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La présente invention est relative à un nouveau prooédé de préparation d'amides d'acides acylaminocarboxyliques par une réaction de transposition Intramoléculaire.
Dans la demande de brevet déposée en France par la demanderesse le 5 Juillet 1956 et ayant pour titre :
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"Procède de pr4puat1on de peptides.", il a été décrit un nouveau procédé pour préparer des peptides. Suivant ce procédé on traite., par exemple des composés de formule :
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dans laquelle X représente de l'oxygëne ou du soufrât fi et R' les restes divalents diacides aminés, et Y le reste d'un acide aminé ou d'un peptide, par des agents basiques; 11 se produit une transposition conduisant à un composé de formule ;
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En scindant le reate Ce lOao1dc carboxylique 61"Omatique, on obtient un peptide de formule H2NRCOMm'COY.
Comme agent basique, on utilise dans ce cas avantageusement la triéthylamine.
La présente invention concerne un procédé permettant de transposer de manière analogue,, d'une façon surprenante,
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les entera a-em1nocarboxY11quea de P-hydroxy- ou de e-mor- ûptocarboX1am1des saturas en a#µ et comportant au moins un atome dihydrogène am1d1que et un atome d'hydrogène libre au groupe am1nogène, en P-hydx'oxy-' ou f)-m6Z'oaptoacyl-aam1noac,lamldes correspondants.
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Cette faction peut 0tre représentée chémst1QUement
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connue suit:
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Dans ces toriiulose x représenta de l'osygene ou du aoutres R la! rests divalenb à'un aCidO -anzoooalu et Rt de 3,'hydpogene ou un ro .stO C't3kïia:, i'3'lïï3î2 le reste d'un acide asainë ou d'un paptidd. 31 MI représente de à es or, on obtient des J3-h7dro3w- ou des '-Mex'capio-acy-m-'aNisso-' carboxyamidea S:Imploe. si R' est le veate d'un ecido anisé ou d'un peptMe, on obtient alors un 3-hdva- ou un 9mercapto-sc;1 peptide ou un -hy<3roxy- ou un P-E9eM&pto-acyl-' paptldr, éÀÀloiààé par une Unlté dtaeldé emirtê.
Un avantage particulier de la nouvelle réaction sulvant la présente Invention t5.$ .i le falt que le reste 13-hydroxy- ou peut lui-Etêae tx's une partie d'un acide amIné, notamment d'un aolde aminé Naturel ou ï' u1 peptide.
Si l'on part par exemple d'un ester euainocarboxylique d'un peptide, de formule a
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dans laquelle X reprênénte 4e l'oxygène ou du Boufre R un
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reste divalent d'un acide a-aminé, R' et R" les restes d'un acide aminé ou d'un peptide, la partie de la molécule entourée par des traits correspondant au reste de la oystéine, de la serina ou de la thréonine, on obtient alors par la transposition intramoléculaire directement un peptide de formule :
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En estérifiant l'hydroxyle ou le groupe mercaptanique avec un acide aminé, et en répétant la transposition, on peut agrandir la'chaîne peptidique d'un nombre quelconque de restes d'acides aminés identiques ou différents, d'une façon très simple.
Alors que,suivant le procédé décrit dans la demande de brevet français citée ci-dessus, il n'est possible de prolonger une chaîne paptidique qu'à son extrémité, et qu'on doit ensuite scinder le reste aromatique, on réussit suivant le présent procéder par un choix approprié des substances de départ, à incorporer les acides aminés dans une chaîne peptidique au voisinage de la cystéine, de la serine ou de la thréonine, sans devoir pour autant scinder le reste phydroxy- ou ss-mercaptoacyle.
Cette réaction de transposition ne peut pas @tre exécutée dans la série aliphatique avec les agents de transposition faiblement basique qui sont, de préférence, utilisés
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dans la aérie aromatiques Il est néce55a1 d'utiliser des agents fortement basiques et dopérer avantarm dans un milieu dans lequel Il ne ze produit pas de caponlfiaatlon
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notable du groupe ester. Des agents de transposition forte-
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ment basiques appropries pour cette réaction sont,, de pr6têrence, ceux qui sont capables d'ionisé? un groupe . am1d1qu.
Comme agent da t!'m1spo:s1t1on de ce genre il y a lieu de citer en prem1o lieu àes oomposés hydrocarbonés, les am1durosg les looolat0e te1tia1Y.es ds n±%aux alcalins ou slca11no-terrcux6 par exemple lCamldure de sodluine le butylete tortlaire de pote-molumo le phényl-aod1um et le pnânyl-l1th1um. On utilise avec avantvse les amiur02 métal- 11qus dans de l'ammoniac liquide comms milieu, les alcoolatea tert1irea pouvant être utlllo62 danc l'alcool correspondant.
La testpërature a le.quelle on opsre peut varier dana de larges liai tes. En ettectuant la péaotion au-donnous de 30 C on a obtenu des résultats part1ou110remnt bons.
En rsum6, ce nouveau prooddd de préparation d'acyl-, am1nocarboam1des peut être caractdrloé par le fait qu'on transpose des esters -am1no-oarboxy11quea de P-hydroxy- ou de -mrcaptoo&rboxyam1dea comportant au moins un atome d'hydrogène am1dique et un atome d'hydrogène libre au groupe amlnogène, ou des sels de cas composés, en acylaminocarboxy-
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amides correspondants., en les traitant par des agents forte-
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ment basiques, de préférence par ceux qui sont capables
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d'ioniser un groupe amidique.
Comme on l'a déjà Indiqué au début, on utilise comme substance de départ notamment des esters d'acides
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a-aminoicerboxy.iques naturels a,,ec des dérivés P-hydroxyou a-merc8pto-acy.da d'acides aminés naturels ou de peptides; le reste acyle peut encore porter d'autres substituantae par exemple en position a un groupe aminogène substitué. Comme groupes aminogènes substitués, on envisage notamment ceux qui sont substitués par le reste d'un acide aminé, de préférence naturel, ou d'un peptide, ou ceux qui sont facilement transformables en groupe aminogène libre par solvolyae,
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hydrolyse ou hydrogênolise, par exemple les groupes aminogènes qui portent un reste formule, tri.uoroaeicy3a, carbobenzoxyle, tosyle ou trltyle, ou deux restes bonzyllques.
D a substances de départ préférées sont, par exemple, les esters d'u1nocarboxyliques de composés cystéyllquez, eéryliquas ou thréonyliques 1-aubetitus d'acides aminée ou de peptides. Des groupes fonctionnels réactifs présents dans la
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matière de départ, par exemple des hy6,,4ryleB, des groupes thiollques, des groupes carboxyliques libres ou des groupes aminogènes ne participant pas à la transposition sont de préférence protégés d'une manière usuelle.
Les substances de départ sont connues ou peuvent être obtenues suivant des procédés en eux-mimes connus ou, le cas échéant, suivant le procédé faisant l'objet de la
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présente invention. i L'invention est c1te plue ee détail dans les exemples non limitatifs qui aulventt dans lesquele lee tempé t1tureB sont indiquées en degrés centigrades. le 1 lb CejEet en s'K3peas3.o'ny 2000 98 rs (o,5 m.mol) de chlorhydrate de l'amide de l'acide O-gleol--hyës'oxy-métbylpi'opionique d8\.11S 23 cm? t1e butt²,nol ts'tis.is'â abvolu, de man1re obtoniy unis uapna1on tè t1ne, ajouta 1,88 OM3 (4 dquiwl@ntD) d'une solution norwele da buty13te toétialee de pota#a1um d4%n,u àu butanol trtla1re et. eu bout doutie dem1-beuro au mon6 4 équ1vclnts de 19échangeu? <a'i<m:
3 hJro1dc dénoID.T!1é ak#3IIRLISE 1R 120 (forme acide), au moins un éqwivlen de dflon liunitle dénomlnâ ài,183RLI'#E nA-400 (foflm0 et 25 csr d'oau. Des que la valeur du pu s'est abaissa à 6-7, on flltre et évapore a sec sous vide, à 35 Le rézldu est conatltud par de l'amide pur de la Il erletallloo 4ana un mélange d'éthanol et <'éther en pr1sm8 d'un point de fusion de 107-1081> Le chlorhydrate de l'amide de l'acide 0-glycol-phydroxy-9-mêthylproplonïque utilisa comme matière de départ peut être préparé de la façon sulvante Dans 5 car de pyr1d1jâ\t) absolue, ôn (51fUIout 1,55 9 (3,86 at.mol)
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d'anhydride de carbobenzoxy-glyolne et, après avoir refroidi
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la solution obtenue à 0 , on la verse dans une solution da
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390 mg z3,8 m.mol)
d'amide de l'acide p-hydyoxy-p-RnSthylpropionique dans 5 em3 de pyridine a.bo3.ue, 0 . Apres avoir laissé séjourner pendant 40 heures en glacière (3-4 ), on ajoute un peu de glace à la solution et 30 minutes plus tard, évapore le mélange sous vide une température de bain de 35-40 .
On reprend le résidu huileux dans 100 cm3 d'acétate d'éthyle et 10 cm3 d'acide chlorhydrique binormal et, après avoir séparé la phase aqueuse, extrait la solution à deux reprises avec de l'acide chlorhydrique binormal, ensuite jusqu'à épuisement avec une solution à 10% de bicarbonate de potassium, et finalement une fois avec 10 cm3 d'une solution saturée de chlorure de sodium. Après avoir séché la solution sur du sulfate de sodium, on l'évapore sous vide. Le résidu huileux cristallise complètement au cours de 24 heures par repos sous un mélange d'éther et d'éther de pétrole.
Pour le
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reerlotalliser, on dissout le produit brut obtenu dans peu d'acétate d'éthyle chaud, ajouts de l'éther de pétrole jusqu'à apparition d'un louche,, puis clarifie en ajoutant quelques gouttes d'acétate d'éthyle. Par cristallisation lente dans un bain à 35 , on obtient des aiguilles extrêmement fines de
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l'amide de l'acide 0-carirobeno:g3.ycy.--hydroxy-p-rthl.- propionique sous la forme de fins faisceaux d'un point de fusion de 78-79 .
Dans 30 cm3 d'acide acétique glacial, en présence
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de 1#36 em3 dl aclde chlorhydrique noystal et de 60 mg ci. un charbon à 10% de palladium, on traite pendant 30 à 40 minutes par de l'hydrogène, à la température ambiante, 400 mag (1,36 m.mol) de ce compood carbobenzozylé. On filtre, évapora sous vide à 35o jumqutà desS1o&t1on, et cr1stal11ae l résidu au moyen de méthanol et d'acétate d'éthyle. L'amide de l'acide est ainsi obtenu sous
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la forme de cristaux p1amat1qusz fondant à 140-141 .
Exemple 2. a) Dans 20 cm3 de butanol tertiaire absolu, on met
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très finement on auspensiont à 2OPt 100 mg (0,5µ m.mol) de obierhydrate de lQm1dG de la ajoute un cm" (3 équivalents) d'une solution normale do butylate tert1&ire do potassium da'ne du butanol tortialve et, au bout d'une dmi-heu# au moins' équivalente de l'éù31anseuà d'ions humide dl1omm0 A?.IBERLIY% IR-120 (for!ae acide)., au moins un àquivéàlont de Ildehanaour d'lone humide dénoà*nÔ AMSERLITE IRA-400 (forme basi!j.ue) et 20 cm3 deau. Dàs aue le pH est tombé à 6-7, on flltre et évapore A 350# sous vide, jusqu'à dessicatlon.
Une ohs'osatOËya?M'3 sur papier montre que le résidu est unitaire; on le cristallise dans un mélange humide d'acétone et d'acétate d'éthyle. L'amide de la benzoyl-
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adz7l-glyolne que l'on obtient ainsi forme des c1etaux prismatiques d'un point de fusion de 141,5-142,5 . b) On dissout 12 mg de sodium 0,5 atome-mg) dans
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20 cm3 d'ammoniac liquide, attend que la décoloration de la solution bleue se soit produite, et ajoute, tout en mélangeant fortement, 60 mg (0,2 m.mol) de chlorhydrate de l'ami@e de la 0-glcyl-N-benzoyl-sérine et évapora l'ammoniac.
Pour isoler le produit réactionnel on opère d'une manibre analogu-- à celle décrite sous a) et obtient le même produit.
Le chlorhydrate de l'amide de la O-glycyl-N-benzoylglycine utilise Comme matière de départ peut être préparé de la faqon suivante :
On dissout de la N-benzoyl-sérine dans une quantité 25 fois plus grande de méthanol et, tout on agitant, estérifie -avec du diazométhane.
Après avoir évaporé le solvent sous vide, on reprend le résidu dans 20 fois sa quantité d'acétate d'éthyle et extrait à deux @eprises avec chaque fois 10 à 15 cm3 diacide chlorhydrique binormal, avec une solution à 10% ,de bicarbonate de potassium et avec une solution sature de ohlor@re de sodium. Après avoir séché la solution sur du sulfate de soidum, on l'évapore sous vide et, à 20 , transforma en amide l'huile visqueuse qui reste, en la dissolvant et en la faisant reposer pendant 24 heures dans 20 fois sa quantité d'une solution saturée d'ammoniaque dans du méthanol à 0 .
En évaporant sous vide la solution auuoniscale méthanolique, on obtient un résidu cristallin blanc que l'on lave avec peu d'acétate d'éthyle (l'amide de la N-benzoyl-sérine est presque insoluble dans l'acétate d'éthyle) et qu'on recristallise,
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après ,scC9 aaché co.s ViÇ,1 5'r: de 3?e-.
oùa.1:r6#: au moyen de méthanol et <3tho.ncl. a 4.r G'tr'îi2xlt-". présente 1.h' point: ôe fusion de 165-167 4 Da-10 15 cm"" di3 pyxo1f51ine absolu", en dissout 31'8 g (9,5 m-r-01) t4.nI'v tlo CË.rbobeRsosyg3.yo.ne et" après l'avoir pofroldie a 0 0 1 voe la solution obtcnMe dans une SQlut1o d 1,9 5 (9,1 s3.s.el) A ClßlivE.:5i 'Y14 ln -bnyl-ér1n en OM3 de pyriùit3a à 0. .ps CVO5.v laissa sjoean-, pesant ,5 heU00 zit gw1gifiir (5-# ), on ajoute un peu Ge zlaoe a le 801t1on et 30 n>2nutez pluo 4'', 1 p 65'i b le t,"elJ. â 3dts'oda? v1c à une tE6atu àe bain dG '50. 1 siasout le r4z±du .n 100 es" ;neâ n eê'ëa.t<3 d"h3.e et Ggtr1t la solution jUDu3à ép1DemQnt avec de- 13ia chlorhyd1qe b1norm1 et v1-ie 301ution . 10% de bicarbonat@ da or>e.
Apres airoir lavd la solution avec une solution ûL'9.tv' fw 'Se sa..'r.'C3 do modlume on la mèche sur du sulfate tr3 '' éEâ:89E#fi et élimine le solvant sous vida tu 350. L91â b ut de la 0-sax'bo" rwna-ip bzo3.xzd 3t sous la forme à'une tourne blancho. Pour le purifier; on le rcriQtal11ae au moyen d'acétone et d'éther de pétx'o3.e i2. fond aloya a 33-14n.
Dans 50 em3 d'thno3. et 23 cm3 dîeau,, et en présence de 2 cm d'acide chlorhydrique normal et de 200 mg d'un charbon à 10% de palladlum, on traite pendant fJ 90 minutes par de lShyàrog&n0; à la t6mpérature &J1b1snte,l 0,8 g (2 m.mol) de ce compose carbobanzoxylé. On filtre, évapore à
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sec et cristallise au moyen de mêthanol et d'adts.ts d"ëthy3.e* Le chlorhydrate de l'amide de la 0-glycyl-N-benzoylsérine que l'on obtient ainsi forme des aiguilles d'un point de fusion de 162-164 .
D'une manière analogue, on obtient :
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e j a partir de l'aazide de la N-(benzoyl-slycyl)-0- , giyeyi-a6rrihe, l'amide de la N-(bensoyl-glycyl)-séryl-gly9ine? b) à partir de l'alùide de la M-bonzoyl-0-glycyl-Lnérinee l'amide de la Id-bsrzoyi-D-sdsyi-g.yoiras$ c) à partir de l'ester méthylique de la N*'bensoyl-0- -hdny.ra,anyâ )-r-adxl-g3.yaïns, l'ester cdtry3.3;s de la B!-bénzoyl-L-Béryl-(L-phenylalasyl3-glyeine du à partir de l'amide de la fif-g.ycyi-0-,g.yoyi-sdrina, , l'acide de la glycyl-aéryl-slycinej e) partir de l'acide de va N-bensoyl-0-glycylIthréonine,, l'emido de la N-benoyàony-glyo2ns f) à partir de l'amide de la X-bontoyl-8-glyo3rl-cystélnet ',l'8mide de la N-benzoyl-cy8téinyl-slyoine.
Exemple 3.
A 20 et à l'abri de l'humidité, on met en suspension., dans 15 cm3 environ de butanol tertiaire ses, à l'aide d'un
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taelangeur à vibration, 200 mg (m 0,55 m.mol) de chlorhydrate de l'anide de la 0-glycyl-N-(benaaylgiyryij-DL-sérine, st ajoute au tout 1,6 car d'une solution de butylate tertiaire de potassium dans du butanol tertiaire. A la solution devenue
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jaune, on ajoutât au bout de"30 stinutes, e11 moins 3 équivalents de l'échangeur datons humide A ".an'..6H. IR-120 (forme acide), -au moins un équivalent de lCéchangur dU10na humide Al#RLTE IRA-400 (torse basique) et 15 cm' d 8 e..t\ .
Dlhs que le p de la solution est tcsb a. 6-7 et qu'on ne peut plus décèles* êe chloret on filtra et 0vapore sous vide 35 jmzqu'à decs1cQtion. Une chlomatogrpb1 Gur pp1er montra que ce produit est un11 on le rr1st3111se rai deux reprises au i!J1c:on do i1étb&1Ql et 6'é"<lxcil. OR obtient!! avec un j:: ndú#ont de 70p, 3eu5 le. faysse (je f1nG6 iguil1e6J ltam1(]e de le N-{b0nzolD111)DLéyllycin qui fond à i-.20.
90#S 1&nl1e, on fâ4aNA4> 00 pSto4uà% une nuit sur 3û 'L5'aL de 96â 5',ß'"nD . 5d et sous una ppession de 0,01 h"i.6â 6e scuw.-' : r'Ryh'Q C.lH:\805i1 : calculé C 'a,7 5J)6} 0 24e820 N 178% 3aa,5a trouvé 0 51.97% Il 5 D 6J jF 0 25g09% N 17<10% Le chloeiydrate d.39a.co de la 0--glycyl-N- (beno1-gldcyl)-DL-aÓr1ne qui est utilisé comme matière de départ peut atre préparé de la teqon suivante : Dans 12 osa" d'eau, on dissout 3,7 g (- 35 m.mol) de DL-Bér1ne et alcalinise faiblement avec environ 17 c d'une solution b1normale d'hydroxyde de sodium. Tout en agitant, on ajoute par portions, dans la solution chauffée é, 50 8 g z9 m.mol) d'azide de l'acide hippurique (fraiehement
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préparé, encore humide).
En ajoutant goutte à goutte une solu-
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tion binor!aal8 4t'h;L#oa de Bod1um on mint1nt la solution â faible alcalinité. Au bout de 40 a. 60 1nut@9 on laisse refroidir, filtre et rend le tout acide au oongo à lV1dQ d"acide chloidr1que. Ap3G avoir laisse reposes* :3'.an 12 heures en glac1èreg on s6pQ$ les cristaux oria9 par essorage, le@ lave à lqeau g2acée et les rGc1ct11is a z3eiJx reposes dans 6e 1'eauo La !-<benzoyl-slycJl}...D&...jé)1?1n0 obtenue a300 un rendement de 65ee., fonâ à 6mâ . Pour l'analyse, on c1stal11a ce ?.''Et1$Îi vf'.yAd33w s dotix ep1as au moyen de méthanoi eg & h8r (Ri IS 3.?3.-3.) ee 1@ GChf1} pendant une nuit sur du pnittoxyde a 1o:Jßhore G. 10" et sous une pression de 5âa . mm de mercure, 12Hl05H2 Calculé s S 513 H 5,>ÙJ N 10b5 26625 Trouvé 8 .
54,0e,% H 549 zon 2O,î45,,D On dissout la dans 30 ±018 sa quantité de aw''e3&,24, et oaté1t1 avec uns solution éthérée de d1azométhane. Wa8 râ brut est 'r'Èâtâ "s' 0n amide de manière en elle-asÊNs comme. le r6oldu.. constltud par l'a- 'ja- de la -(brao3dg,;o-. .ae que loon obtient en évaporant sous vide la solution 2."ilmon1acale mthano11qua cristallise, au moyen do méthanol et d'acétate d'éthYle, en prismes courts d'un point de fusion de 176 . Le rendement est de $0,.
Pour ;Ianalyi3e,, on recr1stel11se ce produit dans le mime mélange de solvants (P -,17805-1790) et le sèche
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pendant 12 heures sur du peroxyde de phoaphore, & C , sous pn vide poussé.
"H'o1i13 calculé s C 54,33% H 5,70% N .4,'7,6b L e iG2 f5i.lid6t trouvé C 54,60% H 5,79% N 15#8% A l'abri de Ilhumidité, on dissout, dans 10 car de tétrahydrofuranne, 0.8% g ( a 4 m.mal) de caxbob nzoxyglyc1ne et 0,56 car (m 4 m.ma3,) de tr1éthylamine. On refroidit le mélange à -80 environ (dans un mélange de tolun et de glace Bêcha). Tout en agitant, on ajoute alors goutte à goutte 5, 6 m.mol de phosgène en solution dans du toluène absolu (1,8 m.mol de phosgène par cm3 de solution).
Après avoir laisse reposer
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pendant 15 minutes a -C7ld , on ajouta 0,64 g (ur , momoi) d'acide de la N-(benzoJl-glycWl)-DL.ar1n0 dissous dmna 4,2 o1Î de pyridine et 3 em3 de d1mfith11tormam1cïe et refroidi à Après avoir brièvement agité, on laissa le mélange
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réactionnel repocer pendant une nuit à. 09. On évapore à 30- 40 nous vide, reprend le résidu huileux dans de l'acétate d'éthyle et extrait Buooea6ivement avec de l'acide chlorhyd i- ,q7tio biàosal, aveo une solution a 10% de bicarbonate de potassium et finalement avec de l'eau. Ensuite on sèche sur du sulfate de sodium, puis évapore l'acétate d'éthyle sous vide; il reste une poudre amorphe qui, après cristallisation
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au moyen d'éthanol et d'éther, fonds 177-17g .
Le rendement est de 50 d'amide de la 0-(oarbobenzoxyglyoyl)-N-(benzoylgllo11)-DL-sérine.
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Dans 30 car d'éthanol à 65%, on dissout 380 mg ( = 0,83 m.mol) du composé carbobenzoxylé et, après avoir ajouta 0,85 cm3 d'acide chlorhydrique normal et environ 100 mg de charbon à 10% de palladium, on traite pendant 40 minutes environ à la température ambiante par de 3,'hydrogène.
Après avoir filtre et évaporé la solution, il reste une écume incolore, qui, au moyen de méthanol et d'acétate d'éthyle, cristallise Bous la forme de belles aiguillas qui tondent à 160-162 1 en se décomposant. Le rendement cat de 80% en chlor- hydrate de l'amide de la. O-glycyl-N-(benzoyl-glycyl)-DLsérine.
Pour l'analysât on Bêche ce produit pendant 12 heures sur du pentoxyde de phosphore, à 100 et sous une pression de 0,02 mm de mercure.
C14H19O5N4Cl Calculé: C 46.*86% il 5,34% 0 22,30% ci 9,88%
358,78 trouas C 49,92% H 5,23% 0 22,32% Cl 9,64%
Exemple 4.
A 20 et dans 20 car de butanol tertiaire absolu, on met en suspension, à l'aide d'un mélangeur à vibration, 100 mg (0,33 m.mol) de chlorhydrate de l'amide de la 0-glycyl- N-benzoyl-L-aérine et ajoute 1 cm3 (3 équivalents) d'une solution normale de butylate tertiaire de potassium dans du butanol tertiaire. au bout d'une demi-heure, on ajoute au moins 3 équivalents de l'échangeur d'ions humide dénommé AMERLITE IR-120 (torme acide), au moins un équivalent de
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liéchanseur d'Ions humide d6nomm6 àµMBG±tT.I5il# IRA-"00 (fogr.m.z basique) et 20 cm> d'eau. Dss que le pu est tombé & 6-7, on filtre et évapore sous vide à 35 Jusque degsloatlon.
Une chromatographie sur papier du réeidu montee que ce produit est unitaire et QUOII est conotitué pas* lO1da de la Il ar1ctall1:!D0, au moyen de méthenol et d'tho? en 1gu111m3, prn0ntnt un point de !s1on de 156-1570 et un pouvoir rtato1s Dpdoirique ia]jµ6 m + 281 1,5 la m 0,66 dane de Icetha-nol à 95). L point de fusion du m41ange, le mur paplec et Io sp-scire 1nfra-rOU!3 montrent que Co produit est i<3@stique a un produit de mCme conotltutlon obtenu pas* uno autre vole.
Le chlorh:vdrl3.t# de l'am1ds de la O-glycyl-Nbenzo11-L-sérine, utilisé comme matière de dêpartu peut Stre 3>râptAr6 de la façon Gu1V&nte Avoc une solution méthano11u d'a*z1oniaque, on trenatorme en amide, de mt1m1È:x-e connue, l'ester rcéthlilique de la H-benzoyl-L-eér1ne. Après avolr laissa repose? deux jours à la température ambiante, l'égide no aépar# tous Torme c18t$111na par évaporation sous vide. Une reeplatallloatlon *ffectude à deux reprises au moyen de méthanol et dedtherp fournit 80% d'amide de la N-benzoyl-L-sénine qui présente
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un point de fusion de,174-1760 et un pouvoir rotatoire
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ap40itique lalµ5 - + 58 i 1 (a m 0,5 daM de 1'éthanoi à 95%).
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Pour l'analyse, on recristallise ce produit dansle même solvant et le sèche pendant une nuit sur du pentoxyde
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de phosphore, a 0 , sous un vide poussa. e 101203,12 calculé t 0 51,68,s H 5,815' N l3o45% 208"21 trouvé 2 C 3l5? H 6,07% N z
A l'abri de l'humidité, on dissout, dans un petit ballon rond d'une capacité de 50 cm3, 0,835 g (4 m.mol) de
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carbobenzcxyglc1n0 et 0,56 em3 Ca 4 m.mol) do t!'1thye.mlne dans 10 CET de t'trdrgfu,...a1:1.. On refroid1t le m'lange à .80P environ a l'aide d'un m'lange de toluène et de glece 3êoht.
Tout en agitant, on ajoute goutte a goutte 5,5 m.mo de pho&6éne en solution dans du toluène absolu (3,8# ioi de phosgène par car de solution). Apres avoir laissé reposer pendant 15 minutes à -80 , on ajoute 0,63 g (-3 m.mol) d'amide de la N-benzoyl-L-sérine dissous dans 6 om de pyridine
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et 1,5 cm3 de d,mthlgortam2ç! et refroidi z, 0 .
On agite brièvement le mélange réactionnel et l'abandonne une nuit à 0 . On évapore à 35 sous vide jusqu'à dessication, reprend le résidu dans de l'acétate d'éthyle, puis extrait avec de l'acide ohlorhydrique binormal et ensuite avec une solution à 10% de bicarbonate de potassium, lave à l'eau jusqu'à neutralité et, après avoir séché sur du sulfate de sodium, élimine l'acétate d'éthyle par évaporation sous vide à 30 .
Le résidu qui est constitué par des cristaux blancs, fournit, après avoir été reoristallisé à deux reprises
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dans un mélange de méthanol et d'éthorg 60;; d'aàaide ùe la O-<csrbobenzoXlg11cyl)-N-benzoyl-L-aérin dUun point de fusion de 167-168 et d'un pouvoir rotatoire spécifique [a]5 a + 15,2 ! 1,50 (c r- 0,5 dans de i?t>n3.de acétique
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glacial).
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Pour Ilanairset on sèche ce produit p@ildant une nuit sur du pentoxydo de phosphore, à 800P sous un vide pouszé.
C20H2106N, calculé: C 6Oel4% Er 5,, Il lOt521j 399t39 trouvé: C 60,34% H 5p34,é,4 N la,411,% Dans 50 ci-' environ d'éthanol a 70%, on dissout 0,5 9 (ml 1,25 m.mol) du eoMpasé carbobanzoxyld et, après avoir ajouté 1$4 <M8'" d'acide chlorhyë!x'iqe nos's'!a3. et environ 100 mg d'un Qh1abon à liD5, dé pallmd1ulM, on traits pn!/.Jl1It 60 !'i!1nutes a la tompdrature b1ante par 'Se no. On filtra, évérporàe à 30 Jusque deacloatlon et rucwistallinz au moyen de mdthanol et d'acdtate dOdt1iylo. On obtient, awec un rendement de 85%, le chlorhydrate de l'aïnide de la O-glysyl-Nbenzoyl-L-eér1ne qui tond à 188-190 , et présente un pouvoir rotatoire spécifique la]26 m + µ5 + l,50 (0 m 0,7 dans
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l'acide chlorhydrique). pour l'analyse, on sèche ce produit pendant une
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nuit sur du pontoxyde de phosphore, à 909, sous un vide poussé.
C12H1604N,Cl calculé : C 47*77% H 5#34% 0 21#21% dl 11,75% 301,73 trouvé C 47ffl5C% H 5à34% 0 20,85% 01 11,18%
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... JttI1:t!le :J..- Avec 0,65 cm3 d'une solution normale de butylate
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tertiaire de potassium dans de l'alcool buty11quê tertiaire on agite pendant 20 minutes à la température ambiante, à l'aide d'un mélangeur à vibration, une émulsion de 80 mg de perchlora-
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te de l'amide de la 0-glycyl-l-benzoyl-DL-thràonlne (0,21 m.mol produit brut) dans 20 cm3 d'alcool butylique tertiaire absolu* On ajoute au tout 15 cm3 d'eau, verso la solution limpide jaune pâle dans un excès d'AMBERLITE IR-120 humide (forme acide)
et d'AMBERLITE IRA-400 (forme basique), puis agite jusqu'à ce que le pH Boit tombé à 6 environ et qu'on ne puisse plus voir la coloration de la flemme au potassium. Apes avoir filtre la solution, on l'évaporé à se@ à 40 . On reprend le
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produit brut (44 mg m 747%) dans da liacétorie, ajoute de l'éther jusqu'à apparition d'un louche et, après avoir amorcé la cristallisation, obtient des cristaux aciculaires d'amide
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de la iO-7J'iniod'ili'Illi'"r:ilir JL.If.(.
Ces cristaux fondent,après reoristallisation . dans 1'acétone, à 157-159 . Le point de fusion du produi de comparaison est de 158-159 et le point de fusion du mélange est de 155-157 . Les spectres infra-rouges (dans le nujol) du produit de transposition et de la substance de comparaison août identiques.
Pour l'analyse, on sèche
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pendant 12 heures sur -1i pentoxyde de phosphore, à 4ao, sous une pression de 0,01 mm de mercure.
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C13H17N3O4 calculé : C 55,90 H 6,14 trouvé : C 56,17 H 6,34
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Le perchlorate de lltmlde de la 0-glycyl-N-bonsoylDL-thréonine qui est utilisé comme matière de df1pal'"t peut être préparé de la. manière suivante
A l'ester méthylique brut obtenu de manière connue
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à partir de 2,24 g (10 M.taol) de N-benzoyl-DL-tbéon1ne. on ajoute 100 a1nÎ do méthanol ammoniacal (3attl à 0?), puis con5erw@ la solution pendant 36 heures en vamo clos à la température 8.Nbi@te.
On éWliApoIrI3 à mec à 4d;) /1 rcrplC'md le résidu d,".ne de 1'acétale d'éthyle châut preip3.@ & lOé1er de pétrole., et sépare par esso age le prÓc1pité bien filtrable qui est constitué par l 'am1(e de la '-besïsoyI-DL'-théonine.
Au moyen doacétate 4-eahyle et d'éther de pëts'ole, on obtient de t1nec a1guillea d'un point de fusion de 16>- 16o (l,g S# 85%). Pour i'snéài+se, on sfJche pendant 12 heures sur du pentoxyde de phosphore, à 40 et sous une pression de 0,01 mm de mercure.
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r'CllH14N?O, calcula C 59e44 H 6e35 N 12o6G% 222,24 trouvé C 59,48 H 6,50 N 12,76%
A - 75 , on ajoute à une solution de 0,42 g de
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carbobenzoxy-glyolne (2 m,mol) dans 3,2 em3 de tétrahydrofuranne absolu et 0,28 CE)? (2 m.mol) de triéth7lamine, 1,32 car (2,9 m.mol) d'un* solution de phosgène dans du toluène absolu, puis laisse reposer pendant 15 minutes en agitant de temps en
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temps.
On ajoute au produit laiteux formé une solution de
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0,22 g d'amide de la N-:benzo11-DX,,,-thréon1né (1 m.mol) dans 4 em3 de pyridine, laisse le mélange 3aune-pale repouer pendant 24 heures à 0 , chauffe à. "0 , laissa reposer pendant 15 minutes et évapore à la m@me température juoqulà ce qu'il reste une huile visqueuse. On reprend cette dernière dans 70 CET d'acétate d'éthyle, lave la solution avec 20 cm3
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d'acide chlorhydrique biOMns.1, avec 50 -,m3 de bicarbonate de poteaslum è. 10%,$ ainsi qu9avee 50 ojo <3''una solution sature de chlorure de sodium, puis sèche sur '.,j sulfate de sodium.
On évapore là 40 jusqu'à d!H)1ct:ltion.l' repend le produit brut (0,38 g - 91,7%) dans peu d'acétoa:1 et ajoute de l'éther de pétrole jusqu'à apparition d'un loucher il
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cristallise peu à peu de tlneu aiguillas d'amide de la 0-(Ncarbobenzoxy-glycyl)-N-bonzo7l-DL-thréoiilne,, d'un point de fusion de 136-l40'\ Apres recristallisation au moyen d''aeéton@ et d'éther de pétrolej, ce produit fond à.138-1409. Pour l'analyse, on sèche pendant 12 heures sur du pentoxyde de phosphore, à 40 et sous une pression de 0,01 mm de mercure.
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021H If-Oe Calculé C 61,01 H 5,61 N po,11 0 23..22% 413,4a trouvé : 0 60,80 H 5,71 N 10,14 0 23,a1%
Après avoir ajouté 50 mg d'un charbon à 10% de pal- ladium, on traite pendant 40 minutes par de l'hydrogène (fin du dégagement de CO2) une solution de 0,1 g d'amide de 0-
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(N-carbobenzoxy-glycyl)-N-benzoyl-thréonine (0,25 m.mol) dans
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15 car d9$clde acétique glacial et 0,25 duune solution 'normale d'acide perchlorique dans de 1!c1e cét1v.e sla1al.
-Apres avoir filtré la molution, on 1 évapora à '0 JuCqulà denalcation et conserve dans un exalcatour, sur de lhydroxyde de potassium, le peechlorate nu11eu: de 1m1de de la 0-g3.ysyl'-NeKsoyl"3L-th2'êûnine.
E1e 6.
Dans 100 em3 ano1d acétique glac4al, on dissout lt09 (2 m.mol) (Ps.m:U.1é tle la. O-eas'bobeasos'-L-pMElalany)-" w-benzoyi-11-ù4ryi-jlycin@, +xjou e 2 en? cil 0 G!Q:1dG ehlos'hs'ique et 260 mg (! 'un oh±\1'bO&1 à 10% de palladiui.1:> ];'lui" traite rar de l'hydrogène juoqult osst1on du àôz.m*eràent de 0 2.
Apr0Z evo1 tiltrÓ la oolutionp on la débw3 le pluz complètement possible de l'acide acétique, reprend le réoldu dans 100 em3 <3e d1méthylform1d absolu, puis ajoute à la solution obtenue 5 ça" d'une solution normale de butylate tortlalee de potassium dans du bute-Mol tortialre absolu. Tout en agitant.. on laisse réagir perdant 10 minutes à 25 0 ajouts environ 10 m1111-équ1valents d'ADM--nLl"u IR-120 (forme aolde)p environ 3 mil11équivalentu <3'AERLITE mA-400 (forme basique) et 100 cm 3 d'eau. Lorsqu'on a agité pendant 15 minutes., la solution présente une réaction neutre. On filtre, évapore iL sec sous vide de la faqon la plus ménagée possible en a30utan de l'eau a plusieurs repl'leGs,.repl'en4 dans peu de dlméthylformamido sec et fait cr1stal11soX' en ajoutant de l'éther
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absolu. Le rendement est de 6Qµ.
Lte.m1de de dia Lrbonzo7l-Lque l'on obtient ainsi eorme des aiguilles qui fondent à 261-265 0 et peéuontent un pouvoir rotatoire spécifique [aJË5 - - 2011 (0 , Ot78 dans le dîméthylformamlde).
L'amide de la C(oabcbssosy-L"n?la.3.anyl-N<' benzÓyl8ér1-glyc1ne utilisé comme mat1#@ de dépss't;, peut être obtenu de la m@K!@ manl"nre que 1' lée de 1 0-(es2'bc"benzox1-g1cyl>-N-b0nzo1-LeSérine décrit dana leeBpl's 4
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à partir de 1.'amide de la (et. ex.4)
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et de oarbabenzoxy-L-phéniqlaieninz, Il tond 2!. 1890 ot prézante un pouvoir rotatolre spéo1t:tq1e [C1.]O IIIJ '-105 11150 (0 .. oe63 dans le tëyayotraïl's).
- Beem Dans 20 OM3 <l'acide t\cdt1que glacial C?ôaolu1 on met en suspension 415 mg (1 m.l:i1(1) d'sm1de de S'-eax'bobesoxyglyûyl)-beïisoyl-cy8t;iR et 320 g Î2 m.mol) dflodure de phospbon1um, secoue deux heures et demie na 60 , ajoute là nouveau 320 ma doloduro de phoophonltm* zecoue encore deux heures et demie à 60 , évapore a sec sous vide. ajoute au résidu 10 cm de benzene, évapore a nouveau à ses eo# vide et traite encore le rée1du uns seconde et une troisième fois de la m@me manière avec du benzène.
Après addition de 10 on:? de butanol tertiaire absolu, on ajoute 5 am3 d'une solution normale de butylate tertiaire de potassium an8 du butanol
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tertiaire, agite 3tu minutes à 25 et ajoute 0,35 oar Î3 iu-mol) de chlorure de benzyle et 3 ci > deuno solution normale éo butylate tertiaire de potassium, acouc deux heuK'e?s à 25 et évapore ensuite lu 000 sous vide.
On répartit le résidu entre 50 1±9 5A P dC4i 4s.w t1éthyle et 20 en3 a'a.aide ôt,d.'5; tn G b1nor-malJ séxe.xie par tilr&t1on un ps'H de submt8nc non dissoutee extrait la phase éPc.ctH;:,te dUéthyle aVê@ de la-eMe C'3,é3''3.'a âd."t b1noX'fj1" a1!'Q 1Z1 lU e(:1ul' avec .31.; solution binozizKale d'hyd3fioxyì- 'Se aoÓ!1m, 2.a."!?e jUsG1ua x'4iDt1oi1 rA(eJ1JtX'e sèch0 et 6vaporo le solvant sous i:9 1e OEai<3u w1tx renferme lJai;1d,a do la k-beigyi-s-&otil:.,Yie sous 12 forms du compovi S-ben11c; il : n$t1vet w le nitrop$1ate do aoctlum.
Pou là rlt1atin d6 ee ,"ld's9 on le $'"ss'±1".'y."'"J'.. mu de . g ,a3nJ" âgalum1ni aoi<cio on Obtient à 3<at pur 1 amY.ùc dé le. y3-' a 90.--': .-,cyté11-zlyoin dnun poist de, iusion de 138-139 et drun pouvoir otato1 péc1f1que Q)21 - "Ë9,T (0 m âa ïw'diWll GIt4v 11 éthanol 95% > Loamlde de la :.seaoanoX-,el)-NabenzoylL-cysté1ne utilise comme mati@e de départ peut étpe obtenu de la façon suivante g A -15 h on recouvre avec 10 em3 de chlorure de theonyle, 2,08 gaz (10 m.mol) d'amide de N-benzoyI-L-séyine {ct.ex.4h laisse reposer pendant 30 minutes gaz -15 en agitant de temps en temps tout passe en solution; on maintient ensuite le
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mélange réactionnel pendant une heuie à 250.
La (}w1stal11aa- tien se produit alors* On évapore le chlorure de thionyle
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sous Vide, ajoute au résidu 30 cm3 de chloyofopfss et 50 am3 d'une solution b1normale de carbonate do mod1um, agite bien, aépere, lave à nouveau la solution ohlorotorw1ue avec du carbonate de sodium,puis à l'eau, la sèche et l'évapore sous vide. On dissout le résidu dans de l'eau et le décolore avec
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du charbon. A 0 , il se produit la cristallication de la 2phényl-4-oarhamido-oxazoline. Le rendement est da 60%.
On agite 1ntimement 1#0 g (5 m.mol) de l'c#asoline avec 2,07 g (10 m.mol) de N-carbobenZox;l-th1og1ycine [obtenue à partir de caybobensosy-glyoine et deh7droiene sulfure de manière connue,, par exomple suivant la Mdthode ta leanhydrldee et. Sheshan et Johnson 01 J. Amer. Chem. Sou." Z4 4727 < 1952 )1, puis chauffe pendant 3 heures au bain de vapeur ef. à ce propos CE.M. Frey, " J. of orsanie Chem. il !2-, 438 (1950)]. La masse fondue est malaxée avec 50 CFl1' d" acétate dgéthzrle et le produit rdactionnel insoluble est sépar6 par filtration.
L'acide de la 8-(oarbobenzoxy gljoyl)-Fi-benùoyl-L-cystéino que l'on obtient ainsi est suffisamment pur pour le traitement ultérieur.
Exemple 80
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A 5,2 g (30 m.mol) d'ester 1sopropylique de leueine fortement séché, on ajoute 460 mg (3 m.mol) de chlorhydrate de l'amide de la sérine, 200 mg de carbonate de potassium
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fmî<3h<<mt oalciné S'l ;z" ±:'u.ao sol-ëic nas 'e t>u tjllù%;ii %o Bie4ro @ pas-ssS. >1=:iixw tlta 1;iitùù>ol teZ'iaÜ3:: On aite le m61enZ0 pen6aoe-.t S- izeiu:##a 25 la i;i= oad.tô sesteat p" &ygexziv*iaei;tv i 1 se ptoàiizit 1,Qi#,lcooàyi:e de l"@3t7 iGCppyiqui; de le leucilxa 1 Ire, a3.coe3.:Iq <S8 3-i- iéi?inoEn =ai.làec bà#1.q>i<-, 1' <à5=,tiô> {3 la Q*-1< r;# Ti..t Jg.ii;e ae Sùi+>,nt'p kxù en ami-de <3e 3.s s'Heâns' l1 'iijj?G#ioxi ?.e ali,eo=31,1.gj%x;
à.baiait t6jénà#=é et i:o#v';i;i-- pa?? %Ultxc %;he.qUe p&à> .s.?,oot-1t=éi& ,t1 GY' r% zifi3,#ci.iJge ù"eml*1 iaop;o<xpjj;li;#ie e 2.a 3.e'sâ. Z *:iiie= & so fos'ma .a3.ox's se transpose 5's?a.u en >*<53;énù>aiit à ' ty<>mijia, etc. Il oc l'o:oKe Ein asi)'!?.f? ù#- la zoµJ1r?, z=nZài3.ottci.ix¯z m>i#±r#ce?, est oaolciaest B; ;?ii;:ùi <1> 3.*n!ae d:- è l<Eay3.s;J#=à/1-po3,j;11.*;ioeinaa uy S#zoà**à. 2,9 prg=oùilô à<>t;:lonik1-1, <>o élimine 3.os fra,oiifl-cniz &3.s.3.@s a 23 so uii vJ,e?ie pJ>aar'él, ajoute ensuite 10 c3 dec1d Jtiqu no² l 15 eilr3C e,lu do faeide C1.Qti".u$' g3.Mi&l ju;?zu'l- ac Mna =é>àsa<><liion ';libloEizant ansda (pil 5 6), nl-01:;e jiz3¯vi'é; ce qice le. !'t'rM)101Zl ixYSolub3.e eoit deuenue g anuXeuso, fliî" o e';
1,iàva srzù:àlso tond aW<i-C de l'eav. te polË!sre Pen-&:>;,e b#zi;oa-ip de leo1na à coté d'un poM de ér1nez il est Inaoluble ëssa 1 eiia, dans une solution b1nomal d?h-=à>cx'ùe de oo4lura ou CÎOna l'alcool,, et soluble dans du phénol à 80% ou dans de l'acide chlorhydrl' que conconts-6 (d D 119)' Au lieu de Chlol'hi1r$.1.te de l"asa.do de la sérine, on peut aussi utilise? un autre nel, par exemple le broN-
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hydrate.
Les matières de départ indiquées ci-dessus peuvent être obtenues de la façon suivante a) On sature une suspension de 30 g de leucine dans
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300 em3 d'isopropanol absolu avec du gaz chlorhydrique sans 'refroidir, fait bouillir une heure à refluxp êvaporG à sec sous vide, ajoute au r6oldu 100 em3 d'smmon1aqu# eonoentrée, et extrait l'ester avec de l'éther.
En distillant la solution après l'avoir séchée (carbonate de potassium); on obtient 31 g
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(76%) d'enter 1aopo11que de la leucine, qui bout à 82-830 sous une pression de 10 ma. b) On estérifie de la osybcbenscsy-séx'iRe à l'aide de dlazomèthane,, transforme l'ester, avec une solution mêthanolique ùtewmoniaque, en amide de carbobGnZoT.y-eér1na (fondant à 110-1110), puis débenzyle ce a6n1e9 avec de l'hydrogène clans du méthanol a 60%t en présence de charbon au PQllo.â1um et d'un équivalent du chlorhydrate aqueux normal, on obtient le chlorhydrate de l'amide de la sérine qui cristallise au moyen d'eau et d'acétone et fond à 198-200 ; on peut aussi
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obtenir le bï'otahyds'ate qui cristallise au moyen d'éthanol et d'acétone et fond à 170-172 .