JPH0321157B2 - - Google Patents
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- JPH0321157B2 JPH0321157B2 JP57142439A JP14243982A JPH0321157B2 JP H0321157 B2 JPH0321157 B2 JP H0321157B2 JP 57142439 A JP57142439 A JP 57142439A JP 14243982 A JP14243982 A JP 14243982A JP H0321157 B2 JPH0321157 B2 JP H0321157B2
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
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- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
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-
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- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
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- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
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Description
本発明は新規な制癌性物質の製造法、更に詳細
にはフソバクテリウム属に属する菌の菌体をジア
ルキルスルホキシドによる抽出処理に付し、得ら
れる抽出液より下記の性状を有する制癌性物質
TF−500又はその塩を製造する方法に関する。 (イ) 白灰色ないし淡褐色の粉末。 (ロ) 制癌作用および免疫賦活作用を有する。 (ハ) 水に溶解し、メタノール、エタノール、アセ
トン、ベンゼン、クロロホルム、酢酸エチル、
ジエチルエーテルに不溶。 (ニ) 明確な融点を示さず、約180℃より分解を始
め、195℃以上で著しく分解する。 (ホ) KBr錠剤法による赤外線吸収スペクトルは、
3500〜3200、2920、2850、1660〜1600、1580〜
1520、1460〜1400、1380〜1360、1120〜1100、
1080〜1000、970および840〜800cm-1の近傍に
吸収帯を有する。 (ヘ) PH７の水溶液の紫外線吸収スペクトルは、吸
収末端に強い吸収があり、また246〜280nmの
近傍に吸収を示す。 (ト) モーリツシユ反応、フエノール硫酸反応、ア
ンスロン硫酸反応、インール塩酸反応、ロウリ
ー・フオリン反応は陽性、ニンヒドリン反応は
陰性。 (チ) 元素分析値 Ｃ：38％〜47％ Ｈ：５％〜７％ Ｎ：１％〜
４％。 (リ) フエノール硫酸法による糖の含有率は、約30
％〜12％（グリコース換算）、およびロウリ
ー・フオリン法による蛋白質の含有率は、約10
％以下（牛血清アルブミン換算）である。 （ヌ） 分子量 数1000以上であるが、特定は極めて困難であ
る。 近年、各種の癌患者の治療法において宿主の免
疫機能を亢進させ、免疫機能の助けを借りながら
制癌効果を発現させる治療法の研究が盛んとなつ
てきた。 本発明者らはヒト口腔内より分離したフソバク
テリウム属に属する菌の菌体からジアルキルスル
ホキシドによる抽出処理に付して採取される成分
について、その薬理作用を調べていたところ、特
定の成分が制癌性を有しており、宿主介在性ある
いは宿主の免疫力を亢進させ、免疫力の助けを借
りながら間接的に制癌作用を発現させる作用を有
するものであり、制癌作用が強く、かつ副作用が
少ないなど制癌剤として好ましい性質を有するも
のであることを見出し、かかる成分を得る方法に
ついて種々検討して本発明を完成したものであ
る。 本発明で利用される菌としては、制癌性物質
TF−500を生成するフソバクテリウム属に属する
菌であればよく、好適なものとしてはフソバクテ
リウム・ヌクレアタムが挙げられる。具体的に
は、例えば、フソバクテリウム・ヌクレアタム
TF−031（FERM−ｐNo.5077、ATCC−31647）
および微生物学の一般常識としてその性質を有す
る菌株、すなわち、自然変異株あるいは人工的に
改良された菌株等が利用される。 フソバクテリウム・ヌクレアタムTF−031の菌
学的性状を記載すれば以下のとおりである。 (1) 形態 細胞の形：紡錘形（第１図） 細胞の多形性の有無：なし 運動性の有無：なし 胞子の有無：なし グラム染色：グラム陰性 抗酸性：陰性 (2) 培地における生育状態 TF−ａ寒天平板及び斜面培地 外形：円形 大きさ：約１mm 隆起：半球状 構造：露滴状 表面：平滑 辺縁：平滑 色：乳黄白色 透明度：不透明 TF−ａ液体培地 発育の程度：旺盛 濁り：凝塊 沈殿：なし 表面の発育：なし、約５mmまでは発育なし ガス：なし (3) 生理学的性質 硫化水素の生成：＋ 硝酸塩の還元：− 酪酸の生成：＋ インドールの生成：＋ ウルアーゼ：− カタラーゼ：− デンプンの加水分解：− 酸素に対する態様：嫌気性 アンニアの生成：＋ 炭酸ガスの生成：＋ 生育の範囲：PH５〜8.5、温度30〜45℃ 糖からのガスの生成 Ｌ−アラビノース（−）、Ｄ−キシロース
（−）、Ｄ−グルコース（−）、Ｄ−マンノース
（−）、Ｄ−フラクトース（−）、Ｄ−ガラクトー
ス（−）、麦芽糖（−）、シヨ糖（−）、トレハロ
ース（−）、ソルビツト（−）、マンニトール
（−）、イノシツト（−）、グリセリン（−）、デン
プン（−） 以上の諸性状をバージーズ・マニユアル・オ
ブ・デイタミネイテイブ・バクテリオロジー第８
版に照らして検討すると、本菌株はフソバクテリ
ウム・ヌクレアタム（Fusobacter−ium
nucleatum）に酷似し、これに属する。 つぎに本発明の制癌性物質TF−500の製造法の
一例を図式化して説明すれば、次のとおりであ
る。 菌体から制癌作用を有する画分の採取
にはフソバクテリウム属に属する菌の菌体をジア
ルキルスルホキシドによる抽出処理に付し、得ら
れる抽出液より下記の性状を有する制癌性物質
TF−500又はその塩を製造する方法に関する。 (イ) 白灰色ないし淡褐色の粉末。 (ロ) 制癌作用および免疫賦活作用を有する。 (ハ) 水に溶解し、メタノール、エタノール、アセ
トン、ベンゼン、クロロホルム、酢酸エチル、
ジエチルエーテルに不溶。 (ニ) 明確な融点を示さず、約180℃より分解を始
め、195℃以上で著しく分解する。 (ホ) KBr錠剤法による赤外線吸収スペクトルは、
3500〜3200、2920、2850、1660〜1600、1580〜
1520、1460〜1400、1380〜1360、1120〜1100、
1080〜1000、970および840〜800cm-1の近傍に
吸収帯を有する。 (ヘ) PH７の水溶液の紫外線吸収スペクトルは、吸
収末端に強い吸収があり、また246〜280nmの
近傍に吸収を示す。 (ト) モーリツシユ反応、フエノール硫酸反応、ア
ンスロン硫酸反応、インール塩酸反応、ロウリ
ー・フオリン反応は陽性、ニンヒドリン反応は
陰性。 (チ) 元素分析値 Ｃ：38％〜47％ Ｈ：５％〜７％ Ｎ：１％〜
４％。 (リ) フエノール硫酸法による糖の含有率は、約30
％〜12％（グリコース換算）、およびロウリ
ー・フオリン法による蛋白質の含有率は、約10
％以下（牛血清アルブミン換算）である。 （ヌ） 分子量 数1000以上であるが、特定は極めて困難であ
る。 近年、各種の癌患者の治療法において宿主の免
疫機能を亢進させ、免疫機能の助けを借りながら
制癌効果を発現させる治療法の研究が盛んとなつ
てきた。 本発明者らはヒト口腔内より分離したフソバク
テリウム属に属する菌の菌体からジアルキルスル
ホキシドによる抽出処理に付して採取される成分
について、その薬理作用を調べていたところ、特
定の成分が制癌性を有しており、宿主介在性ある
いは宿主の免疫力を亢進させ、免疫力の助けを借
りながら間接的に制癌作用を発現させる作用を有
するものであり、制癌作用が強く、かつ副作用が
少ないなど制癌剤として好ましい性質を有するも
のであることを見出し、かかる成分を得る方法に
ついて種々検討して本発明を完成したものであ
る。 本発明で利用される菌としては、制癌性物質
TF−500を生成するフソバクテリウム属に属する
菌であればよく、好適なものとしてはフソバクテ
リウム・ヌクレアタムが挙げられる。具体的に
は、例えば、フソバクテリウム・ヌクレアタム
TF−031（FERM−ｐNo.5077、ATCC−31647）
および微生物学の一般常識としてその性質を有す
る菌株、すなわち、自然変異株あるいは人工的に
改良された菌株等が利用される。 フソバクテリウム・ヌクレアタムTF−031の菌
学的性状を記載すれば以下のとおりである。 (1) 形態 細胞の形：紡錘形（第１図） 細胞の多形性の有無：なし 運動性の有無：なし 胞子の有無：なし グラム染色：グラム陰性 抗酸性：陰性 (2) 培地における生育状態 TF−ａ寒天平板及び斜面培地 外形：円形 大きさ：約１mm 隆起：半球状 構造：露滴状 表面：平滑 辺縁：平滑 色：乳黄白色 透明度：不透明 TF−ａ液体培地 発育の程度：旺盛 濁り：凝塊 沈殿：なし 表面の発育：なし、約５mmまでは発育なし ガス：なし (3) 生理学的性質 硫化水素の生成：＋ 硝酸塩の還元：− 酪酸の生成：＋ インドールの生成：＋ ウルアーゼ：− カタラーゼ：− デンプンの加水分解：− 酸素に対する態様：嫌気性 アンニアの生成：＋ 炭酸ガスの生成：＋ 生育の範囲：PH５〜8.5、温度30〜45℃ 糖からのガスの生成 Ｌ−アラビノース（−）、Ｄ−キシロース
（−）、Ｄ−グルコース（−）、Ｄ−マンノース
（−）、Ｄ−フラクトース（−）、Ｄ−ガラクトー
ス（−）、麦芽糖（−）、シヨ糖（−）、トレハロ
ース（−）、ソルビツト（−）、マンニトール
（−）、イノシツト（−）、グリセリン（−）、デン
プン（−） 以上の諸性状をバージーズ・マニユアル・オ
ブ・デイタミネイテイブ・バクテリオロジー第８
版に照らして検討すると、本菌株はフソバクテリ
ウム・ヌクレアタム（Fusobacter−ium
nucleatum）に酷似し、これに属する。 つぎに本発明の制癌性物質TF−500の製造法の
一例を図式化して説明すれば、次のとおりであ
る。 菌体から制癌作用を有する画分の採取
【表】
除蛋白処理および／または限外濾過
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ フソバクテリウム属に属する制癌性物質TF
−500生産菌の菌体をジアルキルスルホキシドに
よる抽出処理に付し、得られる抽出液より下記の
性状を有する制癌性物質TF−500又はその塩を採
取することを特徴とする制癌性物質TF−500およ
びその塩の製造法。 (イ) 白灰色ないし淡褐色の粉末。 (ロ) 制癌作用および免疫賦活作用を有する。 (ハ) 水に溶解し、メタノール、エタノール、アセ
トン、ベンゼン、クロロホルム、酢酸エチル、
ジエチルエーテルに不溶。 (ニ) 明確な融点を示さず、約180℃より分解を始
め、195℃以上で著しく分解する。 (ホ) KBr錠剤法による赤外線吸収スペクトルは、
3500〜3200、2920、2850、1660〜1600、1580〜
1520、1460〜1400、1380〜1360、1120〜1100、
1080〜1000、970および840〜800cm-1の近傍に
吸収帯を有する。 (ヘ) PH７の水溶液の紫外線吸収スペクトルは、吸
収末端に強い吸収があり、また246〜280nmの
近傍に吸収を有する。 (ト) モーリツシユ反応、フエノール硫酸反応、ア
ンスロン硫酸反応、インドール塩酸反応、ロウ
リー・フオリン反応は陽性、ニンヒドリン反応
は陰性。 (チ) 元素分析値 Ｃ：38％〜47％ Ｈ：５％〜７％ Ｎ：１％〜
４％。 (リ) フエノール硫酸法による糖の含有率は、約30
％〜12％（グルコース換算）およびロウリー・
フオリン法による蛋白質の含有率は、約10％以
下（牛血清アルブミン換算）である。 ２ フソバクテリウム属に属する制癌性物質TF
−500生産菌の菌体をジアルキルスルホキシドに
よる抽出処理に付し、得られる抽出液に親水性有
機溶媒を加えて得られる沈澱物を除蛋白処理に付
した後、限外過することを特徴とする特許請求
の範囲第１項記載の製造法。 ３ ジアルキルスルホキシドがジメチルスルホキ
シドである特許請求の範囲第２項記載の製造法。 ４ 親水性有機溶媒がアセトンである特許請求の
範囲第２項又は第３項記載の製造法。 ５ 除蛋白処理が蛋白質分解酵素による酵素処理
である特許請求の範囲第２項〜第４項いずれかの
項記載の製造法。 ６ 蛋白質分解酵素による酵素処理が、プロナー
ゼ処理である特許請求の範囲第５項記載の製造
法。 ７ フソバクテリウム属に属する制癌性物質TF
−500生産菌の菌体をジアルキルスルホキシドに
よる抽出処理に付し、得られる抽出液に親水性有
機溶媒を加えて得られる沈澱物を限外過するこ
とを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の製造
法。 ８ ジアルキルスルホキシドがジメチルスルホキ
シドである特許請求の範囲第７項記載の製造法。 ９ 親水性有機溶媒がアセトンである特許請求の
範囲第７項又は第８項記載の製造法。 １０ 限外過を分画分子量５万〜20万の過膜
を使用して行う特許請求の範囲第２項〜第９項い
ずれかの項記載の製造法。 １１ フソバクテリウム属に属する制癌性物質
TF−500生産菌の菌体がフソバクテリウム・ヌク
レアタムである特許請求の範囲第１項〜第10項い
ずれかの項記載の製造法。
Priority Applications (22)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57142439A JPS5931715A (ja) | 1982-08-17 | 1982-08-17 | 制癌性物質ｔｆ−５００の製造法 |
| AU17848/83A AU556770B2 (en) | 1982-08-17 | 1983-08-10 | Novel tf substance having carcino static and immunostimulating activity |
| CA000434476A CA1202585A (en) | 1982-08-17 | 1983-08-12 | Process for preparing substance having carcinostatic and immunostimulating activity |
| DE3329255A DE3329255C2 (de) | 1982-08-17 | 1983-08-12 | Verfahren zur Herstellung der Substanz TF-500 mit carcinostatischen und immunostimulierenden Eigenschaften |
| IT48851/83A IT1168209B (it) | 1982-08-17 | 1983-08-12 | Procedimento per preparare una sostanza avente attivita' carcinostatica ed immunostimolante |
| GB08321918A GB2126893B (en) | 1982-08-17 | 1983-08-15 | Obtaining tf-500 substance from fusobacterium |
| FI832929A FI79140C (fi) | 1982-08-17 | 1983-08-15 | Foerfarande foer framstaellning av ett tf-500-aemne med karsinostatisk och immunitet stimulerande aktivitet. |
| CH4453/83A CH659256A5 (de) | 1982-08-17 | 1983-08-16 | Verfahren zur herstellung einer substanz mit carcinostatischer und immunostimulierender aktivitaet. |
| US06/523,438 US4547462A (en) | 1982-08-17 | 1983-08-16 | Process for preparing substance having carcinostatic and immunostimulating activity |
| KR1019830003811A KR860001213B1 (ko) | 1982-08-17 | 1983-08-16 | 제암 및 면역자극 작용을 갖는 물질의 제조방법 |
| ZA836021A ZA836021B (en) | 1982-08-17 | 1983-08-16 | Process for preparing substance having carcinostatic and immunostimulating activity |
| DD83253996A DD212401A5 (de) | 1982-08-17 | 1983-08-16 | Neues verfahren zur herstellung einer substanz mit carcinostatischer und immunostimulierender aktivitaet |
| PT77207A PT77207B (en) | 1982-08-17 | 1983-08-16 | Process for preparing a substance having carcinostatic and immunostimulating activity |
| ES524977A ES8505823A1 (es) | 1982-08-17 | 1983-08-16 | Un procedimiento para la preparacion de una sustancia carcinostatica |
| DK374283A DK374283A (da) | 1982-08-17 | 1983-08-16 | Fremgangsmaade til fremstilling af en carcinostatisk forbindelse |
| NZ205295A NZ205295A (en) | 1982-08-17 | 1983-08-16 | Microbial preparation of carcino-static substance |
| NL8302880A NL8302880A (nl) | 1982-08-17 | 1983-08-16 | Carcinostaticum en werkwijze ter verkrijging daarvan. |
| SE8304435A SE456014B (sv) | 1982-08-17 | 1983-08-16 | Forfarande for framstellning av en substans, tf-500, med karcinostatisk och immunostimulerande aktivitet |
| AT0293783A AT389525B (de) | 1982-08-17 | 1983-08-16 | Verfahren zur herstellung der neuen carcinostatischen substanz tf-500 |
| NO832938A NO159452C (no) | 1982-08-17 | 1983-08-16 | Fremgangsm te for fremstilling av en carcinostatiskns. |
| BE0/211367A BE897549A (fr) | 1982-08-17 | 1983-08-17 | Procede de preparation d'une substance ayant une activite carcinostatique et immunostimulante a partir de micro-organismes du genre fusobacterium |
| FR8313363A FR2531863B1 (fr) | 1982-08-17 | 1983-08-17 | Procede de preparation d'une substance ayant une activite carcinostatique et immunostimulante, a partir de micro-organismes du genre fusobacterium |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57142439A JPS5931715A (ja) | 1982-08-17 | 1982-08-17 | 制癌性物質ｔｆ−５００の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5931715A JPS5931715A (ja) | 1984-02-20 |
| JPH0321157B2 true JPH0321157B2 (ja) | 1991-03-22 |
Family
ID=15315335
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57142439A Granted JPS5931715A (ja) | 1982-08-17 | 1982-08-17 | 制癌性物質ｔｆ−５００の製造法 |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4547462A (ja) |
| JP (1) | JPS5931715A (ja) |
| KR (1) | KR860001213B1 (ja) |
| AT (1) | AT389525B (ja) |
| AU (1) | AU556770B2 (ja) |
| BE (1) | BE897549A (ja) |
| CA (1) | CA1202585A (ja) |
| CH (1) | CH659256A5 (ja) |
| DD (1) | DD212401A5 (ja) |
| DE (1) | DE3329255C2 (ja) |
| DK (1) | DK374283A (ja) |
| ES (1) | ES8505823A1 (ja) |
| FI (1) | FI79140C (ja) |
| FR (1) | FR2531863B1 (ja) |
| GB (1) | GB2126893B (ja) |
| IT (1) | IT1168209B (ja) |
| NL (1) | NL8302880A (ja) |
| NO (1) | NO159452C (ja) |
| NZ (1) | NZ205295A (ja) |
| PT (1) | PT77207B (ja) |
| SE (1) | SE456014B (ja) |
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