BRPI0706676A2

BRPI0706676A2 - métodos de tratamento ou prevenção de peritonite com solução aquosa com potencial de oxirredução

Info

Publication number: BRPI0706676A2
Application number: BRPI0706676-7A
Authority: BR
Inventors: Hojabr Alimi; Andres Gutierrez
Original assignee: Oculus Innovative Sciences Inc
Priority date: 2006-01-20
Filing date: 2007-01-22
Publication date: 2011-04-05
Also published as: US9782434B2; JP5723084B2; EP1993571B1; EP1993570A2; CA2637197A1; US20180028562A1; US20150306137A1; US8147444B2; JP2009523830A; WO2007085019A3; CA2637178C; KR20080093135A; WO2007085018A2; JP5449780B2; US20070196434A1; US8834445B2; AU2007205861A1; WO2007085021A2; US20070196357A1; AU2007205860B2

Abstract

MéTODOS DE TRATAMENTO OU PREVENçãO DE PERITONITE COM SOLUçãO AQUOSA COM POTENCIAL DE OXIRREDUçãO. é fornecido um método para tratamento ou prevenção de peritonite por administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma solução aquosa com potencial de oxirredução (ORP) que é estável por pelo menos cerca de vinte e quatro horas. A solução aquosa com ORP administrada de acordo com a invenção pode ser combinada com um ou mais veículos adequados, e pode ser administrada em conjunto com um ou mais agentes terapêuticos adicionais. Ainda é fornecido um método para a prevenção de hemorragia, adesões e abscessos peritoneais.

Description

MÉTODOS DE TRATAMENTO OU PREVENÇÃO DE PERITONITE COMSOLUÇÃO AQUOSA COM POTENCIAL DE OXIRREDUÇÃO

REFERENCIA CRUZADA COM PEDIDOS RELACIONADOS

Este pedido de patente reivindica o benefício dosPedidos Provisórios de Patente Nos U.S. 60/760.635,depositado em 20 de janeiro de 2006, 60/760.567, depositadoem 20 de janeiro de 2006, 60/760.645, depositado em 20 dejaneiro de 2006, e 60/760.557, depositado em 20 de janeirode 2006; todos aqui incorporados por referência em suastotalidades.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

A peritonite é uma inflamação do revestimento internoda cavidade abdominal. As causas mais comuns da peritonitesão infecção bacteriana e irritação química. A peritonitebacteriana é normalmente secundária ã penetração bacterianaatravés de um órgão abdominal, como ocorre com distúrbios- como' apendicite, colecistite aguda, úlceras pépticas,diverticulite, obstrução intestinal, pancreatite, trombosemesentérica, doença pélvica inflamatória, tumor ou traumapenetrante, ou combinações destes. Além disso, a peritonitebacteriana espontânea (SBP) pode se desenvolver sem umafonte de contaminação óbvia. A SBP está freqüentementeassociada a estados de imunossupressão como, por exemplo,ascite cirrótica ou a síndrome nefrótica. A peritonitetambém é uma complicação comum da diálise peritonealambulatorial crônica (CAPD).

Embora praticamente todos os organismos tenham sidoimplicados na peritonite bacteriana, os organismos maiscomuns são Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa,Staphylococcus aureus, C. perfingens, Neisseria gonorrhea,Chlamydia trachomatis, Mycobaterium tuberculosis, Chlamydiatrachomatis, Clostridium perfringens, estreptococos eenterococos. Os fúngicos mais comuns que causam peritoniteinfecciosa são Candida albicans, Candida parapsilasis eAspergillus fumigatus. Peritonite química não infecciosapode ser causada por materiais estranhos introduzidos noperitônio, por exemplo, durante cirurgia ou por trauma. Aperitonite química também pode se desenvolver em condiçõescomo, por exemplo, pancreatite aguda, que introduzemmateriais endógenos irritantes, tais como enzimasdigestivas ou bile, dentro da cavidade peritoneal.

Adesões e abscessos peritoneais são complicações delongo prazo freqüentes da peritonite. Adesões peritoneaissão conexões anormais de tecido fibroso entre assuperfícies serosas intraperitoneais. Cirurgia e inflamaçãoabdominal são as causas mais comuns de adesões peritoneais.A infecção peritoneal é freqüentemente acompanhada porinflamação peritoneal, incluindo exsudação de fibrinogênioe fibrina dentro da cavidade abdominal. A presença defibrinogênio e fibrina promove formação de fibrose eadesão.

A inflamação também resulta no acúmulo intraperitonealde fatores de crescimento, citocinas, proteases e matrizextracelular, o que promove ainda mais a formação defibrose e adesão. Na peritonite infecciosa, depósitos defibrina podem capturar agentes infecciosos, produzindoabscessos, os quais, por sua vez, causam mais adesõesfibrosas. Adesões peritoneais limitam o movimento e afunção normais dos órgãos intra-abdominais, particularmentea função normal do trato gastrintestinal. Adesõesperitoneais também causam dor pélvica, infertilidade eobstruções intestinais isquêmicas.

Os abscessos peritoneais são coleções fechadas demicroorganismos e células e mediadores inflamatórios (ouseja, "pus"). Os abscessos peritoneais são de difíciltratamento, pois são enclausurados por cápsulas fibrosas, oque torna difícil a obtenção de níveis terapêuticos deantibióticos dentro dos abscessos peritoneais. Os abscessosperitoneais podem ser a fonte de infecções sérias em órgãosdistantes e sépsis. Dessa forma, as adesões e os abscessosperitoneais constituem uma causa importante de morbidade emortalidade. 0 tratamento ou prevenção eficaz da peritonítepode reduzir significativamente o risco de desenvolvimentode adesões e abscessos intraperitoneais.

Os métodos usados atualmente para o tratamento ou aprevenção de peritonite são limitados. Em alguns casos, aperitonite química pode responder à irrigação da cavidadeabdominal. Foi recomendado o uso de múltiplas re-explorações e lavagem intra-operatória com grandesquantidades de soro fisiológico estéril para reduzir orisco de infecção peritoneal, peritonite e adesões pós-operatórias. No entanto, ainda há um risco significativo dedesenvolvimento de peritonite e adesões, apesar do uso delavagens repetidas com soro fisiológico estéril. Tambémforam testados vários antimicrobianos tópicos, mas nenhumfoi amplamente aceito para controle da fonte em função daausência de eficácia ou de efeitos colaterais sérios (ouseja, peritonite esclerosante). Além disso, a terapiaantibiótica sistêmica é freqüentemente necessária, mesmo sea condição tiver etiologia originalmente química.Dependendo do tipo e da gravidade da peritonite, oquadro clínico pode progredir para uma síndrome de respostainflamatória sistêmica aguda (SIRS), sépsis ou choqueséptico. A fisiopatologia dessas condições é complexa, maspode ser associada tanto à presença de infecção quanto deuma reação inflamatória aguda, local e sistemicamente.Dessa forma, mesmo nos estágios iniciais (ou seja, SIRS),há acúmulo de citocinas pró-inflamatórias na cavidadeperitoneal e no sangue que contribuem para oestabelecimento de falência múltipla dos órgãos e morte.

Essas citocinas, pelo menos em modelos murídeos deperitonite, são derivadas principalmente de mastócitosativados na cavidade peritoneal.

Conseqüentemente, há necessidade de métodosaprimorados de tratamento ou de prevenção de peritonite. Apresente invenção fornece tais métodos. Essas e outrasvantagens da invenção, além de características adicionaisda invenção, ficarão evidentes a partir da descrição dainvenção aqui apresentada.

BREVE SUMÁRIO DA INVENÇÃO

A presente invenção fornece um método de tratamento ouprevenção de peritonite, em que o método inclui aadministração ao paciente (por exemplo, o contato do tecidoperitoneal no paciente com) uma quantidade terapeuticamenteeficaz de uma solução aquosa com potencial de oxirredução(ORP) , em que a solução é estável por pelo menos cerca devinte e quatro horas. De acordo com a presente invenção,uma quantidade terapeuticamente eficaz da solução aquosacom ORP pode ser administrada pela liberação da soluçãoaquosa com ORP ao tecido peritoneal (ou a outro) com o usode qualquer método de liberação adequado, para tratar ouevitar peritonite (ou para evitar adesões locais, abscessosperitoneais, síndrome de resposta inflamatória sistêmica efalência múltipla dos órgãos a ela associadas) . Umaquantidade terapeuticamente eficaz da água com ORP pode serliberada ao espaço peritoneal do paciente no período intra-operatório, por via laparoscópica ou transabdominal. Asolução aquosa com ORP pode ser liberada, por exemplo, aotecido peritoneal afetado por peritonite ou ao tecidoperitoneal em risco de desenvolver peritonite (por exemplo,como em conseqüência de cirurgia, procedimentosdiagnósticos laparoscópicos, lesão, infecção, doença,reação alérgica, contato com um ou mais irritantes químicosou proximidade com tecido lesionado, danificado e/ouinfectado, e semelhantes).

A lavagem peritoneal, por exemplo, enxágües repetidosdo peritônio com a solução aquosa com ORP, pode ser usadapara realizar o método da presente invenção. A soluçãoaquosa com ORP pode ser retida na cavidade peritoneal porqualquer período de tempo adequado, por exemplo, um períodode tempo eficaz para fornecer uma resposta terapêutica, quepode ser segundos, minutos, horas ou dias. Em umamodalidade, a presente invenção fornece um método detratamento ou prevenção de peritonite, cujo método inclui oacesso ao espaço peritoneal, por exemplo, cirurgicamente oupor via transabdominal; a liberação ao espaço peritoneal dopaciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz dasolução aquosa com ORP, por exemplo, cerca de 1-10 litros,permitindo que a água permaneça no espaço peritoneal por umperíodo de tempo suficiente para efetuar uma respostaterapêutica, por exemplo, segundos, minutos ou horas;opcionalmente, a remoção da solução aquosa com ORP doespaço peritoneal; opcionalmente, a remoção da soluçãoaquosa com ORP do espaço peritoneal; opcionalmente,liberação de soro fisiológico ou de outra soluçãofisiológica, antes ou depois da liberação da água com ORP;e, opcionalmente, repetição da lavagem peritoneal porquantas vezes forem necessárias.

A presente invenção ainda fornece um método deprevenção de adesões peritoneais ou abscessos peritoneaisem um paciente, cujo método inclui a administração aopaciente (por exemplo, contato do tecido peritoneal nopaciente com) de uma quantidade terapeuticamente eficaz deuma solução aquosa com potencial de oxirredução (ORP), emque a solução é estável por pelo menos cerca de vinte equatro horas.

A síndrome de resposta inflamatória sistêmica (SIRS) éuma síndrome que engloba as características de inflamaçãosistêmica sem dano ao órgão final ou bacteremiaidentificável. A SIRS é uma entidade separada e distinta dasépsis, sépsis grave ou choque séptico. A distinçãofundamental entre a SIRS e a sépsis é a presença de umpatógeno identificado no sangue. A fisiopatologia da SIRSinclui, sem limitação, ativação de complemento, secreção demetabólitos de citocina e ácido araquidônico, estimulaçãoda imunidade mediada por células, ativação das cascatas dacoagulação e mecanismos imunes humorais. Clinicamente, aSIRS é caracterizada por taquicardia, taquipnéia,hipotensão, hipoperfusão, oligúria, leucocitose ouleucopenia, febre ou hipotermia, acidose metabólica e anecessidade de reposição de volume. A SIRS pode afetartodos os sistemas orgânicos, e pode levar à síndrome defalência múltipla dos órgãos (MODS).

Conseqüentemente, a presente invenção ainda fornece ummétodo de prevenção de falência múltipla dos órgãossecundária à peritonite e relacionada ao desenvolvimento deSIRS ou sépsis, cujo método inclui a administração aopaciente (por exemplo, contato do tecido peritoneal nopaciente com) de uma quantidade terapeuticamente eficaz deuma solução aquosa com potencial de oxirredução (ORP) parainibir a secreção de novas moléculas pró-inflamatórias pormastócitos, e reduzir a carga bacteriana, em que a soluçãoé estável por pelo menos cerca de vinte e quatro horas.

A solução aquosa com ORP pode ser administrada emqualquer forma adequada de acordo com a presente invenção,por exemplo, como um líquido, spray, névoa, aerossol ouvapor, isoladamente ou em combinação com um ou mais agentesterapêuticos adicionais e, se desejado, pode ser formuladaem combinação com um ou mais veículos adequados, por20 exemplo, veículos, adjuvantes, excipientes, diluentes, esemelhantes.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com apresente invenção pode estar contida dentro de umrecipiente adequado (por exemplo, um recipiente lacradoestéril) no qual a solução seja estável por pelo menoscerca de vinte e quatro horas. A solução aquosa com ORPadministrada de acordo com a invenção pode ser produzidapor eletrólise e, preferivelmente, compreende uma misturade água oxidada [anode water) e água reduzida (cathodewater), que contém uma ou mais espécies, incluindo, porexemplo, uma ou mais espécies reativas, espécies iônicas,espécies de radicais, precursores destes e combinaçõesdestes.

Em outra modalidade, a solução aquosa com ORPcompreende ácido hipocloroso em uma quantidade de cerca de15 ppm a cerca de 3 5 ppm, hipoc lorito de sódio em umaquantidade de cerca de 25 ppm a cerca de 50 ppm, é estávelpor pelo menos cerca de uma semana, e possui um pH de cercade 6,2 a cerca de 7,8. A quantidade total de espéciesquímicas oxidantes presente na solução aquosa com ORP estápreferivelmente na faixa de cerca de 2 milimolar (mM) epode incluir as espécies de cloro mencionadasanteriormente, uma ou mais espécies adicionais de águasuperoxidada (por exemplo, uma ou mais espécies deoxigênio), e espécies adicionais que podem ser de difícilmedição como, por exemplo , Cl+, ClO3, Cl2" e ClOx.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

A FIG. 1 ilustra uma célula de eletrólise de trêscâmaras para a produção de uma solução aquosa com ORPexemplar.

A FIG. 2 ilustra uma célula de eletrólise de trêscâmaras e descreve espécies iônicas que supostamente sãogeradas durante o processo de produção.

A FIG. 3 é um diagrama de fluxo esquemático de umprocesso para a produção de uma solução aquosa com ORPexemplar.

As FIGS. 4A-4C descrevem uma comparação gráfica daviabilidade celular, apoptose e necrose em fibroblastoshumanos dérmicos (HDFs) tratados com uma solução aquosa comORP exemplar (MCN) versus peróxido de hidrogênio (HP).A FIG. 5 é uma comparação gráfica dos níveis de adutosde 8-hidróxi-2'-desoxiguanosina (8-OHdG) em HDFs tratadoscom uma solução aquosa com ORP exemplar (MCN) versus 500 μΜde peróxido de hidrogênio (HP).

A FIG. 6 ilustra o envelhecimento celular demonstradopor expressão de β-galactosidase em HDFs após exposiçãocrônica a concentrações baixas de uma solução aquosa comORP exemplar (MCN) versus peróxido de hidrogênio (RP).

A FIG. 7 ilustra o efeito sobre a degranulação demastócitos ativados por antígeno tratados com váriasconcentrações de uma solução aquosa com ORP exemplar (MCN).

A FIG. 8 ilustra comparativamente o efeito de umasolução aquosa com ORP exemplar (MCN) sobre a degranulaçãode mastócitos ativados por antígeno tratados comcromoglicato.

A FIG. 9 ilustra o efeito sobre a degranulação demastócitos ativados por antígeno e ativados por ionóforo decálcio (A2318 7) tratados com várias concentrações de umasolução aquosa com ORP exemplar (MCN).

A FIG. 110-IOB são ensaios de proteção de RNAse queilustram níveis de mRNA de citocina após ataque comantígeno em mastócitos de controle versus mastócitostratados com solução aquosa com ORP.

A FIG. 12 é uma comparação gráfica da secreção de TNF-α por mastócitos ativados por antígeno tratados com váriasconcentrações de uma solução aquosa com ORP exemplar (MCN).

A FIG. 13 é uma comparação gráfica da secreção deMIPl-a por mastócitos ativados por antígeno tratados comvárias concentrações de uma solução aquosa com ORP exemplar(MCN).A FIG. 13 é uma comparação gráfica da secreção de IL-6por mastócitos ativados por antigeno tratados com váriasconcentrações de uma solução aquosa com ORP exemplar (MCN).

A FIG. 14 é uma comparação gráfica da secreção de IL-13 por mastócitos ativados por antigeno tratados com váriasconcentrações de uma solução aquosa com ORP exemplar (MCN).

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

A presente invenção fornece um método para otratamento ou a prevenção de peritonite, para a prevençãode adesões ou abscessos a ela associados, e para aprevenção do desenvolvimento de SIRS e de insuficiência demúltiplos órgãos nesses casos, cujo método inclui aadministração ao paciente (por exemplo, contato do tecidoperitoneal no paciente com) de uma quantidadeterapeuticamente eficaz de uma solução aquosa com potencialde oxirredução (ORP) , em que a solução é estável por pelomenos cerca de vinte e quatro horas. De acordo com ainvenção, a solução aquosa com ORP pode ser administrada,por exemplo, aos pacientes que possuem peritonite, possuemsintomas indicativos ou associados à peritonite, ou queestejam em risco de desenvolver peritonite (por exemplo, emconseqüência de cirurgia, procedimentos diagnósticosinvasivos (por exemplo, laparoscopia, endoscopia), lesão,infecção, doença, alergia, reação alérgica, contato com umou mais irritantes químicos, e semelhantes). Outra fontepotencial de peritonite em conseqüência de infecção seria otransplante de órgãos. Dessa forma, a solução aquosa comORP poderia ser usada para a preparação do leito de tecidoantes de transplante e/ou antes do fechamento do abdome.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção é eficaz para o tratamento ou a prevenção de (porexemplo, inibição do surgimento de, inibição do agravamentode, diminuição da probabilidade de, ou limitação)peritonite, e pode ainda evitar a formação de adesões e/ouabscessos e o desenvolvimento de IRS e de insuficiência demúltiplos órgãos a ela associada. A solução aquosa com ORPadministrada de acordo com a invenção possui potenteatividade antiinflamatória, anti-alérgica e antiinfecciosa,embora seja praticamente livre de toxicidade para tecidosnormais e células eucarióticas normais.

Clinicamente, verificou-se que a solução aquosa comORP administrada de acordo com a invenção é segura e eficazpara a redução da carga bacteriana peritoneal, e constatou-se que reduz a duração do período de internação hospitalarem pacientes com peritonite. A peritonite tratável ouevitável de acordo com a presente invenção pode incluirperitonite que resulta de, por exemplo, infecçãobacteriana, irritação química, hemorragia, ou umacombinação destes. 0 método da presente invenção pode serfeito por administração de uma quantidade terapeuticamenteeficaz da solução aquosa com ORP a um paciente que tenhaperitonite ou a um paciente em risco de desenvolverperitonite, por exemplo, por infecção, exposição a um oumais microorganismos infecciosos, cirurgias prolongadas,contato com um ou mais irritantes químicos, doença ou outracondição fisiológica que possa dar origem à peritonite, ecombinações destes.

O método da presente invenção pode ser usado para otratamento ou a prevenção de peritonite resultante, porexemplo, de cirurgia, procedimentos diagnósticos outerapêuticos invasivos (por exemplo, o uso de laparoscopia,endoscopia), apendicite, colecistite aguda, úlceraspépticas, diverticulite, obstrução intestinal, pancreatite,doença pélvica inflamatória, tumor, diálise ou lesão, porexemplo, trauma penetrante. 0 método da presente invençãoinclui o tratamento ou a prevenção de peritonite (ou aprevenção de adesões ou abscessos) causada ou complicada(por exemplo, exacerbada) por infecção, que é realizadopreferivelmente por administração da solução aquosa com ORPem uma quantidade eficaz para reduzir a carga microbianaperitoneal de um ou mais microorganismos suscetíveis. Essaperitonite pode incluir, sem limitação, peritonitebacteriana espontânea, que pode ocorrer em um pacienteimunossuprimido, em que a imunossupressão está associada,por exemplo, ã imunodeficiência congênita ou adquirida,infecção, câncer, Iinfoma, leucemia, doença autoimune, mánutrição, fármacos imunossupressores, cirrose hepática esíndrome nefrótica.

De acordo com esse aspecto da invenção, é desejávelreduzir a carga microbiana peritoneal suficientemente paratratar ou evitar peritonite, para reduzir as reaçõesinflamatórias ou alérgicas e/ou para evitar adesões ouabscessos, que pode resultar de infecção (por exemplo, porum ou mais microorganismos suscetíveis), inflamação esangramento. Microorganismos suscetíveis podem incluir, porexemplo, vírus, bactérias, esporos e fungos. Exemplos debactérias suscetíveis incluem, sem limitação, Escherichiacoli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, C.perfingens, Neisseria gonorrhea, Chlamydia trachomatis,Mycobaterium tuberculosis, Chlamydia trachomatis,Clostridium perfringens, estreptococos, enterococos, ecombinações destes. Exemplos de fungos suscetíveis incluem,sem limitação, Candida albicans, Candida parapsilasis,Trichophyton mentagrophytes, e Aspergillus fumigatus, ecombinações destes. Exemplos de vírus suscetíveis podemincluir um ou mais vírus suscetíveis aqui descritos.

A invenção também fornece métodos para a morte debactérias em biofilmes, por exemplo, Pseudomonas aeruginosaem biofilmes. A invenção ainda fornece métodos para a mortede Moraxella catarrhalis e bactérias resistentes aantibióticos, por exemplo, Streptococcus resistente apenicilina. Os métodos aqui revelados podem ser usados deacordo com a invenção para a morte de bactérias com o usode soluções de água com ORP mais rápido do que com autilização de bacitracina.

0 método da presente invenção também pode ser eficazpara o tratamento ou a prevenção de peritonite (ou aprevenção de adesões ou abscessos a ela associados), quenão são necessariamente causados por infecção. Essainflamação pode incluir inflamação causada, por exemplo,por reação alérgica, contato com e/ou exposição a um oumais irritantes (por exemplo, irritantes químicos), diátesehemorrágica, e combinações destes. Essa inflamação tambémpode incluir inflamação que resulta da lesão ou do dano detecidos, por exemplo, tecido peritoneal ou outro tecido, emque a lesão ou o dano pode levar ou aumentar aprobabilidade de peritonite. Tecidos que podem serlesionados ou danificados podem incluir, por exemplo, orevestimento peritoneal, o mesentério, epíplon, órgãosabdominais, órgãos pélvicos, e um ou mais tecidos no espaçoretro-peritoneal. A lesão ou o dano pode ser causado, semlimitação, por cirurgia, laparoscopia, endoscopia, lesão,doença (por exemplo, câncer, doença sangüínea, doença deórgão, doença de tecido, e semelhantes), diálise ecombinações destes.

O método da presente invenção também pode ser eficazpara o tratamento ou a prevenção de peritonite (ou aprevenção de adesões ou abscessos) associada ao tecidolesionado ou danificado colonizado ou infectado com um oumais microorganismos como, por exemplo, vírus, bactériase/ou fungos, que são suscetíveis à solução aquosa com ORPadministrada de acordo com a invenção. Bactériassuscetíveis podem incluir, por exemplo, Escherichia coli,Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, C.perfingens, Neisseria gonorrhea, Chlamydia traehomatis,Myeobaterium tubereulosis, Chlamydia traehomatis,Clostridium perfringens, estreptococos sp. , enterococos, ecombinações destes. Fungos suscetíveis podem incluir, porexemplo, Candida albieans, Candida parapsilasis, eAspergillus fumigatus, e combinações destes. Vírussuscetíveis podem incluir um ou mais vírus suscetíveis aquidescritos.

O método da presente invenção ainda inclui a prevenção(por exemplo, inibição do surgimento de, inibição doagravamento de, diminuição da probabilidade de, oulimitação) de SIRS e de falência múltipla dos órgãos em umpaciente com peritonite pela liberação ao espaço peritonealdo paciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz deuma solução aquosa com ORP, em que a solução é estável porpelo menos vinte e quatro horas. Embora sem se fixar anenhuma teoria em particular, acredita-se que a soluçãoaquosa com ORP administrada de acordo com a presenteinvenção trate ou evite o processo inflamatório subjacentena cavidade peritoneal necessário para o desenvolvimento deSIRS e de falência múltipla dos órgãos. Além disso,acredita-se que a solução aquosa com ORP administrada deacordo com a invenção iniba a secreção de moléculas pró-inflamatórias que podem se acumular na cavidade peritonealdurante peritonite. Conseqüentemente, acredita-se que aadministração da solução aquosa com ORP em uma quantidadeeficaz para tratar ou evitar até mesmo peritonitesubclinica possa evitar a progressão até a SIRS e afalência múltipla dos órgãos.

Surpreendentemente, verificou-se que a solução aquosacom ORP administrada de acordo com a invenção é um inibidoraltamente eficaz da degranulação de mastócitos, uma dascascatas biológicas primárias que causam inflamação naperitonite. A solução aquosa com ORP administrada de acordocom a invenção inibe a degranulação de mastócitos,independentemente do fato de eles serem ativados com umantígeno ou um ionóforo de cálcio. Tambémsurpreendentemente, verificou-se que a solução aquosa comORP administrada de acordo com a presente invenção inibenão seletivamente a secreção de citocinas pró-inflamatóriasem mastócitos. Por exemplo, a solução aquosa com ORP dapresente invenção pode inibir a secreção de, por exemplo,TNF-ct, ΜΙΡ1-α, IL-6 e IL-13 em mastócitos. Acredita-se quea solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção também possa inibir a secreção de citocinas pró-inf lamatórias em outras células que secretam citocina.Esses achados demonstram que a solução aquosa com ORPadministrada de acordo com a presente invenção deve exibirampla eficácia anti-alérgica e antiinflamatória, o que édesejável para o tratamento ou a prevenção de peritonite,para a prevenção de adesões e abscessos a ela associados, epara a prevenção do estabelecimento de SIRS e de falênciamúltipla dos órgãos que pioram o prognóstico nesses casos.

Acredita-se também que tenha sido possivelmente observadoum efeito hemostático na prática clínica, e essapropriedade poderia ainda ser outro mecanismo pelo qual asolução aquosa com ORP reduziria a formação de fibrose eabscesso. Embora os requerentes não queiram se fixar anenhuma teoria em particular, acredita-se que, para evitaradesões peritoneais, abscessos, SIRS e falência múltiplados órgãos, ocorra uma atividade antimicrobiana, anti-alérgica e antiinflamatória combinadas, e a solução aquosacom ORP pode ainda fornecer possivelmente um efeitohemostático suficiente para melhorar completamentehematomas (coágulos sangüíneos intersticiais).

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção preferivelmente inibe a degranulação de mastócitosem mais de cerca de 50% em relação aos mastócitos nãotratados, mais pref erivelmente em mais de cerca de 8 0% emrelação aos mastócitos não tratados com, ainda maispreferivelmente, em mais de cerca de 90% em relação aosmastócitos não tratados com, e ainda mais preferivelmente,em mais de cerca de 95% em relação aos mastócitos nãotratados com, quando colocados em contato com a soluçãoaquosa com ORP por até cerca de 3 0 minutos, maispreferivelmente, por até cerca de 15 minutos e, ainda maispreferivelmente, por até cerca de 5 minutos. De acordo como método da invenção, a secreção de histamina (por exemplo,por degranulação) pode ser terapeuticamente inibida pelaadministração da solução aquosa com ORP isoladamente ou emcombinação com um diluente (por exemplo, água ou sorofisiológico). Por exemplo, a secreção de histamina pode serterapeuticamente inibida por administração de composiçõesnas quais a solução aquosa com ORP é diluída, por exemplo,por uma proporção de até cerca de 50% (vol/vol) de soluçãoaquosa com ORP/diluente, por uma proporção de até cerca de25% (vol/vol) de solução aquosa com ORP/diluente, por umaproporção de até cerca de 10% (vol/vol) de solução aquosacom ORP/diluente, por uma proporção de até cerca de 5%(vol/vol) de solução aquosa com ORP/diluente, ou até mesmopor uma proporção de até cerca de 1% (vol/vol) de soluçãoaquosa com ORP/diluente.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção também inibe preferivelmente a secreção de TNF-aem mais de cerca de 50%, mais pref erivelmente em mais decerca de 60%, ainda mais preferivelmente, em mais de cercade 70%, e ainda mais pref erivelmente, em mais de cerca de85%. Além disso, a solução aquosa com ORP administrada deacordo com a invenção também inibe preferivelmente asecreção de ΜΙΡ1-α em mais de 25%, mais pref erivelmente emmais de cerca de 50% e, ainda mais preferivelmente, em maisde cerca de 60%. Além disso, a solução aquosa com ORPadministrada de acordo com a invenção também inibepreferivelmente a secreção de IL-6 ou IL-13 em mais de 25%,mais preferivelmente em mais de cerca de 50% e, ainda maispref erivelmente, em mais de cerca de 60%. De acordo com ométodo da invenção, a secreção de citocina pode ser inibidaterapeuticamente pela administração da solução aquosa comORP isoladamente ou em combinação com um diluente (porexemplo, água ou soro fisiológico). Por exemplo, a secreçãode citocina pode ser inibida terapeuticamente poradministração de composições nas quais a solução aquosa comORP é diluída, por exemplo, até cerca de 50% (vol/vol) desolução aquosa com ORP/diluente, até cerca de 25% (vol/vol)de solução aquosa com ORP/diluente, até cerca de 10%(vol/vol) de solução aquosa com ORP/diluente, até cerca de5% (vol/vol) de solução aquosa com ORP/diluente, ou atémesmo cerca de 1% (vol/vol) de solução aquosa comORP/diluente.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção pode ser usada para o tratamento ou a prevenção deinflamação mediada por células e inflamação resultante deuma reação autoimune incluindo, sem limitação, inflamaçãocausada por lúpus eritematoso sistêmico, tireoiditeautoimune, sarcoidose, doença inflamatória do intestino,artrite reumatóide, e febre reumática. A solução aquosa comORP administrada de acordo com a invenção também podetratar ou evitar inflamação resultante de infecção, porexemplo, por um ou mais microorganismos selecionados dogrupo que consiste em vírus, bactérias e fungos, incluindohipersensibilidade e inflamação com mediação autoimunecausada por infecção.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção também pode ser usada para o tratamento ou aprevenção de inflamação associada à hipersensibilidade.

Historicamente, as reações de hipersensibilidade foramclassificadas como um entre quatro tipos, dos quais podesurgir doença significativa. A solução aquosa com ORPadministrada de acordo com a invenção pode ser usada paratratar e/ou evitar (por exemplo, inibir o surgimento de,inibir a progressão de, diminuir a probabilidade de,limitar ou suprimir) uma ou mais dessas reações. Ahipersensibilidade do Tipo I tipicamente resulta dacombinação de um antígeno com um anticorpo ligado a ummastócito ou basófilo. As reações do Tipo I ocorrem em umintervalo de minutos de exposição ao antígeno em indivíduosque foram sensibilizados previamente ao antígeno. Em seremhumanos, as reações do Tipo I são mediadas por IgE, quepossui receptores Fc de alta afinidade em mastócitos ebasófilos.

O papel dos mastócitos na hipersensibilidade do Tipo Ié especialmente importante, pois eles residem em tecidossob a superfície epitelial próximo aos vasos sangüíneos enervos. Vários sintomas clínicos observados na dermatiteatópica, rinite alérgica e asma atópica são produzidos porestimulação de antígeno por IgE de mastócitos localizadosem diferentes tecidos afetados. A visão aceita atualmenteda patogênese de condições como, por exemplo, asma atópica,é que alérgenos iniciam o processo pelo acionamento demastócitos pulmonares que abrigam IgE (MCs) para aliberação de mediadores como, por exemplo, histamina,leucotrienos, prostaglandinas, cininas, fator de ativaçãode plaquetas (PAF) etc. na denominada fase inicial dareação (veja Kumar e cols., Robbins & Cotran "PathologicBasis of Disease" , 2004, pp. 193-268, que é aquiincorporado por referência). Por sua vez, esses mediadoresinduzem broncoconstrição e aumentam a permeabilidadevascular e a produção de muco. De acordo com esse modelo,após a ativação de mastócitos, aquelas células secretamvárias citocinas, incluindo fator de necrose tumoral alfa(TNF-α), IL-4, IL-5 e IL- 6, que participam no recrutamentoe na ativação locais de outras células inflamatõrias como,por exemplo, eosinófilos, basófilos, linfócitos T,plaquetas e fagócitos mononucleares. Essas célulasrecrutadas, por sua vez, contribuem para o desenvolvimentode uma resposta inflamatória que pode então se tornarautônoma e agravar os sintomas asmáticos. Essa resposta dafase tardia constitui um processo inflamatório de longoprazo que irá induzir alterações nos tecidos circundantes(Kumar e cols., pp. 193-268) . Clinicamente, as reações doTipo I podem ter efeitos locais como, por exemplo, rinitealérgica, ou efeitos sistêmicos, como encontrado naanafilaxia, os quais, eles próprios, podem se manifestarcom coceira, urticária, sofrimento respiratório e colapsocirculatório.

A hipersensibilidade do Tipo II é mediada poranticorpos dirigidos aos antigenos nas superfícies decélulas e no espaço extracelular. Esses anticorpos podemdirigir a Iise celular ou causar a opsonização dasmoléculas-alvo (preparação para a fagocitose por outrascélulas). Alternativamente, os anticorpos podem serdirigidos para e ativar receptores da superfície celular.As condições que resultam de reações do Tipo II incluemreações a transfusões, doença de Graves (tireotoxicose),reações a fármacos, anemia perniciosa e febre reumáticaaguda. Na febre reumática, os anticorpos são formadoscontra antígenos estreptocócicos, mas reagem de formacruzada com tecidos humanos como, por exemplo, as valvascardíacas.

A hipersensibilidade do Tipo III é causada porcomplexos imunes, que são combinações de anticorpos eoutras proteínas do sistema imunológico do hospedeiro, maistipicamente proteínas do complemento. É a função normal dosanticorpos se ligar e ativar o complemento. No entanto,quando os complexos imunes macromoleculares resultantes nãosão processados adequadamente, eles podem produzir danotecidual persistente. Macrófagos e PMNLs podem ser ativadospor complexos imunes e induzir a liberação de substânciasquímicas tóxicas por essas células. As reações ao complexoimune podem ser locais e podem causar condições como, porexemplo, uma reação artro, ou causar doença sistêmica como,por exemplo, doença do soro ou alguns dos aspectos do lúpuseritematoso sistêmico (LES).

A hipersensibilidade do Tipo IV é mediada por célulase é denominada algumas vezes hipersensibilidade do tiporetardada. A hipersensibilidade do Tipo IV é mediada porlinfócitos T e freqüentemente resulta na formação de umareação granulomatosa. Em uma reação granulomatosa, umaforma de macrófago denominada célula epitelióide tenta, masnão consegue, digerir um antígeno. A persistência doantígeno leva à liberação de citocinas que atraemlinfócitos adicionais, resultando em focos crônicos deinflamação. Os focos possuem concentrações elevadas delinfócitos T citotóxicos que liberam granzimas e perforinasque são tóxicas para as células adjacentes. Ahipersensibilidade do Tipo IV é um componente proeminentede doenças autoimunes como, por exemplo, síndrome deSjògren, sarcoidose e dermatite de contato.

Estados patológicos podem combinar diferentes tipos dereações de hipersensibilidade. Em doenças autoimunes,antígenos do hospedeiro estimulam a hipersensibilidade comconseqüências sérias para o hospedeiro. Por exemplo, nolúpus eritematoso sistêmico, antígenos do hospedeiroinduzem reações do Tipo II contra células sangüíneas,enquanto reações do Tipo III causam lesão dos vasossangüíneos e glomerular renal. Além disso, também sãoobservadas reações de hipersensibilidade em condiçõesiatrogênicas como, por exemplo, reações a fármacos erejeição a transplantes. A rejeição a transplantes incluicomponentes de hipersensibilidade do Tipo II e Tipo IV.

Verificou-se que a solução aquosa com ORP administradade acordo com a invenção é praticamente isenta detoxicidade para tecidos normais e células mamíferasnormais. A solução aquosa com ORP administrada de acordocom a invenção preferivelmente não causa diminuiçãosignificativa na viabilidade de células eucarióticas, nãocausa aumento significativo da apoptose, não causaaceleração significativa do envelhecimento celular e/ou nãocausa dano oxidativo significativo do DNA em célulasmamíferas. A não toxicidade é particularmente vantajosa etalvez até mesmo surpreendente, considerando que o poderdesinfetante da solução aquosa com ORP administrada deacordo com a invenção é aproximadamente equivalente àqueledo peróxido de hidrogênio, embora seja significativamentemenos tóxica do que o peróxido de hidrogênio é para tecidosnaturais e células mamíferas normais. Esses achadosdemonstrara que a solução aquosa cora ORP administrada deacordo com a presente invenção é segura para uso, porexemplo, em mamíferos, incluindo seres humanos.

Preferivelmente, a solução aquosa com ORP administradade acordo com a presente invenção não causa diminuiçãosignificativa na viabilidade de células mamíferas e/ou nãocausa aumento significativo da apoptose, aceleração deenvelhecimento celular e/ou dano oxidativo do DNA emcélulas mamíferas. A taxa de viabilidade celular é de,preferivelmente, pelo menos cerca de 65%, maispreferivelmente, pelo menos cerca de 70% e, ainda maispreferivelmente, pelo menos cerca de 75% após de cerca de 5a cerca de 3 0 minutos de exposição à solução aquosa comORP.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção pref erivelmente faz com que até cerca de 10% decélulas, mais preferivelmente, apenas até cerca de 5% decélulas e, ainda mais preferivelmente, apenas até cerca de3% de células, exponham Anexina-V em suas superfíciescelulares, quando colocadas em contato com a solução aquosacom ORP por até cerca de trinta minutos ou menos (porexemplo, após cerca de trinta minutos ou após cerca decinco minutos de contato com a solução aquosa com ORP).

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção preferivelmente faz com que menos de cerca de 15%de células, mais preferivelmente, menos de cerca de 10% decélulas e, ainda mais preferivelmente, menos de cerca de 5%de células expressem a enzima SA-P-galactosidase apósexposição crônica à solução aquosa com ORP. A soluçãoaquosa com ORP administrada de acordo com a invençãopreferivelmente faz com que a fração da formação de adutooxidativo de DNA causado por peróxido de hidrogênio emcélulas tratadas sob condições equivalentes, por exemplo,menos de cerca de 20% da formação de aduto oxidativo deDNA7 menos de cerca de 10% da formação de aduto oxidativode DNA, ou cerca de 5% ou menos da formação de adutooxidativo de DNA normalmente causada por peróxido dehidrogênio em células tratadas sob condições equivalentes.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção não produz degradação significativa de RNA.Conseqüentemente, o RNA extraído de culturas de célulashumanas após cerca de 30 minutos de exposição à soluçãoaquosa com ORP ou após cerca de 3 horas de exposição, eanalisada por eletroforese em gel desnaturante, tipicamentenão exibirá degradação de RNA significativa e apresentarátipicamente duas bandas distintas que correspondem aos RNAseucarióticos ribossômicos (ou seja, 28S e 18S), indicandoque a solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção deixa o RNA substancialmente intacto. Da mesmaforma, o RNA extraído de culturas de células humanas apóscerca de 30 minutos de exposição à solução aquosa com ORPou após cerca de 3 horas de exposição pode ser submetido àtranscrição reversa e amplificação (RT-PCR) do geneconstitutivo da GAPDH humana (Gliceraldeído-3 - fosfatodesidrogenase) e resulta em uma forte banda de GAPDH naeletroforese em gel dos produtos de RT-PCR. Ao contrário,células tratadas com HP por um período similar mostramdegradação de RNA significativa e pouco, ou nenhum, produtoGAPDH por RT-PCR.

De acordo com a presente invenção, uma quantidadeterapeuticamente eficaz da solução aquosa com ORP pode seradministrada por qualquer método adequado. Métodosadequados podem incluir, por exemplo, o contato de um oumais tecidos com uma quantidade da solução aquosa com ORPeficaz para tratar ou evitar peritonite, reduzir osangramento capilar, evitar o desenvolvimento de abscessosperitoneais e adesões, ou evitar a progressão até a SIRS efalência múltipla dos órgãos. Um método de administraçãoexemplar inclui a liberação de uma quantidadeterapeuticamente eficaz da solução aquosa com ORP ao espaçoperitoneal, por exemplo, na fase intra-operatória, sobcontrole laparoscópico, ou por via transabdominal.

A quantidade terapeuticamente eficaz da solução aquosacom ORP pode ser liberada ao espaço peritoneal, porexemplo, por gravidade (por exemplo, derramando oudispensando a solução aquosa com ORP de um recipiente oudispositivo) ou pela liberação da solução aquosa com ORPsob pressão (por exemplo, por pulverização). Podem serrealizados um ou mais enxágües do peritônio, ou seja, operitônio pode ser "lavado". A solução aquosa com ORP podeser retida na cavidade peritoneal por qualquer período detempo adequado, por exemplo, um período de tempo eficazpara fornecer uma resposta terapêutica, por exemplo,segundos, minutos, horas ou dias e, opcionalmente, removidacom a utilização de qualquer método adequado. Métodos deremoção adequados podem incluir, por exemplo, permitir quea solução aquosa com ORP seja absorvida naturalmente em umou mais tecidos circundantes, absorção com um ou maismateriais absorventes (por exemplo, gaze, esponja, toalha,ou trama), remoção por sucção, e semelhantes, e combinaçõesdestes.

Em uma modalidade, o método da presente invençãoinclui:

acesso ao espaço peritoneal em um paciente, porexemplo, que possua ou que esteja em risco de desenvolverperitonite, ou que esteja em risco de desenvolver adesõesou abscessos associados à peritonite;

liberação ao espaço peritoneal do paciente de umvolume da solução aquosa com ORP que seja suficiente paracontato do tecido peritoneal com uma quantidadeterapeuticamente eficaz desta;

- permitir que a solução aquosa com ORP permaneça noespaço peritoneal por um período de tempo suficiente parafornecer um efeito terapêutico;

- opcionalmente, remoção da solução aquosa com ORP doespaço peritoneal; e

- opcionalmente, repetição da lavagem peritoneal.

0 espaço peritoneal pode ser acessado por qualquermétodo adequado, por exemplo, cirurgicamente ou por viatransabdominal, através da abertura de uma feridaexistente, e semelhantes. Qualquer volume adequado dasolução aquosa com ORP pode ser liberado ao espaçoperitoneal, por exemplo, de cerca de 0,01 a cerca de 10litros (por exemplo, de cerca de 0,1 a cerca de 10 litros,de cerca de 0,2 a cerca de 10 litros, de cerca de 0,5 acerca de 10 litros, ou de cerca de 1 a cerca de 10 litros).

A solução aquosa com ORP pode opcionalmente ser removida e,se desejado, as lavagens repetidas, por exemplo, como aquidescrito. As lavagens podem ser realizadas isoladamente ouem combinação com terapias adicionais, por exemplo, emcombinação com um ou mais de soro fisiológico estérillavagens, terapia antibiótica, e combinações destes.

A solução aquosa com ORP pode ser administradaparenteralmente, por via endoscópica, através de um cateterde diálise ou diretamente à superfície de qualquer tecidobiológico afetado, os quais podem incluir a pele e/ou umaou mais superfícies mucosas. A administração parenteralpode incluir, por exemplo, a administração da soluçãoaquosa com ORP por via intraperitoneal, por viaintramuscular, subcutânea, intravenosa, intra-arterial,intratecal, intravesical, ou em um espaço sinovial. Aadministração endoscópica da solução aquosa com ORP podeincluir, por exemplo, o uso de broncoscopia, colonoscopia,sigmoidoscopia, histeroscopia, laparoscopia, artroscopia,gastroscopia ou uma abordagem transuretral. A administraçãoda solução aquosa com ORP a uma superfície mucosa podeincluir, por exemplo, administração a uma superfície mucosaesofágica, gástrica, intestinal, peritoneal, uretral,vesicular, vaginal, uterina, da glândula de Falópio,sinovial e nasal, e também pode incluir a administração dasolução a uma superfície mucosa oral, traqueal oubrônquica.

A administração parenteral também pode incluir aadministração da solução aquosa com ORP por viaintraperitoneal, subcutânea ou intramuscular, além daintravenosa, por exemplo, como descrito nas Patentes U.S.Nos 5.334.383 e 5.622.848 (aqui incorporadas porreferência), que descrevem métodos de tratamento demiocardite viral, esclerose múltipla e AIDS por meio daadministração intravenosa de soluções de água com ORP.De acordo com a invenção, a solução aquosa com ORPusada pode ser administrada topicamente, por exemplo, comoum spray, névoa, aerossol ou vapor, por qualquer métodoadequado, por exemplo, por aerossolização, nebulização ouatomização, por exemplo, na forma de gotículas que possuemum diâmetro na faixa de cerca de 0,1 mícron a cerca de 100mícrons, preferivelmente de cerca de 1 mícron a cerca de 10microns. Métodos e dispositivos úteis para aerossolização,nebulização e atomização são bem conhecidos na técnica.Nebulizadores médicos, por exemplo, têm sido usados paraliberar uma dose metrificada de um líquido fisiologicamenteativo em um jato de gás inspiratório, por exemplo, parainalação por um receptor. Veja, por exemplo, a Patente U.S.N0 6.598.602 (aqui incorporada por referência). Osnebulizadores médicos podem operar para a geração degotículas líquidas, que formam um aerossol, por exemplo,com um gás inspiratório. Em outras circunstâncias,nebulizadores médicos têm sido usados para injetargotículas de água em um jato de gás inspiratório para ofornecimento de gás com um teor de umidade adequado a umreceptor, o que é particularmente útil quando o jato de gásinspiratório for fornecido por um auxílio mecânico derespiração como, por exemplo, um respirador, um ventiladorou sistema de liberação de anestésicos.

A Patente U.S. N0 5.312.281 (aqui incorporada porreferência) descreve um nebulizador de onda ultra-sônicaque atomiza água ou líquido em baixa temperatura esupostamente pode ajustar o tamanho da névoa. Além disso, aPatente U.S. N° 5.287.847 (aqui incorporada por referência)descreve um aparelho pneumático de nebulização com taxas defluxo e volumes de saída escalonáveis para a liberação deum aerossol medicinal a neonatos, crianças e adultos. Alémdisso, a Patente U.S. N0 5.063.922 (aqui incorporada porreferência) descreve um atomizador ultra-sônico. A soluçãoaquosa com ORP também pode ser dispensada em forma deaerossol como parte de um sistema de inalação para otratamento de infecções nos pulmões e/ou nas passagensaéreas ou para a cicatrização de feridas nessas partes docorpo.

Para aplicações em maior escala, pode ser usado umdispositivo adequado para dispersar uma solução aquosa comORP no ar, incluindo, sem limitação, umidificadores,nebulizadores, pulverizadores, vaporizadores, atomizadores,sprays de água e outros dispositivos de spray. Essesdispositivos permitem a dispersão da solução aquosa com ORPde forma contínua. Pode ser empregado um ejetor que misturadiretamente a água em um bocal. Uma solução aquosa com ORPpode ser convertida em vapor, por exemplo, vapor de baixapressão, e liberada no jato de ar. Vários tipos deumidificadores podem ser usados como, por exemplo,umidificadores ultra-sônicos, umidificadores ouvaporizadores de jato, e umidificadores evaporativos. 0dispositivo específico usado para dispersar uma soluçãoaquosa com ORP pode ser incorporado em um sistema deventilação para fornecer a aplicação disseminada da soluçãoaquosa com ORP por toda a casa ou instalação de atendimentomédico (por exemplo, hospital, casa de repouso etc.).

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com apresente invenção também pode ser usada como a solução deirrigação para dispositivos de pressão negativa que sãousados para reduzir edema e aumentar o fluxo sangüíneo.Dispositivos de pressão negativa adequados podem incluir,por exemplo, um ou mais dispositivos de fechamento deferidas a vácuo como, por exemplo, os dispositivosV.A.C.(R) e Insti 11™ vendidos nos Estados Unidos porKinetic Concepts, Inc. Acredita-se que a solução aquosa comORP possa agir sinergicamente com o dispositivo aocontrolar o processo inflamatório-alérgico, enquanto reduza carga microbiana. Dessa forma, o dispositivo pode seraplicado para abertura da cavidade abdominal com irrigaçãointermitente ou continua para tratar ou evitar peritonite(ou abscessos ou adesões) de acordo com a presenteinvenção.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com apresente invenção também pode ser usada como a solução deirrigação para dispositivos de hidrocirurgia que são usadospara o desbridamento de feridas. Dispositivos dehidrocirurgia adequados podem incluir, por exemplo, odispositivo VersaJet vendido nos Estados Unidos por Smithand Nephew, Debritom na Europa por Medaxis, JetOx nosEstados Unidos e na Europa por DeRoyal ou PulsaVac naItália. Acredita-se que a solução aquosa com ORP possaatuar sinergicamente com o dispositivo por redução da cargamicrobiana na ferida e evitando a formação de névoasinfecciosas durante o procedimento de desbridamento. Dessaforma, o dispositivo pode ser usado para o desbridamentodas feridas com irrigação contínua, para reduzir o processode infecção e evitar a formação de névoas infecciosas deacordo com a presente invenção.

De acordo com a presente invenção, uma quantidadeterapeuticamente eficaz da solução aquosa com ORP pode seradministrada isoladamente ou em combinação com um ou maisagentes terapêuticos adicionais, de modo a tratar ou evitarperitonite ou a fim de evitar a formação de adesões ouabscessos e para tratar ou evitar SIRS ou falência múltiplados órgãos a ela associados. Por exemplo, a solução aquosacom ORP pode ser administrada em conjunto com um ou maisagentes terapêuticos adicionais, por exemplo, um ou maiscompostos selecionados do grupo que consiste em agentesantiinfecciosos (por exemplo, agentes antibacterianos(como, por exemplo, antibióticos), agentes antifúngicos eagentes antivirais), agentes antiinflamatórios, proteínasou anticorpos recombinantes, um ou mais fãrmacossintéticos, e combinações destes. A administração dessesagentes terapêuticos em conjunto com a solução aquosa comORP pode incluir a administração de um ou mais dessesagentes adicionais, por exemplo, antes, durante (porexemplo, contemporaneamente, por co-administração ou emcombinação com), ou depois da administração da soluçãoaquosa com ORP.

Antibióticos adequados podem incluir, sem limitação,penicilina, cefalosporinas ou outras β-lactamas, macrolidas(por exemplo, eritromicina, 6-0-metileritromicina eazitromicina), fluorquinolonas, sulfonamidas,tetraciclinas, aminoglicosídeos, clindamicina, quinolonas,metronidazol, vancomicina, cloranfenicol, derivadoseficazes em termos antibacterianos destes, e combinaçõesdestes. Agentes antiinfecciosos adequados também podemincluir agentes antifúngicos como, por exemplo,anfotericina B, fluconazol, flucitosina, cetoconazol,miconazol, derivados destes, e combinações destes. Agentesantiinflamatórios adequados podem incluir, por exemplo, umou mais fármacos antiinflamatórios, por exemplo, um ou maisesteróides antiinflamatórios ou um ou mais fármacosantiinflamatórios não esteróides (NSAIDs). Fármacosantiinflamatórios exemplares podem incluir, por exemplo,ciclofilinas, proteínas de ligação FK, anticorpos anti-citocina (por exemplo, anti-TNF), esteróides e NSAIDs.

De acordo com a invenção, a solução aquosa com ORPpode ser administrada isoladamente ou em combinação com umou mais veículo farmaceuticamente aceitáveis, que podemincluir, por exemplo, veículos, adjuvantes, excipientes,diluentes, combinações destes, e semelhantes. Tais veículossão pref erivelmente compatíveis com uma ou mais dasespécies químicas que existem na solução aquosa com ORP.Aqueles habilitados na técnica podem determinar facilmentea formulação e o método apropriados para a administração dasolução aquosa com ORP usada de acordo com a presenteinvenção. Por exemplo, uma formulação baseada em gelcontendo a solução aquosa com ORP pode ser usada paramanter a hidratação da cavidade peritoneal, ao mesmo tempoem que fornece uma barreira contra microorganismos.Formulações em gel adequadas são descritas, por exemplo, naPublicação do Pedido de Patente U.S. N0 2005/0142157 (aquiincorporada por referência). Quaisquer ajustes necessáriosna dose podem ser feitos rapidamente por aqueleshabilitados na técnica para atender à natureza e/ougravidade da condição tratada, à luz de um ou mais fatoresclinicamente relevantes como, por exemplo, efeitoscolaterais, alterações na condição geral do paciente, esemelhantes.

Por exemplo, a solução aquosa com ORP pode serformulada por combinação ou diluição da solução aquosa comORP com cerca de 25% (p/p ou vol/vol) de um veículoadequado, cerca de 50% (p/p ou vol/vol) de um veículoadequado, cerca de 75% (p/p ou vol/vol) de um veículoadequado, cerca de 90% (p/p ou vol/vol) de um veículoadequado, cerca de 95% (p/p ou vol/vol) de um veículoadequado, ou até mesmo com cerca de 99% (p/p ou vol/vol) oumais de um veículo adequado. Veículos adequados podemincluir, por exemplo, água (por exemplo, água destilada,água estéril, por exemplo, água estéril para injeção, sorofisiológico estéril, e semelhantes). Veículos adequadostambém podem incluir um ou mais veículos descritos noPedido de Patente U.S. N° 10/916.278 (aqui incorporado porreferência). Formulações exemplares podem incluir, porexemplo, soluções nas quais a solução aquosa com ORP édiluída com água estéril ou soro fisiológico estéril, emque a solução aquosa com ORP é diluída por cerca de 25%(vol/vol) , por cerca de 50% (vol/vol) , por cerca de 75%(vol/vol) , por cerca de 90% (vol/vol) , por cerca de 95%(vol/vol), ou por 99% (vol/vol) ou mais, dependendo daaplicação terapêutica e/ou de quaisquer outros fatoresterapeuticamente relevantes.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção pode ainda ser formulada em combinação com um oumais agentes terapêuticos adicionais, por exemplo, um oumais compostos ativos selecionados do grupo que consiste emagentes antibacterianos (por exemplo, antibióticos),agentes antivirais, agentes antiinflamatórios, ecombinações destes, como aqui descrito.

A quantidade terapeuticamente eficaz administrada aopaciente, por exemplo, um mamífero, particularmente um serhumano, no contexto da presente invenção, deve sersuficiente para produzir uma resposta terapêutica ouprofilática no paciente ao longo de um intervalo de temporazoável. A dose pode ser facilmente determinada com o usode métodos que são bem conhecidos na técnica. Aqueleshabilitados na técnica reconhecerão que o nível de dosagemespecífico para qualquer paciente em particular dependeráde diversos fatores terapeuticamente relevantes empotencial. Por exemplo, a dose pode ser determinada combase na potência da solução aquosa com ORP em particularempregada, na gravidade da condição, no peso corporal dopaciente, na idade do paciente, na condição física e mentaldo paciente, saúde geral, sexo, dieta, e semelhantes. 0tamanho da dose também pode ser determinado com base naexistência, natureza e extensão de quaisquer efeitoscolaterais adversos que possam acompanhar a administraçãoda solução aquosa com ORP em particular. É desejável,sempre que possível, manter os efeitos colaterais adversosem um mínimo.

Fatores que podem ser considerados para uma dosagemespecífica podem incluir, por exemplo, abiodisponibilidade, o perfil metabólico, o tempo deadministração, a via de administração, a taxa de excreção,a farmacodinâmica associada a uma solução aquosa com ORP emparticular em um paciente em particular, e semelhantes.Outros fatores podem incluir, por exemplo, a potência oueficácia da solução aquosa com ORP com relação à condiçãoespecífica a ser tratada, a gravidade dos sintomasapresentados antes, durante ou depois do período deterapia, e semelhantes. Em alguns casos, o que constituiuma quantidade terapeuticamente eficaz também pode serdeterminado, em parte, com a utilização de um ou mais dosensaios, por exemplo, bioensaios, que são indicadoresclinicamente razoáveis da eficácia de uma solução aquosacom ORP em particular para o tratamento ou a prevenção deuma condição em particular.

A solução aquosa com ORP usada de acordo com apresente invenção pode ser administrada, isoladamente ou emcombinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais,a um paciente, por exemplo, um ser humano, por exemplo,para tratar uma condição existente. A solução aquosa comORP da presente invenção também pode ser administradaprofilaticamente, isoladamente ou em combinação com um oumais agentes terapêuticos adicionais, a um paciente, porexemplo, um ser humano, que esteja em risco de desenvolvera condição, por exemplo, por ter sido exposto a um ou maisagentes causadores associados à condição. Por exemplo, asolução aquosa com ORP da invenção pode ser adequadamenteadministrada a um paciente que foi exposto a um ou maismicroorganismos que causam inflamação (por exemplo,infecções, vírus, bactérias e/ou fungos) profilaticamentepara diminuir a probabilidade ou gravidade da peritonite,adesões, abscessos, SIRS, falência múltipla dos órgãos, emesmo infecção, associada ao microorganismo em um paciente.A solução aquosa com ORP também pode ser usada para irrigarcontinuamente o campo cirúrgico, incluindo o peritônio,intestino, a parede abdominal, e semelhantes, durantecirurgias muito longas, ou quando tiver que ser aplicadauma trama ou outra prótese. Com isso, a possibilidade decontaminação ou infecção pode ser reduzida por conta daspropriedades desinfetantes da solução aquosa com ORP, namedida em que a irrigação continua com a solução aquosa comORP pode ainda ajudar a manter uma hidratação adequada dostecidos. A freqüência e o volume a serem usados sob essascircunstâncias podem ser variáveis, dependendo, porexemplo, da natureza da cirurgia, da condição do pacienteetc.

Aqueles habilitados na técnica observarão que estãodisponíveis métodos adequados de administração da soluçãoaquosa com ORP usada de acordo com a presente invenção e,embora possa ser usada mais de uma via de administração,uma via em particular pode fornecer uma reação maisimediata e mais eficaz do que outra via. A quantidadeterapeuticamente eficaz pode ser a dose necessária para seobter um "nível eficaz" da solução aquosa com ORP em umpaciente individual. A quantidade terapeuticamente eficazpode ser definida, por exemplo, como a quantidadenecessária que deve ser administrada a um pacienteindividual para se obter um nível sangüíneo, nível teciduale/ou nível intracelular da solução aquosa com ORP (ou umaou mais espécies ativas nela contidas) para evitar outratar a condição no paciente.

Quando o nível eficaz é usado como um limite finalpreferido para a dosagem, a dose e a posologia reais podemvariar, dependendo, por exemplo, de diferenças entreindivíduos em termos de farmacocinética, distribuição,metabolismo, e semelhantes. 0 nível eficaz também podevariar quando a solução aquosa com ORP for usada emcombinação com um ou mais agentes terapêuticos adicionais,por exemplo, um ou mais agentes antiinfecciosos, um ou maisagentes de "moderação", "modulação" ou "neutralização" , porexemplo, como descrito nas Patentes U.S. Nos 5.334.383 e5.622.848 (aqui incorporadas por referência), um ou maisagentes antiinflamatórios, e semelhantes.

Um indicador apropriado pode ser usado para determinare/ou monitorar o nível eficaz. Por exemplo, o nível eficazpode ser determinado por análise direta (por exemplo, examefísico, química analítica) ou por análise indireta (porexemplo, com indicadores clínicos bioquímicos) de amostrasadequadas de pacientes (por exemplo, líquido peritoneal,sangue e/ou tecidos). 0 nível eficaz também pode serdeterminado, por exemplo, por observações diretas ouindiretas como, por exemplo, a concentração de metabólitosurinários, mudanças em marcadores associados à condição(por exemplo, contagem viral no caso de uma infecçãoviral), análise da histopatologia e imunoquímica,diminuições dos sintomas associados à condição, esemelhantes.

Soluções de água com ORP convencionais possuem umprazo de validade extremamente limitado, normalmente apenaspoucas horas. Em conseqüência dessa vida útil curta, o usode soluções de água com ORP convencionais exige que aprodução ocorra próximo do ponto de uso. Do ponto de vistada praticidade, isso significa que a instalação predial,por exemplo, um local de atendimento médico, por exemplo,um hospital, tem que adquirir, abrigar e manter oequipamento necessário para produzir solução aquosa com ORPconvencional. Adicionalmente, as técnicas convencionais defabricação não foram capazes de produzir quantidadessuficientes em escala comercial para permitir o usodisseminado, por exemplo, como um agente desinfetante geralpara instalações para atendimento médico.

Diferentemente das soluções de água com ORPconvencionais, a solução aquosa com ORP administrada deacordo com a invenção é estável por pelo menos cerca devinte e quatro após sua preparação. Além disso, a soluçãoaquosa com ORP administrada de acordo com a invenção é, emgeral, ambientalmente segura e, dessa forma, evita anecessidade de procedimentos de descarte dispendiosos.

Preferivelmente, a solução aquosa com ORP administradade acordo com a invenção é estável por pelo menos cerca deuma semana (por exemplo, uma semana, duas semanas, trêssemanas, quatro semanas etc.) e, mais preferivelmente, pelomenos cerca de dois meses. Ainda mais preferivelmente, asolução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção é estável por pelo menos cerca de seis meses.

Ainda mais preferivelmente, a solução aquosa com ORPadministrada de acordo com a invenção é estável por pelomenos cerca de um ano e, principalmente, é estável por maisde cerca de um ano, por exemplo, pelo menos cerca de doisanos ou pelo menos cerca de três anos.

A estabilidade pode ser medida com base na habilidadeda solução aquosa com ORP para permanecer adequada por umou mais usos, por exemplo, para inibir a degranulação demastócitos, inibir a secreção de citocina, descontaminação,desinfecção, esterilização, limpeza antimicrobiana elimpeza de feridas, por um período de tempo especificadoapós sua preparação sob condições normais de estocagem (porexemplo, temperatura ambiente). A estabilidade da soluçãoaquosa com ORP administrada de acordo com a invenção tambémpode ser medida por estocagem sob condições aceleradas, porexemplo, de cerca de 30°C a cerca de 60°C, em que a soluçãoaquosa com ORP preferivelmente é estável por até cerca de90 dias e, mais preferivelmente, por até cerca de 180 dias.

A estabilidade também pode ser medida com base naconcentração ao longo de tempo de uma ou mais espécies (ouprecursores destas) presentes em solução durante o prazo devalidade da solução aquosa com ORP. Preferivelmente, asconcentrações de uma ou mais espécies, por exemplo, clorolivre, ácido hipocloroso e uma ou mais espécies de águasuperoxidada, são mantidas em cerca de 70% ou mais de suaconcentração inicial por pelo menos cerca de dois mesesapós preparação da solução aquosa com ORP. Maispreferivelmente, a concentração de uma ou mais dessasespécies é mantida em cerca de 80% ou mais de suaconcentração inicial por pelo menos cerca de dois mesesapós preparação da solução aquosa com ORP. Ainda maispreferivelmente, a concentração de uma ou mais dessasespécies é mantida em cerca de 90% ou mais e,principalmente, é mantida em cerca de 95% ou mais, de suaconcentração inicial por pelo menos cerca de dois mesesapós preparação da solução aquosa com ORP.

A estabilidade também pode ser determinada com base naredução na quantidade de organismos presentes em umaamostra após exposição à solução aquosa com ORP. A medidada redução da concentração de organismo pode ser feita combase em qualquer organismo adequado, incluindo, porexemplo, bactérias, fungos, leveduras ou vírus. Organismosadequados podem incluir, por exemplo, Escherichia coli,Staphylococcus aureus, Candida albieans, e Baeillusathrophaeus (anteriormente B. subtilis).

A estabilidade também pode ser determinada com base naredução na quantidade de endotoxinas (por exemplo,lipopolissacarídeos), fatores de crescimento, citocinas eoutras proteínas e lipídeos presentes em uma amostra apósexposição à solução aquosa com ORP.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção pode funcionar como um desinfetante de nível baixocapaz de uma redução de Iog quatro (IO4) na concentração demicroorganismos vivos, e também pode funcionar como umdesinfetante de nível elevado capaz de uma redução de Iogseis (IO6) na concentração de microorganismos vivos.Preferivelmente, a solução aquosa com ORP administrada deacordo com a invenção é capaz de gerar uma redução de pelomenos cerca de Iog quatro (IO4) na concentração total deorganismo, após exposição por um minuto, quando medida pelomenos cerca de dois meses após a preparação da solução.Mais preferivelmente, a solução aquosa com ORP é capaz deuma redução de IO4-IO6 da concentração de organismo, quandomedida pelo menos cerca de seis meses após a preparação dasolução. Ainda mais preferivelmente, a solução aquosa comORP é capaz de uma redução de IO4-IO6 da concentração deorganismo, quando medida pelo menos cerca de um ano apóspreparação da solução aquosa com ORP e, principalmente,quando medida mais de cerca de um ano, por exemplo, pelomenos cerca de dois anos ou pelo menos cerca de três anos,após preparação da solução aquosa com ORP.Por exemplo, a solução aquosa com ORP é capaz de umaredução de pelo menos cerca de cinco Iog (IO5) naconcentração de uma amostra de microorganismos vivosselecionados do grupo que consiste em Pseudomonasaeruginosa, Escherichia coli, Enterococcus hirae,Aeinetobaeter baumannii, espécies de Aeinetobacter,Baeteroides fragilis, Enterobaeter aerogenes, Enteroeoceusfaecalis, Enteroeoceus faeeium resistente à vancomicina(VRE, MDR), Haemophilus influenzae, Klebsiella oxytoea,Klebsiella pneumoniae, Mierococeus Iuteusr Proteusmirabilis, Serratia mareeseens, Staphyloeoeeus aureus,Staphyloeoeeus epidermidis, Staphyloeoeeus haemolytieus,Staphyloeoeeus hominis, Staphyloeoeeus saprophytieus,Streptoeoeeus pneumoniae, Streptoeoeeus pyogenes, Candidaalbieans e Candida tropiealis, em até 30 segundos deexposição, quando medida pelo menos dois meses apóspreparação da solução aquosa com ORP.

Em uma modalidade, a solução aquosa com ORPadministrada de acordo com a invenção pode reduzir umaamostra de microorganismos vivos incluindo, sem limitação,Eseheriehia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphyloeoeeusaureus e Candida albieans, a partir de uma concentraçãoinicial de entre cerca de 1 x 106 e cerca de 1 x 108organismos/ml até uma concentração final de cerca de zeroorganismo/ml em um intervalo de cerca de um minuto deexposição, quando medida pelo menos cerca de dois mesesapós preparação da solução aquosa com ORP. Isso correspondea uma redução de cerca de Iog seis (106) a uma redução decerca de log oito (108) na concentração de organismo.

Preferivelmente, a solução aquosa com ORP é capaz de obteruma redução de 10^6-10^8 de organismos Escherichia coli,Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus ou Candidaalbicans, quando medida pelo menos cerca de seis meses apóspreparação e, mais preferivelmente, quando medida pelomenos cerca de um ano após preparação.

Alternativamente, a solução aquosa com ORPadministrada de acordo com a presente invenção podeproduzir uma redução de cerca de Iog seis (IO6) naconcentração de uma suspensão de esporos de Baeillusathrophaeus em um intervalo de até cinco minutos deexposição, quando medida pelo menos cerca de dois mesesapós preparação da solução aquosa com ORP. Preferivelmente,a solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção pode obter uma redução de cerca de IO6 naconcentração de esporos de Bacillus athrophaeus, quandomedida pelo menos cerca de seis meses após preparação e,mais preferivelmente, quando medida pelo menos cerca de umano após preparação.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção também pode produzir uma redução de cerca de logquatro (10^4) na concentração de uma suspensão de esporos deesporos de Baeillus athrophaeus em um intervalo de atécerca de trinta (30) segundos de exposição, quando medidapelo menos cerca de dois meses após preparação da soluçãoaquosa com ORP. Preferivelmente, a solução aquosa com ORPpode obter essa redução na concentração de esporos deBaeillus athrophaeus, quando medida pelo menos cerca deseis meses após preparação e, mais preferivelmente, quandomedida pelo menos cerca de um ano após preparação.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção pode ainda produzir uma redução de cerca de Iogseis (IO6) na concentração de esporos fúngicos como, porexemplo, esporos de Aspergillis niger, em um intervalo deaté cerca de cinco a cerca de dez minutos de exposição,quando medida pelo menos cerca de dois meses apóspreparação da solução aquosa com ORP. Preferivelmente, asolução aquosa com ORP pode obter uma redução de IO6 naconcentração de esporos fúngicos, quando medida pelo menoscerca de seis meses após preparação e, maispreferivelmente, quando medida pelo menos cerca de um anoapós a preparação.

Alternativamente, a solução aquosa com ORPadministrada de acordo com a invenção preferivelmente podegerar uma redução de pelo menos cerca de IO6 naconcentração de uma amostra de microorganismos vivosselecionados do grupo que consiste em Escherichia coli,Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, C.perfingens, Neisseria gonorrhèa, Chlamydia trachomatis,estreptococos, enterococos e Candida albicans, ecombinações destes, em um intervalo de cerca de um minutode exposição, quando medida pelo menos cerca de dois mesesapós a preparação da solução.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção pode ainda produzir uma redução de mais de Iog 3(IO3) na concentração de vírus como, por exemplo, vírus daimunodeficiência humana (HIV) e adenovírus, em um intervalode até cerca de cinco a cerca de dez minutos de exposição,quando medida pelo menos cerca de dois meses apóspreparação da solução aquosa com ORP. Preferivelmente, asolução aquosa com ORP pode obter uma redução > IO3 naconcentração de vírus, quando medida pelo menos cerca deseis meses após preparação e, mais preferivelmente, quandomedida pelo menos cerca de um ano após preparação.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção pode ainda inibir completamente o crescimento deMycobacterium bovis em um intervalo de até cinco minutos deexposição, quando medida pelo menos cerca de dois mesesapós preparação da solução aquosa com ORP. Preferivelmente,a solução aquosa com ORP pode obter a inibição total naconcentração de Mycobacterium, quando medida pelo menoscerca de seis meses após preparação e, maispreferivelmente, quando medida pelo menos cerca de um anoapós preparação.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção pode ser ácida, neutra ou básica e, geralmente,pode ter um pH de cerca de 1 a cerca de 14. Dentro dessafaixa de pH, a solução aquosa com ORP pode ser aplicada comsegurança em quantidades adequadas, por exemplo, àssuperfícies, sem danificar as superfícies ou prejudicarobjetos como, por exemplo, a pele humana, que entram emcontato com uma solução aquosa com ORP. Preferivelmente, opH da solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção é de cerca de 3 a cerca de 8. Maispreferivelmente, o pH da solução aquosa com ORP é de cercade 6,4 a cerca de 7,8 e, ainda mais preferivelmente, o pH éde cerca de 7,4 a cerca de 7,6.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção pode ter um potencial de oxirredução de cerca de -1.000 milivolts (mV) a cerca de +1150 milivolts (mV) . Essepotencial é uma medida da tendência (ou seja, o potencial)de uma solução para aceitar ou transferir elétrons que sãopercebidos por um eletrodo metálico, comparado com umeletrodo de referência na mesma solução. Esse potencialpode ser medido por técnicas padronizadas que incluem, porexemplo, a medida do potencial elétrico em milivolts dasolução aquosa com ORP em relação a uma referência-padrãocomo, por exemplo, um eletrodo de prata/cloreto de prata.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção preferivelmente possui um potencial de cerca de —400 mV a cerca de +1.300 mV. Mais pref erivelmente, asolução aquosa com ORP possui um potencial de cerca de 0 mVa cerca de +1.250 mV e, ainda mais preferivelmente, decerca de +500 mV a cerca de +1.250 mV. Ainda maispreferivelmente, a solução aquosa com ORP administrada deacordo com a presente invenção possui um potencial de cercade +800 mV a cerca de +1.100 mV e, principalmente, de cercade +800 mV a cerca de +1.000 mV.

Várias espécies iônicas e outras espécies podem estarpresentes na solução aquosa com ORP administrada de acordocom a invenção. Por exemplo, a solução aquosa com ORP podeconter cloro (por exemplo, cloro livre e cloro ligado), umaou mais espécies adicionais de água superoxidada (porexemplo, uma ou mais espécies de oxigênio, por exemplo,oxigênio dissolvido) e, opcionalmente, ozônio e perõxidos(por exemplo, peróxido de hidrogênio). Acredita-se que apresença de uma ou mais dessas espécies contribua pelomenos para a habilidade desinfetante da solução aquosa comORP para matar diversos microorganismos, por exemplo,bactérias e fungos, além de vírus. Sem se fixar a nenhumateoria específica, acredita-se que uma ou mais dessasespécies também possam contribuir para a eficácia dasolução aquosa com ORP no tratamento ou na prevenção deperitonite e/ou na prevenção de hemorragia e da formação deadesões ou abscesso a ela associados. A inibição da síntesee secreção de citocinas poderia ainda ser outro efeito dasolução aquosa com ORP.

Cloro livre tipicamente inclui, sem limitação, ácidohipocloroso (HClO), íons hipoclorito (CIO") e hipocloritode sódio (NaOCl)7 e precursores destes. A proporção deácido hipocloroso para íons hipoclorito depende do pH. Emum pH de 7,4, os níveis de ácido hipocloroso sãotipicamente de cerca de 25 ppm a cerca de 75 ppm. Atemperatura também tem um impacto sobre a proporção docomponente de cloro livre.

Cloro ligado tipicamente inclui cloro em combinaçãoquímica com, por exemplo, amônia ou aminas orgânicas (porexemplo, cloraminas). Cloro ligado está presentepreferivelmente em uma quantidade de até cerca de 20 ppm.

Uma ou mais espécies de cloro, uma ou mais espéciesadicionais de água superoxidada (por exemplo, uma ou maisespécies de oxigênio) e oxigênio podem estar presentes nasolução aquosa com ORP em qualquer quantidade adequada. Osníveis desses componentes podem ser medidos por qualquermétodo adequado, incluindo métodos conhecidos na técnica.

0 teor total de cloro, que inclui tanto cloro livrequanto, opcionalmente, cloro ligado, pode ser de cerca de10 partes por milhão (ppm) a cerca de 4 00 ppm, por exemplo,de cerca de 10 partes ppm a cerca de 200 ppm, de cerca de20 ppm a cerca de 150 ppm, de cerca de 30 ppm a cerca de100 ppm, de cerca de 30 a cerca de 80 ppm, ou, por exemplo,de cerca de 50 ppm a cerca de 2 00 ppm ou de cerca de 8 0 ppma cerca de 150 ppm.

O teor de cloro pode ser medido por métodos conhecidosna técnica como, por exemplo, o método do colorímetro deDPD (Lamotte Company, Chestertown, Maryland) ou outrosmétodos conhecidos como, por exemplo, métodos estabelecidospela "Environmental Protection Agency". No método docolorímetro de DPD, é formada uma cor amarela pela reaçãode cloro livre com N,N-dietil-p-fenilenediamina (DPD), e aintensidade é medida com um calorímetro calibrado quefornece o resultado em partes por milhão. A adiçãoadicional de iodeto de potássio dá à solução uma cor rosapara fornecer o valor do cloro total. A quantidade de cloroligado presente é então determinada por subtração do clorolivre do cloro total.

A quantidade total de espécies químicas oxidantespresente na solução aquosa com ORP está preferivelmente nafaixa de cerca de 2 milimolares (mM) , e pode incluir asespécies de cloro mencionadas anteriormente, espécies deoxigênio e espécies adicionais, incluindo aquelas que sãode difícil medição como, por exemplo, Cl", ClO3, Cl2" eClOx.

Em uma modalidade, a solução aquosa com ORP dainvenção compreende uma ou mais espécies de cloro e uma oumais espécies adicionais de água superoxidada (por exemplo,uma ou mais espécies oxidantes adicionais como, porexemplo, oxigênio). Preferivelmente, as espécies de cloroestão presentes como uma espécie de cloro livre. A espéciede cloro livre pode incluir uma ou mais espéciesselecionadas do grupo que consiste em ácido hipocloroso(HOCl), Ions hipoclorito (OCl") , hipoclorito de sódio(NaOCl~) , ίοη cloreto (Cl") e, opcionalmente, gás clorodissolvido (Cl2), precursores destes e misturas destes.

A quantidade total de espécie de cloro livre épreferivelmente de cerca de 10 ppm a cerca de 400 ppm, maispreferivelmente, de cerca de 50 ppm a cerca de 200 ppm e,principalmente, de cerca de 50 ppm a cerca de 8 0 ppm. Aquantidade de ácido hipocloroso é preferivelmente de cercade 15 ppm a cerca de 3 5 ppm. A quantidade de hipoclorito desódio está pref erivelmente na faixa de cerca de 25 ppm acerca de 50 ppm. Os níveis de dióxido de cloro estãopreferivelmente abaixo de cerca de 5 ppm.

Em uma modalidade, a solução aquosa com ORP inclui umaou mais espécies de cloro ou um ou mais precursores destas,uma ou mais espécies adicionais de água superoxidada (porexemplo, uma ou mais espécies de oxigênio) e,opcionalmente, peróxido de hidrogênio, e é estável por pelomenos cerca de 24 horas, pref erivelmente por pelo menoscerca de uma semana, mais pref erivelmente, por pelo menoscerca de dois meses e, ainda mais preferivelmente, por pelomenos cerca de seis meses após sua preparação. Ainda maispreferivelmente, essa solução aquosa com ORP é estável porpelo menos cerca de um ano e, principalmente, por mais decerca de um ano, por exemplo, pelo menos cerca de dois anosou pelo menos cerca de três anos.

Prefere-se também que a solução aquosa com ORP incluauma ou mais espécies de cloro (por exemplo, ácidohipocloroso e hipoclorito de sódio) ou um ou maisprecursores destes e uma ou mais espécies oxidantesadicionais (por exemplo, oxigênio) ou um ou maisprecursores destes, e possua um pH de cerca de 6 a cerca de8, mais preferivelmente, de cerca de 6,2 a cerca de 7,8 e,principalmente, de cerca de 7,4 a cerca de 7,6. Uma soluçãoaquosa com ORP exemplar administrada de acordo com apresente invenção pode compreender, por exemplo, de cercade 15 ppm a cerca de 3 5 ppm de ácido hipocloroso, de cercade 25 ppm a cerca de 50 ppm de hipoclorito de sódio, decerca de 1 ppm a cerca de 4 ppm de uma ou mais espéciesadicionais de água superoxidada, e um pH de cerca de 6,2 acerca de 7,8, e pode ser estável por pelo menos cerca deuma semana, por exemplo, pelo menos cerca de dois meses,pelo menos cerca de seis meses, pelo menos cerca de um ano,ou mais do que cerca de um ano, por exemplo, pelo menoscerca de dois anos ou pelo menos cerca de três anos.

Embora sem limitar de forma alguma a presenteinvenção, acredita-se que o controle do pH e de outrasvariáveis (por exemplo, salinidade) possa fornecer soluçõesde água com ORP estáveis, que contêm um ou mais espécies decloro ou precursores destas como, por exemplo, ácidohipocloroso e íons hipoclorito, e uma ou mais espécies deágua superoxidada (por exemplo, oxigênio).

As soluções de água com ORP administradas de acordocom a invenção preferivelmente compreendem uma ou maisespécies de água oxidada que podem gerar radicais livres(como, por exemplo, radicais hidroxila) ao serem expostasao ferro. A água com ORP pode opcionalmente incluir um oumais compostos químicos gerados durante a produção destacomo, por exemplo, hidróxido de sódio (NaOH), dióxido decloro (ClO2) , peróxidos (por exemplo, peróxido dehidrogênio (H2O2) , e ozônio (O3) , embora tenha sido relatadoque hidróxido de sódio, dióxido de cloro, peróxido dehidrogênio e ozônio possam reagir com hipocloritoresultando no seu consumo e na produção de outras espéciesquímicas.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com apresente invenção pode ser produzida por um processo deoxirredução, por exemplo, por um processo eletrolítico oureação redox, em que a energia elétrica é usada paraproduzir uma ou mais alterações químicas em uma soluçãoaquosa. Processos exemplares para a preparação de soluçõesde água com ORP adequadas são descritos, por exemplo, nasPublicações de Pedidos de Patentes U.S. Nos US 2005/0139808e US 2005/0142157 (aqui incorporadas por referência).

No processo eletrolítico, a energia elétrica éintroduzida e transportada através da água pela condução decarga elétrica de um ponto a outro na forma de uma correnteelétrica. Para que a corrente elétrica surja e subsista,deve haver transportadores de carga na água, e deve haveruma força que faça com que os transportadores se movam. Ostransportadores de carga podem ser elétrons, como no casode metal e semicondutores, ou podem ser íons positivos enegativos, no caso de soluções. Uma reação de reduçãoocorre no catodo, enquanto uma reação de oxidação ocorre noanodo. Pelo menos algumas das reações redutoras eoxidativas que supostamente ocorrem são descritas no PedidoInternacional WO 03/048421 Al.

Como aqui usada, água produzida em um anodo édenominada água oxidada, e água produzida em um catodo édenominada água reduzida. Água oxidada tipicamente contémespécies oxidadas produzidas pela reação eletrolítica,enquanto água reduzida tipicamente contém espéciesreduzidas pela reação. Água oxidada geralmente possui um pHbaixo, tipicamente de cerca de 1 a cerca de 6,8. A águaoxidada preferivelmente contém cloro em várias formasincluindo, por exemplo, gás cloro, Ions cloreto, ácidoclorídrico e/ou ácido hipocloroso, ou um ou maisprecursores destes. Oxigênio em várias formas também estápreferivelmente presente, incluindo, por exemplo, gásoxigênio e, possivelmente, uma ou mais espécies formadasdurante a produção (por exemplo, peróxidos e/ou ozônio), ouum ou mais precursores destas. Água reduzida geralmentepossui um pH elevado, tipicamente de cerca de 7,2 a cercade 11. Água reduzida pode conter gás hidrogênio, radicaishidroxila e/ou íons sódio.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção pode incluir uma mistura de água oxidada (porexemplo, água produzida na câmara anódica de uma célulaeletrolítica) e água reduzida (por exemplo, água produzidana câmara catódica de uma célula de eletrólise) .

Preferivelmente, a solução aquosa com ORP administrada deacordo com a presente invenção contém água reduzida, porexemplo, em uma quantidade de cerca de 10% por volume acerca de 90% por volume da solução. Mais pref erivelmente,água reduzida está presente na solução aquosa com ORP emuma quantidade de cerca de 10% por volume a cerca de 50%por volume e, ainda mais preferivelmente, de cerca de 20%por volume a cerca de 4 0% por volume da solução, porexemplo, de cerca de 2 0% por volume a cerca de 3 0% porvolume da solução. Adicionalmente, a água oxidada podeestar presente na solução aquosa com ORP, por exemplo, emuma quantidade de cerca de 5 0% por volume a cerca de 90%por volume da solução. Soluções de água com ORP exemplarespodem conter de cerca de 10% por volume a cerca de 50% porvolume de água reduzida e de cerca de 50% por volume acerca de 90% por volume de água oxidada. A água oxidada e aágua reduzida podem ser produzidas com a utilização dacélula de eletrólise de três câmaras mostrada na FIG. 1.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção é produzida preferivelmente com o uso de pelomenos uma célula de eletrólise que compreende uma câmara deanódica, uma câmara catódica e uma câmara de solução salinalocalizada entre as câmaras anódica e catódica, em que pelomenos um pouco da água oxidada e da água reduzida écombinado, a fim de que a solução aquosa com ORP compreendaágua oxidada e água reduzida. Um diagrama de uma célula deeletrólise de três câmaras exemplar que pode ser usada napreparação de uma solução aquosa com ORP exemplar émostrado na FIG. 2.

A célula de eletrólise 100 possui uma câmara anódica102, uma câmara catódica 104 e uma câmara de solução salina106. A câmara de solução salina está localizada entre acâmara anódica 102 e a câmara catódica 104. A câmaraanódica 102 possui um local de entrada 108 e um local desaída 110 para permitir o fluxo de água através da câmaraanódica 100. A câmara catódica 104 similarmente possui umlocal de entrada 112 e um local de saída 114 para permitiro fluxo de água através da câmara catódica 104. A câmara desolução salina 106 possui um local de entrada 116 e umlocal de saída 118. A célula de eletrólise 100preferivelmente inclui uma caixa para manter todos oscomponentes juntos.

A câmara anódica 102 é separada da câmara de soluçãosalina por um eletrodo anódico 12 0 e uma membrana de trocaiônica aniônica 122. 0 eletrodo anódico 120 pode serposicionado adjacente à câmara anódica 102, com a membrana122 localizada entre o eletrodo anódico 120 e a câmara desolução salina 106. Alternativamente, a membrana 122 podeser posicionada adjacente à câmara anódica 102, com oeletrodo anódico 120 localizado entre a membrana 122 e acâmara de solução salina 106.

A câmara catódica 104 é separada da câmara de soluçãosalina por um eletrodo catódico 124 e uma membrana de trocaiônica catódica 126. O eletrodo catódico 124 pode serposicionado adjacente à câmara catódica 104, com a membrana126 localizada entre o eletrodo catódico 124 e a câmara desolução salina 106. Alternativamente, a membrana 126 podeser posicionada adjacente ã câmara catódica 104, com oeletrodo catódico 124 localizado entre a membrana 126 e acâmara de solução salina 106.

Os eletrodos preferivelmente são construídos de metalpara permitir que seja aplicado um potencial de voltagementre a câmara anódica e a câmara de catódica. Os eletrodosmetálicos são geralmente planos e possuem dimensões e áreade superfície do corte transversal similares àquelas dasmembranas de troca iônica. Os eletrodos são configuradospara expor uma porção substancial da superfície doscomponentes de troca iônica à água em suas respectivascâmaras anódica e catódica. Isso permite a migração deespécies iônicas entre a câmara de solução salina, a câmaraanódica e a câmara de catódica. Preferivelmente, oseletrodos possuem diversas passagens ou aberturas espaçadasigualmente através da superfície dos eletrodos.

Uma fonte de potencial elétrico é conectada aoeletrodo anódico 120 e ao eletrodo catódico 124 de modo ainduzir uma reação de oxidação na câmara anódica 102 e umareação de redução na câmara catódica 104.

As membranas de troca iônica 122 e 126 usadas nacélula de eletrólise 100 podem ser construídas de qualquermaterial adequado para permitir a troca de íons entre acâmara de solução salina 106 e a câmara anódica 102 como,por exemplo, íons cloreto (Cl"), e entre a câmara desolução salina 106 e a câmara catódica 104 como, porexemplo, íons sódio (Na+) . A membrana de troca iônicaanódica 122 e a membrana de troca iônica catódica 126 podemser feitas do mesmo material ou de um material deconstrução diferente. Preferivelmente, a membrana de trocaiônica anódica compreende um polímero fluorado. Polímerosfluorados adequados incluem, por exemplo, polímeros ecopolímeros de ácido perfluorsulfônico como, por exemplo,copolímeros de ácido perfluorsulfônico/PTFE e copolímerosde ácido perfluorsulfônico/TFE. A membrana de troca iônicapode ser construída de uma camada única de material ou demúltiplas camadas. Polímeros de membrana de troca iônicaadequados podem incluir um ou mais polímeros de membrana detroca iônica comercializados sob o nome comercial Nafion®.

A fonte da água para a câmara anódica 102 e para acâmara catódica 104 da célula de eletrólise 100 pode serqualquer suprimento de água adequado. A água pode ser de umsuprimento municipal de água ou, alternativamente, pré-tratada antes de ser utilizada na célula de eletrólise.Preferivelmente, a água é pré-tratada, e é selecionada dogrupo que consiste em água amolecida, água purificada, águadestilada e água deionizada. Mais preferivelmente, a fontede água pré-tratada é água ultrapura obtida com uso deosmose reversa e equipamento de purificação de luz UV.

A solução salina aquosa para uso na câmara de águasalina 106 pode incluir qualquer solução salina aquosa quecontenha espécies iônicas adequadas para a produção dasolução aquosa com ORP. Preferivelmente, a solução salinaaquosa é uma solução salina aquosa de cloreto de sódio(NaCl), também comumente denominada soro fisiológico.Outras soluções salinas adequadas podem incluir outros saisde cloreto como, por exemplo, cloreto de potássio, cloretode amônio e cloreto de magnésio, além de outros sais dehalogênios, tais como sais de potássio e bromo. A soluçãosalina pode conter uma mistura de sais.

A solução salina pode ter qualquer concentraçãoadequada. Por exemplo, a solução salina pode ser saturadaou concentrada. Preferivelmente, mas não exclusivamente, asolução salina é uma solução saturada de cloreto de sódio.

A FIG. 2 ilustra o que supostamente são váriasespécies iônicas produzidas na célula de eletrólise de trêscâmaras útil em relação à invenção. A célula de eletrólisede três câmaras 200 inclui uma câmara anódica 202, umacâmara catódica 204 e uma câmara de solução salina 206.Mediante aplicação de uma corrente elétrica adequada aoanodo 208 e ao catodo 210, os íons presentes na soluçãosalina seguem através da câmara de solução salina 206,migram através da membrana de troca iônica anódica 212 e damembrana de troca iônica catódica 214 para a água que fluiatravés da câmara anódica 202 e da câmara catódica 204,respectivamente.

Os Ions positivos migram da solução salina 216 queflui através da câmara de solução salina 2 06 para a águareduzida 218 que flui através da câmara catódica 204. Osíons negativos migram da solução salina 216 que fluiatravés da câmara de solução salina 206 para a água oxidada220 que flui através da câmara anódica 202.

Preferivelmente, a solução salina 216 é cloreto desódio aquoso (NaCl), que contém tanto íons sódio (Na+)quanto íons cloreto (Cl"). Os íons Na+ positivos migram dasolução salina 216 para a água reduzida 218. Os íons Cl"negativos migram da solução salina 216 para a água oxidada 220.

Os íons sódio e os íons cloreto podem passar por umareação adicional na câmara anódica 2 02 e na câmara catódica204. Por exemplo, os íons cloreto podem reagir com váriosíons oxigênio e outras espécies (por exemplo, radicaislivres contendo oxigênio, O2, O3) presentes na água oxidada220 para a produção de ClOn" e CIO". Também podem ocorreroutras reações na câmara anódica 202 incluindo a formaçãode radicais livres de oxigênio, íons hidrogênio (H+),oxigênio (por exemplo, como O2), ozônio (O3) e peróxidos.Na câmara catódica 204, gás hidrogênio (H2), hidróxido desódio (NaOH), íons hidróxido (OH") e outros radicais podemser formados.

0 aparelho para a produção da solução aquosa com ORPtambém pode ser construído para incluir pelo menos duascélulas de eletrólise de três câmaras. Cada uma das célulaseletrolíticas inclui uma câmara de anódica, uma câmara decatódica e uma câmara de solução salina que separa ascâmaras anódica e catódica. 0 aparelho inclui um tanque demistura para coleta da água oxidada produzida pelas célulaseletroliticas e uma porção da água reduzida produzida poruma ou mais das células eletroliticas. Preferivelmente, oaparelho ainda inclui um sistema de recirculação de salpara permitir a reciclagem da solução salina fornecida àscâmaras de solução salina das células eletroliticas. Umdiagrama de um processo exemplar para a produção de umasolução aquosa com ORP com o uso de duas células deeletrólise é mostrado na FIG. 3.

0 processo 300 inclui duas células eletroliticas detrês câmaras, especificamente uma primeira célulaeletrolitica 302 e uma segunda célula eletrolitica 304. Aágua é transferida, bombeada ou de algum outro modofornecida da fonte de água 305 para a câmara anódica 306 epara a câmara catódica 308 da primeira célula eletrolitica3 02 e para a câmara anódica 310 e para a câmara catódica312 da segunda célula eletrolitica 304. Vantajosamente,esse processo pode produzir de cerca de 1 litro/minuto acerca de 50 litros/minuto de solução aquosa com ORP. Acapacidade de produção pode ser aumentada com a utilizaçãode células eletroliticas adicionais. Por exemplo, três,quatro, cinco, seis, sete, oito, nove, dez ou mais célulaseletroliticas de três câmaras podem ser usadas paraaumentar o volume da solução aquosa com ORP administrada deacordo com a invenção.

A água oxidada produzida na câmara anódica 3 06 e nacâmara anódica 310 é coletada no tanque de mistura 314. Umaporção da água reduzida produzida na câmara catódica 308 ena câmara catódica 312 é coletada no tanque de mistura 314e combinada com a água oxidada. A porção restante de águareduzida produzida no processo é descartada. A águareduzida pode opcionalmente ser submetida a um separador degás 316 e/ou separador de gás 318, antes da adição aotanque de mistura 314. Os separadores de gás removem gasescomo, por exemplo, gás hidrogênio, que são formados na águareduzida durante o processo de produção.

O tanque de mistura 314 pode opcionalmente serconectado a uma bomba de recirculação 315 para permitir amistura homogênea da água oxidada e de uma porção da águareduzida das células de eletrólise 302 e 304. Além disso, otanque de mistura 314 pode opcionalmente incluirdispositivos adequados para o monitoramento do nível e dopH da solução aquosa com ORP. A solução aquosa com ORP podeser transferida do tanque de mistura 314 por meio da bomba317 para aplicação na desinfecção ou esterilização notanque ou próximo à localização do tanque de mistura.Alternativamente, a solução aquosa com ORP pode serliberada para um ou mais recipientes adequados, porexemplo, para embarque para um local remoto (por exemplo,depósito, hospital etc.).

O processo 300 ainda inclui um sistema de recirculaçãode solução salina para fornecer a solução salina â câmarade solução salina 322 da primeira célula eletrolítica 302 ea câmara de solução salina 324 da segunda célulaeletrolítica 304. A solução salina é preparada no tanque desal 320. O sal é transferido por meio da bomba 321 para ascâmaras de solução salina 322 e 324. Preferivelmente, asolução salina flui em série, primeiro através da câmara desolução salina 322, seguida pela câmara de solução salina324. Alternativamente, a solução salina pode ser bombeadapara ambas as câmaras de solução salina simultaneamente.

Antes de retornar ao tanque de sal 320, a soluçãosalina pode fluir através de um trocador de calor 326 notanque de mistura 314 para controlar a temperatura dasolução aquosa com ORP, como necessário.

Os íons presentes na solução salina são eliminados aolongo de tempo na primeira célula eletrolítica 3 02 e nasegunda célula eletrolítica 304. Uma fonte de íonsadicional pode ser adicionada periodicamente ao tanque demistura 320 para substituir os íons que são transferidospara a água oxidada e água reduzida. A fonte de íonsadicional pode ser usada, por exemplo, para manter um pHconstante da solução salina, que pode cair (ou seja, setornar ácido) ao longo de tempo. A fonte adicional de íonspode ser qualquer composto adequado incluindo, por exemplo,sais como, por exemplo, cloreto de sódio. Preferivelmente,hidróxido de sódio é adicionado ao tanque de mistura 320para substituir os íons sódio (Nat) que são transferidospara a água oxidada e água reduzida.

Após sua preparação, a solução aquosa com ORP pode sertransferida para um ou mais recipientes adequados, porexemplo, um recipiente lacrado para distribuição e vendapara os usuários finais como, por exemplo, instalações deassistência médica incluindo, por exemplo, hospitais, casasde repouso, consultórios médicos, centros de cirurgiaambulatorial, consultórios dentários, e semelhantes.

Recipientes adequados podem incluir, por exemplo, umrecipiente lacrado que mantém a esterilidade e estabilidadeda solução aquosa com ORP contida no recipiente. 0recipiente pode ser construído de qualquer material queseja compatível com a solução aquosa com ORP.

Preferivelmente, o recipiente é geralmente não reativo comum ou mais íons ou outras espécies presentes na soluçãoaquosa com ORP.

Preferivelmente, o recipiente é construído de plásticoou vidro. 0 plástico pode ser rígido a fim de que orecipiente seja capaz de ser armazenado em uma prateleira.Alternativamente, o recipiente pode ser flexível, porexemplo, um recipiente feito de plástico flexível como, porexemplo, uma bolsa flexível. Plásticos adequados podemincluir, por exemplo, polipropileno, tereftalato depoliéster (PET), poliolefina, cicloolefina, policarbonato,resina ABS, polietileno, cloreto de polivinila, e misturasdestes. Preferivelmente, o recipiente compreende um ou maispolietilenos selecionados do grupo que consiste empolietileno de alta densidade (HDPE), polietileno de baixadensidade (LDPE), e polietileno linear de baixa densidade(LLDPE). Mais preferivelmente, o recipiente é construído depolietileno de alta densidade.

O recipiente preferivelmente possui uma abertura parapermitir a saída da solução aquosa com ORP. A abertura dorecipiente pode ser lacrada por qualquer forma adequada.Por exemplo, o recipiente pode ser lacrado com uma tampa ouuma rolha de rosca. Opcionalmente, a abertura pode aindaser lacrada com uma camada de folha metálica.

A solução aquosa com ORP a ser usada na cavidadeabdominal e retroperitônio pode ser formulada e engarrafadana instalação de produção ou rapidamente preparada antes daaplicação, por exemplo, por mistura do estoque com água,soro fisiológico ou qualquer outra solução aquosacompatível.

0 gás do headspace do recipiente lacrado pode ser arou qualquer outro gás adequado, que preferivelmente nãoreaja com uma ou mais espécies na solução aquosa com ORP.Gases do headspaces adequados podem incluir, por exemplo,nitrogênio, oxigênio, e misturas destes.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção também pode ser usada para a prevenção ou otratamento de uma infecção, por exemplo, por um ou maispatógenos infecciosos como, por exemplo, microorganismosinfecciosos. Esses microorganismos podem incluir, porexemplo, vírus, bactérias e fungos. 0 vírus pode incluir, por exemplo, um ou mais vírus selecionados do grupo queconsiste em adenovírus, herpes vírus, vírus coxsackie, HIV,rinovírus, coronavírus e vírus da gripe. As bactérias podemincluir, por exemplo, uma ou mais bactérias selecionadas dogrupo que consiste em Escherichia coli, Pseudomonasaeruginosa, Staphylococcus aureus e Myeobateriumtubereulosis. Os fungos podem incluir, por exemplo, um oumais fungos selecionados do grupo que consiste em Candidaalbieans, Baeillus subtilis e Baeillus athrophaeus.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção também pode ser eficaz contra adenovírus.Preferivelmente, a solução aquosa com ORP administrada deacordo com a invenção obtém preferivelmente uma redução delog 10 na carga adenoviral acima de cerca de 3, apósexposição à solução aquosa com ORP por cerca de 2 0 minutos,mais preferivelmente, após exposição por cerca de 15minutos e, ainda mais preferivelmente, após exposição porcerca de 5 minutos. A solução aquosa com ORP administradade acordo com a invenção também pode ser eficaz pararedução da carga viral de HIV-1, preferivelmente por umfator de redução de Iog acima de cerca de 2, maispreferivelmente, por um fator de redução de Iog acima decerca de 2,5 e, ainda mais preferivelmente, por um fator deredução de Iog acima de cerca de 3 após exposição à soluçãoaquosa com ORP por cerca de cinco minutos.

De acordo com o método da presente invenção, aadministração da solução aquosa com ORP para a prevenção ouo tratamento de infecção também pode servir para evitar outratar peritonite associada à infecção (ou aos tecidosafetados), como aqui descrito.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção também pode ser usada para o tratamento de tecidolesionado ou danificado, por exemplo, por contato de um oumais tecidos debilitados ou danificados com uma quantidadeterapeuticamente eficaz da solução aquosa com ORP. Qualquermétodo adequado pode ser usado para contato do tecidolesionado ou danificado, a fim de tratar o tecido lesionadoou danificado. Por exemplo, o tecido lesionado oudanificado pode ser tratado por irrigação do tecido com asolução aquosa com ORP, a fim de colocar em contato otecido lesionado ou danificado com uma quantidadeterapeuticamente eficaz da solução aquosa com ORP. Asolução aquosa com ORP pode ser administrada como um vaporou um spray, ou por aerossolização, nebulização ouatomização, ou por meio de um dispositivo de pressãonegativa ou positiva ou de um dispositivo de hidrocirurgia,como aqui descrito, a fim de colocar em contato o tecidolesionado ou danificado com uma quantidade terapeuticamenteeficaz da solução aquosa com ORP.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção pode ser usada para o tratamento de tecidos queforam lesionados ou danificados, por exemplo, por cirurgia.Por exemplo, a solução aquosa com ORP pode ser usada para otratamento de tecidos que foram lesionados ou danificadospor uma incisão. Além disso, a solução aquosa com ORP podeser usada para o tratamento de tecidos que foram lesionadosou danificados por cirurgia de enxerto, cirurgia deimplante, cirurgia de transplante, cauterização, amputação,radiação, quimioterapia, e combinações destes. Se desejado,a solução aquosa com ORP pode ser usada para o tratamentode tecidos que foram lesionados ou danificados por cirurgiaoral, por exemplo, cirurgia dental como, por exemplo,cirurgia de canal, extração dentária, cirurgia de gengiva,e semelhantes.

É possível que o alto teor de oxigênio e de outrasespécies oxidantes na água com ORP administrada de acordocom a invenção (por exemplo, uma ou mais espécies ativas deoxigênio e uma ou mais espécies de cloro) possa exercerpropriedades de cicatrização positivas como, por exemplo, aquimiotaxia de fibroblastos e a formação de uma nova matrizextracelular.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção pode ser usada para o tratamento de tecidos queforam lesionados ou danificados por um ou mais dequeimaduras, cortes, abrasões, arranhões, erupçõescutâneas, úlceras, feridas puntiformes, combinações destes,e semelhantes, que não são necessariamente causados porcirurgia. A solução aquosa com ORP administrada de acordocom a invenção pode ser usada para o tratamento de tecidolesionado ou danificado que esteja infectado, ou tecidolesionado ou danificado em conseqüência de infecção. Essainfecção pode ser causada por um ou mais patógenosinfecciosos como, por exemplo, um ou mais microorganismosselecionados do grupo que consiste em vírus, bactérias efungos, como aqui descrito.

De acordo com a presente invenção, a administração dasolução aquosa com ORP para o tratamento de tecidolesionado ou danificado também pode servir para evitar outratar peritonite associada à lesão ou ao dano (ou aotecido lesionado ou danificado).

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção também pode ser usada como desinfetante para aerradicação de microorganismos, incluindo bactérias, víruse esporos, em diversos quadros, por exemplo, nos campos daassistência médica e de dispositivos médicos, para adesinfecção de superfícies e equipamentos médicos, e tambémfoi aplicada no tratamento de feridas, esterilização dedispositivos médicos, esterilização de alimentos,desinfecção das mãos em funcionários da área médica,hospitais, usuários domésticos e antibioterrorismo. Asolução aquosa com ORP pode ser usada para a desinfecção deuma superfície, por exemplo, por contato da superfície comuma quantidade antiinfecciosa da solução aquosa com ORP. Asuperfície pode ser colocada em contato com o uso dequalquer método adequado. Por exemplo, a superfície podeser colocada em contato por irrigação da superfície com asolução aquosa com ORP, a fim de desinfetar a superfície.Adicionalmente, a superfície pode ser colocada em contatopor aplicação da solução aquosa com ORP à superfície comoum vapor ou um spray, ou por aerossolização, nebulização ouatomização ou dispositivos de pressão positiva, como aquidescritos, a fim de desinfetar a superfície. Além disso, asolução aquosa com ORP pode ser aplicada à superfície comum lenço de limpeza, como aqui descrito. Para desinfecçãode uma superfície, a superfície pode ser limpa demicroorganismos infecciosos. Alternativamente (ouadicionalmente), a solução aquosa com ORP administrada deacordo com a presente invenção pode ser aplicada àsuperfície para fornecer uma barreira à infecção para,dessa forma, desinfetar a superfície. A solução aquosa comORP também pode ser usada para desinfetar ou manter aesterilidade dos instrumentos durante cirurgias longas.

As superfícies podem incluir uma ou mais superfíciesbiológicas, uma ou mais superfícies inanimadas, ecombinações destas. Superfícies biológicas podem incluir,por exemplo, tecidos dentro de uma ou mais cavidadescorpóreas como, por exemplo, a cavidade oral, a cavidadesinusal, a cavidade craniana, a cavidadeabdominal/peritoneal e a cavidade torácica. 0 tecidobiológico também pode incluir tecidos dentro da cavidadeoral incluindo, por exemplo, tecido da boca, tecido dagengiva, tecido da língua e tecido da garganta. O tecidobiológico também pode incluir tecido muscular, tecidoósseo, tecido de órgãos, tecido mucoso, tecido vascular,tecido neurológico, e combinações destes. Superfíciesinanimadas incluem, por exemplo, dispositivos implantáveiscirurgicamente, dispositivos prostéticos e dispositivosmédicos. De acordo com o método da presente invenção, assuperfícies de órgãos internos, vísceras, músculo esemelhantes, que podem ser expostas durante cirurgias,podem ser desinfetadas, por exemplo, para manter aesterilidade do ambiente cirúrgico. A administração dasolução aquosa com ORP para a desinfecção de uma superfícietambém pode servir para tratar ou evitar peritonite porprevenção de uma infecção por um ou mais microorganismossuscetíveis que podem residir nessas superfícies.

A solução aquosa com ORP também pode ser aplicada aseres humanos e/ou animais para o tratamento de váriascondições, incluindo, sem limitação, peritonite associada aum ou mais dos seguintes: agente de limpeza de feridasabertas/cirúrgicas; desinfecção de patógeno cutâneo (porexemplo, para bactérias, micoplasmas, vírus, fungos,príons); desinfecção de feridas de guerra; promoção dacicatrização de feridas; promoção da cicatrização dequeimaduras; tratamento de úlceras gástricas; irrigação deferidas; e outras condições como, por exemplo, fungoscutâneos; psoríase; pé de atleta; olho vermelho e outrasinfecções oculares; infecções do ouvido (por exemplo,ouvido do nadador); infecções pulmonares/nasais/sinusais; eoutras aplicações médicas no corpo de um ser humano ou deum animal. 0 uso de soluções de água com ORP como promotordo crescimento celular tecidual é ainda descrito naPublicação do Pedido de Patente U.S. 2002/0160053 (aquiincorporada por referência).

A solução aquosa com ORP usada de acordo com ainvenção possui uma ampla variedade de usos ambientais comodesinfetante, detergente, limpador, anti-séptico, esemelhantes, para o controle da atividade de substânciasindesejadas ou danosas presentes no ambiente. Assubstâncias que podem ser tratadas com a solução aquosa comORP incluem, por exemplo, organismos e alérgenos.

Outras aplicações podem incluir as seguintes:equipamentos e dispositivos médicos, dentários e/ouveterinários; indústria de alimentos (por exemplo,superfícies duras, frutas, vegetais, carnes); remediaçãoambiente em hospitais/instalações de assistência médica(por exemplo, superfícies duras); indústria de cosméticos(por exemplo, limpador cutâneo); no ambiente doméstico (porexemplo, pisos, bancadas, superfícies duras); indústria deeletrônicos (por exemplo, limpeza de circuitos, discosrígidos); e bioterrorismo (por exemplo, antraz, micróbiosinfecciosos).

Organismos que podem ser controlados, reduzidos,mortos ou erradicados por tratamento com a solução aquosacom ORP usada de acordo com a invenção incluem, porexemplo, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli,Enterococcus hirae, Aeinetobaeter baumannii, espécies deAeinetobaeter, Baeteroides fragilis, Enterobaeteraerogenes, Enteroeoeeus faeealis, Enterocoeeus faeeiumresistente à vancomicina (VRE, MDR) , Haemophilusinfluenzae, Klebsiella oxytoea, Klebsiella pneumoniae,Mierococeus luteus, Proteus mirabilis, Serratia mareeseens,Staphyloeoeeus aureus, Staphyloeoeeus epidermidis,Staphyloeoeeus haemolytieus, Staphyloeoeeus hominis,Staphyloeoeeus saprophytieus, Streptoeoeeus pneumoniae,Streptoeoeeus pyogenes, Salmonella eholeraesuis, Shigelladysenteriae, e outras bactérias suscetíveis, além deleveduras, por exemplo, Trichophyton mentagrophytes,Candida albicans e Candida tropicalis. A solução aquosa comORP também pode ser aplicada de acordo com a invenção parao controle, redução, morte ou erradicação de vírus,incluindo, por exemplo, adenovírus, vírus daimunodeficiência humana (HIV), rinovírus, influenza (porexemplo, influenza A), hepatite (por exemplo, hepatite A),coronavírus (responsável pela Síndrome Respiratória AgudaGrave (SARS)), rotavírus, vírus respiratório sincicial,vírus do herpes simples, vírus varicela zoster, vírus darubéola e outros vírus suscetíveis.

A solução aquosa com ORP usada de acordo com ainvenção também pode ser usada no controle da atividade dealérgenos presentes no ambiente. Nesse contexto, alérgenostipicamente incluem qualquer substância diferente debactérias, fungos, leveduras ou vírus que possamdesencadear uma resposta imune adversa, ou alergia, empessoas ou animais suscetíveis. A asma é uma respostafisiológica comum após exposição a um ou mais dessesalérgenos. Alérgenos podem ser viáveis (ou seja, deorganismos vivos ou mortos) ou não viáveis (por exemplo,não vivos como, por exemplo, têxteis), e podem estarpresente no ambiente, por exemplo, no ambiente domésticoe/ou locais de trabalho.

Alérgenos domésticos baseados em proteínas que podemser tratados com a solução aquosa com ORP podem incluir,por exemplo, pêlo, pele e fezes de animais, poeiradoméstica, ervas daninhas, gramas, árvores, ácaros epolens. Alérgenos amimais podem incluir, por exemplo,epitélio de gato, epitélio de cachorro, caspa de cavalo,caspa de vaca, caspa de cachorro, epitélio de porquinho-da-india, penas de gansos, epitélio de camundongo, urina decamundongo, epitélio de rato e urina de rato.

Alérgenos ocupacionais podem incluir, por exemplo,agentes de alto peso molecular, tais como, proteínasnaturais geralmente derivadas de proteínas de plantas ouanimais, e substâncias químicas de baixo peso molecular,por exemplo, diisocianatos, e outros materiais encontradosem alguns têxteis. Outros alérgenos químicos que podemestar presentes no local de trabalho podem incluir, porexemplo, anidridos, antibióticos, poeira de madeiras ecorantes. Várias proteínas podem ser alérgenosocupacionais, incluindo gomas vegetais, enzimas, proteínasanimais, insetos, proteínas de plantas e legumes.

Alérgenos adicionais que podem ser tratados pelasolução aquosa com ORP são descritos em Korenblat e Wedner,"Allergy Theory and Practice" (1992) e Middleton, Jr.,"Allergy Principies and Practice" (1993).

A solução aquosa com ORP pode ser aplicada paradesinfetar e esterilizar de qualquer forma adequada. Porexemplo, para desinfetar e esterilizar equipamento médicoou dentário, o equipamento pode ser mantido em contato coma solução aquosa com ORP por um período de tempo suficientepara reduzir o nível de organismos presentes no equipamentoaté um nível desejado.

Para desinfecção e esterilização de superfícies duras,a solução aquosa com ORP pode ser aplicada à superfíciedura diretamente de um recipiente no qual a solução aquosacom ORP é armazenada. Por exemplo, a solução aquosa com ORPpode ser derramada, pulverizada ou de algum outro modoaplicada diretamente à superfície dura. A solução aquosacom ORP pode então ser distribuída sobre a superfície duracom o uso de um substrato adequado como, por exemplo, pano,tecido ou toalha de papel. Em aplicações hospitalares, osubstrato é preferivelmente estéril. Alternativamente, asolução aquosa com ORP pode primeiro ser aplicada a umsubstrato como, por exemplo, pano, tecido ou toalha depapel. O substrato umedecido pode então ser colocado emcontato com a superfície dura. Alternativamente, a soluçãoaquosa com ORP pode ser aplicada às superfícies duras pordispersão da solução no ar, como aqui descrito. A soluçãoaquosa com ORP pode ser aplicada de forma similar a sereshumanos e animais.

A solução aquosa com ORP também pode ser aplicada comum lenço de limpeza que compreende um substrato nãohidrossolúvel e a solução aquosa com ORP aqui descrita, emque a solução aquosa com ORP é distribuída sobre osubstrato. A solução aquosa com ORP pode ser impregnada,revestida, coberta ou de algum outro modo aplicada aosubstrato. Preferivelmente, o substrato é pré-tratado com asolução aquosa com ORP, antes da distribuição dos lenços delimpeza aos usuários finais.

O substrato para o lenço de limpeza pode ser qualquermaterial absorvente ou adsorvente não hidrossolúveladequado. Diversos materiais podem ser usados comosubstrato. Ele deve ter resistência à umidade,abrasividade, maciez e porosidade suficientes. Além disso,o substrato não deve afetar de forma adversa a estabilidadeda solução aquosa com ORP. Exemplos incluem substratos nãoentrelaçados, substratos entrelaçados, substratos hidro-entrelaçados e esponjas.

O substrato pode ter uma ou mais camadas. Cada camadapode ter texturas e abrasividade iguais ou diferentes.

Texturas diferentes podem ser causadas pelo uso dediferentes combinações de materiais ou pelo uso dediferentes processos de manufatura ou uma combinaçãodestes. O substrato não deve se dissolver ou se degradar naágua. O substrato pode, desse modo, fornecer um veiculopara a liberação da solução aquosa com ORP à superfície aser tratada.

O substrato pode ser uma única folha não entrelaçadaou múltiplas folhas não entrelaçadas. A folha nãoentrelaçada pode ser feita de polpa de madeira, fibrassintéticas, fibras naturais, e misturas destas. Fibrassintéticas adequadas para uso no substrato podem incluir,sem limitação, poliéster, viscose, náilon, polipropileno,polietileno, outros polímeros de celulose, e misturasdessas fibras. Os não entrelaçados podem incluir materiaisnão entrelaçados fibrosos de folha que incluem fundidos asopro, co-formados, air-laid, ligados por fiação, colocadosa úmido, materiais de trama bonded-carded, materiais hidro-entrelaçados (também conhecida como spunlaced), ecombinações destes. Esses materiais podem compreenderfibras sintéticas ou naturais, ou combinações destas. Umligante pode opcionalmente estar presente no substrato.

Exemplos de substratos não entrelaçados e nãohidrossolúveis adequados incluem celulose 100% Wadding deGrau 1804 de Little Rapids Corporation, material depolipropileno 100% perfurado NB 701-2.8-W/R de AmericanNon-wovens Corporation, uma mistura de fibras celulósicas esintéticas Hydraspun 8579 de Ahlstrom Fibre Composites eViscose 70%/PES 30% Código 9881 de PGI Nonwovens PolymerCorp. Exemplos adicionais de substratos não entrelaçadosadequados para uso nos lenços de limpeza são descritos nasPatentes U.S. Nos 4.781.974, 4.615.937, 4.666.621 e5.908.707 e nas Publicações de Pedido de PatenteInternacional WO 98/03713, WO 97/40814 e WO 96/14835 (aquiincorporadas por referência).

0 substrato também pode ser feito de materiaisentrelaçados, tais como fibras de algodão, misturas dealgodão/náilon ou outros têxteis. Celulose regenerada,espumas de poliuretano, e semelhantes, que são usadas naprodução de esponjas, também são adequadas para uso.

A capacidade de carga líquida do substrato deve ser depelo menos cerca de 50%-1.000% do peso seco deste,principalmente pelo menos cerca de 200%-800%. Isso éexpresso como carga de 1/2 a 10 vezes o peso do substrato.0 peso do substrato varia, sem limitação, de cerca de 0,01a cerca de 1.000 gramas por metro quadrado, principalmente25 a 120 gramas/m2 (denominado "peso-base") , e tipicamenteé produzido como uma folha ou trama que é cortada, cortadasob pressão, ou de algum outro modo dimensionada no formatoe tamanho apropriados. Os lenços de limpeza terãopreferivelmente certa resistência tênsil úmida que é, semlimitação, de cerca de 25 a cerca de 250 Newtons/m, maispreferivelmente, de cerca de 75-170 Newtons/m.

A solução aquosa com ORP pode ser distribuída,impregnada, revestida, coberta ou de algum outro modoaplicada ao substrato por qualquer método adequado. Porexemplo, porções individuais de substrato podem sertratadas com uma quantidade distinta da solução aquosa comORP. Preferivelmente, é feito um tratamento de massa de umatrama contínua de material de substrato com a soluçãoaquosa com ORP. Toda a trama de material de substrato podeser embebida na solução aquosa com ORP. Alternativamente, àmedida que a trama de substrato é rebobinada, ou até mesmodurante a criação de um substrato não entrelaçado, asolução aquosa com ORP pode ser pulverizada ou metrificadasobre a trama. Uma pilha de porções de substrato cortadas edimensionadas individualmente pode ser impregnada ourevestida com a solução aquosa com ORP em seu recipientepelo fabricante.

Os lenços de limpeza opcionalmente podem contercomponentes adicionais para aprimorar as propriedades doslenços. Por exemplo, os lenços de limpeza podem aindacompreender polímeros, tensoativos, polissacarídeos,policarboxilatos, alcoóis polivinílicos, solventes, agentesquelantes, tampões, espessantes, pigmentos, corantes,fragrâncias, e misturas destes para aprimorar aspropriedades dos lenços. Esses componentes opcionais nãodevem afetar de forma adversa a estabilidade da soluçãoaquosa com ORP. Exemplos de vários componentes que podemopcionalmente ser incluídos nos lenços de limpeza sãodescritos nas Patentes U.S. 6.340.663, 6.649.584 e6.624.135 (aqui incorporadas por referência).

Os lenços de limpeza da invenção podem ser lacradosindividualmente com uma capa termoplástica lacrada comcalor ou com cola (por exemplo, polietileno, Mylar, esemelhantes). Os lenços também podem ser embalados comovárias folhas individuais para uma distribuição maiseconômica. Os lenços de limpeza podem ser preparadoscolocando-se inicialmente várias folhas do substrato em umdispensador, e a seguir colocando-se em contato as folhasde substrato com a solução aquosa com ORP da invenção.

Alternativamente, os lenços de limpeza podem ser formadoscomo uma trama continua aplicando-se a solução aquosa comORP ao substrato durante o processo de manufatura, e depoiscolocando-se o substrato umedecido em um dispensador.

0 dispensador inclui, sem limitação, uma lata com umfechamento ou um tubo com fechamento. 0 fechamento nodispensador é para isolar os lenços úmidos do ambienteexterno, e para evitar a volatilização prematura dosingredientes líquidos.

0 dispensador pode ser feito de qualquer materialadequado que seja compatível tanto com o substrato quantocom a solução aquosa com ORP. Por exemplo, o dispensadorpode ser feito de plástico como, por exemplo, polietilenode alta densidade, polipropileno, policarbonato,polietileno tereftalato (PET), cloreto de polivinila (PVC),ou outros plásticos rígidos.

A trama contínua de lenços pode ser passada através deuma abertura fina no topo do dispensador, principalmente,através do fechamento. Pode então ser necessário um meiopara dimensionar o comprimento ou o tamanho desejado dolenço da trama. Pode ser fornecida uma lâmina cortante, umaborda serrilhada ou outro meio de corte da trama no tamanhodesejado no topo do dispensador, como exemplo nãolimitante, com a abertura fina na verdade se desdobrando emuso como uma borda cortante. Alternativamente, a tramacontínua de lenços pode ser marcada, dobrada, segmentada,perfurada ou parcialmente cortada em tamanhos oucomprimentos uniformes ou não uniformes, o que entãoevitaria a necessidade de uma borda cortante afiada. Alémdisso, os lenços podem ser interfoliados a fim de que aremoção de um lenço avance o lenço seguinte.

A solução aquosa com ORP da invenção alternativamentepode ser dispersa no ambiente através de um meio gasosocomo, por exemplo, ar. A solução aquosa com ORP pode serdispersa no ar por qualquer meio adequado. Por exemplo, asolução aquosa com ORP pode ser formada em gotículas dequalquer tamanho adequado e dispersa em uma sala.

Para aplicações em pequena escala, a solução aquosacom ORP pode ser dispensada por meio de um atomizador queinclui uma coluna e bomba. Alternativamente, a soluçãoaquosa com ORP pode ser embalada em recipientes deaerossol. Os recipientes de aerossol podem incluir oproduto a ser dispensado, um propelente, um recipiente euma válvula. A válvula pode incluir um ativador e um tubode imersão. 0 conteúdo do recipiente pode ser dispensadopressionando-se o ativador. Os vários componentes dorecipiente de aerossol devem ser compatíveis com a soluçãoaquosa com ORP. Propelentes adequados podem incluir umhalocarbono liqüefeito, hidrocarboneto ou misturahalocarbono-hidrocarboneto, ou um gás comprimido como, porexemplo, dióxido de carbono, nitrogênio ou óxido nitroso.Sistemas em aerossol preferivelmente geram gotículas quepossuem um tamanho que varia de cerca de 0,15 μπι a cerca de5 μιη.

A solução aquosa com ORP administrada de acordo com ainvenção opcionalmente pode conter aditivos adequados, porexemplo, para a limpeza de ambientes domésticos e detrabalho. Aditivos adequados podem incluir, por exemplo,tensoativos, tais como detergentes e agentes de limpeza.Perfumes ou outros compostos que produzem aroma tambémpodem ser incluídos para aumentar a receptividade doconsumidor da solução aquosa com ORP. Alternativamente,pode ser adicionado um corante marcador para facilitar aavaliação da aplicação específica.

Para algumas aplicações, a solução aquosa com ORP podeopcionalmente conter um agente alvejante. 0 agentealvejante pode incluir, por exemplo, a composto que clareiaou embranquece um substrato. A solução aquosa com ORP quecontém um agente alvejante pode ser usada na lavagem deroupa doméstica para desinfetar e esterilizar bactérias egermes, além de clarear roupas. Agentes alvejantesadequados incluem, sem limitação, agentes alvejantes quecontêm cloro e agentes alvejantes que contêm peróxido.Também podem ser adicionadas misturas de agentes alvejantesà solução aquosa com ORP. 0 agente alve jante pode seradicionado na forma de uma solução aquosa à solução aquosacom ORP.

Agentes alvejantes que contêm cloro adequados podemincluir, por exemplo, cloro, hipocloritos, compostos de N-cloro e dióxido de cloro. Preferivelmente, o agentealvejante que contém cloro adicionado ã solução aquosa comORP é hipoclorito de sódio ou ácido hipocloroso. Outrosagentes alvejantes que contêm cloro adequados incluem, porexemplo, cloro, hipoclorito de cálcio, solução alvejante(por exemplo, solução aquosa de hipoclorito de cálcio ecloreto de cálcio), pó alvejante (por exemplo, mistura dehipoclorito de cálcio, hidróxido de cálcio, cloreto decálcio, e hidratos destes), hipoclorito dibásico demagnésio, hipoclorito de lítio, fosfato trissódico clorado,e misturas destes.

A adição de um agente alvejante à solução aquosa comORP pode ser feita de qualquer modo adequado. Por exemplo,uma solução aquosa que contém um agente alvejante pode serpreparada com o uso de alvejante doméstico (por exemplo,alvejante Clorox®) ou outra fonte adequada de agentealvejante que contém cloro ou outro agente alvejante. Asolução do agente alvejante pode então ser combinada com asolução aquosa com ORP.

O agente alvejante pode ser adicionado à soluçãoaquosa com ORP em qualquer quantidade adequada.Preferivelmente, a solução aquosa com ORP que contém umagente alvejante não é irritante para a pele humana ouanimal. O teor total de íons cloreto da solução aquosa comORP que contém um agente alvejante que contém cloro podeser de cerca de 1.000 ppm a cerca de 5.000 ppm, porexemplo, de cerca de 1.000 ppm a cerca de 3.000 ppm. O pHda solução aquosa com ORP que contém um agente alvejanteque contém cloro é preferivelmente de cerca de 8 a cerca de10, e o potencial de oxirredução da solução épreferivelmente de cerca de +700 mV a cerca de +800 mV.

Os exemplos a seguir ilustram ainda mais a invenção,mas, evidentemente, não devem ser considerados de formaalguma como limitantes de seu escopo.

EXEMPLOS 1-3

Esses exemplos demonstram as características únicas dasolução aquosa cora ORP usada de acordo com a invenção. Asamostras da solução aquosa com ORP nos Exemplos 1-3 foramanalisadas de acordo com os métodos aqui descritos paradeterminar as propriedades físicas e os níveis de espéciesiônicas e de outras espécies químicas presentes em cadaamostra. Os resultados obtidos para dióxido de cloro,ozônio e peróxido de hidrogênio se baseiam em testes-padrãousados para medir estas espécies, mas podem ser indicativosde espécies diferentes, o que também pode gerar resultadospositivos do teste. Além disso, foi relatado que dióxido decloro, ozônio e peróxido de hidrogênio reagem comhipoclorito, resultando no seu consumo e na produção deoutros compostos (por exemplo, HCl e O2) . 0 pH, o potencialde oxirredução (ORP) e as espécies iônicas presentes sãoapresentados na Tabela 1 para cada amostra da soluçãoaquosa com ORP.

Tabela 1. Características físicas e espécies iônicaspresentes para as amostras de solução aquosa com ORP

A solução aquosa com ORP possui característicasfísicas adequadas para uso, por exemplo, na desinfecção,esterilização, limpeza e/ou na prevenção e/ou no tratamentode inflamação, sinusite, peritonite ou infecção.

EXEMPLOS 4-10

Esses exemplos demonstram a adição de um agentealvejante à solução aquosa com ORP de acordo com a invençãoem várias quantidades. Em particular, esses exemplosdemonstram a atividade antimicrobiana e a capacidade debranqueamento de tecidos das composições.

Uma solução alvejante 10% Clorox® foi preparada com ouso de água destilada. As soluções seguintes foram entãopreparadas com a utilização da solução alvejante 10%:solução aquosa com ORP 8 0%/alvejante 2 0% (Exemplo 4) ;solução aquosa com ORP 60%/alvejante 40% (Exemplo 5) ;solução aquosa com ORP 40%/alvejante 60% (Exemplo 6) ;solução aquosa com ORP 20%/alvejante 80% (Exemplo 7) ; esolução aquosa com ORP 0%/alvejante 100% (Exemplo 8).Também foram usadas soluções de controle para comparação,incluindo solução aquosa com ORP 100%/alvejante 0% (Exemplo9) e uma solução aquosa com ORP com detergente Tween 2 00,01% (Exemplo 10). As características físicas dessasamostras foram determinadas, especificamente o pH, opotencial de oxirredução (ORP), o teor total de cloro (Cl")e de ácido hipocloroso (HClO), e foram testadas quanto aoteor de dióxido de cloro e teor de peróxido, cujosresultados são apresentados na Tabela 2.

Tabela 2. Características físicas das composições desolução aquosa com ORP/alvejante

<table>table see original document page 80</column></row><table>O grande bolo de Ions cloro adicionado como parte doagente alvejante impediu a medida precisa dos níveis dedióxido de cloro e peróxido, como indicado pelasdesignações n.d. Além disso, os resultados obtidos paradióxido de cloro e peróxido se baseiam em testes-padrãousados para medir estas espécies, mas podem ser indicativosde espécies diferentes que também podem gerar resultadospositivos do teste. Além disso, foi relatado que dióxido decloro, ozônio e peróxido de hidrogênio reagem comhipoclorito, resultando no seu consumo e na produção deoutros compostos (por exemplo, HCl e O2). Como essesexemplos demonstram, os níveis de ácido hipocloroso dasolução aquosa com ORP, com e sem a adição de um agentealvejante, são similares.

As amostras dos Exemplos 4-10 foram submetidas a umteste de contagem de esporos superiores com a utilização deesporos de Bacillus subtilis var. niger (ATCC N°: 9.372obtido de "SPS Medicai of Rush", Nova York). As suspensõesde esporos foram concentradas (por evaporação em uma coifaestéril) até 4 χ IO6 esporos por 100 microlitros. Umaamostra de 100 microlitros da suspensão de esporos foimisturada com 900 microlitros de cada uma das amostras nosExemplos 4-10. As amostras foram incubadas em temperaturaambiente por períodos de 1 a 5 minutos, como mostrado naTabela 3. Nos momentos indicados, 100 microlitros dasamostras incubadas foram plaqueados em placas de TSAindividuais e incubados por 24 horas a 35°C ± 2°C, e apósesse tempo o número de colônias resultantes em cada placafoi determinado. As placas de controle demonstraram que asconcentrações de esporos de partida eram > 1 χ IO6esporos/100 microlitros. A concentração de esporos deBacillus para as várias amostras nos vários períodos deincubação (como a média de duas determinações) éapresentada na Tabela 3.

Tabela 3. Concentrações de esporos de Bacillus

<formula>formula see original document page 82</formula>

Como esses resultados demonstram, à medida que aconcentração de alvejante (como solução alvejante aquosa10%) aumenta, a quantidade de esporos de Bacillus morta éreduzida para as amostras incubadas por 2-3 minutos. Noentanto, para amostras incubadas por 5 minutos, aconcentração de alvejante não interfere com a morte deesporos de Bacillus. Além disso, os resultados demonstramque a adição de detergente 0,01% à solução aquosa com ORPnão reduz a morte de esporos.

As amostras dos Exemplos 4-10 foram submetidas a umteste de branqueamento de tecidos. Os tecidos sobre osquais as amostras foram testadas eram camisetas de criançascom 100% de viscose com manchas de corante azul escuro.

Pedaços de 12,903 centímetros quadrados de tecido tingidoforam colocados em tubos plásticos de 50 ml. Cada pedaço detecido foi coberto por uma amostra da solução nos Exemplos4-10. O tempo decorrido até o branqueamento completo serobtido, como determinado pelo branqueamento do tecido, éapresentado na Tabela 4.

Tabela 4. Tempo até o branqueamento completo da amostra detecido

<table>table see original document page 83</column></row><table>

Como demonstrado por esses exemplos, à medida que aconcentração da solução aquosa com ORP aumenta nacomposição, o tempo até o branqueamento completo ser obtidoaumenta.

EXEMPLO 11

A finalidade desse estudo foi avaliar a segurança doteste de uma solução aquosa com ORP exemplar, Microcyn,quando administrada como gotas na cavidade nasal decoelhos. Trinta e três coelhos foram distribuídosaleatoriamente em dois grupos, Grupos I e II. 0 Grupo I (18animais) serviu como o grupo de controle, e o Grupo II (15animais) foi dosado com o artigo de teste. No Io Dia ou noDia 0, os pesos corporais foram registrados e amostras desangue foram coletadas para análise de parâmetrosselecionados. No Dia 0, 500 μΐ de soro fisiológico estérilforam administrados aos animais do Grupo I, e 5 00 μΐ doartigo de teste (em uma concentração de 50%) foramadministrados aos animais do Grupo II. Tanto o artigo decontrole quanto o artigo de teste foram administrados duasvezes diariamente como gotas na narina direita. Os animaisforam dosados da mesma forma nos Io-6° Dias. Os animaisforam observados diariamente quanto aos sinais de efeitosfarmacológicos e/ou toxicológicos, com atenção especial aonariz. Os pesos corporais foram registrados semanalmenteaté o término do estudo. No 7° Dia, um terço dos animais decada grupo foi selecionado para coleta de sangue,sacrifício e necropsia. Os animais restantes continuaram aser dosados até o 14° Dia, quando metade dos animais decada grupo foi selecionada para coleta de sangue,sacrifício e necropsia. No 21° Dia, após um período derecuperação de 7 dias, os animais restantes tiveram osangue coletado, e foram sacrificados e submetidos ànecropsia. Amostras da mucosa nasal de ambas as narinasforam coletadas de cada animal para análisehistopatológica.

A necropsia consistiu em observações macroscópicas dotrato respiratório. Toda a passagem nasal e os ossosassociados foram coletados e fixados em formalinatamponada. Amostras de quaisquer anormalidades visíveis notrato respiratório também foram coletadas parahistopatologia. Três amostras de biópsia (cavidade nasalanterior, média e posterior) por narina (direita tratada eesquerda não tratada) foram examinadas. A histopatologiamicroscópica da mucosa nasal incluiu: integridade doepitélio, presença ou ausência de cílios epiteliais,infiltração de células inflamatórias, edema, presença decélulas caliciformes, hiperplasia de glândulas, alteraçõesno número ou nas características de vasos sangüíneos equaisquer outras alterações ou observações.

Os resultados (observações em vida, incluindoobservações nasais, pesos corporais, análise sangüínea,resultados da necropsia macroscópica e da histopatologia)do grupo de teste foram comparados com o grupo de controle.O grupo de teste não era significativamente diferente dosanimais tratados com soro fisiológico em termos deirritação leve.

EXEMPLO 12

Esse exemplo demonstra a ausência de toxicidade eestabilidade de soluções de água com ORP.

Foram feitos estudos toxicológicos nos quais Microcyn60 foi aplicada topicamente à pele intacta, com o uso deuma única aplicação com exposição de 4 a 24 horas. Váriasaplicações de Microcyn 60, uma ou duas vezes ao dia,durante um período de 7 dias, foram avaliadas em feridasprofundas em ratos.

Foram feitos dois estudos na pele intacta de coelhospara avaliar o efeito de Microcyn 6 0 quanto à irritaçãoaguda e toxicidade dérmica. Não foram encontrados sinaisclínicos, irritação dérmica ou anormalidades na pele nanecropsia em nenhum dos animais expostos à Microcyn 60.

A caracterização da toxicidade local e sistêmica deMicrocyn 60 aplicada topicamente em uma ferida profunda foiavaliada em ratos. Não foram observadas anormalidades oudiferenças significativas nos parâmetros da bioquímica dosangue ou na citologia hematológica, nem anormalidades nasautópsias. As gradações da irritação cutânea e ahistopatologia das feridas e dos tecidos em torno do localde aplicação não revelaram qualquer diferença entre asferidas tratadas com Microcyn 60 e aquelas do grupo decontrole tratado com soro fisiológico.

A toxicidade sistêmica de Microcyn 60 também foiavaliada por meio de uma injeção intraperitoneal emcamundongos. Para isso, cinco camundongos foram injetadoscom uma dose única (50 ml/kg) de Microcyn 60 pela viaintraperitoneal. Da mesma forma, cinco camundongos decontrole foram injetados com uma dose única (50 ml/kg) desoro fisiológico (cloreto de sódio a 0,9%). Nessainvestigação, não foram observadas mortalidade nem qualquerevidência de toxicidade sistêmica em qualquer um dosanimais que receberam a dose intraperitoneal única deMicrocyn 60, indicando que a LD50 é acima 50 ml/kg.

Microcyn 60 foi administrada pela via oral em ratospara permitir sua absorção e para caracterizar qualquerefeito tóxico inerente ao produto. Nesse estudo, uma doseúnica (4,98 ml/kg) foi administrada por um tubo esofágico atrês ratos albinos da cepa Sprague-Dawley. Não houvemortalidade, nem havia sinais clínicos ou anormalidades nasautópsias de qualquer um dos animais expostos à dose oralúnica de Microcyn 60.

O potencial de Microcyn 6 0 aplicada topicamente parairritação ocular também foi avaliado em coelhos. Não foiobservada irritação ocular ou qualquer outro sinal clínicoem qualquer animal exposto à Microcyn 60 por administraçãotópica por meio da via ocular.

Microcyn 60 foi aplicada pela via inalatória em ratospara determinar a toxicidade aguda potencial por inalação.Todos os animais mostraram uma redução muito discreta oudiscreta da atividade e piloereção após a exposição, mastodos estavam assintomáticos no dia seguinte. Não foiobservada mortalidade ou anormalidades na autópsia dosanimais expostos à Microcyn 60 por inalação.

A avaliação do potencial para sensibilização da pelecom Microcyn 60 foi realizada em porquinhos-da-índia usandoum método de oelusão com curativo modificado (Buehler). Nãofoi observada irritação nos animais do grupo de controleapós um ataque de tratamento simples, nem nos animaisavaliados (tratados por indução) após ataque com otratamento. Esses estudos demonstram que Microcyn 60 nãoprovoca uma reação de sensibilização.

Dessa forma, quando foi aplicada à pele intacta, aferidas dérmicas abertas profundas, no saco conjuntival,por vias oral e de inalação ou por meio de injeçãointraperitoneal, Microcyn 60 não mostrou efeitos adversosrelacionados ao produto. Também há experiência notratamento de mais de milhares de pacientes com feridas denatureza muito diversa na pele e nas mucosas, comexcelentes resultados anti-sépticos e cosméticos.Conseqüentemente, Microcyn 60 aplicada topicamente deve sereficaz e bem tolerada em seres humanos.

Microcyn 60 é embalada em garrafas PET transparenteslacradas de 240 ml. Esse produto é estocado em temperaturaambiente e permanece estável por até 2 anos nessasgarrafas. A partir de seu perfil de alta segurançabiológica, Microcyn 60 pode ser descartada com segurança,por exemplo, por esvaziamento na pia, sem risco decontaminação ou corrosão.

Foram feitos vários experimentos microbianos comMicrocyn 60, tanto nos Estados Unidos quanto no México. Aerradicação de mais de 90% das bactérias ocorre nosprimeiros segundos de exposição. A atividade antibacterianae antimicótica que Microcyn 60 exibe de acordo com essepadrão é resumida na Tabela 5.

Tabela 5. Tempos de morte.

<table>table see original document page 88</column></row><table>

0 experimento de atividade esporicida foi realizado deacordo com o protocolo da OPAS [Organização Pan-Americanade Saúde]/OMS (Organização Mundial de Saúde).

A atividade viricida de Microcyn 60 foi recentementeconfirmada em estudos realizados nos Estados Unidos contraHIV, e sua atividade contra Listeria monocytogenes, MRSA eMycobacterium tuberculosis também foi demonstrada. Dessaforma, foi demonstrado que Microcyn 60, quando administradacomo recomendado, pode erradicar bactérias, fungos, vírus eesporos com um a quinze minutos de exposição.

EXEMPLO 13

Esse exemplo demonstra a atividade viricida de umasolução aquosa com ORP exemplar contra Adenovírussorotipo 5. Para esse exemplo, foram usados vetoresadenovirais (Ad) baseados no adenovírus humano do tipo 5,que são Ela-, parcialmente El-b, e parcialmente E3eliminados. Um plasmideo shuttle que contém o gene repórterda Proteína Verde Fluorescente (GFP) sob o controle detranscrição de pCMV foi preparado (pAd-Track). Arecombinação homóloga desse plasmideo pShuttle complasmideo AdEasy 1 foi realizada em bactériaseletrocompetentes. Os clones que tinham inserções foramtestados por digestões por endonuclease de restrição. Apósconfirmado, o plasmideo DMA supercoiled foi transformado emcélulas DHlOB para amplificação em maior escala.Subseqüentemente, 293 células (ATCC 1573) foram cultivadasem meio sem soro (OptiMEM-GIBCO) e transfectadas complasmideo recombinante digerido com Pad. As célulasinfectadas foram monitoradas quanto ao efeito citopático,coletadas e lisadas com três ciclos de congelamento edescongelamento. Os vírus resultantes (AdGFP) forampurificados com colunas AdenoPure (BD Clontech) de acordocom as instruções do fabricante. Os vírus foramquantificados por OD 260/280. 0 rendimento final foi de1, 52 X IO11 pfu/ml.

A eficácia da solução aquosa com ORP para inativaçãode adenovírus que codifica o gene da proteína verdefluorescente (AdGFP) foi avaliada com a utilização de umteste baseado na detecção de emissão de fluorescência porcélulas HeLa infectadas com vírus AdGFP de controle ou comAdGFP tratado com solução aquosa com ORP, usando citometriade fluxo ativada por fluorescência. A infecção de célulasHeLa foi sempre feita com 7,5 X IO7 pfu/ml (ou seja, 150m.o.i.). Em todas as condições de teste, as célulaspareciam normais sob microscopia óptica. A fluorescência defundo medida em células HeLa de controle foi de 0,06%. Apósinfecção com AdGFP de controle, 88,51% das células HeLaexpressavam GFP. Após exposição à solução aquosa com ORP, ainfectividade do adenovírus diminuiu de forma inversamenteproporcional ao período de exposição. Conseqüentemente, ovírus tratado com solução aquosa com ORP por 1, 5 e 10minutos só podia expressar GFP em 2,8%, 0,13% e 0,09% deculturas de células HeLa, respectivamente. Considerando aautofluorescência e a carga viral inicial para todas ascondições testadas (ou seja, 7,5 X IO7 pfu), a titulaçãoinfecciosa foi de 6,6 X IO7 pfu no grupo AdGFP-HeLa decontrole. Nos grupos em que o vírus foi tratado com asolução aquosa com ORP, as titulações infecciosas foram de2,0 X IO6, 5,2 X IO4 e 2,2 X IO4 em um, cinco e dez minutosde exposição do vírus à solução aquosa com ORP,respectivamente. Portanto, o fator de redução de Iog 10 foide 1,5, 3,1 e 3,5 em um, cinco e dez minutos de exposiçãoviral à solução aquosa com ORP. Considerados em conjunto,esses resultados demonstram que a exposição do vírus àsolução aquosa com ORP por 5 minutos obtém uma redução delog 10 na carga viral > 3.

EXEMPLO 14

Esse exemplo demonstra a eficácia viricida de umasolução aquosa com ORP exemplar contra HIV com o uso doprotocolo da "United States Environmental ProtectionAgency" para desinfecção de superfícies ambientais inanimadas.

A cepa SF33 de HIV-I foi usada para esse estudo.Células mononucleares do sangue periférico de doadoressaudáveis foram ativadas com PHA (3 μg/ml; Sigma) e IL-2humana (20 U/ml, Roche) em meios HUT por três dias. Ascélulas foram lavadas e infectadas com a cepa com SF33. Osobrenadante foi coletado nos 4 o e 6° dias, e testadoquanto ao antígeno de HIV-I p24 por ELISA (BeckmanCoulter). O sobrenadante foi centrifugado para removercélulas e restos a 314 rad/s por 2 0 minutos em temperaturaambiente. O sobrenadante foi removido, dividido emalíquotas, e o vírus foi estocado a -80°C até o dia de suautilização.

As alíquotas congeladas foram descongeladas a 37°C pordois minutos, imediatamente antes de sua utilização. Foramusadas diluições logarítmicas seriais (-1 a -5) em meioHUT. As películas de vírus foram preparadas espalhando-se0,2 ml de inoculo de vírus uniformemente sobre os fundos deplacas de Petri de poliestireno estéreis de 55 cm2. Aspelículas de vírus foram secas ao ar em temperaturaambiente (21°C) em um gabinete de segurança biológica, atéque parecessem visivelmente secas (20 minutos) (paraassegurar que a cepa do vírus (SF3 3) era capaz de replicare causar efeitos citopáticos, o procedimento foi repetidocom uma suspensão viral que havia permanecido em meio HUTsem ser seca).

A película de controle foi exposta a 2 ml de meios HUTpor cinco minutos. O vírus foi raspado e diluído. Películassecas separadas foram expostas a 2 ml cada da soluçãoaquosa com ORP por cinco minutos em temperatura ambiente.Após o tempo de exposição, as placas foram raspadas e seuconteúdo foi ressuspenso. A mistura de vírus-solução aquosacom ORP foi imediatamente diluída (10:1) em meio HUT.Diluições Iog seriais da suspensão resultante foramtestadas quanto à infectividade (para controlar um possívelefeito citotóxico direto da solução aquosa com ORP sobrecélulas MT-2, uma alíquota de 2 ml da solução aquosa comORP foi diluída serialmente (10:1 até 10:5) em meio, einoculada em culturas de células MT-2). [0211] A linhagemde células MT-2 foi usada como a linhagem celularindicadora nos ensaios de infectividade. Essa linhagemmostra um efeito citopático que consiste na formação desincícios quando infectada com HIV-1. Quatro micropoçosforam inoculados com 0,2 ml de cada diluição da suspensãoreconstituída de vírus dos grupos de teste (reconstituídosem água com ORP) e de controle (reconstituídos com meio decontrole). Os controles de células não infectadas célulaforam inoculados somente com meio de teste. As culturasforam incubadas a 37°C e CO2 5%.

As culturas foram pontuadas periodicamente a cada doisdias quanto à presença ou ausência de efeito citopático,bem como quanto à presença de antígeno p24-HIV-I por ELISA.A infecção experimental com HIV-I de controle exerceu umefeito citopático e liberação de proteína Ag p24 nosobrenadante em culturas de MT-2 infectadas. Em contraste,o tratamento de HIV-I com a solução aquosa com ORP porcinco minutos obteve um fator de redução de log > 3 nacarga viral medida em culturas de MT-2 por ambos osensaios. Dessa forma, esses resultados demonstram que onível de eficácia está em conformidade com as exigências daEPA para atividade viricida de HIV-I sobre superfíciesinanimadas.

EXEMPLO 15

Esse exemplo demonstra o efeito de uma solução aquosacom ORP exemplar versus peróxido de hidrogênio (HP) sobre aviabilidade de fibroblastos diplóides humanos (HDFs). Paraestudar essa toxicidade potencial, os HDFs foram expostosin vitro à solução aquosa com ORP e ao peróxido dehidrogênio (HP) . O HP é conhecido por ser tóxico para ascélulas eucarióticas, aumentando a apoptose e a necrose ereduzindo a celular viabilidade. Nesse exemplo, aviabilidade celular, a apoptose e a necrose foram medidasem HDFs expostos ã solução aquosa com ORP pura e a 880 mMde HP (uma concentração empregada para usos anti-sépticosde HP) por 5 e 3 0 minutos.

As culturas de HDFs foram obtidas de três diferentesprepúcios, que foram reunidos em pool e crio-preservadosjuntos para serem utilizados nesse estudo. Só foram usadascélulas diplóides para todos os experimentos. Na análise dociclo celular, a diploidia do DNA foi definida como apresença de um único pico GO-Gl com uma CV </= 7%, e umpico G2/M correspondente coletado de pelo menos 20.000eventos totais. As FIG. 4A-4C apresentam os resultados, emque os tempos de exposição de 5 e 30 minutos são mostradosem barras brancas e pretas, respectivamente. A análisesimultânea desses parâmetros foi realizada nas mesmaspopulações de células por citometria de fluxo usando: A) 7-aminoactinomicina D (7AAD); B) Anexina V-FITC; e C) Iodetode propidio. As FIG. 4A-4C mostram os valores percentuaisexpressos como média ± DP (n=3).

A viabilidade celular foi de 75% e 55% após umaexposição de 5 minutos à solução aquosa com ORP e ao HP,respectivamente (FIG. 4A) . Caso a exposição fosseprolongada até 30 minutos, a viabilidade celular diminuíaainda mais até 60% e 5%, respectivamente. Aparentemente, asolução aquosa com ORP induziu morte celular por meio denecrose, pois 15% das células incorporarão iodeto depropídio na análise por citometria de fluxo em ambos ostempos (FIG. 4C) . A apoptose não parece ser o mecanismopelo qual a solução aquosa com ORP induz morte celular,pois somente 3% das células tratadas com solução aquosa comORP expuseram Anexina-V na superfície celular (um marcadorde apoptose) (FIG. 4B) . Essa percentagem foi, na verdade,similar àquela medida no grupo de controle. Por outro lado,HP induziu necrose em 20% e 75% das células tratadas eapoptose em 15% e 20% após 5 e 30 minutos de exposição,respectivamente. Em conjunto, esses resultados mostram quea solução aquosa com ORP (não diluída) é bem menos tóxicapara HDFs do que uma concentração anti-séptica de HP.

EXEMPLO 16

Esse exemplo demonstra o efeito de uma solução aquosacom ORP exemplar em relação ao peróxido de hidrogênio (HP)sobre o dano oxidativo do DNA e a formação do aduto de DNA8-hidróxi-21-desoxiguanosina (8-OHdG) em HDFs. Sabe-se quea produção de adutos de 8-OHdG em uma célula é um marcadorde dano oxidativo em resíduos específicos de DNA. Alémdisso, níveis celulares elevados desse aduto estãocorrelacionados à mutagênese, carcinogênese eenvelhecimento celular.

A FIG. 5 mostra os níveis de adutos de 8-OHdGpresentes em amostras de DNA de HDFs após tratamentos decontrole, tratamentos com solução aquosa com ORP etratamentos com HP por 3 0 minutos. 0 DNA foi extraído logoapós a exposição (TO, barras brancas) ou três horas após operíodo de ataque (T3, barras pretas). 0 DNA foi digerido eos adutos de 8-OHdG foram medidos pelo kit de ELISA deacordo com as instruções do fabricante. Os valores sãomostrados (ng/ml) como média ± DP (n = 3). A exposição àsolução aquosa com ORP por 30 minutos não aumentou aformação de adutos nas células tratadas em comparação comcélulas de controle após incubação por 30 minutos. Emcontraste, o tratamento com 500 μΜ de HP por 30 minutosaumentou o número de adutos de 8-OHdG em cerca de 25 vezesem relação às células tratadas de controle ou às célulastratadas com solução aquosa com ORP.

As células tratadas com solução aquosa com ORP foramcapazes de diminuir os níveis de adutos de 8-OHdG sedeixadas em DMEM suplementado por 3 horas após exposição àsolução aquosa com ORP. Apesar de ter sido permitido omesmo período de recuperação de 3 horas, as célulastratadas com HP ainda apresentavam cerca de 5 vezes maisadutos do que as células tratadas de controle ou que ascélulas tratadas com solução aquosa com ORP. Em conjunto,esses resultados demonstram que a exposição aguda à soluçãoaquosa com ORP não induz dano oxidativo do DNAsignificativo. Esses resultados também indicam que asolução aquosa com ORP provavelmente não induzirámutagênese ou carcinogênese in vitro ou in vivo.

EXEMPLO 17

Esse exemplo demonstra os efeitos sobre os HDFs daexposição crônica a concentrações baixas de uma soluçãoaquosa com ORP exemplar versus HP. Sabe-se que o estresseoxidativo crônico induz envelhecimento prematuro dascélulas. A fim de simular um estresse oxidativo prolongado,culturas primárias de HDF foram expostas cronicamente aconcentrações baixas da solução aquosa com ORP (10%) ou HP(5 μΜ) durante 2 0 duplicações da população. A expressão e aatividade da enzima SA-p-galactosidase foram associadaspreviamente ao processo de envelhecimento in vivo e invitro. Nesse exemplo, a expressão da enzima SA-β-galactosidase foi analisada após um mês de exposiçãocontinua de HDF à solução aquosa com ORP ou HP. Osresultados são apresentados na FIG. 6. A expressão daenzima SA-p-galactosidase foi analisada por contagem donúmero de células azuis em 20 campos microscópicos (para umexemplo do padrão de coloração, veja o Painel A). 0 PainelB mostra que apenas o tratamento com HP acelerou oenvelhecimento das células, como indicado pelo número decélulas que superexpressam SA-P-galactosidase (n = 3). 0tratamento crônico com uma dose baixa de HP aumentou aexpressão de SA-P-Gal em 86% das células, enquanto otratamento com a solução aquosa com ORP não induziu asuperexpressão dessa proteína. Pode-se concluir a partirdesse exemplo que a solução aquosa com ORP não é um indutorde envelhecimento celular prematuro.

EXEMPLO 18

Esse exemplo demonstra o efeito de uma solução aquosacom ORP exemplar sobre a redução da carga bacterianaperitoneal e sobre a redução na duração do período deinternação hospitalar em pacientes com peritonite. Todos ospacientes internados no Hospital Ruben Lenero, na Cidade doMéxico, de junho de 2004 a janeiro 2005, e com umdiagnóstico de peritonite secundária aguda generalizada,foram incluídos no grupo tratado com a solução aquosa comORP. Peritonite secundária foi definida como o resultado daperda de integridade do trato gastrintestinal ougeniturinário que leva à contaminação do espaço peritoneal.A análise retrospectiva de casos pareados que apresentaminfecções peritoneais similares entre 2003 e 2004 na mesmaInstituição foi efetuada para o grupo de controle. Vintepacientes consecutivos foram incluídos de forma prospectivano grupo tratado com a solução aquosa com ORP (ou seja,grupo de estudo).

Após a internação, todos os pacientes foram submetidosà cirurgia aberta e lavagem peritoneal intra-operatória("IOPL") de todos os quadrantes do abdome. Foram coletadasamostras intra-operatórias de cultura peritoneal em ambosos grupos. A IOPL foi realizada com 10 litros de sorofisiológico em ambos os grupos, seguida por 5 litros dasolução aquosa com ORP somente no grupo de estudo. 0excesso de solução aquosa com ORP foi removido e não foifeito nenhum enxágüe adicional. A cavidade abdominal foicoberta com uma trama plástica em ambos os grupos. Noentanto, no grupo de estudo, um curativo embebido emsolução aquosa com ORP foi deixado em cima da trama. 0curativo era trocado três vezes ao dia. Uma terapiaantimicrobiana empírica foi iniciada em todos os pacientescom dois antibióticos, incluindo clindamicina e cefotaximeou amicacina. A conduta pós-operatória no grupo de estudoincluía irrigação diária da trama com 100 ml da soluçãoaquosa com ORP três vezes ao dia, sem enxágüe ou lavagemadicional. Os casos graves de peritonite necessitaram denova laparotomia e IOPL a cada 72 horas. As culturas dolíquido peritoneal para bactérias aeróbicas e fungos foramcoletadas a cada 72 horas em ambos os grupos por até umasemana. Foi registrada a duração do período de internaçãohospitalar.

Vinte casos de controle foram selecionados dosprontuários médicos da Instituição e pareados ao grupo deestudo por idade, sexo e etiologia da peritonite. Aspopulações de controle e de estudo eram comparáveis emtermos de idade, sexo e fatores prognósticos na entrada. Aorigem anatômica e a etiologia da peritonite também eramsimilares para ambos os grupos (Tabela 6).

Tabela 6. Diagnóstico primário de pacientes com peritonite.

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Peritonite pós-operatória estava presente em 19 e 17pacientes dos grupos de controle e de estudo,respectivamente. Todos os casos foram submetidos atratamento cirúrgico, seguido por IOPL. Os tipos decirurgias realizadas nos grupos de controle/de estudoforam: apendicectomia (3/6), ressecção gástrica (4/0),colecistectomia (1/2) , necrosectomia pancreática (6/3) ,suture/ ressecção do intestino delgado com anastomose(4/3), operação de Hartman (1/1); ressecção de cólon (0/1)e diversas (1/4) . O uso de antibióticos foi muito similarem ambos os grupos. Para os grupos de controle e de estudo,foram administrados três antibióticos em 16 e 15 pacientes,e mais de 3 antibióticos em 4 e 5 casos, respectivamente.Os pacientes foram mantidos no CTI e foram ventiladosmecanicamente no pós-operatório. Foram coletadas amostrasintra-abdominais peroperatórias em todos os 40 pacientes(Tabela 7).

Tabela 7. Microorganismos isolados de amostrasintraperitoneais e duração do período de internaçãohospitalar em pacientes com peritonite.

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Foram obtidas amostras no período peroperatório e nasemana seguinte após lavagem intra-operatória apenas comsoro fisiológico (grupo de controle) ou com sorofisiológico e solução aquosa com ORP (grupo de estudo). Ainternação hospitalar média foi então analisada para cadamicroorganismo isolado na entrada e para o grupo inteiro.

Os números médios de microorganismos que cresceramnessas amostras foram de 29 no grupo de controle e de 30 nogrupo de estudo. Os microorganismos isolados são mostradosna Tabela 8. Escherichia coli, Enterococcus, Staphylococcusaureus, Pseudomonas aeruginosa e fungos foram isoladosdesses grupos em 3/6, 4/2, 10/8, 2/3 e 10/7 ocasiões,respectivamente. Culturas positivas para A. xilosoxidans(1) , estafilococos coagulase-negativos (2) e A. baumanii(1) só foram encontrados no grupo de estudo.

Uma segunda cultura intra-abdominal foi coletadadurante a primeira semana após a cirurgia (Tabela 7) . Nessemomento, o número médio de organismos isolados no grupo decontrole (24) foi quase o mesmo que na amostraperoperatória (29). É importante destacar que houve umaforte redução no número de amostras positivas no grupo deestudo. De 30 culturas positivas nas amostrasperoperatórias, somente uma permaneceu positiva para S.aureus e outra para E. coli. Na análise de dias dehospitalização, o grupo de controle teve uma permanênciamais longa (31,9 dias) em comparação com o grupo de estudo(22,4 dias). Dessa forma, a solução aquosa com ORP reduziueficazmente a carga bacteriana peritoneal e duração doperíodo de internação hospitalar em pacientes comperitonite.

As taxas de mortalidade também foram analisadas. Houveseis mortes no grupo de controle e 3 no de estudo. Todas asmortes ocorreram nos primeiros 30 dias após a primeiracirurgia, e o risco relativo calculado foi maior para ogrupo de controle (ou seja, 3,3 versus 0) . No entanto, otamanho da amostra era muito pequeno para ter significânciaestatística. Não foram registrados efeitos colateraislocais com o uso de água com ORP na IOPL. Os pacientessobreviventes no grupo de estudo foram acompanhados por 6 a12 meses. Nenhum dos 20 pacientes no Grupo tratado com águacom ORP apresentou oclusão intestinal ou dados que sugiramperitonite esclerosante no período de acompanhamento.

EXEMPLO 19

Esse exemplo demonstra a eficácia de uma soluçãoaquosa com ORP exemplar (Microcyn) na inibição dadegranulação de mastócitos. Mastócitos foram reconhecidoscomo os principais participantes em distúrbios dahipersensibilidade do tipo I. Vários sintomas clínicosobservados na dermatite atópica, rinite alérgica e asmaatópica são produzidos por estimulação de IgE-antígeno demastócitos localizados em distintos tecidos afetados. Avisão aceita atualmente da patogênese da asma atópica é deque alérgenos iniciam o processo pelo acionamento demastócitos pulmonares que abrigam IgE (MCs) para aliberação de mediadores como, por exemplo, histamina,leucotrienos, prostaglandinas, cininas, fator de ativaçãode plaquetas (PAF) etc. na denominada fase inicial dareação. Por sua vez, esses mediadores induzembroncoconstrição e aumentam a permeabilidade vascular e aprodução de muco. De acordo com esse modelo, após aativação de mastócitos, aquelas células secretam váriascitocinas pró-inflamatórias, incluindo fator de necrosetumoral alfa (TNF-α), IL-4, IL-5 e IL-6, que participam norecrutamento e na ativação locais de outras célulasinflamatórias como, por exemplo, eosinófilos, basófilos,linfócitos T, plaquetas e fagócitos mononucleares. Essascélulas recrutadas, por sua vez, contribuem para odesenvolvimento de uma resposta inflamatória que pode entãose tornar autônoma e agravar os sintomas asmáticos. Essaresposta da fase tardia constitui um processo de inflamaçãode longo prazo que pode induzir alterações plásticas emtecidos circundantes (veja Kumar e cols., pp. 193-268). Emmodelos experimentais de peritonite em camundongos, tambémfoi demonstrado que a fonte principal de citocinas pró-inflamatórias na cavidade peritoneal é o mastócito. Essascitocinas são relevantes, pois induzem a formação deadesões, abscessos, síndrome da reposta inflamatóriasistêmica (SIRS) e falência múltipla dos órgãos.

A estimulação antigênica de mastócitos ocorre por meioda ativação do receptor de alta afinidade por IgE (oreceptor FceRI), que é uma proteína multimérica que se ligaa IgE e subseqüentemente pode ser agregada pela interaçãoda IgE ligada ao receptor com um antígeno específico. Suaestrutura compreende quatro polipeptídeos, uma cadeia α deligação de IgE, uma cadeia β que serve para amplificar suacapacidade de sinalização e duas cadeias γ ligadas pordissulfeto, que são os principais condutores de sinalatravés do motivo de ativação de baseado no imunorreceptorbaseado em tirosina (ITAM) codificado. As vias desinalização ativadas pelo entrecruzamento desse receptorforam caracterizadas com o uso de mastócitos derivados damedula óssea (BMMC), da linhagem de células de leucemia deratos RBL 2H3, mastócitos peritoneais de camundongos eratos e de outras linhagens de mastócitos como, porexemplo, MC-9. Em todas elas, a presença de antígeno ligadoa IgE causa degranulação de mastócitos, mobilização decálcio, rearranjos citoesqueléticos e ativação dediferentes fatores de transcrição (NFAT, NFkB, AP-1, PU.l,SPl, Ets etc.) que ativam a transcrição do gene decitocina, que culminam com a produção de citocina.

BMMCs murídeos maduros foram carregados com uma IgEmonoclonal anti-dinitrofenol (300 ng/milhão de células)durante 4 horas a 37°C. O meio de cultura foi removido e ascélulas foram re-suspensas em tampão fisiológico (tampão deTyrode/BSA). As células foram então tratadas por 15 minutosa 37°C com concentrações distintas da solução aquosa comORP (em sua modalidade Microcyn). O tampão foi removido eas células re-suspensas em tampão de Tyrode/BSA fresco, eestimuladas com diferentes concentrações de antígeno(albumina humana acoplada a dinitrofenol) durante umaincubação de 3 0 minutos a 37°C. A degranulação foi medidapor determinação da atividade de β-hexosaminidase emsobrenadantes e péletes das células estimuladas, usando umareação colorimétrica baseada na capacidade dessa enzimapara hidrolisar distintos carboidratos (foi demonstrado quea β-hexosaminidase está localizada nos mesmos grânulos quecontêm histamina em mastócitos). Os resultados (FIG. 7)demonstram que a degranulação é significativamente reduzidacom concentrações crescentes da solução aquosa com ORP.

Surpreendentemente, o efeito inibidor da soluçãoaquosa com ORP (Microcyn) sobre a degranulação demastócitos é pelo menos similar àquele observado com o"estabilizador de mastócitos" clinicamente eficaz e ocomposto antialérgico estabelecido cromoglicato de sódio(Intel™) . A degranulação foi novamente medida poratividade enzimática de β-hexosaminidase no pêlete e nosobrenadante de células estimuladas, com o uso de umareação colorimétrica baseada na capacidade dessa enzimapara hidrolisar distintos carboidratos. Células carregadascom IgE monoclonal anti-DNP foram estimuladas com ou semuma pré-incubação de 15 minutos com cromoglicato de sódio(Intel™). O cromoglicato não foi mais eficaz do que asolução aquosa com ORP na redução de degranulações (comparea FIG.7 com a FIG. 8; ambos obtendo pelo menos cerca de 50%de redução da degranulação).

EXEMPLO 20

Esse exemplo demonstra a atividade inibidora de umasolução aquosa com ORP exemplar sobre a ativação demastócitos por um ionóforo de cálcio.

Os mastócitos podem ser estimulados por meio daativação de fluxos de cálcio induzidos por um ionóforo decálcio. As vias de sinalização ativadas por ionóforos decálcio foram caracterizadas com o uso de mastócitosderivados da medula óssea (BMMC), da linhagem de células deleucemia de ratos RBL 2H3, de mastócitos peritoneais decamundongos e ratos, e de outras linhagens de mastócitocomo, por exemplo, MC-9. Em todos esses sistemas, amobilização de cálcio causa a degranulação de mastócitos(por exemplo, liberação de histamina), rearranjoscitoesqueléticos e ativação de diferentes fatores detranscrição (por exemplo, NFAT, NFkB, AP-1, PU.l, SPl,Ets.), que ativam a transcrição do gene de citocina, queculminam com a produção e secreção de citocina.

Mastócitos murídeos maduros derivados da medula óssea(BMMC) foram carregados com uma IgE monoclonal anti-dinitrofenol (300 ng/milhão de células) durante 4 horas a37°C . O meio de cultura foi removido e as células foram re-suspensas em tampão fisiológico (tampão de Tyrode/BSA). Ascélulas foram então tratadas por 15 minutos a 370C comconcentrações distintas da solução aquosa com ORP (em suamodalidade Microcyn). 0 tampão foi removido e as célulasre-suspensas em tampão de Tyrode/BSA fresco, e estimuladascom ionóforo de cálcio (100 mM A23187) durante umaincubação de 3 0 minutos a 37°C. A degranulação foi medidapor determinação da atividade de β-hexosaminidase emsobrenadantes e péletes das células estimuladas, usando umareação colorimétrica baseada na capacidade dessa enzimapara hidrolisar distintos carboidratos (foi demonstrado quea β-hexosaminidase está localizada nos mesmos grânulos quecontêm histamina em mastócitos). Os resultados (FIG. 9)demonstram que a degranulação é significativamente reduzidacom concentrações crescentes da solução aquosa com ORP.

Esses resultados sugerem que a solução aquosa com ORPé um inibidor não especifico da liberação de histamina.Dessa forma, a solução aquosa com ORP - mesmo em diferentesconcentrações - inibirá a degranulação de mastócitos,independentemente do estímulo (por exemplo, antígeno ouionóforo). Sem se prender a nenhuma teoria em particular, asolução aquosa com ORP provavelmente modifica o sistema davia secretora no nivel da membrana plasmática e/ou docitoesqueleto. Como o mecanismo de ação da solução aquosacom ORP supostamente é inespecifico, acredita-se que asolução aquosa com ORP possa ter amplas aplicações clinicaspotenciais.

EXEMPLO 21

Esse exemplo demonstra o efeito de uma solução aquosacom ORP exemplar sobre a ativação de transcrição do gene decitocina de mastócitos.

As FIGS. IOA e IOB são ensaios de proteção de RNAasede mastócitos tratados com solução aquosa com ORP emdiferentes concentrações por 15 minutos, e aindaestimulados por antigeno, como descrito no Exemplo 19. Apósestimulação, o mRNA foi extraído com o uso de colunas decromatografia por afinidade (kit RNAeasy, Qiagene) e oensaio de proteção de RNAse foi realizado com o uso dascondições-padrão do kit (Clontech, Becton & Dickinson), afim de detectar a produção de mRNA de distintas citocinasapós ataque com antigeno. As citocinas incluíam TNF-α, LIF,IL-13, M-CSF, IL6, MIF e L32.

As FIGS. IOA e IOB mostram que a solução aquosa comORP (Microcyn) não modificou os níveis de mRNA de citocinaapós ataque com antigeno em mastócitos, independentementedas concentrações de solução aquosa com ORP ou de antigenousadas para o experimento.

Nesse estudo, o nível de transcritos (ou seja, o teorde RNA de mastócitos estimulados) de genes pró-inflamatórios não foi alterado em mastócitos tratados comsolução aquosa com ORP após serem estimulados com váriasconcentrações de antígeno. Dessa forma, a solução aquosacom ORP inibiu a via secretora dessas citocinas, sem afetarsua transcrição.

EXEMPLO 22

Esse exemplo demonstra a atividade inibidora de umasolução aquosa com ORP exemplar sobre a secreção de TNF-apor mastócitos.

Os mastócitos foram tratados com diferentesconcentrações de solução aquosa com ORP por 15 minutos, eainda estimulados por antígeno, como descrito no Exemplo19. A seguir, o meio de cultura de tecido foi substituído,e as amostras do meio fresco foram coletadas em váriosperíodos de tempo (2-8 horas) para medida dos níveis deTNF-α. As amostras foram congeladas e posteriormenteanalisadas com um kit ELISA comercial (Biosource) de acordocom as instruções do fabricante.

A FIG. 11 mostra que o nível de TNF-α secretada nomeio por células tratadas com solução aquosa com ORP apósestimulação com antígeno é significativamente diminuído, emcomparação com as células não tratadas.

Dessa forma, a solução aquosa com ORP inibiu asecreção de TNF-α por mastócitos estimulados antígeno.

Esses resultados estão de acordo com observações clínicasde que o uso de soluções de água com ORP pode diminuir areação inflamatória em várias feridas após procedimentoscirúrgicos.

EXEMPLO 23

Esse exemplo demonstra a atividade inibidora de umasolução aquosa com ORP exemplar sobre a secreção de MIPl-apor mastócitos.Os mastócitos foram tratados com diferentesconcentrações de uma solução aquosa com ORP exemplar(Microcyn) por 15 minutos, e ainda estimulados porantígeno, como descrito no Exemplo 19. A seguir, o meio decultura do tecido foi substituído, e as amostras do meiofresco foram coletadas em vários períodos de tempo (2-8horas) para medida dos níveis de MIPl-a. As amostras foramcongeladas e posteriormente analisadas com um kit ELISAcomercial (Biosource) de acordo com as instruções dofabricante.

A FIG. 12 mostra que o nível de ΜΙΡ1-α secretado nomeio por células tratadas com solução aquosa com ORP apósantígeno estimulação foi significativamente diminuído, emcomparação com as células não tratadas.

Dessa forma, a solução aquosa com ORP inibiu asecreção de ΜΙΡ1-α por mastócitos estimulados por antígeno.Esses resultados estão de acordo com observações clínicasde que o uso de soluções de água com ORP pode diminuir areação inflamatória em várias feridas após procedimentos cirúrgicos.

Os resultados de estudos análogos que medem a secreçãode IL-6 e de IL-13 são apresentados nas FIGS. 13 e 14.

Os Exemplos 20-23 e esse exemplo demonstram ainda quea solução aquosa com ORP é capaz de inibir respostasalérgicas da fase inicial e tardia iniciadas peloentrecruzamento do receptor de IgE.

EXEMPLO 24

Esse exemplo demonstra os resultados de um estudo detoxicidade que utiliza uma solução aquosa com ORP exemplar.

Foi feito um estudo de toxicidade aguda sistêmica emcamundongos para determinar a toxicidade sistêmicapotencial de uma solução aquosa com ORP exemplar, Microcyn60. Uma dose única (50 ml/kg) de Microcyn 60 foi injetadapor via intraperitoneal em cinco camundongos. Cincocamundongos de controle foram injetados com uma dose única(50 ml/kg) de soro fisiológico (cloreto de sódio 0,9%).Todos os animais foram observados quanto à mortalidade ereações adversas imediatamente após a injeção, com 4 horasapós a injeção e, a seguir, uma vez ao dia por 7 dias.Todos os animais também foram pesados antes da injeção enovamente no 7o Dia. Não houve mortalidade durante oestudo. Todos os animais pareciam clinicamente normais portodo o estudo. Todos os animais ganharam peso. A LD50intraperitoneal aguda estimada de Microcyn 6 0 por esseestudo é acima de 50 ml/kg. Esse exemplo demonstra queMicrocyn 60 não possui toxicidade significativa e deve sersegura para uso terapêutico de acordo com a invenção.

EXEMPLO 25

Esse exemplo ilustra um estudo realizado paradeterminar a toxicidade citogenética potencial de umasolução aquosa com ORP exemplar.

Foi feito um teste de micronúcleo com o uso de umasolução aquosa com ORP exemplar (10% Microcyn) para avaliaro potencial mutagênico da injeção intraperitoneal de umasolução aquosa com ORP em camundongos. 0 teste demicronúcleo de mamífero in vivo é usado para aidentificação de substâncias que causam dano aoscromossomos ou ao aparelho mitótico de eritrócitospolicromáticos murídeos. Esse dano resulta a formação de"micronúcleos", estruturas intracelulares que contêmfragmentos de cromossomo lagging ou cromossomos inteirosisolados. O estudo da solução aquosa com ORP incluiu 3grupos de 10 camundongos cada (5 machos/5 fêmeas): um grupode teste, dosado com a solução aquosa com ORP; um grupo decontrole negativo, dosado com a solução de NaCl 0,9%; e umgrupo de controle positivo, dosado com uma soluçãomutagênica de ciclofosfamida. Os grupo de teste e o grupode controle negativo receberam uma injeção intraperitoneal(12,5 ml/kg) da solução aquosa com ORP ou solução de NaCl0,9%, respectivamente, por dois dias consecutivos (Io e 2odias). Os camundongos de controle positivo receberam umaúnica injeção intraperitoneal de ciclofosfamida (8 mg/ml,12,5 ml/kg) no 2° dia. Todos os camundongos foramobservados imediatamente após a injeção quanto a quaisquerreações adversas. Todos os animais pareciam clinicamentenormais por todo o estudo e não foi observado nenhum sinalde toxicidade em qualquer grupo. No 3 o dia, todos oscamundongos foram pesados e sacrificados.

Os fêmures foram removidos dos camundongossacrificados, a medula óssea foi extraída e foram feitosesfregaços em duplicata para cada camundongo. As lâminas damedula óssea para cada animal foram lidas com um aumento de4OX. A proporção de eritrócitos policromáticos (PCE) paraeritrócitos normocromáticos (NCE), um índice de toxicidadeda medula óssea, foi determinado para cada camundongo porcontagem de um total de pelo menos 200 eritrócitos. Aseguir, um mínimo de 2.000 PCE classificáveis porcamundongo foi avaliado quanto à incidência de eritrócitospolicromáticos micronucleados. A análise estatística dosdados foi feita com a utilização do teste de Mann e Whitney(em um limiar de risco de 5%) por uma suíte de programasestatísticos (Statview 5.0, SAS Institute Inc., EUA).

Os camundongos de controle positivo tiveram proporçõesPCE/NCE menores estatisticamente significativas, quandocomparados com seus respectivos controles negativos(machos: 0,77 vs. 0,90 e fêmeas: 0,73 vs. 1,02),evidenciando a toxicidade da ciclofosfamida sobre a medulaóssea tratada. No entanto, não houve diferençaestatisticamente significativa das proporções PCE/NCE paraos camundongos tratados com a solução aquosa com ORP e oscontroles negativos. Da mesma forma, camundongos decontrole positivo tiveram um número maior estatisticamentesignificativo de eritrócitos policromáticos que possuemmicronúcleos, quando comparados tanto com os camundongostratados com a solução aquosa com ORP (machos: 11,0 vs.1,4/fêmeas: 12,6 vs. 0,8) quanto com os controles negativos(machos: 11,0 vs. 0,6 /fêmeas: 12,6 vs. 1,0). Não houvediferença estatisticamente significativa entre o número deeritrócitos policromáticos que possuem micronúcleos emcamundongos tratados com a solução aquosa com ORP e decontrole negativo.

Esse exemplo demonstra que Microcyn™ 10% não induziutoxicidade ou efeitos mutagênicos após injeçõesintraperitoneais em camundongos.

EXEMPLO 26

Esse estudo demonstra a ausência de toxicidade de umasolução aquosa com ORP exemplar, Dermacyn.

Esse estudo foi feito de acordo com o padrão ISO10993-5:1999 para determinar o potencial de uma soluçãoaquosa com ORP exemplar, Dermacyn, para causarcitotoxicidade. Um disco de filtro com 0,1 ml de Dermacynfoi colocado sobre uma superfície de agarose, cobrindodiretamente uma monocamada de células fibroblásticas decamundongos (L-929). As amostras preparadas foramobservadas quanto ao dano citotóxico após 24 horas deincubação a 37°C, na presença de CO2 5%. As observaçõesforam comparadas com amostras de controle positivo enegativo. As amostras que contêm Dermacyn não revelaramqualquer evidência de Iise celular ou de toxicidade,enquanto os controles positivo e negativo tiveram odesempenho que era antecipado.

Com base nesse estudo, concluiu-se que Dermacyn nãogera efeitos citotóxicos sobre fibroblastos murídeos.

EXEMPLO 27

Esse estudo foi realizado com 16 ratos para avaliar atolerabilidade local de uma solução aquosa com ORPexemplar, Dermacyn, e seus efeitos sobre a histopatologiade leitos de feridas em um modelo de cicatrização de feridade espessura total. As feridas foram feitas em ambos oslados do rato em questão. Durante o processo decicatrização, foram retirados cortes de pele do ladoesquerdo ou direito (por exemplo, tratado com Dermacyn etratado com soro fisiológico, respectivamente).

Os cortes corados com tricromo de Masson e os cortescorados com Colágeno do Tipo II dos locais de feridascirúrgicas tratados com Dermacyn e com soro fisiológicoforam avaliados por um patologista veterinário credenciado.

Os cortes foram testados quanto à quantidade de expressãoColágeno do Tipo 2 como uma manifestação de proliferação detecido conjuntivo, morfologia de fibroblastos e formação decolágeno, presença de neoepiderme no corte transversal,inflamação e extensão de ulceração dérmica.

Os achados indicam que Dermacyn foi bem tolerada emratos. Não houve lesões histopatológicas relacionadas aotratamento nos cortes de pele das feridas de ambos os lados(tratadas com Dermacyn e tratadas com soro fisiológico,respectivamente). Não houve diferenças histopatológicasrelevantes entre os locais de feridas tratados com sorofisiológico e os com Dermacyn, indicando que o tratamentocom Dermacyn foi bem tolerado. Não houve diferençassignificativas entre a expressão de Colágeno do Tipo 2entre os locais de ferida tratados com soro fisiológico eos tratados com Dermacyn, indicando que Dermacyn não possuium efeito adverso sobre fibroblastos ou sobre a elaboraçãode colágeno durante o processo de cicatrização de feridas.

EXEMPLO 2 8

Esse exemplo demonstra o uso de uma água com potencialde oxirredução exemplar, Microcyn, de acordo com a invençãocomo uma solução antimicrobiana eficaz.

Foi realizada uma avaliação Time-Kill in vitro com ouso da água com potencial de oxirredução Microcyn. Microcynfoi avaliada versus suspensões de ataque de cinqüenta cepasde microorganismos diferentes - vinte e cinco cepas da"American Type Culture Collection" (ATCC) e vinte e cincoisolados clínicos daquelas mesmas espécies - como descritona "Tentative Final Monograph, Federal Register", 17 dejunho de 1994, vol. 59: 116, pg. 31.444. As reduçõespercentuais e as reduções LoglO da população inicial decada cepa de ataque foram determinadas após exposições àMicrocyn por trinta (30) segundos, um (1) minuto, três (3)minutos, cinco (5) minutos, sete (7) minutos, nove (9)minutos, onze (11) minutos, treze (13) minutos, quinze (15)minutos e vinte (20) minutos. Todo o plaqueamento em ágarfoi feito em duplicata, e a Microcyn foi avaliada em umaconcentração de 99% (v/v). Todos os testes foram realizadosde acordo com "Good Laboratory Practices", comoespecificado em 21 C.F.R. Parte 58.

A tabela a seguir resume os resultados da avaliaçãoTime-Kill in vitro mencionada acima na marca da exposiçãode trinta segundos para todas as populações testadas, queforam reduzidas em mais de 5,0 Log10:

Tabela 8. Morte em 30 segundos in vitro.

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Embora suas reduções microbianas tenham sido medidasem menos de 5,0 Logio, Microcyn também demonstrou atividadeantimicrobiana contra as três espécies restantes nãoincluídas na Tabela 8. Mais especificamente, uma exposiçãode trinta segundos à Microcyn reduziu a população deStreptococcus pneumoniae (Isolado clínico; BSLI#072605Spnl) em mais de 4,5 Log10, que era o limite dedetecção versus essa espécie. Além disso, quando atacadocom Candida tropicalis (ATCC N°: 750), Microcyn demonstrouuma redução microbiana em mais de 3,0 Logi0 após umaexposição de trinta segundos. Adicionalmente, quandoatacada com Candida tropicalis (BSLI #042905Ct), Microcyndemonstrou uma redução microbiana em mais de 3,0 Logi0 apósuma exposição de vinte minutos.Os resultados exemplares dessa avaliação Time-Kill invitro demonstrara que a água com potencial de oxirreduçãoMicrocyn exibe atividade antimicrobiana rápida (ou seja,menos de 30 segundos na maioria dos casos) versus um amploespectro de microorganismos de ataque. As populaçõesmicrobianas de quarenta e sete de cinqüenta espécies Gram-positivas, Gram-negativas e de leveduras avaliadas foramreduzidas em mais de 5,0 Logi0 em um intervalo de atétrinta segundos de exposição ao produto.

EXEMPLO 29

Esse exemplo demonstra uma comparação da atividadeantimicrobiana de uma água com potencial de oxirreduçãoexemplar, Microcyn, usada de acordo com a invenção, versussolução de gluconato de clorexidina 4,0% (p/v) HIBICLENS® eirrigação de cloreto de sódio 0,9% (USP).

Foi realizada uma avaliação Time-Kill in vitro, comodescrito no Exemplo 28, com a utilização de solução degluconato de clorexidina 4,0% (p/v) HIBICLENS® e umasolução de irrigação estéril de cloreto de sódio 0,9% (USP)como produtos de referência. Cada produto de referência foiavaliado versus suspensões das dez cepas da "American TypeCulture Collection" (ATCC) especificamente citadas na"Tentative Final Monograph". Os dados coletados foram entãoanalisados contra a atividade de redução microbianaMicrocyn registrada no Exemplo 28.

A água com potencial de oxirredução Microcyn reduziuas populações microbianas de cinco das cepas de ataque a umnível comparável àquele observado para a solução degluconato de clorexidina HIBICLENS®. Tanto Microcyn quantoHIBICLENS® geraram uma redução microbiana de mais de 5,0Log10 após uma exposição de trinta segundos às seguintesespécies: Escherichia coli (ATCC N°: 11.229 e ATCC N°:25.922), Pseudomonas aeruginosa (ATCC N°: 15.442 e ATCC N°:27.853) e Serratia marcescens (ATCC N°: 14.756). Alémdisso, como mostrado acima na Tabela 8, Microcyn demonstrouexcelente atividade antimicrobiana contra Micrococcusluteus (ATCC N°: 7.468) ao gerar uma redução de 5,8420Log10 após uma exposição de trinta segundos. No entanto,uma comparação direta da atividade de Micrococcus luteus(ATCC N°: 7468) com HIBICLENS® não foi possível porque,após uma exposição de trinta segundos, HIBICLENS® reduziu apopulação pelo limite de detecção do teste (nesse casoespecífico, em mais de 4,8 Log10) · Observa-se que a soluçãode irrigação estéril de cloreto de sódio 0,9% reduziu aspopulações microbianas de cada uma das seis cepas de ataquediscutidas acima por menos de 0,3 Log10 após uma exposiçãocompleta de vinte minutos.

A água com potencial de oxirredução Microcyn forneceuuma atividade antimicrobiana maior do que HIBICLENS® e doque a irrigação com cloreto de sódio para quatro das cepasde ataque testadas: Enteroeoceus faeealis (ATCC N°:29.212), Staphyloeoeeus aureus (ATCC N°: 6.538 e ATCC N°:29.213) e Staphyloeoeeus epidermidis (ATCC N°: 12.228). Atabela a seguir resume os resultados da redução microbianada avaliação Time-Kill in vitro para essas quatro espécies:

Tabela 9. Resultados comparativos

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Os resultados dessa avaliação Time-Kil1 in vitrocomparativa demonstram que a água com potencial deoxirredução Microcyn não apenas exibe atividadeantimicrobiana comparável com HIBICLENS® contra Escherichiacoli (ATCC N°: 11.229 e ATCC N°: 25.922), Pseudomonasaeruginosa (ATCC N°: 15.442 e ATCC N°: 27.853), Serratiamarcescens (ATCC N°: 14.756) e Micrococcus luteus (ATCC N°:7.468), mas fornece um tratamento mais eficaz contraEnterococcus faeealis (ATCC N°: 29.212), Staphyloeoeeusaureus (ATCC N°: 6.538 e ATCC N°: 29.213) e Staphyloeoeeusepidermidis (ATCC N°: 12.228). Como mostrado na Tabela 9,Microcyn exemplifica uma resposta antimicrobiana maisrápida (ou seja, menos de 30 segundos) em algumas espécies.Além disso, a exposição ã Microcyn resulta em uma reduçãomicrobiana global maior em todas as espécies listadas naTabela 9.

EXEMPLO 30

Esse exemplo demonstra a eficácia de uma soluçãoaquosa com ORP contra Streptoeoeeus pneumoniae resistente àpenicilina (ATCC 51.915).Uma cultura de Streptococcus pneumoniae foi preparadacom o uso de uma cultura congelada para inocular múltiplasplacas BAP, e incubação por 2-3 dias a 35-37°C com CO2.

Após a incubação, 3-7 ml de diluente/meio estéril foramtransferidos para cada placa de ágar e raspados parasuspender o organismo. As suspensões de todas as placasforam coletadas e transferidas para um tubo estéril ecomparadas com um Padrão de McFarland 4.0. A suspensão foifiltrada através de uma gaze estéril, e misturada porturbilhonamento antes do uso no procedimento de teste.

Um inóculo de 0,1 ml da suspensão do organismo foiadicionado a 49,9 ml da Microcyn ou da substância decontrole. Em cada período de exposição, a mistura de testefoi misturada por agitação. A mistura de teste foi expostapor 15 segundos, 3 0 segundos, 6 0 segundos, 12 0 segundos, 5minutos e 15 minutos a 25,0°C.

Uma amostra de 1,0 ml foi removida da mistura de testee adicionada a 9,0 ml de neutralizante, representando umadiluição de 100 da mistura de teste inoculada neutralizada.

Uma alíquota de 5 ml da mistura de teste inoculadaneutralizada 100 foi transferida para um aparelho de filtrode 0,45 microlitro pré-umedecido com 10 ml de tampão deButterfield. 0 filtro foi enxaguado com aproximadamente 50ml de tampão de Butterfield, removido assepticamente doaparelho, e transferido para uma placa BAP. Forampreparadas diluições seriais adicionais 1:10, e alíquotasde um (1,0) ml das diluições 10-3- 10-4 da mistura de testeneutralizada inoculada foram plaqueadas em duplicata emBAP.

As placas de subcultura bacteriana foram incubadas por48 ± 4 horas a 35-37°C em CO2. As placas de subculturaforam refrigeradas por dois a 2-8°C, antes de seremexaminadas. Após incubação e estocagem, as placas de ágarforam observadas visualmente quanto à presença decrescimento. As unidades formadoras de colônia foramenumeradas, e o número de sobreviventes em cada tempo deexposição foi determinado. Sub-culturas representativas quedemonstram crescimento foram examinadas adequadamente paraconfirmação dos organismos de teste.

A solução aquosa com ORP exemplar, Microcyn,demonstrou uma redução >99,93197279% de Streptococcuspneumoniae resistente à penicilina (ATCC 51.915) apóstempos de contato de 15 segundos, 30 segundos, 60 segundos,120 segundos, 5 minutos e 15 minutos a 25,O0C.

EXEMPLO 31

0 objetivo desse Exemplo é determinar a atividademicrobiana de uma solução aquosa com ORP exemplar(Dermacyn) versus bacitracina com a utilização de um ensaiosuspensão bacteriana.

Dermacyn é um produto pronto para uso e, portanto, arealização de diluições durante o teste não foi necessária.A bacitracina é uma solução re-hidratada concentrada quenecessita de uma diluição até 33 Unidades/ml.

Uma suspensão de esporos de B. atropheus a 2,5 χ IO7/ml adquirida foi usada para o teste. Além disso,suspensões frescas de Pseudomonas aeruginosa eStaphylococcus aureus foram preparadas e medidas com o usode um espectrofotômetro para assegurar que a titulação eraaceitável.

Nove microlitros da substância de teste foramadicionados a 100 μl de suspensão de micróbios. A misturade teste foi mantida a 20°C pelos tempos de contato de 20segundos, 5 minutos e 20 minutos. Um ml da mistura de teste(toda a mistura) foi adicionado a 9,0 ml de neutralizantepor 20 minutos (esse é o tubo de neutralização original ouONT). Um ml da mistura de teste neutralizada foi plaqueadoem ágar tríptico de soja em duplicata pelos tempos decontato de 5 minutos e 20 minutos. Foram usadas diluições eplacas cobertas adicionais para o ponto de 20 segundos,para se obter placas contáveis.

Todas as placas foram incubadas a 30°C-35°C por umtotal de 3 dias e foram avaliadas após cada dia deincubação. Para determinar o número de micróbios expostos àDermacyn e Bacitracina durante os testes, foram feitasquatro diluições de 10 vezes das suspensões, e 1,0 ml das 2diluições finais foi plaqueado em duplicata, quandoaplicável.

Dermacyn, quando atacada com os organismos de teste,mostrou erradicação total (redução > 4 log) das bactériasvegetativas em todos os pontos de tempo e, para esporos,nos pontos de tempo de 5 e 20 minutos. Bacitracina sóproduziu uma redução de aproximadamente 1 log. Microcyn noponto de tempo de 20 segundos mostrou alguma redução deesporos. Bacitracina não apresentou evidências de reduçãodas populações bacterianas ou de esporos ao longo dosperíodos de tempo testados.

EXEMPLO 32

Esse exemplo demonstra a eficácia de duas soluções deágua com ORP exemplares (Ml e M2) contra bactérias embiofilmes.A cepa parente para todos os estudos é P. aeruginosaPAOl. Todas as cepas planctônicas cresceram aerobicamenteera meio mínimo (2,56 g de Na2HPO4, 2,08 g de KH2PO4, 1,0 gde NH4Cl, 0,04 g de CaCl2 ·2 H2O, 0,5 g de MgSO4 · 7H20, 0,1de mg CuSO4 · 5H20, 0,1 mg de ZnSO4 · H2O, 0,1 mg de FeSO4 ·7H20 e 0,004 mg de MnCl2 · 4H20 por litro, pH 7,2) a 22°C emfrascos em agitação a 220 rpm. Os biofilmes cresceram comodescrito abaixo a 22 0C em meio mínimo. Glutamato (130mg/litro) foi usado como a única fonte de carbono.

Os biofilmes cresceram como descrito previamente(Sauer e cols., J. Bacteriol. 184: 1.140-1.154 (2002), queé aqui incorporado por referência). Resumidamente, assuperfícies interiores de tubos de silicone de um sistemade reator com tubo de fluxo contínuo once-through foramusadas para o cultivo de biofilmes a 22°C. Os biofilmesforam coletados após 3 dias (estágio de maturação-I), 6dias (estágio de maturação-2) e 9 dias (estágio dedispersão) de crescimento sob condições de fluxo. Ascélulas do biofilme foram coletadas da superfície interiorpinçando-se o tubo ao longo de todo o ser comprimento,produzindo uma extrusão do material celular do lúmen. Apasta de células resultante foi coletada em gelo. Antes daamostragem, o volume líquido foi expurgado do tubo paraevitar interferência de células planctônicas destacadas.

0 tamanho da população de células planctônicas e dobiofilme foi determinado pelo número de CFU com o uso decontagens de placa de diluição serial. Para isso, osbiofilmes foram coletados da superfície interior apósvários períodos de tempo de exposição até SOSs. As imagensdos biofilmes desenvolvidos em células de fluxo once-through foram visualizadas por luz transmitida com ummicroscópio Olympus BX6 0 (Olympus, Melville, NY) e umalente objetiva com ampliação de 100 A100PL. As imagensforam capturadas com o uso de uma câmera Magnafireresfriada carregada com três chips (Optronics Inc., Galena,CA) e uma exposição de 30 ms. Além disso, foi realizadamicroscopia a laser com varredura confocal com ummicroscópio invertido LSM 510 Meta (Zeiss, Heidelberg,Alemanha). As imagens foram obtidas com uma lente LD-Apochrome 40/0.6 e com o software LSM 510 Meta (Zeiss).

Foi observada uma redução de 2-Iog para os biofilmestratados com Ml em 60 mm de tratamento. 0 achado indicaque, a cada 10,8 min (+/- 2,8 min) , o tratamento com Mlresulta em uma redução de 50% da viabilidade do biofilme.

Tabela 10. Morte por Ml.

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No entanto, de forma geral, M2 foi um pouco maiseficaz na morte de biofilmes do que Ml, pois os resultadosindicaram que a cada 4,0 min (+/- 1,2 min) o tratamento comM2 resulta em uma redução de 50% na viabilidade dobiofilme.

Tabela 11. Morte por M2.

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Dessa forma, a água com ORP é eficaz contra bactériasem biofilmes.

Todas as referências aqui citadas, incluindopublicações, pedidos de patentes e patentes, são aquiincorporadas por referência na mesma extensão como se cadareferência fosse individual e especificamente indicada paraser incorporada por referência e fosse aqui apresentada emsua totalidade.

O uso dos termos "um" , "uma" , "a" e "o" e referentessimilares no contexto da descrição da invenção(especialmente no contexto das reivindicações a seguir)devem ser considerados como englobando tanto as formas nosingular quanto no plural, a menos que aqui indicado deoutra forma ou claramente contradito pelo contexto. Ostermos "que compreende", "que possui", "que inclui" e "quecontém" devem ser considerados como termos em aberto (ouseja, significando "incluindo, sem limitação"), a menos queobservado de forma diferente. A citação de intervalos devalores nessa especificação visa meramente servir como ummétodo abreviado de se referir individualmente a cada valorseparado incluído no intervalo, a menos que aqui indicadode forma diferente, e cada valor separado é incorporado naespecificação como se fosse individualmente aqui citado.Todos os métodos aqui descritos podem ser realizados emqualquer ordem adequada, a menos que aqui indicado de formadiferente ou de algum outro modo claramente contradito pelocontexto. 0 uso de qualquer um e de todos os exemplos, oulinguagem exemplar (por exemplo, "tais como") aquifornecidos, visa simplesmente melhor ilustrar a invenção, enão impõe uma limitação ao escopo da invenção, a menos quereivindicado de forma diferente. Nenhuma linguagem naespecificação deve ser considerada como indicativa dequalquer elemento não reivindicado como essencial à prática da invenção.

São aqui descritas modalidades preferidas destainvenção, incluindo o melhor modo conhecido pelosinventores para realizar a invenção. Variações dessasmodalidades preferidas podem ser evidentes àqueleshabilitados na técnica mediante a leitura da descriçãoprecedente. Os inventores esperam que aqueles habilitadosna técnica empreguem essas variações da forma adequada, eos inventores desejam que a invenção seja praticada de umaforma diferente em relação àquela descrita especificamentenos exemplos. Conseqüentemente, esta invenção inclui todasas modificações e equivalentes da matéria em questãocitadas nas reivindicações em anexo, da forma permitidapela lei aplicável. Além disso, qualquer combinação doselementos descritos acima em todas as variações possíveisdeste é englobada pela invenção, a menos que aqui indicadode forma diferente ou de algum outro modo claramentecontradito pelo contexto.

Claims

1. Método de prevenção ou tratamento de peritonite emum paciente, o método caracterizado pelo fato decompreender a administração ao paciente de uma quantidadeterapeuticamente eficaz de uma solução aquosa com potencialde oxirredução, em que a solução é estável por pelo menoscerca de vinte e quatro horas, e possui um pH de cerca de6,4 a cerca de 7,8.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de compreender o contato do tecidoperitoneal no paciente com uma quantidade terapeuticamenteeficaz da solução aquosa com potencial de oxirredução.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de compreender a liberação de umaquantidade terapeuticamente eficaz da solução aquosa compotencial de oxirredução ao espaço peritoneal do paciente.

4. Método, de acordo com a reivindicação 3,caracterizado pelo fato de que a solução aquosa compotencial de oxirredução é liberada no espaço peritoneal dopaciente no intra-operatório, por via laparoscópica outransabdominal.

5. Método, de acordo com a reivindicação 3,caracterizado por compreender:(a) o acesso ao espaço peritoneal no paciente;(b) a liberação ao espaço peritoneal de cerca de 0,1 acerca de 10 litros da solução aquosa com potencial deoxirredução;(c) permitir que a solução aquosa com potencial deoxirredução permaneça no espaço peritoneal por um períodode tempo suficiente para fornecer um efeito terapêutico;(d) opcionalmente, a remoção da solução aquosa compotencial de oxirredução; e(e) opcionalmente, a repetição das etapas (b)-(d).

6. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a peritonite resulta decirurgia, apendicite, colecistite aguda, úlcera péptica,diverticulite, obstrução intestinal, pancreatite, doençapélvica inflamatória, trombose mesentérica, tumor, traumapenetrante, ou uma combinação destes.

7. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a peritonite está associadaa uma infecção.

8. Método, de acordo com a reivindicação 7,caracterizado pelo fato de que a infecção é por um ou maismicroorganismos selecionados do grupo que consiste emvírus, bactérias e fungos.

9. Método, de acordo com a reivindicação 7,caracterizado pelo fato de que a infecção é por uma ou maisbactérias.

10. Método, de acordo com a reivindicação 7,caracterizado pelo fato de que a infecção é por uma ou maisbactérias selecionadas do grupo que consiste em Pseudomonasaeruginosa, Escherichia coli, Enterococcus hirae,Aeinetobaeter haumannii, espécies de Aeinetobaeter,Baeteroides fragilis, Enterobaeter aerogenes, Enteroeoeeusfaeealis, Enteroeoeeus faeeium resistente à vancomicina(VRE, MDR), Haemophilus influenzae, Klebsiella oxytoea,Klebsiella pneumoniae, Mierococeus luteus, Proteusmirabilis, Serratia mareeseens, Staphyloeoeeus aureus,Staphyloeoeeus aureus resistente à meticilina (MRSA),Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus haemolytieus,Staphylocoeeus hominis, Staphylococcus saprophytieus,Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogen.es,Salmonella eholeraesuis, Shigella dysenteriae, C.perfingens, Neisseria gonorrhea, Chlamydia traehomatis,Myeobaterium bovis, Chlamydia traehomatis, e combinaçõesdestas.

11. Método, de acordo com a reivindicação 7,caracterizado pelo fato de que a infecção é por um ou maisfungos selecionados do grupo que consiste em Candidaalbieans, Candida parapsilasis, Candida tropiealis,Trichophyton mentagrophytes e Aspergillus fumigatus.

12. Método, de acordo com a reivindicação 7,caracterizado pelo fato de que a peritonite é peritonitebacteriana espontânea.

13. Método, de acordo com a reivindicação 12,caracterizado pelo fato de que a peritonite bacterianaespontânea surge em um paciente com cirrose hepática ousíndrome nefrótica.

14. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a peritonite resulta de umacondição inflamatória.

15. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a peritonite resulta de umareação alérgica.

16. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a peritonite resulta deirritação química.

17. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a peritonite está associadaa um ou mais tecidos debilitados ou danificados.

18. Método, de acordo com a reivindicação 17,caracterizado pelo fato de que um ou mais tecidosdebilitados ou danificados estão infectados.

19. Método, de acordo com a reivindicação 18,caracterizado pelo fato de que a infecção é por um ou maismicroorganismos selecionados do grupo que consiste emvírus, bactérias e fungos.

20. Método, de acordo com a reivindicação 18,caracterizado pelo fato de que a infecção é por uma ou maisbactérias selecionadas do grupo que consiste em Pseudomonasaeruginosa, Escherichia coli, Enterococcus hirae,Aeinetobacter baumannii, espécies de Aeinetobaeter,Baeteroides fragilis, Enterobaeter aerogenes, Enteroeoeeusfaeealis, Enteroeoeeus faeeium resistente ã vancomicina(VRE, MDR) , Haemophilus influenzae, Klebsiella oxytoea,Klebsiella pneumoniae, Mierococeus luteus, Proteusmirabilis, Serratia mareeseens, Staphyloeoceus aureus,Staphyloeoeeus aureus resistente à meticilina (MRSA),Staphyloeoeeus epidermidis, Staphyloeoeeus haemolytieus,Staphyloeoeeus hominis, Staphyloeoeeus saprophytieus,Streptoeoeeus pneumoniae, Streptoeoeeus pyogenes,Salmonella eholeraesuis, Shigella dysenteriae, C.perfingens, Neisseria gonorrhea, Chlamydia traehomatis,Myeobaterium bovis, Chlamydia traehomatis, e combinaçõesdestas.

21. Método, de acordo com a reivindicação 18,caracterizado pelo fato de que a infecção é por um ou maisfungos selecionados do grupo que consiste em Candidaalbieans, Candida parapsilasis, Candida tropiealis,Trichophyton mentagrophytes e Aspergillus fumigatus.

22. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado ainda por compreender a administração aopaciente de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um oumais agentes terapêuticos adicionais selecionados do grupoque consiste em agentes antiinfecciosos e agentesantiinflamatórios.

23. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que o agente antiinfeccioso é umagente antibacteriano.

24. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que o agente antiinfeccioso é umantibiótico.

25. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que o agente antiinflamatório éselecionado do grupo que consiste em fármacoantiinflamatório esteroidal, fármaco antiinflamatório nãoesteroidal, e combinações destes.

26. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado por compreender a administração de pelo menosum antibiótico e pelo menos um agente antiinflamatório.

27. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que o pH da solução aquosa compotencial de oxirredução é de cerca de 7,4 a cerca de 7,6.

28. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a solução aquosa compotencial de oxirredução é estável por pelo menos cerca deuma semana.

29. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a solução aquosa compotencial de oxirredução é estável por pelo menos cerca dedois meses.

30. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a solução aquosa compotencial de oxirredução é estável por pelo menos cerca deseis meses.

31. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a solução aquosa compotencial de oxirredução é estável por pelo menos cerca deum ano .

32. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a solução aquosa compotencial de oxirredução é capaz de gerar uma redução depelo menos cerca de IO6 vezes na concentração de umaamostra de um ou mais microorganismos vivos selecionados dogrupo que consiste em Escherichia coli, Pseudomonasaeruginosa, Staphylococcus aureus, C. perfingens, Neisseriagonorrhea, Chlamydia trachomatis, estreptococos,enterococos, Mycobaterium tuberculosis, Candida albicans, ecombinações destes, em até um minuto de exposição, quandomedida pelo menos cerca de dois meses após a preparação dasolução.

33. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a solução aquosa compotencial de oxirredução compreende água catódica em umaquantidade de cerca de 10% a cerca de 90% por volume dasolução.

34. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a solução aquosa compotencial de oxirredução compreende água catódica em umaquantidade de cerca de 10% a cerca de 50% por volume dasolução.

35. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a solução aquosa compotencial de oxirredução compreende água catódica em umaquantidade de cerca de 2 0% a cerca de 4 0% por volume dasolução.

36. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a solução aquosa compotencial de oxirredução compreende água anódica em umaquantidade de cerca de 50% a cerca de 90% por volume dasolução.

37. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a solução aquosa compotencial de oxirredução compreende água anódica em umaquantidade de cerca de 10% a cerca de 50% por volume dasolução, e água oxidada em uma quantidade de cerca de 50% acerca de 90% por volume da solução.

38. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a solução aquosa compotencial de oxirredução compreende uma ou mais espéciesselecionadas do grupo que consiste em ácido hipocloroso,xons hipoclorito, hipoclorito de sódio, uma ou maisespécies de água superoxidada e combinações destas.

39. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a solução compreende decerca de 15 ppm a cerca de 35 ppm de ácido hipocloroso.

40. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a solução aquosa compotencial de oxirredução compreende de cerca de 25 ppm acerca de 50 ppm de hipoclorito de sódio.

41. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a solução aquosa compotencial de oxirredução compreende de cerca de 15 ppm acerca de 35 ppm de ácido hipocloroso, de cerca de 25 ppm acerca de 5 0 ppm de hipoclorito de sódio, e de cerca de 1ppm a cerca de 4 ppm de uma ou mais espécies de águasuperoxidada; possui um pH de cerca de 6,2 a cerca de 7,8;e é estável por pelo menos cerca de dois meses.

42. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a solução aquosa compotencial de oxirredução solução aquosa possui um potencialde cerca de —4 00 mV a cerca de +1.3 00 mV.

43. Método de prevenção de adesões peritoneais em umpaciente, o método caracterizado por compreender aadministração ao paciente uma solução aquosa com potencialde oxirredução em uma quantidade eficaz para evitar adesõesperitoneais, em que a solução é estável por pelo menoscerca de vinte e quatro horas e a solução possui um pH decerca de 6,4 a cerca de 7,8.

44. Método de prevenção de abscessos peritoneais em umpaciente, o método caracterizado por compreender aadministração ao paciente uma solução aquosa com potencialde oxirredução em uma quantidade eficaz para evitarabscessos peritoneais, em que a solução é estável por pelomenos cerca de vinte e quatro horas, e a solução possui umpH de cerca de 6,4 a cerca de 7,8.

45. Método de prevenção de complicações sistêmicas emum paciente com peritonite, o método caracterizado porcompreender a administração ao paciente uma solução aquosacom potencial de oxirredução em uma quantidade eficaz paraevitar adesões peritoneais, em que a solução é estável porpelo menos cerca de vinte e quatro horas, e a soluçãopossui um pH de cerca de 6,4 a cerca de 7,8.

46. Método, de acordo com a reivindicação 45,caracterizado pelo fato de que as complicações sistêmicassão selecionadas do grupo que consiste em SIRS, sépsis,choque séptico, e combinações destes.