添加
したのち、水素ガス０．０１モルを注入し、一夜反応さ
せることにより、３α・１２α−ジヒドロキシ−５β−
フラン酸（デオキシコール酸）及び３α・１２β−ジヒ
ドロキシ−５β−コラン酸を得た（収率：９０％）。
第１図はアルスロバクタ−ＣＡ−３５菌株の電子顕微鏡
写真（倍率：１万イ剖であり、第２図は実施例１で得ら
れたコール酸塩変換物及び未変換コール酸の液体クロマ
）ヘゲラムを表わし、第３〜５図はそれぞれ第２図のタ
ロマドグラムのピークＡ、ピークＢ及びピークＣの各々
の部分に相当する化合物をメチルエステル化したものの
赤外線吸収スペクトル（Ａ、Ｂ及びＣ）を標準品の赤外
線゛吸収スペクトル（Ａ’、Ｂ′及びＣ′）と対比して
表示したものである。
写真（倍率：１万イ剖であり、第２図は実施例１で得ら
れたコール酸塩変換物及び未変換コール酸の液体クロマ
）ヘゲラムを表わし、第３〜５図はそれぞれ第２図のタ
ロマドグラムのピークＡ、ピークＢ及びピークＣの各々
の部分に相当する化合物をメチルエステル化したものの
赤外線吸収スペクトル（Ａ、Ｂ及びＣ）を標準品の赤外
線゛吸収スペクトル（Ａ’、Ｂ′及びＣ′）と対比して
表示したものである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 高濃度コール酸塩を含む培地で生育するアルスロバ
クタ−・エスピー。 ２ 工業技術院微生物工業技術研究所、菌寄第５１４５
号と同定される特質を有する特許請求の範囲第１項記載
のアルスロバクタ−・エスピー。
Priority Applications (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12486679A JPS5951277B2 (ja) | 1979-09-27 | 1979-09-27 | 新規な微生物 |
| GB8024436A GB2057447B (en) | 1979-08-21 | 1980-07-25 | Microbal process for producing cholanic acid derivatives and microbes used therein |
| US06/173,815 US4359529A (en) | 1979-08-21 | 1980-07-30 | Microbial process for producing cholanic acid derivatives |
| DE3031334A DE3031334C2 (de) | 1979-08-21 | 1980-08-20 | Mikrobiologisches Verfahren zur Herstellung von Cholansäurederivaten |
| IT68301/80A IT1166482B (it) | 1979-08-21 | 1980-08-20 | Procedimento microbiologico per la produzione di derivati dell acido colanico e microorganismi utilizzati nel procedimento |
| CH628980A CH646442A5 (de) | 1979-08-21 | 1980-08-20 | Mikrobielles verfahren fuer die herstellung von cholansaeurederivaten und in einem solchen verfahren verwendete mikroorganismen. |
| FR8018288A FR2463809A1 (fr) | 1979-08-21 | 1980-08-21 | Procede microbien pour produire des derives d'acide cholanique et les microbes qu'il utilise |
| NLAANVRAGE8004741,A NL185731C (nl) | 1979-08-21 | 1980-08-21 | Werkwijze voor het bereiden van 3alfa,7alfa-dihydroxy 12-keto 5beta-cholaanzuur of een alkali- of aardalkalimetaalzout hiervan, alsmede micro-organismen ten gebruike bij de werkwijze. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12486679A JPS5951277B2 (ja) | 1979-09-27 | 1979-09-27 | 新規な微生物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5658489A JPS5658489A (en) | 1981-05-21 |
| JPS5951277B2 true JPS5951277B2 (ja) | 1984-12-13 |
Family
ID=14896027
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP12486679A Expired JPS5951277B2 (ja) | 1979-08-21 | 1979-09-27 | 新規な微生物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5951277B2 (ja) |
-
1979
- 1979-09-27 JP JP12486679A patent/JPS5951277B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5658489A (en) | 1981-05-21 |
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