NO20220263A1 - Humanisert, glykoomkonstruert Type II anti-CD20 antistoff og anvendelse derav, samt vertscelle og farmasøytisk sammensetning - Google Patents

Humanisert, glykoomkonstruert Type II anti-CD20 antistoff og anvendelse derav, samt vertscelle og farmasøytisk sammensetning Download PDF

Info

Publication number
NO20220263A1
NO20220263A1 NO20220263A NO20220263A NO20220263A1 NO 20220263 A1 NO20220263 A1 NO 20220263A1 NO 20220263 A NO20220263 A NO 20220263A NO 20220263 A NO20220263 A NO 20220263A NO 20220263 A1 NO20220263 A1 NO 20220263A1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
antibody
seq
cells
cell
sequence
Prior art date
Application number
NO20220263A
Other languages
English (en)
Other versions
NO347530B1 (no
Inventor
Peter Brünker
Claudia Ferrara
Tobias Suter
Pablo Umaña
Ursula Püntener
Ekkehard Mössner
Original Assignee
Roche Glycart Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=34572912&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=NO20220263(A1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Roche Glycart Ag filed Critical Roche Glycart Ag
Publication of NO20220263A1 publication Critical patent/NO20220263A1/no
Publication of NO347530B1 publication Critical patent/NO347530B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A61P31/06—Antibacterial agents for tuberculosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/38—Drugs for disorders of the endocrine system of the suprarenal hormones
    • A61P5/40—Mineralocorticosteroids, e.g. aldosterone; Drugs increasing or potentiating the activity of mineralocorticosteroids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2887—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD20
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1048—Glycosyltransferases (2.4)
    • C12N9/1051—Hexosyltransferases (2.4.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y204/00—Glycosyltransferases (2.4)
    • C12Y204/01—Hexosyltransferases (2.4.1)
    • C12Y204/01144—Beta-1,4-mannosyl-glycoprotein 4-beta-N-acetylglucosaminyltransferase (2.4.1.144)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
    • C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/53—Hinge
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/72—Increased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/808—Materials and products related to genetic engineering or hybrid or fused cell technology, e.g. hybridoma, monoclonal products
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/866—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof involving immunoglobulin or antibody fragment, e.g. fab', fab, fv, fc, heavy chain or light chain
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/867—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof involving immunoglobulin or antibody produced via recombinant dna technology

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)

Description

[0001] Foreliggende oppfinnelse angår antigenbindende molekyler (ABM). Ved spesielle utførelsesformer angår foreliggende oppfinnelse rekombinante monoklonale antistoffer, innbefattende kimæriske, primatiserte eller humaniserte antistoffer som er spesifikke for humant CD20. Foreliggende oppfinnelse angår dessuten nukleinsyremolekyler som koder for slike ABM, samt vektorer og vertsceller omfattende slike nukleinsyremolekyler. Oppfinnelsen angår videre fremgangsmåter for fremstilling av ABM ifølge oppfinnelsen, samt fremgangsmåter for anvendelse av disse ABM ved behandling av sykdom. Dessuten angår foreliggende oppfinnelse ABM med modifisert glykosylering med forbedrede terapeutiske egenskaper, innbefattende antistoffer med øket Fc-reseptorbinding og øket effektorfunksjon.
Immunsystemet og anti-CD20-antistoffer
[0002] Immunsystemet hos virveldyr, innbefattende mennesker, består av en rekke organer og celletyper, som er blitt utviklet til nøyaktig og spesifikt å gjenkjenne, binde og ødelegge inntrengende fremmende mikroorganismer ("antigener"). Lymfocytter er avgjørende for fyllestgjørende funksjon av immunsystemet. Disse celler dannes i thymus, milt og benmarg (voksne) og representerer ca. 30% av den totale mengde hvite blodlegemer som finnes i sirkulasjonssystemet hos voksne mennesker. Det er to hoved-subpopulasjoner av lymfocytter: T-celler og B-celler. T-celler er ansvarlige for cellemediert immunitet, mens B-celler er ansvarlige for antistoffdannelse (humoral immunitet). I en typisk immunrespons funksjonerer imidlertid T-celler og B-celler i gjensidig avhengighet av hverandre: T-celler aktiveres når T-cellereseptoren bindes til fragmenter av et antigen som er bundet til vevstypekompleks-("MHC")-glykoproteiner på overflaten av en antigen-presenterende celle; slik aktivering gir frigjøring av biologiske mediatorer ("interleukiner"), som stimulerer B-celler til å differensiere og danne antistoffer ("immunglobuliner") overfor antigenet.
[0003] Hver B-celle i verten uttrykker et antistoff av én spesiell type og spesifisitet, og forskjellige B-celler uttrykker antistoffer som er spesifikke for forskjellige antigener. B-celleproliferasjon og antistoffdannelse skyter fart som reaksjon på et fremmed antigen, og begge opphører typisk (eller opphører i det vesentlige) straks det fremmede antigen er blitt nøytralisert. Leilighetsvis vil imidlertid proliferasjon av en spesiell B-celler fortsette med uforminsket styrke; slik proliferasjon kan resultere i en krefttype som omtales som "B-cellelymfom<11>.
[0004] Både T-celler og B-celler omfatter celleoverflateproteiner som kan anvendes som "markører" for differensiering og identifisering. Én slik human B-cellemarkør er det humane B-lymfocytt-begrensede differensieringsantigen Bp35, omtalt som "CD20". CD20 uttrykkes under tidlig pre-B-celleutvikling og vedvarer inntil plasmacelledifferensiering. Spesifikt kan CD20-molekylet regulere et trinn i aktiveringsprosessen som er nødvendig for cellesyklusinitiering og -differensiering, og uttrykkes vanligvis i meget høye nivåer på neoplastiske ("tumor"-) B-celler. På grunn av at CD20 er til stede i høye nivåer på "maligne" B-celler, dvs. B-celler hvis uforminskede proliferasjon kan føre til B-celle-lymfom, har CD20-overflateantigenet potensial til å tjene som en kandidat for "målsøking" av B-cellelymfomer.
[0005] Slik målsøking kan hovedsakelig generaliseres som følger: antistoffer som er spesifikke for CD20-overflateantigenet på B-celler, innføres i en pasient, for eksempel ved injeksjon. Disse anti-CD20-antistoffer bindes spesifikt til CD20-celleoverflateantigenet på (øyensynlig) både normale og maligne B-celler; anti-CD20-antistoffet som er bundet til CD20-overflateantigenet, kan føre til ødeleggelse og uttømming av neoplastiske B-celler. Dessuten kan kjemiske midler eller radioaktive merkesubstanser med potensial til å ødelegge tumoren konjugeres til anti-CD20-antistoffet slik at midlet spesifikt "avgis" til f.eks. de neoplastiske B-celler. Uansett fremgangsmåte er det et primært mål å ødelegge tumoren: den spesifikke fremgangsmåte kan bestemmes ved det spesielle anti-CD20-antistoff som anvendes, og således kan de tilgjengelige fremgangsmåter for målsøking av CD20-antigenet variere i betydelig grad.
[0006] Ukonjugerte monoklonale antistoffer (mAb) kan være anvendelige medisiner for behandling av kreft, som vist ved U.S. Food and Drug Administrations godkjennelse av Rituximab (Rituxan™; IDEC Pharmaceuticals, San Diego, CA, og Genetech Inc., San Francisco, CA), for behandling av CD20-positiv B-celle, lavgradig eller follikulær ikke-Hodgkins lymfom, T rastuzumab (Herceptin™; Genentech Inc.) for behandling av fremskreden brystkreft (Grillo-Lopez, A.-J., et al., Semin. Oncol. 26:66-73 (1999); Goldenberg, M. M., Clin. Ther.
21 :309-18 (1999)), Gemtuzumab (Mylotarg™, Celltech/Wyeth-Ayerst) for behandling av tilbakefall av myeloid leukemi, samt Alemtuzumab (CAMPATH™, Millenium Pharmaceuticals/Schering AG) for behandling av kronisk B-cellelymfocyttleukemi. Suksessen med disse produkter er ikke bare basert på deres effektivitet, men også på deres utmerkede sikkerhetsprofiler (Grillo-Lopez, A.-J., et al., Semin. Oncol. 26:66-73 (1999); Goldenberg, M. M., Clin. Ther. 21 :309-18 (1999)). Til tross for oppnåelse av disse medikamenter, er det for tiden stor interesse for oppnåelse av høyere spesifikk antistoffaktivitet enn det som typisk fås ved ukonjugert mAb-terapi. Det monoklonale museantistoff , B-Ly1 , er et annet antistoff som er kjent for å være spesifikt for humant CD20. (Poppema, S. og Visser, L, Biotest Bulletin 3: 131 -139 (1987)).
[0007] Resultatene av en rekke undersøkelser tyder på at Fc-reseptoravhengige mekanismer i vesentlig grad bidrar til virkningen av cytotoksiske antistoffer overfor tumorer, og tyder på at et optimalt antistoff mot tumorer vil bindes preferensielt til aktiverings-Fc-reseptorer og minimalt til den inhiberende partner FcyRIIB. (Clynes, R. A., et al., Nature Medicine 6(4):443-446 (2000);
Kalergis, A.M. og Ravetch, J. V., J Exp. Med. 195(12):1653-1 659 (juni 2002). Resultatene av minst én undersøkelse tyder for eksempel på at FoyRlllareseptoren spesielt er sterkt forbundet med effektiviteten av antistoffterapi.
(Cartron, G., et al., Blood 99(3) :754-757 (februar 2002)). Denne undersøkelse viste at pasienter som er homozygote for FcyRIIIa, har bedre respons overfor Rituxirnab enn heterozygote pasienter. Forfatterne konkluderte med at den overlegne respons skyldtes bedre in vivo-binding av antistoffet til FcyRIIIa, noe som resulterte i bedre ADCC-aktivitet overfor lymfomceller. (Cartron, G., et al., Blood 99(3):754-757 (februar 2002)).
[0008] Forskjellige forsøk på å målsøke CD20-overflateantigenet er rapportert. Monoklonalt museantistoff 1 F5 (et anti-CD20-antistoff) ble ifølge rapport administrert ved kontinuerlig intravenøs infusjon til pasienter med B-cellelymfom. Meget høye nivåer (>2 gram) 1 F5 var ifølge rapport nødvendig for å uttømme sirkulerende tumorceller, og resultatene ble beskrevet som "forbigående". Press et al., "Monoclonal Antibody 1 F5 (Anti-CD20) Serotherapy of Human B-Cell Lymphomas." Blood 69/2:584-591 (1987). Et potensielt problem med denne fremgangsmåte er at ikke-humane monoklonale antistoffer (f.eks. monoklonale museantistoffer) typisk mangler human effektorfunksjonalitet, dvs. at de ikke er i stand til blant annet å formidle komplementavhengig lyse, eller til å lysere humane målceller via antistoffavhengig cellulær toksisitet eller Fc-reseptormediert fagocytose. Videre kan ikke-humane monoklonale antistoffer gjenkjennes av menneskeverten som et fremmed protein; gjentatte injeksjoner av slike fremmede antistoffer kan derfor føre til induksjon av immunresponser som fører til skadelige hypersensitivitetsreaksjoner. Når det gjelder musebaserte monoklonale antistoffer, omtales dette ofte som human anti-mus-antistoffrespons, eller "HAMA"-respons. Disse "fremmede" antistoffer kan dessuten angripes av vertens immunsystem slik at de egentlig nøytraliseres før de når sitt målsted.
[0009] En annen rapportert fremgangsmåte til forbedring av evnen hos monoklonale museantistoffer til å være effektive ved behandling av B-celleforstyrrelser har vært å konjugere en radioaktiv merkesubstans eller toksin til antistoffet slik at merkesubstansen eller toksinet lokaliseres på tumorstedet. For eksempel er det ovenfor angitte 1 F5-antistoff blitt "merket" med jod-131 (<,,131>|") og er ifølge rapport evaluert for biofordeling i to pasienter. Se Eary, J. F. et al., "Imaging and Treatment of B-Cell Lymphoma" J. Nuc. Med. 31/8:1257-1268 (1990); se også Press, O. W. et al., "Treatment of Refractory Non-Hodgkin's Lymphoma with Radiolabeled MB-1 (Anti-CD37) Antibody" J. Clin. One. 7/8:1027-1038 (1989) (indikasjon om at én pasient behandlet med <131>l-merket IF-5 oppnådde en "delvis respons"); Goldenberg, D. M. et al., "Targeting, Dosimetry and Radioimmunotherapy of B-Cell Lymphomas with Iodine-1 31 -Labeled LL2 Monoclonal Antibody" J. Clin. One. 9/4:548-564 (1991 ) (tre a v åtte pasienter som fikk multiple injeksjoner, rapporterte å ha utviklet en HAMA-respons); Appelbaum, F. R. "Radiolabeled Monoclonal Antibodies in the Treatment of Non-Hodgkin's Lymphoma" Hem/Onc. Clinics of N. A. 5/5:1013-1025 (1991) (oversiktsartikkel); Press, O. W. et al "Radiolabeled-Antibody Therapy of B-Cell Lymphoma with Autologous Bone Marrow Support." New England J. Med. 329/17: 1219-1223 (1993) (iodine-131 labeled anti-CD20 antibody IFS and B1); og Kaminski, M. G. et al "Radioimmunotherapy of B-Cell Lymphoma with <131>1 Anti-B1 (Anti-CD20) Antibody". New England J. Med. 329/7(1993) (jod-131 -merket anti-CD20-antistoff B1 ; i det følgende "Kaminski"). Toksiner (dvs. kjemoterapeutiske midler så som doksorubicin eller mitomycin C) er også blitt konjugert til antistoffer. Se for eksempel publisert PCT-patentsøknad WO 92/07466 (publisert 14. mai 1992).
[0010] Kimæriske antistoffer omfattende deler av antistoffer fra to eller flere forskjellige arter (f.eks. mus og menneske) er blitt utviklet som alternativ til "konjugerte" antistoffer. For eksempel beskriver Liu, A. Y. et al i "Production of a Mouse-Human Chimeric Monoclonal Antibody to CD20 with Potent Fc-Dependent Biologic Activity" J. Immun. 139/10:3521-3526 (1987) et kimaerisk muse/humantantistoff rettet mot CD20-antigenet. Se også PCT-publikasjon nr. WO 88/04936. For eksempel er rituximab (RITUXAN®), et kimærisk anti-CD20, blitt godkjent for behandling av ikke-Hodgkins lymfom.
[0011] På bakgrunn av ekspresjonen av CD20 ved B-cellelymfomer kan dette antigen tjene som kandidat for "målsøking" av slike lymfomer. Slik målsøking kan hovedsakelig generaliseres som følger; antistoffer som er spesifikke for CD20-overflateantigen på B-celler, administreres til en pasient. Disse anti-CD20-antistoffer bindes spesifikt til CD20-antigenet på (tilsynelatende) både normale og maligne B-celler, og antistoffet bundet til CD20 på celleoverflaten resulterer i ødeleggelse og uttømming av tumorigene B-celler. Dessuten kan kjemiske midler, cytotoksiner eller radioaktive midler festes direkte eller indirekte til anti-CD20-antistoffet slik at midlet selektivt "avgis" til de CD20-antigen-uttrykkende B-celler. Med begge disse fremgangsmåter er det primære mål å ødelegge tumoren. Den spesifikke fremgangsmåte vil avhenge av det spesielle anti-CD20-antistoff som anvendes. Det fremgår således at de forskjellige fremgangsmåter for målsøking av CD20-antigenet kan variere betraktelig.
[0012] Rituximab- (RITUXAN®) antistoffet er et genteknologisk konstruert kimærisk humant konstant gamma 1 -musedoméne inneholdende monoklonalt antistoff rettet mot det humane CD20-antigen. Dette kimæriske antistoff inneholder humane konstante gamma 1 -doméner og identifiseres ved navnet "C2B8" i US-patent nr. 5 736 137 utstedt 17. april 1998, overdradd til IDEC Pharmaceuticals Corporation. RITUXAN® er godkjent for behandling av pasienter med tilbakevendt eller refraktært ("refracting") lavgradig eller follikulært, CD20-positivt ikke-Hodgkins B-cellelymfom. In vitro-virkningsmekanisme-undersøkelser har vist at RITUXAN® viser human komplementavhengig cytotoksisitet (CDC) (Reff et. al, Blood 83(2): 435-445 (1994)). Det viser dessuten betydelig aktivitet i analyser som måler antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet (ADCC). RITUXAN® er blitt vist å ha antiproliferativ aktivitet i thymidin-inkorporeringsanalyser og en begrenset evne til å indusere apoptose direkte, mens CD20-antistoffer ikke har dette (Maloney et. al, Blood 88 (10): 637a (1996)).
Antistoffglykosylering
[0013] Oligosakkaridkomponenten kan i betydelig grad påvirke egenskaper som angår effektiviteten av et terapeutisk glykoprotein, innbefattende fysisk stabilitet, motstandsdyktighet overfor proteaseangrep, interaksjoner med immunsystemet, farmakokinetikk og spesifikk biologisk aktivitet. Slike egenskaper kan avhenge ikke bare av tilstedeværelse eller fravær, men også av de spesifikke strukturer, av oligosakkarider. Det kan gjøres noen generaliseringer mellom oligosakkaridstruktur og glykoproteinfunksjon. For eksempel medierer visse oligosakkaridstrukturer hurtig fjerning av glykoproteinet fra blodstrømmen via interaksjoner med spesifikke karbohydratbindende proteiner, mens andre kan bindes av antistoffer og trigge uønskede immunreaksjoner (Jenkins et al., Nature Biotechnol. 14:975-81 (1996)).
[001 4] Pattedyrceller er de foretrukne verter for dannelse av terapeutiske glykoproteiner på grunn av sin evne til å glykosylere proteiner i den mest kompatible form for human anvendelse (Cumming et al., Glycobiology 1:115-30 (1991 ); Jenkins et al., Nature Biotechnol. 14:975-81 (1996)). Bakterier glykosylerer proteiner meget sjelden, og gir, i likhet med andre typer vanlige verter, så som gjærsopp, filamentøse sopp, insekt- og planteceller, glykosyleringsmønstre forbundet med hurtig fjerning fra blodstrømmen, uønskede immun-interaksjoner, og i noen spesifikke tilfeller redusert biologisk aktivitet. Blant pattedyrceller har kinesisk hamster-ovarie- (CHO)-celler vært mest alminnelig anvendt i de siste to tiår. I tillegg til at disse celler gir egnede glykosylerings-mønstre, muliggjør de konstant generering av genetisk stabile, meget produktive klonale cellelinjer. De kan dyrkes til høye tettheter i enkle bioreaktorer ved anvendelse av serumfrie medier, og muliggjøre utvikling av sikre og reproduserbare bioprosesser. Andre vanlig anvendte dyreceller innbefatter baby-hamsternyre (BHK)-celler, NS0- og Sp2/0-musemyelomceller. I den senere tid er dannelse ut fra transgene dyr også blitt testet. (Jenkins et al., Nature Biotechnol. 14:975-81 (1996)).
[0015] Alle antistoffer inneholder karbohydratstrukturer i konserverte stillinger i de konstante tungkjederegioner, og hver isotype har en særlig rekke N-bundne karbohydratstrukturer, som variabelt påvirker proteinsammensetning, -utskillelse og funksjonell aktivitet. (Wright, A., og Morrison, S. L, Trends Biotech.
15:26-32 (1997)). Strukturen av det tilknyttede N-bundne karbohydrat varierer i betydelig grad, avhengig av graden av prosessering, og kan innbefatte komplekse oligosakkarider med høyt innhold av mannose, med multiple grener og med to antenner ("biantennary"). (Wright, A., og Morrison, S. L, Trends Biotech. 15:26-32 (1997)). Det er typisk en heterogen prosessering av kjerne-oligosakkaridstrukturene tilknyttet på et spesielt glykosyleringssted, slik at til og med monoklonale antistoffer finnes som multiple glykoformer. Det er likeledes vist at hovedforskjeller i antistoff-glykosyleringen finnes mellom cellelinjer, og enda mindre forskjeller sees for en gitt cellelinje dyrket under forskjellige dyrkningsbetingelser. (Lifely, M. R. et al., Glycobiology 5(8):813-22 (1995)).
[0016] Én måte til å oppnå store økninger i potens, mens det opprettholdes en enkel produksjonsprosess og potensielt unngås betydelige, uønskede bivirkninger, er å forsterke de naturlige, cellemedierte effektorfunksjoner hos monoklonale antistoffer ved omarbeiding av deres oligosakkaridkomponent som beskrevet i Umaha, P. et al., Nature Biotechnol. 17:176-180 (1999) og US-patent nr. 6 602 684, og hele innholdet i disse er hen/ed i sin helhet medtatt her i dokumentet som referanse. Antistoffer av lgG1 -typen, de mest alminnelig anvendte antistoffer ved kreft-immunterapi, er glykoproteiner som har et konservert N-bundet glykosyleringssete ved Asn297 i hvert CH2-doméne. De to komplekse toantenne-oligosakkarider knyttet til Asn297 er begravet mellom CH2-doménene og danner utstrakte kontakter med polypeptidskjelettet, og deres tilstedeværelse er essensiell for at antistoffet skal mediere effektorfunksjoner så som antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet (ADCC) (Lifely, M. R., et al., Glycobiology 5:813-822 (1995); Jefferis, R., et al., Immunol Rev. 163:59-76 (1998); Wright, A. og Morrison, S. L., Trends Biotechnol. 15:26-32 (1997)).
[0017] De nærværende oppfinnere har tidligere vist at overekspresjon i kinesisk hamster-ovarie- (CHO)-celler av β(1 ,4)-N-acetylglukosaminyltransferase III ("GnTIII"), en glykosyltransferase som katalyserer dannelsen av todelte ("oligosakkarider, i betydelig grad øker ADCC-aktiviteten in vitro av et kimærisk monoklonalt anti-neuroblastom-antistoff (chCE7) dannet av de omarbeidede CHO-celler (se Umaha, P. et al., Nature Biotechnol. 17:176-180 (1999); og internasjonal publikasjon nr. WO 99/54342, idet hele innholdet i disse er medtatt her i dokumentet som referanse). Antistoffet chCE7 hører til en stor klasse ukonjugerte mAb som har høy tumoraffinitet og -spesifisitet, men har for liten potens til å være klinisk anvendelige ved fremstilling i industrielle standardcellelinjer som mangler GnTIM-enzymet (Umaha, P., et al., Nature Biotechnol. 17:176-180 (1999)). Denne undersøkelse var den første som viste at store økninger i ADCC-aktivitet kan oppnås ved at de antistoffproduserende celler omarbeides til å uttrykke GnTIII, noe som også førte til en økning i andelen av todelte (“bisected") oligosakkarider som er knyttet til den konstante region (Fc), innbefattende todelte, ikke-fukosylerte oligosakkarider, over nivåene som finnes i naturlig forekommende antistoffer.
[001 8] Det er et stadig behov for forbedrede terapeutiske fremgangsmåter rettet mot CD20-antigenet for behandling av B-celle-lymfomer i primater, innbefattende, men ikke begrenset til, mennesker.
[0019] Idet man er klar over det voldsomme terapeutiske potensial hos antigenbindende molekyler (ABM) som har bindingsspesifisitet som hos muse-B-Ly1 -antistoffet, og som er blitt glyko-omarbeidet til å forsterke Fc-reseptorbindende affinitet og -effektorfunksjon, har de nærværende oppfinnere utviklet en fremgangsmåte for fremstilling av slike ABM. Denne fremgangsmåte innbefatter blant annet frembringelse av rekombinante, kimæriske antistoffer eller kimæriske fragmenter derav. Effektiviteten av disse ABM blir ytterligere forsterket ved omarbeiding av glykosyleringsprofilen for antistoff-Fc-regionen.
[0020] Ved ett aspekt er oppfinnelsen følgelig rettet mot et isolert polynukleotid omfattende: (a) en sekvens valgt fra en gruppe bestående av:
SEKV ID NR:5, SEKV ID NR: 6 og SEKV ID NR:7. (CDR VH-i); (b) en
sekvens valgt fra en gruppe bestående av: SEKV ID NR:21 , SEKV ID NR:22 og SEKV ID NR:23. (CDR VH.2); og SEKV ID NR:24. Ved et annet aspekt er oppfinnelsen rettet mot et isolert polynukleotid omfattende SEKV ID NR:8, SEKV ID NR:9 og SEKV ID NR:10. (CDR V|_). Ved én utførelsesform koder hvilke som helst av disse polynukleotider for et fusjonspolypeptid.
[0021] Ved et ytterligere aspekt er oppfinnelsen rettet mot et isolert polynukleotid omfattende SEKV ID NR:3. Ved et annet aspekt er oppfinnelsen rettet mot et isolert polynukleotid omfattende SEKV ID NR:4. Ved et ytterligere aspekt er oppfinnelsen rettet mot et isolert polynukleotid omfattende en sekvens valgt fra gruppen bestående av SEKV ID NR:29; SEKV ID NR:31 ; SEKV ID NR:33; SEKV ID NR:35; SEKV ID NR:37; SEKV ID NR:39; SEKV ID NR:41 ; SEKV ID NR:43; SEKV ID NR:45; SEKV ID NR:47; SEKV ID NR:49; SEKV ID NR:51 ; SEKV ID NR:53; SEKV ID NR:55; SEKV ID NR:57; SEKV ID NR:59; SEKV ID NR:61 ; SEKV ID NR:63; SEKV ID NR:65; SEKV ID NR:67; SEKV ID NR:69; og SEKV ID NR:71 . Ved et annet aspekt er oppfinnelsen rettet mot et isolert polynukleotid omfattende SEKV ID NR:75. Ved én utførelsesform koder slike polynukleotider for fusjonspolypeptider.
[0022] Oppfinnelsen er videre rettet mot et isolert polynukleotid omfattende en sekvens med minst 80% identitet med SEKV ID NR:3, hvor det isolerte polynukleotid koder for et fusjonspolypeptid. Ved et ytterligere aspekt er oppfinnelsen rettet mot et isolert polynukleotid omfattende en sekvens med minst 80% identitet med SEKV ID NR: 4, hvor det isolerte polynukleotid koder for et fusjonspolypeptid. Oppfinnelsen er videre rettet mot et isolert polynukleotid omfattende en sekvens med minst 80% identitet med en sekvens valgt fra gruppen bestående av SEKV ID NR:29; SEKV ID NR:31 ; SEKV ID NR:33; SEKV ID NR:35; SEKV ID NR:37; SEKV ID NR:39; SEKV ID NR:41 ; SEKV ID NR:43; SEKV ID NR:45; SEKV ID NR:47; SEKV ID NR:49; SEKV ID NR:51 ; SEKV ID NR:53; SEKV ID NR:55; SEKV ID NR:57; SEKV ID NR:59; SEKV ID NR:61 ; SEKV ID NR:63; SEKV ID NR:65; SEKV ID NR:67; SEKV ID NR:69; og SEKV ID NR:71 , hvor det isolerte polynukleotid koder for et fusjonspolypeptid. Ved et ytterligere aspekt er oppfinnelsen rettet mot et isolert polynukleotid omfattende en sekvens med minst 80% identitet med SEKV ID NR:75, hvor det isolerte polynukleotid koder for et fusjonspolypeptid.
[0023] Oppfinnelsen er videre rettet mot et polynukleotid omfattende SEKV ID NR:1 1 (hel tung kjede), eller polynukleotider med 80%, 85%, 90%, 95% eller 99% identitet med SEKV ID NR:11 . Oppfinnelsen er også rettet mot et polynukleotid omfattende SEKV ID NR: 12 (hel lett kjede), eller to polynukleotider med 80%, 85%, 90%, 95% or 99% identitet med SEKV ID NR:12.
[0024] Oppfinnelsen er også rettet mot et isolert polynukleotid som koder for et kimærisk polypeptid med sekvensen SEKV ID NR:1 . Ved én utførelsesform omfatter polynukleotidet en sekvens som koder for et polypeptid med sekvensen SEKV ID NR: 1 , og en sekvens som koder for et polypeptid med sekvensen for en antistoff-Fc-region, eller et fragment derav, fra en annen art enn mus.
Oppfinnelsen er også rettet mot et isolert polynukleotid som koder for et kimærisk polypeptid med en sekvens valgt fra gruppen bestående av SEKV ID NR:30;
SEKV ID NR:32; SEKV ID NR:34; SEKV ID NR:36; SEKV ID NR:38; SEKV ID NR:40; SEKV ID NR:42; SEKV ID NR:44; SEKV ID NR:46; SEKV ID NR:48;
SEKV ID NR:50; SEKV ID NR:52; SEKV ID NR:54; SEKV ID NR:56; SEKV ID NR:58; SEKV ID NR:60; SEKV ID NR:62; SEKV ID NR:64; SEKV ID NR:66; SEKV ID NR:68; SEKV ID NR:70; og SEKV ID NR:72. Ved én utførelsesform omfatter polynukleotidet en sekvens som koder for et polypeptid med en sekvens valgt fra gruppen bestående av SEKV ID NR:30; SEKV ID NR:32; SEKV ID NR: 34, SEKV ID NR:36; SEKV ID NR:38; SEKV ID NR:40; SEKV ID NR:42; SEKV ID NR:44; SEKV ID NR:46; SEKV ID NR:48; SEKV ID NR:50; SEKV ID NR:52;
SEKV ID NR:54; SEKV ID NR:56; SEKV ID NR:58; SEKV ID NR:60; SEKV ID NR:62; SEKV ID NR:64; SEKV ID NR:66; SEKV ID NR:68; SEKV ID NR:70; og SEKV ID NR:72; og en sekvens som koder for et polypeptid med sekvensen som hos en antistoff-Fc-region, eller et fragment derav, fra en annen art enn mus.
[0025] Ved enda et annet aspekt er oppfinnelsen rettet mot et isolert polynukleotid som koder for et kimærisk polypeptid med sekvensen SEKV ID NR: 2. Ved én utførelsesform omfatter polynukleotidet en sekvens som koder for et polypeptid med sekvensen SEKV ID NR: 2, og en sekvens som koder for et polypeptid med sekvensen som hos en antistoff-Fc-region, eller et fragment derav, fra en annen art enn mus. Ved enda et annet aspekt er oppfinnelsen rettet mot et isolert polynukleotid som koder for et kimærisk polypeptid med sekvensen SEKV ID NR:76. Ved én utførelsesform omfatter polynukleotidet en sekvens som koder for et polypeptid med sekvensen SEKV ID NR:76; og en sekvens som koder for et polypeptid med sekvens som for en antistoff-Fcregion, eller et fragment derav, fra en annen art enn mus.
[0026] Oppfinnelsen er også rettet mot et isolert polynukleotid omfattende en sekvens som koder for et polypeptid med VH-regionen som hos muse-B-Ly1 -antistoffet, eller funksjonelle varianter derav, og en sekvens som koder for et polypeptid med sekvens som for en antistoff-Fc-region, eller et fragment derav, fra en annen art enn mus. Ved et annet aspekt er oppfinnelsen rettet mot et isolert polynukleotid omfattende en sekvens som koder for et polypeptid med VL-regionen av muse- B-Ly1 -antistoffet, eller funksjonelle varianter derav, og en sekvens som koder for et polypeptid med sekvens som for en antistoff-Fc-region, eller et fragment derav, fra en annen art enn mus.
[0027] Oppfinnelsen er videre rettet mot en ekspresjonsvektor omfattende hvilke som helst av de isolerte polynukleotider beskrevet ovenfor, og en vertscelle som omfatter en slik ekspresjonsvektor. Ved et ytterligere aspekt er oppfinnelsen rettet mot en vertscelle omfattende hvilke som helst av de isolerte polynukleotider beskrevet ovenfor.
[0028] Ved ett aspekt er oppfinnelsen rettet mot et isolert polypeptid omfattende: (a) en sekvens valgt fra en gruppe bestående av: SEKV ID NR: 15, SEKV ID NR: 16 og SEKV ID NR:17. (CDR VH-i); (b) en sekvens valgt fra en gruppe bestående av: SEKV ID NR:25, SEKV ID NR:26 og SEKV ID NR:27 (CDR VH.2); og SEKV ID NR:28, hvor polypeptidet er et fusjonspolypeptid. Ved et annet aspekt er oppfinnelsen rettet mot et isolert polypeptid omfattende SEKV ID NR:18, SEKV ID NR: 19 og SEKV ID NR:20. (CDR VL), hvor polypeptidet er et fusjonspolypeptid.
[0029] Oppfinnelsen er også rettet mot et kimærisk polypeptid omfattende sekvensen SEKV ID NR:1 eller en variant derav. Oppfinnelsen er videre rettet mot et kimærisk polypeptid omfattende sekvensen SEKV ID NR:2 eller en variant derav. Ved én utførelsesform omfatter hvert av disse polypeptider videre en human Fc-region. Oppfinnelsen er også rettet mot et kimærisk polypeptid omfattende en sekvens valgt fra gruppen bestående av SEKV ID NR:30; SEKV ID NR:32; SEKV ID NR:34; SEKV ID NR:36; SEKV ID NR:38; SEKV ID NR:40;
SEKV ID NR:42; SEKV ID NR:44; SEKV ID NR:46; SEKV ID NR:48; SEKV ID NR:50; SEKV ID NR:52; SEKV ID NR:54; SEKV ID NR:56; SEKV ID NR:58;
SEKV ID NR:60; SEKV ID NR:62; SEKV ID NR:64; SEKV ID NR:66; SEKV ID NR:68; SEKV ID NR:70; og SEKV ID NR:72, eller en variant derav. Oppfinnelsen er videre rettet mot et kimærisk polypeptid omfattende sekvensen SEKV ID NR:76 eller en variant derav. Ved én utførelsesform omfatter hvert av disse polypeptider videre en human Fc-region.
[0030] Ved et annet aspekt er oppfinnelsen rettet mot et polypeptid omfattende en sekvens som stammer fra muse-B-Ly1 -antistoffet, og en sekvens som stammer fra et heterologt polypeptid, samt et antigenbindende molekyl omfattende et slikt polypeptid. Ved én utførelsesform er det antigenbindende molekyl et antistoff. Ved en foretrukket utførelsesform er antistoffet kimærisk. Ved en annen foretrukket utførelsesform er antistoffet humanisert eller primatisert.
[0031] Ved et ytterligere aspekt er oppfinnelsen rettet mot et isolert polypeptid omfattende SEKV ID NR: 13 eller en variant derav. Ved et annet aspekt er oppfinnelsen rettet mot et isolert polypeptid omfattende SEKV ID NR: 14.
[0032] Ved et annet aspekt er oppfinnelsen rettet mot et ABM som er i stand til å konkurrere med muse-B-Ly1 -antistoffet med hensyn til binding til CD20, og som er kimærisk. Ved én utførelsesform er ABM et antistoff eller et fragment • derav. Ved en ytterligere utførelsesform er ABM et rekombinant antistoff omfattende en VH-region med en aminosyresekvens valgt fra gruppen bestående av SEKV ID NR:1 ; SEKV ID NR:30; SEKV ID NR:32; SEKV ID NR:34; SEKV ID
NR:36; SEKV ID NR:38; SEKV ID NR:40; SEKV ID NR:42; SEKV ID NR:44;
SEKV ID NR:46; SEKV ID NR:48; SEKV ID NR:50; SEKV ID NR:52; SEKV ID
NR:54; SEKV ID NR:56; SEKV ID NR:58; SEKV ID NR:60; SEKV ID NR:62;
SEKV ID NR:64; SEKV ID NR:66; SEKV ID NR:68; SEKV ID NR:70; og SEKV ID NR:72. Ved en annen utførelsesform er ABM is et rekombinant antistoff omfattende en VL-region med en aminosyresekvens valgt fra gruppen bestående av SEKV ID NR: 2 og SEKV ID NR:76. Ved en ytterligere utførelsesform er ABM et rekombinant antistoff som er primatisert. Ved enda en ytterligere utførelsesform er ABM et rekombinant antistoff som er humanisert. Ved en annen utførelsesform er ABM et rekombinant antistoff omfattende en human Fc-region. Ved en ytterligere utførelsesform kan hvilke som helst av ABM omtalt ovenfor være konjugert til en del så som et toksin eller en radiomerkesubstans.
[0033] Oppfinnelsen angår videre et ABM ifølge foreliggende oppfinnelse, hvilket ABM har modifiserte oligosakkarider. Ved én utførelsesform har de modifiserte oligosakkarider redusert fukosylering sammenliknet med ikkemodifiserte oligosakkarider. Ved andre utførelsesformer er de modifiserte oligosakkarider hybride eller komplekse. Ved en ytterligere utførelsesform har ABM en øket andel av ikke-fukosylerte oligosakkarider eller todelte ikkefukosylerte oligosakkarider i Fc-regionen av molekylet. Ved én utførelsesform er de todelte, ikke-fukosylerte oligosakkarider hybride. Ved en ytterligere utførelsesform er de todelte, ikke-fukosylerte oligosakkarider komplekse. Ved én utførelsesform er minst 20% av oligosakkaridene i Fc-regionen av polypeptidet ikke-fukosylerte eller todelte, ikke-fukosylerte. Ved mer foretrukne utførelsesformer er minst 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70% eller 75% eller mer av oligosakkaridene ikke-fukosylerte eller todelte, ikke-fukosylerte.
[0034] Oppfinnelsen angår videre et polynukleotid som koder for hvilke som helst av ABM omtalt ovenfor, samt ekspresjonsvektorer og celler omfattende et slikt polynukleotid.
[0035] Oppfinnelsen angår videre en fremgangsmåte for fremstilling av et ABM som er i stand til å konkurrere med muse-B-Ly1 -antistoffet om binding til CD20, og hvor nevnte ABM er kimærisk; hvilken fremgangsmåte omfatter: (a) dyrking av en vertscelle omfattende et polynukleotid som koder for et ABM ifølge foreliggende oppfinnelse i et medium under betingelser som muliggjør ekspresjon av polynukleotidet som koder for dette ABM; og (b) gjenvinning av dette ABM fra den resulterende kultur.
[0036] Ved et annet aspekt angår oppfinnelsen et farmasøytisk preparat omfattende ABM ifølge oppfinnelsen. Det er påtenkt at det farmasøytiske preparat videre kan omfatte en farmasøytisk akseptabel bærer, en adjuvans eller en kombinasjon derav.
[0037] Ved et ytterligere aspekt angår oppfinnelsen en fremgangsmåte for behandling av en sykdom som kan behandles med B-celle-uttømming.
Fremgangsmåten omfatter administrering av en terapeutisk effektiv mengde av ABM ifølge foreliggende oppfinnelse til et menneske som trenger det. Ved en foretrukket utførelsesform behandles sykdommen ved administrering av et ABM som er et kimærisk antistoff, eller et kimærisk fragment av et antistoff.
[0038] Ved enda et annet aspekt angår oppfinnelsen en vertscelle som er omarbeidet til å uttrykke minst én nukleinsyre som koder for et polypeptid med GnTI II -aktivitet i en mengde tilstrekkelig til å modifisere oligosakkaridene i Fcregionen dannet av vertscellen, hvor ABM er i stand til å konkurrere med muse-B-Ly1 -antistoffet med hensyn til binding til CD20, og hvor ABM er kimærisk. Ved én utførelsesform er polypeptidet med GnTI II -aktivitet et fusjonspolypeptid. Ved en annen utførelsesform er ABM dannet av vertscellen et antistoff eller et antistoff -fragment. Ved en ytterligere utførelsesform omfatter ABM en region ekvivalent med Fc-regionen av et humant IgG.
[0039] Oppfinnelsen er også rettet mot et isolert polynukleotid omfattende minst én komplementaritetesbestemmende region av muse-B-Ly1 -antistoffet, eller en variant eller avkortet form derav inneholdende minst de spesifisitetsbestemmende rester for den komplementaritetsbestemmende region, hvor det isolerte polynukleotid koder for et fusjonspolypeptid. Slike isolerte polynukleotider koder fortrinnsvis for et fusjonspolypeptid som er et antigenbindende molekyl. Ved én utførelsesform omfatter polynukleotidet tre komplementaritetsbestemmende regioner av muse-B-Ly1 -antistoffet, eller varianter eller avkortede former derav inneholdende minst de spesifisitets-bestemmende rester for hver av de tre komplementaritetsbestemmende regioner. Ved en annen utførelsesform koder polynukleotidet for hele den variable region av den lette eller tunge kjede av et kimærisk (f.eks. humanisert) antistoff. Oppfinnelsen er videre rettet mot
<: >polypeptidene som kodes for av slike polynukleotider.
[0040] Ved en annen utførelsesform er oppfinnelsen rettet mot et antigenkombinerende molekyl omfattende minst én komplementaritetsbestemmende region av muse-B-Ly1 -antistoffet, eller en variant- eller avkortet form derav inneholdende minst de spesifisitetsbestemmende rester for den komplementaritetsbestemmende region, og omfattende en sekvens som stammer fra et heterologt polypeptid. Ved én utførelsesform omfatter det antigenbindende molekyl tre komplementaritetsbestemmende regioner av muse-B-Ly1 -antistoffet, eller varianter eller avkortede former derav inneholdende minst de spesifisitetsbestemmende rester for hver av de tre komplementaritetsbestemmende regioner. Ved et annet aspekt omfatter det antigenbindende molekyl den variable region av en lett eller tung antistoff kjede. Ved én spesielt anvendelig utførelsesform er det antigenbindende molekyl et kimærisk, f.eks. humanisert, antistoff. Oppfinnelsen er også rettet mot fremgangsmåter for frembringelse av slike antigenbindende molekyler, og anvendelse av disse ved behandling av sykdom, innbefattende B-celle-lymfomef.
[0041] Foreliggende oppfinnelse er det første kjente tilfelle hvor et type II-anti-CD20-antistoff er blitt omarbeidet til å ha økte effektorfunksjoner så som ADCC, mens det fremdeles bibeholder potent apoptoseevne. Foreliggende oppfinnelse er følgelig rettet mot et omarbeidet anti-CD20-antistoff type II med øket ADCC som resultat av denne omarbeidelse og uten tap av vesentlig evne til å indusere apoptose. Ved én utførelsesform er anti-CD20-antistoffene type II blitt omarbeidet til å ha forandret glykosyleringsmønster i Fc-regionen. Ved en spesiell utførelsesform omfatter den forandrede glykosylering et øket nivå av todelte komplekse rester i Fc-regionen. Ved en annen spesiell utførelsesform omfatter den forandrede glykosylering et redusert nivå av fukoserester i Fc-regionen. Ved en annen utførelsesform har anti-CD20-antistoffene type II gjennomgått polypeptidomarbeiding. Oppfinnelsen er videre rettet mot fremgangsmåter for fremstilling av slike omarbeidede type II -antistoffer, og fremgangsmåter for anvendelse av slike antistoffer ved behandling av forskjellige B-celle-forstyrrelser, innbefattende B-celle-lymfomer.
[0042] Vertscellen ifølge foreliggende oppfinnelse kan velges fra gruppen som innbefater, men som ikke er begrenset til, en CHO-celle, en BHK-celle, en NSO-celle, en SP2/0-celle, en YO-myelomcelle, en P3X63-musemyelomcelle, en PER-celle, en PER.C6-celle eller en hybridomcelle. Ved én utførelsesform omfatter vertscellen ifølge oppfinnelsen videre et transfektert polynukleotid omfatende et polynukleotid som koder for VL-regionen av muse-B-Ly1 -antistoffet eller varianter derav og en sekvens som koder for en region ekvivalent til Fcregionen av et humant immunglobulin. Ved en annen utførelsesform omfatter vertscellen ifølge oppfinnelsen videre et transfektert polynukleotid omfattende et polynukleotid som koder for Vn-regionen av muse-B-Ly1 -antistoffet eller varianter derav, og en sekvens som koder for en region ekvivalent til Fc-regionen av et humant immunglobulin.
[0043] Ved et ytterligere aspekt er oppfinnelsen rettet mot en vertscelle som danner et ABM som oppviser øket Fc-reseptorbindingsaffinitet og/eller øket effektorfunksjon som resultat av modifikasjonen av dets oligosakkarider. Ved én utførelsesform er den økte bindingsaffinitet til en Fc-reseptor, spesielt FcyRIIIA-reseptoren. Effektorfunksjonen som er påtenkt i det foreliggende, kan velges fra gruppen som innbefater, men som ikke er begrenset til, øket Fc-mediert cellulær cytotoksisitet; øket binding til NK-celler, øket binding til makrofager, øket binding til polymorfonukleære celler; øket binding til monocyter; øket direkte signalisering som induserer apoptose; øket dendritcelleutvikling; og øket T-celle-priming.
[0044] Ved en yterligere utførelsesform omfater vertscellen ifølge foreliggende oppfinnelse minst én nukleinsyre som koder for et polypeptid med GnTI I l-aktivitet, som er operabelt knytet til et konstitutivt promoterelement.
[0045] Ved et annet aspekt er oppfinnelsen retet mot en metode for frembringelse av et ABM i en vertscelle, omfatende: (a) dyrking av en vertscelle som er omarbeidet til å uttrykke minst et polynukleotid som koder for et fusjonspolypeptid med GnTII l-aktivitet, under betingelser som muliggjør frembringelse av nevnte ABM, og som muliggjør modifisering av oligosakkaridene som finnes på Fc-regionen av dette ABM; og (b) isolering av nevnte ABM; hvor nevnte ABM er i stand til å konkurrere med muse-B-Ly1 -antistoffet med hensyn til binding til CD20, og hvor nevnte ABM er kimærisk. Ved én utførelsesform er polypeptidet med GnTII l-aktivitet et fusjonspolypeptid, fortrinnsvis omfattende det katalytiske doméne av GnTI II og Golgi-lokalisasjonsdoménet av et heterologt Golgi-residerende polypeptid valgt fra gruppen bestående av lokalisasjonsdoménet av mannosidase II, lokalisasjonsdoménet av β(1 ,2)-N-acetylglukosaminyltransferase I (''GnTI'<1>), lokalisasjonsdoménet av mannosidase I, .. lokalisasjonsdoménet av β(1 ,2)-N-acetylglukosaminyltransferase II ("GnTII") og lokalisasjonsdoménet av a1 -6-kjeme-fukosyltransferase. Golgi-lokalisasjonsdoménet er fortrinnsvis fra mannosidase II eller GnTI.
[0046] Ved et ytterligere aspekt er oppfinnelsen rettet mot en fremgangsmåte for modifisering av glykosyleringsprofilen for et anti-CD20-ABM frembrakt av en vertscelle, omfattende innføring i vertscellen av minst én nukleinsyre eller ekspresjonsvektor ifølge oppfinnelsen. Ved én utførelsesform er ABM et antistoff eller et fragment derav; fortrinnsvis omfattende Fc-regionen av et IgG. Alternativt er polypeptidet et fusjonsprotein som innbefatter en region ekvivalent til Fc-regionen av et humant IgG.
[0047] Ved ett aspekt angår oppfinnelsen et rekombinant, kimærisk antistoff, eller et fragment derav, som kan konkurrere med muse-B-Ly1 -antistoffet med hensyn til binding til CD20, og med redusert fukosylering.
[0048] Ved et annet aspekt er foreliggende oppfinnelse rettet mot en fremgangsmåte for modifisering av glykosyleringen av det rekombinante antistoff eller et fragment derav ifølge oppfinnelsen ved anvendelse av et fusjonspolypeptid med GnTIII-aktivitet og omfattende Golgi-lokalisasjonsdoménet av et heterologt Golgi-residerende polypeptid. Ved én utførelsesform omfatter fusjonspolypeptidene ifølge oppfinnelsen det katalytiske doméne av GnTIII. Ved en annen utførelsesform er Golgi-lokalisasjonsdoménet valgt fra gruppen bestående av: lokalisasjonsdoménet av mannosidase II, lokalisasjonsdoménet av GnTI, lokalisasjonsdoménet av mannosidase I, lokalisasjonsdoménet av GnTII og lokalisasjonsdoménet av a1-6-kjeme-fukosyltransferase. Fortrinnsvis er Golgilokalisasjonsdoménet fra mannosidase II eller GnTI.
[0049] Ved én utførelsesform er fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen rettet mot frembringelse av et rekombinant, kimærisk antistoff eller et fragment derav, med modifiserte oligosakkarider hvor de modifiserte oligosakkarider har redusert fukosylering sammenliknet med ikke-modifiserte oligosakkarider. I henhold til foreliggende oppfinnelse kan disse modifiserte oligosakkarider være hybride eller komplekse. Ved en annen utførelsesform er fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen rettet mot frembringelse av et rekombinant, kimærisk antistoff eller et fragment derav med øket andel av todelte, ikke-fukosylerte oligosakkarider i Fc-regionen av polypeptidet. Ved én utførelsesform er de todelte, ikke-fukosylerte oligosakkarider hybride. Ved en annen utførelsesform er de todelte, ikke-fukosylerte oligosakkarider komplekse. Ved en ytterligere utførelsesform er fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen rettet mot frembringelse av et rekombinant, kimærisk antistoff eller et fragment derav hvor minst 20% av oligosakkaridene i Fc-regionen av nevnte polypeptid er todelte, ikke-fukosylerte. Ved en foretrukket utførelsesform er minst 30% av oligosakkaridene i Fc-regionen av polypeptidet todelte, ikkefukosylerte. Ved en annen foretrukket utførelsesform er minst 35% av oligosakkaridene i Fc-regionen av polypeptidet todelte, ikke-fukosylerte.
[0050] Ved et ytterligere aspekt er oppfinnelsen rettet mot et rekombinant, kimærisk antistoff eller et fragment derav, som oppviser øket Fc-reseptorbindingsaffinitet og/eller øket effektorfunksjon som resultat av modifikasjonen av dets oligosakkarider. Ved én utførelsesform er den økte bindiogsaffinitet til en Fcaktiverende reseptor. Ved en ytterligere utførelsesform er Fc-reseptoren Fcyaktiverende reseptor, spesielt FcyRllla-reseptoren. Effektorfunksjonen som er påtenkt i det foreliggende, kan være valgt fra gruppen som innbefatter, men som ikke er begrenset til, øket Fc-mediert cellulær cytotoksisitet; øket binding til NK-celler; øket binding til makrofager; øket binding til polymorfonukleære celler; øket binding til monocytter; øket direkte signalisering som induserer apoptose; øket dendrittcelleutvikling; og øket T-celle-priming.
[0051] Ved et annet aspekt er oppfinnelsen rettet mot et rekombinant, kimærisk antistoff-fragment, med bindingsspesifisitet som for muse-B-Ly1 -antistoffet og inneholdende Fc-regionen, som er omarbeidet til å ha øket effektorfunksjon frembrakt ved hvilken som helst av fremgangsmåtene ifølge foreliggende oppfinnelse.
[0052] Ved et annet aspekt er foreliggende oppfinnelse rettet mot et fusjonsprotein som innbefatter et polypeptid med sekvensen SEKV ID NR:1 og en region ekvivalent med Fc-regionen av et immunglobulin, og som er omarbeidet til å ha øket effektorfunksjon frembrakt ved hvilken som helst av fremgangsmåtene ifølge foreliggende oppfinnelse.
[0053] Ved et annet aspekt er foreliggende oppfinnelse rettet mot et fusjonsprotein som innbefatter et polypeptid med sekvensen SEKV ID NR: 2 og en region ekvivalent med Fc-regionen av et immunglobulin og omarbeidet til å ha øket effektorfunksjon frembrakt ved hvilken som helst av fremgangsmåtene ifølge foreliggende oppfinnelse.
[0054] . Ved ett aspekt er foreliggende oppfinnelse rettet mot et farmasøytisk preparat omfattende et rekombinant, kimærisk antistoff, frembrakt ved hjelp av hvilken som helst av fremgangsmåtene ifølge foreliggende oppfinnelse, og en farmasøytisk akseptabel bærer. Ved et annet aspekt er foreliggende oppfinnelse rettet mot et farmasøytisk preparat omfattende et rekombinant, kimærisk antistofffragment frembrakt ved hjelp av hvilken som helst av fremgangsmåtene ifølge foreliggende oppfinnelse, og en farmasøytisk akseptabel bærer. Ved et annet aspekt er foreliggende oppfinnelse rettet mot et farmasøytisk preparat omfattende et fusjonsprotein frembrakt ved hjelp av hvilken som helst av fremgangsmåtene ifølge foreliggende oppfinnelse, og en farmasøytisk akseptabel bærer.
[0055] Oppfinnelsen er videre rettet mot en fremgangsmåte for behandling av en sykdom som kan behandles ved B-celle-uttømming, omfattende administrering av en terapeutisk effektiv mengde av det rekombinante, kimæriske antistoff eller fragmentet derav, frembrakt ved hvilken som helst av fremgangsmåtene ifølge foreliggende oppfinnelse, til et menneske som trenger det.
Det vises nå til tegningene.
[0056] Fig 1. Nukleotid- (SEKV ID NR:3) og aminosyresekvens (SEKV ID NR:1) for VH-regionen av muse-B-Ly1.
[0057] Fig 2. Nukleotid- (SEKV ID NR:4) og aminosyresekvens (SEKV ID NR:2) for VL-regionen av muse-B-Ly1 .
[0058] Fig 3. Binding av Rituximab® (O) og ch-B-Ly1 (Δ) til CD20 på Raji B-lymfomceller.
[0059] Fig 4. B-celle-uttømming ved Rituximab® (O) og ch-B-Ly1 (Δ) i fullblod fra de tre forskjellige klasser av FcyRllla-158V/F-genotype: (A) fullblod fra en F/F-donor, homozygot med hensyn til lavereaffinitets-reseptoren; (B) fullblod fra en F/V-donor, heterozygot med hensyn til affinitetsreseptoren; og (C) fullblod fra en V/V-donor, homozygot med hensyn til høyereaffinitetsreseptoren.
[0060] Fig 5. Nukleotid- (SEKV ID NR:1 1) og aminosyresekvens (SEKV ID NR: 13) for den tunge kjede av et kimærisk, anti-CD20-antistoff.
[0061] Fig 6. Nukleotid- (SEKV ID NR:12) og aminosyresekvens (SEKV ID NR: 13) for den lette kjede av et kimærisk, anti-CD20-antistoff.
[0062] Fig 7. Nukleotid- og aminosyresekvenser for muse- B-Ly1 -antistoff-CDR: (A) Forutsette CDR for VH-regionen. (B) Forutsette CDR for VL-regionen.
[0063] Fig 8. MALDI-TOF-profil for et glyko-omarbeidet, kimaerisk B-Ly1-antistoff. (A) Tabell som detaljert viser prosentandelene av spesifikke topper; (B) Spektrum for glyko-omarbeidet kimaerisk B-Ly1 ; (C) Spektrum for glykoomarbeidet kimærisk B-Ly1 behandlet med Endo-H.
[0064] Fig 9. Binding av forskjellige humaniserte anti-CD20-antistoffer til Raji B-celler. Forskjellene mellom B-HH2-konstruksjonen og B-HL8- og B-HL1 1 -konstruksjonene befinner seg i rammeverk 1- og 2-regionene idet alle de tre CDR er identiske. FR1- og FR2-sekvensene i B-HL8 og B-HL11 stammer fra den humane VH3-klasse, mens det fullstendige B-HH2-rammeverk er humant VH1-avledet. B-HL1 1 er et derivat av B-HL8 med enkeltmutasjonen GlulGIn, hvor Gin er aminosyreresten i B-HH2-konstruksjonen. Dette betyr at Glul Gln-utskiftingen ikke forandringer bindingsaffiniteten eller -intensiteten. De andre forskjeller mellom B-HH2 og B-HL8 er 14 FR-rester, hvorav hvilke en eller flere vil innvirke på dette antistoffs antigenbindende oppførsel.
[0065] Fig. 10. Binding av det humaniserte anti-CD20-antistoff BHL4-KV1 på Raji-målceller. B-HL4-konstruksjonen fås fra B-HH2-antistoffet ved erstatting av FR1 i B-HH2 med FR1 fra den humane kimlinjesekvens VH1_45. Denne konstruksjon viser sterkt redusert antigenbindende evne, til tross for at den har forskjellige aminosyrer ved bare tre stillinger i FR1 . Disse rester befinner seg i stillingene 2, 14 og 30 ifølge Kabat-nummerering. Blant disse ser det ut til at stilling 30 er den mest innflytelsesrike stilling, siden den er en del av Chothiadefinisjonen av CDR1 .
[0066] Fig. 11 . Sammenlikning av bindingsoppførselen hos B-HH1 , B-HH2, B-HH3 og parentalantistoffet B-ly1 . Dataene viser at alle Ab viser en liknende ED50-verdi, men B-HH1 -konstruksjonen bindes med lavere intensitet/støkiometri enn variantene B-HH2 og B-HH3. B-HH1 kan skjelnes fra B-HH2 og B-HH3 ved sine delvis humane CDR1- og CDR2-regioner (Kabat-definisjon), samt Ala/Thrpolymorfismen i stilling 28 (Kabat-nummerering). Dette tyder på at enten stilling 28, den fullstendige CDR1 og/eller den fullstendige CDR2 er viktig for antistoff/antigen-interaksjon.
[0067] Fig. 12. Sammenlikning av B-HL1 , B-HH1 og B-ly1 -parentalantistoffet. Dataene viste fravær av en hver bindingsaktivitet i B-HL1-konstruksjonen, og omtrent halvdelen av bindingsintensiteten/støkiometrien for B-HH1 sammenliknet med B-ly1 . Både B-HL1 og B-HH1 er utformet basert på akseptor-rammeverk som stammer fra den humane VH1 -klasse. Blant andre forskjeller er stilling 71 (Kabat-nummerering) i B-HL1 -konstruksjonen en slående forskjell, noe som tyder på dens putative betydning for antigenbinding.
[0068] Fig. 13. Fluorcytometrisk analyse av kapasiteten hos anti-CD20-antistoffet overfor sitt antigen. Dataene viste at B-HL2- og B-HL3-konstruksjonene ikke viser CD20-bindingsaktivitet.
[0069] Fig. 14. Apoptose av anti-CD20-antistoffer på Z-138 MCL-celler.
[0070] Fig. 15. Apoptose ved anti-CD20-antistoffer. Analysedetaljer: 5 x 10<5 >celler pr. brønn ble utsådd i 24-brønnsplater (5 x 10<5 >celler pr. ml) i dyrkningsmedium. 10 mg av de respektive Ab, PBS for den negative kontroll eller 5 mM kamptotecin (CPT)-positive kontroll ble tilsatt i brønnene. Prøvene ble inkubert natten over (16 timer), merket med AnnV-FITC og analysert ved hjelp av FACS. Analyser ble utført in triplo (<*>): Signal for PBS alene subtrahert (PBS alene ga 8% og 2% AnnV+ for henholdsvis PR-1 - og Z-138-celler). Anvendte antistoffer var: C2B8 (kimæriske, ikke glyko-omarbeidede); BHH2-KV1 (humaniserte, ikke glyko-omarbeidede). Bemerk: denne analyse innbefatter ikke noen ytterligere effektorceller, bare målceller pluss antistoff eller kontroller.
[0071] Fig. 16. Målcelledreping ved anti-CD20-antistoffer med immuneffektorceller. Analysedetaljer: B-celle-uttømming i normalt fullblod inkubering natten over og analyse med henblikk på CD19+/CD3+ ved FACS. ADOC ved anvendelse av PBMC som effektorer, 4 timers inkubering, 25:1 effektor.mål-forhold, måldreping målt ved Calcein-retensjon i forhold til detergentlyse (100%) og lyse uten Ab (0%). Anvendte antistoffer: C2B8 (kimærisk, ikke glyko-omarbeidet form); BHH2-KV1 -wt (humanisert, ikke glyko-omarbeidet form av BHH2-KV1); BHH2:KV1-GE (humanisert, glyko-omarbeidet form av BHH2-KV1).
[0072] Fig. 17. MALDI/TOF-MS-profil av PNGaseF-frigjorte Fcoligosakkarider av ikke-modifisert, ikke glyko-omarbeidet BHH2-KV1 humanisert lgG1 B-ly1 antihumant CD20-antistoff.
[0073] Fig. 18. MALDI/TOF-MS-profil av PNGaseF-frigjorte Fcoligosakkarider av glyko-omarbeidet BHH2-KV1 g1 humanisert lgG1 B-ly1 antihumant CD20-antistoff . Glyko-omarbeiding utført ved koekspresjon i vertsceller av antistoffgener og gen som koder for enzym med β-1 ,4-N-acetylglukosaminyltransferase III (GnT-lll)-katalytisk aktivitet.
[0074] Fig. 19. MALDI/TOF-MS-profil av PNGaseF-frigjorte Fcoligosakkarider av glyko-omarbeidet BHH2-KV1g2 humanisert lgG1 B-ly1 antihumant CD20-antistoff. Glyko-omarbeiding utført ved koekspresjon i vertsceller av antistoffgener og gen som koder for enzym med β-1 ,4-N-acetylglukosaminyltransferase III (GnT-lll)-katalytisk aktivitet og koder for enzym med Golgi α-mannosidase ll-katalytisk aktivitet.
[0075] Fig. 20. Binding av ikke glyko-omarbeidede og glyko-omarbeidede antistoffer til human FcgammaRllla-reseptor som viser seg på overflaten av rekombinante CHO-CD16-celler.
[0076] Fig. 21 . Apoptose av ikke-Fc-omarbeidede og Fc-omarbeidede anti-CD20-antistoffer på Z-138 MCL-celler. Analysedetaljer: 5 x 10<5 >celler pr. brønn ble utsådd i 24 brønns plater (5 x 10<5 >celler pr. ml) i dyrkningsmedium. 10 mg av det respektive Ab, PBS for den negative kontroll ble tilsatt i brønnene. Prøvene ble inkubert natten over (16 timer), merket med AnnV-FITC og analysert ved hjelp av FACS. Analyse ble utført in triplo. Ab anvendt: C2B8 = rituximab (kimærisk, ikke glyko-omarbeidet form, samme som kommersiell form); BHH2-KV1 (humanisert, ikke glyko-omarbeidet - se fig. 6 for glykosyleringsprofil); BHH2-KV1g1 (humanisert, glyko-omarbeidet - se fig. 7 for glykosyleringsprofil; BHH2-KV1g2 (humanisert, glyko-omarbeidet - se fig. 8 med hensyn til glykosyleringsprofil). Bemerk: denne analyse innbefatter ikke noen ytterligere effektorceller, kun målceller pluss antistoff eller kontroller. (<*>): Signal for PBS alene subtrahert.
[0077] Betegnelser er anvendt her i dokumentet slik de vanligvis anvendes på området, dersom ikke annet er definert, som følger.
[0078] Anvendt her i dokumentet er betegnelsen antistoff ment å innbefatte hele antistoffmolekyler, innbefattende monoklonale, polyklonale og multispesifikke (f.eks. bispesifikke) antistoffer, samt antistoff-fragmenter med Fc-regionen og som bibeholder bindingsspesifisitet, og fusjonsproteiner som innbefatter en region ekvivalent med Fc-regionen av et immunglobulin og som bibeholder bindingsspesifisitet. Humaniserte, primatiserte og kimæriske antistoffer er også innbefattet.
[0079] Anvendt her i dokumentet er betegnelsen Fc-region ment å angi en C-terminal region av en IgG-tungkjede. Skjønt grensene for Fc-regionen av en IgG-tungkjede kan variere litt, er den humane IgG-tungkjede-Fc-region vanligvis <' >definert som å strekke seg fra aminosyreresten i stilling Cys226 til den karboksylterminale ende.
[0080] Anvendt her i dokumentet er betegnelsen region ekvivalent med Fcregionen av et immunglobulin ment å innbefatte naturlig forekommende allele varianter av Fc-regionen av et immunglobulin samt varianter med forandringer som frembringer substitusjoner, addisjoner eller delesjoner, men som ikke i noen vesentlig grad reduserer immunglobulinets evne til å mediere effektorfunksjoner (så som antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet). For eksempel kan én eller flere aminosyrer utelukkes fra den N-terminale eller C-terminale ende av Fc-regionen av et immunglobulin uten vesentlig tap av biologisk funksjon. Slike varianter kan velges i henhold til generelle regler kjent på området, for å ha minimal effekt på aktiviteten. (Se f.eks. Bowie, J.U. et al., Science 247:1306-10 (1990).
[0081] Anvendt her i dokumentet angir betegnelsen antigenbindende molekyl i sin videste betydning et molekyl som spesifikt binder en antigen determinant. Mer spesifikt er et antigenbindende molekyl som binder CD20, et molekyl som spesifikt bindes til et ikke-glykosylert celleoverflate-fosfoprotein på 35 000 dalton, typisk betegnet som det humane B-lymfocytt-begrensede differensieringsantigen Bp35, vanligvis omtalt som CD20. Med "spesifikt binder" menes at bindingen er selektiv for antigenet og kan skjelnes fra uønskede eller ikke-spesifikke interaksjoner.
[0082] Anvendt her i dokumentet angir betegnelsene fusjon og kimærisk, anvendt med henvisning til polypeptider så som ABM, polypeptider omfattende aminosyresekvenser som stammer fra to eller flere heterologe polypeptider, så som deler av antistoffer fra forskjellige arter. Når det for eksempel gjelder kimæriske ABM, kan de ikke-antigenbindende komponenter stamme fra mange forskjellige arter, innbefattende primater så som sjimpanser og mennesker. Den konstante region av det kimæriske ABM er mest foretrukket hovedsakelig identisk med den konstante region av et naturlig humant antistoff; den variable region av det kimæriske antistoff er mest foretrukket hovedsakelig identisk med den variable region av et rekombinant anti-CD20-antistoff med aminosyresekvens som hos den variable muse-B-Ly1 -region. Humaniserte antistoffer er en spesielt foretrukket form av fusjons- eller kimærisk antistoff.
[0083] Anvendt her i dokumentet angir et polypeptid med "GnTIII-aktivitet" polypeptider som kan katalysere addisjonen av en N-acetylglykosamin- (GlcNAc-) rest i β-1 -4-binding til det β-bundne mannosid i trimannosylkjernen av N-bundne oligosakkarider. Dette innbefatter fusjonspolypeptider som oppviser enzymatisk aktivitet i likhet med, men ikke nødvendigvis identisk med, aktiviteten av β(1 ,4)-N-acetylglukosaminyltransferase III, også kjent som β-1 ,4-ιτΐ3ηηο5ν^^ορΓθΙβϊη 4-beta-N-acdetylglukosaminyl-transferase (EC 2.4.1 .144), i henhold til Nomenclature Committee of the International Union of Biochemistry and Molecular Biology (NC-IUBMB) målt i en spesiell biologisk analyse, med eller uten doseavhengighet. I det tilfelle hvor doseavhengighet finnes, behøver det ikke være identisk med doseavhengigheten hos GnTIII, men heller hovedsakelig lik doseavhengigheten i en gitt aktivitet sammenliknet med GnTIII (dvs. at kandidatpolypeptidet vil oppvise større aktivitet eller ikke mer enn ca. 25 ganger mindre, og fortrinnsvis ikke mer enn ca. ti ganger mindre aktivitet, og mest foretrukket ikke mer enn ca. tre ganger mindre aktivitet i forhold til GnTIII).
[0084] Anvendt her i dokumentet angir betegnelsen variant (eller analog ) et polypeptid som er forskjellig fra et spesifikt angitt polypeptid ifølge oppfinnelsen ved aminosyreinnsettinger, -delesjoner og -substitusjoner, frembrakt ved anvendelse av f.eks. rekombinante DNA-teknikker. Varianter av ABM ifølge foreliggende oppfinnelse innbefatter kimæriske, primatiserte eller humaniserte antigenbindende molekyler hvor én eller flere av aminosyrerestene er modifisert ved substitusjon, addisjon og/eller delesjon på en slik måte at det ikke i noen vesentlig grad påvirker antigen- (f.eks. CD20-) bindende affinitet. Rettledning med hensyn til bestemmelse av hvilken aminosyrerest som kan erstattes, adderes eller utelukkes uten at aktuelle aktiviteter oppheves, kan finnes ved sammenlikning av sekvensen for det spesielle polypeptid med sekvensen for homologe peptider, og minimalisering av antallet aminosyresekvensforandringer utført i regioner med høy homologi (konserverte regioner), eller ved erstatting av aminosyrer med konsensussekvens.
[0085] Alternativt kan rekombinante varianter som koder for disse samme eller liknende polypeptider, syntetiseres eller utvelges ved at det gjøres bruk av "overflødigheten" i den genetiske kode. Forskjellige kodonsubstitusjoner, så som de stumme forandringer som frembringer forskjellige restriksjonsseter, kan innføres for optimalisering av kloning i et plasmid eller en virusvektor, eller ekspresjon i et spesielt prokaryot eller eukaryot system. Mutasjoner i polynukleotidsekvensen kan gjenspeiles i polypeptidet eller doménene av andre peptider som er tilføyd til polypeptidet, for modifisering av egenskapene hos hvilken som helst del av polypeptidet, under forandring av karakteregenskaper så som ligandbindende affiniteter, interkjedeaffiniteter eller nedbrytnings/tumoverhastighet.
[0086] Aminosyre-"substitusjoner" er fortrinnsvis et resultat av erstatting av én aminosyre med en annen aminosyre med liknende strukturelle og/eller kjemiske egenskaper, dvs. konserverende aminosyre-erstatninger.
"Konserverende" aminosyresubstitusjoner kan gjøres på basis av likhet med hensyn til polaritet, ladning, løselighet, hydrofobitet, hydrofilitet og/eller den amfipatiske beskaffenhet av de rester som inngår. For eksempel innbefatter ikkepolare (hydrofobe) aminosyrer alanin, leucin, isoleucin, valin, prolin, fenylalanin, tryptofan og metionin; polare nøytrale aminosyrer innbefatter glycin, serin, treonin, cystein, tyrosin, asparagin og glutamin; positivt ladde (basiske) aminosyrer innbefatter arginin, lysin og histidin; og negativt ladde (sure) aminosyrer innbefatter asparaginsyre og glutaminsyre. "Innsettinger" eller "utelukkelser" er fortrinnsvis i området ca. 1 -20 aminosyrer, mer foretrukket 1-10 aminosyrer. Den tillatte variasjon kan bestemmes eksperimentelt ved at det systematisk foretas innsettinger, utelukkelser eller substitusjoner av aminosyrer i et polypeptidmolekyl ved anvendelse av rekombinante DNA-teknikker og analysering av de resulterende rekombinante varianter med henblikk på aktivitet.
[0087] Anvendt her i dokumentet er betegnelsen humanisert anvendt for henvisning til et antigenbindende molekyl som stammer fra et ikke-humant antigenbindende molekyl, for eksempel et museantistoff, som bibeholder eller i det vesentlige bibeholder de antigenbindende egenskaper hos opphavsmolekylet, men som er mindre immunogent i mennesker. Dette kan oppnås ved forskjellige metoder innbefattende (a) poding av hele de ikke-humane variable doméner på humane konstante regioner under frembringelse av kimæriske antistoffer, (b) poding av bare de ikke-humane CDR på humane rammeverk- og konstante regioner med eller uten tilbakeholdelse av kritiske rammeverkrester (f.eks. slike som er viktige for bibeholdelse av gode antigenbindende affinitets- eller antistoff-funksjoner), eller (c) transplantering av hele de ikke-humane variable doméner, men "tilsløring" av dem med en humanliknende del ved erstatting av overflaterester. Slike metoder er beskrevet i Jones et al., Morrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 81 :6851-6855 (1984); Morrison og Oi, Adv. Immunol., 44:65-92 (1988); Verhoeyen et al., Science, 239:1534-1536 (1988); Padlan, Molec. Immun., 28:489-498 (1991); Padlan, Molec. Immun., 31 (3):169-217 (1994), som alle i sin helhet er medtatt her i dokumentet som referanse. Det er generelt 3 komplementaritetsbestemmende regioner, eller CDR, (CDR1 , CDR2 og CDR3) i hver av de variable tung- og lettkjededoméner av et antistoff, som er flankert av fire rammeverk-subregioner (dvs. FR1 , FR2, FR3 og FR4) i hver av de variable tung- og lettkjededoméner av et antistoff: FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4. En omtale av humaniserte antistoffer kan blant annet finnes i US-patent nr. 6 632 927, og i publisert US-patentsøknad nr.
2003/0175269, som begge i sin helhet er medtatt her i dokumentet som referanse.
[0088] Anvendt her i dokumentet er likeledes betegnelsen primatisert anvendt for henvisning til et antigenbindende molekyl som stammer fra et antigenbindende ikke-primat-molekyl, for eksempel et museantistoff, som bibeholder eller i det vesentlige bibeholder de antigenbindende egenskaper hos opphavsmolekylet, men som er mindre immunogent i primater.
[0089] I det tilfelle hvor det er to eller flere definisjoner av en betegnelse som anvendes og/eller er akseptert på området, er definisjonen av betegnelsen anvendt her i dokumentet ment å innbefatte alle slike betydninger dersom ikke det motsatte er uttrykkelig angitt. Et spesifikt eksempel er bruken av betegnelsen "komplementaritetsbestemmende region" ("CDR") til beskrivelse av de ikke på hverandre følgende antigenkombinerende seter som finnes i den variable region av både tung- og lettkjede-polypeptider. Denne spesielle region er beskrevet av Kabat et al., U.S. Dept. of Health og Human Services, "Sequences of Proteins of Immunological Interest" (1983) og av Chothia et al., J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987), som er medtatt her i dokumentet som referanse, hvor definisjonene innbefatter overlappende eller subsett av aminosyrerester sammenliknet med hverandre. Ikke desto mindre er anvendelse av én av definisjonene til å omtale en CDR av et antistoff eller varianter derav ment å være innenfor rammen for betegnelsen som definert og anvendt her i dokumentet. De passende aminosyrerester som omfatter CDR som definert ved hver av de ovenfor angitte referanser, er angitt nedenfor i tabell I som sammenlikning. De nøyaktige restnumre som omfatter en bestemt CDR, vil variere avhengig av sekvensen og størrelsen av CDR. Fagfolk på området kan rutinemessig bestemme hvilke rester som omfatter en bestemt CDR på bakgrunn av aminosyresekvensen for den variable region av antistoffet.
TABELL 1. CDR-definisjoner<1>
^Nummerering av alle CDR-definisjoner i tabell 1 i henhold til nummereringskonvensjonene angitt av Kabat et al. (se nedenfor).
[0090] Kabat et al. definerte også et nummereringssystem for sekvenser av variable doméner, som er anvendelig for hvilket som helst antistoff. En vanlig fagperson på området kan utvetydig tilordne dette system med "Kabatnummerering<11 >til hvilken som helst sekvens for variabelt doméne, uten å basere seg på noen forsøksdata ut over selve sekvensen. Avnendt her i dokumentet angir "Kabat-nummerering" nummereringssystemet angitt av Kabat et al., U.S. Dept. of Health and Human Services, "Sequence of Proteins of Immunological Interest" (1983). Dersom ikke annet er spesifisert, er henvisninger til nummereringen av spesifikke aminosyrereststillinger i et ABM i henhold til Kabatnummereringssystemet. Sekvensene i sekvenslisten (dvs. SEKV ID NR: 1 til SEKV ID NR: 78) er ikke nummerert i henhold til Kabat-nummereringssystemet.
[0091] Med en nukleinsyre eller et polynukleotid med en nukleotidsekvens som er for eksempel minst 95% "identisk" med en referanse-nukleotidsekvens ifølge foreliggende oppfinnelse menes at nukleotidsekvensen i polynukleotidet er identisk med referansesekvensen, bortsett fra at polynukleotidsekvensen kan innbefatte opp til fem punktmutasjoner pr. 100 nukleotider i referansenukleotidsekvensen. Med andre ord kan opp til 5% av nukleotidene i referansesekvensen utelukkes eller substitueres med et annet nukleotid for oppnåelse av et polynukleotid med en nukleotidsekvens som er minst 95% identisk med en referanse-nukleotidsekvens, eller et antall nukleotider på opp til 5% av den totale mengde nukleotider i referansesekvensen kan innføres i referansesekvensen. Søkesekvensen kan være hele sekvensen vist enten på fig.
24 eller fig. 25.
[0092] I praksis kan det bestemmes om hvorvidt hvilket som helst spesielt nukleinsyremolekyl eller polypeptid er minst 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% eller 99% identisk med en nukleotidsekvens eller polypeptid-sekvens ifølge foreliggende oppfinnelse, på konvensjonell måte ved anvendelse av kjente datamaskinprogrammer. En foretrukket metode for bestemmelse av den beste totale samstemmighet mellom en søkesekvens (en sekvens ifølge foreliggende oppfinnelse) og en aktuell sekvens, også omtalt som en global sekvensinnretting, kan bestemmes ved anvendelse av FASTDB-datamaskin-programmet basert på algoritmen ifølge Brutlag et al., Comp. App. Biosci. 6:237-245 (1990). I en sekvensoppstilling er både søkesekvensen og de aktuelle sekvenser DNA-sekvenser. En RNA-sekvens kan sammenliknes ved omdannelse av U til T.
Resultatet av den globale sekvensoppstilling er prosent identitet. Foretrukne parametere anvendt i en FASTDB-oppstilling av DNA-sekvenser for beregning av prosent identitet er: Matriks=Enhetlig, k-tuppel=4, Mismatch-fradrag (-"penalty")=1 , Kombinasjons-("joining")-fradrag=30, Randomiseringsgruppelengde=0, Forkortnings-fcut off")-poeng=1 , Mellomromsfradrag=5, Mellomromsstørrelse-fradrag 0,05, Vindusstørrelse=500 eller lengden av den aktuelle nukleotidsekvens, avhengig av hvilken som er den korteste.
[0093] Hvis den aktuelle sekvens er kortere enn søkesekvensen på grunn av 5<1>- eller 3'-delesjoner, ikke på grunn av indre delesjoner, må det utføres en manuell korrigering av resultatene. Dette er på grunn av at FASTDB-programmet ikke svarer for 5'- og 3'-avkortninger av den aktuelle sekvens ved beregning av prosent identitet. Når det gjelder aktuelle sekvenser som er avkortet i 5'- eller 3'-endene, i forhold til søkesekvensen, korrigeres prosent identitet ved beregning av antallet baser i søkesekvensen som er 5' og 3' i forhold til den aktuelle sekvens, som ikke er samsvarige/innrettet på linje, som prosent av de totale baser i søkesekvensen. Om et nukleotid er samsvarig/innrettet bestemmes ved resultatene av FASTDB-sekvensinnrettingen. Denne prosentandel blir så trukket fra prosent identitet, beregnet ved ovennevnte FASTDB-program ved anvendelse av de spesifiserte parametere, under opppnåelse av et endelig prosent identitetspoengtall. Dette korrigerte poengtall er det som anvendes for foreliggende oppfinnelses formål. Bare baser utenfor 5'- og 3'-basene i den aktuelle sekvens, vist ved FASTDB-innrettingen, som ikke er samsvarige/innrettet med søkesekvensen, beregnes for det formål å justere prosent identitetspoeng manuelt.
[0094] For eksempel blir en aktuell sekvens på 90 baser innrettet med en 100 basers søkesekvens for bestemmelse av prosent identitet. Delesjonene finnes i 5'-enden av den aktuelle sekvens, og derfor viser ikke FASTDB-innrettingen samsvar/innretting av de første 10 baser i 5'-enden. De 10 uparede baser representerer 10% av sekvensen (antall baser i 5'- og 3'-endene som ikke samsvarer/totalt antall baser i søkesekvensen) slik at 10% trekkes fra prosent identitet-poengtallet beregnet ved FASTDB-programmet. Hvis de gjenværende 90 baser var fullkomment tilpasset, ville den endelige prosent identitet være 90%. I et annet eksempel sammenliknes en 90 basers aktuell sekvens med en 100 basers søkesekvens. Denne gang er delesjonene indre delesjoner slik at det ikke er noen baser på 5' eller 3' av den aktuelle sekvens som ikke er tilpasset/innrettet med søkesekvensen. I dette tilfelle blir ikke prosent identitet beregnet ved FASTDB manuelt korrigert. Enda en gang blir bare baser 5‘ og 3' i den aktuelle sekvens som ikke er tilpasset/innrettet med søkesekvensen, korrigert manuelt. Ingen andre manuelle korrigeringer gjøres for foreliggende oppfinnelses formål.
[0095] Med et polypeptid med en aminosyresekvens som for eksempel er minst 95% "identisk" med en søke-aminosyresekvens ifølge foreliggende oppfinnelse, er det ment at aminosyresekvensen i det aktuelle polypeptid er identisk med søkesekvensen, bortsett fra at den aktuelle polypeptidsekvens kan innbefatte opp til fem aminosyreforandringer pr. 100 aminosyrer i søkeaminosyresekvensen. For oppnåelse av et polypeptid med en aminosyresekvens som er minst 95% identisk med en søke-aminosyresekvens kan, med andre ord, opp til 5% av aminosyrerestene i den aktuelle sekvens innsettes, utelukkes eller erstattes med en annen aminosyre. Disse forandringer av referansesekvensen kan skje i de amino- eller karboksyterminale stillinger av referanse-aminosyresekvensen eller hvor som helst mellom disse terminale stillinger, spredt enten individuelt blant rester i referansesekvensen, eller i én eller flere på hverandre følgende grupper i referansesekvensen.
[0096] I praksis kan det bestemmes om hvorvidt hvilket som helst bestemt polypeptid er minst 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% eller 99% identisk med et referanse-polypeptid, konvensjonelt ved anvendelse av kjente datamaskinprogrammer. En foretrukket metode for bestemmelse av det beste totale samsvar mellom en søkesekvens (en sekvens ifølge foreliggende oppfinnelse) og en aktuell sekvens, også omtalt som en global sekvensinnretting, kan bestemmes ved anvendelse av FASTDB-datamaskinprogrammet basert på algoritmen ifølge Brutlag et al., Comp. App. Biosci. 6:237-245 (1990). Ved en sekvensinnretting er både søkesekvensen og den aktuelle sekvens enten nukleotidsekvenser eller aminosyresekvenser. Resultatet av den globale sekvensinnretting er prosent identitet. Foretrukne parametere anvendt i en FASTDB-aminosyreinnretting er: Matriks=PAM 0, k-tuppel=2, Umake-fradrag = 1 , Kombinasjonsfradrag=20, Randomiserings-gruppelengde=0, Forkortningspoeng=1 , Vindusstørrelse= sekvenslengde, Mellomromsfradrag=5, Mellomromsstørrelse-fradrag 0,05, Vindusstørrelse=500 eller lengden av den aktuelle aminosyre, avhengig av hvilken som er den korteste.
[0097] Hvis den aktuelle sekvens er kortere enn søkesekvensen på grunn av N- eller C-terminale delesjoner, ikke på grunn av indre delesjoner, må det foretas en manuell korrigering av resultatene. Dette er på grunn av av FASTDB-programmet ikke gjør rede for N- og C-terminale avkortninger av den aktuelle sekvens ved beregning av global prosent identitet. Når det gjelder aktuelle sekvenser som er avkortet ved den N- og C-terminale ende, i forhold til søkesekvensen, blir prosent identitet korrigert ved beregning av antallet rester i søkesekvensen som er N- og C-terminale i forhold til den aktuelle sekvens, som ikke er samsvarige/inn rettet med en tilsvarende aktuell rest, som prosent av de totale baser i søkesekvensen. Om en rest er samsvarig/innrettet bestemmes ved resultatene av FASTDB-sekvensinnrettingen. Denne prosentandel blir så trukket fra prosent identitet, beregnet ved ovennevnte FASTDB-program under anvendelse av de spesifiserte parametere, under oppnåelse av en endelig prosent identitetspoengverdi. Denne endelige prosent identitetspoengverdi er det som anvendes for foreliggende oppfinnelses formål. Bare rester til de N- og C-temninale ender av den aktuelle sekvens, som ikke er samsvarige/innrettet med søkesekvensen, tas i betraktning for manuell justering av prosent identitetspoengverdi. Det vil si bare søke-reststillingen utenfor de fjerneste N- og C-terminale rester i den aktuelle sekvens.
[0098] For eksempel blir en 90 aminosyreresters aktuell sekvens innrettet på linje med en 100 resters søkesekvens for bestemmelse av prosent identitet.
Delesjonen finner sted i den N-terminale ende av den aktuelle sekvens, og derfor viser ikke FASTDB-innrettningen et samsvar/innretting av de første 10 rester i den N-terminale ende. De 10 uparede rester representerer 10% av sekvensen (antall rester i den N- og C-terminale ende som ikke er samsvarige/totalt antall rester i søkesekvensen) slik at 10% trekkes fra prosent identitet-poengverdien beregnet ved FASTDB-programmet. Hvis de gjenværende 90 rester var fullkomment samstemmige, ville den endelige prosent identitet være 90%. Ved et annet eksempel sammenliknes en 90 resters aktuell sekvens med en 100 resters søkesekvens. Denne gang er delesjonene indre delesjoner slik at det ikke er noen rester i den N- eller C-terminale ende av den aktuelle sekvens som ikke er samsvarige/innrettet med søkesekvensen. I dette tilfelle blir prosent identitet beregnet ved FASTDB ikke manuelt korrigert. Enda en gang blir bare reststillinger utenfor de N- og C-terminale ender av den aktuelle sekvens, vist i FASTDB-innrettingen, som ikke er samsvarige/innrettet med søkesekvensen, manuelt korrigert for. Ingen andre manuelle korrigeringer skal gjøres for foreliggende oppfinnelses formål.
[0099] Anvendt her i dokumentet angir en nukleinsyre som " hybridiserer under stringente betingelset' til en nukleinsyresekvens ifølge oppfinnelsen, et polynukleotid som hybridiserer i en inkubering natten over ved 42°C i en løsning omfattende 50% formamid, 5 x SSC (750 mM NaCI, 75 mM natriumcitrat), 50 mM natriumfosfat (pH 7,6), 5x Denhardts løsning, 10% dekstransulfat og 20 μg/ml denaturert, kuttet ("sheared") laksespermie-DNA, fulgt av vasking av filtrene i 0,1 x SSC ved ca. 65°C.
[0100] Anvendt her i dokumentet angir betegnelsen Golgi-lokalisasjonsdomene aminosyresekvensen i et Golgi-residerende polypeptid som er ansvarlig for forankring av polypeptidet på lokasjonen i Golgi-komplekset. Lokalisasjonsdoméner omfatter generelt aminoterminale "haler" av et enzym.
[0101] Anvendt her i dokumentet angir betegnelsen effektorfunksjon de biologiske aktiviteter som kan tilskrives Fc-regionen (en nativ sekvens-Fc-region eller aminosyresekvens-variant-Fc-region) av et antistoff. Eksempler på antistoffeffektorfunksjoner innbefatter, men er ikke begrenset til, Fc-reseptorbindingsaffinitet, antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet (ADCC), antistoffavhengig cellulær fagocytose (ADCP), cytokinutskillelse, immun-kompleksmediert antigenopptak ved antigenpresenterende celler, nedregulering av
celleoverflatereseptorer, osv.
[0102] Anvendt her i dokumentet betraktes betegnelsene omarbeide, omarbeidet, omarbeiding og glykosyleringsomarbeiding som å innbefatte en hver manipulering av glykosyleringsmønsteret for et naturlig forekommende eller . rekombinant polypeptid eller fragment derav. Glykosyleringsomarbeiding innbefatter metabolsk omarbeiding av en celles glykosyleringsmaskineri, innbefattende genetiske manipuleringer av oligosakkarid-synteseveiene under oppnåelse av forandret glykosylering av glykoproteiner som uttrykkes i celler. Videre innbefatter glykosyleringsomarbeiding virkningene av mutasjoner og cellemiljøet på glykosyleringen.
[0103] Anvendt her i dokumentet dekker betegnelsen vertscelle hver cellesystemtype som kan omarbeides til å frembringe polypeptidene og de antigenbindende molekyler ifølge foreliggende oppfinnelse. Ved én utførelsesform blir vertscellen omarbeidet til å muliggjøre dannelse av et antigenbindende molekyl med modifiserte glykoformer. Ved en foretrukket utførelsesform er det antigenbindende molekyl et antistoff, antistoff-fragment eller fusjonsprotein. Ved visse utførelsesformer er vertscellene blitt ytterligere manipulert til å uttrykke økte nivåer av ett eller flere polypeptider med GnTIII-aktivitet. Vertsceller innbefatter dyrkede celler, f.eks. dyrkede pattedyrceller, så som CHO-celler, BHK-celler, NSO-celler, SP2/0-celler, YO-myelomceller, P3X63-musemyelomceller, PER-celler, PER.C6-celler eller hybridomceller, gjærceller, insektceller og planteceller, for bare å nevne noen få, men også celler som finnes i et transgent dyr, en transgen plante eller et dyrket plante- eller dyrevev.
[0104] Anvendt her i dokumentet innbefatter betegnelsen Fc-mediert cellulær cytotoksisitet antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet og cellulær cytotoksisitet mediert ved et løselig Fc-fusjonsprotein inneholdende en human Fcregion. Det er en immunmekanisme som fører til lyse av "antistoff-målsøkte celler" ved "humane immuneffektorceller", hvor:
[0105] De humane immuneffektorceller er en populasjon av leukocytter som viser Fc-reseptorer på sin overflate gjennom hvilke de bindes til Fc-regionen av antistoffer eller av Fc-fusjonsproteiner, og utfører effektorfunksjoner. En slik populasjon kan innbefatte, men er ikke begrenset til, mononukleære celler fra perifert blod (PBMC) og/eller naturlige dreper-(NK-) celler.
[0106] De antistoff-målsøkte celler er celler som er bundet av antistoffene eller Fc-fusjonsproteinene. Antistoffene eller Fc-fusjonsproteinene bindes til målceller via proteindelen som er N-terminal i forhold til Fc-regionen.
[0107] Anvendt her i dokumentet er betegnelsen øket Fc-mediert cellulær cytotoksisitet definert som enten en økning i antallet "antistoff-målsøkte celler" som lyseres innen en gitt tid, ved en gitt konsentrasjon av antistoff eller av Fcprotein, i mediet som omgir målcellene, ved mekanismen for Fc-mediert cellulær cytotoksisitet definert ovenfor, og/eller en reduksjon i konsentrasjonen av antistoff, eller av Fc-fusjonsprotein, i mediet som omgir målcellene, som trenges for oppnåelse av lyse av et gitt antall "antistoff-målsøkte celler" i et gitt tidsrom, ved mekanismene for Fc-mediert cellulær cytotoksisitet. Økningen i Fc-mediert cellulær cytotoksisitet er i forhold til den cellulære cytotoksisitet som medieres ved det samme antistoff eller Fc-fusjonsprotein, frembrakt ved den samme type vertsceller, under anvendelse av de samme standardfrembringelses-, -rense-, -formulerings- og -lagringsmetoder, som er kjent for fagfolk på området, men som ikke er blitt frembrakt av vertsceller som er omarbeidet til å uttrykke glykosyltransferasen GnTIII ved metodene beskrevet her i dokumentet.
[01 08] Med antistoff med øket antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet (ADCC) menes et antistoff, slik denne betegnelse er definert her i dokumentet, med øket ADCC ifølge bestemmelse ved hvilken som helst egnet metode kjent for vanlige fagfolk på området. Én akseptert in vitro-ADCC-analyse er som følger:
1 ) analysen anvender målceller som er kjent for å uttrykke målantigenet som gjenkjennes av den antigenbindende region av antistoffet;
2) analysen anvender humane mononukleære celler fra perifert blod (PBMC), isolert fra blod fra vilkårlig valgt frisk donor, som effektorceller;
3) analysen utføres i henhold til følgende protokoll:
i) PBMC isoleres under anvendelse av standard-densitetssentrifugeringsmetoder og oppslemmes med 5 x 10<6 >celler pr. ml i RPMI-celledyrkningsmedium;
ii) målcellene dyrkes ved standard-vevsdyrkningsmetoder, høstes fra den eksponensielle vekstfase med en levedyktighet høyere enn 90%, vaskes i RPMI-celledyrkningsmedium, merkes med 100 μCi <51>Cr, vaskes to ganger med celledyrkningsmedium og gjenoppslemmes i celledyrkningsmedium med en tetthet på 10<5 >celler pr. ml;
iii) 100 mikroliter av den endelige målcellesuspensjon ovenfor overføres til hver brønn i en 96 brønns mikrotiterplate;
iv) antistoffet seriefortynnes fra 4000 ng/ml til 0,04 ng/ml i celledyrkningsmedium, og 50 mikroliter av de resulterende antistoffløsninger tilsettes til målcellene i 96 brønns mikrotiterplaten, under in triplo-testing av forskjellige antistoffkonsentrasjsoner som dekker hele konsentrasjonsområdet ovenfor;
v) for maksimal frigjørings-(MR)-kontrollene får 3 ytterligere brønner i platen som inneholder de merkede målceller, 50 mikroliter av en 2% (på volumbasis) vandig løsning av ikke-ionisk detergent (Nonidet, Sigma, St. Louis), i stedet for antistoffløsningen (punkt iv ovenfor).
vi) for spontan frigjørings-(SR)-kontrollene får 3 ytterligere brønner i platen inneholdende de merkede målceller 50 mikroliter RPMI-celledyrkningsmedium i stedet for antistoffløsningen (punkt iv ovenfor);
vii) 96 brønns mikrotiterplaten blir så sentrifugert ved 50 x g i 1 minutt og inkuberes i 1 time ved 4°C;
viii) 50 mikroliter av PBMC-suspensjonen (punkt i ovenfor) tilsettes i hver brønn under frembringelse av et effektormålcelle-forhold på 25:1 , og platene anbringes i en inkubator under 5% CCVatmosfære ved 37°C i 4 timer;
ix) den cellefrie supernatant fra hver brønn høstes, og den eksperimentelt frigjorte radioaktivitet (ER) kvantifiseres under anvendelse av en gammateller;
x) prosentandelen av spesifikk lyse beregnes for hver antistoffkonsentrasjon i henhold til formelen (ER-MR)/(MR-SR) x 100, hvor ER er den gjennomsnittlige kvantifiserte radioaktivitet (se punkt ix ovenfor) for denne antistoffkonsentrasjon, MR er den gjennomsnittlige kvantifiserte radioaktivitet (se punkt ix ovenfor) for MR-kontrollene (se punkt v ovenfor), og SR er den gjennomsnittlige kvantifiserte radioaktivitet (se punkt ix ovenfor) for SR-kontrollene (se punkt vi ovenfor);
4) "øket ADCC" er definert som enten en økning i den maksimale prosentandel av spesifikk lyse observert i antistoffkonsentrasjonsområdet testet ovenfor, og/eller en reduksjon i konsentrasjonen av antistoff som trenges for oppnåelse av halvdelen av den maksimale prosentandel av spesifikk lyse observert i antistoffkonsentrasjonsområdet testet ovenfor. Økningen i ADCC er i forhold til ADCC, målt med ovennevnte analyse, som medieres ved det samme antistoff, frembrakt ved den samme type vertsceller, under anvendelse av de samme standardfrembringelses-, -rense-, -formulerings- og -lagringsmetoder, som er kjent for fagfolk på området, men som ikke er blitt frembrakt av vertsceller som er omarbeidet til å overuttrykke GnTIII.
[0109] Ved ett aspekt angår foreliggende oppfinnelse antigenbindende molekyler med bindingsspesifisitet som hos muse-B-Ly1 -antistoffet, og oppdagelsen av at deres effektorfunksjoner kan forbedres ved forandret glykosylering. Ved én utførelsesform er det antigenbindende molekyl et kimærisk antistoff. Ved en foretrukket utførelsesform er oppfinnelsen rettet mot et kimærisk antistoff, eller et fragment derav, omfattende CDR vist på fig. 7. Spesifikt er oppfinnelsen ved en foretrukket utførelsesform rettet mot et isolert polynukleotid omfattende: (a) en sekvens valgt fra en gruppe bestående av: SEKV ID NR:5, SEKV ID NR: 6 og SEKV ID NR: 7. (CDR VH-i); og (b) en sekvens valgt fra en gruppe bestående av: SEKV ID NR:21 , SEKV ID NR: 22 og SEKV ID NR: 23. (CDR VH-2; og SEKV ID NR: 24. Ved en annen foretrukket utførelsesform er oppfinnelsen rettet mot et isolert polynukleotid omfattende SEKV ID NR: 8, SEKV ID NR: 9 og SEKV ID NR: 10. (CDR VL). Ved én utførelsesform koder hvert av disse polynukleotidene for et fusjonspolypeptid.
[0110] Ved en annen utførelsesform omfatter det antigenbindende molekyl VH-doménet av muse-B-Ly1 -antistoffet vist på fig. 1 , eller en variant derav; og et ikke-muse-polypeptid. Ved en annen foretrukket utførelsesform er oppfinnelsen rettet mot et antigenbindende molekyl omfattende VL-doménet av muse-B-Ly1-antistoffet vist på fig. 2, eller en variant derav; og et ikke-muse-polypeptid.
[0111] Ved et annet aspekt er oppfinnelsen rettet mot antigenbindende molekyler omfattende én eller flere avkortede CDR av B-Ly1 . Slike avkortede CDR vil mimimalt inneholde de spesifisitetsbestemmende aminosyrerester for den gitte CDR. Med "spesifisitetsbestemmende rest" menes de rester som er direkte involvert i interaksjonen med antigenet. Vanligvis deltar bare ca. én femtedel til én tredjedel av restene i en gitt CDR i binding til antigen. De spesifisitetsbestemmende rester i en spesiell CDR kan identifiseres for eksempel ved beregning av interatomiske kontakter ut fra tredimensjonal modellering og bestemmelse av sekvensvariabiliteten ved en gitt reststilling i henhold til metodene beskrevet i Padlan et al., FASEB J. 9(1): 133-139 (1995), hvis innhold i sin helhet er medtatt her i dokumentet som referanse.
[0112] Oppfinnelsen er følgelig også rettet mot et isolert polynukleotid omfattende minst en komplementaritetsbestemmende region av muse-B-Ly1-antistoffet, eller en variant- eller avkortet form derav inneholdende minst de spesifisitetsbestemmende rester for den komplementaritetsbestemmende region, . hvor det isolert polynukleotid koder for et fusjonspolypeptid. Slike isolerte polynukleotider koder fortrinnsvis for et fusjonspolypeptid som er et antigenbindende molekyl. Ved én utførelsesform omfatter polynukleotidet tre komplementaritetsbestemmende regioner av muse-B-Ly1 -antistoffet, eller varianter eller avkortede former derav inneholdende minst de spesifisitetsbestemmende rester for hver av de tre komplementaritetsbestemmende regioner. Ved en annen utførelsesform koder polynukleotidet for hele den variable region av den lette eller tunge kjede av et kimærisk (f. eks. humanisert) antistoff.
Oppfinnelsen er videre rettet mot polypeptidene som kodes for av slike polynukleotider.
[0113] Ved en annen utførelsesform er oppfinnelsen rettet mot et antigenkombinerende molekyl omfattende minst én komplementaritetsbestemmende region av muse-B-Ly1 -antistoffet, eller en variant eller avkortet form derav inneholdende i det minste de spesifisitetsbestemmende rester for den komplementaritetsbestemmende region, og omfattende en sekvens som stammer fra et heterologt polypeptid. Ved én utførelsesform omfatter det antigenbindende molekyl tre komplementaritetsbestemmende regioner av muse-B-Ly1 -antistoffet, eller varianter eller avkortede former derav inneholdende minst de spesifisitetsbestemmende rester for hver av de tre komplementaritetsbestemmende regioner. Ved et annet aspekt omfatter det antigenbindende molekyl den variable region av en lett eller tung antistoffkjede. Ved én spesielt anvendelig utførelsesform er det antigenbindende molekyl et kimærisk, f.eks. humanisert, antistoff. Oppfinnelsen er også rettet mot fremgangsmåter for frembringelse av slike antigenbindende molekyler, og anvendelse av disse ved behandling av sykdom, innbefattende B-celle-lymfomer.
[0114] Det er kjent at flere mekanismer inngår ved den terapeutiske effektivitet av anti-CD20-antistoffer, innbefattende antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet (ADCC), komplementavhengig cytotoksisitet (CDC) og induksjon av vekststansing eller apoptose. For eksempel tyder hovedandelen av eksperimentelle beviser på at rituximab opererer via konvensjonelle effektormekanismer målt ved CDC- og ADCC-analyser. Likeledes er det vist at bestandigheten hos forskjellige lymfomceller overfor rituximab in vivo er en funksjon av deres følsomhet overfor CDC in vitro. I motsetning til dette fordrer virkningsmåten in vivo for et annet antistoff som er blitt godkjent for terapeutisk bruk, B1 , verken komplement eller naturlig dreper (NK)-celle-aktivitet.
Effektiviteten av B1 in vivo skyldes snarere dets evne til å indusere potent apoptose.
[0115] Monoklonale anti-CD20-antistoffer kan generelt inndeles i to atskilte kategorier basert på sin virkningsmekanisme med hensyn til å utrydde lymfomceller. Anti-CD20-antistoffer type I anvender hovedsakelig komplement til å drepe målceller, mens antistoffer type II opererer ved andre mekanismer, hovedsakelig apoptose. Rituximab og 1 F5 er eksempler på anti-CD20-antistoffer type I, mens B1 er et eksempel på et antistoff type II. Se f.eks. Cragg, M.S, og Glennie, M.J., Blood 103(7):2738-2743 (april 2004); Teeling, J.L. et al., Blood 104(6): 1793- 1800 (september 2004); hele innholdet i hver av disse er medtatt her i dokumentet som referanse.
[0116] Foreliggende oppfinnelse er det første kjente tilfelle hvor et anti-CD20-antistoff type II er blitt omarbeidet til å ha økte effektorfunksjoner så som ADCC, mens det fremdeles bibeholder potent apoptoseevne. Foreliggende oppfinnelse er følgelig rettet mot et omarbeidet anti-CD20-antistoff type II med øket ADCC som resultat av denne omarbeiding, og uten tap av vesentlig evne til å indusere apoptose. Ved én utførelsesform er anti-CD20-antistoffene type II blitt omarbeidet til å ha et forandret mønster for glykosylering i Fc-regionen. Ved en spesiell utførelsesform omfatter den forandrede glykosylering et øket nivå av todelte kompleksrester i Fc-regionen. Ved en annen spesiell utførelsesform omfatter den forandrede glykosylering et redusert nivå av fukoserester i Fcregionen. Se publisert US-patentsøknad nr. 2004/0093621 , hvis hele innhold er medtatt her i dokumentet som referanse. Ved en annen utførelsesform har anti-CD20-antistoffene type II gjennomgått polypeptidomarbeiding som angitt i US-patent nr. 6 737 056 eller publisert US-patentsøknad nr. 2004/0185045 eller publisert US-patentsøknad nr. 2004/0132101 ; hele inneholdet i hver av disse er medtatt som referanse. Oppfinnelsen er videre rettet mot fremgangsmåter for frembringelse av slike omarbeidede antistoffer type II samt fremgangsmåter for anvendelse av slike antistoffer ved behandling av forskjellige B-celle-forstyrrelser, innbefattende B-celle-lymfomer.
[0117] Kimæriske muse-/humane antistoffer er beskrevet. Se for eksempel Morrison, S. L. et al., PNAS 11 :6851-6854 (november 1984); europeisk patentpublikasjon nr. 173494; Boulianna, G. L, et al., Nature 312:642 (desember 1984); Neubeiger, M. S. et al., Nature 314:268 (mars 1985); europeisk patentpublikasjon nr. 125023; Tan et al., J. Immunol. 135:8564 (november 1985); Sun, L. K et al., Hybridoma 5(1):517 (1986); Sahagan et al., J. Immunol.
137:1066-1074 (1986). Se generelt Muron, Nature 312:597 (desember 1984); Dickson, Genetic Engineering News 5(3) (mars 1985); Marx, Science 229:455 (august 1985); og Morrison, Science 229: 1202-1207 (september 1985). PCT-publikasjon nr. WO/881 04936 beskriver et kimærisk antistoff med konstant human region og variabel museregion, med spesifisitet overfor en epitop på CD20; musedelen av det kimæriske antistoff i Robinson-referansen stammer fra det monoklonale museantistoff 2H7 (gamma 2b, kappa). Skjønt referansen bemerker at det beskrevne kimæriske antistoff er en "hovedkandidat" for behandling av B-celleforstyrrelser, kan dette utsagn anses som ikke mer enn et forslag overfor fagfolk på området for å bestemme om hvorvidt dette forslag er nøyaktig for dette spesielle antistoff eller ikke, spesielt på grunn av at referansen mangler data som underbygger påstanden om terapeutisk effektivitet, og i det vesentlige data som anvender høyereordens-pattedyr så som primater eller mennesker.
[01 18] Metodikker for frembringelse av kimæriske antistoffer er tilgjengelige for fagfolk på området. For eksempel kan de lette og tunge kjeder uttrykkes separat, for eksempel under anvendelse av immunglobulin-lettkjeder og immunglobulin-tungkjeder i separate plasmider, eller på en enkelt (f.eks. polycistronisk) vektor. Disse kan så renses og settes sammen in vitro til fullstendige antistoffer; metodikker for utførelse av slik sammensetting er beskrevet. Se for eksempel Scharff M., Harvey Lectures 69:125 (1974). In vitroreaksjonsparametere for dannelse av IgG-antistoffer fra reduserte isolerte lette og tunge kjeder er også beskrevet. Se for eksempel Sears et al., Biochem.
16(9):201 6-25 (1977).
[0119] Ved en spesielt foretrukket utførelsesform er det kimæriske ABM ifølge foreliggende oppfinnelse et humanisert antistoff. Metoder for humanisering av ikke-humane antistoffer er kjent på området. For eksempel kan humaniserte ABM ifølge foreliggende oppfinnelse frembringes i henhold til metodene ifølge USpatent nr. 5 225 539, US-patent nr. 6 180 370 eller US-patent nr. 6 632 927; hele innholdet i hvert av disse er herved medtatt som referanse. Et humanisert antistoff har fortrinnsvis innført én eller flere aminosyrerester fra en kilde som er ikkehuman. Disse ikke-humane aminosyrerester omtales ofte som "impoif'-rester, som typisk er tatt fra et variabelt "import"-doméne. Humanisering kan i det vesentlige utføres i henhold til metoden ifølge Winter og medarbeidere (Jones et al., Nature, 321 :522-525 (1986); Riechmann et al., Nature, 332:323-327 (1988); Verhoeyen et al., Science, 239:1534-1536 (1988)) ved innsetting av hypervariable regionsekvenser i stedet for de tilsvarende sekvenser av et humant antistoff. Slike "humaniserte" antistoffer er følgelig kimæriske antistoffer (US-patent nr.
4 816 567) hvor hovedsakelig mindre enn et intakt humant variabelt doméne er blitt erstattet med den tilsvarende sekvens fra en ikke-human art. I praksis er humaniserte antistoffer typisk humane antistoffer hvor en del hypervariabel regionrester og eventuelt en del FR-rester er erstattet med rester fra analoge steder i gnager-antistoffer. De aktuelle humaniserte anti-CD20-antistoffer vil omfatte konstante regioner av humant immunglobulin.
[0120] Valget av humane variable doméner, både lette og tunge, for anvendelse ved frembringelse av de humaniserte antistoffer er meget viktig for redusering av antigenisitet. I henhold til den såkalte "beste tilpasnings"-metode blir sekvensen i det variable doméne av et gnager-antistoff screenet mot hele biblioteket av kjente humane variabelt doméne-sekvenser. Den humane sekvens som er nærmest gnagersekvensen, blir så akseptert som den humane rammeverkregion (FR) for det humaniserte antistoff (Sims et al., J. Immunol., 151 :2296 (1993); Clothia et al., J. Mol. Biol., 196:901 (1987)). En annen metode for utvelging av den humane rammeverksekvens er å sammenlikne sekvensen for hver individuell subregion av hele gnager-rammeverket (dvs. FR1 , FR2, FR3 og FR4) eller en kombinasjon av de individuelle subregioner (f .eks. FR1 og FR2) med et bibliotek av kjente humane variabel region-sekvenser som svarer til denne rammeverk-subregion (f. eks. bestemt ved Kabat-nummerering) og velge den humane sekvens for hver subregion eller kombinasjon som er nærmest gnagersekvensen (publisert US-patentsøknad nr. 2003/0040606A1 , publisert 27. feb. 2003). En annen metode anvender en bestemt rammeverkregion som stammer fra konsensussekvensen hos alle humane antistoffer i en spesiell subgruppe av lette eller tunge kjeder. Det samme rammeverk kan anvendes for flere forskjellige humaniserte antistoffer (Carter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:4285 (1992); Presta et al., J. Immunol., 151 :2623 (1993)).
[0121] Det er videre viktig at antistoffer humaniseres med retensjon av høy affinitet for antigenet og andre gunstige biologiske egenskaper. For å oppnå dette mål blir humaniserte antistoffer i henhold til en foretrukket metode frembrakt ved hjelp av en prosess for analyse av parentalsekvensene og forskjellige begrepsmessige humaniserte produkter under anvendelse av tredimensjonale modeller av parentalsekvensene og de humaniserte sekvenser. Tredimensjonale immunglobulinmodeller er alminnelig tilgjengelige og er kjent for fagfolk på området. Det er tilgjengelig datamaskinprogrammer som illustrerer og viser sannsynlige tredimensjonale konformasjonelle strukturer av utvalgte kandidatimmunglobulinsekvenser. Inspeksjon av disse fremvisninger muliggjør analyse av den sannsynlige rolle for restene ved funksjonering av kandidat-immunglobulinsekvensen, dvs. analyse av rester som innvirker på evnen hos kandidatimmunglobulinet til å binde sitt antigen. På denne måte kan FR-rester utvelges og kombineres fra mottaker- og importsekvensene slik at de ønskede antistoffkarakteregenskaper, så som øket affinitet for målantigenet (-antigenene) oppnås. Vanligvis er restene i den hypervariable region direkte og i det alt vesentlige involvert i innvirkning på antigenbinding.
[0122] Ved en annen utførelsesform blir de antigenbindende molekyler ifølge foreliggende oppfinnelse omarbeidet til å ha forøket bindingsaffinitet, for eksempel i henhold til metodene beskrevet i publisert US-patentsøknad nr.
2004/0132066, og hele innholdet i dette er medtatt her i dokumentet som referanse.
[0123] Ved én utførelsesform blir det antigenbindende molekyl ifølge foreliggende oppfinnelse konjugert til en ytterligere del, så som en radiomerkesubstans eller et toksin. Slike konjugerte ABM kan frembringes ved hjelp av tallrike metoder som er velkjente på området.
[0124] En rekke radionuklider er anvendelige ved foreliggende oppfinnelse, og fagfolk på området tillegges evnen til lett å bestemme hvilken radionuklide som er mest hensiktsmessig under en rekke omstendigheter. For eksempel er <131>jod en velkjent radionuklide som anvendes for målsøkt immunterapi. Den kliniske anvendelighet av <131>jod kan imidlertid være begrenset av flere faktorer innbefattende: åtte dagers fysisk halveringstid; dehalogenering av jodert antistoff både i blodet og på tumorsteder; og emisjonsegenskaper (f. eks. stor gammakomponent) som kan være suboptimal for lokalisert doseavsetning i tumor. Med tilkomst av bedre chelateringsmidler har muligheten til å knytte metallchelaterende grupper til proteiner øket mulighetene til å anvende andre radionuklider så som <111>indium og "yttrium. <90>Yttrium gir flere fordeler for anvendelse ved radioimmunterapeutiske anvendelser: 64 timers halveringstiden for "yttrium er lang nok til å muliggjøre antistoffopphopning ved tumor, og i motsetning til f.eks. <131>jod, er "yttrium en ren betaemitter med høy energi uten noen ledsagende gammastråling ved nedbrytningen av det, med en rekkevidde i vev på 100 til 1000 cellediametre. Videre muliggjør den minimale mengde av gjennomtrengende stråling poliklinisk administrering av "yttrium-merkede antistoffer. Dessuten er internalisering av merket antistoff ikke nødvendig for celledreping, og den lokale emisjon av ioniserende stråling skulle være letal for nabo-tumorceller som mangler mål-antigenet.
[0125] Effektive enkeltbehandlingsdoseringer (dvs. terapeutisk effektive mengder) av "yttrium-merkede anti-CD20-antistoffer er i området mellom ca. 5 og ca. 75 mCi, mer foretrukket mellom ca. 10 og ca. 40 mCi. Effektive ablative enkeltbehandlings-benmargdoser av <131>jod-merkede anti-CD20-antistoffer er i området mellom ca. 5 og ca. 70 mCi, mer foretrukket mellom ca. 5 og ca. 40 mCi. Effektive ablative enkeltbehandlingsdoser (dvs. kan kreve autolog benmargtransplantasjon) av <131>jod-merkede anti-CD20-antistoffer er i området mellom ca. 30 og ca. 600 mCi, mer foretrukket mellom ca. 50 og mindre enn ca.
500 mCi. I forbindelse med et kimærisk anti-CD20-antistoff er en effektiv ablativ enkeltbehandlings-benmargdose av <131>jod-merkede kimæriske anti-CD20-antistoffer i området mellom ca. 5 og ca. 40 mCi, mer foretrukket mindre enn ca.
30 mCi, på grunn av den lengre sirkulerings-halveringstid i forhold til museantistoffer. Avbildingskriterier for f.eks. <111>indium-merkesubstansen er typisk mindre enn ca. 5 mCi.
[0126] Med hensyn til radiomerkede anti-CD20-antistoffer kan terapi med disse også finne sted ved anvendelse av en enkeltterapibehandling eller ved anvendelse av multiple behandlinger. På grunn av radionuklidekomponenten er det foretrukket at perifere stamceller ("PSC") eller benmarg ("BM") "høstes" for behandling av pasienter som har fått potensielt fatal benmargtoksisitet som resultat av bestråling. BM og/eller PSC høstes under anvendelse av
standardteknikker, og blir så utskylt og frosset for eventuell reinfusjon. Det er dessuten meget foretrukket at det før behandling utføres en diagnostisk
<: >dosimetriundersøkelse med anvendelse av et diagnostisk merket antistoff (f .eks. under anvendelse av <111 >indium) på pasienten; et formål med dette er å sikre at . det terapeutisk merkede antistoff (f.eks. med anvendelse av <90>yttrium) ikke vil bli unødvendig "konsentrert" i noe normalt organ eller vev.
[0127] Ved en foretrukket utførelsesform er foreliggende oppfinnelse rettet mot et isolert polynukleotid omfattende en sekvens som koder for et polypeptid med en aminosyresekvens som vist i tabell 3 nedenfor. Oppfinnelsen er videre rettet mot en isolert nukleinsyre omfattende en sekvens som er minst 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% eller 99% identisk med en nukleotidsekvens vist i tabell 2 nedenfor. Ved en annen utførelsesform er oppfinnelsen rettet mot en isolert nukleinsyre omfattende en sekvens som koder for et polypeptid med en aminosyresekvens som er minst 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% eller 99% identisk med en aminosyresekvens i tabell 3. Oppfinnelsen omfatter også en isolert nukleinsyre omfattende en sekvens som koder for et polypeptid med aminosyresekvens som hos hvilken som helst av konstruksjonene i tabell 3 med konserverende aminosyresubstitusjoner.
TABELL 2
TABELL 3
[0128] Ved en annen foretrukket utførelsesform er foreliggende oppfinnelse rettet mot et isolert polynukleotid omfattende en sekvens som koder for et polypeptid med aminosyresekvensen vist på fig. 1 eller fig. 2. Oppfinnelsen er videre rettet mot en isolert nukleinsyre omfattende en sekvens som er minst 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% eller 99% identisk med nukleotidsekvensen vist på fig. 5 eller fig. 6. Ved en annen utførelsesform er oppfinnelsen rettet mot en isolert nukleinsyre omfattende en sekvens som koder for et polypeptid med en aminosyresekvens som er minst 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% eller 99% identisk med aminosyresekvensen vist på fig. 5 eller fig. 6. Oppfinnelsen omfatter også en isolert nukleinsyre omfattende en sekvens som koder for et polypeptid med aminosyresekvensen ifølge hvilken som helst av fig. 1. fig. 2, fig. 5 eller fig. 6 med konserverende aminosyresubstitusjoner.
[0129] Ved en annen utførelsesform er foreliggende oppfinnelse rettet mot , en ekspresjonsvektor og/eller en vertscelle som omfatter ett eller flere isolerte polynukleotider ifølge foreliggende oppfinnelse.
[0130] Generelt kan hvilken som helst type dyrket cellelinje anvendes til å uttrykke ABM ifølge foreliggende oppfinnelse. Ved en foretrukket utførelsesform anvendes CHO-celler, BHK-celler, NSO-celler, SP2/0-celler, YO-myelomceller, P3X63-musemyelomceller, PER-celler, PER.C6-celler eller hybridomceller, andre pattedyrceller, gjærceller, insektceller eller planteceller som bakgrunnscelielinje til frembringelse av de omarbeidede vertsceller ifølge oppfinnelsen.
[0131] Den terapeutiske effektivitet av ABM ifølge foreliggende oppfinnelse kan forsterkes ved at de frembringes i en vertscelle som videre uttrykker et polynukleotid som koder for et polypeptid med GnTIII-aktivitet. Ved en foretrukket utførelsesform er polypeptidet med GnTIII-aktivitet et fusjonspolypeptid omfattende Golgi-lokalisasjonsdoménet av et polypeptid som finnes i Golgiapparatet. Ved en annen foretrukket utførelsesform resulterer ekspresjonen av ABM ifølge foreliggende oppfinnelse i en vertscelle som uttrykker et polynukleotid som koder for et polypeptid med GnTIII-aktivitet, i ABM med øketFc-reseptorbindingsaffinitet og øket effektorfunksjon. Ved én utførelsesform er foreliggende oppfinnelse følgelig rettet mot en vertscelle omfattende (a) en isolert nukleinsyre omfattende en sekvens som koder for et polypeptid med GnTIII-aktivitet; og (b) et isolert polynukleotid som koder for et ABM ifølge foreliggende oppfinnelse, så som et kimærisk, primatisert eller humanisert antistoff som binder humant CD20. Ved en foretrukket utførelsesform er polypeptidet som har GnTIII-aktivitet, et fusjonspolypeptid omfattende det katalytiske doméne av GnTIII, og Golgilokalisdasjonsdoménet er lokalisasjonsdoménet for mannosidase II. Metoder for frembringelse av slike fusjonspolypeptider og anvendelse av dem til fremstilling av antistoffer med økte effektorfunksjoner er beskrevet i midlertidig US-patentsøknad nr. 60/495 142; hele innholdet i denne er uttrykkelig medtatt her i dokumentet som referanse. Ved en annen foretrukket utførelsesform er det kimæriske ABM et kimærisk antistoff eller et fragment derav, som har bindingsspesifisitet som for muse-B-Ly1 -antistoffet. Ved en spesielt foretrukket utførelsesform omfatter det kimæriske antistoff et humant Fc. Ved en annen foretrukket utførelsesform er antistoffet primatisert eller humanisert.
[0132] Ved én utførelsesform kan ett eller flere polynukleotider som koder for et ABM ifølge foreliggende oppfinnelse, uttrykkes under regulering av en konstitutiv promoter, eller alternativt et regulert ekspresjonssystem. Egnede regulerte ekspresjonssystemer innbefatter, men er ikke begrenset til, et tetracyklinregulert ekspresjonssystem, et ecdyson-induserbart ekspresjonssystem, et lac-omskiftings-ekspresjonssystem, et glukokortikoid-induserbart ekspresjonssystem, et temperatur-induserbart promotersystem og et metalltionein-metall-induserbart ekspresjonssystem. Hvis flere forskjellige nukleinsyrer som koder for et ABM ifølge foreliggende oppfinnelse finnes i vertscellesystemet, kan noen av dem uttrykkes under kontroll av en konstitutiv promoter, mens andre uttrykkes under kontroll av en regulert promoter. Det maksimale ekspresjonsnivå anses for å være det høyest mulige nivå av stabil polypeptidekspresjon som ikke har en betydelig uheldig virkning på celleveksthastigheten, og vil bli bestemt under anvendelse av rutineeksperimentering. Ekspresjonsnivåene bestemmes ved metoder som er generelt kjent på området, innbefattende Western blot-analyse med anvendelse av et antistoff som er spesifikt for ABM, eller et antistoff som er spesifikt for et peptidmerkemateriale koplet til ABM; og Northern blot-analyse. Ved et ytterligere alternativ kan polynukleotidet være operativt knyttet til et reportergen; ekspresjonsnivåene for et kimærisk ABM med hovedsakelig samme bindingsspesifisitet som muse-B-Ly1 -antistoffet bestemmes ved måling av et signal som er korrelert med ekspresjonsnivået for reportergenet. Reportergenet . kan transkriberes sammen med nukleinsyren(e) som koder for nevnte polypeptid som et enkelt mRNA-molekyl; deres respektive kodingssekvenser kan sammenknyttes enten ved et indre ribosominngangssete (IRES) eller ved en deksel ("cap")-uavhengig translasjonsforsterker (CITE). Reportergenet kan translateres sammen med minst én nukleinsyre som koder for et kimærisk ABM med hovedsakelig samme bindingsspesifisitet som muse-B-Ly1 -antistoffet slik at det dannes en enkelt polypeptidkjede. Nukleinsyrene som koder for AMB ifølge foreliggende oppfinnelse, kan være operativt knyttet til reportergenet under kontroll av en enkelt promoter, slik at nukleinsyren som koder for fusjonspolypeptidet og reportergenet, transkriberes til et RNA-molekyl som alternativt spleises til to atskilte budbringer-RNA (mRNA)-molekyler; ett av de resulterende mRNA translateres til reporterproteinet, og det andre translateres til fusjonsproteinet.
[0133] Metoder som er velkjente for fagfolk på området, kan anvendes til konstruering av ekspresjonsvektorer inneholdende kodingssekvensen for et ABM med hovedsakelig samme bindingsspesifisitet som muse-B-Ly1 -antistoffet sammen med passende transkripsjons/translasjons-kontrollsignaler. Disse metoder innbefatter rekombinante in vitro-DNA-teknikker, synteseteknikker og in vivo-rekombinasjon/genetisk rekombinasjon. Se for eksempel teknikkene beskrevet i Maniatis et al., Molecular Cloning A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, N.Y. (1989) og Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates and Wiley Interscience, N.Y. (1989).
[0134] Det kan anvendes forskjellige verts-ekspresjonsvektorsystemer til å uttrykke kodingssekvensen for ABM ifølge foreliggende oppfinnelse. Det anvendes fortrinnsvis pattedyrceller som vertssystemer transfektert med rekombinant plasmid-DNA- eller kosmid-DNA-ekspresjonsvektorer inneholdende kodingssekvensen for det aktuelle protein, og kodingssekvensen for fusjonspolypeptidet. Mest foretrukket anvendes CHO-celler, BHK-celler, NSO-celler, SP2/0-celler, YO-myelomceller, P3X63-musemyelomceller, PER-celler, PER.C6-celler eller hybridomceller, andre pattedyrceller, gjærceller, insektceller eller planteceller som vertscellesystem. Noen eksempler på ekspresjonssystemer og seleksjonsmetoder er beskrevet i følgende referanser, og referanser i disse: Borth et al., Biotechnol. Bioen. 71 (4):266-73 (2000-2001), i Werner et al., Arzneimittelforschung/Drug Res. 48(8):870-80 (1998), i Andersen og Krummen, Curr. Op. Biotechnol. 13:117-123 (2002), i Chadd og Chamow, Curr. Op.
Biotechnol. 12:188-194 (2001), og i Giddings, Curr. Op. Biotechnol. 12: 450-454 (2001). Ved alternative utførelsesformer kan andre eukaryote vertscellesystemer overveies, innbefattende gjærceller transformert med rekombinante gjærekspresjonsvektorer inneholdende kodingssekvensen for et ABM ifølge foreliggende oppfinnelse; insektscellesystemer infisert med rekombinante virusekspresjonsvektorer (f.eks. baculovirus) inneholdende kodingssekvensen for et kimærisk ABM med hovedsakelig samme bindingsspesifisitet som muse-B-Ly1-antistoffet; plantecellesystemer infisert med rekombinante virusekspresjonsvektorer (f.eks. blomkålmosaikkvirus, CaMV; tobakkmosaikkvirus, TMV) eller transformert med rekombinante plasmid-ekspresjonsvektorer (f.eks. Ti-plasmid) inneholdende kodingssekvensen for ABM ifølge oppfinnelsen; eller dyrecellesystemer infisert med rekombinante virusekspresjonsvektorer (f.eks. adenovirus, vacciniavirus) innbefattende cellelinjer omarbeidet til å inneholde multiple kopier av DNA som koder for et kimærisk ABM med hovedsakelig samme bindingsspesifisitet som for muse-B-Ly1 -antistoffet, enten stabilt amplifisert (CHO/dhfr) eller ustabilt amplifisert i dobbelt-småkromosomer (f.eks. musecellelinjer). Ved én utførelsesfomn er vektoren omfattende polynukleotidet (polynukleotidene) som koder for ABM ifølge oppfinnelsen, polycistronisk. Ved én utførelsesform er ABM omtalt ovenfor dessuten et antistoff eller et fragment derav. Ved en foretrukket utførelsesform er ABM et humanisert antistoff.
[0135] Når det gjelder fremgangsmåtene ifølge denne oppfinnelse, er stabil ekspresjon vanligvis foretrukket fremfor forbigående ekspresjon på grunn av at den typisk oppnår mer reproduserbare resultater og dessuten er mer tilpassbar til storskalaproduksjon. Heller enn å anvende ekspresjonsvektorer som inneholder virus-replikasjonsorigo, kan vertsceller transformeres med de respektive kodingsnukleinsyrer kontrollert ved passende ekspresjonskontrollelementer (f.eks. promoter, forsterker, sekvenser, transkripsjonsterminatorer, polyadenyleringsseter osv.) og en selekterbar markør. Etter innføring av fremmed DNA, kan omarbeidede celler få vokse i 1 -2 dager i et anriket medium, som deretter blir skiftet til et selektivt medium. Den selekterbare markør i det rekombinante plasmid gir resistens til seleksjonen og muliggjør seleksjon av celler som har stabilt integrert plasmidet i sine kromosomer og vokser under dannelse av foci som i sin tur kan klones og ekspanderes i cellelinjer.
[0136] En rekke seleksjonssystemer kan anvendes, innbefattende, men ikke begrenset til, herpes simplex-virus-thymidinkinase- (Wigler et at, Cell 11 :223 (1977)), hypoxantin-guanin fosforibosyltransferase- (Szybalska & Szybalski, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 48:2026 (1962)), og adeninfosforibosyltransferase- (Lowy et at, Cell 22:817 (1980)) gener, som kan anvendes i henholdsvis tk - hgprt - eller aprf -celle. Dessuten kan antimetabolittresistens anvendes som basis for seleksjon med henblikk på dhfr, som gir resistens overfor metotreksat (Wigler et al., Natl. Acad. Sci. USA 77:3567 (1989); O'Hare etat , Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:1527 (1981)); gpt, som gir resistens overfor mykofenolsyre (Mulligan & Berg, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:2072 (1981 )); neo, som gir resistens overfor aminoglykosid G-418- (Colberre-Garapin et al., J. Mol. Biol. 150:1 (1981)); og hygro, som gir resistens overfor hygromycin- (Santerre etat , Gene 30:147 (1984) gener. Det er nylig beskrevet ytterligere selekterbare gener, nemlig trpB, som gir mulighet for celler å anvende indol i stedet for tryptofan; hisD, som gir mulighet for celler å anvende histinol i stedet for histidin (Hartman & Mulligan, Proc. Natl. Acad. Set USA 85:8047 (1988)); glutaminsyntasesystemet; og ODC (omitindekarboksylase) som gir resistens overfor ornitindekarboksylase-inhibitoren, 2-(difluormeyl-DL-omitin, DFMO (McConlogue, i: Current Communications in Molecular Biology, Cold Spring Harbor Laboratory red. (1987)).
[0137] Foreliggende oppfinnelse er videre rettet mot en metode for modifisering av glykosyleringsprofilen for ABM ifølge foreliggende oppfinnelse som dannes av en vertscelle, omfattende ekspresjon i vertscellen av en nukleinsyre som koder for et ABM ifølge oppfinnelsen, og en nukleinsyre som koder for et polypeptid med GnTIII-aktivitet, eller en vektor omfattende slike nukleinsyrer. Det modifiserte polypeptid er fortrinnsvis IgG eller et fragment derav omfattende Fcregionen. Ved en spesielt foretrukket utførelsesform er ABM et humanisert antistoff eller et fragment derav.
[0138] De modifiserte ABM dannet av vertscellene ifølge oppfinnelsen oppviser øket Fc-reseptor-bindende affinitet og/eller øket effektorfunksjon som resultat av modifikasjonen. Ved en spesielt foretrukket utførelsesform er ABM et humanisert antistoff eller et fragment derav inneholdende Fc-regionen. Den økte Fc-reseptor-bindende affinitet er fortrinnsvis øket binding til en Fcy-aktiverende reseptor, så som FcyFRIIIa-reseptoren Den økte effektorfunksjon er fortrinnsvis en økning i én eller flere av følgende: øket antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet, øket antistoffavhengig cellulær fagocytose (ADCP), øket cytokinutskillelse, øket immunkompleks-mediert antigenopptak ved antigenpresenterende celler, øket Fcmediert cellulær cytotoksisitet, øket binding til NK-celler, øket binding til makrofager, øket binding til polymorfonukleære celler (PMN), øket binding til monocytter, øket kryssbinding av målbundne antistoffer, øket direkte signalisering som induserer apoptose, øket dendrittcelleutvikling og øket T-celle-priming.
[0139] Foreliggende oppfinnelse er også rettet mot en fremgangsmåte for frembringelse av et ABM ifølge foreliggende oppfinnelse, med modifiserte oligosakkarider i en vertscelle, omfattende (a) dyrking av en vertscelle som er omarbeidet til å uttrykke minst én nukleinsyre som koder for et polypeptid med GnTIII-aktivitet under betingelser som muliggjør dannelse av et ABM ifølge foreliggende oppfinnelse, hvor polypeptidet med GnTIII-aktivitet uttrykkes i en mengde som er tilstrekkelig til å modifisere oligosakkaridene i Fc-regionen av nevnte ABM dannet av vertscellen; og (b) isolering av dette ABM. Ved en foretrukket utførelsesform er polypeptidet med GnTIII-aktivitet et fusjonspolypeptid omfattende det katalytiske doméne av GnTIII. Ved en spesielt foretrukket utførelsesform omfatter fusjonspolypeptidet videre Golgi-lokalisasjonsdoménet av et polypeptid i Golgi-apparatet.
[0140] Golgi-lokalisasjonsdoménet er fortrinnsvis lokalisasjonsdoménet av mannosidase II eller GnTI. Alternativt er Golgi-lokalisasjonsdoménet valgt fra gruppen bestående av: lokalisasjonsdoménet av mannosidase I, lokalisasjonsdoménet av GnTII og lokalisasjonsdoménet av a1 -6-kjerne-fukosyltransferase. ABM fremstilt ved hjelp av fremgangsmåtene ifølge foreliggende oppfinnelse har øket Fc-reseptor-bindende affinitet og/eller øket effektorfunksjon. Den økte effektorfunksjon er fortrinnsvis én eller flere av følgende: øket Fc-mediert cellulær cytotoksisitet (innbefattende øket antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet), øket antistoffavhengig cellulær fagocytose (ADCP), øket cytokinutskillelse, øket immunkompleks-mediert antigenopptak ved antigenpresenterende celler, øket binding til NK-celler, øket binding til makrofager, øket binding til monocytter, øket binding til polymorfonukleære celler, øket direkte signalisering som induserer apoptose, øket kryssbinding av målbundne antistoffer, øket dendrittcelleutvikling eller øket T-celle-priming. Den økte Fc-reseptor-bindende affinitet er fortrinnsvis . øket binding til Fc-aktiverende reseptorer så som FoyRllla. Ved en spesielt foretrukket utførelsesform er ABM et humanisert antistoff eller et fragment derav.
[0141] Ved en annen utførelsesform er foreliggende oppfinnelse rettet mot et kimærisk ABM med hovedsakelig samme bindingsspesifisitet som for muse-B-Ly1 -antistoffet frembrakt ved hjelp av fremgangsmåtene ifølge oppfinnelse som har en øket andel av todelte oligosakkarider i Fc-regionen av nevnte polypeptid. Man tenker seg at et slikt ABM omfatter antistoffer og fragmenter derav omfattende Fc-regionen. Ved en foretrukket utførelsesform er ABM et humanisert antistoff. Ved én utførelsesform er prosentandelen av todelte oligosakkarider i Fcregionen av ABM minst 50%, mer fortrukket minst 60%, minst 70%, minst 80%, minst 90% og mest foretrukket minst 90-95% av den totale mengde oligosakkarider. Ved enda en annen utførelsesform har ABM fremstilt ved fremgangsmåtene ifølge oppfinnelsen en øket andel av ikke-fukosylerte oligosakkarider i Fc-regionen som resultat av modifikasjonen av dets oligosakkarider ved hjelp av fremgangsmåtene ifølge foreliggende oppfinnelse. Ved én utførelsesform er prosentandelen av ikke-fukosylerte oligosakkarider minst 50%, fortrinnsvis minst 60 til 70%, mest foretrukket minst 75%. De ikke-fukosylerte oligosakkarider kan være av hybrid- eller komplekstypen. Ved en spesielt foretrukket utførelsesform har ABM dannet av vertscellene og ved fremgangsmåtene ifølge oppfinnelsen en øket andel av todelte, ikke-fukosylerte oligosakkarider i Fc-regionen. De todelte, ikke-fukosylerte oligosakkarider kan være enten hybride eller komplekse. Fremgangsmåtene ifølge foreliggende oppfinnelse kan spesifikt anvendes til frembringelse av ABM hvor minst 15%, mer foretrukket minst 20%, mer foretrukket minst 25%, mer foretrukket minst 30%, mer foretrukket minst 35% av oligosakkaridene i Fc-regionen av ABM er todelte, ikkefukosylerte. Fremgangsmåtene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også anvendes til fremstilling av polypeptider hvor minst 15%, mer foretrukket minst 20%, mer foretrukket minst 25%, mer foretrukket minst 30%, mer foretrukket minst 35% av oligosakkaridene i Fc-regionen av polypeptidet er todelte hybride, ikke-fukosylerte.
[0142] Ved en annen utførelsesform er foreliggende oppfinnelse rettet mot et kimærisk ABM med hovedsakelig samme bindingsspesifisitet som for muse-B-Ly1 -antistoffet som er omarbeidet til å ha øket effektorfunksjon og/eller øket Fcreseptor-bindende affinitet, fremstilt ved fremgangsmåtene ifølge oppfinnelsen. Den økte effektorfunksjon er fortrinnsvis én eller flere av følgende: øket Fc-mediert cellulær cytotoksisitet (innbefattende øket antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet), øket antistoffavhengig cellulær fagocytose (ADCP), øket cytokinutskillelse, øket immunkompleks-mediert antigenopptak ved antigenpresenterende celler, øket binding til NK-celler, øket binding til makrofager, øket binding til monocytter, øket binding til polymorfonukleære celler, øket direkte signalisering som induserer apoptose, øket kryssbinding av målbundne antistoffer, øket dendrittcelleutvikling eller øket T-celle-priming. Ved en foretrukket utførelsesform er den økte Fcreseptor-bindende affinitet øket binding til en Fc-aktiverende reseptor, mest foretrukket FcyRIIIa. Ved én utførelsesform er ABM et antistoff, et antistoff -fragment inneholdende Fc-regionen eller et fusjonsprotein som innbefatter en region som er ekvivalent med Fc-regionen av et immunglobulin. Ved en spesielt foretrukket utførelsesform er ABM et humanisert antistoff.
[0143] Foreliggende oppfinnelse er videre rettet mot farmasøytiske preparater omfattende ABM ifølge foreliggende oppfinnelse og en farmasøytisk akseptabel bærer.
[0144] Foreliggende oppfinnelse er videre rettet mot anvendelse av slike farmasøytiske preparater ved metoden for behandling av kreft. Spesifikt er foreliggende oppfinnelse rettet mot en fremgangsmåte for behandling av kreft, omfattende administrering av en terapeutisk effektiv mengde av det farmasøytiske preparat ifølge oppfinnelsen.
[0145] Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer videre fremgangsmåter for frembringelse og anvendelse av vertscellesystemer for fremstilling av glykoformer av ABM ifølge foreliggende oppfinnelse, med øket Fc-reseptor-bindende affinitet, fortrinnsvis øket binding til Fc-aktiverende reseptorer, og/eller med økte effektorfunksjoner, innbefattende antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet. Glykoomarbeidingsmetodikken som kan anvendes med ABM ifølge foreliggende oppfinnelse, er beskrevet mer detaljert i US-patent nr. 6 602 684 og midlertidig US-patentsøknad nr. 60/441 307 og WO 2004/065540; innholdet i hver av disse er i sin helhet medtatt her i dokumentet som referanse. ABM ifølge foreliggende oppfinnelse kan alternativt glyko-omarbeides til å ha reduserte fukoserester i Fcregionen i henhold til teknikkene beskrevet i EP 1 176 195 A1 , hvis hele innhold er medtatt her i dokumentet som referanse.
Frembringelse av cellelinjer for fremstilling av proteiner med forandret glykosyleringsmønster
[0146] Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer vertscelle-ekspresjonssystemer for frembringelse av ABM ifølge foreliggende oppfinnelse med modifiserte glykosyleringsmønstre. Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer spesielt vertscellesystemer for frembringelse av glykoformer av ABM ifølge foreliggende oppfinnelse med forbedret terapeutisk verdi. Oppfinnelsen tilveiebringer derfor vertscelle-ekspresjonssystemer valgt eller omarbeidet til å uttrykke et polypeptid med GnTIII-aktivitet. Ved én utførelsesform er polypeptidet med GnTIII-aktivitet et fusjonspolypeptid omfattende Golgi-lokalisasjonsdoménet av et heterologt polypeptid i Golgi-apparatet. Slike vertscelle-ekspresjons-systemer kan spesifikt omarbeides til å omfatte et rekombinant nukleinsyremolekyl som koder for et polypeptid med GnTIII, operabelt knyttet til et konstitutivt eller regulert promotersystem.
[0147] Ved én spesifikk utførelsesform tilveiebringer foreliggende oppfinnelse en vertscelle som er blitt omarbeidet til å uttrykke minst én nukleinsyre som koder for et fusjonspolypeptid med GnTIII-aktivitet og omfattende Golgilokalisasjonsdoménet av et heterologt polypeptid som befinner seg i Golgiapparatet. Ved ett aspekt er vertscellen omarbeidet med et nukleinsyremolekyl omfattende minst ett gen som koder for et fusjonspolypeptid med GnTIII-aktivitet og omfattende Golgi-lokalisasjonsdoménet av et heterologt polypeptid som befinner seg i Golgi-apparatet.
[0148] Generelt kan hvilken som helst type dyrket cellelinje, innbefattende cellelinjene omtalt ovenfor, anvendes som bakgrunn for omarbeiding av vertscellelinjene ifølge foreliggende oppfinnelse. Ved en foretrukket utførelsesform anvendes CHO-celler, BHK-celler, NSO-celler, SP2/0-celler, YO-myelomceller, P3X63-musemyelomceller, PER-celler, PER.C6-celler eller hybridomceller, andre pattedyrceller, gjærceller, insektceller eller planteceller som bakgrunns-cellelinje for frembringelse av de omarbeidede vertsceller ifølge oppfinnelsen.
[01 49] Oppfinnelsen er forutsett å omfatte hvilke som helst omarbeidede vertsceller som uttrykker et polypeptid med GnTIII-aktivitet, innbefattende et fusjonspolypeptid som omfatter Golgi-lokalisasjonsdoménet av et heterologt polypeptid som befinner seg i Golgi-apparatet, som definert her i dokumentet.
[0150] Én elier flere nukleinsyrer som koder for et polypeptid med GnTI II-aktivitet, kan uttrykkes under kontroll av en konstitutiv promoter, eller alternativt et regulert ekspresjonssystem. Slike systemer er velkjente på området og innbefatter systemene omtalt ovenfor. Hvis flere forskjellige nukleinsyrer som koder for fusjonspolypeptider med GnTI I l-aktivitet, og som omfatter Golgi-lokalisasjonsdoménet av et heterologt polypeptid som befinner seg i Golgi-apparatet, omfattes i vertscellesystemet, kan noen av dem uttrykkes under kontroll av en konstitutiv promoter, mens andre uttrykkes under kontroll av en regulert promoter.
Ekspresjonsnivåer av fusjonspolypeptidene med GnTI I l-aktivitet bestemmes ved metodene som er generelt kjent på området, innbefattende Western blot-analyse, Northern blot-analyse, reportergen-ekspresjonsanalyse eller måling av GnTIII-aktivitet. Alternativt kan det anvendes et lektin som bindes til biosyntetiske produkter av GnTIII, for eksempel E4-PHA-lektin. Alternativt kan det anvendes en funksjonsanalyse som måler den økte Fc-reseptor-binding eller øket effektorfunksjon formidlet av antistoffer dannet av cellene som er omarbeidet med nukleinsyren som koder for et polypeptid med GnTI I l-aktivitet.
Identifikasjon av transfektanter eller transformanter som uttrykker proteinet med et modifisert glykosyleringsmønster
[01 51 ] Vertscellene som inneholder kodingssekvensen for et kimærisk ABM med hovedsakelig samme bindingsspesifisitet som for muse-B-Ly1 -antistoffet, og som uttrykker de biologisk aktive genprodukter, kan identifiseres ved minst fire generelle fremgangsmåter: (a) DNA-DNA- eller DNA-RNA-hybridisering; (b) tilstedeværelse eller fravær av "markør<">-genfunksjoner; (c) fastsettelse av nivået av transkripsjon målt ved ekspresjon av de respektive mRNA-transkripter i vertscellen; og (d) påvisning av genproduktet målt ved immunanalyse eller ved dets biologiske aktivitet.
[0152] Ved den første fremgangsmåte kan tilstedeværelsen av kodingssekvensen for et kimærisk ABM med hovedsakelig samme bindingsspesifisitet som muse-B-Ly1 -antistoffet, og kodingssekvensen for polypeptidet med GnTIII-aktivitet påvises ved DNA-DNA- eller DNA-RNA-hybridisering under anvendelse av prober omfattende nukleotidsekvenser som er homologe med henholdsvis de respektive kodingssekvenser eller deler eller derivater derav.
[0153] Ved den andre fremgangsmåte kan det rekombinante ekspresjonsvektor/verts-system identifiseres og selekteres basert på tilstedeværelse eller fravær av visse "markør"-genfunksjoner (f.eks. thymidinkinaseaktivitet, resistens overfor antibiotika, resistens overfor metotreksat, transformasjons-fenotype, okklusjons-legemedannelse i baculovirus, osv.). Hvis for eksempel kodingssekvensen for ABM ifølge oppfinnelsen, eller et fragment derav, og kodingsssekvensen for polypeptidet med GnTI II -aktivitet innføres i en markørgensekvens av vektoren, kan rekombinanter inneholdende de respektive kodingssekvenser identifiseres ved fraværet av markørgenfunksjonen. Alternativt kan et markørgen anbringes i tandem med kodingssekvensene under kontroll av den samme eller annen promoter anvendt til regulering av ekspresjonen av kodingssekvensene. Ekspresjon av markøren som svar på induksjon eller seleksjon angir ekspresjon av kodingssekvensen for ABM ifølge oppfinnelsen og kodingssekvensen for polypeptidet med GnTIII-aktivitet.
[0154] Ved den tredje fremgangsmåte kan transkripsjonsaktivitet for kodingsregionen for ABM ifølge oppfinnelsen, eller et fragment derav, og kodingssekvensen for polypeptidet med GnTIII-aktivitet, fastsettes ved hybridiseringsforsøk. For eksempel kan RNA isoleres og analyseres ved hjelp av Northern blot under anvendelse av en probe som er homolog til kodingssekvensene for ABM ifølge oppfinnelsen, eller et fragment derav, og kodingssekvensen for polypeptidet med GnTIII-aktivitet eller spesielle deler derav. Alternativt kan total mengde nukleinsyrer i vertscellen ekstraheres og analyseres med henblikk på hybridisering til slike prober.
[01 55] Ved den fjerde fremgangsmåte kan ekspresjonen av proteinproduktene fastsettes immunologisk, for eksempel ved Western blot, immunanalyser så som radioimmunpresipitasjon, enzymbundne immunanalyser og liknende. Den endelige test angående vellykkethet av ekspresjonssystemet innbefatter imidlertid påvisning av de biologisk aktive genprodukter.
Frembringelse og anvendelse av ABM med øket effektorfunksjon innbefattende antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet
[0156] Ved foretrukne utførelsesformer tilveiebringer foreliggende oppfinnelse glykoformer av kimæriske ABM med hovedsakelig samme bindingsspesifisitet som for muse-B-Ly1 -antistoffet og med øket effektorfunksjon innbefattende antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet. Glykosyleringsomarbeiding av antistoffer er beskrevet tidligere. Se f.eks. US-patent nr. 6 602 684, i sin helhet medtatt her i dokumentet som referanse.
[0157] Kliniske forsøk angående ukonjugerte monoklonale antistoffer (mAb) for behandling av noen typer kreft har nylig gitt oppmuntrende resultater. Dillman, Cancer Biother. Radiopharm. 12:223-25 (1997); Deo et at, Immunology Today 18:127 (1997). Et kimærisk, ukonjugert lgG1 er godkjent for lavgradig eller follikulært ikke-Hodgkins B-celle-lymfom. Dillman, Cancer Biother. & Radiopharm. 12:223-25 (1997), mens et annet ukonjugert mAb, et humanisert lgG1 som søker mot faste brysttumorer, også har vist lovende resultater i kliniske forsøk fase III. Deo et al., Immunology Today 18:127 (1997). Antigenene for disse to mAb uttrykkes sterkt i sine respektive tumorceller, og antistoffene formidler potent tumorødeleggelse ved effektorceller in vitro og in vivo. I motsetning til dette kan mange andre ukonjugerte mAb med fine tumorspesifisiteter ikke trigge effektorfunksjoner med tilstrekkelig potens til at det er klinisk anvendelig. Frost et al., Cancer 80:317-33 (1997); Surfus et al., J. Immunother. 19:184-91 (1996). Når det gjelder noen av disse svakere mAb, blir hjerper-cytokinterapi testet for tiden. Tilsetting av cytokiner kan stimulere antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet (ADCC) ved øking av aktiviteten og antallet av sirkulerende lymfocytter. Frost et al., Cancer 80:317-33 (1997); Surfus etat, J. Immunother. 19:184-91 (1996). ADCC, et lytisk angrep på antistoff-målsøkte celler, trigges ved binding av leukocyttreseptorer til den konstante region (Fc) av antistoffer.
Deo et al., Immunology Today 18:127 (1997).
[0158] En annen, men komplementerende, fremgangsmåte for øking av ADCC-aktiviteten av ukonjugerte lgG1 er å omarbeide Fc-regionen av antistoffet. Proteinomarbeidingsundersøkelser har vist at FcyR interagerer med den lavere hengselregion av IgG CH2-doménet. Lund et al., J. Immunol. 157:4963-69 (1996). FcyR-binding fordrer imidlertid også tilstedeværelse av oligosakkarider som er kovalent knyttet til det konserverte Asn 297 i CH2-regionen. Lund et al., J. Immunol. 157:4963-69 (1996); Wright og Morrison, Trends Biotech. 15:26-31 (1997), noe som tyder på at både oligosakkarid og polypeptid bidrar direkte til interaksjonssetet, eller at oligosakkaridet trenges for opprettholdelse av en aktiv CH2-polypeptidkonformasjon. Modifikasjon av oligosakkaridstrukturen kan derfor utforskes som middel for å øke affiniteten ved interaksjonen.
[0159] Et IgG-molekyl bærer to N-bundne oligosakkarider i Fcregionen, ett på hver tung kjede. Som hvilket som helst glykoprotein, frembringes et antistoff som en populasjon av glykoformer som har samme polypeptidskjelett, men som har forskjellige oligosakkarider knyttet til glykosyleringssetene. Oligosakkaridene som normalt finnes i Fc-regionen av serum-IgG, er av kompleks toantennetype (Wormald et al., Biochemistry 36:130-38 (1997), med et lavt nivå av terminal sialinsyre og todelende N-acetylglukosamin (GlnNAc), og en variabel grad av terminal galaktosylering og kjerne-fukosylering. Noen undersøkelser tyder på at den minimale karbohydratstruktur som trenges for FcyR-binding, ligger innenfor oligosakkaridkjernen. Lund et al., J. Immunol. 157:4963-69 (1996).
[0160] De muse- eller hamsteravledede cellelinjer som anvendes i industrien og akademien for dannelse av ukonjugerte terapeutiske mAb, knytter normalt de fordrede oligosakkarid-determinanter til Fc-seter. IgG som uttrykkes i disse cellelinjer, mangler imidlertid det todelende GlcNAc som finnes i små mengder i serum-IgG. Lifely et al., Glycobiology 318:813-22 (1995). I motsetning til dette er det nylig observert at et rottemyelomfrembrakt, humanisert lgG1 (CAMPATH-1 H) bar et todelende GlcNAc i noen av sine glykoformer. Lifely et al., Glycobiology 318:813-22 (1995). Det rottecelleavledede antistoff nådde en liknende maksimal in vitro-ADCC-aktivitet som CAMPATH-1 H-antistoffer dannet i standardcellelinjer, men i betydelig lavere antistoffkonsentrasjoner.
[0161] CAMPATH-antigenet er normalt til stede i høye nivåer på lymfomceller, og dette kimæriske mAb har høy ADCC-aktivitet i fravær av et todelende GlcNAc. Lifely et al., Glycobiology 318:81 3-22 (1995). I den N-bundne glykosyleringsvei tilføyes et todelende GlcNAc ved GnTIII.
Schachter, Biochem. Cell Biol. 64:163-81 (1986).
[0162] Tidligere undersøkelser anvendte en enkelt antistoffproduserende CHO-cellelinje som på forhånd var blitt omarbeidet til på en eksternt regulert måte å uttrykke forskjellige nivåer av et klonet GnTIII-genenzym (Umana, P., et al., Nature Biotechnol. 17:176-180 (1999)). Denne fremgangsmåte påviste for første gang en meget nøyaktig korrelasjon mellom ekspresjon av GnTIII og ADCC-aktiviteten av det modifiserte antistoff. Oppfinnelsen forutsetter således også et rekombinant, kimærisk antistoff eller et fragment derav med bindingsspesifisitet som for muse-B-Ly1 -antistoffet, med forandret glykosylering som resultat av øket GnTIII-aktivitet. Den økte GnTIII-aktivitet resulterer i en økning i prosentandelen av todelte oligosakkarider, samt en reduksjon i prosentandelen av fukoserester, i Fc-regionen av ABM. Dette antistoff, eller fragmentet derav, har øket Fcreseptor-bindende affinitet og øket effektorfunksjon. Oppfinnelsen er dessuten rettet mot et antistoff-fragment og fusjonsproteiner omfattende en region som er ekvivalent med Fc-regionen av immunglobuliner.
Terapeutiske anvendelser av ABM fremstilt i henhold til fremgangsmåtene ifølge oppfinnelsen.
[0163] ABM ifølge foreliggende oppfinnelse kan anvendes alene til å målsøke og drepe tumorceller in vivo. ABM kan også anvendes i forbindelse med et passende terapeutisk middel til behandling av humant karsinom. For eksempel kan ABM anvendes i kombinasjon med standard- eller vanlige behandlingsmetoder så som kjemoterapi eller bestrålings-terapi, eller de kan konjugeres eller knyttes til et terapeutisk medikament eller toksin, samt til et lymfokin eller en tumorinhiberende vekstfaktor, for avgivelse av det terapeutiske middel til stedet for karsinomet. Konjugatene av ABM ifølge denne oppfinnelse som er av største betydning, er (1) immuntoksiner (konjugater av ABM og en cytotoksisk del) og (2) merkede (f. eks. radiomerkede, enzym-merkede eller fluorkrom-merkede) ABM hvor merkesubstansen tilveiebringer et middel for identifisering av immunkomplekser som innbefatter det merkede ABM. ABM kan også anvendes til indusering av lyse gjennom den naturlige komplementprosess, og til å interagere med antistoffavhengige cytotoksiske celler som normalt er til stede.
[0164] Den cytotoksiske del av immuntoksinet kan være et cytotoksisk medikament eller et enzymatisk aktivt toksin av bakterie- eller planteopprinnelse, eller et enzymatisk aktivt fragment ("A-kjede") av et slikt toksin. Enzymatisk aktive toksiner og fragmenter derav som anvendes, er difteri A-kjede, ikke-bindende aktive fragmenter av difteritoksin, eksotoksin A-kjede (fra Pseudomonas aeruginosa), ricin A-kjede, abrin A-kjede, modeccin A-kjede, alfa-sarcin, Aleurites fordii-proteiner, diantinproteiner, Phytolacca americana-proteiner (PAPI, PAPII og PAP-S), momordica charantia-inhibitor, curcin, crotin, sapaonaria officinalis-inhibitor, gelonin, mitogellin, restrictocin, fenomycin og enomycin. Ved en annen utførelsesform blir ABM konjugert til småmolekylære antikreftmedikamenter. Konjugater av ABM og slike cytotoksiske deler lages under anvendelse av forskjellige bifunksjonelle proteinkoplingsmidler. Eksempler på slike reagenser er SPDP, IT, bifunksjonelle derivater av imidoestere så som dimetyladipimidat-HCI, aktive estere så som disuksinimidylsuberat, aldehyder så som glutaraldehyd, bisazidoforbindelser så som bis(p-azidobenzoyl)heksandiamin, bisdiazoniumderivater så som bis(p-diazoniumbenzoyl)-etylendiamin, diisocyanater så som tolylen-2,6-diisocyanat, og bis-aktive fluorforfindelser så som 1 ,5-difluor-2,4-dinitrobenzen. Den lyserende del av et toksin kan knyttes til Fab-fragmentet av ABM. Ytterligere passende toksiner er kjent på området, som vist i f. eks. publisert US-patentsøknad nr. 2002/0128448, i sin helhet medtatt her i dokumentet som referanse.
[0165] Ved én utførelsesform blir et kimærisk, glyko-omarbeidet ABM med hovedsakelig samme bindingsspesifisitet som for muse-B-Ly1-antistoffet, konjugert til ricin A-kjede. Mest fordelaktig blir ricin A-kjeden deglykosylert og frembrakt ved rekombinante metoder. En fordelaktig metode for fremstilling av ricin-immuntoksinet er beskrevet i Vitetta et al., Science 238, 1098 (1987), medtatt her i dokumentet som referanse.
[0166] Anvendt til å drepe humane kreftceller in vitro for diagnostiske formål vil konjugatene typisk bli tilsatt til celledyrkningsmediet i en konsentrasjon på minst ca. 10 nM. Formuleringen og administreringsmåten for in vitro-anvendelse er ikke avgjørende. Vandige formuleringer som er kompatible med dyrknings- eller perfusjonsmediet, vil normalt bli anvendt. Cytotoksisitet kan avleses ved konvensjonelle teknikker for bestemmelse av tilstedeværelse eller graden av kreft.
[0167] Som omtalt ovenfor, kan det lages at cytotoksisk radiofarmasøytisk middel for behandling av kreft ved konjugering av en radioaktiv isotop (f.eks. I, Y, Pr) til et kimærisk, glyko-omarbeidet ABM med hovedsakelig samme bindingsspesifisitet som for muse-B-Ly1 -antistoffet. Betegnelsen "cytotoksisk del" anvendt her i dokumentet er ment å innbefatte slike isotoper.
[0168] Ved en annen utførelsesform fylles liposomer med et cytotoksisk medikament, og liposomene belegges med ABM ifølge foreliggende oppfinnelse. På grunn av at det er mange CD20-molekyler på overflaten av den maligne B-celle, muliggjør denne metode avgivelse av store mengder medikament til den riktige celletype.
[0169] Teknikker for konjugering av slike terapeutiske midler til antistoffer er velkjente (se f.eks. Amon et al., "Monoclonal Antibodies for Immunotargeting of Drugs in Cancer Therapy", i Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Reisfeld et al. (red.), s. 243-56 (Alan R. Liss, Inc. 1985); Hellstrom et al., "Antibodies For Drug Delivery", i Controlled Drug Delivery (2. utg.), Robinson et al. (red.), s. 623-53 (Marcel Dekker, Inc. 1987); Thorpe, "Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review", i Monoclonal Antibodies 84: Biological And Clinical Applications, Pinchera et al. (red.), s. 475-506 (1985); og Thorpe et al., "The Preparation And Cytotoxic Properties Of Antibody-Toxin Conjugates", Immunol. Rev., 62:1 19-58 (1982)).
[01 70] Enda andre terapeutiske anvendelser for ABM ifølge oppfinnelsen innbefatter konjugering eller binding, f.eks. ved rekombinante DNA-teknikker, til et enzym som er i stand til å omdanne en prodroge til et cytotoksisk medikament, og anvendelse av dette antistoff-enzym-konjugat i kombinasjon med prodrogen til omdannelse av prodrogen til et cytotoksisk middel på tumorstedet (se f.eks. Senter et al., "Anti-Tumor Effects of Antibody-alkaline Phosphatase", Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:4842-46 (1988); "Enhancement of the in vitro and in vivo Antitumor Activities of Phosphorylated Mitocycin C and Etoposide Derivatives by Monoclonal Antibody-Alkaline Phosphatase Conjugates", Cancer Research 49:5789-5792 (1989); og Senter, "Activation of Prodrugs by Antibody-Enzyme Conjugates: A New Approach to Cancer Therapy," FASEB J. 4:188-193 (1990)).
[0171] Enda en annen terapeutisk anvendelse for ABM ifølge oppfinnelsen innbefatter anvendelse, enten ukonjugert, i nærvær av komplement, eller som en del av et antistoff-medikament- eller antistoff-toksin-konjugat, til fjerning av tumorceller fra benmargen hos kreftpasienter. I henhold til denne fremgangsmåte kan autolog benmarg utspyles ex vivo ved behandling med antistoffet, og margen infunderes tilbake i pasienten [se f.eks. Ramsay et al., "Bone Marrow Purging Using Monoclonal Antibodies", J Clin. Immunol., 8(2):81-88 (1988)].
[0172] Det er videre forutsett at oppfinnelsen omfatter et enkeltkjedet immuntoksin omfattende antigenbindende doméner som muliggjør
hovedsakelig samme bindingsspesifisitet som muse-B-Ly1 -antistoffet (f.eks. polypeptider omfattende CDR av muse-B-Ly1 -antistoffet) og videre omfatter et toksin-polypeptid. Enkeltkjede-immuntoksinene ifølge oppfinnelsen kan anvendes til behandling av humant karsinom in vivo.
[0173] Likeledes kan det anvendes et fusjonsprotein omfattende minst den antigenbindende region av et ABM ifølge oppfinnelsen knyttet til minst en funksjonelt aktiv del av et andre protein med antitumoraktivitet, f.eks. et lymfokin eller onkostatin, til behandling av humant karsinom in vivo.
[0174] Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en fremgangsmåte for selektiv dreping av tumorceller som uttrykker CD20. Denne metode omfatter omsetting av immunkonjugatet (f.eks. immuntoksinet) ifølge oppfinnelsen
med tumorcellene. Disse tumorceller kan være fra et humant karsinom.
[0175] Denne oppfinnelse tilveiebringer dessuten en metode for behandling av karsinomer (for eksempel humane karsinomer) in vivo. Denne metode omfatter administrering til et individ av en farmasøytisk effektiv
mengde av et preparat inneholdende minst ett av immunkonjugatene (f.eks. immuntoksinet) ifølge oppfinnelsen.
[0176] Ved et ytterligere aspekt er oppfinnelsen rettet mot en forbedret metode for behandling av B-celle-proliferative forstyrrelser innbefattende B-celle-lymfom, samt en autoimmun sykdom frembrakt helt eller delvis av -patogene autoantistoffer, basert på B-celle-uttømming, omfattende administrering av en terapeutisk effektiv mengde av et ABM ifølge
foreliggende oppfinnelse til et menneske som trenger det. Ved en foretrukket utførelsesform er ABM et glyko-omdannet anti-CD20-antistoff med en bindingsspesifisitet som er hovedsakelig den samme som for muse-B-Ly1 antistoffet. Ved en annen foretrukket utførelsesform er antistoffet humanisert. Eksempler på autoimmune sykdommer eller forstyrrelser innbefatter, men er ikke begrenset til, immunmedierte trombocytopenier, så som akutt idiopatisk trombocytopenisk purpura og kronisk idiopatisk trombocytopenisk purpura, dermatomyositt, Sydenhams chorea, lupusnefritt, reumatisk feber, polyglandulære syndromer, Henoch-Schonlein purpura, post-streptokokknefritt, erythema nodosum, Takayasus arteritt, Addisons sykdom, erythema multiforme, polyarteritis nodosa, ankyloserende spondylitt, Goodpastures syndrom, tromboangitis ubiterans, primær biliser cirrhose, Hashimotos tyreoiditt, tyreotoksikose, kronisk aktiv hepatitt, polymyositt/dermatomyositt, polykondritt, pamphigus vulgaris, Wegeners granulomatose, membranes nefropati, amyotrofisk lateral sklerose, tabes dorsalis, polymyaglia, perniciøs anemi, "rapidly progressive" glomerulonefritt og fibroserende alveolitt, inflammatoriske responser så som inflammatoriske hudsykdommer innbefattende psoriasis og dermatitt (f.eks. atopisk dermatitt); systemisk skleroderma og sklerose; responser forbundet med inflammatorisk tarmsykdom (så som Crohns sykdom og ulcerøs kolitt); åndenødssyndrom (inbefattende akutt åndenødssyndrom; ARDS); dermatitt; meningitt; encefalitt; uveitt; kolitt; glomerulonefritt; allergiske tilstander så som eksem og astma, og andre tilstander som innbefatter infiltrasjon av T-celler og kroniske inflammatoriske responser; aterosklerose; leukocytt-adhesjonsdefekt; reumatoid artritt; systemisk lupus erythematosus (SLE); diabetes mellitus (f.eks. diabetes mellitus type 1 , eller insulinavhengig diabetes mellitus); multippel sklerose; Reynauds syndrom; autoimmun tyreoiditt; allergisk encefalomyelitt; Sjogrens syndrom; juvenil diabetes; og immunresponser forbundet med akutt og forsinket hypersensitivitet mediert ved cytokiner og T-lymfocytter som typisk finnes ved tuberkulose, sarkoidose, polymyositt, granulomatose og vaskulitt; perniciøs anemi (Addisons sykdom); sykdommer som innbefatter leukocytt-diapedese; inflammatorisk forstyrrelse i sentralnervesystemet (CNS); multippelt organskadesyndrom; hemolytisk anemi (innbefattende, men ikke begrenset til, kryoglobulinemi eller Coombs positive anemi); myasthenia gravis; antigen-antistoff-kompleks-medierte sykdommer; anti-glomerulær basalmembran-sykdom; antifosfolipidsyndrom; allergisk neuritt; Graves' sykdom; myastenisk Eaton-Lamberts syndrom; bulløst pemfigoid; pemfigus; autoimmune polyendokrinopatier; Reiters sykdom; "stiff man"-syndrom; Behcets sykdom; kjempecellearteritt; immunkompleks-nefritt; IgA-nefropati; IgM-polyneuropatier; idiopatisk trombocytopenisk purpura (ITP) eller autoimmun trombocytopeni osv. Ved dette aspekt ved oppfinnelsen anvendes ABM ifølge oppfinnelsen til tømming av blodet for normale B-celler i et langvarig tridsrom.
[0177] I henhold til praksisen ifølge denne oppfinnelsen kan individet være et menneske-, heste-, grise-, bovint, muse-, hunde-, katte- og fugleindivid. Andre varmblodige dyr inngår også i denne oppfinnelse.
[0178] Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer videre metoder for hemming av veksten av humane tumorceller, behandling av en tumor i et individ og behandling av en proliferativ sykdomstype hos et individ. Disse metoder omfatter administrering til individet av en effektiv mengde av preparatet ifølge oppfinnelsen.
[0179] Det er derfor klart at foreliggende oppfinnelse omfatter farmasøytiske preparater, kombinasjoner og metoder for behandling av humane karsinomer, så som et B-celle-lymfom. For eksempel innbefatter oppfinnelsen farmasøytiske preparater for anvendelse ved behandling av humane karsinomer, omfattende en farmasøytisk effektiv mengde av et antistoff ifølge foreliggende oppfinnelse og en farmasøytisk akseptabel bærer.
[0180] ABM-preparatene ifølge oppfinnelsen kan administreres under anvendelse av konvensjonelle administreringsmåter innbef attende, men ikke begrenset til, intravenøs, intraperitoneal, oral, intralymfatisk eller administrering direkte i tumoren. Intravenøs administrering er foretrukket.
[01 81 ] Ved ett aspekt ved oppfinnelsen tilberedes terapeutiske utformninger inneholdende ABM ifølge oppfinnelsen for lagring ved blanding av et antistoff med den ønskede grad av renhet med eventuelle farmasøytisk akseptable bærere, tilsetningsmidler eller stabilisatorer (Remington's Pharmaceutical Sciences 16. utgave, Osol, A. red. (1980)), i form av lyofiliserte formuleringer eller vandige løsninger. Akseptable bærere, tilsetningsmidler eller stabilisatorer er ikke-toksiske for mottakere i de anvendte doser og konsentrasjoner, og innbefatter buffere så som fosfat, citrat og andre organiske syrer; antioksidanter innbefattende askorbinsyre og metionin; konserveringsmidler (så som oktadekyldimetylbenzyl-ammoniumklorid; heksametoniumklorid; benzalkoniumklorid, benzetoniumklorid; fenol, <’ >butyl- eller benzylalkohol; alkylparabener så som metyl- eller propylparaben; katekol; resorcinol; cykloheksanol; 3-pentanol; og m-kresol); lavmolekylære . (mindre enn ca. 10 rester) polypeptider; proteiner, så som serumalbumin, gelatin eller immunglobuliner; hydrofile polymerer så som polyvinylpyrrolidon; aminosyrer så som glycin, glutamin, asparagin, histidin, arginin eller lysin; monosakkarider, disakkarider og andre karbohydrater innbefattende glukose, mannose eller dekstriner; chelateringsmidler så som EDTA; sukkerarter så som sakkarose, mannitol, trehalose og sorbitol; saltdannende mot-ioner så som natrium; metallkomplekser (f.eks. Zn-protein-komplekser); og/eller ikkeioniske overflateaktive midler så som TWEEN™, PLURONICS™ eller polyetylenglykol (PEG).
[0182] Eksempler på anti-CD20-ABM-formuleringer er beskrevet i W098/56418, uttrykkelig medtatt her i dokumentet som referanse. Denne publikasjon beskriver en flytende flerdoseformulering omfattende 40 mg/ml rituximab, 25 mM acetat, 150 mM trehalose, 0,9% benzylalkohol, 0,02% polysorbat 20 ved pH 5,0 som har en minimal holdbarhet på to års lagring ved 2-8°C. En annen aktuell anti-CD20-formulering omfatter 10 mg/ml rituximab i 9,0 mg/ml natriumklorid, 7,35 mg/ml natriumcitrat-dihydrat, 0,7 mg/ml polysorbat 80 og sterilt vann for injeksjon, pH 6,5. Ved foreliggende oppfinnelse vil RITUXAN® bli erstattet med et ABM ifølge foreliggende oppfinnelse.
[0183] Lyofiliserte formuleringer tilpasset for subkutan administrering er beskrevet i W097/04801 . Slike lyofiliserte formuleringer kan rekondisjoneres med et egnet fortynningsmiddel til høy proteinkonsentrasjon, og den rekondisjonerte formulering kan administreres subkutant til pattedyret som skal behandles i det foreliggende.
[0184] Formuleringen i det foreliggende kan også inneholde mer enn én aktiv forbindelse etter som det er nødvendig for den spesielle indikasjon som behandles, fortrinnsvis slike med komplementære aktiviteter som ikke på uheldig måte påvirker hverandre. Det kan for eksempel være ønskelig videre å tilveiebringe et cytotoksisk middel, et kjemoterapeutisk middel, et cytokin eller et immunundertrykkende middel (f.eks. et middel som virker på T-celler, så som cyklosporin eller et antistoff som binder T-celler, f. eks. ett som binder LFA-1). Den effektive mengde av slike andre midler avhenger av mengden av antagonist som finnes i formuleringen, typen sykdom eller forstyrrelse eller behandling, samt andre faktorer omtalt ovenfor. Disse anvendes vanligvis i samme doseringer og med administreringsmåter som anvendt i det foregående, eller omtrent fra 1 til 99% av de hittil anvendte doser.
[0185] De aktive bestanddeler kan også innfanges i mikrokapsler som for eksempel er fremstilt ved koacervasjonsteknikker eller ved grenseflatepolymerisering, for eksempel hydroksymetylcellulose, eller henholdsvis gelatin-mikrokapsler og poly(metylmetakrylat)-mikrokapsler, i kolloidale medikamentavgivelsessystemer (for eksempel liposomer, albuminmikrokuler, mikroemulsjoner, nanopartikler og nanokapsler) eller i makroemulsjoner. Slike teknikker er beskrevet i Remington's Pharmaceutical Sciences 16. utgave, Osol, A. red. (1980).
[0186] Det kan fremstilles preparater med langvarig frigjøring. Egnede eksempler på preparater med langvarig frigjøring innbefatter semipermeable matrikser av faste hydrofobe polymerer inneholdende antagonisten, hvilke matrikser er i form av formede artikler, f. eks. filmer, eller mikrokapsler.
Eksempler på matrikser for langvarig frigjøring innbefatter polyestere, hydrogeler (for eksempel poly(2-hydroksyetylmetakrylat), eller poly(vinylalkohol)), polylaktider (US-patent nr. 3773 919), kopolymerer av L-glutaminsyre og yetyl-L-glutamat, ikke-nedbrybart etylen-vinylacetat, nedbrytbare melkesyre-glykolsyre-kopolymerer så som LUPRON DEPOT™ (injiserbare mikrokuler bestående av melkesyre-glykolsyre-kopolymer og leuprolidacetat), og poly-D-(-)-3-hydroksysmørsyre.
[0187] Formuleringene for anvendelse for in vivo-administrering må være sterile. Dette oppnås lett ved filtrering gjennom sterilfiltreringsmembraner.
[0188] Preparatene ifølge oppfinnelsen kan være i mange forskjellige doseringsformer som innbefatter, men er ikke begrenset til, flytende løsninger eller suspensjoner, tabletter, piller, pulvere, stikkpiller, polymere mikrokapsler eller mikrovesikler, liposomer og injiserbare eller infunderbare løsninger. Den foretrukne form avhenger av administreringsmåten og den terapeutiske anvendelse.
[0189] Preparatene ifølge oppfinnelsen innbefatter også fortrinnsvis konvensjonelle farmasøytisk akseptable bærere og adjuvanser kjent på området, så som humant serumalbumin, ionebyttere, aluminiumoksid, lecitin, buffersubstanser så som fosfater, glycin, sorbinsyre, kaliumsorbat, og salter eller elektrolytter så som protaminsulfat.
[0190] Den mest effektive administreringsmåte og doseringsregime for de farmasøytiske preparater ifølge denne oppfinnelse avhenger av graden og forløpet av sykdommen, pasientens helse og respons overfor behandling og den behandlende leges bedømmelse. Dosene av preparatene bør følgelig titreres til den individuelle pasient. Ikke desto mindre vil en effektiv dose av preparatene ifølge denne oppfinnelse vanligvis være i området fra ca. 0,01 til ca. 2000 mg/kg.
[0191] Molekylene beskrevet her i dokumentet kan være i mange forskjellige doseringsformer som innbefatter, men er ikke begrenset til, flytende løsninger eller suspensjoner, tabletter, piller, pulvere, stikkpiller, polymere mikrokapsler eller mikrovesikler, liposomer, og injiserbare eller infunderbare løsninger. Den foretrukne form avhenger av administreringsmåten og den terapeutiske anvendelse.
[0192] Preparatet omfattende et ABM ifølge foreliggende oppfinnelse vil bli formulert, dosert og administrert på en måte i overensstemmelse med god medisinsk praksis. Faktorer for overveielse i denne forbindelse innbefatter den spesielle sykdom eller forstyrrelse som behandles, det spesielle pattedyr som behandles, den kliniske tilstand for den individuelle pasient, forløpet av sykdommen eller forstyrrelsen, stedet for avgivelse av midlet, administreringsmetoden, timeplanen for administrering og andre faktorer kjent for praktiserende leger. Den terapeutisk effektive mengde av antagonisten som skal administreres, vil bli styrt av slike hensyn.
[0193] Som et generelt forslag vil den terapeutisk effektive mengde av antistoffet administrert parenteralt pr. dose være i området ca. 0,1 til 20 mg/kg pasient-kroppsvekt pr. dag, hvor det typiske innledende område for anvendt antagonist er i området ca. 2-10 mg/kg.
[01 94] Ved en foretrukket utførelsesform er ABM et antistoff, fortrinnsvis et humanisert antistoff. Egnede doser for et slikt ukonjugert antistoff er for eksempel i området fra ca. 20 mg/m<2 >til ca. 1000 mg/m<2>. Ved én utførelsesform.er doseringen av antistoffet forskjellig fra det som for tiden anbefales for RITUXAN®. Man kan for eksempel administrere til pasienten én eller flere doser med hovedsakelig mindre enn 375 mg/m<2 >av antistoffet, f. eks. hvor dosen er i området fra ca. 20 mg/m<2 >til ca. 250 mg/m<2>, for eksempel fra ca. 50 mg/m<2 >til ca. 200 mg/m<2>.
[0195] Man kan videre administrere én eller flere innledende doser av antistoffet, fulgt av én eller flere påfølgende doser, hvor mg/m<2 >dose for antistoffet i påfølgende dose(r) overstiger mg/m<2 >dose av antistoffet i den
(de) innledende dose(r). Den innledende dose kan for eksempel være i området fra ca. 20 mg/m<2 >til ca. 250 mg/m<2 >(f.eks. fra ca. 50 mg/m<2 >til ca. 200 mg/m<2>), og den påfølgende dose kan være i området fra ca. 250 mg/m<2 >til ca.
1000 mg/m<2>.
[0196] Som angitt ovenfor, er imidlertid disse foreslåtte mengder av ABM gjenstand for en stor del terapeutisk skjønn. Nøkkelfaktoren ved utvelging av en passende dose og program er det oppnådde resultat, som angitt ovenfor. Det kan for eksempel trenges relativt høyere doser innledningsvis for behandling av pågående og akutte sykdommer. For oppnåelse av de mest effektive resultater, avhengig av sykdommen eller forstyrrelsen, blir antagonisten administrert så nær det første tegn på, diagnostisering av, tilsynekomst eller fremkomst av sykdommen eller forstyrrelsen som mulig eller under remisjon av sykdommen eller forstyrrelsen.
[0197] ABM ifølge foreliggende oppfinnelse administreres på hvilken som helst egnet måte, innbefattende parenteralt, subkutant, intraperitonealt, intrapulmonalt og intranasalt, og, hvis ønskelig for lokal immunsuppressiv behandling, intralesjonal administrering. Parenterale infusjoner innbefatter intramuskulær, intravenøs, intraarteriell, intraperitoneal eller subkutan administrering. Dessuten kan antagonist passende administreres ved pulsinfusjon, f.eks. med avtakende doser av antagonisten. Doseringen gis fortrinnsvis ved injeksjoner, mest foretrukket intravenøs eller subkutan injeksjon, avhengig delvis av om hvorvidet administreringen er kort eller kronisk.
[0198] Man kan administrere andre forbindelser, så som cytotoksiske midler, kjemoterapeutiske midler, immunsuppressive midler og/eller cytokiner med antagonistene i det foreliggende. Den kombinerte administrering innbefatter koadministrering under anvendelse av separate formuleringer eller en enkelt farmasøytisk formulering, og på hverandre følgende administrering i hvilken som helst rekkefølge, hvor det fortrinnsvis er et tidsrom hvor begge (eller alle) aktive midler samtidig utøver sine biologiske aktiviteter.
: [0199] Det vil være klart at dosen av preparatet ifølge oppfinnelsen som trenges for oppnåelse av helbredelse, kan reduseres ytterligere med tidsplanoptimalisering.
[0200] I henhold til praksisen ifølge oppfinnelsen kan den farmasøytiske bærer være en lipidbærer. Lipidbæreren kan være et fosfolipid. Videre kan lipidbæreren være en fettsyre. Lipidbæreren kan også være en detergent. Anvendt her i dokumentet er en detergent hvilken som helst substans som forandrer en væskes overflatespenning, generelt reduserer den.
[0201] Ved ett eksempel ifølge oppfinnelsen kan detergenten være en ikkeionisk detergent. Eksempler på ikke-ioniske detergenter innbefatter, men er ikke begrenset til, polysorbat 80 (også kjent som Tween 80 eller (polyoksyetylensorbitan-monooleat), Brij og Triton (for eksempel Triton WR-1339 og Triton A-20).
[0202] Detergenten kan alternativt være en ionisk detergent. Et eksempel på en ionisk detergent innbefatter, men er ikke begrenset til, alkyltrimetylammoniumbromid.
[0203] I henhold til oppfinnelsen kan lipidbæreren dessuten være et liposom. Anvendt i denne patentsøknad er et "liposom" hvilken som helst membranbundet vesikkel som inneholder hvilke som helst molekyler ifølge oppfinnelsen eller kombinasjoner derav.
[0204] Eksemplene nedenfor forklarer oppfinnelsen mer detaljert. Følgende preparater og eksempler er gitt for at fagfolk på området klarere skal kunne forstå og utøve foreliggende oppfinnelse. Foreliggende oppfinnelse er imidlertid ikke begrenset med hensyn til ramme ved de eksemplifiserte utførelsesformer, som kun er påtenkt som illustrasjoner av enkeltaspekter ved oppfinnelsen, og metoder som er funksjonelt ekvivalente, er innenfor oppfinnelsens ramme. Faktisk vil forskjellige modifikasjoner av oppfinnelsen, i tillegg til dem som er beskrevet her i dokumentet, bli åpenbare for fagfolk på området ut fra foranstående beskrivelse og de medfølgende tegninger. Slike modifikasjoner er påtenkt å ligge innenfor rammen for de tilknyttede krav.
EKSEMPLER
[BEMERK: Dersom ikke annet er spesifisert, er henvisninger til nummereringen av spesifikke aminosyrerest-stiilinger i følgende eksempler i henhold til Kabatnummereringssystemet].
EKSEMPEL 1
Materialer og metoder
Kloning og ekspresjon av rekombinant antistoff B-Ly1
[0205] B-Ly1 -uttrykkende hybridomceller ble dyrket i RPMI inneholdende 10% FBS og 4 mM L-glutamin. 6 x 10<6 >celler med levedyktighet > 90% ble høstet, og total-RNA ble isolert under anvendelse av et Qiagen RNAeasy midi-sett. cDNA som kodet for de variable lette og tunge kjeder av B-Ly1 , ble amplifisert ved RT-PCR. RT-PCR-reaksjonen ble utført under anvendelse av følgende betingelser: 30 min 50°C for førstestreng-cDNA syntese; 15 min 95°C begynnelsesdenaturering; 30 sykluser på 1 min 94°C, 1 min 45°C, 1 ,5 min 72°C; og et endelig forlengelsestrinn i 10 min ved 72°C. Den forventede størrelse av PCR-produktene ble bekreftet ved gel-elektroforese. PCR-produktene ble klonet i passende E. coli-vektorer, og DNA-sekvensering bekreftet at de variable lett- og tungkjede-kodende gener var isolert.
[0206] For konstruksjon av kimæriske B-Ly1-ekspresjonsvektorer ble syntesesignalsekvenser og passende restriksjonsseter koplet til de variable kjeder ved ytterligere PCR-reaksjoner. Etter en endelig bekreftelse av den riktige DNA-sekvens for de variable kjeder, ble de kombinert med de tilsvarende humane konstante lgG1 -regioner. Etter at genene var konstruert, ble de klonet under kontroll av av MPSV-promoteren og oppstrøms for et syntetisk polyA-sete, under anvendelse av to separate vektorer, én for hver kjede, som resulterte i plasmidene pETR1808 (tungkjede-ekspresjonsvektor) og pETR1813 (lettkjedeekspresjonsvektor). Hver vektor bar en EBV OriP-sekvens.
[0207] Kimærisk B-Ly1 ble frembrakt ved ko-transfektering av HEK293-EBNA-celler med vektorer pETR1 808 og pETR1813 under anvendelse av en kalsumfosfat-transfekteringsmetode. Eksponensielt voksende HEK293-EBNA-celler ble transfektert ved kalsiumfosfatmetoden. Cellene ble dyrket som tilheftende monolag-kulturer i T-kolber under anvendelse av DMEM-dyrkningsmedium supplert med 10% FCS, og ble transfektert når de var mellom 50 og 80% konfluente. For transfektering av en T75-kolbe ble 8 millioner celler utsådd 24 timer før transfektering i 14 ml DMEM-dyrkningsmedium supplert med FCS (i en endelig konsentrasjon på 10 volum%), 250 μg/ml neomycin, og cellene ble anbrakt ved 37°C i en inkubator med 5% CO2atmosfære natten over. For hver . T75-kolbe som skulle transfekteres ble det tilberedt en løsning av DNA, CaCI2 og vann ved blanding av 47 μg total plasmidvektor-DNA delt likt mellom lett- og tungkjede-ekspresjonsvektorene, 235 μl av en 1 M CaCI2-løsning og tilsetting av vann til et sluttvolum på 469 pl. Til denne løsning ble det tilsatt 469 μΙ av en løsning av 50 mM HEPES og 280 mM NaCI, 1 ,5 mM Na2HP04-løsning ved pH 7,05 ble tilsatt, og det ble umiddelbart blandet i 10 sek. og fikk stå ved romtemperatur i 20 sek. Suspensjonen ble fortynnet med 12 ml DMEM supplert med 2% FCS, og tilsatt til T75 i stedet for det eksisterende medium. Cellene ble inkubert ved 37°C og 5% C02 i ca. 17-20 timer, og medium ble deretter erstattet med 12 ml DMEM, 10% FCS. For frembringelse av umodifisert antistoff "chB-LyT<1 >ble cellene transfektert med bare antistoff-ekspresjonsvektorer pETR1808 og pETR1813 i et forhold på 1 :1. For fremstilling av det glyko-omarbeidede antistoff "chB-Ly1-ge" ble cellene ko-transfektert med fire plasmider, to for antistoffekspresjon (pETR1808 og pETR1813), ett for en fusjons-GnTIII-polypeptidekspresjon (pETR1519) og én for mannosidase ll-ekspresjon (pCLF9) i et forhold på henholdsvis 4:4:1 :1 . På dag 5 etter transfektering ble supematanten høstet og sentrifugert i 5 min ved 1200 omdr. pr. min., fulgt av en andre sentrifugering i 10 min ved 4000 omdr. pr. min., og holdt ved 4°C.
[0208] chB-Ly1 og chB-Ly1 -ge ble renset fra dyrkningssupematant under anvendelse av tre sekvensielle kromatografiske trinn, protein A-kromatografi, kationebytterkromatografi og et størrelsesutelukkelseskromatografitrinn på en Superdex 200-kolonne (Amersham Pharmacia) idet bufferen ble skiftet til fosfatbufret saltløsning, og toppen for monomert antistoff fra dette siste trinn ble oppsamlet. Antistoffkonsentrasjonen ble anslått under anvendelse av et spektrofotometer, ut fra absorbansen ved 280 nm.
Oligosakkaridanalyse
[0209] Oligosakkarider ble frigjort enzymatisk fra antistoffene ved PNGaseF-digerering, hvor antistoffene enten var immobilisert på en PVDF-membran eller i løsning.
[0210] Den resulterende digereringsløsning inneholdende de frigjorte oligosakkarider ble enten tilberedt direkte for MALDI/TOF-MS-analyse eller ytterligere nedbrutt med EndoH-glykosidase før prøvetilberedning for MALDI/TOF-MS-analyse.
Oligosakkaridfrigjøringsmetode for PVDF-membran-immobiliserte antistoffer [0211] Brønnene i en 96-brønnsplate laget av en PVDF- (Immobilon P, Millipore, Bedford, Massachusetts) membran ble fuktet med 100 μΙ metanol, og væsken ble trukket gjennom PVDF-membranen under anvendelse av vakuum påført på Multiscreen vakuum-manifolden (Millipore, Bedford, Massachusetts). PVDF-membranene ble vasket tre ganger med 300 μΙ vann. Brønnene ble deretter vasket med 50 μΙ RCM-buffer (8M urea, 360 mM Tris, 3,2 mM EDTA, pH 8,6). Mellom 30 og 40 pg antistoff ble tilsatt i en brønn inneholdende 10 μΙ RCM-buffer. Væsken i brønnen ble trukket gjennom membranen ved påføring av vakuum, og membranen ble deretter vasket to ganger med 50 μΙ RCM-buffer. Reduksjon av disulfidbroer ble utført ved tilsetting av 50 μΙ 0,1 M ditiotreitol i RCM og inkubering ved 37°C i 1 time.
[0212] Etter reduksjon ble det påført vakuum for fjerning av ditiotreitolløsningen fra brønnen. Brønnene ble vasket tre ganger med 300 μΙ vann før utførelse av karboksymetyleringen av cysteinrestene ved tilsetting av 50 μΙ 0,1 M jodeddiksyre i RCM-buffer og inkubering ved romtemperatur i mørke i 30 min.
[0213] Etter karboksymetylering ble brønnene påført vakuum og deretter vasket tre ganger med 300 μΙ vann. PVDF-membranen ble deretter blokkert for forhindring av adsorpsjon av endoglykosidasen, ved inkubering av 100 μΙ av en 1% vandig løsning av polyvinylpyrrolidon 360 ved romtemperatur i 1 time. Blokkeringsreagenset ble deretter fjernet ved svakt vakuum fulgt av tre vaskinger med 300 μΙ vann.
[0214] N-bundne oligosakkarider ble frigjort ved tilsetting av 2,5 mE peptid-N-glykosydase F (rekombinant N-Glycanase, GLYKO, Novato, CA) og 0,1 mE Sialidase (GLYKO, Novato, CA), for fjerning av potensielle ladde monosakkaridrester, i et sluttvolum på 25 μΙ i 20 mM NaHC03, pH 7,0). Digerering ble utført i 3 timer ved 37°C.
Oligosakkaridfrigjøringsmetode for antistoffer i løsning
[0215] Mellom 40 og 50 μg antistoff ble blandet med 2,5 mE PNGaseF . (Glyko, U.S.A.) i 2 mM Tris, pH 7,0 i et sluttvolum på 25 mikroliter, og blandingen ble inkubert i 3 timer ved 37°C.
;
Anvendelse av endoglykosidase H-digerering av PNGaseF-frigjorte oligosakkarider for tilordning av hybride todelte oligosakkaridstrukturer til nøytrale MALDI/TOF-MS-oligosakkaridtopper
[0216] De PNGaseF-frigjorte oligosakkarider ble deretter digerert med Endoglykosidase H (EC 3.2.1.96). For EndoH-digerering ble 15 mE EndoH (Roche, Sveits) tilsatt til PNGaseF-digereringsproduktet (antistoff i løsning-metode ovenfor) under oppnåelse av et sluttvolum på 30 mikroliter, og blandingen ble inkubert i 3 timer ved 37°C. EndoH spalter mellom N-acetylglukosaminrestene i chitobiosekjernen i N-bundne oligosakkarider. Enzymet kan bare digerere oligomannose og de fleste glykaner av hybridtypen, mens komplekse oligosakkaridtyper ikke hydrolyseres.
Prøvetilberedning for MALDI/TOF-MS
[0217] De enzymatiske nedbrytningsprodukter inneholdende de frigjorte oligosakkarider ble inkubert i ytterligere 3 timer ved romtemperatur etter tilsetting av eddiksyre til en sluttkonsentrasjon på 150 mM, og ble deretter ledet gjennom 0,6 ml kationebytterharpiks (AG50W-X8-hrpiks, hydrogenform, 150-75 pm (100-200 mesh), BioRad, Sveits) pakket i en mikro-bio-spinn-kromatografikolonne (BioRad, Sveits) for fjerning av kationer og proteiner. Én mikroliter av den resulterende prøve ble påført på en målplate av rustfritt stål og blandet på platen med 1 μl sDHB-matriks. sDHB-matriks ble tilberedt ved oppløsing av 2 mg 2,5-dihydroksybenzosyre pluss 0,1 mg 5-metoksysalicylsyre i 1 ml etanol/10 mM vandig natriumklorid 1 :1 (på volumbasis). Prøvene ble lufttørket, 0,2 pl etanol ble påført, og prøvene fikk til slutt omkrystalliseres under luft.
MALDI/TOF-MS
[0218] MALDI-TOF-massespektrometret anvendt til å oppnå massespektraene var en Voyager Elite (Perspective Biosystems). Instrumentet ble operert i lineær konfigurasjon, med en akselerering på 20kV og 80 ns forsinkelse. Ekstern kalibrering under anvendelse av oligosakkaridstandarder ble anvendt for masse-tilordning av ionene. Spektraene fra 200 laserskudd ble oppsummert for oppnåelse av sluttspektret.
Uttømming av fullblod-B-celler
[0219] 495 μΙ heparinisert blod fra en frisk donor ble porsjonert i 5 ml polystyrenrør, 5 μ1 100 ganger konsentrerte antistoffprøver (sluttkonsentrasjon 1-1000 ng/ml) eller bare PBS ble tilsatt, og rørene ble inkubert ved 37°. Etter 24 timer ble 50 μΙ blod overført til et nytt rør og merket med anti-CD3-FITC, anti-CD19-PE og anti-CD45-CyChrome (Becton-Dickinson) i 15 min ved romtemperatur i mørke. Før analyse ble det tilsatt 500 μΙ FACS-buffer (PBS inneholdende 2% FCS og 5mM EDTA) til rørene. CD3-FITC- og CD19-PE-fluorescens av blodprøvene ble væskestrømcytometrisk analysert ved innstilling av en terskel på CD45-CyChrome. B celle-uttømming ble bestemt ved avsetting av forholdet mellom CD19<+ >B-celler og CD3<+ >T-celler.
Binding av anti-CD20-antistoffer til Raji-celler
[0220] 500 000 i 180 μΙ FACS-buffer (PBS inneholdende 2% FCS og 5mM EDTA) ble overført til 5 ml polystyrenrør, og 20 μΙ 10 ganger konsentrert anti-CD20-antistoffprøver (1-5000 ng/ml sluttkonsentrasjon) eller bare PBS ble tilsatt, og rørene ble inkubert ved 4°C i 30 min. Prøvene ble deretter vasket to ganger med FACS-buffer og pelletert ved 300 x g i 3 min. Supernatant ble avsugd, og cellene ble tatt opp i 100 μΙ FACS-buffer, 1 μΙ anti-Fc-spesifikke F(ab')2-FITC-fragmenter (Jackson Immuno Research Laboratories, USA) ble tilsatt, og rørene ble inkubert ved 4°C i 30 min. Prøvene ble vasket to ganger med FACS-buffer og tatt opp i 500 μΙ FACS-buffer inneholdende 0,5 pg/ml Pl for analyse ved væskestrømcytometri. Binding ble bestemt ved avsetting av den geometriske middelfluorescens mot antistoffkonsentrasjonene.
EKSEMPEL 2
Høyhomologiakseptor-fr-emgangsmåte
[0221] Høyhomologi-antistoffakseptor-rammeverksøkingen ble utført ved innretting av muse-B-Ly1 -proteinsekvensen mot en samling av humane kimlinjesekvensr og plukking av den humane sekvens som viste den høyeste sekvensidentitet. Her ble sekvensen VH1_10 fra VBase-databasen valgt som , tungkjederammverk-akseptorsekvens, og VK_2_40-sekvensen ble valgt til være rammeverkakseptoren for den lette kjede. Pa disse to akseptor-rammeverk ble de tre komplementaritetsbestemmende regioner (CDR) av de tunge og lette variable musedoméner podet. Siden rammeverk 4-regionen ikke er en del av den variable region av kimlinje-V-genet, ble innrettingen for denne stilling utført individuelt. JH4-regionen ble valgt for den tunge kjede, og JK4-regionen ble valgt for den lette kjede. Molekylmodellering av det skisserte immunglobulindoméne viste ett sted som potensielt fordret muse-aminosyrerestene i stedet for de humane utenfor CDR. Gjeninnføring av muse-aminosyrerester i det humane rammeverk ville frembringe de såkalte tilbakemutasjoner. For eksempel ble den humane akseptoraminosyrerest i Kabat-stilling 27 tilbakemutert til en tyrosinrest. Det ble utformet humaniserte antistoffvarianter som enten innbefattet eller utelukket tilbakemutasjonene. Den lette humaniserte antistoffkjede fordret ikke noen tilbakemutasjoner. Etter skissering av proteinsekvensene, ble DNA-sekvenser som kodet for disse proteiner, syntetisert som angitt detaljert nedenfor.
Blandet rammeverk-fremgangsmåte
[0222] For å unngå innføring av tilbakemutasjoner i kritiske aminosyrereststillinger (kritiske for bibeholdelse av god antigenbindende affinitet eller antistofffunksjoner) i det humane akseptor-rammeverk ble det undersøkt om hvorvidt enten hele rammeverkregion 1 (FR1) eller rammeverkregionene 1 (FR1) og 2 (FR2) sammen kunne erstattes av humane antistoffsekvenser som allerede hadde donor-rester, eller funksjonelt ekvivalente, i disse viktige stillinger i den naturlige humane kimlinjesekvens. For dette formål ble VH-rammeverkene 1 og 2 av muse-Bly-1 -sekvensen innrettet individuelt i forhold til humane kimlinjesekvenser. Her var det ikke viktig med høyeste sekvensidentitet, og dette ble ikke anvendt, for velging av akseptor-rammeverk, men i stedet ble matching av flere kritiske rester antatt å være viktigere. Disse kritiske rester omfatter restene 24, 71 og 94 (Kabatnummerering) og dessuten restene i stilling 27, 28 og 30 (Kabat-nummerering), som ligger utenfor CDR1 -definisjonen ifølge Kabat, men ofte inngår ved antigenbinding. IMGT-sekvensen VH_3_15 ble valgt som en egnet sekvens. Etter skissering av proteinsekvensene, ble DNA-sekvensene som kodet for disse proteiner, syntetisert som angitt detaljert nedenfor. Ved anvendelse av denne fremgangsmåte trengtes det ingen tilbakemutasjoner verken for den lette eller tunge kjede, for bibeholdelse av gode nivåer av antigenbinding.
Syntese av antistoffgenene
[0223] Etter å ha utpekt aminosyresekvensen for den humaniserte antistoff V-region, måtte DNA-sekvensen frembringes. DNA-sekvensdataene for de individuelle rammeverkregioner ble funnet i databasene for humane kimlinjesekvenser. DNA-sekvensen for CDR-regionene ble tatt fra de tilsvarende muse-cDNA-data. Med disse sekvenser ble hele DNA-sekvensen i realiteten satt sammen. Med disse DNA-sekvensdata ble det innført diagnostiske restriksjonsseter i den virkelige sekvens, ved innføring av stumme mutasjoner, noe som frembrakte gjenkjennelsesseter for restriksjonsendonukleaser. For oppnåelse av den fysiske DNA-kjede ble det utført gensyntese (f. eks. Wheeler et al., 1995). Ved denne metode utformes oligonukleotider fra de aktuelle gener, slik at én serie oligonukleotider fås fra kodingsstrengen, og en annen serie fra den ikke-kodende streng. 3'- og 5'-endene av hvert oligonukleotid (bortsett fra den aller første og siste i rekken) viser alltid komplementære sekvenser med to primere som stammer fra den motsatte streng. Når disse oligonukleotider innlemmes i en reaksjonsbuffer egnet for hvilken som helst varmestabil polymerase, og det tilsettes Mg<2+>, dNTP og en DNA-polymerase, strekker hvert oligonukleotid seg fra sin 3'-ende. Den nydannede 3'-ende av én primer koples så til den neste primer på den motsatte streng og utvider sin sekvens videre under betingelser som er egnet for templatavhengig DNA-kjede-forlengelse. Det endelige produkt ble klonet i en konvensjonell vektor for formering i E. coli.
Antistoffproduksjon
[0224] Humane tung- og lettkjede-ledersekvenser (for sekresjon) ble tilføyd oppstrøms for de ovennevnte variabel region-sekvenser, og disse ble deretter sammenføyd oppstrøms for henholdsvis humane konstante tunge og lette lgG1-kappa-sekvenser under anvendelse av standard-molekylærbiologiteknikker. De resulterende fullstendige tung- og lettkjede-DNA-antistoffsekvenser ble subklonet i pattedyr-ekspresjonsvektorer (én for den lette kjede og én for den tunge kjede) under kontroll av MPSV-promoteren og oppstrøms for et syntetisk polyA-sete, idet . hver vektor bar en EBV OriP-sekvens, som beskrevet i eksempel 1 ovenfor.
Antistoffer ble frembrakt som beskrevet i eksempel 1 ovenfor, nemlig ved
. kotransfektering av HEK293-EBNA med pattedyr-antistoff-tung- og lettkjedeekspresjonsvektorer, høsting av det kondisjonerte dyrkningsmedium 5 til 7 dager etter transfeksjon og rensing av de utskilte antistoffer ved protein A-aff initetskromatografi, fulgt av kationebytterkromatografi og et endelig størrelseseksklusjonskromatografitrinn for isolering av rene monomere lgG1 -antistoffer. Antistoffene ble formulert i en løsning av 25 mM kaliumfosfat, 125 mM natriumklorid, 100 mM glycin, med pH 6,7. Glyko-omarbeidede varianter av de humaniserte antistoffvarianter ble frembrakt ved kotransfeksjon av antistoffekspresjonsvektorene sammen med en GnT-lll-glykosyltransferaseekspresjonsvektor, eller sammen med en GnT-lll-ekspresjonsvektor pluss en Golgi-mannosidase ll-ekspresjonsvektor, som beskrevet for det kimæriske antistoff i eksempel 1 ovenfor. Glyko-omarbeide antistoffer ble renset og formulert som beskrevet ovenfor for de ikke-glyko-omarbeidede antistoffer. Oligosakkaridene knyttet til Fc-regionen av antistoffene ble analysert ved MALDI/TOF-MS som beskrevet nedenfor.
Oligosakkaridanalyse
[0225] Oligosakkaridfrigjøringsmetode for antistoffer i løsning
Mellom 40 og 50 pg antistoff ble blandet med 2,5 mE PNGaseF (Glyko, USA) i 2 mM Tris, pH 7,0, i et sluttvolum på 25 mikroliter, og blandingen ble inkubert i 3 timer ved 37°C.
Prøvetilberedning for MALDI/TOF-MS
[0226] De enzymatiske nedbrytningsprodukter inneholdende de frigjorte oligosakkarider ble inkubert i ytterligere 3 timer ved romtemperatur etter tilsetting av eddiksyre til en sluttkonsentrasjon på 150 mM, og ble deretter ledet gjennom 0,6 ml kationebytterharpiks (AG50W-X8-harpiks, hydrogenform, 150-75 pm, BioRad, Sveits) pakket i en mikro-bio-spin-kromatografikolonne (BioRad, Sveits) under fjerning av kationer og proteiner. Én mikroliter av den resulterende prøve ble påført på en målplate av rustfritt stål og blandet på platen med 1 μΙ sDHB-matriks. sDHB-matriks ble tilberedt ved oppløsing av 2 mg 2,5-dihydroksybenzosyre pluss 0,1 mg 5-metoksysalicylsyre i 1 ml etanol/10 mM vandig natriumklorid 1 :1 (på volumbasis). Prøvene ble lufttørket, 0,2 μΙ etanol ble påført, og prøvene fikk til slutt omkrystalliseres under luft.
MALDI/TOF-MS
[0227] MALDI-TOF-massespektrometeret anvendt til opptak av massespektraene var et Voyager Elite (Perspective Biosystems). Instrumentet ble operert i lineær konfigurasjon, med en akselerering på 20kV og 80 ns forsinkelse. Ekstern kalibrering med anvendelse av oligosakkaridstandarder ble anvendt for massetilordning av ionene. Spektraene fra 200 laserskudd ble summert under oppnåelse av det endelige spektrum.
Antigenbindingsanalyse
[0228] De rensede, monomere humaniserte antistoffvarianter ble testet med hensyn til binding til humant CD20 på Raji B-cellelymfom-målceller under anvendelse av væskestrømcytometribasert analyse, som beskrevet for det kimæriske B-ly1 -antistoff i Eksempel 1 ovenfor.
Binding av monomere lgG1 -glykovarianter til NK-celler og FcyRIIIA-uttrykkende CHO-cellelinje
[0229] Humane NK-celler ble isolert fra nyisolerte mononukleære celler fra perifert blod (PBMC) med anvendelse av negativ seleksjonsanriking med hensyn til CD16- og CD56-positive celler (MACS-system, Miltenyi Biotec GmbH, Bergisch Gladbach/Tyskland). Renheten bestemt ved CD56-ekspresjon var mellom 88 og 95%. Nyisolerte NK-celler ble inkubert i PBS uten kalsium- og magnesium-ioner (3 x 10<5 >celler/ml) i 20 minutter ved 37°C under fjerning av NK-celle-assosiert IgG. Cellene ble inkubert med 10<6 >celler/ml med forskjellige konsentrasjoner av anti-CD20-antistoff (0, 0,1 , 0,3, 1 , 3, 10 μg/ml) i PBS, 0,1% BSA. Etter flere vaskinger ble antistoffbinding påvist ved inkubering med 1 :200 FlTC-konjugert F(ab')2 geiteantihumant, f (ab')2-spesifikt IgG (Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA/USA) og anti-humant CD56-PE (BD Biosciences, Al Ischwi I/Sveits). AntiFcgammaRIIIA 3G8 F(ab‘)2-fragmenter (Ancell, Bayport, MN/USA) ble tilsatt i en konsentrasjon på 10 μg/ml for konkurrering av binding av antistoff-glykovarianter (3 μg/ml). Fluorescensintensiteten som kan tilskrives de bundne antistoffvarianter, ble bestemt for CD56-positive celler på en FACSCalibur (BD Biosciences, Allschwil/Sveits). CHO-celler ble transfektert ved elektroporasjon (280 V, 950 μF, 0,4 cm) med en ekspresjonsvektor som kodet for FcgammaRIIIA-Val158 a-kjeden og γ-kjeden. Transfektanter ble selektert ved tilsetting av 6 μg/ml puromycin, og stabile kloner ble analysert ved FACS under anvendelse av 10 pl monoklonalt FlTC-konjugert anti-FcgammaRIII 3G8-antistoff (BD Biosciences, Allschwil/Sveits) for 10<6 >celler. Binding av lgG1 til FcgammaRIIIA-Val158-uttrykkende CHO-celler ble utført analogt med NK-cellebindingen beskrevet ovenfor.
ADCC-analyse
[0230] Humane mononukleære celler fra perifert blod (PBMC) ble anvendt som effektorceller og ble preparert under anvendelse av Histopaque-1077 (Sigma Diagnostics Inc., St. Louis, M063178 USA) og idet man hovedsakelig fulgte fabrikantens instruksjoner. Kort angitt ble veneblod tatt med hepariniserte sprøyter fra frivillige personer. Blodet ble fortynnet 1 :0,75-1 ,3 med PBS (ikke inneholdende Ca<++ >eller Mg<++>) og lagt på Histopaque-1077. Gradienten ble sentrifugert ved 400 x g i 30 min ved romtemperatur (RT) uten bremser. Interfasen inneholdende PBMC ble oppsamlet og vasket med PBS (50 ml pr. celler fra to gradienter) og harvested ved sentrifugering ved 300 x g i 10 minutter ved RT. Etter gjenoppslemming av pelleten med PBS, ble PBMC tellet og vasket en andre gang ved sentrifugering ved 200 x g i 10 minutter ved RT. Cellene ble deretter gjenoppslemmet i passende medium for de påfølgende prosesser.
[0231] Forholdet mellom effektor og mål anvendt for ADCC-analysene var 25:1 og 10:1 for henholdsvis PBMC og NK-celler. Effektorcellene ble preparert i AIM-V-medium i passende konsentrasjon for tilsetting av 50 pl pr. brønn i rundbunnede 96 brønnsplater. Målcellene var humane B-lymfomceller (f.eks. Rajiceller) dyrket i DMEM inneholdende 10% FCS. Målcellene ble vasket i PBS, tellet og gjenoppslemmet i AIM-V med 0,3 millioner pr. ml for tilsetting av 30 000 celler i 100 μΙ pr. mikrobrønn. Antistoffene ble fortynnet i AIM-V, tilsatt i 50 μΙ til de forutplatede målcellene og fikk bindes til målcellene i 10 minutter ved RT. Deretter ble effektorcellene tilsatt, og platen ble inkubert i 4 timer ved 37°C i fuktig atmosfære inneholdende 5% CO2. Dreping av målcellene ble fastslått ved måling <: >av laktatdehydrogenase (LDH)-frigjøring fra ødelagte celler under anvendelse av Cytotoksisitetspåvisningssettet (Roche Diagnostics, Rotkreuz, Sveits). Etter , inkuberingen på 4 timer ble platene sentrifugert ved 800 x g. 100 μΙ supernatant fra hver brønn ble overført til en ny transparent flatbunnet 96 brønns plate. 100 μΙ fargesubstratbuffer fra utstyrssettet ble tilsatt pr. brønn. Vmaks-verdiene for fargereaksjonen ble fastsatt i en ELISA-avlesningsinnretning ved 490 nm i minst 10 min under anvendelse av SOFTmax PRO-p rog ram vare (Molecular Devices, Sunnyvale, CA94089, USA). Spontan LDH-frigjøring ble målt fra brønner inneholdende bare mål- og effektorceller, men ingen antistoffer. Maksimal frigjøring ble bestemt fra brønner inneholdende bare målceller og 1% Triton X-100. Prosentandel av spesifikk antistoffmediert dreping ble beregnet som følger: ((x — SR)/(MR — SR)<*>100, hvor x er middelverdien for Vmaks ved en spesifikk antistoffkonsentrasjon, SR er middelverdien for Vmaks for den spontane frigjøring, og MR er middelverdien for Vmaks for den maksimale frigjøring.
Komplementavhengig cytotoksisitetsanalyse
[0232] Målcellene ble tellet, vasket med PBS, gjenoppslemmet i AIM-V (Invitrogen) med 1 millioner celler pr. ml. 50 μΙ celler ble utplatet pr. brønn i en flatbunnet 96 brønns plate. Antistoff -fortynninger ble tilberedt i AIM-V og tilsatt i 50 μΙ til cellene. Antistoffene fikk bindes til cellene i 10 minutter ved romtemperatur. Humant serumkomplement (Quidel) ble nytint, fortynnet 3 ganger med AIM-V og tilsatt i 50 μΙ i brønnene. Kaninkomplement (Cedarlane Laboratories) ble tilberedt som beskrevet av fabrikanten, fortynnet 3 ganger med AIM-V og tilsatt i 50 μΙ i brønnene. Som kontroll ble komplementkilder oppvarmet i 30 min ved 56°C før tilsetting til analysen. Analyseplatene ble inkubert i 2 timer ved 37°C. Dreping av cellene ble bestemt ved måling av LDH-frigjøring. Kort angitt ble platene sentrifugert ved 300 x g i 3 min. 50 μΙ supernatant pr. brønn ble overført til en ny 96 brønns plate, og 50 μΙ av analysereagenset fra Cytotoksisitets-settet (Roche) ble tilsatt. En kinetisk måling med ELISA-avlesningsinnretningen bestemte Vmaks som samsvarte med LDH-konsentrasjonen i supernatanten. Maksimal frigjøring ble bestemt ved inkubering av cellene i nærvær av 1 % T rition X-100.
Uttømmingsanalyse for B-celler i fullblod
[0233] Normal B-celle-uttømming i fullblod ved anti-CD20-antistoffene ble utført som beskrevet i Eksempel 1 ovenfor.
Apoptoseanalyse
[0234] Den apoptotiske potens for antistoffene ble analysert ved inkubering av antistoffet med 10 μg/ml (metningsbetingelser med hensyn til antigenbinding) med målcellene (med en målcellekonsentrasjon på 5 x 10<5 >celler/ml) natten over (16-24 1). Prøvene ble merket med AnnV-FITC og analysert ved FACS. Analyse ble utført in triplo.
[0235] Påvisning utføres ved væskestrømcytometri ved at man fulgte tilsynekomsten av apoptotiske markører så som annexin V og fosfatidylserin.
Negativ kontroll (ingen apoptose indusert) inneholder intet antistoff, men bare fosfatbufret saltløsning. Positiv kontroll (maksimal apoptose) inneholder 5 mikromolar av det sterke apoptoseinduserende middel camptothecin (CPT).
Resultater og diskusjon
[0236] Sammenlikning av bindingen til humant CD20-antigen av antistoffvariantene B-HH1 , B-HH2, B-HH3, enten kompleksbundet med den kimæriske B-ly 1 -lettkjede (mVL, som beskrevet i eksempel 1 ovenfor) eller med den humaniserte B-ly1 -lettkjede (KV1), og det parentale, kimæriske antistoff chB-Iy1 (beskrevet i eksempel 1 ovenfor) viser at alle antistoffer har liknende EC50-verdi, men B-HH1 -konstruksjonen bindes med lavere intensitet/støkiometri enn variantene B-HH2 og B-HH3 (fig. 11). B-HH1 kan skjelnes fra B-HH2 og B-HH3 ved sine delvis humane CDR1- og CDR2-regioner (Kabat-definisjon), samt Ala/Thr-polymorfismen i stilling 28 (Kabat-nummerering). Dette tyder på at enten 28, det fullstendige CDR1 og/eller det fullstendige CDR2 er viktige for antistoff/antigen-interaksjon.
[0237] Sammenlikningen av B-HL1 , B-HH1 og det kimæriske parentale chB-Iy1 -antistoff viste fravær av en hver bindingsaktivitet i B-HL1 -konstruksjonen, og omtrent halvdelen av bindingsintensiteten/støkiometrien for B-HH1 sammenliknet med B-ly1 (fig. 12). Både B-HL1 og B-HH1 utformes basert på akseptorrammeverk som stammer fra den humane VH1 -klasse. Blant andre forskjeller er stilling 71 (Kabat-nummerering; Kabat-stilling 71 svarer til stilling 72 i SEKV ID NR: 48) av B-HL1 -konstruksjonen et slående avvik, noe som viser dens antatte betydning for antigenbinding.
[0238] Ved sammenlikning av antigenbindingsdataene ifølge fig. 9-13 viser BHH2-KV1 BHL8-KV1 - og BHL11 -KV1 -variantene den beste bindingsaff initet, blant de forskjellige testede humaniserte antistoffvarianter, til humant CD20 på overflaten av humane celler. Forskjellene mellom B-HH2 på den ene side og B-HL8 og B-HL11 på den annen side befinner seg kun i FR1- og FR2-regionene, idet alle de tre CDR er identiske (sammenlikne f.eks. SEKV ID NR: 32, 56 og 60, som ikke er nummerert ifølge Kabat, men hvis Kabat-nummerering lett kan bestemmes av en vanlig fagperson). B-HL8 og B-HL1 1 har sine FR1 - og FR2-sekvenser fra den humane VH3-klasse, mens det fullstendige B-HH2-rammeverk er humant VH1 -avledet. B-HL1 1 er et derivat av B-HL8 med enkeltmutasjonen GlulGIn (stilling 1 er den samme både ved Kabat-nummerering og det konvensjonelle nummereringssystem anvendt i sekvenslisten), hvor Gin er aminosyreresten i B-HH2-konstruksjonen. Dette betyr at GlulGln-utskifting ikke forandrer bindingsaffinitet eller intensitet. De andre forskjeller mellom B-HH2 og B-HL8 er 14 rammeverkrester, hvorav én eller flere vil innvirke på den antigenbindende oppførsel hos dette antistoff.
[0239] B-HL4-konstruksjonen fås fra B-HH2-antistoffet ved erstatting av FR1 i B-HH2 med FR1 i den humane kimlinjesekvens VH1_45. Denne konstruksjon viser sterkt redusert antigenbindende evne, til tross for at den har forskjellige aminosyrer bare i tre stillinger i FR1 . Disse rester befinner seg i stillingene 2, 14 og 30 (Kabat-nummerering). Blant disse kan stilling 30 være en stilling av betydning, siden det er en del av Chothia-definisjonen av CDR1 . Total analyse av alle bindingskurvene fra fig. 9 til 13 viser at følgende humaniserte B-Iy1-tungkjederester (Kabat-nummerering) er viktige for binding til CD20: N35 (enden av Kabat CDR1), fullstendig Kabat CDR1 , fullstendig Kabat CDR2 og fullstendig Kabat CDR3, restene A71 og R94 (i dette tilfelle kan R94 ikke erstattes av et treonin) og Y27. A28 og S30 bidrar også i mindre utstrekning. Dessuten er Kabat CDR3 og alle kanoniske rester viktige for antigenbinding. Ingen tilbakemutasjoner ble innført i den humaniserte lette kjede, som hadde de fullstendige Kabat CDR1 , CDR2 og CDR3 innpodet. Ved induksjon av apoptose (fig. 14, 15 og 21) var den mest potente variant humanisert B-ly1 -variant BHH2KV1 (enda mer potent enn den opprinnelige chB-ly1 , og meget mer potent enn et antistoff med en sekvens identisk med rituximab, C2B8). Andre humaniserte varianter (derivater av BHL8) som kan gjenvinne den økte apoptose, er: B-HL12 til B-HL17 (se tabell) og BHH8 (blandede rammeverk) og BHH9 ("blandede
, rammeverk" med én tilbakemutasjon, S30T). Stillingene 9 og 48 (Kabatnummerering) kan kontakte antigenet. Variantene BHH4 til BHH7 er andre humaniserte B-ly1 -varianter som ikke innfører ytterligere ikke-humane sekvenser.
[0240] Viktige egenskaper hos det humaniserte B-ly1 -antistoff er at det er et anti-CD20-antistoff type II som definert i Cragg, M.S. og Glennie, M.J., Blood 103(7):2738-2743 (april 2004). Ved binding til CD20 induserte det derfor ikke noen betydelig resistens overfor ekstraksjon av CD20 med ikke-ionisk detergent fra overflaten av humane CD20+-celler, ved anvendelse av analysen beskrevet for dette formål i Polyak, M.J. og Deans, J.P., Blood 99(9):3256-3262 (2002). Det induserte unektelig betydelig mindre resistens overfor ekstraksjon av CD20 med ikke-ionisk detergent enn C2B8-antistoffet gjør (et annet anti-CD20-antistoff med identisk sekvens som rituximab (se US-patentpublikasjon nr. 2003/0003097). Som ventet for et anti-CD20-antistoff type II, hadde det humaniserte B-ly1 ikke noen signifikant komplementmediert lyseaktivitet og unektelig en mengde mer komplementmediert lyseaktivitet enn anti-CD20-antistoffet C2B8 (kimærisk lgG1 med identisk sekvens som rituximab). En annen viktig egenskap hos det humaniserte B-ly1 -antistoff var at det var meget potent i den homotypiske aggregeringsanalyse. I denne analyse ble CD20-positive humane celler, Daudiceller, inkubert i celledyrkningsanalysemedium i opp til 24 timer ved 37°C i 5% CCVatmosfære i en pattedyrcelleinkubator som beskrevet detaljert i (Deans referanse) med antistoffet i en konsentrasjon på 1 mikrogram pr. ml og parallelt i en konsentrasjon på 5 mikrogram pr. ml. Til sammenlikning ble kontroll, parallell inkubering av cellene utført under identiske betingelser, men med anvendelse av anti-CD20-antistoffet C2B8. På forskjellige tidspunkter, innbefattende 8 timers og 24 timers inkubering, ble cellene inspisert visuelt ved anvendelse av mikroskop. Det ble funnet at det humaniserte B-ly1 -antistoff førte til sterk homotypisk aggregering, idet aggregatene var betydelig større enn aggregatene innført ved tilsetting av C2B8-kontrollantistoffet. Dessuten, og i overensstemmelse med at antistoffet var anti-CD20 type II, induserte det høyere nivåer av apoptose når CD20-positive humane celler ble inkubert med det humaniserte B-ly1 -antistoff, i forhold til en kontroll under identiske betingelser under anvendelse av det C2B8-kimæriske lgG1 -antistoff med identisk sekvens som rituximab.
[0241] Glyko-omarbeidede varianter av de humaniserte antistoffer ble frembrakt ved ko-ekspresjon av GnTIII-glykosyltransferase, sammen med antistoff genene, i pattedyrceller. Dette førte til en økning i fraksjonen av ikkefukosylerte oligosakkarider knyttet til Fc-regionen av antistoffene, innbefattende todelte ikke-fukosylerte oligosakkarider, som beskrevet i WO 2004/065540 (fig. 17-19). De glyko-omarbeidede antistoffer hadde betydelig høyere nivåer av binding til humane FcgammaRIII-reseptorer (fig. 20) samt ADCC-aktivitet (fig. 16), i forhold til det ikke-glyko-omarbeidede antistoff og i forhold til C2B8-antistoffet. Det humaniserte B-ly1 -antistoff var også mer potent ved innføring av human B-celleuttømming i en fullblodanalyse (fig. 16), enn kontroll-C2B8-antistoffet. Dette var tilfellet både for det ikke-glyko-omarbeidede B-ly1 -antistoff og for den glykoomarbeidede versjon av det. Det glyko-omarbeidede antistoff var omtrent 1000 ganger mer potent enn C2B8-kontroll-anti-CD20-antistoffet med hensyn til uttømming av B-celler i fullblodanalysen. Denne sammenlikning er viktig både for de ikke-glyko-omarbeidede og for de glyko-omarbeidede humaniserte former av B-Iy1 -antistoff, på grunn av at den viste at i analyser som kombinerte Fc-reseptoravhengige aktiviteter, så som ADCC, pluss komplementmediert lyse, pluss induksjon av apoptose, var begge former av B-ly1 betydelig mer potente enn C2B8, skjønt begge former av B-ly1 har dramatisk lavere komplementmediert lyseaktivitet. De Fc-reseptor-avhengige ADCC-dreperaktiviteter og apoptoseinduksjon var til stede i denne overlegne aktivitet av de humaniserte B-ly1-antistoffvarianter. Ved apoptoseanalysen var videre både de glyko-omarbeidede og ikke-glyko-omarbeidede former av dette type ll-anti-CD20-antistoff potente, og de Fc-omarbeidede varianter med øket bindingsaffinitet til Fcgamma-reseptorer var enda mer potente ved apoptoseinduksjon enn den ikke-Fc-omarbeidede variant, og alle varianter var betydelig mer potente enn kontrollantistoffet C2B8. Den nøyaktige mekanisme for forøket homotypisk aggregering og induksjon av apoptose mediert ved type ll-anti-CD20-antistoffer er ikke kjent, og samtidig binding til andre molekyler på overflaten av CD20-positive celler, så som Fcgamma-reseptorer, kan innvirke på denne viktige egenskap. Det var derfor viktig å vise at anti-CD20-antistoffer av type II som er blitt omarbeidet i sin Fc-region for øket bindingsaffinitet til Fc-gamma-reseptorer, innbefattende FcgammaRIII og med en tilknyttet økning i ADCC-aktivitet, fremdeles var i stand til å indusere sterk
apoptose, enda høyere enn den ikke-Fc-omarbeidede og homotypiske
<’ >aggregering. Apoptoseinduksjon er viktig in vivo, siden det er steder i kroppen hvor de CD20-positive målceller kan finnes, men hvor adgang til FcgammaRIII-positive . celler er mer vanskelig enn i blod; slike steder er for eksempel lymfeknuter. På disse steder kan induksjonen av apoptose ved selve anti-CD20-antistoffet være avgjørende for god effektivitet av anti-CD20-antistoff -terapien hos mennesker, både for behandling av hematologiske maligniteter så som ikke-Hodgkins lymfomer og kronisk B-celle-lymfocyttleukemi, og for behandling av autoimmune sykdommer så som reumatoid artritt og lupus via en B-celle-uttømmingsfremgangsmåte. Den økte bindingsaffinitet til FcgammaRIII og høyere ADCC hos det humaniserte, Fc-omarbeidede anti-CD20-antistoff type II kan også være en meget viktig egenskap for slike terapier. Endelig kan den reduserte eller ubetydelige komplementmedierte lyseaktivitet hos disse anti-CD20-antistoffer type II, innbefattende humaniserte og Fc-omarbeidede varianter, også være viktig høyere komplementaktivering ved anti-CD20-antistoffer er blitt korrelert med økte, uønskede bivirkningen

Claims (48)

Patentkrav
1. Humanisert Type II anti-CD20 antistoff omfattende
(a) tungkjede variabel region omfattende SEKV ID NR:32 eller en tungkjede variabel region omfattende SEKV ID NR:32 som omfatter substitusjonen M34I, og
(b) en lettkjede variabel region omfattende SEKV ID NR:76.
2. Antistoff ifølge krav 1, idet nevnte antistoff omfatter tungkjede variabel region SEKV ID NR:40.
3. Ekspresjonsvektor omfattende et polynukleotid kodende for en tungkjede variabel region ifølge krav 1 eller krav 2 og et polynukleotid kodende for en lettkjede variabel region ifølge krav 1.
4. Vektor ifølge krav 3, som er polycystronisk
5. Vertscelle omfattende ekspresjonsvektoren ifølge krav 3 eller krav 4 eller et polynukleotid kodende for en tungkjede variabel region ifølge krav 1 eller krav 2 og et polynukleotid kodende for en lettkjede variabel region ifølge krav 1.
6. Vertscelle ifølge krav 5, idet nevnte vertscelle er konstruert for å uttrykke minst en nukleinsyre kodende for et polypeptid med β(1,4)-N-acetylglukosylaminyltransferase III aktivitet.
7. Vertscelle ifølge krav 6, idet nevnte polypeptid som har β(1,4)-N-acetylglukosylaminyltransferase III aktivitet er et fusjonspolypeptid som videre omfatter Golgi lokaliseringsdomenen til et heterologt Golgi resident polypeptid.
8. Vertscelle ifølge krav 7, idet nevnte Golgi lokaliseringsdomene er valgt fra lokaliseringsdomenen til mannosidase II, lokaliseringsdomenen til β(1,2)-N-acetylglucosaminyltransferase I, β(1,2)-N-acetylglucosaminyltransfcrase II, mannosidase I eller α1-6 kjerne fukosyltransferase.
9. Metode for produksjon av et humanisert Type II anti-CD20 antistoff ifølge krav 1 eller krav 2 omfattende dyrking av vertscellen ifølge et hvilket som helst av kravene 5 til 8 under betingelser som tillater produksjon av nevnte antistoff og isolering av nevnte antistoff fra nevnte kultur.
10. Humanisert Type II anti-CD20 antistoff, hvor antistoffet blir oppnådd ved metoden ifølge krav 9.
11. Antistoff ifølge et hvilken som helst av kravene 1, 2 eller 10, eller oppnådd ved metoden ifølge krav 9, idet nevnte antistoff omfatter en glykokonstruert Fc region.
12. Antistoff ifølge krav 11, idet nevnte antistoff har en økning i fraksjonen av ikkefukosylerte oligosakkarider koblet til nevnte glykokonstruerte Fc region.
13. Antistoff ifølge krav 11, idet nevnte antistoff har en økning i fraksjonen av halverte, ikke-fukosylerte oligosakkarider koblet til nevnte glykokonstruerte Fc region.
14. Antistoff ifølge krav 11, idet nevnte antistoff har betydeligere høyere nivå av binding til human FcgammaRIII reseptorer i forhold til det ikke-glykokonstruerte antistoffet.
15. Antistoff ifølge krav 11, idet nevnte antistoff har et betydeligere høyere nivå av ADCC aktivitet i forhold til det ikke-glykokonstruerte antistoffet.
16. Farmasøytisk sammensetning omfattende antistoffet ifølge et hvilken som helst av kravene 1, 2 eller 10 til 15, eller oppnådd ved metoden ifølge krav 9 og en farmasøytisk akseptabel bærer.
17. Antistoff ifølge hvilke som helst av kravene 1, 2 eller 10 til 15, eller oppnådd ved metoden ifølge krav 9 for anvendelse som et medikament for behandling en B-celle forstyrrelse.
18. Antistoff ifølge krav 17, idet nevnte B-celle forstyrrelse er et B-celle lymfom.
19. Anvendelse av antistoffet ifølge et hvilket som helst av kravene 1, 2 eller 10 til 15 eller oppnådd ved metoden ifølge krav 9 for fremstilling av et medikament for behandling av en forstyrrelse som kan behandles ved B-celle utarming.
20. Antistoff ifølge et hvilket som helst av kravene 1, 2 eller 10 til 15, eller oppnådd ved metoden ifølge krav 9 for anvendelse som et medikament for behandling av en forstyrrelse som kan behandles ved B-celle utarming.
21. Antistoff for anvendelse ifølge krav 20 eller anvendelse av antistoffet ifølge krav 19, idet nevnte forstyrrelse er en hematologisk malignhet eller en autoimmun sykdom.
22. Antistoff for anvendelse eller anvendelse av antistoffet ifølge krav 21, idet nevnte hematologiske malignhet er B-celle lymfom, ikke-Hodgkins lymfom, eller B-celle kronisk lymfocyttisk leukemi.
23. Antistoff for anvendelse eller anvendelse av antistoffet ifølge krav 21, idet nevnte autoimmune sykdom er revmatoid artritt eller lupus.
24. Humanisert Type II anti-CD20 antistoff omfattende
(a) en tungkjede variabel region valgt fra gruppen bestående av SEKV ID NR: 32 og SEKV ID NR: 40 og
(b) KV1 lettkjede variabel region ifølge SEKV ID NR: 76.
25. Antistoff ifølge krav 24, idet tungkjede variable region er SEKV ID NR: 40.
26. Humanisert Type II anti-CD20 antistoff omfattende en tungkjede variabel region som har de spesifisitetsbestemmende residiene til tungkjede variabel region av antistoffet ifølge krav 24 eller krav 25, idet nevnte antistoff induserer høyere nivåer av apoptose når den inkubert med CD20-positive humane celler i forhold til en kontroll under identiske betingelser ved anvendelse av C2B8 kimært IgG-1 antistoff med en sekvens identisk med rituximab.
27. Humanisert Type II anti-CD20 antistoff omfattende en tungkjede variabel region som blir kodet av en nukleinsyresekvens som er minst 80% identisk med SEKV ID NR: 31 eller SEKV ID NR: 39 og en lettkjede variabel region som blir kodet av en nukleinsyresekvens som er minst 80% identisk med SEKV ID NR: 75, idet nevnte antistoff induserer høyere nivåer av apoptose når inkubert med CD20-positive humane celler i forhold til en kontroll under identiske betingelser ved anvendelse av det chimært IgGl-antistoff med en sekvens identisk til rituximab.
28. Ekspresjonsvektor omfattende et polynukleotid som koder for en tungkjede variabel region ifølge et hvilket som helst av kravene 24 til 27 og et polynukleotid kodende for en lettkjede variabel region ifølge et hvilket som helst av kravene 24 eller 27.
29. Vektoren ifølge krav 28, som er polycistronisk.
30. Isolert vertscelle omfattende ekspressionsvektoren ifølge krav 28 eller krav 29 eller et polynukleotid kodende for en tung kjede variabel region ifølge et hvilket som helst av kravene 24 til 27 og et polynukleotid kodende for en lettkjede variabel region ifølge et hvilket som helst av kravene 24 eller 27.
31. Vertscelle ifølge krav 30, idet nevnte vertscelle er konstruert til å uttrykke minst en nukleinsyre kodende for et polypeptid med β(1,4) -N-acetylglukosylaminyltransferase III-aktivitet.
32. Vertscelle ifølge krav 31, idet nevnte polypeptid som har β(1,4) -N-acetylglukosylaminyltransferase III-aktivitet er et fusjonspolypeptid som videre omfatter Golgi-lokaliseringsdomenen til et heterologt Golgi-resistent polypeptid.
33. Vertscelle ifølge krav 32, idet nevnte Golgi lokaliseringsdomene er valgt fra lokaliseringsdomenen til mannosidase II, lokaliseringsdomenen til β(1,2) -N-acetylglukosaminyltransferase I, β(1,2) -N-acetylglukosaminyltransferase II, mannosidase I eller α1-6 kjernefukosyltransferase.
34. Metode for produksjon av et humanisert Type II anti-CD20 antistoff ifølge et hvilket som helst av kravene 24 til 27 omfattende dyrking av vertscellen ifølge et hvilket som helst av kravene 30 til 33 under betingelser som muliggjør produksjon av nevnte antistoff og isolering av nevnte antistoff fra nevnte kultur.
35. Humanisert Type II anti-CD20 antistoff, idet antistoffet blir produsert av vertscellen ifølge et hvilket som helst av kravene 30 til 33.
36. Antistoff ifølge et hvilket som helst av kravene 24 til 27 eller 35, eller produsert ved metoden ifølge krav 34, idet nevnte antistoff omfatter en glykokonstruert Fcregion.
37. Antistoff ifølge krav 36, idet nevnte antistoff har en økning i fraksjonen av ikkefukosylerte oligosakkarider koblet til nevnte glykokonstruerte Fc-region.
38. Antistoff ifølge krav 36, idet nevnte antistoff har en økning i fraksjonen av halverte, ikke-fukosylerte oligosakkarider koblet til nevnte glykokonstruerte Fc-region.
39. Antistoff ifølge krav 36, idet nevnte antistoff har betydeligere høyere nivåer av binding til humane FcgammaRIII-reseptorer i forhold til det ikke-glykokonstruerte antistoffet.
40. Antistoff ifølge krav 36, idet nevnte antistoff har betydelige høyere nivåer av ADCC-aktivitet i forhold til det ikke-glykokonstruerte antistoffet.
41. Farmasøytisk sammensetning omfattende antistoffet ifølge et hvilket som helst av kravene 24 til 27 eller 35 til 40, eller produsert ved metoden ifølge krav 34, og en farmasøytisk akseptabel bærer.
42. Antistoff ifølge et hvilket som helst av kravene 24 til 27 eller 35 til 40 eller produsert ved metoden ifølge krav 34, for anvendelse som et medikament for behandling en B-celleforstyrrelse.
43. Antistoff ifølge krav 42, idet nevnte B-celleforstyrrelse er et B-celle lymfom.
44. Anvendelse av antistoffet ifølge et hvilket som helst av kravene 24 til 27eller 35 til 40, eller produsert ved metoden ifølge krav 34, for fremstilling av et medikament for behandling av en forstyrrelse som kan behandles ved B-celleutarming.
45. Antistoff ifølge et hvilket som helst av kravene 24 til 27 eller 35 til 40, eller produsert ved metoden ifølge krav 34, for anvendelse som et medikament for behandling av en forstyrrelse som kan behandles ved B-celleutarming.
46. Anvendelse ifølge krav 44 eller antistoff ifølge krav 45, idet nevnte forstyrrelse er en hematologisk malignhet eller en autoimmun sykdom.
47. Antistoff eller anvendelse ifølge krav 46, idet nevnte hematologiske malignhet er en B-celle lymfom, ikke-Hodgkins lymfom, eller B-celle kronisk lymfocyttisk leukemi.
48. Antistoff eller anvendelse ifølge krav 46, idet nevnte autoimmune sykdom er reumatoid artritt eller lupus.
NO20220263A 2003-11-05 2004-11-05 Et humanisert type II anti-CD20 antistoff og vertscelle som produserer et humanisert type II anti-CD20 antistoff samt en fremgangsmåte for fremstilling og en farmasøytisk sammensetning. NO347530B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US51709603P 2003-11-05 2003-11-05
PCT/IB2004/003896 WO2005044859A2 (en) 2003-11-05 2004-11-05 Cd20 antibodies with increased fc receptor binding affinity and effector function

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20220263A1 true NO20220263A1 (no) 2006-08-03
NO347530B1 NO347530B1 (no) 2023-12-11

Family

ID=34572912

Family Applications (6)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20220263A NO347530B1 (no) 2003-11-05 2004-11-05 Et humanisert type II anti-CD20 antistoff og vertscelle som produserer et humanisert type II anti-CD20 antistoff samt en fremgangsmåte for fremstilling og en farmasøytisk sammensetning.
NO20210499A NO346533B1 (no) 2003-11-05 2004-11-05 Antigenbindingsmolekyler med økt Fc-reseptorbindingsaffinitet og effektorfunksjon.
NO20062289A NO341893B1 (no) 2003-11-05 2006-05-19 Humanisert, glykoomkonstruert Type II anti-CD20 antistoff og anvendelse derav, samt vertscelle og farmasøytisk sammensetning.
NO20171989A NO346167B1 (no) 2003-11-05 2017-12-13 Humanisert, glykoomkonstruert Type II anti-CD20 antistoff og anvendelse derav, samt vertscelle og farmasøytisk sammensetning
NO2018020C NO2018020I1 (no) 2003-11-05 2018-06-27 Obinutuzumab
NO20220904A NO347800B1 (no) 2003-11-05 2022-08-24 Humanisert, glykoomkonstruert Type II anti-CD20 antistoff og anvendelse derav, samt vertscelle og farmasøytisk sammensetning

Family Applications After (5)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20210499A NO346533B1 (no) 2003-11-05 2004-11-05 Antigenbindingsmolekyler med økt Fc-reseptorbindingsaffinitet og effektorfunksjon.
NO20062289A NO341893B1 (no) 2003-11-05 2006-05-19 Humanisert, glykoomkonstruert Type II anti-CD20 antistoff og anvendelse derav, samt vertscelle og farmasøytisk sammensetning.
NO20171989A NO346167B1 (no) 2003-11-05 2017-12-13 Humanisert, glykoomkonstruert Type II anti-CD20 antistoff og anvendelse derav, samt vertscelle og farmasøytisk sammensetning
NO2018020C NO2018020I1 (no) 2003-11-05 2018-06-27 Obinutuzumab
NO20220904A NO347800B1 (no) 2003-11-05 2022-08-24 Humanisert, glykoomkonstruert Type II anti-CD20 antistoff og anvendelse derav, samt vertscelle og farmasøytisk sammensetning

Country Status (40)

Country Link
US (8) US9296820B2 (no)
EP (5) EP2077282B1 (no)
JP (5) JP4653109B2 (no)
KR (3) KR101220691B1 (no)
CN (4) CN1902231B (no)
AT (1) ATE463513T1 (no)
AU (1) AU2004287643C1 (no)
BE (1) BE2016C008I2 (no)
BR (2) BRPI0416262B1 (no)
CA (1) CA2544865C (no)
CR (1) CR11848A (no)
CY (6) CY1110301T1 (no)
DE (1) DE602004026470D1 (no)
DK (5) DK2380911T3 (no)
EA (4) EA015009B1 (no)
EC (2) ECSP066603A (no)
ES (5) ES2672640T3 (no)
FR (1) FR15C0076I2 (no)
HK (1) HK1213574A1 (no)
HR (5) HRP20100303T1 (no)
HU (5) HUE038955T2 (no)
IL (4) IL175367A (no)
LT (4) LT2380911T (no)
LU (2) LU92632I2 (no)
MA (1) MA31040B1 (no)
ME (3) ME02332B (no)
MX (2) MXPA06004836A (no)
NL (1) NL300801I2 (no)
NO (6) NO347530B1 (no)
NZ (2) NZ547589A (no)
PL (5) PL2380911T3 (no)
PT (5) PT1692182E (no)
RS (5) RS55723B1 (no)
SG (3) SG10201504094SA (no)
SI (5) SI2348051T1 (no)
TN (1) TNSN06126A1 (no)
TR (2) TR201903329T4 (no)
UA (1) UA91823C2 (no)
WO (1) WO2005044859A2 (no)
ZA (1) ZA200604547B (no)

Families Citing this family (909)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU3657899A (en) 1998-04-20 1999-11-08 James E. Bailey Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity
NZ581474A (en) 2001-08-03 2011-04-29 Glycart Biotechnology Ag Antibody glycosylation variants having increased antibody-dependent cellular cytotoxicity
TWI353991B (en) 2003-05-06 2011-12-11 Syntonix Pharmaceuticals Inc Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids
KR101351122B1 (ko) 2003-05-09 2014-01-14 듀크 유니버시티 Ｃｄ２０-특이적 항체 및 이를 이용한 방법
PT1692182E (pt) * 2003-11-05 2010-05-13 Roche Glycart Ag Anticorpos de cd20 com uma afinidade de ligação acrescida ao receptor fc e uma função efectora acrescida
JP2008507555A (ja) * 2004-07-22 2008-03-13 ジェネンテック・インコーポレーテッド シェーグレン症候群の治療方法
EA012464B1 (ru) 2004-08-04 2009-10-30 Эпплайд Молекьюлар Эволюшн, Инк. Антитело против cd20 и его применение
RU2411956C2 (ru) 2004-10-05 2011-02-20 Дженентек, Инк. Способ лечения васкулита
ES2755976T3 (es) 2005-02-07 2020-04-24 Roche Glycart Ag Moléculas de unión a antígeno que se unen a EGFR, vectores que las codifican y usos de las mismas
JP2008539753A (ja) * 2005-05-09 2008-11-20 グリクアート バイオテクノロジー アクチェンゲゼルシャフト 修飾ｆｃ領域およびｆｃ受容体との結合変更を有する抗原結合分子
ZA200709956B (en) * 2005-05-20 2009-02-25 Genentech Inc Pretreatment of a biological sample from an autoimmune disease subject
WO2006133148A2 (en) * 2005-06-03 2006-12-14 Genentech, Inc. Method of producing antibodies with modified fucosylation level
WO2007009469A2 (en) 2005-07-21 2007-01-25 Genmab A/S Potency assays for antibody drug substance binding to an fc receptor
AU2012216702B2 (en) * 2005-08-26 2014-12-04 Roche Glycart Ag Modified antigen binding molecules with altered cell signaling activity
RU2482132C2 (ru) 2005-08-26 2013-05-20 Роше Гликарт Аг Модифицированные антигенсвязывающие молекулы с измененной клеточной сигнальной активностью
EP2455100A3 (en) * 2005-11-07 2012-11-07 The Rockefeller University Reagents, methods and systems for selecting a cytotoxic antibody or variant thereof
US20080206246A1 (en) * 2006-04-05 2008-08-28 Ravetch Jeffrey V Polypeptides with enhanced anti-inflammatory and decreased cytotoxic properties and relating methods
US8470318B2 (en) * 2005-11-07 2013-06-25 The Rockefeller University Polypeptides with enhanced anti-inflammatory and decreased cytotoxic properties and relating methods
MY149159A (en) 2005-11-15 2013-07-31 Hoffmann La Roche Method for treating joint damage
AU2006342792A1 (en) 2005-12-02 2007-11-08 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of diseases and disorders associated with cytokine signaling involving antibodies that bind to IL-22 and IL-22R
EP1973950B1 (en) 2006-01-05 2014-09-17 Genentech, Inc. Anti-ephb4 antibodies and methods using the same
WO2008029281A2 (en) * 2006-02-10 2008-03-13 Invitrogen Corporation Labeling and detection of post translationally modified proteins
AR059851A1 (es) 2006-03-16 2008-04-30 Genentech Inc Anticuerpos de la egfl7 y metodos de uso
EP2815768A3 (en) * 2006-04-05 2015-01-14 The Rockefeller University Polypeptides with enhanced anti-inflammatory and decreased cytotoxic properties and relating methods
WO2007140371A2 (en) 2006-05-30 2007-12-06 Genentech, Inc. Antibodies and immunoconjugates and uses therefor
WO2007143689A2 (en) * 2006-06-06 2007-12-13 Genentech, Inc. Compositions and methods for modulating vascular development
AR062223A1 (es) * 2006-08-09 2008-10-22 Glycart Biotechnology Ag Moleculas de adhesion al antigeno que se adhieren a egfr, vectores que los codifican, y sus usos de estas
NZ576032A (en) * 2006-10-12 2012-03-30 Genentech Inc Antibodies to lymphotoxin-alpha
AU2007308792B2 (en) 2006-10-27 2013-01-24 Genentech, Inc. Antibodies and immunoconjugates and uses therefor
AU2013202392B2 (en) * 2006-12-20 2016-02-25 Mmrglobal, Inc. Antibodies and methods for making and using them
CA2673725C (en) * 2006-12-20 2016-01-12 Mmr Information Systems, Inc. Antibodies and methods for making and using them
JP5361738B2 (ja) 2007-01-22 2013-12-04 ジェネンテック， インコーポレイテッド 多価電解質沈殿物及びタンパク質の精製
JP2010517944A (ja) * 2007-01-26 2010-05-27 バイオインヴェント インターナショナル アーベー Ｄｌｌ４シグナリング阻害薬およびその使用
BRPI0806403A2 (pt) 2007-02-09 2011-09-06 Genentech Inc anticorpo anti-robo4, usode um anticorpo e método de obtenção de imagem
US7960139B2 (en) 2007-03-23 2011-06-14 Academia Sinica Alkynyl sugar analogs for the labeling and visualization of glycoconjugates in cells
FR2915398B1 (fr) * 2007-04-25 2012-12-28 Lab Francais Du Fractionnement "ensemble de moyens pour le traitement d'une pathologie maligne, d'une maladie auto-immune ou d'une maladie infectieuse"
DK3072525T3 (en) 2007-05-14 2018-04-30 Astrazeneca Ab PROCEDURES FOR REDUCING BASOFILE CELL LEVELS
DK2158315T3 (en) 2007-06-25 2016-06-06 Esbatech Alcon Biomed Res Unit Methods of modifying antibodies and modified antibodies with improved functional properties
ATE543835T1 (de) 2007-07-16 2012-02-15 Genentech Inc Anti-cd79b-antikörper und immunkonjugate und anwendungsverfahren
ES2528922T3 (es) 2007-07-16 2015-02-13 Genentech, Inc. Anticuerpos anti-CD79b humanizados e inmunoconjugados y métodos de uso
US20110243931A1 (en) * 2007-09-02 2011-10-06 Thomas Friess Combination therapy with type i and type ii anti-cd20 antibodies
EP3415529B1 (en) 2007-09-26 2020-11-04 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Modified antibody constant region
US20090098118A1 (en) * 2007-10-15 2009-04-16 Thomas Friess Combination therapy of a type ii anti-cd20 antibody with an anti-bcl-2 active agent
US20090110688A1 (en) * 2007-10-24 2009-04-30 Georg Fertig Combination therapy of type ii anti-cd20 antibody with a proteasome inhibitor
RU2503460C2 (ru) 2007-11-07 2014-01-10 Дженентек Инк. Применение противомикробного полипептида для лечения микробных нарушений
TWI580694B (zh) 2007-11-30 2017-05-01 建南德克公司 抗-ｖｅｇｆ抗體
ES2511844T3 (es) * 2007-12-21 2014-10-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Formulación de anticuerpo
US9266967B2 (en) 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US20090162359A1 (en) 2007-12-21 2009-06-25 Christian Klein Bivalent, bispecific antibodies
CN101945667A (zh) * 2007-12-21 2011-01-12 健泰科生物技术公司 利妥昔单抗不应性类风湿性关节炎患者的疗法
PT2247620T (pt) 2008-01-31 2016-08-23 Genentech Inc Anticorpos e imunoconjugados anti-cd79b e métodos de utilização
KR101280716B1 (ko) * 2008-03-25 2013-07-01 로슈 글리카트 아게 비-호지킨 림프종의 치료를 위한, 시클로포스파미드, 빈크리스틴 및 독소루비신과 조합으로의 증가된 항체 의존성 세포 세포독성 (ａｄｃｃ) 을 갖는 유형 ⅱ 항-ｃｄ20 항체의 용도
JP6161233B2 (ja) * 2008-03-31 2017-07-12 ジェネンテック， インコーポレイテッド 喘息の治療及び診断のための組成物及び方法
EP2279410B1 (en) * 2008-04-22 2015-11-11 The Rockefeller University Methods of identifying anti-inflammatory compounds
WO2009134738A1 (en) * 2008-04-29 2009-11-05 Genentech, Inc. Responses to immunizations in rheumatoid arthritis patients treated with a cd20 antibody
KR101054362B1 (ko) * 2008-07-03 2011-08-05 재단법인 목암생명공학연구소 재조합 단백질의 푸코스 함량을 감소시키는 방법
JP5986745B2 (ja) 2008-07-15 2016-09-06 アカデミア シニカＡｃａｄｅｍｉａ Ｓｉｎｉｃａ Ｐｔｆｅ様のアルミニウム・コート・ガラススライド上のグリカンアレイおよび関連する方法
TW201438738A (zh) 2008-09-16 2014-10-16 建南德克公司 治療進展型多發性硬化症之方法
KR101834999B1 (ko) 2008-10-14 2018-03-06 제넨테크, 인크. 이뮤노글로불린 변이체 및 그의 용도
WO2010075249A2 (en) 2008-12-22 2010-07-01 Genentech, Inc. A method for treating rheumatoid arthritis with b-cell antagonists
EP2382234A2 (en) 2008-12-23 2011-11-02 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants with altered binding to protein a
SG10201402742YA (en) 2009-03-20 2014-08-28 Genentech Inc Bispecific anti-her antibodies
HRP20150965T1 (hr) * 2009-03-25 2015-11-06 Genentech, Inc. Anti-fgr3 protutijela i metode koje ih koriste
JP6051048B2 (ja) 2009-03-25 2016-12-21 ジェネンテック， インコーポレイテッド 新規な抗α５β１抗体及びその使用
US20100247484A1 (en) * 2009-03-31 2010-09-30 Heinrich Barchet Combination therapy of an afucosylated antibody and one or more of the cytokines gm csf, m csf and/or il3
BRPI1014089A2 (pt) 2009-04-02 2016-04-19 Roche Glycart Ag anticorpos multiespecíficos que compreendem anticorpos de comprimento completo e fragmentos fab de cadeia simples
PT2417156E (pt) 2009-04-07 2015-04-29 Roche Glycart Ag Anticorpos trivalentes, biespecíficos
AU2010233993A1 (en) 2009-04-07 2011-09-08 Roche Glycart Ag Bispecific anti-ErbB-1/anti-c-Met antibodies
JP5587975B2 (ja) 2009-04-07 2014-09-10 ロシュ グリクアート アクチェンゲゼルシャフト 二重特異的抗−ＥｒｂＢ−３／抗−ｃ−Ｍｅｔ抗体
WO2010146059A2 (en) 2009-06-16 2010-12-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Biomarkers for igf-1r inhibitor therapy
US9676845B2 (en) 2009-06-16 2017-06-13 Hoffmann-La Roche, Inc. Bispecific antigen binding proteins
DE202010018640U1 (de) 2009-07-24 2019-11-14 F. Hoffmann-La Roche Ag Rührersystem
TW201106972A (en) 2009-07-27 2011-03-01 Genentech Inc Combination treatments
KR20120089253A (ko) 2009-07-31 2012-08-09 제넨테크, 인크. Ｂｖ８? 또는 ｇ?ｃｓｆ?길항제를 이용한 종양 전이의 억제
TWI409079B (zh) * 2009-08-14 2013-09-21 Roche Glycart Ag 非典型岩藻醣化ｃｄ２０抗體與苯達莫斯汀（ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ）之組合療法
RU2012109451A (ru) 2009-08-14 2013-09-27 Роше Гликарт Аг Комбинированная терапия на основе афукозилированного антитела к cd20 в сочетании с флударабином и/или митоксантроном
GB0914691D0 (en) 2009-08-21 2009-09-30 Lonza Biologics Plc Immunoglobulin variants
TW201113037A (en) 2009-08-28 2011-04-16 Hoffmann La Roche Antibodies against CDCP1 for the treatment of cancer
TWI412375B (zh) 2009-08-28 2013-10-21 Roche Glycart Ag 人類化抗ｃｄｃｐ１抗體
DK2473522T3 (en) 2009-09-02 2016-11-28 Genentech Inc Smoothened MUTANT AND METHODS OF USING THE SAME
AR078161A1 (es) 2009-09-11 2011-10-19 Hoffmann La Roche Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento.
MX2012003396A (es) 2009-09-16 2012-04-10 Genentech Inc Complejos de proteina conteniendo helice super-enrollada y/o enlazador tether y usos de los mismos.
AU2010303415B2 (en) * 2009-10-07 2015-02-19 Macrogenics, Inc. Fc region-containing polypeptides that exhibit improved effector function due to alterations of the extent of fucosylation, and methods for their use
BR112012009412A2 (pt) 2009-10-22 2016-11-29 Genentech Inc 'anticorpo anti-hepsina isolado, molécula de ácido nucleico, célula hospedeira, método para fabricar um anticorpo, imunoconjugado, formulação farmacêutica, uso do anticorpo e método para fabricar um anticorpo anti-serina protease'
WO2011056494A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Activin receptor-like kinase-1 antagonist and vegfr3 antagonist combinations
WO2011056502A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Bone morphogenetic protein receptor type ii compositions and methods of use
WO2011056497A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Activin receptor type iib compositions and methods of use
DK3202898T3 (en) 2009-11-02 2019-01-14 Univ Washington THERAPEUTIC NUCLEASE COMPOSITIONS AND PROCEDURES
EP2496600A1 (en) 2009-11-04 2012-09-12 Fabrus LLC Methods for affinity maturation-based antibody optimization
SI2496601T1 (sl) 2009-11-05 2017-09-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Tehnike in sestavek za sekrecijo heterolognih polipeptidov
US11377485B2 (en) 2009-12-02 2022-07-05 Academia Sinica Methods for modifying human antibodies by glycan engineering
US10087236B2 (en) 2009-12-02 2018-10-02 Academia Sinica Methods for modifying human antibodies by glycan engineering
TWI505836B (zh) 2009-12-11 2015-11-01 Genentech Inc 抗－ｖｅｇｆ－ｃ抗體及其使用方法
PH12012501157A1 (en) 2009-12-22 2012-10-29 Roche Glycart Ag Anti-her3 antibodies and uses thereof
NZ600826A (en) 2009-12-23 2014-09-26 Genentech Inc Anti-bv8 antibodies and uses thereof
US9173961B2 (en) 2010-02-10 2015-11-03 Immunogen, Inc. CD20 antibodies and uses thereof
RU2577702C2 (ru) 2010-02-11 2016-03-20 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг 3d-facs-анализ-adcc nk-клеток
KR20130000384A (ko) 2010-02-18 2013-01-02 더 보드 어브 트러스티스 어브 더 리랜드 스탠포드 주니어 유니버시티 뉴레귤린 길항제 및 암의 치료에서의 그의 용도
BR112012022044A2 (pt) 2010-03-24 2020-08-25 Genentech Inc ''anticorpo,imunoconjugado,formulação farmacêutica,uso do anticorpo,método de tratamento,anticorpo biespecifico isolado e célula hospedeira''.
TW201138821A (en) 2010-03-26 2011-11-16 Roche Glycart Ag Bispecific antibodies
EP2374816B1 (en) 2010-04-07 2016-09-28 Agency For Science, Technology And Research Binding molecules against Chikungunya virus and uses thereof
WO2011124635A1 (en) 2010-04-07 2011-10-13 Humalys Binding molecules against chikungunya virus and uses thereof
WO2011130332A1 (en) 2010-04-12 2011-10-20 Academia Sinica Glycan arrays for high throughput screening of viruses
MX342590B (es) * 2010-04-27 2016-10-05 Roche Glycart Ag Terapia de combinacion de un anticuerpo cd20 afucosilado con un inhibidor mtor.
EP2568976B1 (en) 2010-05-10 2015-09-30 Academia Sinica Zanamivir phosphonate congeners with anti-influenza activity and determining oseltamivir susceptibility of influenza viruses
WO2011147834A1 (en) 2010-05-26 2011-12-01 Roche Glycart Ag Antibodies against cd19 and uses thereof
BR112012029866A2 (pt) 2010-06-03 2017-03-07 Genentech Inc método para a determinação da presença de uma proteína steap-1
CA2794731C (en) 2010-06-18 2019-03-19 Genentech, Inc. Anti-axl antibodies and methods of use
WO2011161119A1 (en) 2010-06-22 2011-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies against insulin-like growth factor i receptor and uses thereof
WO2011161189A1 (en) 2010-06-24 2011-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-hepsin antibodies and methods of use
WO2012006503A1 (en) 2010-07-09 2012-01-12 Genentech, Inc. Anti-neuropilin antibodies and methods of use
HRP20191305T1 (hr) 2010-07-09 2019-10-18 Bioverativ Therapeutics Inc. Preradive jednolančane molekule i polipeptidi izrađeni koristeći iste
EP2409712A1 (en) 2010-07-19 2012-01-25 International-Drug-Development-Biotech Anti-CD19 antibody having ADCC and CDC functions and improved glycosylation profile
EP2409993A1 (en) 2010-07-19 2012-01-25 International-Drug-Development-Biotech Anti-CD19 antibody having ADCC function with improved glycosylation profile
EP2409989A1 (en) 2010-07-19 2012-01-25 International-Drug-Development-Biotech Method to improve glycosylation profile for antibody
FR2962908A1 (fr) 2010-07-20 2012-01-27 Lfb Biotechnologies Formulation d'anticorps anti-cd20
WO2012010582A1 (en) 2010-07-21 2012-01-26 Roche Glycart Ag Anti-cxcr5 antibodies and methods of use
BR112013002535A2 (pt) 2010-08-03 2019-09-24 F. Hoffmann - La Roche Ag biomarcadores de leucemia linfocítica crônica (cll)
MX2013001305A (es) 2010-08-05 2013-03-20 Hoffmann La Roche Proteina de fusion de citoquina anti-viral de anticuerpo anti-mhc.
CA2807552A1 (en) 2010-08-06 2012-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
SG187746A1 (en) 2010-08-13 2013-03-28 Roche Glycart Ag Anti-fap antibodies and methods of use
KR101653030B1 (ko) 2010-08-13 2016-08-31 로슈 글리카트 아게 항-테나신-c a２ 항체 및 이의 사용 방법
WO2012022734A2 (en) 2010-08-16 2012-02-23 Medimmune Limited Anti-icam-1 antibodies and methods of use
AR082693A1 (es) 2010-08-17 2012-12-26 Roche Glycart Ag Terapia de combinacion de un anticuerpo anti-cd20 afucosilado con un anticuerpo anti-vegf
NZ604510A (en) 2010-08-17 2013-10-25 Csl Ltd Dilutable biocidal compositions and methods of use
RU2013110875A (ru) 2010-08-24 2014-09-27 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг БИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА, СОДЕРЖАЩИЕ СТАБИЛИЗИРОВАННЫЙ ДИСУЛЬФИДОМ ФРАГМЕНТ Fv
AR082518A1 (es) 2010-08-25 2012-12-12 Hoffmann La Roche Anticuerpos contra il-18r1 y usos de los mismos
SG10201408229WA (en) 2010-08-31 2015-02-27 Genentech Inc Biomarkers and methods of treatment
ES3005233T3 (en) 2010-10-01 2025-03-14 Modernatx Inc Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
AU2011312205B2 (en) 2010-10-05 2015-08-13 Curis, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
EP2787007A3 (en) 2010-11-08 2015-03-11 F. Hoffmann-La Roche AG Subcutaneously administered ANTI-IL-6 receptor antibody
TW201300417A (zh) 2010-11-10 2013-01-01 Genentech Inc 用於神經疾病免疫療法之方法及組合物
WO2012075037A1 (en) 2010-11-30 2012-06-07 Genentech, Inc. Low affinity blood brain barrier receptor antibodies and uses therefor
TWI638833B (zh) 2010-11-30 2018-10-21 中外製藥股份有限公司 細胞傷害誘導治療劑
EP2652498B1 (en) 2010-12-16 2018-04-18 F.Hoffmann-La Roche Ag Diagnosis and treatments relating to th2 inhibition
JP2014507384A (ja) 2010-12-16 2014-03-27 ロシュ グリクアート アーゲー Ｍｄｍ２阻害剤とのアフコシル化ｃｄ２０抗体の併用療法
PE20170917A1 (es) 2010-12-20 2017-07-12 Genentech Inc Anticuerpos anti-mesotelina e inmunoconjugados
BR112013015687A2 (pt) 2010-12-22 2016-10-11 Genentech Inc anticorpo anti-pcsk9 ou um fragmento de anticorpo que se liga a pcsk9, ácido nucleico isolado, vetor, célula hospedeira, método para fabricar um anticorpo anti-pcsk9, composição farmacêutica, método de redução do nível de colesterol ldl em um sujeito e método de tratamento de hipercolesterolemia em um sujeito
JP5766296B2 (ja) 2010-12-23 2015-08-19 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ポリペプチド−ポリヌクレオチド複合体、およびエフェクター成分の標的化された送達におけるその使用
RU2013139267A (ru) * 2011-02-10 2015-03-20 Рош Гликарт Аг Улучшенная иммунотерапия
EP2681239B8 (en) 2011-02-28 2015-09-09 F. Hoffmann-La Roche AG Antigen binding proteins
AR085403A1 (es) 2011-02-28 2013-09-25 Hoffmann La Roche Proteinas monovalentes que se unen a antigenos
ES2692268T5 (en) 2011-03-29 2025-02-26 Roche Glycart Ag Antibody fc variants
JP2014511687A (ja) 2011-03-31 2014-05-19 モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッド 工学操作された核酸の送達および製剤
BR112013024717A2 (pt) 2011-04-07 2017-08-08 Genentech Inc anticorpo isolado, ácido nucleico isolado, célula hospedeira, imunoconjugado, formulação farmacêutica, método de tratar um indivíduo que tem câncer e método de inibir proliferação celular em um indivíduo
WO2012146630A1 (en) 2011-04-29 2012-11-01 F. Hoffmann-La Roche Ag N-terminal acylated polypeptides, methods for their production and uses thereof
PH12013502441B1 (en) 2011-04-29 2019-02-08 Univ Washington Therapeutic nuclease compositions and methods
US8679767B2 (en) 2011-05-12 2014-03-25 Genentech, Inc. Multiple reaction monitoring LC-MS/MS method to detect therapeutic antibodies in animal samples using framework signature peptides
KR101623246B1 (ko) 2011-05-16 2016-05-20 제넨테크, 인크. Fgfr1 효능제 및 사용 방법
MY166974A (en) 2011-06-15 2018-07-27 Hoffmann La Roche Anti-human epo receptor antibodies and method of use
PE20141212A1 (es) 2011-06-22 2014-09-19 Hoffmann La Roche Eliminacion de celulas diana por parte de celulas t citotoxicas especificas de virus utilizando complejos que comprenden mhc de clase 1
FR2976811A1 (fr) 2011-06-22 2012-12-28 Lfb Biotechnologies Utilisation d'un anticorps anti-cd20 a haute adcc pour le traitement de la maladie de waldenstrom
WO2013003680A1 (en) 2011-06-30 2013-01-03 Genentech, Inc. Anti-c-met antibody formulations
US20140363438A1 (en) 2011-08-17 2014-12-11 Genentech, Inc. Neuregulin antibodies and uses thereof
MX2014001736A (es) 2011-08-17 2014-03-31 Genentech Inc Inhibicion de angiogenesis en tumores refractarios.
BR112014003999A2 (pt) 2011-08-23 2017-06-13 Roche Glycart Ag anticorpo isolado que se liga a um epítopo próximo da membrana de mcsp humano, ácido nucleico isolado, célula hospedeira, método de produção de um anticorpo, imunoconjugado, formulação farmacêutica, uso do anticorpo, método de tratamento de indivíduos portadores de câncer, método de undução da lise celular em indivíduos e teste imuno-histoquímico de mcsp
EP2747781B1 (en) 2011-08-23 2017-11-15 Roche Glycart AG Bispecific antibodies specific for t-cell activating antigens and a tumor antigen and methods of use
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
WO2013040433A1 (en) 2011-09-15 2013-03-21 Genentech, Inc. Methods of promoting differentiation
WO2013043715A1 (en) 2011-09-19 2013-03-28 Genentech, Inc. Combination treatments comprising c-met antagonists and b-raf antagonists
EP2758435A1 (en) 2011-09-23 2014-07-30 Roche Glycart AG Bispecific anti-egfr/anti igf-1r antibodies
SG11201401102VA (en) * 2011-09-30 2014-09-26 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Ion concentration-dependent binding molecule library
MX2014003689A (es) 2011-09-30 2014-12-05 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd Anticuerpos contra tl1a y sus usos.
EP2763701B1 (en) 2011-10-03 2018-12-19 Moderna Therapeutics, Inc. Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
CA2849011A1 (en) 2011-10-05 2013-04-11 Genentech, Inc. Methods of treating liver conditions using notch2 antagonists
MX390891B (es) 2011-10-14 2025-03-19 Genentech Inc ANTICUERPOS ANTI-HtrA1 Y MÉTODOS DE USO.
MX2014004426A (es) 2011-10-15 2014-07-09 Genentech Inc Metodos de uso de antagonistas de scd1.
WO2013059531A1 (en) 2011-10-20 2013-04-25 Genentech, Inc. Anti-gcgr antibodies and uses thereof
WO2013059740A1 (en) 2011-10-21 2013-04-25 Foundation Medicine, Inc. Novel alk and ntrk1 fusion molecules and uses thereof
PH12014500925A1 (en) 2011-10-28 2014-06-09 Genentech Inc Therapeutic combinations and methods of treating melanoma
AU2012327878A1 (en) 2011-10-28 2014-05-29 Patrys Limited PAT-LM1 epitopes and methods for using same
ES2749349T3 (es) 2011-11-07 2020-03-19 Medimmune Llc Proteínas de unión multiespecíficas y multivalentes y usos de las mismas
MX2014005885A (es) 2011-11-21 2014-09-04 Genentech Inc Purificacion de anticuerpos anti-c-met.
US20130302274A1 (en) 2011-11-25 2013-11-14 Roche Glycart Ag Combination therapy
WO2013083497A1 (en) 2011-12-06 2013-06-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibody formulation
JP2015501844A (ja) 2011-12-16 2015-01-19 モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドＭｏｄｅｒｎａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ． 修飾ヌクレオシド、ヌクレオチドおよび核酸組成物
PT2794905T (pt) 2011-12-20 2020-06-30 Medimmune Llc Polipéptidos modificados para estrutura de anticorpos bispecíficos
HRP20200744T1 (hr) 2011-12-22 2020-07-24 F. Hoffmann - La Roche Ag Organizacija ekspresijskog vektora, novi postupci generiranja proizvodnje stanica i njihova uporaba za rekombinantnu proizvodnju polipeptida
RU2756910C2 (ru) 2011-12-22 2021-10-06 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Комбинации элементов экспрессионного вектора, новые способы получения клеток-продуцентов и их применение для рекомбинантного получения полипептидов
CN104011080B (zh) 2011-12-22 2017-10-20 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 用于真核细胞的全长抗体展示系统及其用途
WO2013096791A1 (en) 2011-12-23 2013-06-27 Genentech, Inc. Process for making high concentration protein formulations
CA2862424A1 (en) 2012-01-18 2013-07-25 Genentech, Inc. Methods of using fgf19 modulators
US9200072B2 (en) 2012-01-18 2015-12-01 Genentech Inc. Anti-LRP5 antibodies and methods of use
CN104105711B (zh) 2012-02-10 2018-11-30 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 单链抗体及其他异多聚体
HK1211037A1 (en) 2012-02-11 2016-05-13 霍夫曼-拉罗奇有限公司 R-spondin translocations and methods using the same
PL2814587T3 (pl) 2012-02-15 2018-10-31 F.Hoffmann-La Roche Ag Chromatografia powinowactwa oparta na receptorze Fc
RU2014136886A (ru) 2012-03-27 2016-05-20 Дженентек, Инк. Диагностика и виды лечения, связанные с ингибиторами her3
AR090549A1 (es) 2012-03-30 2014-11-19 Genentech Inc Anticuerpos anti-lgr5 e inmunoconjugados
US9254311B2 (en) 2012-04-02 2016-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of proteins
WO2013151663A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 modeRNA Therapeutics Modified polynucleotides for the production of membrane proteins
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
US10130714B2 (en) 2012-04-14 2018-11-20 Academia Sinica Enhanced anti-influenza agents conjugated with anti-inflammatory activity
BR112014027166A2 (pt) 2012-05-01 2017-06-27 Genentech Inc anticorpo, ácido nucleico, célula hospedeira, método para produzir um anticorpo, imunoconjugado, formulação farmacêutica, método de tratamento, método de inibir proliferação e métodos de detecção.
WO2013170191A1 (en) 2012-05-11 2013-11-14 Genentech, Inc. Methods of using antagonists of nad biosynthesis from nicotinamide
PL2849723T3 (pl) 2012-05-18 2018-10-31 Genentech, Inc. Formulacje o wysokim stężeniu przeciwciał monoklonalnych
MX374424B (es) 2012-05-21 2025-03-06 Genentech Inc Metodos para mejorar la seguridad del transporte de la barrera hematoencefalica.
MX2014014086A (es) 2012-05-23 2015-01-26 Genentech Inc Metodo de seleccion para agentes terapeuticos.
RU2015101113A (ru) 2012-06-15 2016-08-10 Дженентек, Инк. Антитела против pcsk9, составы, дозы и способы применения
HK1209034A1 (en) 2012-06-21 2016-03-24 Indiana University Research And Technology Corporation Incretin receptor ligand polypeptide fc-region fusion polypeptides and conjugates with altered fc-effector function
WO2014004549A2 (en) 2012-06-27 2014-01-03 Amgen Inc. Anti-mesothelin binding proteins
MX2014014804A (es) 2012-06-27 2015-02-12 Hoffmann La Roche Metodo para la elaboracion de conjugados de la region fc de anticuerpos que comprenden por lo menos una entidad de union que se une especificamente a un objetivo y usos del mismo.
EP2867253B1 (en) 2012-06-27 2016-09-14 F. Hoffmann-La Roche AG Method for selection and production of tailor-made highly selective and multi-specific targeting entities containing at least two different binding entities and uses thereof
BR112014030844A2 (pt) 2012-07-04 2019-10-15 Hoffmann La Roche anticorpo anti-biotina humanizado, formulação farmacêutica e uso do anticorpo
BR112014029403A2 (pt) 2012-07-04 2018-10-09 F. Hoffmann-La Roche Ag conjugados, anticorpo e formulação farmacêutica
JP6324376B2 (ja) 2012-07-04 2018-05-16 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 抗テオフィリン抗体および使用方法
PL2870247T3 (pl) 2012-07-05 2019-10-31 Hoffmann La Roche Układ ekspresji i wydzielania
CN104540524A (zh) 2012-07-09 2015-04-22 基因泰克公司 包含抗cd22抗体的免疫缀合物
CN104428007B (zh) 2012-07-09 2018-03-16 基因泰克公司 包含抗cd22抗体的免疫缀合物
EP2869847B1 (en) 2012-07-09 2017-12-06 Genentech, Inc. Immunoconjugates comprising anti-cd79b antibodies
AR091700A1 (es) 2012-07-09 2015-02-25 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados anti-cd79b
LT3495387T (lt) 2012-07-13 2021-11-25 Roche Glycart Ag Bispecifiniai anti-vegf / anti-ang-2 antikūnai ir jų panaudojimas akių kraujagyslių ligoms gydyti
AR092044A1 (es) * 2012-08-07 2015-03-18 Roche Glycart Ag Inmunoterapia mejorada
WO2014031498A1 (en) 2012-08-18 2014-02-27 Academia Sinica Cell-permeable probes for identification and imaging of sialidases
AU2013305827A1 (en) 2012-08-21 2015-03-05 Academia Sinica Benzocyclooctyne compounds and uses thereof
RU2711552C2 (ru) 2012-08-29 2020-01-17 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Шаттл для гематоэнцефалического барьера
MX2015002947A (es) * 2012-09-07 2015-09-23 Genentech Inc Terapia de combinacion de un anticuerpo ant-cd20 tipo ii con un inhibidor blc-2 selectivo.
EP2905290B1 (en) 2012-10-05 2019-12-04 Kyowa Kirin Co., Ltd. Heterodimeric protein composition
WO2014056783A1 (en) 2012-10-08 2014-04-17 Roche Glycart Ag Fc-free antibodies comprising two fab-fragments and methods of use
EP2727942A1 (en) 2012-11-05 2014-05-07 MAB Discovery GmbH Bispecific antibodies against human EGFR, HER2, and HER3
AU2013337277B2 (en) 2012-11-05 2018-03-08 Foundation Medicine, Inc. Novel NTRK1 fusion molecules and uses thereof
EP2914629A1 (en) 2012-11-05 2015-09-09 MAB Discovery GmbH Method for the production of multispecific antibodies
EP2727943A1 (en) 2012-11-05 2014-05-07 MAB Discovery GmbH Trispecific antibodies against human EGFR, HER2 and HER3
EP2727941A1 (en) 2012-11-05 2014-05-07 MAB Discovery GmbH Method for the production of multispecific antibodies
WO2014071419A2 (en) 2012-11-05 2014-05-08 Foundation Medicine, Inc. Novel fusion molecules and uses thereof
WO2014072306A1 (en) 2012-11-08 2014-05-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Her3 antigen binding proteins binding to the beta-hairpin of her3
JP6386465B2 (ja) 2012-11-13 2018-09-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ヘマグルチニン抗体及び使用方法
ES2921623T3 (es) 2012-11-26 2022-08-30 Modernatx Inc ARN modificado terminalmente
WO2014096672A1 (fr) 2012-12-17 2014-06-26 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Utilisation d'anticorps monoclonaux pour le traitement de l'inflammation et d'infections bacteriennes
WO2014096015A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Disulfide-linked multivalent mhc class i comprising multi-function proteins
US20140194368A1 (en) * 2013-01-04 2014-07-10 Beech Tree Labs, Inc. Method of Treating Cancer by Administration of Low Levels of Heat Shock Protein 70 (HSP70)
AR094403A1 (es) 2013-01-11 2015-07-29 Hoffmann La Roche Terapia de combinación de anticuerpos anti-her3
RU2519546C1 (ru) 2013-01-16 2014-06-10 Общество С Ограниченной Ответственностью "Биоинтегратор" (Ооо "Биоинтегратор") КОНЪЮГАТЫ И МАЛЫЕ МОЛЕКУЛЫ, ВЗАИМОДЕЙСТВУЮЩИЕ С РЕЦЕПТОРОМ CD16а
WO2014113729A2 (en) 2013-01-18 2014-07-24 Foundation Mecicine, Inc. Methods of treating cholangiocarcinoma
WO2014116749A1 (en) 2013-01-23 2014-07-31 Genentech, Inc. Anti-hcv antibodies and methods of using thereof
PT2951208T (pt) 2013-02-01 2019-12-30 Univ California Anticorpos anti-cd83 e sua utilização
KR102489953B1 (ko) 2013-02-07 2023-01-20 씨에스엘 리미티드 Il-11r 결합 단백질 및 이의 용도
AU2014217561B2 (en) 2013-02-13 2018-11-15 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Highly galactosylated anti-TNF-alpha antibodies and uses thereof
KR20150118159A (ko) 2013-02-22 2015-10-21 에프. 호프만-라 로슈 아게 암의 치료 방법 및 약물 내성의 예방 방법
WO2014131712A1 (en) 2013-02-26 2014-09-04 Roche Glycart Ag Bispecific t cell activating antigen binding molecules
JP2016512489A (ja) 2013-02-26 2016-04-28 ロシュ グリクアート アーゲー 抗ｍｃｓｐ抗体
JP6499087B2 (ja) 2013-02-26 2019-04-10 ロシュ グリクアート アーゲー 二重特異性ｔ細胞活性化抗原結合分子
KR20150123250A (ko) 2013-03-06 2015-11-03 제넨테크, 인크. 암 약물 내성의 치료 및 예방 방법
AU2014248886B2 (en) * 2013-03-12 2019-06-27 University Of Utah Research Foundation Compositions and methods for inducing apoptosis
CN105209069B (zh) * 2013-03-13 2019-08-23 豪夫迈·罗氏有限公司 抗体配制剂
AU2014239903A1 (en) 2013-03-14 2015-09-17 Genentech, Inc. Combinations of a MEK inhibitor compound with an HER3/EGFR inhibitor compound and methods of use
EP3299391B1 (en) 2013-03-14 2019-12-04 Genentech, Inc. Anti-b7-h4 antibodies and immunoconjugates
KR20150127216A (ko) 2013-03-14 2015-11-16 제넨테크, 인크. 암의 치료 및 암 약물 내성의 예방 방법
US9562099B2 (en) 2013-03-14 2017-02-07 Genentech, Inc. Anti-B7-H4 antibodies and immunoconjugates
RU2015143437A (ru) 2013-03-15 2017-04-27 Дженентек, Инк. Способы лечения рака и предотвращения устойчивости к лекарственным препаратам для лечения рака
PE20151673A1 (es) 2013-03-15 2015-11-27 Genentech Inc POLIPEPTIDOS DE IL-22 Y PROTEINAS DE FUSION DE IL-22 Fc Y METODOS DE USO
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
US9587235B2 (en) 2013-03-15 2017-03-07 Atyr Pharma, Inc. Histidyl-tRNA synthetase-Fc conjugates
WO2014151006A2 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Genentech, Inc. Biomarkers and methods of treating pd-1 and pd-l1 related conditions
WO2014144865A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Genentech, Inc. Anti-crth2 antibodies and methods of use
AU2014236815B2 (en) 2013-03-15 2019-04-04 Genentech, Inc. Compositions and methods for diagnosis and treatment of hepatic cancers
BR112015023262B8 (pt) 2013-03-15 2024-02-06 Ac Immune Sa Anticorpo isolado, imunoconjugado, formulação farmacêutica e usos do anticorpo
UA118028C2 (uk) 2013-04-03 2018-11-12 Рош Глікарт Аг Біспецифічне антитіло, специфічне щодо fap і dr5, антитіло, специфічне щодо dr5, і спосіб їх застосування
EP2992010B1 (en) 2013-04-29 2021-03-24 F.Hoffmann-La Roche Ag Fc-receptor binding modified asymmetric antibodies and methods of use
SG10201810481UA (en) 2013-04-29 2018-12-28 Hoffmann La Roche Fcrn-binding abolished anti-igf-1r antibodies and their use in the treatment of vascular eye diseases
SG10201800492PA (en) 2013-04-29 2018-03-28 Hoffmann La Roche Human fcrn-binding modified antibodies and methods of use
MX359964B (es) * 2013-05-02 2018-10-17 Hoffmann La Roche Terapia de combinacion de un anticuerpo para cd20 afucosilado con un conjugado de anticuerpo para cd79b-farmaco.
JP6207721B2 (ja) * 2013-05-02 2017-10-04 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト アフコシル化ｃｄ２０抗体のｃｄ２２抗体−薬物コンジュゲートとの併用療法
EA038367B1 (ru) 2013-05-20 2021-08-16 Дженентек, Инк. АНТИТЕЛА ПРОТИВ РЕЦЕПТОРА ТРАНСФЕРРИНА (TfR) И СПОСОБЫ ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ
US10086054B2 (en) 2013-06-26 2018-10-02 Academia Sinica RM2 antigens and use thereof
WO2014210564A1 (en) 2013-06-27 2014-12-31 Academia Sinica Glycan conjugates and use thereof
CN105452296B (zh) 2013-08-01 2020-09-25 戊瑞治疗有限公司 无岩藻糖基化抗fgfr2iiib抗体
EP3038657A2 (en) 2013-08-28 2016-07-06 Bioasis Technologies Inc. Cns-targeted conjugates having modified fc regions and methods of use thereof
JP6486368B2 (ja) 2013-09-06 2019-03-20 アカデミア シニカＡｃａｄｅｍｉａ Ｓｉｎｉｃａ 改変されたグリコシル基を含む糖脂質を用いたヒトｉＮＫＴ細胞の活性化
MX2016003248A (es) 2013-09-17 2016-06-07 Genentech Inc Metodos de uso de anticuerpos anti-lgr5.
WO2015048744A2 (en) 2013-09-30 2015-04-02 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
WO2015050959A1 (en) 2013-10-01 2015-04-09 Yale University Anti-kit antibodies and methods of use thereof
PT3052192T (pt) 2013-10-02 2020-09-24 Medimmune Llc Anticorpos neutralizantes anti-influenza a e suas utilizações
KR20160067219A (ko) 2013-10-03 2016-06-13 모더나 세라퓨틱스, 인코포레이티드 저밀도 지단백질 수용체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드
RU2016115866A (ru) 2013-10-11 2017-11-16 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Мультиспецифические антитела с обменянными доменами и одинаковыми вариабельными доменами легкой цепи
EP3055328A1 (en) 2013-10-11 2016-08-17 F. Hoffmann-La Roche AG Nsp4 inhibitors and methods of use
ES2764833T3 (es) 2013-10-11 2020-06-04 The United States Of America Represented By The Sec Dep Of Health And Human Services Anticuerpos contra TEM8 y su uso
TW201940514A (zh) 2013-10-18 2019-10-16 美商建南德克公司 抗-rspo抗體及使用方法
BR112016008694A2 (pt) 2013-10-23 2017-10-03 Genentech Inc Métodos de previsão da reação de pacientes com asma, de previsão da capacidade de reação de pacientes com asma, de identificação de pacientes com asma, de tratamento de pacientes portadores de asma e de tratamento de asma, uso de um kit e kit
SI3063275T1 (sl) 2013-10-31 2020-02-28 Resolve Therapeutics, Llc Terapevtske fuzije nukleaza-albumin in postopki
CA2924268C (en) 2013-11-21 2021-05-18 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-alpha-synuclein antibodies and methods of use
WO2015082446A1 (en) 2013-12-02 2015-06-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Treatment of cancer using an anti-cdcp1 antibody and a taxane
EP3611191A1 (en) 2013-12-09 2020-02-19 Allakos Inc. Anti-siglec-8 antibodies and methods of use thereof
CA2931340A1 (en) 2013-12-13 2015-06-18 Genentech, Inc. Anti-cd33 antibodies and immunoconjugates
MX379030B (es) 2013-12-17 2025-03-10 Genentech Inc Anticuerpos anti-cd3 y metodos de uso
BR112016013741A2 (pt) 2013-12-17 2017-10-03 Genentech Inc Usos de antagonistas de ligação de eixo de pd-1 e um anticorpo de anti-cd20, e kit compreendendo os mesmos
WO2015095423A2 (en) 2013-12-17 2015-06-25 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ox40 binding agonists and pd-1 axis binding antagonists
SG10202002334PA (en) 2013-12-17 2020-05-28 Genentech Inc Methods of treating cancers using pd-1 axis binding antagonists and taxanes
TWI670283B (zh) 2013-12-23 2019-09-01 美商建南德克公司 抗體及使用方法
EP3089758B1 (en) 2014-01-03 2021-01-27 F.Hoffmann-La Roche Ag Covalently linked helicar-anti-helicar antibody conjugates and uses thereof
WO2015103549A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
ES2895752T3 (es) 2014-01-03 2022-02-22 Hoffmann La Roche Anticuerpos biespecíficos anti-hapteno/anti-receptor de la barrera hematoencefálica, complejos de los mismos y su uso como lanzaderas a través de la barrera hematoencefálica
EP3089759B1 (en) 2014-01-03 2018-12-05 F. Hoffmann-La Roche AG Covalently linked polypeptide toxin-antibody conjugates
JP6557664B2 (ja) 2014-01-06 2019-08-07 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 一価の血液脳関門シャトルモジュール
EP3835318B1 (en) 2014-01-15 2025-10-29 F. Hoffmann-La Roche AG Fc-region variants with modified fcrn- and maintained protein a-binding properties
TW201620939A (zh) 2014-01-16 2016-06-16 中央研究院 治療及檢測癌症之組合物及方法
US10150818B2 (en) 2014-01-16 2018-12-11 Academia Sinica Compositions and methods for treatment and detection of cancers
CN106413756A (zh) 2014-01-24 2017-02-15 豪夫迈·罗氏有限公司 使用抗steap1抗体和免疫缀合物的方法
ES2694857T3 (es) 2014-02-04 2018-12-27 Genentech, Inc. Smoothened mutante y métodos de uso de la misma
SG10201901076WA (en) 2014-02-08 2019-03-28 Genentech Inc Methods of treating alzheimer's disease
RU2724190C2 (ru) 2014-02-08 2020-06-23 Дженентек, Инк. Способы лечения болезни альцгеймера
EP3105253B1 (en) 2014-02-12 2018-06-27 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-jagged1 antibodies and methods of use
UA117608C2 (uk) 2014-02-21 2018-08-27 Дженентек, Інк. Спосіб лікування еозинофільного захворювання у пацієнта шляхом застосування біспецифічного анти-il-13/il-17 антитіла
JP6825909B2 (ja) 2014-02-28 2021-02-03 アラコス インコーポレイテッド シグレック−８関連疾患を処置するための方法および組成物
PL3116999T3 (pl) 2014-03-14 2021-12-27 F.Hoffmann-La Roche Ag Sposoby i kompozycje do wydzielania polipeptydów heterologicznych
US20170107294A1 (en) 2014-03-21 2017-04-20 Nordlandssykehuset Hf Anti-cd14 antibodies and uses thereof
EP3119490B1 (en) 2014-03-21 2021-09-08 F. Hoffmann-La Roche AG In vitro prediction of in vivo half-life of antibodies
MX2016012285A (es) 2014-03-24 2017-01-23 Genentech Inc Tratamiento de cáncer con antagonista de c-met y correlación de estos con la expresión de hgf.
EP3129767B1 (en) 2014-03-27 2021-09-01 Academia Sinica Reactive labelling compounds and uses thereof
MA40682B1 (fr) 2014-03-31 2020-01-31 Hoffmann La Roche Anticorps anti-ox40 et procédés d'utilisation correspondants
WO2015153514A1 (en) 2014-03-31 2015-10-08 Genentech, Inc. Combination therapy comprising anti-angiogenesis agents and ox40 binding agonists
SG11201608192SA (en) 2014-04-11 2016-10-28 Medimmune Llc Bispecific her2 antibodies
WO2015164615A1 (en) 2014-04-24 2015-10-29 University Of Oslo Anti-gluten antibodies and uses thereof
EP3145952A2 (en) 2014-05-22 2017-03-29 Genentech, Inc. Anti-gpc3 antibodies and immunoconjugates
MX2016015163A (es) 2014-05-23 2017-03-03 Genentech Inc Biomarcadores mit y metodos para su uso.
KR20170003720A (ko) 2014-05-27 2017-01-09 아카데미아 시니카 항-ｃｄ20 글리코항체 및 이의 용도
US10118969B2 (en) 2014-05-27 2018-11-06 Academia Sinica Compositions and methods relating to universal glycoforms for enhanced antibody efficacy
DK3149045T3 (da) 2014-05-27 2023-03-06 Academia Sinica Sammensætninger og fremgangsmåder vedrørende universelle glycoformer til forbedret antistofeffekt
AU2015267045B2 (en) 2014-05-27 2021-02-25 Academia Sinica Anti-HER2 glycoantibodies and uses thereof
JP7063538B2 (ja) 2014-05-28 2022-05-09 アカデミア シニカ 抗ＴＮＦα糖操作抗体群およびその使用
TWI689520B (zh) 2014-05-30 2020-04-01 漢霖生技股份有限公司 抗表皮生長因子受體（ｅｇｆｒ）抗體
KR20170010785A (ko) 2014-06-11 2017-02-01 제넨테크, 인크. 항-lgr5 항체 및 이의 용도
EP3154589A1 (en) 2014-06-13 2017-04-19 Genentech, Inc. Methods of treating and preventing cancer drug resistance
CN106687476B (zh) 2014-06-26 2020-11-13 豪夫迈·罗氏有限公司 抗brdu抗体及使用方法
BR112017000130A2 (pt) 2014-07-11 2018-01-09 Genentech Inc método para atenuar a toxicidade associada à inibição da via de notch e método de tratamento do câncer
BR112017000497B1 (pt) 2014-07-11 2023-12-26 Ventana Medical Systems, Inc Anticorpo isolado, célula hospedeira procariótica, imunoconjugado e método de detecção da presença ou do nível de expressão de pd-l1
CA2954780A1 (en) 2014-07-15 2016-01-21 Medimmune, Llc Neutralizing anti-influenza b antibodies and uses thereof
RS65573B1 (sr) 2014-08-04 2024-06-28 Hoffmann La Roche Bispecifični antigen vezujući molekuli koji aktiviraju t ćelije
TWI805109B (zh) 2014-08-28 2023-06-11 美商奇諾治療有限公司 對cd19具專一性之抗體及嵌合抗原受體
ES3034398T3 (en) 2014-08-28 2025-08-18 Bioatla Inc Conditionally active chimeric antigen receptors for modified t-cells
EP3191500A4 (en) 2014-09-08 2018-04-11 Academia Sinica HUMAN iNKT CELL ACTIVATION USING GLYCOLIPIDS
EP3191527B1 (en) * 2014-09-10 2020-01-15 F.Hoffmann-La Roche Ag Galactoengineered immunoglobulin 1 antibodies
MA40579A (fr) 2014-09-12 2016-03-17 Genentech Inc Anticorps anti-cll-1 et immunoconjugués
MY186334A (en) 2014-09-12 2021-07-12 Genentech Inc Anti-her2 antibodies and immunoconjugates
CN113698488A (zh) 2014-09-12 2021-11-26 基因泰克公司 抗-b7-h4抗体及免疫缀合物
SG11201701821QA (en) 2014-09-15 2017-04-27 Genentech Inc Antibody formulations
CN107124870A (zh) 2014-09-17 2017-09-01 基因泰克公司 包含抗her2抗体和吡咯并苯并二氮杂*的免疫缀合物
DK3262071T3 (da) 2014-09-23 2020-06-15 Hoffmann La Roche Fremgangsmåde til anvendelse af anti-CD79b-immunkonjugater
US9732148B2 (en) 2014-10-16 2017-08-15 Genentech, Inc. Anti-α-synuclein antibodies and methods of use
US10870704B2 (en) 2014-10-23 2020-12-22 Kira Biotech Pty Limited CD83 binding proteins and uses thereof
WO2016070001A1 (en) 2014-10-31 2016-05-06 Jounce Therapeutics, Inc. Methods of treating conditions with antibodies that bind b7-h4
EP3215637B1 (en) 2014-11-03 2019-07-03 F. Hoffmann-La Roche AG Methods and biomarkers for predicting efficacy and valuation of an ox40 agonist treatment
KR20170086540A (ko) 2014-11-03 2017-07-26 제넨테크, 인크. T 세포 면역 하위세트를 검출하기 위한 검정 및 그의 사용 방법
CN107108740B (zh) 2014-11-05 2021-09-17 豪夫迈·罗氏有限公司 抗fgfr2/3抗体及其使用方法
KR20170072343A (ko) 2014-11-06 2017-06-26 제넨테크, 인크. Ox40 결합 효능제 및 tigit 억제제를 포함하는 병용 요법
EP3215528B1 (en) 2014-11-06 2019-08-07 F.Hoffmann-La Roche Ag Fc-region variants with modified fcrn-binding and methods of use
WO2016071377A1 (en) 2014-11-06 2016-05-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Fc-region variants with modified fcrn- and protein a-binding properties
EP3552488A1 (en) 2014-11-10 2019-10-16 F. Hoffmann-La Roche AG Animal model for nephropathy and agents for treating the same
AU2015346460A1 (en) 2014-11-10 2017-03-23 Genentech, Inc. Anti-interleukin-33 antibodies and uses thereof
MX391388B (es) 2014-11-14 2025-03-21 Hoffmann La Roche Moléculas de unión a antígeno que comprenden un trímero de ligando de la familia de tnf.
WO2016077789A1 (en) 2014-11-14 2016-05-19 The Usa, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to ebola virus glycoprotein and their use
EP3221360A1 (en) 2014-11-17 2017-09-27 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy comprising ox40 binding agonists and pd-1 axis binding antagonists
WO2016081640A1 (en) 2014-11-19 2016-05-26 Genentech, Inc. Anti-transferrin receptor / anti-bace1 multispecific antibodies and methods of use
JP6779876B2 (ja) 2014-11-19 2020-11-04 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗トランスフェリン受容体抗体及びその使用方法
CN107108745B (zh) 2014-11-19 2021-01-12 基因泰克公司 抗bace1的抗体和其用于神经疾病免疫疗法的用途
FI4141032T3 (fi) 2014-11-20 2024-07-31 Hoffmann La Roche T-solua aktivoivien bispesifisten antigeeniä sitovien molekyylien ja pd-1-akselia sitovien antagonistien yhdistelmähoito
EP3221356B1 (en) 2014-11-20 2020-09-02 F.Hoffmann-La Roche Ag T cell activating bispecific antigen binding molecules against folr1 and cd3
BR112017010513A2 (pt) 2014-11-20 2018-04-03 F. Hoffmann-La Roche Ag ?cadeias leves comuns e métodos de uso?
CN107001482B (zh) 2014-12-03 2021-06-15 豪夫迈·罗氏有限公司 多特异性抗体
AR102918A1 (es) 2014-12-05 2017-04-05 Genentech Inc Anticuerpos anti-cd79b y métodos de uso
CA2966365A1 (en) 2014-12-10 2016-06-16 Genentech, Inc. Blood brain barrier receptor antibodies and methods of use
NZ730607A (en) 2014-12-19 2022-07-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-myostatin antibodies, polypeptides containing variant fc regions, and methods of use
SG10201710322VA (en) 2014-12-19 2018-02-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-c5 antibodies and methods of use
US20160200815A1 (en) 2015-01-05 2016-07-14 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies that inhibit tim-3:lilrb2 interactions and uses thereof
WO2016110576A1 (en) 2015-01-08 2016-07-14 Genmab A/S Bispecific antibodies against cd3 and cd20
US9975965B2 (en) 2015-01-16 2018-05-22 Academia Sinica Compositions and methods for treatment and detection of cancers
US10495645B2 (en) 2015-01-16 2019-12-03 Academia Sinica Cancer markers and methods of use thereof
AR103442A1 (es) 2015-01-16 2017-05-10 Juno Therapeutics Inc Anticuerpos y receptores de antígenos quiméricos específicos de ror1
CN107428823B (zh) 2015-01-22 2021-10-26 中外制药株式会社 两种以上抗-c5抗体的组合与使用方法
US10342858B2 (en) 2015-01-24 2019-07-09 Academia Sinica Glycan conjugates and methods of use thereof
WO2016126972A1 (en) 2015-02-04 2016-08-11 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
WO2016125495A1 (en) 2015-02-05 2016-08-11 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibodies comprising an ion concentration dependent antigen-binding domain, fc region variants, il-8-binding antibodies, and uses therof
US10301377B2 (en) 2015-02-24 2019-05-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Middle east respiratory syndrome coronavirus immunogens, antibodies, and their use
AU2016233398A1 (en) 2015-03-16 2017-09-07 F. Hoffmann-La Roche Ag Methods of detecting and quantifying IL-13 and uses in diagnosing and treating Th2-associated diseases
WO2016146833A1 (en) 2015-03-19 2016-09-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Biomarkers for nad(+)-diphthamide adp ribosyltransferase resistance
SMT202000255T1 (it) 2015-03-20 2020-07-08 The United States Of America As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Anticorpi neutralizzanti diretti contro gp120 e loro utilizzo
RS60614B1 (sr) 2015-03-23 2020-08-31 Jounce Therapeutics Inc Antitela za icos
HUE048111T2 (hu) 2015-03-23 2020-05-28 Bayer Pharma AG Anti-CEACAM6 ellenanyagok és alkalmazásuk
WO2016161390A1 (en) 2015-04-03 2016-10-06 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs targeting afp peptide/mhc complexes and uses thereof
CN115932273A (zh) 2015-04-24 2023-04-07 豪夫迈·罗氏有限公司 鉴定包含结合多肽的细菌的方法
WO2016174917A1 (ja) * 2015-04-30 2016-11-03 富士フイルム株式会社 装飾シート
HK1250997A1 (zh) 2015-05-01 2019-01-18 基因泰克公司 掩蔽抗cd3抗体和使用方法
WO2016179194A1 (en) 2015-05-04 2016-11-10 Jounce Therapeutics, Inc. Lilra3 and method of using the same
CN107592812A (zh) 2015-05-11 2018-01-16 豪夫迈·罗氏有限公司 治疗狼疮性肾炎的组合物和方法
IL255312B (en) 2015-05-12 2022-08-01 Genentech Inc Therapeutic and diagnostic methods for cancer containing a pd–l1 binding antagonist
HK1248773A1 (zh) 2015-05-29 2018-10-19 豪夫迈‧罗氏有限公司 用於癌症的治疗和诊断方法
WO2016196343A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Genentech, Inc. Humanized anti-ebola virus glycoprotein antibodies and methods of use
JP2018516933A (ja) 2015-06-02 2018-06-28 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｉｌ−３４抗体を使用して神経学的疾患を治療するための組成物及び方法
WO2016196975A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health & Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
ES2834823T3 (es) 2015-06-04 2021-06-18 Ospedale San Raffaele Srl IGFBP3 y usos del mismo
AU2016272045B2 (en) 2015-06-04 2018-04-19 Ospedale San Raffaele Srl Inhibitor of IGFBP3/TMEM219 axis and diabetes
UA126272C2 (uk) 2015-06-05 2022-09-14 Дженентек, Інк. Антитіло проти тау-білка та спосіб його застосування
KR20180011839A (ko) 2015-06-08 2018-02-02 제넨테크, 인크. 항-ox40 항체를 이용한 암의 치료 방법
HK1251474A1 (zh) 2015-06-08 2019-02-01 豪夫迈‧罗氏有限公司 使用抗ox40抗体和pd-1轴结合拮抗剂治疗癌症的方法
US10017577B2 (en) 2015-06-15 2018-07-10 Genentech, Inc. Antibodies and immunoconjugates
WO2016204966A1 (en) 2015-06-16 2016-12-22 Genentech, Inc. Anti-cd3 antibodies and methods of use
CN107847568B (zh) 2015-06-16 2022-12-20 豪夫迈·罗氏有限公司 抗cll-1抗体和使用方法
HRP20231134T1 (hr) 2015-06-16 2024-01-05 F. Hoffmann - La Roche Ag Humanizirana i afinitetno zrela protutijela na fcrh5 i postupci za uporabu
US10774145B2 (en) 2015-06-17 2020-09-15 Allakos Inc. Methods and compositions for treating fibrotic diseases
HUE073235T2 (hu) 2015-06-17 2026-01-28 Hoffmann La Roche Anti-HER2 antitestek és alkalmazási eljárások
CA2986263A1 (en) 2015-06-17 2016-12-22 Genentech, Inc. Methods of treating locally advanced or metastatic breast cancers using pd-1 axis binding antagonists and taxanes
JP7021955B2 (ja) 2015-06-24 2022-03-03 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｈｅｒ２及び血液脳関門受容体に特異的な三重特異性抗体及び使用方法
RU2018102575A (ru) * 2015-06-24 2019-07-25 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Антитела против человеческого csf-1r, предназначенные для применения для индукции лимфоцитоза при лимфомах или лейкозах
EP3108897A1 (en) 2015-06-24 2016-12-28 F. Hoffmann-La Roche AG Antibodies against human csf-1r for use in inducing lymphocytosis in lymphomas or leukemias
CR20210429A (es) 2015-06-24 2021-09-24 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS ANTI-RECEPTOR DE TRANSFERRINA CON AFINIDAD DISEÑADA (Divisional 2017-0562)
CN108026172B (zh) 2015-06-26 2022-04-29 赛诺菲生物技术公司 单克隆抗il-1racp抗体
EP3313885A1 (en) 2015-06-29 2018-05-02 H. Hoffnabb-La Roche Ag Type ii anti-cd20 antibody for use in organ transplantation
EP3514174B1 (en) 2015-06-29 2021-03-31 Ventana Medical Systems, Inc. Materials and methods for performing histochemical assays for human pro-epiregulin and amphiregulin
FR3038517B1 (fr) 2015-07-06 2020-02-28 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Utilisation de fragments fc modifies en immunotherapie
CN105384825B (zh) 2015-08-11 2018-06-01 南京传奇生物科技有限公司 一种基于单域抗体的双特异性嵌合抗原受体及其应用
WO2017040342A1 (en) 2015-08-28 2017-03-09 Genentech, Inc. Anti-hypusine antibodies and uses thereof
AU2016328357B2 (en) 2015-09-22 2023-03-02 Ventana Medical Systems, Inc. Anti-OX40 antibodies and diagnostic uses thereof
JP6959912B2 (ja) 2015-09-23 2021-11-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｖｅｇｆ抗体の最適化変異体
PH12018500645B1 (en) 2015-09-24 2022-10-21 Abvitro Llc Hiv antibody compositions and methods of use
PH12022553648A1 (en) 2015-09-25 2024-03-11 Genentech Inc Anti-tigit antibodies and methods of use
JP7628764B2 (ja) 2015-09-29 2025-02-12 アムジエン・インコーポレーテツド Ａｓｇｒ阻害剤
AR106188A1 (es) 2015-10-01 2017-12-20 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-cd19 humano humanizados y métodos de utilización
KR20180073561A (ko) 2015-10-02 2018-07-02 에프. 호프만-라 로슈 아게 이중특이적 항-ceaxcd3 t 세포 활성화 항원 결합 분자
BR112018002570A2 (pt) 2015-10-02 2018-10-16 Hoffmann La Roche molécula de ligação ao antígeno biespecífica, anticorpo biespecífico, polinucleotídeos, anticorpo que se liga especificamente ao ox40, composição farmacêutica e método para inibir o crescimento de células tumorais em um indivíduo
TWI819458B (zh) 2015-10-02 2023-10-21 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 雙特異性抗‐人類cd20/人類轉鐵蛋白受體抗體及使用方法
AR106189A1 (es) 2015-10-02 2017-12-20 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS BIESPECÍFICOS CONTRA EL A-b HUMANO Y EL RECEPTOR DE TRANSFERRINA HUMANO Y MÉTODOS DE USO
DK3356411T3 (da) 2015-10-02 2021-09-06 Hoffmann La Roche Bispecifikke antistoffer, der er specifikke for PD1 og TIM3
EP3150636A1 (en) 2015-10-02 2017-04-05 F. Hoffmann-La Roche AG Tetravalent multispecific antibodies
KR102111338B1 (ko) 2015-10-02 2020-05-15 제넨테크, 인크. 피롤로벤조디아제핀 항체 약물 콘쥬게이트 및 이의 사용 방법
KR20180054877A (ko) 2015-10-07 2018-05-24 에프. 호프만-라 로슈 아게 공자극 tnf 수용체에 대해 4가를 갖는 이중특이적 항체
CA2997809A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Il-7r-alpha specific antibodies for treating acute lymphoblastic leukemia
US10604577B2 (en) 2015-10-22 2020-03-31 Allakos Inc. Methods and compositions for treating systemic mastocytosis
CA2998208A1 (en) 2015-10-22 2017-04-27 Jounce Therapeutics, Inc. Gene signatures for determining icos expression
CN114891102A (zh) 2015-10-29 2022-08-12 豪夫迈·罗氏有限公司 抗变体Fc区抗体及使用方法
EP3184547A1 (en) 2015-10-29 2017-06-28 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-tpbg antibodies and methods of use
EP3368074A2 (en) 2015-10-30 2018-09-05 Hoffmann-La Roche AG Anti-factor d antibodies and conjugates
SG11201803356SA (en) 2015-10-30 2018-05-30 Genentech Inc Anti-htra1 antibodies and methods of use thereof
CA3003878A1 (en) 2015-11-03 2017-05-11 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 gp41 and their use
CN108602884B (zh) 2015-11-08 2024-06-25 豪夫迈·罗氏有限公司 筛选多特异性抗体的方法
RU2745707C2 (ru) 2015-11-23 2021-03-30 Файв Прайм Терапьютикс, Инк. Ингибиторы fgfr2 отдельно или в комбинации с иммуностимулирующими агентами в лечении рака
EP3178848A1 (en) 2015-12-09 2017-06-14 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody for reducing formation of anti-drug antibodies
AU2016368469B2 (en) * 2015-12-09 2023-11-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Type II anti-CD20 antibody for reducing formation of anti-drug antibodies
PL3390442T3 (pl) 2015-12-18 2024-03-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Przeciwciała anty-c5 i sposoby ich stosowania
EP3390443A4 (en) 2015-12-18 2019-11-13 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha ANTI-MYOSTATIN ANTIBODIES, POLYPEPTIDES WITH DEVIANT FC REGIONS AND METHOD OF USE
AR107303A1 (es) 2016-01-08 2018-04-18 Hoffmann La Roche Métodos de tratamiento de cánceres positivos para ace utilizando antagonistas de unión a eje pd-1 y anticuerpos biespecíficos anti-ace / anti-cd3, uso, composición, kit
CN114019170A (zh) 2016-01-20 2022-02-08 基因泰克公司 用于阿尔茨海默氏病的高剂量治疗
AU2017213826A1 (en) 2016-02-04 2018-08-23 Curis, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
CN109196121B (zh) 2016-02-29 2022-01-04 基因泰克公司 用于癌症的治疗和诊断方法
JP2019515874A (ja) 2016-03-01 2019-06-13 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 改変された細胞死誘導を有するオビヌツズマブ変異体
AU2017231749A1 (en) 2016-03-08 2018-09-20 Academia Sinica Methods for modular synthesis of N-glycans and arrays thereof
US11767362B1 (en) 2016-03-15 2023-09-26 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods of treating cancers using PD-1 axis binding antagonists and anti-GPC3 antibodies
LT3433280T (lt) 2016-03-22 2023-07-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Proteazės aktyvuojamos t ląstelei bispecifinės molekulės
US20170315132A1 (en) 2016-03-25 2017-11-02 Genentech, Inc. Multiplexed total antibody and antibody-conjugated drug quantification assay
WO2017172260A1 (en) 2016-03-31 2017-10-05 Ngm Bioparmaceuticals, Inc. Binding proteins and methods of use thereof
EP3443004A1 (en) 2016-04-14 2019-02-20 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-rspo3 antibodies and methods of use
JP2019515670A (ja) 2016-04-15 2019-06-13 ジェネンテック， インコーポレイテッド がんをモニタリングし治療するための方法
AU2017248644B2 (en) 2016-04-15 2019-10-31 Bioatla, Llc Anti-Axl antibodies, antibody fragments and their immunoconjugates and uses thereof
MX384141B (es) 2016-04-15 2025-03-14 Genentech Inc Métodos para monitorear y terapias para usarse en tratar el cáncer.
SG11201809620UA (en) 2016-05-02 2018-11-29 Hoffmann La Roche The contorsbody - a single chain target binder
WO2017192589A1 (en) 2016-05-02 2017-11-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to influenza ha and their use and identification
EP3241845A1 (en) 2016-05-06 2017-11-08 MAB Discovery GmbH Humanized anti-il-1r3 antibodies
EP3243836A1 (en) 2016-05-11 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG C-terminally fused tnf family ligand trimer-containing antigen binding molecules
WO2017194442A1 (en) 2016-05-11 2017-11-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Antigen binding molecules comprising a tnf family ligand trimer and a tenascin binding moiety
CN109071640B (zh) 2016-05-11 2022-10-18 豪夫迈·罗氏有限公司 经修饰抗生腱蛋白抗体及使用方法
EP3243832A1 (en) 2016-05-13 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG Antigen binding molecules comprising a tnf family ligand trimer and pd1 binding moiety
TWI851939B (zh) 2016-05-13 2024-08-11 美商拜奧亞特拉公司 抗-ror2抗體、抗體片段、其免疫結合物及其用途
CN118436801A (zh) 2016-05-20 2024-08-06 豪夫迈·罗氏有限公司 Protac抗体缀合物及其使用方法
JP7022080B2 (ja) 2016-05-27 2022-02-17 ジェネンテック， インコーポレイテッド 部位特異的抗体－薬物複合体の特徴付けのための生化学分析的方法
EP3252078A1 (en) 2016-06-02 2017-12-06 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer
CN110603266A (zh) 2016-06-02 2019-12-20 豪夫迈·罗氏有限公司 用于治疗癌症的ii型抗cd20抗体和抗cd20/cd3双特异性抗体
MX2018014375A (es) 2016-06-17 2019-04-22 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpos antimiostatina y metodos de uso.
EP3257866A1 (en) 2016-06-17 2017-12-20 Academisch Medisch Centrum Modified anti-tnf antibody and use thereof in the treatment of ibd
EP3475298A1 (en) 2016-06-24 2019-05-01 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-polyubiquitin multispecific antibodies
AU2017291262A1 (en) * 2016-06-30 2019-01-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Improved adoptive T-cell therapy
AU2017290389B2 (en) 2016-07-01 2024-09-26 Resolve Therapeutics, Llc Optimized binuclease fusions and methods
CN109415435B (zh) 2016-07-04 2024-01-16 豪夫迈·罗氏有限公司 新型抗体形式
WO2018014260A1 (en) 2016-07-20 2018-01-25 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Multispecific antigen binding proteins and methods of use thereof
WO2018023100A2 (en) 2016-07-29 2018-02-01 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies and related methods
CN109415444B (zh) 2016-07-29 2024-03-01 中外制药株式会社 显示增加的备选fviii辅因子功能活性的双特异性抗体
BR112019001902A2 (pt) 2016-08-05 2019-07-09 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha composição para profilaxia ou tratamento de doenças relacionadas à il-8
JP7250674B2 (ja) 2016-08-08 2023-04-03 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト がんの治療及び診断方法
KR102512934B1 (ko) 2016-08-10 2023-03-23 레전드 바이오테크 아일랜드 리미티드 Bcma를 표적으로 하는 키메라 항원 수용체 및 이들의 이용 방법
AU2017316663B2 (en) 2016-08-22 2024-02-22 CHO Pharma Inc. Antibodies, binding fragments, and methods of use
CN107384932B (zh) 2016-08-31 2020-10-20 北京天广实生物技术股份有限公司 抗人cd20人源化单克隆抗体mil62、其制备方法及用途
WO2018045379A1 (en) 2016-09-02 2018-03-08 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Composition and methods of treating b cell disorders
WO2018049083A1 (en) 2016-09-07 2018-03-15 The Regents Of The University Of California Antibodies to oxidation-specific epitopes
SG10201607778XA (en) 2016-09-16 2018-04-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-Dengue Virus Antibodies, Polypeptides Containing Variant Fc Regions, And Methods Of Use
CN109689682B (zh) 2016-09-19 2022-11-29 豪夫迈·罗氏有限公司 基于补体因子的亲和层析
HUE063135T2 (hu) 2016-09-23 2023-12-28 Hoffmann La Roche IL-13 antagonisták alkalmazásai atópiás dermatitis kezelésére
US10882918B2 (en) 2016-09-30 2021-01-05 Hoffmann-La Roche Inc. Bispecific T cell activating antigen binding molecules
EP3519433A1 (en) 2016-10-03 2019-08-07 Juno Therapeutics, Inc. Hpv-specific binding molecules
EP3522933B1 (en) 2016-10-05 2021-12-15 F. Hoffmann-La Roche AG Methods for preparing antibody drug conjugates
EP3523451A1 (en) 2016-10-06 2019-08-14 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for cancer
WO2018068201A1 (en) 2016-10-11 2018-04-19 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies and variants thereof against ctla-4
US11555076B2 (en) 2016-10-29 2023-01-17 Genentech, Inc. Anti-MIC antibodies and methods of use
RS62589B1 (sr) 2016-11-02 2021-12-31 Jounce Therapeutics Inc Antitela na pd-1 i njihova upotreba
KR20190074300A (ko) 2016-11-15 2019-06-27 제넨테크, 인크. 항-cd20/항-cd3 이중특이적 항체에 의한 치료를 위한 투약
JOP20190100A1 (ar) 2016-11-19 2019-05-01 Potenza Therapeutics Inc بروتينات ربط مولد ضد مضاد لـ gitr وطرق استخدامها
CA3036983A1 (en) 2016-11-21 2018-05-24 Cureab Gmbh Anti-gp73 antibodies and immunoconjugates
KR20240035636A (ko) 2016-12-07 2024-03-15 제넨테크, 인크. 항-타우 항체 및 이의 이용 방법
AR110321A1 (es) 2016-12-07 2019-03-20 Genentech Inc Anticuerpos antitau y métodos de uso
TW201827076A (zh) 2016-12-12 2018-08-01 美商建南德克公司 使用抗pd-l1抗體及抗雄激素治療癌症之方法
CN117752798A (zh) 2016-12-19 2024-03-26 豪夫迈·罗氏有限公司 用靶向性4-1bb(cd137)激动剂的组合疗法
MX2019006954A (es) 2016-12-20 2019-08-01 Hoffmann La Roche Terapia de combinacion de anticuerpos biespecificos anti-cd20/anti-cd3 y agonistas de 4-1bb (cd137).
JOP20190134A1 (ar) 2016-12-23 2019-06-02 Potenza Therapeutics Inc بروتينات رابطة لمولد ضد مضادة لنيوروبيلين وطرق استخدامها
KR20190099527A (ko) 2017-01-03 2019-08-27 에프. 호프만-라 로슈 아게 항-4-1bb 클론 20h4.9를 포함하는 이중특이성 항원 결합 분자
US20180230218A1 (en) 2017-01-04 2018-08-16 Immunogen, Inc. Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof
TW201831517A (zh) 2017-01-12 2018-09-01 美商優瑞科生物技術公司 靶向組織蛋白h3肽/mhc複合體之構築體及其用途
BR112019016595A2 (pt) 2017-02-10 2020-03-31 Genentech, Inc. Anticorpos isolados, métodos de produção do anticorpo e de tratamento de um distúrbio, ácido nucleico isolado, vetor ou conjunto de vetores, célula hospedeira, composições farmacêuticas e uso
US11021535B2 (en) 2017-02-10 2021-06-01 The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
CA3052670A1 (en) 2017-03-01 2018-09-07 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for cancer
EP3600442A1 (en) 2017-03-22 2020-02-05 Genentech, Inc. Optimized antibody compositions for treatment of ocular disorders
MX2019011423A (es) 2017-03-28 2019-11-01 Genentech Inc Metodos de tratamiento de enfermedades neurodegenerativas.
JP7196094B2 (ja) 2017-03-29 2022-12-26 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 共刺激ｔｎｆ受容体のための二重特異性抗原結合分子
EP3601346A1 (en) 2017-03-29 2020-02-05 H. Hoffnabb-La Roche Ag Bispecific antigen binding molecule for a costimulatory tnf receptor
JOP20190203A1 (ar) 2017-03-30 2019-09-03 Potenza Therapeutics Inc بروتينات رابطة لمولد ضد مضادة لـ tigit وطرق استخدامها
TWI704158B (zh) 2017-04-04 2020-09-11 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 能夠特異性結合至cd40及fap之新穎雙特異性抗原結合分子
SG11201909154SA (en) 2017-04-05 2019-10-30 Hoffmann La Roche Bispecific antibodies specifically binding to pd1 and lag3
WO2018191438A1 (en) 2017-04-11 2018-10-18 Inhibrx, Inc. Multispecific polypeptide constructs having constrained cd3 binding and methods of using the same
EP3610042A1 (en) 2017-04-14 2020-02-19 H. Hoffnabb-La Roche Ag Diagnostic and therapeutic methods for cancer
CN110536694A (zh) 2017-04-20 2019-12-03 Atyr 医药公司 用于治疗肺部炎症的组合物和方法
CA3059615A1 (en) 2017-04-21 2018-10-25 Genentech, Inc. Use of klk5 antagonists for treatment of a disease
IL270138B2 (en) 2017-04-26 2025-08-01 Eureka Therapeutics Inc Structures that specifically recognize glypican 3 and their uses
SG11201909395TA (en) 2017-04-27 2019-11-28 Tesaro Inc Antibody agents directed against lymphocyte activation gene-3 (lag-3) and uses thereof
BR112019022912A2 (pt) 2017-05-05 2020-05-26 Allakos Inc. Métodos e composições para tratar doenças oculares alérgicas
EP3401332A1 (en) 2017-05-08 2018-11-14 MAB Discovery GmbH Anti-il-1r3 antibodies for use in inflammatory conditions
LT3624837T (lt) 2017-05-16 2025-10-10 Anti-fgfr2 antikūnai derinyje su chemoterapijos agentais vėžio gydymui
EP3652206A1 (en) 2017-07-10 2020-05-20 International-Drug-Development-Biotech Treatment of b cell malignancies using afucosylated pro-apoptotic anti-cd19 antibodies in combination with anti cd20 antibodies or chemotherapeutics
EP3655034A1 (en) 2017-07-21 2020-05-27 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for cancer
EP3658172A4 (en) 2017-07-25 2021-05-05 TrueBinding, Inc. TREATING CANCER BY BLOCKING THE INTERACTION OF TIM-3 AND HIS LIGAND
PL3658589T3 (pl) 2017-07-26 2024-03-18 Forty Seven, Inc. Przeciwciała anty-sirp-alfa i powiązane sposoby
JP2020528061A (ja) 2017-07-26 2020-09-17 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト ＢＥＴ阻害剤、Ｂｃｌ−２阻害剤及び抗ＣＤ２０抗体を用いた併用療法
CN119798437A (zh) 2017-08-08 2025-04-11 豪夫迈·罗氏有限公司 一种dlbcl患者亚组的奥滨尤妥珠单抗治疗
CN107881160A (zh) 2017-08-11 2018-04-06 百奥泰生物科技(广州)有限公司 一种由基因组被编辑的cho宿主细胞产生的具有独特糖谱的重组抗体及其制备方法
CN111511762B (zh) 2017-08-21 2025-05-06 天演药业公司 抗cd137分子及其用途
US10947295B2 (en) 2017-08-22 2021-03-16 Sanabio, Llc Heterodimers of soluble interferon receptors and uses thereof
EP4424707A3 (en) * 2017-09-19 2024-11-13 Tillotts Pharma AG Antibody variants
JP7382922B2 (ja) 2017-09-20 2023-11-17 中外製薬株式会社 Ｐｄ－１系結合アンタゴニストおよびｇｐｃ３標的化剤を使用する併用療法のための投与レジメン
EP3692063A1 (en) 2017-10-03 2020-08-12 Juno Therapeutics, Inc. Hpv-specific binding molecules
EP3694890A4 (en) 2017-10-12 2021-11-03 Immunowake Inc. LIGHT CHAIN ANTIBODY FUSION PROTEIN WITH VEGFR
IL321935A (en) 2017-10-19 2025-09-01 Hoffmann La Roche Treatment of CD20-positive B-cell lymphoma with obinutuzumab
EP3703746A1 (en) 2017-11-01 2020-09-09 F. Hoffmann-La Roche AG Novel tnf family ligand trimer-containing antigen binding molecules
CA3080904A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen
IL272747B2 (en) 2017-11-01 2025-04-01 Hoffmann La Roche Bispecific antibodies 1 + 2
CA3079036A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy with targeted ox40 agonists
CN111213059B (zh) 2017-11-06 2024-01-09 豪夫迈·罗氏有限公司 用于癌症的诊断和治疗方法
EP3710589A4 (en) 2017-11-14 2021-11-10 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha ANTI-C1S ANTIBODIES AND METHOD OF USING
BR112020010753A2 (pt) 2017-12-01 2020-11-24 The Regents Of The University Of California anticorpos anti-cxcr5 e composições e usos dos mesmos
MX2020006125A (es) 2017-12-14 2020-08-24 Hoffmann La Roche Uso de un anticuerpo biespecifico de cea cd3 y un antagonista de la union al eje de pd-1 en un regimen de dosificacion para tratar el cancer.
WO2019118937A1 (en) 2017-12-15 2019-06-20 Juno Therapeutics, Inc. Anti-cct5 binding molecules and methods of use thereof
EP3502140A1 (en) 2017-12-21 2019-06-26 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy of tumor targeted icos agonists with t-cell bispecific molecules
WO2019126472A1 (en) 2017-12-22 2019-06-27 Genentech, Inc. Use of pilra binding agents for treatment of a disease
CA3087166A1 (en) 2017-12-22 2019-06-27 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies to lilrb2
TW201930358A (zh) 2017-12-28 2019-08-01 大陸商南京傳奇生物科技有限公司 針對ｔｉｇｉｔ之單域抗體及其變異體
JP7383617B2 (ja) 2017-12-28 2023-11-20 ナンジン レジェンド バイオテック カンパニー，リミテッド Ｐｄ－ｌ１に対する抗体及びそのバリアント
EP3724223A1 (en) 2018-01-02 2020-10-21 The United States of America, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to ebola virus glycoprotein and their use
JP7653013B2 (ja) 2018-01-04 2025-03-28 アイコニック セラピューティクス リミテッド ライアビリティ カンパニー 抗組織因子抗体、抗体薬物コンジュゲート、及び関連する方法
CA3086879A1 (en) 2018-01-05 2019-07-11 Ac Immune Sa Misfolded tdp-43 binding molecules
EP3508499A1 (en) 2018-01-08 2019-07-10 iOmx Therapeutics AG Antibodies targeting, and other modulators of, an immunoglobulin gene associated with resistance against anti-tumour immune responses, and uses thereof
WO2019139987A1 (en) 2018-01-09 2019-07-18 Elstar Therapeutics, Inc. Calreticulin binding constructs and engineered t cells for the treatment of diseases
KR102839330B1 (ko) 2018-01-15 2025-07-30 난징 레전드 바이오테크 씨오., 엘티디. Pd-1에 대한 단일-도메인 항체 및 이의 변이체
WO2019143636A1 (en) 2018-01-16 2019-07-25 Lakepharma, Inc. Bispecific antibody that binds cd3 and another target
SG11202006259SA (en) 2018-01-26 2020-08-28 Genentech Inc Il-22 fc fusion proteins and methods of use
LT3743088T (lt) 2018-01-26 2022-12-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Il-22 fc kompozicijos ir jų naudojimo būdai
TWI860665B (zh) 2018-02-01 2024-11-01 大陸商信達生物製藥（蘇州）有限公司 全人源的抗ｂ細胞成熟抗原（ｂｃｍａ）單鏈抗體及其應用
WO2019148445A1 (en) 2018-02-02 2019-08-08 Adagene Inc. Precision/context-dependent activatable antibodies, and methods of making and using the same
WO2019154776A1 (en) 2018-02-06 2019-08-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Treatment of ophthalmologic diseases
AR115360A1 (es) 2018-02-08 2021-01-13 Genentech Inc Moléculas de unión al antígeno y métodos de uso
KR20230142806A (ko) 2018-02-09 2023-10-11 제넨테크, 인크. 비만 세포 매개 염증성 질환에 대한 치료 및 진단 방법
AU2019220395B2 (en) 2018-02-14 2025-12-04 Abba Therapeutics Ag Anti-human PD-L2 antibodies
CA3091437A1 (en) 2018-02-21 2019-08-29 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
JP2021514354A (ja) 2018-02-21 2021-06-10 ジェネンテック， インコーポレイテッド ＩＬ−２２Ｆｃ融合タンパク質による治療のための投与
MX2020008882A (es) 2018-02-26 2021-01-08 Genentech Inc Dosificación para tratamiento con anticuerpos antagonistas anti-tigit y anti-pd-l1.
TWI841551B (zh) 2018-03-13 2024-05-11 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 使用靶向4-1bb (cd137)之促效劑的組合療法
CA3092002A1 (en) 2018-03-13 2019-09-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Therapeutic combination of 4-1 bb agonists with anti-cd20 antibodies
BR112020014591A2 (pt) 2018-03-14 2020-12-01 Beijing Xuanyi Pharmasciences Co., Ltd. anticorpos anticlaudina 18.2
US12152073B2 (en) 2018-03-14 2024-11-26 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof
US20200040103A1 (en) 2018-03-14 2020-02-06 Genentech, Inc. Anti-klk5 antibodies and methods of use
CA3093729A1 (en) 2018-03-15 2019-09-19 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-dengue virus antibodies having cross-reactivity to zika virus and methods of use
MX2020009786A (es) 2018-03-21 2020-10-12 Five Prime Therapeutics Inc Anticuerpos de union a supresor de la activacion de celulas t que contiene el dominio variable de inmunoglobulina (vista) a ph acido.
JP7346790B2 (ja) 2018-03-30 2023-09-20 ナンジン レジェンド バイオテック カンパニー，リミテッド Ｌａｇ‐３に対する単一ドメイン抗体およびその使用
TW202011029A (zh) 2018-04-04 2020-03-16 美商建南德克公司 偵測及定量fgf21之方法
CN112566698A (zh) 2018-04-05 2021-03-26 朱诺治疗学股份有限公司 T细胞受体和表达该t细胞受体的工程化细胞
US11505610B2 (en) 2018-04-06 2022-11-22 Atyr Pharma, Inc. Compositions and methods comprising anti-NRP2 antibodies
IL277863B2 (en) 2018-04-11 2026-02-01 Inhibrx Inc Multispecific polypeptide constructs with forced CD3 binding and related methods and uses
CA3094235A1 (en) 2018-04-13 2019-10-17 F. Hoffmann-La Roche Ag Her2-targeting antigen binding molecules comprising 4-1bbl
EP3560945A1 (en) 2018-04-27 2019-10-30 F. Hoffmann-La Roche AG Methods for purification of polypeptides using polysorbates
WO2019228514A1 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Compositions and uses thereof for treating disease or condition
WO2019227490A1 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Compositions and methods for imaging
EP3805400A4 (en) 2018-06-04 2022-06-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule showing changed half-life in cytoplasm
TWI851577B (zh) 2018-06-07 2024-08-11 美商思進公司 喜樹鹼結合物
CA3103936A1 (en) 2018-06-18 2019-12-26 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs targeting prostate-specific membrane antigen (psma) and uses thereof
US12275797B2 (en) 2018-06-22 2025-04-15 Genmab Holding B.V. Anti-CD37 antibodies and anti-CD20 antibodies, compositions and methods of use thereof
US20200030443A1 (en) 2018-06-23 2020-01-30 Genentech, Inc. Methods of treating lung cancer with a pd-1 axis binding antagonist, a platinum agent, and a topoisomerase ii inhibitor
WO2020010250A2 (en) 2018-07-03 2020-01-09 Elstar Therapeutics, Inc. Anti-tcr antibody molecules and uses thereof
TW202035447A (zh) 2018-07-04 2020-10-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 新穎雙特異性促效性4-1bb抗原結合分子
US12097199B2 (en) 2018-07-09 2024-09-24 Takeda Pharmaceutical Company Limited Administration of SUMO-activating enzyme inhibitor and anti-CD20 antibodies
TWI819024B (zh) 2018-07-09 2023-10-21 美商戊瑞治療有限公司 結合至ｉｌｔ４的抗體
WO2020014306A1 (en) 2018-07-10 2020-01-16 Immunogen, Inc. Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof
WO2020014327A2 (en) 2018-07-11 2020-01-16 Five Prime Therapeutics, Inc. Antibodies binding to vista at acidic ph
US20200171146A1 (en) 2018-07-18 2020-06-04 Genentech, Inc. Methods of treating lung cancer with a pd-1 axis binding antagonist, an antimetabolite, and a platinum agent
KR20210032488A (ko) 2018-07-20 2021-03-24 서피스 온콜로지, 인크. 항-cd112r 조성물 및 방법
CA3105891A1 (en) 2018-07-24 2020-01-30 Inhibrx, Inc. Multispecific polypeptide constructs containing a constrained cd3 binding domain and a receptor binding region and methods of using the same
JP7490925B2 (ja) 2018-07-26 2024-05-28 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド Ｎｒｐ２関連疾患を治療するための組成物および方法
AU2019315226B2 (en) 2018-08-03 2025-09-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule containing two antigen-binding domains that are linked to each other
US12172106B2 (en) 2018-08-09 2024-12-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for assessing binding affinity of an antibody variant to the neonatal Fc receptor
IL317002A (en) 2018-08-10 2025-01-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-CD137 antigen binding molecule and use thereof
CN112584863B (zh) 2018-08-17 2025-10-28 Ab工作室有限公司 催化抗体和其使用方法
GB201814281D0 (en) 2018-09-03 2018-10-17 Femtogenix Ltd Cytotoxic agents
WO2020052542A1 (en) 2018-09-10 2020-03-19 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies against cll1 and constructs thereof
KR20210063330A (ko) 2018-09-19 2021-06-01 제넨테크, 인크. 방광암에 대한 치료 및 진단 방법
EP3857230B1 (en) 2018-09-21 2023-06-07 F. Hoffmann-La Roche AG Diagnostic methods for triple-negative breast cancer
MX2021003543A (es) 2018-09-27 2021-06-23 Xilio Dev Inc Polipeptidos de citocinas enmascaradas.
EP3861025A1 (en) 2018-10-01 2021-08-11 F. Hoffmann-La Roche AG Bispecific antigen binding molecules with trivalent binding to cd40
SG11202102477QA (en) 2018-10-01 2021-04-29 Hoffmann La Roche Bispecific antigen binding molecules comprising anti-fap clone 212
EP3632929A1 (en) 2018-10-02 2020-04-08 Ospedale San Raffaele S.r.l. Antibodies and uses thereof
UA130250C2 (uk) 2018-10-05 2025-12-31 Файв Прайм Терапьютикс, Інк. Рідкий фармацевтичний склад та композиція на основі антитіла до fgfr2
US12331320B2 (en) 2018-10-10 2025-06-17 The Research Foundation For The State University Of New York Genome edited cancer cell vaccines
WO2020077257A1 (en) 2018-10-11 2020-04-16 Inhibrx, Inc. Pd-1 single domain antibodies and therapeutic compositions thereof
WO2020081493A1 (en) 2018-10-16 2020-04-23 Molecular Templates, Inc. Pd-l1 binding proteins
AU2019361983A1 (en) 2018-10-18 2021-05-20 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for sarcomatoid kidney cancer
CN113260632A (zh) * 2018-10-29 2021-08-13 蒂嘉特克斯公司 包含IgA抗体构建体的组合物和方法
SG11202103064YA (en) 2018-10-29 2021-05-28 Hoffmann La Roche Antibody formulation
WO2020089380A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Bayer Aktiengesellschaft REVERSAL AGENTS FOR NEUTRALIZING THE THERAPEUTIC ACTIVITY OF ANTI-FXIa ANTIBODIES
JP7627216B2 (ja) 2018-11-16 2025-02-05 メモリアル スローン ケタリング キャンサー センター ムチン－１６に対する抗体およびそれを使用する方法
JP7290725B2 (ja) 2018-11-27 2023-06-13 舒泰神（北京）生物製薬股フン有限公司 顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子受容体αを特異的に認識する抗体及びその使用
AU2019394940A1 (en) 2018-12-05 2021-06-24 Genentech, Inc. Diagnostic methods and compositions for cancer immunotherapy
KR20210100668A (ko) 2018-12-06 2021-08-17 제넨테크, 인크. 항-CD79b 면역접합체, 알킬화제 및 항-CD20 항체를 포함하는 미만성 큰 B-세포 림프종의 조합 요법
EP3894427A1 (en) 2018-12-10 2021-10-20 Genentech, Inc. Photocrosslinking peptides for site specific conjugation to fc-containing proteins
US11793834B2 (en) 2018-12-12 2023-10-24 Kite Pharma, Inc. Chimeric antigen and T cell receptors and methods of use
EP3883609A2 (en) 2018-12-20 2021-09-29 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Ebola virus glycoprotein-specific monoclonal antibodies and uses thereof
CN113227131B (zh) 2018-12-20 2025-03-04 豪夫迈·罗氏有限公司 经修饰的抗体Fc及其使用方法
MX2021007320A (es) 2018-12-21 2021-07-07 Hoffmann La Roche Moleculas agonistas de union al antigeno cd28 que actuan sobre el tumor.
US20200223925A1 (en) 2018-12-21 2020-07-16 Hoffmann-La Roche Inc. Tumor-targeted superagonistic cd28 antigen binding molecules
EP3902833A2 (en) 2018-12-26 2021-11-03 City of Hope Activatable masked anti-ctla4 binding proteins
JP7650802B2 (ja) 2018-12-30 2025-03-25 エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー 抗ウサギｃｄ１９抗体および使用方法
EP3911678A1 (en) 2019-01-14 2021-11-24 Genentech, Inc. Methods of treating cancer with a pd-1 axis binding antagonist and an rna vaccine
US20220128561A1 (en) 2019-01-17 2022-04-28 Bayer Aktiengesellschaft Methods to determine whether a subject is suitable of being treated with an agonist of soluble gyanylyl cyclase (sgc)
WO2020151572A1 (en) 2019-01-23 2020-07-30 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Anti-pd-l1 diabodies and the use thereof
EP3915581A4 (en) 2019-01-24 2023-03-22 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha NOVEL CANCER ANTIGENS AND ANTIBODIES OF THESE ANTIGENS
GB201901197D0 (en) 2019-01-29 2019-03-20 Femtogenix Ltd G-A Crosslinking cytotoxic agents
CA3123303A1 (en) 2019-01-29 2020-08-06 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for receptor tyrosine kinase like orphan receptor 1 (ror1)
CN113711036B (zh) 2019-01-30 2025-03-18 真和制药有限公司 抗gal3抗体及其用途
AU2020226893B2 (en) 2019-02-21 2025-02-27 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to T cell related cancer cells and uses thereof
GB2597851B (en) 2019-02-21 2024-05-29 Marengo Therapeutics Inc Antibody molecules that bind to NKP30 and uses thereof
BR112021016923A2 (pt) 2019-02-27 2021-11-03 Genentech Inc Métodos para tratar um paciente com câncer hematológico, métodos para tratar um paciente com mm recidivante ou refratário, métodos para tratar um paciente tendo um lnh recidivante ou refratário e kits
KR102866290B1 (ko) 2019-03-08 2025-10-01 제넨테크, 인크. 세포외 소포 상에서 막 관련 단백질을 검출하고 정량하기 위한 방법
MA55296A (fr) 2019-03-14 2022-03-23 Hoffmann La Roche Traitement du cancer avec des anticorps bispécifiques de her2xcd3 en combinaison avec un mab anti-her2
WO2020208049A1 (en) 2019-04-12 2020-10-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antigen binding molecules comprising lipocalin muteins
MX2021012692A (es) 2019-04-19 2021-11-12 Genentech Inc Anticuerpos anti-mertk y sus metodos de uso.
JPWO2020213724A1 (no) 2019-04-19 2020-10-22
WO2020227228A2 (en) 2019-05-03 2020-11-12 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
KR20220004744A (ko) 2019-05-03 2022-01-11 제넨테크, 인크. 항-pd-l1 항체를 이용하여 암을 치료하는 방법
CN114206340A (zh) 2019-05-14 2022-03-18 豪夫迈·罗氏有限公司 使用抗cd79b免疫缀合物治疗滤泡性淋巴瘤的方法
CN114096562B (zh) 2019-05-15 2025-02-21 中外制药株式会社 抗原结合分子、药物组合物和方法
US12559544B2 (en) 2019-05-21 2026-02-24 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Antibodies that bind human metapneumovirus fusion protein and their use
US12600766B2 (en) 2019-05-23 2026-04-14 Ac Immune Sa Anti-TDP-43 binding molecules and uses thereof
JPWO2020246563A1 (no) * 2019-06-05 2020-12-10
CA3141378A1 (en) 2019-06-26 2020-12-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Fusion of an antibody binding cea and 4-1bbl
EP3990492A1 (en) 2019-06-27 2022-05-04 F. Hoffmann-La Roche AG Novel icos antibodies and tumor-targeted antigen binding molecules comprising them
AU2020299382A1 (en) 2019-07-02 2022-01-20 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies that bind EGFRvIII and their use
KR20220051164A (ko) 2019-07-05 2022-04-26 아이오엠엑스 테라퓨틱스 아게 Igsf11 (vsig3)의 항체 결합 igc2 및 이의 용도
EP3997121A4 (en) 2019-07-09 2024-03-27 Beijing SoloBio Genetechnology Company Ltd. ANTIBODIES THAT SPECIFICALLY RECOGNIZE PSEUDOMONAS PCRV AND THEIR USES
US20220267452A1 (en) 2019-07-12 2022-08-25 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-mutation type fgfr3 antibody and use therefor
JP7181438B2 (ja) 2019-08-06 2022-11-30 アプリノイア セラピューティクス リミテッド 病理学的タウ種に結合する抗体及びその使用
EP4438057A3 (en) 2019-09-12 2025-01-01 F. Hoffmann-La Roche AG Compositions and methods of treating lupus nephritis
MX2022003204A (es) 2019-09-19 2022-04-18 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos de union al supresor de activacion de linfocitos t que contiene inmunoglobulina con dominio v (vista) a ph acido.
CR20220149A (es) 2019-09-20 2022-05-23 Genentech Inc Dosis para anticuerpos anti-triptasa
JP2022548978A (ja) 2019-09-27 2022-11-22 ジェネンテック， インコーポレイテッド 薬抗ｔｉｇｉｔ及び抗ｐｄ－ｌ１アンタゴニスト抗体を用いた処置のための投薬
TW202122114A (zh) 2019-10-18 2021-06-16 美商建南德克公司 使用抗CD79b 免疫偶聯物治療彌漫性大B 細胞淋巴瘤的方法
WO2021092171A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for treatment of hematologic cancers
US20220396839A1 (en) 2019-11-12 2022-12-15 Foundation Medicine, Inc. Methods of detecting a fusion gene encoding a neoantigen
CN114651006A (zh) 2019-11-15 2022-06-21 恩瑟拉有限责任公司 Tmem219抗体及其治疗性用途
EP3822288A1 (en) 2019-11-18 2021-05-19 Deutsches Krebsforschungszentrum, Stiftung des öffentlichen Rechts Antibodies targeting, and other modulators of, the cd276 antigen, and uses thereof
EP4061839A1 (en) 2019-11-21 2022-09-28 Enthera S.R.L. Igfbp3 antibodies and therapeutic uses thereof
KR20220122653A (ko) 2019-12-06 2022-09-02 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 Ｂｃｍａ-표적 결합 도메인에 대한 항-이디오타입 항체 및 관련 조성물 및 방법
CN115335399A (zh) 2019-12-06 2022-11-11 朱诺治疗学股份有限公司 针对gprc5d靶结合结构域的抗独特型抗体以及相关组合物和方法
BR112022011357A2 (pt) 2019-12-13 2022-08-23 Genentech Inc Anticorpos isolado, um ou mais ácidos nucleicos isolados, um ou mais vetores, uma ou mais células hospedeiras, composição, kit, uso do anticorpo, métodos para produzir o anticorpo e método para tratar ou retardar a progressão de um câncer ly6g6d positivo
KR102645629B1 (ko) 2019-12-27 2024-03-07 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 항ctla-4 항체 및 그의 사용
CN113045655A (zh) 2019-12-27 2021-06-29 高诚生物医药(香港)有限公司 抗ox40抗体及其用途
AU2020416273A1 (en) 2020-01-03 2022-07-28 Marengo Therapeutics, Inc. Anti-TCR antibody molecules and uses thereof
CN114929734A (zh) 2020-01-09 2022-08-19 豪夫迈·罗氏有限公司 新型含有4-1bbl三聚体的抗原结合分子
CN110818795B (zh) 2020-01-10 2020-04-24 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 抗tigit抗体和使用方法
WO2021194481A1 (en) 2020-03-24 2021-09-30 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
WO2022050954A1 (en) 2020-09-04 2022-03-10 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
IL294879A (en) 2020-01-29 2022-09-01 Inhibrx Inc Monodomain antibodies of cd28 and their multivalent and multispecific constructs
WO2021155295A1 (en) 2020-01-31 2021-08-05 The Cleveland Clinic Foundation Anti-müllerian hormone receptor 2 antibodies and methods of use
KR20220136378A (ko) 2020-01-31 2022-10-07 제넨테크, 인크. Pd-1 축 결합 길항제 및 rna 백신을 이용하여 네오에피토프-특이적 t 세포를 유도하는 방법
TWI895351B (zh) 2020-02-12 2025-09-01 日商中外製藥股份有限公司 用於癌症之治療的抗cd137抗原結合分子
CN117964757A (zh) 2020-02-14 2024-05-03 吉利德科学公司 与ccr8结合的抗体和融合蛋白及其用途
EP3868396A1 (en) 2020-02-20 2021-08-25 Enthera S.R.L. Inhibitors and uses thereof
US20230348568A1 (en) 2020-02-20 2023-11-02 The U.S.A., As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Epstein-barr virus monoclonal antibodies and uses thereof
CN115151573A (zh) 2020-02-28 2022-10-04 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 抗cd137构建体、多特异性抗体及其用途
KR20220148209A (ko) 2020-02-28 2022-11-04 상하이 헨리우스 바이오테크, 인크. 항cd137 작제물 및 그 용도
JP7767298B2 (ja) 2020-03-13 2025-11-11 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗インターロイキン－３３抗体及びその使用
CR20220524A (es) 2020-03-19 2022-12-02 Genentech Inc Anticuerpos anti-tgf-beta con selectividad de isoforma y métodos de uso
US20240025991A1 (en) 2020-03-23 2024-01-25 Genentech, Inc. Method for treating pneumonia, including covid-19 pneumonia, with an il6 antagonist
JP2023518812A (ja) 2020-03-23 2023-05-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｃｏｖｉｄ１９肺炎を治療するための、トシリズマブとレムデシビルとの組み合わせ
JP2023518814A (ja) 2020-03-23 2023-05-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｃｏｖｉｄ－１９肺炎における、ｉｌ－６アンタゴニストに対する応答を予測するためのバイオマーカー
PE20230414A1 (es) 2020-03-24 2023-03-07 Genentech Inc Agentes de fijacion a tie2 y metodos de uso
AR121706A1 (es) 2020-04-01 2022-06-29 Hoffmann La Roche Moléculas de unión a antígeno biespecíficas dirigidas a ox40 y fap
CN115698717A (zh) 2020-04-03 2023-02-03 基因泰克公司 癌症的治疗和诊断方法
WO2021207662A1 (en) 2020-04-10 2021-10-14 Genentech, Inc. Use of il-22fc for the treatment or prevention of pneumonia, acute respiratory distress syndrome, or cytokine release syndrome
JP7785016B2 (ja) 2020-04-24 2025-12-12 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ＣＤ７９ｂ免疫抱合体の使用方法
KR20230004520A (ko) 2020-04-27 2023-01-06 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 지단백(ａ)에 대한 이소형-비의존성 항체
CN115885050A (zh) 2020-04-28 2023-03-31 基因泰克公司 用于非小细胞肺癌免疫疗法的方法和组合物
TW202200212A (zh) 2020-05-03 2022-01-01 中國大陸商聯寧（蘇州）生物製藥有限公司 包含抗-trop-2抗體之抗體藥物結合物
WO2021228178A1 (en) 2020-05-13 2021-11-18 Adagene Ag Compositions and methods for treating cancer
CN116157151A (zh) 2020-05-26 2023-05-23 真和制药有限公司 通过阻断半乳凝素-3治疗炎性疾病的方法
US20230220057A1 (en) 2020-05-27 2023-07-13 Staidson (Beijing) Biopharmaceuticals Co., Ltd. Antibodies specifically recognizing nerve growth factor and uses thereof
CN116529260A (zh) 2020-06-02 2023-08-01 当康生物技术有限责任公司 抗cd93构建体及其用途
AU2021283345A1 (en) 2020-06-02 2023-02-02 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-CD93 constructs and uses thereof
WO2021252977A1 (en) 2020-06-12 2021-12-16 Genentech, Inc. Methods and compositions for cancer immunotherapy
MX2022015877A (es) 2020-06-16 2023-01-24 Genentech Inc Metodos y composiciones para tratar cancer de mama triple negativo.
CN115916348A (zh) 2020-06-18 2023-04-04 基因泰克公司 使用抗tigit抗体和pd-1轴结合拮抗剂的治疗
TWI852680B (zh) 2020-06-19 2024-08-11 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 與 cd3 及 cd19 結合之抗體
MX2022015795A (es) 2020-06-23 2023-01-24 Hoffmann La Roche Moleculas agonistas de union al antigeno cd28 que se dirigen a her2.
EP4172203A1 (en) 2020-06-25 2023-05-03 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-cd3/anti-cd28 bispecific antigen binding molecules
WO2022008027A1 (en) 2020-07-06 2022-01-13 Iomx Therapeutics Ag Antibodies binding igv of igsf11 (vsig3) and uses thereof
JP2023532764A (ja) 2020-07-07 2023-07-31 エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー 治療用タンパク質製剤の安定剤としての代替界面活性剤
WO2022012680A1 (en) 2020-07-16 2022-01-20 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Cd20 binding molecules and uses thereof
GB2597532A (en) 2020-07-28 2022-02-02 Femtogenix Ltd Cytotoxic compounds
US20230322935A1 (en) 2020-07-29 2023-10-12 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-cd93 constructs and uses thereof
WO2022031749A1 (en) 2020-08-03 2022-02-10 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for lymphoma
JP2023536326A (ja) 2020-08-05 2023-08-24 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド Ｒｏｒ１標的結合ドメインに対する抗イディオタイプ抗体ならびに関連する組成物および方法
PE20230983A1 (es) 2020-08-07 2023-06-21 Genentech Inc Proteinas de fusion del ligando para flt3 y metodos de uso
US20230322908A1 (en) 2020-08-14 2023-10-12 Ac Immune Sa Humanized Anti-TDP-43 Binding Molecules and Uses Thereof
EP4204448A2 (en) 2020-08-27 2023-07-05 cureab GmbH Anti-golph2 antibodies for macrophage and dendritic cell differentiation
MX2023002984A (es) 2020-09-15 2023-04-10 Bayer Ag Nuevos anticuerpos anti-a2ap y usos de los mismos.
EP4213877A1 (en) 2020-09-17 2023-07-26 Genentech, Inc. Results of empacta: a randomized, double-blind, placebo-controlled, multicenter study to evaluate the efficacy and safety of tocilizumab in hospitalized patients with covid-19 pneumonia
CN118146383A (zh) 2020-09-28 2024-06-07 安济盛生物医药有限公司 抗硬骨抑素构建体及其用途
CA3193952A1 (en) 2020-10-05 2022-04-14 Bernard Martin Fine Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
EP4232040A1 (en) 2020-10-20 2023-08-30 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy of pd-1 axis binding antagonists and lrrk2 inhitibors
AU2021366287A1 (en) 2020-10-20 2023-04-13 Kantonsspital St. Gallen Antibodies or antigen-binding fragments specifically binding to Gremlin-1 and uses thereof
WO2022093981A1 (en) 2020-10-28 2022-05-05 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ptpn22 inhibitors and pd-l1 binding antagonists
CA3173151A1 (en) 2020-11-03 2022-05-12 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung Des Offentlichen Rechts Target-cell restricted, costimulatory, bispecific and bivalent anti-cd28 antibodies
KR20230095113A (ko) 2020-11-04 2023-06-28 제넨테크, 인크. 항-cd20/항-cd3 이중특이적 항체들과 항-cd79b 항체 약물 접합체들을 이용한 치료를 위한 투약
AU2021374590A1 (en) 2020-11-04 2023-06-01 Genentech, Inc. Subcutaneous dosing of anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies
TWI874719B (zh) 2020-11-04 2025-03-01 美商建南德克公司 用抗cd20/抗cd3雙特異性抗體進行治療之給藥
EP4244254A1 (en) 2020-11-16 2023-09-20 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy with fap-targeted cd40 agonists
JP2023553323A (ja) 2020-11-25 2023-12-21 エクシリオ デベロップメント， インコーポレイテッド 腫瘍特異的に切断可能なリンカー
WO2022116877A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Shanghai Henlius Biotech, Inc. ANTI-GARP/TGFβ ANTIBODIES AND METHODS OF USE
TW202237638A (zh) 2020-12-09 2022-10-01 日商武田藥品工業股份有限公司 烏苷酸環化酶ｃ（ｇｃｃ）抗原結合劑之組成物及其使用方法
TW202237639A (zh) 2020-12-09 2022-10-01 日商武田藥品工業股份有限公司 鳥苷酸環化酶ｃ（ｇｃｃ）抗原結合劑之組成物及其使用方法
WO2022132904A1 (en) 2020-12-17 2022-06-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibodies targeting sars-cov-2
MX2023007846A (es) 2021-01-06 2023-07-07 Hoffmann La Roche Tratamiento conjunto que usa un anticuerpo biespecifico contra pd1-lag3 y un anticuerpo biespecifico de linfocitos t cd20.
WO2022162587A1 (en) 2021-01-27 2022-08-04 Centre Hospitalier Universitaire Vaudois (C.H.U.V.) Anti-sars-cov-2 antibodies and use thereof in the treatment of sars-cov-2 infection
AU2022212599A1 (en) 2021-01-28 2023-08-17 Universität Ulm Method and means for modulating b-cell mediated immune responses
CN117120084A (zh) 2021-01-28 2023-11-24 维肯芬特有限责任公司 用于调节b细胞介导的免疫应答的方法和手段
WO2022162203A1 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Vaccinvent Gmbh Method and means for modulating b-cell mediated immune responses
JP2024506315A (ja) 2021-02-09 2024-02-13 ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ アズ リプリゼンテッド バイ ザ セクレタリー、デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシーズ コロナウイルスのスパイクタンパク質を標的とする抗体
US20240117019A1 (en) 2021-02-09 2024-04-11 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Human monoclonal antibodies against pneumococcal antigens
JP2024506200A (ja) 2021-02-15 2024-02-09 武田薬品工業株式会社 細胞治療用組成物及びｔｇｆ－ｂシグナル伝達を調節する方法
CA3211686A1 (en) 2021-02-26 2022-09-01 Bayer Aktiengesellschaft Inhibitors of il-11 or il-11ra for use in the treatment of abnormal uterine bleeding
WO2022187270A1 (en) 2021-03-01 2022-09-09 Xilio Development, Inc. Combination of ctla4 and pd1/pdl1 antibodies for treating cancer
EP4301781A1 (en) 2021-03-01 2024-01-10 Xilio Development, Inc. Combination of masked ctla4 and pd1/pdl1 antibodies for treating cancer
WO2022184082A1 (en) 2021-03-03 2022-09-09 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates comprising an anti-bcma antibody
JP2024509191A (ja) 2021-03-05 2024-02-29 ダイナミキュア バイオテクノロジー エルエルシー 抗ｖｉｓｔａ構築物およびその使用
BR112023018621A2 (pt) 2021-03-15 2023-10-24 Hoffmann La Roche Métodos para tratar nefrite lúpica, esgotar células b periféricas, kits para tratar nefrite lúpica e anticorpos anti-cd20 tipo ii
WO2022197877A1 (en) 2021-03-19 2022-09-22 Genentech, Inc. Methods and compositions for time delayed bio-orthogonal release of cytotoxic agents
WO2022204724A1 (en) 2021-03-25 2022-09-29 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-igfbp7 constructs and uses thereof
US12384843B2 (en) 2021-03-30 2025-08-12 Bayer Aktiengesellschaft Anti-semaphorin 3A antibodies
AR125344A1 (es) 2021-04-15 2023-07-05 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo anti-c1s
WO2022228705A1 (en) 2021-04-30 2022-11-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Dosing for combination treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and anti-cd79b antibody drug conjugate
AU2021443863A1 (en) 2021-04-30 2023-10-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody
MX2023013264A (es) 2021-05-12 2023-11-30 Genentech Inc Metodos para usar inmunoconjugados anti-cd79b para tratar linfoma difuso de linfocitos b grandes.
TW202306993A (zh) 2021-05-14 2023-02-16 美商建南德克公司 Ｔｒｅｍ２之促效劑
KR20240007171A (ko) 2021-05-14 2024-01-16 제넨테크, 인크. 모수네투주맙 및 폴라투주맙 베도틴을 이용한 cd20 양성 증식성 장애의 치료 방법
WO2022243261A1 (en) 2021-05-19 2022-11-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Agonistic cd40 antigen binding molecules targeting cea
AR126009A1 (es) 2021-06-02 2023-08-30 Hoffmann La Roche Moléculas agonistas de unión al antígeno cd28 que se dirigen a epcam
WO2022255440A1 (en) 2021-06-04 2022-12-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-ddr2 antibodies and uses thereof
EP4351582B1 (en) 2021-06-09 2025-10-08 F. Hoffmann-La Roche AG Combination of a particular braf inhibitor (paradox breaker) and a pd-1 axis binding antagonist for use in the treatment of cancer
CN117980333A (zh) 2021-06-11 2024-05-03 基因泰克公司 用st2拮抗剂治疗慢性阻塞性肺疾病的方法
WO2022263638A1 (en) 2021-06-17 2022-12-22 Centre Hospitalier Universitaire Vaudois (C.H.U.V.) Anti-sars-cov-2 antibodies and use thereof in the treatment of sars-cov-2 infection
US12227574B2 (en) 2021-06-17 2025-02-18 Amberstone Biosciences, Inc. Anti-CD3 constructs and uses thereof
TW202527987A (zh) 2021-06-25 2025-07-16 日商中外製藥股份有限公司 抗ctla-4抗體的用途
AR126220A1 (es) 2021-06-25 2023-09-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo anti-ctla-4
EP4367139A1 (en) 2021-07-08 2024-05-15 Staidson Biopharma Inc. Antibodies specifically recognizing tnfr2 and uses thereof
KR20240058075A (ko) 2021-07-14 2024-05-03 스테이드슨 (베이징) 바이오팔마슈티칼스 캄퍼니 리미티드 Cd40을 특이적으로 식별하는 항체 및 이의 응용
EP4373576A1 (en) 2021-07-22 2024-05-29 Genentech, Inc. Brain targeting compositions and methods of use thereof
US20240336697A1 (en) 2021-08-07 2024-10-10 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
JP2024534004A (ja) 2021-08-13 2024-09-18 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗トリプターゼ抗体のための投与量
JP2024534067A (ja) 2021-08-19 2024-09-18 エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー 多価抗バリアントｆｃ領域抗体および使用方法
MX2024002295A (es) 2021-08-27 2024-03-07 Genentech Inc Metodos para tratar las patologias de tau.
EP4396223A1 (en) 2021-08-30 2024-07-10 Genentech, Inc. Anti-polyubiquitin multispecific antibodies
WO2023034809A1 (en) 2021-08-30 2023-03-09 Lassen Therapeutics 1, Inc. Anti-il-11rα antibodies
JP2024535249A (ja) 2021-09-17 2024-09-30 ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ， アズ リプレゼンテッド バイ ザ セクレタリー， デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシーズ 合成ヒト化ラマナノボディライブラリーおよびｓａｒｓ－ｃｏｖ－２中和抗体を同定するためのその使用
WO2023049732A1 (en) 2021-09-21 2023-03-30 Qilu Puget Sound Biotherapeutics Corporation HETERODIMERIC Fc FOR MAKING FUSION PROTEINS AND BISPECIFIC ANTIBODIES
WO2023056403A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Genentech, Inc. Methods for treatment of hematologic cancers using anti-tigit antibodies, anti-cd38 antibodies, and pd-1 axis binding antagonists
MX2024004117A (es) 2021-10-08 2024-04-19 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Metodo para preparar formulacion de jeringa precargada.
CA3236417A1 (en) 2021-11-05 2023-05-11 American Diagnostics & Therapy, Llc (Adxrx) Monoclonal antibodies against carcinoembryonic antigens, and their uses
JP2024544885A (ja) 2021-11-10 2024-12-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗インターロイキン－３３抗体及びその使用
EP4433506A1 (en) 2021-11-16 2024-09-25 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating systemic lupus erythematosus (sle) with mosunetuzumab
TW202334202A (zh) 2021-11-16 2023-09-01 瑞士商Ａｃ免疫有限公司 用於治療和診斷的新分子
US20250066458A1 (en) 2021-12-06 2025-02-27 Beijing Solobio Genetechnology Co., Ltd. Bispecific Antibodies Specifically Binding to Klebsiella Pneumoniae O2 Antigen and O1 Antigen and Compositions Thereof
AU2022408865A1 (en) 2021-12-17 2024-07-04 Shanghai Henlius Biologics Co., Ltd. Anti-ox40 antibodies, multispecific antibodies and methods of use
JP2025501522A (ja) 2021-12-17 2025-01-22 シャンハイ・ヘンリウス・バイオテック・インコーポレイテッド 抗ｏｘ４０抗体及び使用方法
CR20240246A (es) 2021-12-20 2024-07-19 Hoffmann La Roche Anticuerpos agonistas anti-ltbr y anticuerpos biespecificos que los comprenden
UY40097A (es) 2022-01-07 2023-07-14 Johnson & Johnson Entpr Innovation Inc Materiales y métodos de proteínas de unión a il-1b
EP4476251A1 (en) 2022-02-10 2024-12-18 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Human monoclonal antibodies that broadly target coronaviruses
MX2024009948A (es) 2022-02-16 2024-08-22 Ac Immune Sa Moleculas de union anti-tdp-43 humanizadas y usos de las mismas.
WO2023159182A1 (en) 2022-02-18 2023-08-24 Rakuten Medical, Inc. Anti-programmed death-ligand 1 (pd-l1) antibody molecules, encoding polynucleotides, and methods of use
EP4489790A1 (en) 2022-03-10 2025-01-15 Vivasor, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
WO2023180353A1 (en) 2022-03-23 2023-09-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination treatment of an anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and chemotherapy
CN118974096A (zh) 2022-03-25 2024-11-15 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 抗msln抗体及使用方法
AU2023241824A1 (en) 2022-03-26 2024-10-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Bispecific antibodies to hiv-1 env and their use
WO2023192881A1 (en) 2022-03-28 2023-10-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
WO2023186756A1 (en) 2022-03-28 2023-10-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Interferon gamma variants and antigen binding molecules comprising these
WO2023191816A1 (en) 2022-04-01 2023-10-05 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
KR20250004705A (ko) 2022-04-08 2025-01-08 에이씨 이뮨 에스에이 항-tdp-43 결합 분자
CN119384432A (zh) 2022-04-13 2025-01-28 基因泰克公司 治疗性蛋白质的药物组合物和使用方法
CA3255366A1 (en) 2022-04-13 2023-10-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Pharmaceutical compositions based on bispecific anti-CD20/anti-CD3 antibodies and methods of use
US20250257123A1 (en) 2022-04-20 2025-08-14 Kantonsspital St. Gallen Antibodies or antigen-binding fragments pan-specifically binding to gremlin-1 and gremlin-2 and uses thereof
PE20242350A1 (es) 2022-05-03 2024-12-16 Genentech Inc Anticuerpos anti-ly6e, inmunoconjugados y usos de estos
CN119487065A (zh) 2022-05-09 2025-02-18 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性识别gdf15的抗体及其应用
CN119317641A (zh) 2022-05-11 2025-01-14 基因泰克公司 针对用抗fcrh5/抗cd3双特异性抗体进行治疗的给药
WO2023235699A1 (en) 2022-05-31 2023-12-07 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies to lilrb4 and uses thereof
US11807689B1 (en) * 2022-06-01 2023-11-07 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
US11965032B1 (en) 2022-06-01 2024-04-23 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
IL317449A (en) 2022-06-07 2025-02-01 Genentech Inc Method for determining the efficacy of a lung cancer treatment comprising an anti-PD-L1 antagonist and an anti-TIGIT antibody-antagonist
EP4536701A2 (en) 2022-06-08 2025-04-16 Institute for Research in Biomedicine (IRB) Cross-specific antibodies, uses and methods for discovery thereof
KR20250039386A (ko) 2022-07-13 2025-03-20 제넨테크, 인크. 항-fcrh5/항-cd3 이중특이적 항체를 이용한 치료를 위한 투약법
TW202413433A (zh) 2022-07-19 2024-04-01 美商建南德克公司 用抗ｆｃｒｈ５／抗ｃｄ３雙特異性抗體進行治療之給藥
US20260035464A1 (en) 2022-07-19 2026-02-05 Staidson Biopharma Inc. Antibodies specifically recognizing b- and t-lymphocyte attenuator (btla) and uses thereof
KR20250041021A (ko) 2022-07-22 2025-03-25 제넨테크, 인크. 항-steap1 항원 결합 분자 및 이의 용도
AU2023312054A1 (en) 2022-07-22 2025-01-23 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to human pad4 and uses thereof
WO2024030829A1 (en) 2022-08-01 2024-02-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies that bind to the underside of influenza viral neuraminidase
CA3263784A1 (en) 2022-08-05 2024-02-08 Janssen Biotech, Inc. TRANSFERRIN RECEPTOR BINDING PROTEINS FOR THE TREATMENT OF BRAIN TUMORS
JP2025525969A (ja) 2022-08-05 2025-08-07 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 脳腫瘍を治療するためのｃｄ９８結合構築物
CN121293357A (zh) 2022-08-22 2026-01-09 雅博得乐医疗公司 Dll3结合分子及其用途
JP2025529903A (ja) 2022-08-26 2025-09-09 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド デルタ様リガンド３（ｄｌｌ３）に特異的な抗体およびキメラ抗原受容体
CN120153254A (zh) 2022-09-01 2025-06-13 基因泰克公司 膀胱癌的治疗和诊断方法
WO2024054822A1 (en) 2022-09-07 2024-03-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Engineered sars-cov-2 antibodies with increased neutralization breadth
US20260078185A1 (en) 2022-09-07 2026-03-19 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-vista constructs and uses thereof
EP4590704A1 (en) 2022-09-21 2025-07-30 Sanofi Biotechnology Humanized anti-il-1r3 antibody and methods of use
WO2024064826A1 (en) 2022-09-22 2024-03-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
WO2024067344A1 (zh) 2022-09-27 2024-04-04 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性识别light的抗体及其应用
WO2024068996A1 (en) 2022-09-30 2024-04-04 Centre Hospitalier Universitaire Vaudois (C.H.U.V.) Anti-sars-cov-2 antibodies and use thereof in the treatment of sars-cov-2 infection
KR20250093362A (ko) 2022-10-20 2025-06-24 베이징 솔로바이오 진테크놀로지 컴퍼니 리미티드 TRAIL 또는 FasL에 특이적으로 결합하는 항체 조합 및 이중특이 항체
TW202426505A (zh) 2022-10-25 2024-07-01 美商建南德克公司 癌症之治療及診斷方法
WO2024094741A1 (en) 2022-11-03 2024-05-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy with anti-cd19/anti-cd28 bispecific antibody
WO2024097741A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 Gilead Sciences, Inc. Anticancer therapies using anti-ccr8 antibody, chemo and immunotherapy combinations
IL320029A (en) 2022-11-08 2025-06-01 Genentech Inc Compositions and methods for treating childhood idiopathic nephrotic syndrome
AU2023376983A1 (en) 2022-11-09 2025-04-17 Cis Biopharma Ag Anti-l1-cam antibodies and their uses for diagnostic and therapeutic applications
US20240226313A1 (en) 2022-11-17 2024-07-11 Sanofi Ceacam5 antibody-drug conjugates and methods of use thereof
TW202436348A (zh) 2022-11-25 2024-09-16 日商中外製藥股份有限公司 蛋白質的製造方法
EP4638491A1 (en) 2022-12-19 2025-10-29 The United States of America, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services Monoclonal antibodies for treating sars-cov-2 infection
EP4491230A1 (en) 2023-07-14 2025-01-15 iOmx Therapeutics AG Cross-specific antigen binding proteins (abp) targeting leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily b1 (lilrb1) and lilrb2, combinations and uses thereof
AU2023410277A1 (en) 2022-12-23 2025-06-12 Iomx Therapeutics Ag Cross-specific antigen binding proteins (abp) targeting leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily b1 (lilrb1) and lilrb2, combinations and uses thereof
JP2026503273A (ja) 2023-01-06 2026-01-28 ラッセン・セラピューティクス・インコーポレイテッド 抗ｉｌ－１８ｂｐ抗体
CN120787238A (zh) 2023-01-06 2025-10-14 拉森医疗公司 用于治疗甲状腺眼病的抗IL-11Rα抗体
TW202430560A (zh) 2023-01-06 2024-08-01 美商拉森醫療公司 抗ｉｌ－１８ｂｐ抗體
JP2026509262A (ja) 2023-03-08 2026-03-17 エイシー イミューン ソシエテ アノニム 抗ｔｄｐ－４３結合分子およびその使用
EP4428159A1 (en) 2023-03-10 2024-09-11 Istituto Romagnolo per lo Studio dei Tumori "Dino Amadori" - IRST S.r.l. Melanoma targeting human antibodies and therapeutic uses thereof
EP4428158A1 (en) 2023-03-10 2024-09-11 Istituto Romagnolo per lo Studio dei Tumori "Dino Amadori" - IRST S.r.l. Lung cancer targeting human antibodies and therapeutic uses thereof
JP2026510584A (ja) 2023-03-13 2026-04-08 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｐｄ１－ｌａｇ３二重特異性抗体およびｈｌａ－ｇ ｔ細胞二重特異性抗体を用いる併用療法
CN121969397A (zh) 2023-04-05 2026-05-01 维硕公司 抗体偶联药物及其用途
WO2024211235A1 (en) 2023-04-05 2024-10-10 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
WO2024211234A1 (en) 2023-04-05 2024-10-10 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
AU2024251934A1 (en) 2023-04-12 2025-10-30 Shanghai Kangabio Co., Limited Multifunctional molecules comprising masked interleukin 12 and methods of use
AU2024257248A1 (en) 2023-04-17 2025-11-06 Peak Bio, Inc. Antibodies and antibody-drug conjugates and methods of use and synthetic processes and intermediates
AU2024270495A1 (en) 2023-05-05 2025-10-09 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
EP4709484A1 (en) 2023-05-10 2026-03-18 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating cancer
WO2024243355A1 (en) 2023-05-24 2024-11-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibodies that target the rh5 complex of blood-stage plasmodium falciparum
WO2024246086A1 (en) 2023-06-01 2024-12-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Immunostimulatory antigen binding molecules that specifically bind to bcma
WO2024246083A1 (en) 2023-06-01 2024-12-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antibodies targeting bcma and cd28
TW202504641A (zh) 2023-06-08 2025-02-01 美商建南德克公司 用於淋巴瘤之診斷及治療方法的巨噬細胞特徵
CN121311247A (zh) 2023-06-09 2026-01-09 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性结合masp3的抗体以及特异性结合masp3和masp2的多特异性抗体
WO2024255794A1 (zh) 2023-06-16 2024-12-19 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性识别因子XIIa的抗体及其应用
AU2024311339A1 (en) 2023-06-21 2026-01-08 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy with fap-targeted lymphotoxin beta receptor agonists
WO2024263845A1 (en) 2023-06-22 2024-12-26 Genentech, Inc. Treatment of multiple myeloma
CN121986113A (zh) 2023-07-07 2026-05-05 美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表) 人源化40h3抗体
WO2025024233A1 (en) 2023-07-21 2025-01-30 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Bispecific antibodies that broadly target coronaviruses
KR20260041867A (ko) 2023-07-21 2026-03-27 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Pad4 조정제의 시트룰린화 및 활성을 평가하는 방법
CN121548587A (zh) 2023-07-24 2026-02-17 豪夫迈·罗氏有限公司 多特异性抗体
WO2025034806A1 (en) 2023-08-08 2025-02-13 Wisconsin Alumni Research Foundation Single-domain antibodies and variants thereof against fibroblast activation protein
CN121666400A (zh) 2023-08-09 2026-03-13 豪夫迈·罗氏有限公司 单特异性和多特异性抗trem2抗体、其方法和用途
CN121693516A (zh) 2023-08-09 2026-03-17 豪夫迈·罗氏有限公司 单特异性和多特异性抗trem2抗体、其方法及用途
KR20260051039A (ko) 2023-08-09 2026-04-15 에프. 호프만-라 로슈 아게 항-a-베타 단백질 항체, 이의 제조 방법 및 용도
AU2024324215A1 (en) 2023-08-11 2026-02-26 Abalytics Oncology, Inc. Anti-ctla-4 antibodies and related binding molecules and methods and uses thereof
CN122003435A (zh) 2023-09-03 2026-05-08 科越医药(美国)有限责任公司 包含抗因子d部分的多特异性构建体
WO2025064539A1 (en) 2023-09-19 2025-03-27 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Herv-e antibodies and methods of their use
EP4537907A1 (en) 2023-10-10 2025-04-16 Enthera S.r.l. Cd248 inhibitors and uses thereof
WO2025085489A1 (en) 2023-10-17 2025-04-24 Bristol-Myers Squibb Company Gspt1-degrading compounds, anti-cd33 antibodies and antibody-drug conjugates and uses thereof
TW202517674A (zh) 2023-10-19 2025-05-01 德商拜耳廠股份有限公司 抗gpc3抗體及其放射性結合物
WO2025106427A1 (en) 2023-11-14 2025-05-22 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing and protective monoclonal antibodies against respiratory syncytial virus (rsv)
WO2025106474A1 (en) 2023-11-14 2025-05-22 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for treating cancer with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2025111402A1 (en) 2023-11-21 2025-05-30 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Anti-amyloid beta antibodies and related compositions and methods thereof
WO2025117384A1 (en) 2023-12-01 2025-06-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Broadly neutralizing influenza hemagglutinin stem-directed antibodies
US20250230251A1 (en) 2023-12-20 2025-07-17 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies targeting il-18 receptor beta (il-18rb) and related methods
AU2024408954A1 (en) 2023-12-21 2026-05-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Broadly neutralizing antibodies against sars-cov-2 and sars-cov variants
WO2025174974A1 (en) 2024-02-14 2025-08-21 Bristol-Myers Squibb Company Anti-cd33 antibodies and uses thereof
WO2025179281A1 (en) 2024-02-23 2025-08-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Treatment of cardiovascular disease with antxr1 antibodies
WO2025184416A1 (en) 2024-02-27 2025-09-04 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Single-domain antibodies and bispecific antibodies against hiv-1 and their use
WO2025184421A1 (en) 2024-02-28 2025-09-04 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors and antibodies specific for delta-like ligand 3 (dll3) and related methods
WO2025199352A2 (en) 2024-03-20 2025-09-25 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies specific for solute carrier family 34 member 2 (slc34a2)
TW202602929A (zh) 2024-03-21 2026-01-16 美商思進公司 Ｃｄ２５抗體、抗體-藥物共軛體及彼等之用途
WO2025215124A2 (en) 2024-04-12 2025-10-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination treatment of glofitamab and chemotherapy
WO2025218725A1 (zh) * 2024-04-18 2025-10-23 徕特康(苏州)生物制药有限公司 靶向cd20和cd89的髓细胞衔接子抗体及其用途
TW202604943A (zh) 2024-04-24 2026-02-01 美商建南德克公司 治療狼瘡性腎炎之組成物及方法
WO2025240670A2 (en) 2024-05-15 2025-11-20 Abalytics Oncology, Inc. Anti-pd-1 antibodies and related binding molecules and methods and uses thereof
WO2025238187A1 (en) 2024-05-15 2025-11-20 Cis Biopharma Ag Immunoconjugates targeting l1-cam
WO2025242909A1 (en) 2024-05-24 2025-11-27 Paul Scherrer Institut CD30-targeting antibody-radioligand conjugates and their therapeutic use
TW202606758A (zh) 2024-05-31 2026-02-16 美商維泰克斯製藥公司 抗cd74抗體組合物及方法
WO2025262564A1 (en) 2024-06-17 2025-12-26 Pfizer Inc. Use of anti-cxcr5 antibodies
WO2026003224A2 (en) 2024-06-26 2026-01-02 Iomx Therapeutics Ag Bispecific antigen binding proteins (abp) targeting immune checkpoint molecules and both leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily b1 (lilrb1) and lilrb2; combinations and uses thereof
WO2026013218A1 (en) 2024-07-10 2026-01-15 Ac Immune Sa Anti-tdp-43 vectors, binding molecules and uses thereof
EP4684803A1 (en) 2024-07-25 2026-01-28 CeMM - Forschungszentrum für Molekulare Medizin GmbH Antibody conjugated chemical inducers of degradation of rbm39 and therapeutic uses thereof
WO2026030464A1 (en) 2024-07-30 2026-02-05 Genentech, Inc. Dosage regimen for reducing cytokine release syndrome (crs) with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies in multiple myeloma therapy
WO2026030473A1 (en) 2024-07-31 2026-02-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services West nile virus neutralizing monoclonal antibodies
WO2026050244A1 (en) 2024-08-26 2026-03-05 Angitia Incorporated Limited Methods of treating or preventing osteoporosis and low bone mass
WO2026072685A1 (en) 2024-09-25 2026-04-02 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating lupus nephritis
EP4729541A1 (en) 2024-10-16 2026-04-22 Paolo Fiorina Anti- igfbp7 antibodies and uses thereof
US20260124300A1 (en) 2024-11-01 2026-05-07 Hoffmann-La Roche Inc. Combination treatment of an anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and chemotherapy

Family Cites Families (174)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7097A (en) 1850-02-19 Elevating- and lowering carriage-tops
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
EP0173494A3 (en) 1984-08-27 1987-11-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Chimeric receptors by dna splicing and expression
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US6893625B1 (en) * 1986-10-27 2005-05-17 Royalty Pharma Finance Trust Chimeric antibody with specificity to human B cell surface antigen
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
EP0365685B1 (en) 1988-03-30 1995-01-18 Toray Industries, Inc. Freeze-dried composition comprising a horseradish peroxidase-labelled Fab' fragment of an anti-human interferon-beta monclonal antibody and trehalose; EIA kit containing the composition
US5047335A (en) 1988-12-21 1991-09-10 The Regents Of The University Of Calif. Process for controlling intracellular glycosylation of proteins
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
CA2095141A1 (en) 1990-11-05 1992-05-06 Ingegerd Hellstrom Synergistic therapy with combinations of anti-tumor antibodies and biologically active agents
US5736137A (en) 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
US7744877B2 (en) * 1992-11-13 2010-06-29 Biogen Idec Inc. Expression and use of anti-CD20 Antibodies
DE69303494T2 (de) * 1992-11-13 1997-01-16 Idec Pharma Corp Therapeutische verwendung von chimerischen und markierten antikörper gegen menschlichen b lymphozyt beschränkter differenzierung antigen für die behandlung von b-zell-lymphoma
US5595721A (en) 1993-09-16 1997-01-21 Coulter Pharmaceutical, Inc. Radioimmunotherapy of lymphoma using anti-CD20
US20030180290A1 (en) * 1995-06-07 2003-09-25 Idec Pharmaceuticals Corporation Anti-CD80 antibody having ADCC activity for ADCC mediated killing of B cell lymphoma cells alone or in combination with other therapies
CA2226575C (en) 1995-07-27 2011-10-18 Genentech, Inc. Stabile isotonic lyophilized protein formulation
US6001358A (en) 1995-11-07 1999-12-14 Idec Pharmaceuticals Corporation Humanized antibodies to human gp39, compositions containing thereof
EP0938334A4 (en) 1996-07-26 2004-12-15 Smithkline Beecham Corp IMPROVED METHOD FOR TREATING IMMUNE-MEDIATED SYSTEMIC DISEASES
UA76934C2 (en) * 1996-10-04 2006-10-16 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Reconstructed human anti-hm 1.24 antibody, coding dna, vector, host cell, method for production of reconstructed human antibody, pharmaceutical composition and drug for treating myeloma containing reconstructed human anti-hm 1.24 antibody
ES2337091T3 (es) 1996-11-27 2010-04-20 Genentech, Inc. Purificacion por afinidad de polipeptido en una matriz de proteina.
US6306393B1 (en) 1997-03-24 2001-10-23 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies
US6991790B1 (en) 1997-06-13 2006-01-31 Genentech, Inc. Antibody formulation
EP0999853B1 (en) 1997-06-13 2003-01-02 Genentech, Inc. Stabilized antibody formulation
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
CA2293829C (en) 1997-06-24 2011-06-14 Genentech, Inc. Methods and compositions for galactosylated glycoproteins
US20040191256A1 (en) * 1997-06-24 2004-09-30 Genentech, Inc. Methods and compositions for galactosylated glycoproteins
DE69840412D1 (de) 1997-10-31 2009-02-12 Genentech Inc Methoden und zusammensetzungen bestehend aus glykoprotein-glykoformen
US6528624B1 (en) 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
TR200002885T2 (tr) * 1998-04-03 2000-12-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha İnsan doku faktörüne (TF) karşı insanlaştırılmış antikor
AU3657899A (en) * 1998-04-20 1999-11-08 James E. Bailey Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity
BRPI9910332B8 (pt) 1998-05-06 2021-05-25 Genentech Inc método para purificação de um polipeptídio a partir de uma composição
PL195870B1 (pl) * 1998-08-11 2007-11-30 Biogen Idec Inc Zastosowanie przeciwciała anty-CD20, zastosowanieznakowanego radioaktywnie przeciwciała anty-CD20,zastosowanie przeciwciała anty-CD20 do przygotowania leku zwierającego przeciwciało i chemioterapięoraz zastosowanie przeciwciała anty-CD20 do przygotowania leku zawierającego przeciwciało i szpik kostny
AU5565299A (en) 1998-08-17 2000-03-06 California Institute Of Technology Devices and methods for analysis of non-ionic solutes
US6224866B1 (en) 1998-10-07 2001-05-01 Biocrystal Ltd. Immunotherapy of B cell involvement in progression of solid, nonlymphoid tumors
HK1041811A1 (zh) 1998-11-09 2002-07-26 Idec药物公司 接受bmt或pbsc移植患者的抗cd20嵌合抗体治疗
DK1616572T3 (da) * 1998-11-09 2010-12-06 Biogen Idec Inc Kimært anti-CD20-antistof, rituxan, til anvendelse i behandling af kronisk lymfatisk leukæmi
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
KR100940380B1 (ko) * 1999-01-15 2010-02-02 제넨테크, 인크. 효과기 기능이 변화된 폴리펩티드 변이체
PT1176195E (pt) 1999-04-09 2013-07-18 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Processo para controlar a actividade de uma molécula funcional sob o ponto de vista imunológico
ATE311199T1 (de) * 1999-05-07 2005-12-15 Genentech Inc Behandlung von autoimmunkrankheiten mit antagonisten die oberflächenmarker von b zellen binden
EP1194167B1 (en) 1999-06-09 2009-08-19 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of autoimmune disorders using antibodies which target b-cells
AU778863B2 (en) 1999-07-12 2004-12-23 Genentech Inc. Blocking immune response to a foreign antigen using an antagonist which binds to CD20
US8557244B1 (en) 1999-08-11 2013-10-15 Biogen Idec Inc. Treatment of aggressive non-Hodgkins lymphoma with anti-CD20 antibody
CA2378646A1 (en) 1999-08-11 2001-02-15 Idec Pharmaceuticals Corporation Treatment of patients having non-hodgkins lymphoma with bone marrow involvement with anti-cd20 antibodies
US6451284B1 (en) 1999-08-11 2002-09-17 Idec Pharmaceuticals Corporation Clinical parameters for determining hematologic toxicity prior to radioimmunotheraphy
CN1169952C (zh) 1999-10-10 2004-10-06 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院 抗cd20单克隆抗体的重链和轻链可变区基因及其应用
US20020006404A1 (en) * 1999-11-08 2002-01-17 Idec Pharmaceuticals Corporation Treatment of cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications
CA2390412A1 (en) * 1999-11-08 2001-05-17 Idec Pharmaceuticals Corporation Treatment of b cell malignancies using anti-cd40l antibodies in combination with anti-cd20 antibodies and/or chemotherapeutics and radiotherapy
US20020028178A1 (en) * 2000-07-12 2002-03-07 Nabil Hanna Treatment of B cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications
WO2001071005A2 (en) 2000-03-24 2001-09-27 Micromet Ag Multifunctional polypeptides comprising a binding site to an epitope of the nkg2d receptor complex
CN1981868A (zh) * 2000-03-31 2007-06-20 拜奥根Idec公司 抗细胞因子抗体或拮抗剂与抗－cd20在b细胞淋巴瘤治疗中的联合应用
EP1286692A4 (en) 2000-04-25 2004-11-17 Idec Pharma Corp INTRATHECAL ADMINISTRATION OF RITUXIMAB FOR THE TREATMENT OF LYMPHOMAS OF THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM
AU6836301A (en) * 2000-06-20 2002-01-02 Idec Pharma Corp Treatment of b-cell associated diseases such as malignancies and autoimmune diseases using a cold anti-cd20 antibody/radiolabeled anti-cd22 antibody combination
KR20030031957A (ko) 2000-07-12 2003-04-23 아이덱 파마슈티칼즈 코포레이션 Ｂ 세포 고갈 항체 및 면역 조절 항체 관련 적용의 조합을이용한 ｂ 세포 악성종양의 치료
NZ523912A (en) * 2000-07-31 2005-03-24 Biolex Inc Expression of biologically active polypeptides in duckweed
DE10043452A1 (de) 2000-09-04 2002-03-14 Basf Ag Formkörper mit einer tonmineralischen Beschichtung
US20020058029A1 (en) * 2000-09-18 2002-05-16 Nabil Hanna Combination therapy for treatment of autoimmune diseases using B cell depleting/immunoregulatory antibody combination
US20020128448A1 (en) * 2000-10-20 2002-09-12 Idec Pharmaceuticals Corporation Variant IgG3 Rituxan and therapeutic use thereof
US7754208B2 (en) * 2001-01-17 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
US20030103971A1 (en) * 2001-11-09 2003-06-05 Kandasamy Hariharan Immunoregulatory antibodies and uses thereof
CN100574803C (zh) * 2001-01-31 2009-12-30 拜奥根Idec公司 免疫调节抗体在治疗肿瘤性疾病中的用途
US20030211107A1 (en) * 2002-01-31 2003-11-13 Kandasamy Hariharan Use of CD23 antagonists for the treatment of neoplastic disorders
US20020159996A1 (en) * 2001-01-31 2002-10-31 Kandasamy Hariharan Use of CD23 antagonists for the treatment of neoplastic disorders
AU2002251913A1 (en) 2001-02-02 2002-08-19 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Hybrid antibodies and uses thereof
US20030077826A1 (en) 2001-02-02 2003-04-24 Lena Edelman Chimeric molecules containing a module able to target specific cells and a module regulating the apoptogenic function of the permeability transition pore complex (PTPC)
ES2364816T3 (es) 2001-04-02 2011-09-14 Genentech, Inc. Terapia de combinación.
AU2002307037B2 (en) * 2001-04-02 2008-08-07 Biogen Idec Inc. Recombinant antibodies coexpressed with GnTIII
WO2003061694A1 (en) 2001-05-10 2003-07-31 Seattle Genetics, Inc. Immunosuppression of the humoral immune response by anti-cd20 antibodies
US7321026B2 (en) 2001-06-27 2008-01-22 Skytech Technology Limited Framework-patched immunoglobulins
MXPA05000511A (es) * 2001-07-12 2005-09-30 Jefferson Foote Anticuepros super humanizados.
NZ581474A (en) 2001-08-03 2011-04-29 Glycart Biotechnology Ag Antibody glycosylation variants having increased antibody-dependent cellular cytotoxicity
IL159422A0 (en) * 2001-09-20 2004-06-01 Cornell Res Foundation Inc Methods and compositions for treating or preventing skin disorders using binding agents specific for prostate-specific membrane antigen
KR100988949B1 (ko) * 2001-10-25 2010-10-20 제넨테크, 인크. 당단백질 조성물
US20040093621A1 (en) * 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
EP2359685B1 (en) 2001-12-27 2013-12-04 GlycoFi, Inc. Methods to engineer mammalian-type carbohydrate structures
RU2004127458A (ru) 2002-02-14 2005-10-27 Иммуномедикс, Инк. (Us) Анти-cd20 антитела, их гибридные белки и способы их использования
US7432063B2 (en) 2002-02-14 2008-10-07 Kalobios Pharmaceuticals, Inc. Methods for affinity maturation
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US20030180292A1 (en) * 2002-03-14 2003-09-25 Idec Pharmaceuticals Treatment of B cell malignancies using anti-CD40L antibodies in combination with anti-CD20 antibodies and/or chemotherapeutics and radiotherapy
EP2319935B1 (en) 2002-03-19 2016-04-27 Stichting Dienst Landbouwkundig Onderzoek GnTIII (UDP-N-acetylglucosamine:Beta -D mannoside Beta (1,4)-N-acetylglucosaminyltransferase III) expression in plants.
US7262277B2 (en) * 2002-03-21 2007-08-28 Eli Lilly And Company Antagonistic anti-hFAS ligand human antibodies and fragments thereof
AU2003210060B2 (en) 2002-03-22 2010-02-25 Aprogen, Inc. Humanized antibody and process for preparing same
US20030190689A1 (en) * 2002-04-05 2003-10-09 Cell Signaling Technology,Inc. Molecular profiling of disease and therapeutic response using phospho-specific antibodies
EP1502603A4 (en) * 2002-04-09 2006-12-13 Kyowa Hakko Kogyo Kk AN ANTIBODY COMPOSITION CONTAINING MEDICAMENT FOR PATIENTS WITH Fc gamma RIIIa POLYMORPHISM
AU2003236017B2 (en) * 2002-04-09 2009-03-26 Kyowa Kirin Co., Ltd. Drug containing antibody composition
WO2004000102A2 (en) * 2002-06-19 2003-12-31 Abgenix, Inc. Method for predicting response to epidermal growth factor receptor-directed therapy
WO2004016750A2 (en) 2002-08-14 2004-02-26 Macrogenics, Inc. FcϜRIIB-SPECIFIC ANTIBODIES AND METHODS OF USE THEREOF
EP1539966B1 (en) 2002-09-12 2010-06-30 Greenovation Biotech GmbH Protein production method
KR20110017020A (ko) 2002-10-17 2011-02-18 젠맵 에이/에스 Ｃｄ20에 대한 인간 모노클로날 항체
EP1578947A4 (en) * 2002-12-02 2006-12-06 Abgenix Inc ANTIBODIES TAKEN AGAINST PHOSPHOLIPASE A2 AND USES THEREOF
JP2006517096A (ja) 2002-12-16 2006-07-20 ジェネンテック・インコーポレーテッド ヒトｃｄ２０を発現するトランスジェニックマウス
EP1944320A1 (en) * 2002-12-16 2008-07-16 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants and uses thereof
WO2004057002A2 (en) 2002-12-20 2004-07-08 Greenovation Biotech Gmbh Production of heterologous glycosylated proteins in bryophyte cells
EP2368578A1 (en) 2003-01-09 2011-09-28 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
US7960512B2 (en) * 2003-01-09 2011-06-14 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
CZ308720B6 (cs) 2003-01-22 2021-03-24 Roche Glycart Ag Fúzní konstrukty a jejich použití pro přípravu protilátek se zvýšenou vazebnou afinitou k receptorům Fc a efektorovou funkcí
CA2513113A1 (en) * 2003-01-23 2004-08-05 Genentech, Inc. Methods for producing humanized antibodies and improving yield of antibodies or antigen binding fragments in cell culture
MXPA05009837A (es) * 2003-03-14 2005-12-05 Pharmacia Corp Anticuerpos para el receptor del factor de crecimiento tipo insulina-i, para el tratamiento de canceres.
SI1613350T1 (sl) * 2003-04-09 2009-08-31 Genentech Inc Zdravljenje avtoimunske bolezni pri bolniku z neustreznim odzivom na inhibitor TNF-alfa
AR044388A1 (es) 2003-05-20 2005-09-07 Applied Molecular Evolution Moleculas de union a cd20
US20050163775A1 (en) * 2003-06-05 2005-07-28 Genentech, Inc. Combination therapy for B cell disorders
PT2272868E (pt) 2003-06-05 2015-07-07 Genentech Inc Terapêutica de combinação para distúrbios de células b
CA2532556A1 (en) * 2003-07-29 2005-02-24 Genentech, Inc. Assay for human anti cd20 antibodies and uses therefor
JP2007528723A (ja) * 2003-08-22 2007-10-18 メディミューン，インコーポレーテッド 抗体のヒト化
BRPI0412629A (pt) * 2003-08-29 2006-09-26 Genentech Inc método de tratamento de disfunção ocular em mamìferos
PT1692182E (pt) * 2003-11-05 2010-05-13 Roche Glycart Ag Anticorpos de cd20 com uma afinidade de ligação acrescida ao receptor fc e uma função efectora acrescida
US20050186206A1 (en) * 2003-12-19 2005-08-25 Genentech, Inc. Detection of CD20 in therapy of autoimmune diseases
KR20060107555A (ko) 2003-12-19 2006-10-13 제넨테크, 인크. 이식 거부에서 ｃｄ20의 검출
AU2004308482A1 (en) 2003-12-23 2005-07-14 Rinat Neuroscience Corp. Agonist anti-trkC antibodies and methods using same
AU2005214988A1 (en) 2004-02-17 2005-09-01 Absalus, Inc. Super-humanized antibodies against respiratory syncytial virus
EP1735000A2 (en) 2004-04-16 2006-12-27 Genentech, Inc. Method for augmenting b cell depletion
RU2006145450A (ru) * 2004-04-16 2008-06-27 Дженентек, Инк. (Us) Анализ на антитела
WO2005115453A2 (en) * 2004-04-16 2005-12-08 Genentech, Inc. Treatment of polychondritis and mononeuritis multiplex with anti-cd20 antibodies
EP1773393A2 (en) 2004-05-05 2007-04-18 Genentech, Inc. Preventing autoimmune disease by using an anti-cd20 antibody
JP2007538258A (ja) 2004-05-15 2007-12-27 ジェネンテック・インコーポレーテッド 標的分子に結合親和性を有する分子を検出するためのクロススクリーニングシステムと方法
CA2568336A1 (en) * 2004-06-04 2005-12-22 Genentech, Inc. Method for treating lupus
EP1753455A2 (en) 2004-06-04 2007-02-21 Genentech, Inc. Method for treating multiple sclerosis
US7501121B2 (en) * 2004-06-17 2009-03-10 Wyeth IL-13 binding agents
JP2008507555A (ja) 2004-07-22 2008-03-13 ジェネンテック・インコーポレーテッド シェーグレン症候群の治療方法
WO2006031370A2 (en) 2004-08-19 2006-03-23 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US20090175854A1 (en) * 2004-09-08 2009-07-09 Genentech, Inc. Methods of using death receptor ligands and CD20 antibodies
JP2008513367A (ja) 2004-09-08 2008-05-01 ジェネンテック・インコーポレーテッド デスレセプターリガンド及びｃｄ２０抗体の使用方法
CA2579142A1 (en) * 2004-09-13 2006-03-23 Macrogenics, Inc. Humanized antibodies against west nile virus and therapeutic and prophylactic uses thereof
RU2411956C2 (ru) 2004-10-05 2011-02-20 Дженентек, Инк. Способ лечения васкулита
PE20061329A1 (es) 2004-12-15 2006-12-08 Neuralab Ltd Anticuerpos ab humanizados para mejorar la cognicion
SV2006002342A (es) 2004-12-17 2006-06-01 Genentech Inc Terapia de antiogenesis para enfermedades autoinmunes en pacientes que tuvieron la terapia anterior interrumpida
KR20070100307A (ko) 2004-12-22 2007-10-10 제넨테크, 인크. 가용성 다중 막관통 단백질의 생산 방법
GT200600020A (es) 2005-01-13 2006-11-08 Procedimiento de tratamiento
DOP2006000029A (es) 2005-02-07 2006-08-15 Genentech Inc Antibody variants and uses thereof. (variantes de un anticuerpo y usos de las mismas)
TW200714289A (en) 2005-02-28 2007-04-16 Genentech Inc Treatment of bone disorders
AR053579A1 (es) 2005-04-15 2007-05-09 Genentech Inc Tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal (eii)
WO2006116369A2 (en) 2005-04-22 2006-11-02 Genentech, Inc. Method for treating dementia or alzheimer's disease with a cd20 antibody
AU2006247064A1 (en) 2005-05-18 2006-11-23 Biogen Idec Inc. Methods for treating fibrotic conditions
ZA200709956B (en) 2005-05-20 2009-02-25 Genentech Inc Pretreatment of a biological sample from an autoimmune disease subject
WO2006133148A2 (en) 2005-06-03 2006-12-14 Genentech, Inc. Method of producing antibodies with modified fucosylation level
RU2482132C2 (ru) 2005-08-26 2013-05-20 Роше Гликарт Аг Модифицированные антигенсвязывающие молекулы с измененной клеточной сигнальной активностью
MY149159A (en) 2005-11-15 2013-07-31 Hoffmann La Roche Method for treating joint damage
US9726673B2 (en) 2005-11-23 2017-08-08 Genentech, Inc. Methods and compositions related to B cell assays
WO2007064911A1 (en) 2005-12-02 2007-06-07 Biogen Idec Inc. Anti-mouse cd20 antibodies and uses thereof
US7708944B1 (en) 2006-06-13 2010-05-04 Research Foundation Of State University Of New York Ultra-sensitive, portable capillary sensor
AR065910A1 (es) 2007-04-02 2009-07-08 Genentech Inc Marcadores biologicos pronosticos de la respuesta de la artritis reumatoide a los antagonistas de los linfocitos b
WO2008157282A1 (en) 2007-06-18 2008-12-24 Genentech, Inc. Biological markers predictive of rheumatoid arthritis response to b-cell antagonists
HUE037162T2 (hu) 2007-07-09 2018-08-28 Genentech Inc Diszulfidkötés redukciójának megelõzése polipeptidek rekombináns elõállítása során
KR100898362B1 (ko) 2007-07-10 2009-05-18 주식회사 그리폰 다목적 신발
US20110243931A1 (en) 2007-09-02 2011-10-06 Thomas Friess Combination therapy with type i and type ii anti-cd20 antibodies
GB0718684D0 (en) 2007-09-24 2007-10-31 Roche Products Ltd Treatment method
US20090214561A1 (en) 2007-09-24 2009-08-27 David Robert Close Treatment method
US20090098118A1 (en) 2007-10-15 2009-04-16 Thomas Friess Combination therapy of a type ii anti-cd20 antibody with an anti-bcl-2 active agent
US20090110688A1 (en) 2007-10-24 2009-04-30 Georg Fertig Combination therapy of type ii anti-cd20 antibody with a proteasome inhibitor
CN105315323A (zh) 2007-10-30 2016-02-10 健泰科生物技术公司 通过阳离子交换层析进行的抗体纯化
AU2008343347A1 (en) 2007-12-21 2009-07-09 Genentech, Inc. Crystallization of anti-CD20 antibodies
ES2511844T3 (es) 2007-12-21 2014-10-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Formulación de anticuerpo
US20090162351A1 (en) 2007-12-21 2009-06-25 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of inhibitors of p38 MAP kinase
CN101945667A (zh) 2007-12-21 2011-01-12 健泰科生物技术公司 利妥昔单抗不应性类风湿性关节炎患者的疗法
KR101280716B1 (ko) 2008-03-25 2013-07-01 로슈 글리카트 아게 비-호지킨 림프종의 치료를 위한, 시클로포스파미드, 빈크리스틴 및 독소루비신과 조합으로의 증가된 항체 의존성 세포 세포독성 (ａｄｃｃ) 을 갖는 유형 ⅱ 항-ｃｄ20 항체의 용도
WO2009134738A1 (en) 2008-04-29 2009-11-05 Genentech, Inc. Responses to immunizations in rheumatoid arthritis patients treated with a cd20 antibody
US8021850B2 (en) 2008-07-14 2011-09-20 Ribo Guo Universal tandem solid-phases based immunoassay
TW201438738A (zh) 2008-09-16 2014-10-16 建南德克公司 治療進展型多發性硬化症之方法
TW201032826A (en) 2008-11-17 2010-09-16 Genentech Inc Method and formulation for reducing aggregation of a macromolecule under physiological conditions
RU2011124527A (ru) 2008-11-17 2012-12-27 Дженентек, Инк. Способ и композиция для уменьшения агрегации макромолекулы в физиологических условиях
US20100247484A1 (en) 2009-03-31 2010-09-30 Heinrich Barchet Combination therapy of an afucosylated antibody and one or more of the cytokines gm csf, m csf and/or il3
TWI409079B (zh) 2009-08-14 2013-09-21 Roche Glycart Ag 非典型岩藻醣化ｃｄ２０抗體與苯達莫斯汀（ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ）之組合療法
RU2012109451A (ru) 2009-08-14 2013-09-27 Роше Гликарт Аг Комбинированная терапия на основе афукозилированного антитела к cd20 в сочетании с флударабином и/или митоксантроном
BR112012004777A2 (pt) 2009-09-03 2019-09-24 Genentech Inc métodos para tratar diagnósticar e monitorar artrite reumatoide
AR078161A1 (es) 2009-09-11 2011-10-19 Hoffmann La Roche Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento.
WO2011131749A1 (en) 2010-04-23 2011-10-27 Glaxo Group Limited New 14 and 15 membered macrolides for the treatment of neutrophil dominated inflammatory diseases
BR112013002535A2 (pt) 2010-08-03 2019-09-24 F. Hoffmann - La Roche Ag biomarcadores de leucemia linfocítica crônica (cll)
AR082693A1 (es) 2010-08-17 2012-12-26 Roche Glycart Ag Terapia de combinacion de un anticuerpo anti-cd20 afucosilado con un anticuerpo anti-vegf
WO2012118750A2 (en) 2011-02-28 2012-09-07 Genentech, Inc. Biological markers and methods for predicting response to b-cell antagonists
US8592156B2 (en) 2011-08-08 2013-11-26 Roche Molecular Systems, Inc. Predicting response to anti-CD20 therapy in DLBCL patients
EP2892470A4 (en) 2012-09-06 2016-07-06 Freedom Innovations Llc METHOD AND SYSTEM FOR A PROSTHESIS DEVICE WITH SEVERAL FUNCTION LEVELS ACTIVATED THROUGH SEVERAL CONTROL SYSTEMS
MX2015002947A (es) 2012-09-07 2015-09-23 Genentech Inc Terapia de combinacion de un anticuerpo ant-cd20 tipo ii con un inhibidor blc-2 selectivo.

Also Published As

Publication number Publication date
BE2016C008I2 (no) 2021-08-16
NO20220904A1 (no) 2006-08-03
NO346167B1 (no) 2022-04-04
LT2380911T (lt) 2018-07-10
HUE042914T2 (hu) 2019-07-29
CN1902231A (zh) 2007-01-24
CN102373215B (zh) 2014-07-30
SI1692182T1 (sl) 2010-06-30
AU2004287643C1 (en) 2012-05-31
HUE031632T2 (en) 2017-07-28
EP2348051A3 (en) 2012-12-19
EP2380911A1 (en) 2011-10-26
SI2077282T1 (sl) 2017-03-31
EP2348051B1 (en) 2018-12-19
HK1213574A1 (zh) 2016-07-08
JP6235521B2 (ja) 2017-11-22
BRPI0416262A (pt) 2007-01-09
CY1121206T1 (el) 2020-05-29
US20240301079A1 (en) 2024-09-12
ZA200604547B (en) 2007-07-25
IL235172A0 (en) 2014-11-30
KR101220691B1 (ko) 2013-01-14
DK1692182T3 (da) 2010-05-31
JP2018027088A (ja) 2018-02-22
TR201903329T4 (tr) 2019-04-22
CY2016004I2 (el) 2016-08-31
US20230212303A1 (en) 2023-07-06
LTC2380910I2 (lt) 2018-01-25
ES2550311T3 (es) 2015-11-06
NZ588860A (en) 2012-03-30
RS51334B (sr) 2011-02-28
PL2380911T3 (pl) 2018-10-31
HUS1600013I1 (hu) 2016-04-28
EP2348051A2 (en) 2011-07-27
EA025962B1 (ru) 2017-02-28
HRP20190333T1 (hr) 2019-05-03
IL207347A (en) 2015-08-31
EP1692182A2 (en) 2006-08-23
NZ547589A (en) 2009-05-31
PL2380910T3 (pl) 2015-12-31
RS57466B1 (sr) 2018-09-28
TNSN06126A1 (en) 2007-11-15
PT2077282T (pt) 2017-02-14
KR101364858B1 (ko) 2014-02-19
JP2012254083A (ja) 2012-12-27
US20210002382A1 (en) 2021-01-07
FR15C0076I1 (no) 2016-01-01
SI2380910T1 (sl) 2015-11-30
EA015009B1 (ru) 2011-04-29
EP2380910A1 (en) 2011-10-26
BR122020013239B1 (pt) 2022-05-10
US20160076009A1 (en) 2016-03-17
EP2077282A3 (en) 2009-08-05
HRP20170398T2 (hr) 2019-06-28
JP2010081940A (ja) 2010-04-15
IL232954A0 (en) 2014-07-31
RS55723B1 (sr) 2017-07-31
SI2380911T1 (en) 2018-07-31
AU2004287643B2 (en) 2011-11-17
PT2380911T (pt) 2018-07-04
HK1167681A1 (en) 2012-12-07
HRP20100303T1 (hr) 2010-07-31
IL207347A0 (en) 2010-12-30
DK2348051T3 (en) 2019-03-18
RS58420B1 (sr) 2019-04-30
NO341893B1 (no) 2018-02-12
NO346533B1 (no) 2022-09-26
HRP20181204T1 (hr) 2018-09-21
LU93001I2 (fr) 2016-05-17
RS54450B1 (sr) 2016-06-30
BRPI0416262B1 (pt) 2022-04-12
CN1902231B (zh) 2015-05-20
PL2348051T3 (pl) 2019-05-31
PT2348051T (pt) 2019-02-04
DK2077282T3 (en) 2017-01-30
DK2380910T3 (en) 2015-10-19
KR101364902B1 (ko) 2014-02-21
LT2348051T (lt) 2019-02-25
NO20062289L (no) 2006-08-03
ME03330B (me) 2019-10-20
PT1692182E (pt) 2010-05-13
CY2015001I2 (el) 2016-06-22
EP2380910B1 (en) 2015-09-30
SI2348051T1 (sl) 2019-03-29
NO347530B1 (no) 2023-12-11
PT2380910E (pt) 2015-11-26
HK1100005A1 (en) 2007-08-31
SG160348A1 (en) 2010-04-29
EP1692182B1 (en) 2010-04-07
PL2077282T3 (pl) 2017-08-31
CY1118719T1 (el) 2017-07-12
ES2708095T3 (es) 2019-04-08
CN102373215A (zh) 2012-03-14
CY2016004I1 (el) 2016-08-31
SG10201504094SA (en) 2015-06-29
HRP20170398T1 (hr) 2017-05-19
WO2005044859A2 (en) 2005-05-19
NO20210499A1 (no) 2006-08-03
US20090010921A1 (en) 2009-01-08
ECSP21023271A (es) 2021-05-31
SG10202008722QA (en) 2020-10-29
LU92632I2 (fr) 2015-11-02
WO2005044859A3 (en) 2005-08-04
DE602004026470D1 (de) 2010-05-20
MXPA06004836A (es) 2006-07-06
KR20060130579A (ko) 2006-12-19
US20050123546A1 (en) 2005-06-09
JP2015134814A (ja) 2015-07-27
EP2077282B1 (en) 2016-12-28
MX337587B (es) 2016-03-11
NO2018020I1 (no) 2018-06-27
AU2004287643A1 (en) 2005-05-19
KR20120104419A (ko) 2012-09-20
ES2672640T3 (es) 2018-06-15
KR20110129990A (ko) 2011-12-02
ME01775B (me) 2011-02-28
IL175367A0 (en) 2006-09-05
ATE463513T1 (de) 2010-04-15
ES2341009T3 (es) 2010-06-14
US20160075794A1 (en) 2016-03-17
ES2615507T3 (es) 2017-06-07
JP6125770B2 (ja) 2017-05-10
EP2380911B1 (en) 2018-05-09
JP4653109B2 (ja) 2011-03-16
HK1167682A1 (en) 2012-12-07
EA036531B1 (ru) 2020-11-19
LT2077282T (lt) 2017-03-10
US20160075793A1 (en) 2016-03-17
ECSP066603A (es) 2006-10-17
HUE026669T2 (en) 2016-06-28
CN104829719A (zh) 2015-08-12
US8883980B2 (en) 2014-11-11
HRP20151418T1 (hr) 2016-01-29
EA201100128A1 (ru) 2011-06-30
NO347800B1 (no) 2024-03-25
PL1692182T3 (pl) 2010-09-30
CA2544865C (en) 2019-07-09
FR15C0076I2 (fr) 2016-03-11
TR201809892T4 (tr) 2018-07-23
US9296820B2 (en) 2016-03-29
JP2008500017A (ja) 2008-01-10
EA200600905A1 (ru) 2006-12-29
NL300801I2 (nl) 2017-09-19
CN102373214A (zh) 2012-03-14
DK2380911T3 (en) 2018-08-06
CR11848A (es) 2011-04-04
ME02332B (me) 2016-06-30
HUE038955T2 (hu) 2018-12-28
IL232954A (en) 2015-09-24
CY2015001I1 (el) 2016-06-22
CN102373214B (zh) 2014-07-09
EP2077282A2 (en) 2009-07-08
EA201300481A1 (ru) 2014-01-30
EA202091901A1 (ru) 2020-11-24
CY1120252T1 (el) 2019-07-10
CA2544865A1 (en) 2005-05-19
IL175367A (en) 2014-11-30
CY1110301T1 (el) 2015-01-14
UA91823C2 (ru) 2010-09-10
MA31040B1 (fr) 2010-01-04
NO20171989A1 (no) 2006-08-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20240301079A1 (en) Antigen binding molecules with increased fc receptor binding affinity and effector function
EA047444B1 (ru) АНТИТЕЛА, ОБЛАДАЮЩИЕ ПОВЫШЕННОЙ АФФИННОСТЬЮ К СВЯЗЫВАНИЮ С Fc-РЕЦЕПТОРОМ И ЭФФЕКТОРНОЙ ФУНКЦИЕЙ