RS55723B1 - Molekuli koji se vezuju za antigen sa povećanim afinitetom vezivanja za fc receptor i efektornom funkcijom - Google Patents

Molekuli koji se vezuju za antigen sa povećanim afinitetom vezivanja za fc receptor i efektornom funkcijom

Info

Publication number
RS55723B1
RS55723B1 RS20170173A RSP20170173A RS55723B1 RS 55723 B1 RS55723 B1 RS 55723B1 RS 20170173 A RS20170173 A RS 20170173A RS P20170173 A RSP20170173 A RS P20170173A RS 55723 B1 RS55723 B1 RS 55723B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
antibody
seq
item
sequence
cells
Prior art date
Application number
RS20170173A
Other languages
English (en)
Inventor
Pablo Umana
Peter Brünker
Koller Claudia Ferrara
Tobias Suter
Ursula Püntener
Ekkehard Mössner
Original Assignee
Roche Glycart Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=34572912&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS55723(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Roche Glycart Ag filed Critical Roche Glycart Ag
Publication of RS55723B1 publication Critical patent/RS55723B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A61P31/06—Antibacterial agents for tuberculosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/38—Drugs for disorders of the endocrine system of the suprarenal hormones
    • A61P5/40—Mineralocorticosteroids, e.g. aldosterone; Drugs increasing or potentiating the activity of mineralocorticosteroids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2887—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD20
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1048—Glycosyltransferases (2.4)
    • C12N9/1051—Hexosyltransferases (2.4.1)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
    • C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/53—Hinge
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/72—Increased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y204/00—Glycosyltransferases (2.4)
    • C12Y204/01—Hexosyltransferases (2.4.1)
    • C12Y204/01144—Beta-1,4-mannosyl-glycoprotein 4-beta-N-acetylglucosaminyltransferase (2.4.1.144)
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/808—Materials and products related to genetic engineering or hybrid or fused cell technology, e.g. hybridoma, monoclonal products
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/866—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof involving immunoglobulin or antibody fragment, e.g. fab', fab, fv, fc, heavy chain or light chain
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/867—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof involving immunoglobulin or antibody produced via recombinant dna technology

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Oncology (AREA)

Description

OSNOVA PRONALASKA
Oblast pronalaska
[0001] Izlaganje pronalaska se generalno odnosi na molekule koji vezuju antigen (ABM). U naročitim varijantama, predstavljeno izlaganje pronalaska se odnosi na rekombinantna monoklonalna antitela, uključujući himerna, primatizovana ili humanizovana antitela specifična za humani CD20. Pored toga, predstavljeno izlaganje pronalaska se dalje odnosi na molekule nukleinskih kiselina koji kodiraju takve ABM, i vektore i ćelije domaćine koji sadrže takve molekule nukleinskih kiselina. Izlaganje pronalaska se dalje odnosi na postupke proizvodnje ABM prema izlaganju pronalaska, i na postupke za primenu ovih ABM u lečenju bolesti. Pored toga, predstavljeno izlaganje pronalaska se odnosi na ABM sa modifikovanom glikozilacijom koja ima poboljšana terapeutska svojstva, uključujući antitela sa povećanim vezivanjem za Fc receptor i povećanom efektornom funkcijom.
[0002] Pronalazak je definisan u patentnim zahtevima. Pronalazak se odnosi na humanizovano anti-CD20 antitelo tipa II koje sadrži (a) varijabilni region teškog lanca koji sadrži SEQ ID NO: 32 ili varijabilni region teškog lanca koji sadrži SEQ ID NO:32 koji sadrži supstituciju M34I, i
(b) varijabilni region lakog lanca koji sadrži SEQ ID NO:76.
Pored toga, pronalazak se odnosi na humanizovano anti-CD20 antitelo tipa II koje sadrži varijabilni region teškog lanca koji je kodiran nukleinsko kiselinskom sekvencom koja je najmanje 80% identična sa SEQ ID NO: 31 ili SEQ ID NO: 39 i varijabilni region lakog lanca koji je kodiran nukleinsko kiselinskom sekvencom koja je najmanje 80% identična sa SEQ ID NO: 75, pri čemu navedeno antitelo indukuje više nivoe apoptoze kada je inkubirano sa CD20-pozitivnim humanim ćelija u odnosu na kontrolu pod identičnim uslovima upotrebom
C2B8 himemog IgGl antitela sa sekvencom identičnom rituksimabu.
Stanje tehnike
Imuni sistem i anti-CD20 antitela
[0003] Imuni sistem kičmenjaka, uključujući ljude, sastoji se od određenog broja organa i ćelijskih tipova, koji su se razvili da tačno i specifično prepoznaju, vežu i unište strane mikroorganizme ("antigene"). Limfociti su kritični za pravilnu funkciju imunog sistema. Ove ćelije su proizvedene u timusu, slezini i koštanoj srži (kod odraslih) i predstavljaju oko 30% svih leukocita prisutnih u cirkulaciji krvi odraslih ljudi. Postoje dve glavne pod-populacije limfocita: T ćelije i B ćelije. T ćelije su odgovorne za ćelijski posredovan imunitet, dok su B ćelije odgovorne za proizvodnju antitela (humoralni imunitet). Međutim, u tipičnom imunom odgovoru, T ćelije i B ćelije funkcionišu nezavisno: T ćelije se aktiviraju kada se T ćelijski receptor vezuje za fragmente antigena koji su vezani za glikoproteine glavnog kompleksa histokompatibilnosti ("MHC") na površini ćelija koje prikazuju antigen; takva aktivacija uzorkuje oslobađanje bioloških medijatora ("interleukina"), koji stimulišu B ćelije da se diferenciraju i proizvode antitela ("imunoglobuline") protiv antigena.
[0004] Svaka B ćelija unutar domaćina eksprimira antitelo jednog posebnog tipa i specifičnosti, i različite B ćelije eksprimiraju antitela specifična za različite antigene. Proliferacija B ćelija i proizvodnja antitela dostižu maksimum kao reakcija na strani antigen, i oba tipično prestaju (ili se značajno smanjuju) kada je strani antigen neutralizovan. Povremeno, međutim, proliferacija određene B ćelije će se nastaviti nesmanjeno; takva proliferacija može da ima za rezultat kancer označen kao "B ćelijski limfom."
[0005] T ćelije i B ćelije sadrže proteine na ćelijskoj površini koji se mogu koristiti kao "markeri" za diferencijaciju i identifikaciju. Jedan takav humani B ćelijski marker je humani antigen Bp35 specifičan za B limfocite, označen kao "CD20." CD20 se eksprimira tokom ranog pre-B ćelijskog razvoja i ostaje do diferencijacije ćelija plazme. Posebno, molekul CD20 može da reguliše korak u procesu aktivacije koji je potreban za početak ćelijskog ciklusa i diferencijaciju i obično se eksprimira u veoma visokim nivoima na neoplastičnim ("tumorskim") B ćelijama. Kako je CD20 prisutan u visokim nivoima na "malignim" B ćelijama, tj., onim B ćelijama čija nesmanjena proliferacija može dovesti do B ćelijskog limfoma, CD20 površinski antigen ima potencijal da služi kao kandidat za "ciljno delovanje" na B ćelijske limfome.
[0006] U suštini, takvo ciljno delovanje može biti uopšteno kao što sledi: antitela specifična za CD20 površinski antigen B ćelija uvedena su u pacijenta, na primer injekcijom. Ova anti-CD20 antitela specifično se vezuju za CD20 antigen ćelijske površine kako normalnih tako i malignih B ćelija; anti-CD20 antitelo vezano za CD20 površinski antigen može dovesti do uništavanja i smanjenja broja neoplastičnih B ćelija. Pored toga, hemijska sredstva ili radioaktivni obeleživači koji imaju potencijal da unište tumor mogu biti konjugovana za anti-CD20 antitelo tako da se to sredstvo specifično "isporučuje" npr., neoplastičnim B ćelijama. Nezavisno od pristupa, primarni cilj je uništiti tumor: specifičan pristup se može odrediti pomoću posebnog anti-CD20 antitela koje se koristi i, na taj način, dostupni pristupi za ciljno delovanje CD20 antigena mogu značajno da variraju.
[0007] Nekonjugovana monoklonalna antitela (mAbs) mogu biti korisni lekovi za lečenje kancera, kao što je pokazano preko U.S. Food and Drug Administration's approval of Rituximab (Rituxan™; IDEC Pharmaceuticals, San Diego, CA, and Genentech Inc., San Francisco, CA), za tretman CD20 pozitivne B-ćelije, ne-Hočkinovog limfoma niskog stadijuma i folikularnog ne-Hodčkinovog limfoma, trastuzumab (Herceptin™; Genentech Ine,) za lečenje uznapredovalog kancera dojke (Grillo-Lopez, A.-J., et al., Semin. Oncol. 26:66-73 (1999); Goldenberg, M. M., Clin. Ther. 21:309-18 (1999)), gemtuzumab (Mvlotarg™, Celltech/Wyeth-Ayerst) za lečenje remisije akutne mijeloidne leukemije, i alemtuzumab (CAMPATH™, Millenium Pharmaceuticals/Schering AG) za lečenje B ćelijske hronične limfocitne leukemije. Uspeh ovih proizvoda oslanja se ne samo na njihovu efikasnost, već takođe na njihovim istaknutim sigurnosnim profilima (Grillo-Lopez, A.-J., et al., Semin. Oncol. 26:66-73 (1999); Goldenberg, M. M., Clin. Ther. 21:309-18 (1999)). Uprkos postignućima ovih lekova, trenutno postoji veliko zanimanje za dobijanje više aktivnosti specifičnog antitela od onoga što se tipično dobija terapijom nekonjugovanim mAb. Mišje monoklonalno antitelo, B-Lyl, je sledeće antitelo poznato kao specifično za humani CD20. (Poppema, S. and Visser, L., Biotest Bulletin 3: 131-139 (1987)). Polvak, M.J. and Deans J.P., Blood 99:3256-3262 (2002) opisuju mišje B-Lyl antitelo kao jedno od 16 anti-CD20 antitela. Međutim, nijedno od pojedinačno izloženih antitela nije potpuno strukturno okarakterisano i nijedno od njih nije deponovano.
[0008] Rezultati određenog broja studija sugerišu da mehanizmi koji su zavisni od Fc receptora značajno doprinose aktivnosti citotoksičnih antitela protiv tumora i ukazuju na to da bi se optimalno antitelo protiv tumora poželjno vezalo za aktivacione Fc receptore i minimalno za inhibitorni partner FcyRIIB. (Clynes, R. A., et al., Nature Medicine 6(4):443-446 (2000); Kalergis, A.M., and Ravetch, J. V., J. Exp. Med 19S(12):1653-1659 (June 2002). Na primer, rezultati najmanje jedne studije sugerišu da je FcyRIIIa receptor naročito snažno povezan sa efikasnošću terapije antitelom. (Cartron, G., et al., Blood 99(3):754-757 (Februarv 2002)). Ova studija je pokazala da pacijenti homozigotni za FcyRIIIa imaju bolji odgovor na rituksimab od heterozigotnih pacijenata. Autori su zaključili da je bolji odgovor posledica boljeg in vivo vezivanja antitela za FcYRIIIa, što ima za rezultat bolju ADCC aktivnost protiv ćelija limfoma. (Cartron, G., et al, Blood 99(3):754-757 (February 2002)).
[0009] Objavljeni su različiti pokušaji za ciljno delovanje na CD20 površinski antigen. Mišje monoklonalno antitelo 1F5 (anti-CD20 antitelo) navodno se primenjivalo kontinuiranom intravenskom infuzijom pacijentima sa B ćelijskim limfomom. Ekstremno visoki novoi (>2 grama) 1FS navodno su potrebni za snižavanje ćelija tumora u cirkulaciji, a rezultati su opisani kao "prelazni." Press et al., "Monoclonal Antibody 1F5 (Anti-CD20) Serotherapy of Human B-Cell Lymphomas." Blood 69/2:584-591 (1987). Potencijalni problem sa ovim pristupom je to što ne-humanim monoklonalnim antitelima (npr., mišjim monoklonalnim antitelima) tipično nedostaje humana efektorna funkcionalna grupa, tj., ona ne mogu, pored ostalog, da posreduju u lizi zavisnoj od komplementa ili da liziraju humane ciljne ćelije preko ćelijske citotoksičnosti zavisne od antitela ili fagocitoze posredovane preko Fc receptora. Pored toga, ne-humana monoklonalna antitela može prepoznati humani domaćin kao strani protein; prema tome, ponovljene injekcije takvih stranih antitela mogu dovesti do indukcije imunih odgovora što dovodi do štetnih reakcija hipersenzitivnosti. Za monoklonalna antitela na bazi mišjih, ovo je često označeno kao odgovor humanog anti-mišjeg antitela, ili "HAMA" odgovor. Pored toga, ova "strana" antitela mogu biti napadnuta od strane imunog sistema domaćina tako da se ona, ustvari, neutralizuju pre nego što dostignu svoje ciljno mesto.
[0010] Sledeći objavljeni pristup u poboljšanju sposobnosti mišjih monoklonalnih antitela da budu efikasna u lečenju B-ćelijskih poremećaja bio je konjugacija radiaktivnog obeleživača ili toksina za antitelo tako da se obeleživač ili toksin nalaze na mestu tumora. Na primer, prethodno navedeno 1F5 antitelo je "obeleženo" jodom-131 ("1311") i navodno je procenjeno za biodistribuciju kod dva pacijenta. Videti Eary, J. F. et al., "Imaging and Treatment of B-Cell Lymphoma" J. Nuc. Med. 31/8:1257-1268 (1990); takođe videti, Press, O. W. et al., "Treatment of Refractory Non-Hodgkin's Lymphoma with Radiolabeled MB-1 (Anti-CD37) Antibody" J. Clin. One. 7/8:1027-1038 (1989) (indikacija da je jedan pacijent tretiran sa IF-5 koji je obeležen sa 1311 imao "delimični odgovor"); Goldenberg, D. M. et al. Lvmphoma with Radiolabeled MB-1 (Anti-CD37) Antibody" J. Clin. One. 7/8:1027-1038 (1989) (indikacija da je jedan pacijent tretiran sa IF-5 koji je obeležensa13<1>I imao "delimični odgovor"); Goldenberg, D. M. et al., "Targeting, Dosimetry and Radioimmunotherapy of B-Cell
Lvmphomas with Iodine-131-Labeled LL2 Monoclonal Antibodv" J. Clin. One. 9/4:548-564
(1991) (tri od osam pacijenata koji primaju višestruke injekcije prijavili su razvoj HAMA odgovora); Appelbaum, F. R. "Radiolabeled Monoclonal Antibodies in the Treatment of Non-Hodgkin's Lvmphoma" Hem. One. Clinics of N. A. 5/5:1013-1025 (1991) (prikaz rada); Press, O. W. et al. "Radiolabeled-Antibodv Therapv of B-Cell Lvmphoma with Autologous Bone Marrow Support." New England J. Med 329/17: 1219-12223 (1993) (anti-CD20 antitelo IF5 i BI obeleženo jodom-131); i Kaminski, M. G. et al "Radioimmunotherapv of B-Cell Lvmphoma with 1311 Anti-Bl (Anti-CD20) Antibody". New England J. Med 329/7(1993)
(anti-CD20 antitelo BI obeleženo jodom-131; u daljem tekstu označeno kao "Kaminski"). Toksini (tj., hemoterapeutska sredstva kao što je doksorubicin ili mitomicin C) takođe su konjugovani za antitela. Videti, na primer, PCT objavljenu prijavu WO 92/07466 (objavljena 14.05.1992.).
[0011] Himerna antitela koja sadrže delove antitela iz dve ili više različitih vrsta (npr., miša i čoveka) razvijena su kao alternativa "konjugovanim" antitelima. Na primer, Liu, A. Y. et al, "Production of a Mouse-Human Chimeric Monoclonal Antibody to CD20 with Potent Fc-Dependent Biologic Activity" J. Immun. 139/10: 3521-3526 (1987), opisuju mišje/humano himerno antitelo usmereno protiv CD20 antigena. Videti takođe, PCT objavu br. WO88/04936. Na primer, rituksimab (RITUXAN®), himerno anti-CD20, antitelo odobreno je za lečenje ne-Hočkinovog limfoma.
[0012] Dodajući izraz CD20, B ćelijskim limfomima, ovaj antigen može da služi kao kandidat za "ciljno delovanje" na takve limfome. U suštini, takvo ciljno delovanje može biti uopšteno na sledeći način: antitela specifična za CD20 površinski antigen na B ćelijama primenuju se na pacijenta. Ova anti-CD20 antitela se specifično vezuju za CD20 antigen (po izgledu) kako normalnih tako i malignih B ćelija, i antitelo vezano za CD20 na ćelijskoj površini ima za rezultat uništavanje i smanjenje broja tumorogenih B ćelija. Pored toga, hemijska sredstva, citotoksini ili radioaktivna sredstva mogu biti direktno ili indirektno vezana za anti-CD20 antitelo tako da se sredstvo selektivno "isporučuje" u B ćelije koje eksprimiraju CD20 antigen. Sa oba ova pristupa, primarni cilj je uništiti tumor. Specifičan pristup će zavisiti od određenog anti-CD20 antitela koje se koristi. Na taj način, očigledno je da se različiti pristupi za ciljno delovanje na CD20 antigen mogu značajno menjati.
[0013] Rituksimab (RITUXAN®) antitelo je monoklonalno antitelo koje sadrži himerni humani gama 1 konstantni domen miša dobijen genetičkim inženjeringom i koje je usmereno protiv humanog CD20 antigena. Ovo himerno antitelo sadrži humane gama 1 konstantne domene i identifikovano je pod nazivom "C2B8" u U.S. Pat. br. 5,736,137 (Andersen et. al.) objavljenom 17.04.1998., prijavioca IDEC Pharmaceuticals Corporation. RITUXAN® je odobren za lečenje pacijenata sa relapsom ili refrakcijom, CD20 pozitivnog, B ćelijskog ne-Hočkinovog limfoma, niskog ili folikularnog stadijuma. In vitro ispitivanja mehanizma delovanja pokazala su da RITUXAN® ispoljava citotoksičnost zavisnu od humanog komplementa (CDC) (Reff et. al, Blood 83(2): 435-445 (1994)). Pored toga ispoljava značajnu aktivnost u testovima koji mere citotoksičnost zavisnu od antitela (ADCC). Pokazano je da RITUXAN® poseduje anti-proliferativnu aktivnost u testovima ugradnje timidina i ograničenu sposobnost da direktno indukuje apoptozu, dok CD20 antitela to ne čine (Maloney et. al, Blood 88 (10): 637a (1996)).
Glikozilacija antitela
[0014] Oligosaharidna komponenta može značajno da utiče na osobine relevatne za efikasnost terapeutskog glikoproteina, uključujući fizičku stabilnost, otpornost na proteazu, interakcije sa imunim sisitemom, farmakokinetiku i specifičnu biološku aktivnost. Takve osobine mogu da zavise ne samo od prisustva ili odsustva, već takođe od specifičnih struktura, oligosaharida. Mogu se napraviti izvesna uopštavanja između oligosaharidne strukture i glikoproteinske funkcije. Na primer, određene oligosaharidne strukture posreduju u brzom klirensu glikoproteina iz krvotoka preko interakcija sa specifičnim proteinima koji se vezuju za ugljene hidrate, dok druge mogu vezati antitela i pokrenuti neželjene imune reakcije. (Jenkins et al, Nature Biotechnol. 14:975-81 (1996)).
[0015] Sisarske ćelije su poželjni domaćini za proizvodnju terapeutskih glikoproteina, zbog njihove sposobnosti da glikoziluju proteine u najkompatibilnijem obliku humane primene.
(Cumming et al, Glycobiology 1:115-30 (1991); Jenkins et al., Nature Biotechnol. 14:975-81
(1996)). Bakterije veoma retko glikoziluju proteine, i kao drugi tipovi uobičajenih domaćina, kao što su kvasci, filamentozne gljive, ćelije insekata i biljaka, proizvode glikozilacione obrasce povezane sa brzim klirensom iz krvotoka, neželjenim imunim interakcijama i u nekim specifičnim slučajevima, sniženom biološkom aktivnošću. Među sisarskim ćelijama, ćelije jajnika kineskog hrčka (CHO) su najčešće korišćene tokom poslednje dve decenije. Pored toga što daju pogodne glikozilacione obrasce, ove ćelije omogućavaju dosledno stvaranje genetički stabilnih, visoko produktivnih klonalnih ćelijskih linija. One se mogu kultivisati do visokih gustina u jednostavnim bioreaktorima primenom podloge bez seruma, i omogućavaju razvoj bezbednih i ponovljivih bio-procesa. Druge obično korišćene životinjske ćelije obuhvataju ćelije bubrega mladunčeta hrčka (BHK), NS0- i SP2/0-mišje mijeloma ćelije. Skorije, testirana je takođe i proizvodnja iz transgenih životinja. (Jenkins et al., Nature Biotechnol. 14:975-81 (1996)).
[0016] Sva antitela sadrže ugljenohidratne strukture na konzervativnim položajima u konstantnim regionima teškog lanca, pri čemu svaki izotip poseduje poseban niz N-vezanih ugljenohidratnih struktura, koje promenljivo utiču na agregaciju, izlučivanje ili funkcionalnu aktivnost proteina. (Wright, A., and Morrison, S. L., Trends Biotech. 15:26-32 (1997)). Struktura priključrnog N-vezanog ugljenog hidrata značajno varira, u zavisnosti od stepena obrade, i može da obuhvata više manozne, višestruko granate kao i biantenalne složene oligosaharide. (Wright, A., and Morrison, S. L., Trends Biotech. 15:26-32 (1997)). Tipično, postoji heterogena obrada oligosahardinih struktura jezgra vezanih na određenom glikozilacionom mestu tako da čak monoklonalna antitela postoje kao višestruke glikoforme. Slično, pokazano je da se glavne razlike u glikozilaciji antitela javljaju između ćelijskih linija, i čak se manje razlike vide za daru ćelijsku liniju uzgajanu pod različitim uslovima kulture.
(Lifelv, M. R. et al., Glycobiology 5(8):813-22 (1995)).
[0017] Jedan način za dobijanje velikih povećanja potencije, uz održavanje jednostavnog proizvodnog postupka i potencijalno izbegavajući značajne, neželjene sporedne efekte, je pojačati prirodne, ćelijski-posredovane efektorne funkcije monoklonalnih antitela putem inženjeringa njihove oligosaharidne komponente kao što je opisano u Umana, P. et al, Nature Biotechnol. 17: 176-180 (1999) i U.S. Pat. br. 6,602,684.
[0018] Antitela tipa TgGI, najčešće korišćena antitela u imunoterapiji kancera, su glikoproteini koji imaju konzervisano N-vezano glikozilaciono mesto na Asn297 u svakom CH2 domenu. Dva složena biantenalna oligosaharida vezana za Asn297 su uronjena između CH2 domena, formirajući široke kontakte sa polipeptidnim osnovnim lancem, i njihovo prisustvo je osnovno da bi antitelo posredovalo efektorne funkcije kao što je ćelijska citotoksičnost zavisna od antitela (ADCC) (Lifely, M. R., et al, Glycobiology 5:813-822
(1995); Jefferis, R., et al., Immunol Rev. 163:59-76 (1998); Wright, A. and Morrison, S. L., Trends Biotechnol. 15:26-32 (1997)).
[0019] Prethodno je pokazano da prekomerna ekspresija u ćelijama jajnika kineskog hrčka (CHO) P(l,4)-N-acetilglukozaminiltransferaze III ("GnTIII"), glikoziltransferaze koja katalizuje formiranje oligosaharida podeljenih na dva jednaka dela, značajno povećavain vitroADCC aktivnost anti-neuroblastoma himernog monoklonalnog antitela (chCE7) proizvedenog pomoću CHO ćelija dobijenih inženjeringom. (Videti Umana, P. et al., Nature Biotechnol. 17:176-180 (1999); i međunarodnu objavu br. WO 99/54342.
[0020] Antitelo chCE7 pripada velikoj klasi nekonjugovanih mAb antitela koja imaju visok afinitet i specifičnost za tumor, ali imaju premalu potenciju da bi bili klinički korisni kada se proizvode u standardnim industrijskim ćelijskim linijama kojima nedostaje GnTIII enzim (Umana, P., et al, Nature Biotechnol. 17:176-180 (1999)). Ova studija je bila prva koja je trebalo da pokaže da bi se velika povećanja ADCC aktivnosti mogla dobiti inženjeringom ćelija koja proizvode antitelo tako da eksprimiraju GnTIII, što takođe dovodi do povećanja u proporciji oligosaharida podeljenih na dva jednaka dela povezanih sa konstantnim regionom (Fc), uključujući podeljene na dva jednaka dela, nefukozilovane oligosaharide, iznad nivoa koji se nalaze u prirodnim antitelima.
[0021] Ostaje potreba za poboljšanim terapeutskim pristupima koji ciljno deluju na CD20 antigen za lečenje B ćelijskih limfoma kod primata, uključujući, ali bez ograničenja na, ljude.
KRATAK REZIME PRONALASKA
[0022] Prepoznajući ogroman terapeutski potencijal molekula koji vezuju antigen (ABMs) koji imaju specifičnost vezivanja mišjeg B-Lyl antitela i koji su dobijeni gliko-inženjeringom da bi se povećao afinitet vezivanja za Fc receptor i efektorna funkcija, razvijen je postupak za proizvodnju takvih ABMs. Između ostalog, ovaj postupak obuhvata proizvodnju rekombinantnih, himernih antitela ili njihovih himernih fragmenata. Efikasnost ovih ABMs je dalje pojačana putem inženjeringa glikozilacionog profila Fc regiona antitela.
[0023] Prema tome, u jednom aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži: (a) sekvencu izabranu iz grupe koju čine: SEQ ID NO.: 5, SEQ ID NO.: 6 i SEQ ID NO.: 7. (CDRs Vh-i); (b) sekvencu izabranu iz grupe koju čine: SEQ ID NO.: 21, SEQ ID NO.: 22 i SEQ ID NO.: 23. (CDRs VH-2); i SEQ ID NO: 24. U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži SEQ ID NO.: 8, SEQ ID NO.: 9 i SEQ ID NO.: 10. (CDRs VL). U jednoj varijanti, bilo koji od ovih polinukleotida kodira fuzioni polipeptid.
[0024] U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži SEQ ID No.: 3. U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži SEQ ID No.: 4. U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polinukleotuid koji sadrži sekvencu koja je izabrana iz grupe koja se sastoji od SEQ ID No: 29; SEQ ID No: 31; SEQ ID No: 33; SEQ ID No: 35; SEQ ID No: 37; SEQ ID No: 39; SEQ ID No: 41; SEQ ID No: 43; SEQ ID No: 45; SEQ ID No: 47; SEQ ID No: 49; SEQ ID No.: 51; SEQ ID No: 53; SEQ ID No: 55; SEQ ID No: 57; SEQ ID No: 59; SEQ ID No: 61; SEQ ID No: 63; SEQ ID No: 65; SEQ ID No: 67; SEQ ID No: 69; i SEQ ID No.: 71. U sledećem aspektu, pronalazak je usmeren na izolovani polinukleotid koji sadrži SEQ ID No.: 75. U jednoj varijanti, takvi polinukleotidi kodiraju fuzione polipeptide.
[0025] Izlaganje pronalaska je dalje usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 80% identičnosti sa SEQ ID NO: 3, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid kodira fuzioni polipeptid. U dodatnom aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 80% identičnosti sa SEQ ID NO: 4, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid kodira fuzioni polipeptid. Izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 80% identičnosti sa sekvencom koja je izolovana iz grupe koja se sastoji od SEQ ID No: 29; SEQ ID No: 31; SEQ ID No: 33; SEQ ID No: 35; SEQ ID No: 37; SEQ ID No: 39; SEQ ID No: 41; SEQ ID No: 43; SEQ ID No: 45; SEQ ID No: 47; SEQ ID No: 49; SEQ ID No: 51; SEQ ID No: 53; SEQ ID No: 55; SEQ ID No: 57; SEQ ID No: 59; SEQ ID No: 61; SEQ ID No: 63; SEQ ID No: 65; SEQ ID No: 67; SEQ ID No: 69; i SEQ ID No: 71, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid kodira fuzioni polipeptid. U dodatnom aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 80%o identičnosti sa SEQ ID NO: 75, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid kodira fuzioni polipeptid.
[0026] Izlaganje pronalaska je dalje usmereno na polinukleotid koji sadrži SEQ ID NO: 11 (ceo težak lanac), ili polinukleotide koji imaju 80%, 85%, 90%, 95% ili 99% identičnosti sa SEQ TD NO: 11. Izlaganje pronalaska je takođe usmereno na polinukleotid koji sadrži SEQ ID NO: 12 (ceo lak lanac), ili polinukleotidi koji imaju 80%, 85%, 90%, 95% ili 99% identičnosti sa SEQ ID NO: 12.
[0027] Izlaganje pronalaska je takođe usmereno na izolovani polinukleotid koji kodira himerni polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID No.: 1. U jednoj varijanti, polinukleotid sadrži sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID No.: 1; i sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu Fc regiona antitela, ili njegov fragment, iz određene vrste, osim miša. Izlaganje pronalaska je takođe usmereno na izolovani polinukleotid koji kodira himerni polipeptid koji ima sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID No: 30; SEQ ID No: 32; SEQ ID No: 34; SEQ ID No: 36; SEQ ID No: 38; SEQ ID No: 40; SEQ ID No: 42; SEQ ID No: 44; SEQ ID No: 46; SEQ ID No: 48; SEQ ID No: 50; SEQ ID No: 52; SEQ ID No: 54; SEQ ID No: 56; SEQ ID No: 58; SEQ ID No: 60; SEQ ID No: 62; SEQ ID No: 64; SEQ ID No: 66; SEQ ID No: 68; SEQ ID No: 70; i SEQ ID No: 72. U jednoj varijanti, polinukleotid sadrži sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID No: 30; SEQ ID No: 32; SEQ ID No: 34; SEQ ID No: 36; SEQ ID No: 38; SEQ ID No: 40; SEQ ID No: 42; SEQ ID No: 44; SEQ ID No: 46; SEQ ID No: 48; SEQ ID No: 50; SEQ ID No: 52; SEQ ID No: 54; SEQ ID No: 56; SEQ ID No: 58; SEQ ID No: 60; SEQ ID No: 62; SEQ ID No: 64; SEQ ID No: 66; SEQ ID No: 68; SEQ ID No: 70; i SEQ ID No: 72; i sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu Fc regiona antitela, ili njegov fragment, iz određenih vrsta, osim miša.
[0028] U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polinukleotid koji kodira himerni polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID No.: 2. U jednoj varijanti, polinukleotid sadrži sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID No.: 2; i sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu Fc regiona antitela, ili njegov fragment, iz određene vrste, osim miša. U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na opisan je izolovani polinukleotid koji kodira himerni polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID No.: 76. U jednoj varijanti, polinukleotid sadrži sekvencu koja kodira polipeotid koji ima sekvencu SEQ ID No.: 76; i sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu Fc regiona antitela, ili njegov fragment, iz određene vrste, osim miša.
[0029] Izlaganje pronalaska je takođe usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja kodira polipeptid koji ima Vhregion mišjeg B-Lyl antitela, ili njegove funkcionalne varijante, i sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu Fc regiona antitela, ili njegovog fragmenta, iz određenih vrsta, osim miša. U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja kodira polipeptid koji ima Vlregion mišjeg B-Lyl antitela, ili njegove funkcionalne varijante, i sekvenca koja kodira polipeptid koji ima sekvencu Fc regiona antitela, ili njegov fragment, iz određene vrste, osim miša.
[0030] Izlaganje pronalaska je usmereno na eksperioni vektor koji sadrži bilo koji od izolovanih polinukleotida opisanih u prethodnom tekstu, i na ćeliju domaćina koja sadrži takav ekspresioni vektor. U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na ćeliju domaćina koja sadrži bilo koji od izolovanih polinukleotida koji su opisani u prethodnom tekstu.
[0031] U jednom aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polipeptid koji sadrži: (a) sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od: SEQ ID NO.: 15, SEQ ID NO.: 16 i SEQ ID NO.: 17. (CDRs Vh-i); (b) sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od: SEQ ID NO.: 25, SEQ ID NO.: 26 i SEQ ID NO.: 27 (CDRs VH-2); i SEQ ID NO: 28, pri čemu je navedeni polipeptid fuzioni polipeptid. U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polipeptid koji sadrži SEQ ID NO.: 18, SEQ ID NO.: 19 i SEQ ID NO.: 20 (CDRs Vl), pri čemu je navedeni polipeptid fuzioni polipeptid.
[0032] Izlaganje pronalaska je takođe usmereno na himerni polipeptid koji sadrži sekvencu SEQID NO.: 1 ili njegovu varijantu. Izlaganje pronalaska je dalje usmereno na himerni polipeptid koji sadrži sekvencu SEQ ID NO.: 2 ili njegovu varijantu. U jednoj varijanti, svaki od ovih polipeptida dalje sadrži humani Fc region. Izlaganje pronalaska je takođe usmereno na himerni polipeptid koji sadrži sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID No: 30; SEQ ID No: 32; SEQ ID No: 34; SEQ ID No: 36; SEQ ID No: 38; SEQ ID No: 40; SEQ ID No: 42; SEQ ID No: 44; SEQ ID No: 46; SEQ ID No: 48; SEQ ID No: 50; SEQ ID No: 52; SEQ ID No: 54; SEQ ID No: 56; SEQ ID No: 58; SEQ ID No: 60; SEQ ID No: 62; SEQ ID No: 64; SEQ ID No: 66; SEQ ID No: 68; SEQ ID No: 70; i SEQ ID No: 72, ili njenu varijantu. Izlaganje pronalaska je dalje usmereno na himerni polipeptid koji sadrži sekvencu SEQ ID NO.: 76 ili njenu varijantu. U jednoj varijanti, svaki od ovih polipeptida dalje sadrži humani Fc region.
[0033] U sledećem aspektu izlaganje pronalaska je usmereno na polipeptid koji sadrži sekvencu izvedenu iz mišjeg B-Lyl antitela i sekvencu izvedenu iz heterolognog polipeptida i molekul koji vezuje antigen i koji sadrži takav polipeptid. U poželjnoj varijanti, antitelo je himerno. U sledećoj poželjnon varijanti, antitelo je humanizovano ili primatizovano.
[0034] U dodatnom aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polipeptid koji sadrži SEQ ID NO: 13 ili njegovu varijantu. U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polipeptid koji sadrži SEQ ID NO: 14.
[0035] U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na ABM, koji je sposoban da bude u kompeticiji sa mišjim B-Lyl antitelom za vezivanje za CD20 i koji je himeran. U jednoj varijanti, ABM je antitelo ili njegov fragment. U sledećoj varijanti, ABM je rekombinantno antitelo koje sadrži Vhregion koji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO.: 1; SEQ ID No: 30; SEQ ID No: 32; SEQ ID No: 34; SEQ ID No: 36; SEQ ID No: 38; SEQ ID No: 40; SEQ ID No: 42; SEQ ID No: 44; SEQ ID No: 46; SEQ ID No: 48; SEQ ID No: 50; SEQ ID No: 52; SEQ ID No: 54; SEQ ID No: 56; SEQ ID No: 58; SEQ ID No: 60; SEQ ID No: 62; SEQ ID No: 64; SEQ ID No: 66; SEQ ID No: 68; SEQ ID No: 70; i SEQ ID No: 72. U sledećoj varijanti, ABM je rekombinantno antitelo koje sadrži Vlregion koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je izabrana iz grupe koju čine SEQ ID NO.: 2 i SEQ ID NO: 76. U sledećoj varijanti ABM je rekombinantno antitelo koje je primatizovano. U sledećoj varijanti ABM je rekombinantno antitelo koje je humanizovano. U sledećoj varijanti, ABM je rekombinantno antitelo koje sadrži humani Fc region. U sledećoj varijanti, bilo koji od prethodno razmatranih ABM može biti konjugovan sa grupom kao što je toksin ili radioaktivni obeleživač.
[0036] Izlaganje pronalaska je dalje usmereno na ABM kao što je ovde opisan, pri čemu navedeni ABM ima modifikovane oligosaharide. U jednoj varijanti, modifikovani oligosaharidi imaju sniženu fukozilaciju u poređenju sa ne-modifikovanim oligosaharidima. U drugim varijantama, modifikovani oligosaharidi su hibridni ili složeni. U sledećoj varijanti, ABM ima povećanu proporciju ne-fukozilovanih oligosaharida ili podeljenih na dva jednaka dela, ne-fukozilovanih oligosaharida u Fc regionu navedenog molekula. U jednoj varijanti, podeljeni na dva jednaka dela, ne-fukozilovani oligosaharidi su hibridni. U sledećoj varijanti, podeljeni na dva jednaka dela, ne-fukozilovani oligosaharidi su složeni. U jednoj varijanti, najmanje 20% oligosaharda u Fc regionu navedenog polipeptida su ne-fukozilovani ili podeljeni na dva jednaka dela, ne-fukozilovani. U poželjnijim varijantama, najmanje 30%>, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70% ili 75% ili više oligosaharida su ne-fukozilovani ili podeljeni na dva jednaka dela, ne-fukozilovani.
[0037] Izlaganje pronalaska je dalje usmereno na polinukleotid koji kodira svaki od prethodno razmatranih ABM, i na ekspresione vektore i ćelije koji sadrže takav polinukleotid.
[0038] Izlaganje pronalaska je dalje usmereno na postupak za proizvodnju ABM, koji je sposoban da bude u kompeticiji sa mišjim B-Lyl antitelom za vezivanje za CD20 i pri čemu je navedeni ABM himeran; pri čemu navedeni postupak sadrži: (a) kultivisanje ćelije domaćina koja sadrži polinukleotid koji kodira ABM prema predstavljenom pronalasku u podlozi pod uslovima koji omogućavaju ekspresiju navedenog polinukleotida koji kodira navedeni ABM; i (b) dobijanje navedenog ABM iz dobijene kulture.
[0039] U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži ABM koji je ovde opisan. Razmatrano je da farmaceutska kompozicija može dalje da sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač, adjuvant ili njihovu kombinaciju.
[0040] U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na postupak za lečenje bolesti koja se može lečiti pomoću deplecije B-ćelija. Postupak sadrži primenu terapeutski efikasne količine ABM koji je ovde opisan na humanog subjekta kod koga postoji potreba za tim. U poželjnoj varijanti, bolest se leči primenom ABM koji je himerno antitelo, ili himerni fragment antitela.
[0041] U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na ćeliju domaćina konstruisanu tako da eksprimira najmanje jednu nukleinsku kiselinu koja kodira polipeptid koji ima aktivnost GnTIII u količini koja je dovoljna da se modifikuju oligosaharidi u Fc regionu proizvedenom od strane ćelije domaćina, pri čemu je ABM sposoban da bude u kompeticiji sa mišjim B-Lyl antitelom za vezivanje za CD20 i pri čemu je ABM himeran. U jednoj varijanti, polipeptid koji ima aktivnost GnTIII je fuzioni polipeptid. U sledećoj varijanti, ABM proizveden od strane ćelije domaćina je antitelo ili fragment antitela. U sledećoj varijanti, ABM sadrži region ekvivalentan Fc regionu humanog IgG.
[0042] Izlaganje pronalaska je takođe usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži najmanje jedan region koji određuje komplementarnost mišjeg B-Lyl antitela, ili varijantu ili skraćeni njegov oblik koji sadrži najmanje ostatke koji određuju specifičnost za navedeni region koji određuje komplementarnost, pri čemu izolovani polinukleotid kodira fuzioni polipeptid. Poželjno, takvi izolovani polinukleotidi kodiraju fuzioni polipeptid koji je molekul koji vezuje antigen. U jednoj varijanti, polinukleotid sadrži tri regiona koji određuju komplementarnost mišjeg B-Lyl antitela, ili njihove varijante ili skraćene oblike koji sadrže najmanje ostatake koji određuju specifičnost za svaki od navedena tri regiona koji odeđuju komplementarnost. U sledećoj varijanti, polinukleotid kodira ceo varijabilni region lakog ili teškog lanca himernog (npr., humanizovanog) antitela. Izlaganje pronalaska je dalje usmereno na polipeptide kodirane takvim polinukleotidima.
[0043] U sledećoj varijanti, izlaganje pronalaska je usmereno na molekul koji vezuje antigen koji sadrži najmaje jedan region koji određuje komplementarnost mišjeg BLyl antitela, ili njegovu varijantu ili skraćeni oblik koji sadrži najmanje ostatke koji određuju specifičnost za navedeni region koji određuje komplementarnost, i koji sadrži sekvencu izvedenu iz heterolognog polipeptida. U jednoj varijanti, molekul koji vezuje antigen sadrži tri regiona koji određuju komplementarnost mišjeg B-Lyl antitela, ili njegove varijante ili skraćene oblike koje sadrže najmanje ostatke koji određuju specifičnost za svaki od navedena tri regiona koji određuju komplementarnost. U sledećem aspektu, molekul koji vezuje antigen sadrži varijabilni region lakog ili teškog lanca antitela. U jednoj naročito korisnoj varijanti, molekul koji vezuje antigen je himerno, npr., humanizovano, antitelo. Izlaganje pronalaska je takođe usmereno na postupke za pripremu takvih molekula koji se vezuju za antigen, i na upotrebu istih u lečenju bolesti, uključujući B ćelijske limfome.
[0044] Predstavljeno izlaganje pronalaska je prvi poznati slučaj u kome je tip II anti-CD20 antitelo konstruisano tako da ima povećane efektorne funkcije kao što je ADCC, uz istovremeno održavanje visoke sposobnosti za apoptozu. Prema tome, predstavljeno izlaganje pronalaska je usmereno na konstruisano tip II anti-CD20 antitelo koje ima povećanu ADCC kao rezultat navedenog konstruisanja i bez gubitka značajne sposobnosti da indukuje apoptozu. U jednoj varijanti, tip II anti-CD20 antitela konstruisani su tako da imaju promenjeni obrazac glikozilacije u Fc regionu. U posebnoj varijanti, promenjena glikozilacija sadrži povišeni nivo složenih ostataka podeljenih na dva jednaka dela u Fc regionu. U sledećoj posebnoj varijanti, promenjena glikozilacija sadrži sniženi nivo fukoznih ostataka u Fc regionu. U sledećoj varijanti, tip II anti-CD20 antitela podvrgnuta su polipeptidnom konstruisanju. Izlaganje pronalaska se dalje odnosi na postupke za pripremu takvih konstruisanih antitela tipa II i na postupke za upotrebu takvih antitela u lečenju različitih B ćelijskih poremećaja, uključujući B ćelijske limfome.
[0045] Ćelija domaćin prema predstavljenom pronalasku može biti izabrana iz grupe koja obuhvata, ali bez ograničenja na, CHO ćeliju, BHK ćeliju, NSO ćeliju, SP2/0 ćeliju, YO mijeloma ćeliju, P3X63 ćeliju mišjeg mijeloma, PER ćeliju, PER.C6 ćeliju ili hibridoma ćeliju. U jednoj varijanti, ćelija domaćin prema izlaganju pronalaska dalje sadrži transficirani polinukleotid koji sadrži polinukleotid koji kodira VL region mišjeg B-Lyl antitela ili njegove varijante i sekvencu koja kodira region ekvivalentan Fc regionu humanog imunoglobulina. U sledećoj varijanti, ćelija domaćin prema izlaganju pronalaska dalje sadrži transficirani polinukleotid koji sadrži polinukleotid koji kodira VH region mišjeg B-Lyl antitela ili njegove varijante i sekvencu koja kodira region ekvivalentan Fc regionu humanog imunoglobulina.
[0046] U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na ćeliju domaćina koja proizvodi ABM koji ispoljava povećani afinitet vezivanja za Fc receptor i/ili povećanu efektornu funkciju kao rezultat modifikacije njegovih oligosaharida. U jednoj varijanti, povećani afinitet za vezivanje je za Fc receptor, naročito FcyRIIIA receptor. Efektorna funkcija koja je ovde razmatrana može biti izabrana iz grupe koja obuhvata, ali bez ograničenja na, povećanu Fc-posredovanu ćelijsku citotoksičnost; povećano vezivanje za NK ćelije; povećano vezivanje za makrofage; povećano vezivanje za polimorfonuklearne ćelije; povećano vezivanje za monocite; povećani direktni prenos signala koji indukuje apoptozu; povećano sazrevanje dendritskih ćelija; i povećano prpiremanje T ćelija.
[0047] U sledećoj varijanti, ćelija domaćin prema predstavljenom pronalasku sadrži najmanje jednu nukleinsku kiselinu koja kodira polipeptid koji ima aktivnost GnTIII koji je funkcionalno vezan za konstitutivni promoter element.
[0048] U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na postupak za proizvodnju ABM u ćeliji domaćinu, koji sadrži: (a) kultivisanje ćelije domaćina konstruisane tako da eksprimira najmanje jedan polinukleotid koji kodira fuzioni polipeptid koji ima aktivnost GnTIII pod uslovima koji omogućavaju proizvodnju navedenog ABM i koji omogućavaju modifikaciju oligosaharida prisutnih na Fc regionu navedenog ABM; i (b) izolaciju navedenog ABM; pri čemu je navedeni ABM sposoban da bude u kompeticiji sa mišjim BLyl antitelom za vezivanje za CD20 i pri čemu je navedeni ABM himeran. U jednoj varijanti, polipeptid koji ima aktivnost GnTIII je fuzioni polipeptid, poželjno koji sadrži katalitički domen GnTIII i Goldži lokalizacioni domen heterolognog Goldži rezidentnog polipeptida koji je izabran iz grupe koju čine lokalizacioni domen manozidaze II, lokalizacioni domen (l,2)-N-acetilglukozaminiltransferaze I ("GnTI"), lokalizacioni domen manozidaze I, lokalizacioni domen (3(l,2)-N-acetilglukozaminiltransferaze II ("GnTII") i lokalizacioni domen al-6 fukoziltransferaze. Poželjno, Goldžijev lokalizacioni domen je od manozidaze II ili GnTI.
[0049] U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na postupak za modifikaciju glikozilacionog profila anti-CD20 ABM proizvedenog od strane ćelije domaćina, pri čemu taj postupak sadrži uvođenje u ćeliju domaćina najmanje jedne nukleinske kiseline ili ekspresionog vektora prema pronalasku. U jednoj varijanti, ABM je antitelo ili njegov fragment; poželjno sadrži Fc region IgG. Alternativno, polipeptid je fuzioni protein koji obuhvata region ekvivalentan Fc regionu humanog IgG.
[0050] U jednom aspektu, izlaganje pronalaska se odnosi na rekombinantno, himerno antitelo, ili njegov fragment, sposobno da bude u kompeticiji sa mišjim B-Lyl antitelom za vezivanje za CD20 i koje ima sniženu fukozilaciju.
[0051] U sledećem aspektu, predstavljeno izlaganje pronalaska je usmereno na postupak za modifikaciju glikozilacije rekombinantnog antitela ili njegovog fragmenta prema pronalasku primenom fuzionog polipeptida koji ima aktivnost GnTIII i koji sadrži Goldžijev lokalizacioni domen heterolognog Goldžijevog rezidentnog polipeptida. U jednoj varijanti, fuzioni polipeptidi prema pronalasku sadrže katalitički domen GnTTTT. U sledećoj varijanti, Goldžijev lokalizacioni domen je izabran iz grupe koju čine: lokalizacioni domen manozidaze II, lokalizacioni domen GnTI, lokalizacioni domen manozidaze I, lokalizacioni domen GnTII i lokalizacioni domen al-6 fukoziltransferaze. Poželjno, Goldžijev lokalizacioni domen je od manozidaze II ili GnTI.
[0052] U jednoj varijanti, postupak koji je ovde opisan je usmeren na proizvodnju rekombinantnog, himernog antitela ili njegovog fragmenta, sa modifikovanim oligosaharidima, pri čemu navedeni oligosaharidi imaju sniženu fukozilaciju u poređenju sa ne-modifikovanim oligosaharidima. Prema predstavljenom izlaganju pronalaska, ovi modifikovani oligosaharidi mogu biti hibridni ili složeni. U sledećoj varijanti, postupak koji j eovde opisan je usmeren na proizvodnju rekombinantnog, himernog antitela ili njegovog fragmenta koji ima povećanu proporciju podeljenih na dva jednaka dela, nefukozilovanih oligosaharida u Fc regionu navedenog polipeptida. U jednoj varijanti, podeljeni na dva jednaka dela, nefukozilovani oligosaharidi su hibridni. U sledećoj varijanti, podeljeni na dva jednaka dela, nefukozilovani oligosaharidi su složeni. U sledećoj varijanti, postupak prema pronalasku je usmeren na proizvodnju rekombinantnog, himernog antitela ili njegovog fragmenta koji ima najmanje 20% oligosaharida u Fc regionu navedenog polipeptida koji su podeljeni na dva jednaka dela, nefukozilovani. U poželjnoj varijanti, najmanje 30% oligosaharida u Fc regionu navedenog polipeptida su podeljenih na dva jednaka dela, nefukozilovani. U sledećoj poželjnoj varijanti, najmanje 35% oligosaharida u Fc regionu navedenog polipeptida su podeljeni na dva jednaka dela, nefukozilovani.
[0053] U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na rekombinantno, himerno antitelo ili njegov fragment, koje ispoljava povećani afinitet vezivanja za Fc receptor i/ili povećanu efektornu funkciju kao rezultat modifikacije njegovih oligosaharida. U jednoj varijanti, povećani afinitet vezivanja je za Fc aktivirajući receptor. U sledećoj varijanti, Fc receptor je Fcy aktivirajući receptor, naročito, FcyRIiIA receptor. Efektorna funkcija koja je ovde razmatrana može biti izabrana iz grupe koja obuhvata, ali bez ograničenja na, povećanu Fc-posredovanu ćelijsku citotoksičnost; povećano vezivanje za NK ćelije; povećano vezivanje za makrofage; povećano vezivanje za polimorfonuklearne ćelije; povećano vezivanje za monocite; povećani direktni prenos signala koji indukuje apoptozu; povećano sazrevanje dendritskih ćelija; i povećano pripremanje T ćelija.
[0054] U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska se odnosi na fragment rekombinantnog, himernog antitela, koji ima specifičnost za vezivanje mišjeg B-Lyl antitela i koji sadrži Fc region, koji je konstruisan tako da ima povećanu efektornu funkciju proizvedenu pomoću bilo kog od postupaka prema predstavljenom pronalasku.
[0055] U sledećem aspektu, predstavljeno izlaganje pronalaska je usmereno na fuzioni protein koji obuhvata polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID NO: 1 i region ekvivalentan Fc regionu imunoglobulina i koji je konstruisan tako da ima povećanu efektornu funkciju proizvedenu pomoću bilo kog od postupaka koji su ovde opisani.
[0056] U sledećem aspektu, predstavljeno izlaganje pronalaska je usmereno na fuzioni protein koji obuhvata polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID NO: 2 i region ekvivalentan Fc regionu imunoglobulina i koji je konstruisan tako da ima povećanu efektornu funkciju proizvedenu pomoću bilo kog od postupaka koji su ovde opisani.
[0057] U jednom aspektu, predstavljeno izlaganje pronalaska je usmereno na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži rekombinantno, himerno antitelo, proizvedeno pomoću bilo kog od postupaka prema predstavljenom pronalasku, i farmaceutski prihvatljiv nosač. U sledećem aspektu, predstavljeno izlaganje pronalaska je usmereno na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži fragment rekombinantnog, himernog antitela koji je proizveden pomoću bilo kog od postupaka prema predstavljenom pronalasku, i farmaceutski prihvatljiv nosač. U sledećem aspektu, predstavljeno izlaganje pronalaska je usmereno na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži fuzioni protein proizveden pomoću bilo kog od postupaka koji su ovde opisani, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0058] Izlaganje pronalaska je dalje usmereno na postupak za lečenje bolesti koja se može lečiti pomoću deplecije B-ćelija, koji sadrži primenu terapeutski efikasne količine rekombinantnog, himernog, antitela ili njegovog fragmenta, koji je proizveden pomoću bilo kog od postupaka koji su ovde opisani, na humanog subjekta kod koga postoji potreba za tim.
KRATAK OPIS SLIKA
[0059] SI. 1. Nukleotidna (SEQ ID NO: 3) i aminokiselinska sekvenca (SEQ ID NO: 1) VHregiona mišjeg B-Lyl. SI. 2. Nukleotidna (SEQ ID NO: 4) i aminokiselinska sekvenca (SEQ ID NO: 2) VLregiona mišjeg B-Lyl.
SI. 3. Vezivanje Rituximab® (O) i ch-BLyl (A) za CD20 na Raj i B-limfoma ćelijama.
SI. 4. Deplecija B-ćelija sa Rituximab® (O) i ch-B_Lyl (A) u celoj krvi tri različite klase FcyRIiIa-158V/F genotipa: (A) cela krv od F/F donora, homozigotan za receptor sa nižim afinitetom; u celoj krvi tri različite klase FcyRIIIa-158V/F genotipa: (A) cela krv od F/F donora, homozigotan za receptor sa nižim afinitetom; (B) cela krv od F/V donora, heterozigotan za afinitetni receptor; i (C) cela krv od V/V donora, homozigotan za receptor sa višim afinitetom.
SI. 5. Nukleotidna (SEQ ID NO: 11) i aminokiselinska sekvenca (SEQ ID NO: 13) teškog lanca himernog, anti-CD20 antitela.
SI. 6. Nukleotidna (SEQ ID NO: 12) i aminokiselinska sekvenca (SEQ ID NO: 14) lakog lanca himernog, anti-CD20 antitela.
SI. 7. Nukleotidne i aminokiselinske sekvence CDR regiona mišjeg B-Lyl antitela. (A) Predviđeni CDR regioni za VH region. (B) Predviđeni CDR regioni za VL region.
SI. 8. MALDI-TOF profil gliko-inženjeringom modifikovanog himernog B-Lyl antitela. (A) Tabela u kojoj su detaljno prikazani procenti specifičnog pika; (B) Spektar za gliko-inženjeringom modifikovano himerno B-Lyl; (C) Spektar za gliko-inženjeringom modifikovano himerno B-Lyl tretirano sa Endo-H.
SI. 9. Vezivanje različitih humanizovanih anti-CD20 antitela za Raji B-ćelije. Razlike između BHH2 konstrukta i B-HL8 i B-HL11 konstrukata nalaze se u 1 i 2 okvirnim regionima sa identična sva tri CDR regiona. B-HL8 i B-HL11 imaju svoje FR1 i FR2 sekvence izvedene iz humane VH3 klase, pri čemu je kompletan B-HH2 okvirni region - izveden iz humanog VH1. B-HL11 je derivat B-HL8 sa jednom mutacijom GlulGln, pri čemu je Gin aminokiselinski ostatak u B-HH2 konstruktu. Ovo znači da izmena GlulGln ne menja afinitet ili intenzitet vezivanja. Druge razlike između B-HH2 i B-HL8 su 14 FR ostataka, od kojih će jedan ili više imati uticaja na ponašanje vezivanja antigena ovog antitela.
SI. 10. Vezivanje humanizovanog anti-CD20 antitela BHL4-KV na Raji ciljnim ćelijama. B-HL4 konstrukt je izveden od B-HH2 antitela zamenom FR1 u B-HH2 sa istim humane sekvence germinativne linije VH145. Ovaj konstrukt pokazuje veoma smanjen kapacitet vezivanja antigena, uprkos tome što ima različite aminokiseline na samo tri položaja unutar FR1. Ovi ostaci se nalaze na položajima 2, 14 i 30 prema Kabat numerisanju. Od njih, položaj 30 izgleda da je najuticajniji položaj, s obzirom na to da je on deo Chothia definicije za CDR1.
SI. 11. Poređenje ponašanja vezivanja između B-HH1, B-HH2, B-HH3, i ishodnog antitela B-lyl. Podaci pokazuju da sva Abs pokazuju sličnu EC50 vrednost, ali B-HH1 konstrukt se vezuje sa nižim intenzitetom/stehiometrijom od varijanti B-HH2 i B-HH3. B-HH1 se može razlikovati od B-HH2 i B-HH3 prema njegovim delimično humanim CDR1 i CDR2 regionima (Kabat definicija), kao i Ala/Thr polimorfizmu na položaju 28 (Kabat numerisanje). Ovo ukazuje na to da je položaj 28, kompletan CDR1 i/ili kompletan CDR2 značajan za interakciju antitelo/antigen.
SI. 12. Poređenje B-HL1, B-HH1 i B-ly1 ishodnog antitela. Podaci su pokazali odsustvo bilo kakve aktivnosti vezivanja u B-HL1 konstruktu, i oko polovinu intenziteta vezivanja/stehiometrije B-HH1 u poređenju sa Blyl. I B-HL1, kao i B-HH1, su dizajnirani na osnovu akceptorskih okvirnih regiona izvedenih iz humane VH1 klase. Među drugim razlikama, položaj 71 (Kabat numerisanje) B-HL1 konstrukta je upadljiva razlika, što ukazuje na njegov pretpostavljeni značaj za vezivanje antigena.
SI. 13. Fluorocitometrijska analiza kapaciteta anti-CD20 antitela prema njegovom antigenu. Rezultati su pokazali da B-HL2 i B-HL3 konstrukti ne ispoljavaju aktivnost vezivanja CD-20. SI. 14. Apoptoza anti-CD20 antitela na Z-138 MCL ćelijama.
SI. 15. Apoptoza pomoću anti-CD20 antitela. Opis analize: 5 x 10<5>ćelija/komorici zasejano je u 24-komorne ploče (5 x IO<5>ćelija/ml) u podlozi za kulturu. 10 mg odgovarajućeg Ab, PBS za negativnu kontrolu ili 5 mM kamptotecina (CPT) kao pozitivna kontrola dodato je u komorice. Uzorci su inkubirani o/n (16 časova), obojeni sa AnnV-FITC i analizirani pomoću FACS. Analiza je izvedena u po tri kopije. (<*>): Signal za sam PBS je oduzet (PBS sam je dao 8% i 2% AnnV+ za PREP 1 i Z-138 ćelije redom). Korišćena antitela su: C2B8 (himerna, nisu dobijena gliko-inženjeringom); BHH2-KV1 (humanziovana, nisu dobijena gliko-inženjeringom). Napomena: ova analiza ne obuhvata nikakve dodatne efektorne ćelije, samo ciljne ćelije plus antitelo ili kontrole.
SI. 16. Ubijanje ciljne ćelije od strane anti-CD20 antitela sa imunim efektornim ćelijama. Opis analize: deplecija B-ćelija u normalnoj celoj krvi sa prekonoćnom inkubacijom i analiza za CD 19+/CD3+ pomoću FACS. ADCC primenom PBMCs kao efektora, inkubacija od 4 časa, 25:1 odnos efektornih:ciljnih ćelija, ubijanje ciljnih ćelija mereno pomoću retencije kalceina u odnosu na lizu deterdženta (100%) i u odnosu na lizu bez Ab (0%>). Korišćena antitela: C2B8 (himerno, oblik koji nije dobijen gliko-inženjeringom); BHH2-KVl-wt (humanizovano, oblik koji nije dobijen gliko-inženjeringom BHH2-KV1); BHH2-KV1-GE (humanizovano, oblik dobijen gliko-inženjeringom BHH2-KV1).
SI. 17. MALDI/TOF-MS profil PNGazomF-oslobođenih Fc-oligosaharida nemodifikovanog, koje nije dobijeno gliko-inženjeringom BHH2-KV1 humanizovanog IgGl B-lyl anti-humanog CD20 antitela.
SI. 18. MALDI/TOF-MS profil PNGazomF-oslobođenih Fc-oligosaharida dobijenog gliko-inženjeringom BHH2-KVlgl humanizovanog IgGl B-lyl anti-humanog CD20 antitela. Gliko-inženjering je izveden ko-ekspresijom u ćelijama domaćinima gena antitela i gena koji kodira enzim sa katalitičkom aktivnošću P-l,4-N-acetilglukozaminiltransferaze III (GnT-III). SI. 19. MALDI/TOF-MS profil PNGazomF-oslobođenih Fc-oligosaharida gliko-inženjeringom dobijenog BHH2-KV1g2 humanizovanog TgGI B-ly1 anti-humanog CD20 antitela. Gliko-inženjering je izveden ko-ekspresijom u ćelijama domaćinima gena antitela i gena koji kodiraju enzim sa katalitičkom aktivnošću P-l,4-N-acetilglukozaminiltransferaze III (GnT-III) i koji kodira enzim sa katalitičkom aktivnošću Goldžijeve a-manozidaze II.
SI. 20. Vezivanje antitela koja nisu dobijena gliko-inženjeringom i antitela dobijenih gliko-inženjeringom za humani Fc gama Rllla receptor koji se nalazi na površini rekombinantnih CHO-CD 16 ćelija.
SI. 21. Apoptoza anti-CD20 antitela koja nisu dobijena Fc inženjeringom i onih koja su dobijena Fc inženjeringom na Z-138 MCL ćelijama. Opis analize: 5 x IO<5>ćelija/komorici zasejano je u 24-komorne ploče (5 x 10<5>ćelija/ml) u podlozi za kulturu. 10 mg odgovarajućeg Ab, PBS za negativnu kontrolu dodato je u komorice. Uzorci su inkubirani o/n (16 časova), obojeni sa AnnV-FITC i analizirani pomoću FACS. Analiza je izvedena u tri kopije. Korišćena antitela: C2B8 = rituksimab (himerno, oblik koji nije dobijen gliko-inženjeringom, isti kao komercijalni oblik); BHH2-KV1 (humanizovano, koje nije dobijeno gliko-inženjeringom, videti Sliku 6 za glikozilacioni profil); BHH2-KVlgl (humanizovano, dobijeno gliko-inženjeringom - videti SI. 7 za glikozilacioni profil); BHH2-KVlg2 (humanizovano, dobijeno gliko-inženjeringom - videti SI. 8 za glikozilacioni profil). Napomena: ova analiza ne obuhvata nikakve dodatne efektorne ćelije, samo ciljne ćelije plus antitelo ili kontrole. (<*>): Signal za sam PBS je oduzet.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0060] Termini su ovde orišćeni kao što se generalno koriste u tehnici, osim ukoliko nije drugačije definisano kao što sledi.
[0061] Kao što je ovde korišćen, termin antitelo je određen tako da obuhvata cele molekule antitela, uključujući monoklonalna, poliklonalna i multispecifična antitela (npr., bispecifična) antitela, kao i fragmente antitela koji imaju Fc region i zadržavaju specifičnost vezivanja, i fuzione proteine koji obuhvataju region ekvivalentan Fc regionu imunoglobulina i koji zadržava specifičnost vezivanja. Takođe su obuhvaćena humanizovana, primatizovana i himerna antitela.
[0062] Kao što je ovde korišćen, termin Fc region je određen tako da se odnosi na C-terminalni region teškog lanca IgG. Iako granice Fc regiona teškog lanca IgG mogu malo da variraju, Fc region teškog lanca humanog IgG je obično definisan tako da se proteže od aminokiselinskog ostatka na položaju Cys226 do karboksil-terminusa.
[0063] Kao što je ovde korišćen, termin region ekvivalentan Fc regionu imunoglobulina je određen tako da obuhvata prirodne alelske varijante Fc regiona imunoglobulina kao i varijante koje imaju promene koje proizvode supstitucije, adicije ili delecije, ali koje ne smanjuju značajno sposobnost imunoglobulina da posreduje u efektornim funkcijama (kao što je ćelijska citotoksičnost zavisna od antitela). Na primer, jedna ili više aminokiselina mogu biti deletirane sa N-terminusa ili C-terminusa Fc regiona imunoglobulina bez značajnog gubitka biološke funkcije. Takve varijante mogu biti izabrane prema opštim pravilima poznatim u tehnici tako da imaju minimalan efekat na aktivnost. (Videti, npr., Bowie, J. U. et al., Science 247:1306-10 (1990).
[0064] Kao što je ovde korišćen, termin molekul koji vezuje antigen odnosi se u njegovom širem smislu na molekul koji specifično vezuje antigenu determinantu. Specifičnije, molekul koji vezuje antigen koji vezuje CD20 je molekul koji se specifično vezuje za ne-glikozilovani fosfoprotein od 35,000 Daltona na ćelijskoj površini, tipično označen kao antigen Bp35 specifičan za humane B limfocite, obično označen kao CD20. Termin "specifično vezuje" označava da je vezivanje selektivno za antigen i može se razlikovati od neželjenih ili
nespecifičnih interakcija.
[0065] Kao što su ovde korišćeni, termini fuzioni i himerni, kada se koriste u vezi sa polipeptidima kao što su ABM, označavaju polipeptide koji sadrže aminokiselinske sekvence izvedene od dva ili više heterologna polipeptida, kao što su delovi antitela iz različitih vrsta. Za himerne ABM, na primer, komponente koje vezuju antigen mogu biti izvedene iz širokog opsega vrsta, uključujući primate kao što su šimpanze i ljudi. Konstantni region himernog ABM je najpoželjnije značajno identičan konstantnom regionu prirodnog humanog antitela; promenljivi region himernog antitela je najpoželjnije značajno identičan istom kod rekombinantnog antiCD-20 antitela koje ima aminokiselinsku sekvencu varijabilnog regiona mišjeg B-Lyl. Humanizovana antitela su naročito poželjan oblik fuzionog ili himernog antitela.
[0066] Kao što je ovde korišćen, polipeptid koji ima "aktivnost GnTIII" odnosi se na polipeptide koji su sposobni da katalizuju adiciju N-acetilglukozamin (GlcNAc) ostatka u P-1-4 vezu za P-vezani manozid trimanozil jezgra N-vezanih oligosaharida. Ovo obuhvata fuzione polipeptide koji ispoljavaju enzimsku aktivnost sličnu, ali ne neophodno identičnu, aktivnosti P(l,4)-N-acetilglukozaminiltransferaze III, koja je poznata i kao P-1,4-manozilglikoprotein 4-beta-N-acetilglukozaminil-transferaza (EC 2.4.1.144), prema Nomenclature Committee of the International Union of Biochemistry and Molecular Biology (NC-IUBMB), kao što je mereno u posebnom biološkom testu, sa ili bez zavisnosti od doze. U slučaju gde zavisnost postoji, ona ne mora biti identična onoj kod GnTTTT, već pre značajno slična zavisnosti od doze u datoj aktivnosti u poređenju sa GnTIII (tj., polipeptid kandidat će ispoljavati veću aktivnost ili ne više od oko 25-puta manju i, poželjno, ne više od oko deset puta slabiju aktivnost, i najpoželjnije, ne više od oko tri-puta manju aktivnost u odnosu na GnTIII.)
[0067] Kao što je ovde korišćen, termin varijanta (ili analog) označava polipeptid koji se razlikuje od specifično navedenog polipeptida prema pronalasku prema aminokiseliskim insercijama, delecijama i supstitucijama, stvoren primenom, npr., tehnika rekombinantne DNK. Varijante ABM prema predstavljenom pronalasku obuhvataju himerne, primatizovane ili humanizovane molekule koji vezuju antigen, u kome su jedan ili nekoliko aminokiselinskih ostataka modifikovani supstitucijom, adicijom i/ili delecijom na takav način koji značajno ne utiče na afinitet vezivanja antigena (npr., CD20). Vodič za određivanje koji aminokiselinski ostaci mogu biti zamenjeni, adirani ili deletirani bez poništavanja aktivnosti od interesa, može se naći putem upoređivanja sekvence određenog polipeptida sa istom od homologih peptida i minimizacijom broja promena aminokiselinske sekvence napravljenih u regionima visoke homologije (konzervativni regioni) ili zamenom aminokiselina sa konsenzus sekvencom.
[0068] Alternativno, rekombinantne varijante koje kodiraju ove iste ili slične polipeptide mogu biti sintetisane ili selektovane upotrebom "redundantnosti" u genetičkom kodu. Različite supstitucije kodona, kao što su tihe promene koje proizvode različita restrikciona mesta, mogu biti uvedene da bi se optimizovalo kloniranje u plazmidni ili virusni vektor ili ekspresija u određenom prokariotskom ili eukariotskom sistemu. Mutacije u polinukleotidnoj sekvenci mogu biti reflektovane u polipeptidu ili domenu drugih peptida adiranih polipeptidu da bi se modifikovale osobine bilo kog dela polipeptida, da bi se promenile karakteristike kao što su afiniteti vezivanja Uganda, međulančani afiniteti ili stopa razgradnje/ponovne sinteze.
[0069] Poželjno, aminokiselinske "supstitucije" su rezultat zamene jedne aminokiseline drugom aminokiselinom koja ima slične strukturne i/ili hemijske osobine, tj., konzervativne aminokiselinske zamene. "Konzervativne" aminokiselinske supstitucije mogu se napraviti na osnovu sličnosti u polarnosti, naelektrisanju, rastvori) ivosti, hidrofobnosti, hidrofilnosti i/ili amfipatične prirode uključenih ostataka. Na primer, nepolarne (hidrofobne) aminokiseline obuhvataju alanin, leucin, izoleucin, valin, prolin, fenilalanin, triptofan i metionin; polarne neutralne aminokiseline obuhvataju glicin, serin, treonin, cistein, tirozin, asparagin i glutamin; pozitivno naelektrisane (bazne) aminokiseline obuhvataju arginin, lizin i histidin; i negativno naelektrisane (kisele) aminokiseline obuhvataju asparaginsku kiselinu i glutaminsku kiselinu. "Insercije" ili "delecije" su poželjno u opsegu od oko 1 do 20 aminokiselina, poželjnije 1 do 10 aminokiselina. Dozvoljena varijacija može biti eksperimentalno određena putem sistemskog stvaranja insercija, delecija ili supstitucija aminokiselina u polipeptidnom molekulu primenom tehnika rekombinantne DNK i analiziranjem dobijenih rekombinantnih varijanti za aktivnost.
[0070] Kao što je ovde korišćen, termin humanizovan koristi se za označavanje molekula koji vezuje antigen koji je izveden od ne-humanog molekula koji vezuje antigen, na primer, mišjeg antitela, koji zadržava ili značajno zadržava osobine vezivanja antigena ishodnog molekula, ali koji je manje imunogen kod ljudi. Ovo se može postići različitim postupcima uključujući (a) grafting celokupnih ne-humanih varijabilnih domena na humane konstantne regione da bi se stvorila himerna antitela, (b) grafting samo ne-humanih CDR na humani okvirni region i konstantne regione sa ili bez zadržavanja kritičnih okvirnih ostataka (npr., onih koji su značajni za zadržavanje dobrog afiniteta za antigen ili funkciju antitela), ili (c) transplantaciju celokupnih ne-humanih varijabilnih domena, ali njihovim "ogrtanjem" sa delom koji je sličan humanom, zamenom površinskih ostataka. Takvi postupci su navedeni u Jones et al., Morrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 81:6851-6855 (1984); Morrison and Oi, Adv. Immunol., 44:65-92 (1988); Verhoeven et al, Science, 239:1534-1536 (1988); Padlan, Molec. Immun., 28:489-498 (1991); Padlan, Molec. Immun., 31(3): 169-217 (1994).
[0071] Generalno postoje 3 regiona koji određuju komplementarnost, ili CDR, (CDR1, CDR2 i CDR3) u svakom od varijabilnih regiona teškog i lakog lanca antitela, koji su okruženi sa četiri okvirna pod-regiona (tj., FR1, FR2, FR3 i FR4) u svakom od varijabilnih domena teškog i lakog lanca antitela: FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4. Razmatranje humanizovanih antitela može se naći, pored ostalog, u SAD Patentu br. 6,632,927, i u objavljenoj SAD prijavi br. 2003/0175269.
[0072] Slično, kao što je ovde korišćen, termin primatizovan je korišćen da bi se označio molekul koji vezuje antigen izveden od ne-primatskog molekula koji vezuje antigen, na primer, mišjeg antitela, koji zadržava ili značajno zadržava osobine vezivanja antigena ishodnog molekula, ali koji je manje imunogen kod primata.
[0073] U slučaju gde postoje dve ili više definicija termina koji je korišćen i/ili prihvaćen u tehnici, definicija termina kao što je ovde korišćen je određena tako da obuhvati sva takva značenja, osim ukoliko nije izričito navedeno suprotno. Specifičan primer je primena termina "region koji određuje komplementarnost" ("CDR") da bi se opisala ne-kontinuirana mesta koja vezuju antigen koja se nalaze unutar varijabilnog regiona kako polipeptida teškog tako i lakog lanca. Ovaj određeni region opisali su Kabat et al, U.S. Dept. of Health and Human Services, "Sequences of Proteins of Immunological Interest" (1983) i Chothia et al., J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987), gde definicije oubhvataju preklapajuće ili podgrupe aminokiselinskih ostataka kada se međusobno porede. Ipak, primena svake od definicija da bi se opisao CDR antitela ili njegovih varijanti određen je tako da je unutar obima termina kao što je ovde definisan i korišćen. Odgovarajući aminokiselinski ostaci koji obuhvataju CDR regione kao što su definisani u bilo kom od prethodno navedenih radova, navedeni su u daljem tekstu u Tabeli I kao poređenje. Tačan broj ostataka koji obuhvata određeni CDR variraće u zavisnosti od sekvence i veličine CDR. Stručnjaci iz date oblasti tehnike mogu rutinski da odrede koje ostatke sadrži određeni CDR imajući u vidu aminokiselinsku sekvencu varijabilnog regiona antitela.
[0074] Kabat et al. takođe su definisali sistem numerisanja za sekvence varijabilnog domena koji je primenljiv za svako antitelo. Stručnjaci iz date oblasti tehnike mogu nedvosmisleno da pripišu ovaj sistem "Kabat numerisanju" za svaku sekvencu varijabilnog domena, bez oslanjanja na bilo kakve eksperimentalne rezultate izvan same sekvence. Kao što je ovde korišćen, "Kabat numerisanje" označava sistem numerisanja naveden u Kabat et al., U.S. Dept. of Health and Human Services, "Sequence of Proteins of Immunological Interest"
(1983). Osim ukoliko nije drugačije navedeno, numerisanje specifičnih aminokiselinskih ostataka u ABM u skladu su sa sistemom Kabat numerisanja. Sekvence u listingu sekvenci (tj., SEQ ID NO: 1 do SEQ ID NO: 78) nisu numerisane prema sistemu Kabat numerisanja.
[0075] Nukleinska kiselina ili polinukleotid koji ima nukleinsku sekvencu najmanje, na primer, 95% "identičnu" referentnoj nukleotidnoj sekvenci prema predstavljenom izlaganju pronalaska, određeno je da je nukleotidna sekvenca polinukleotida identična referentnoj sekvenci osim što polinukleotidna sekvenca može da obuhvata do pet tačkastih mutacija na svakih 100 nukleotida referentne nukleotidne sekvence. Drugim rečima, da bi se dobio polinukleotid koji ima nukleotidnu sekvencu najmanje 95% identičnu referentnoj nukleotidnoj sekvenci, do 5% nukleotida u referentnoj sekvenci može biti deletirano ili supstituisano sa drugim nukleotidpm, ili broj nukleotida do 5% ukupnih nukleotida u referentnoj sekvenci može biti inseriran u referentnu sekvencu. Ispitivana sekvenca može biti cela sekvenca prikazana ili na SI. 24 ili na SI. 25.
[0076] Kao što je praktično, da li je bilo koji određeni molekul nukleinske kiseline ili polipeptid najmanje 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% ili 99% identičan nukleotidnoj sekvenci ili polipeptidnoj sekvenci prema predstavljenom izlaganju pronalaska može se odrediti uobičajeno primenom poznatih kompjuterskih programa. Poželjan postupak za određivanje najboljeg ukupnog poklapanja između ispitivane sekvence (sekvenca prema predstavljenom pronalasku) i predmetne sekvence, takođe označeno kao globalno ravnanje sekvence, može biti određen primenom FASTDB kompjuterskog programa na bazi algoritma koji su dali Brutlag et al., Comp. App. Biosci. 6:237-245 (1990). U ravnanju sekvence, ispitivana i predmetna sekvenca obe su DNK sekvence. RNK sekvenca može se upoređivati prevođenjem U u T. Rezultat navedenog globalnog ravnanje sekvence je u procentima identičnosti. Poželjni parametri korišćeni u FASTDB ravnanju DNK sekvenci za izračunavanje procenta identičnosti su: Matrix=Unitary, k-tuple=4, Mismatch Penalty=l, Joining Penalty=30, Randomization Group Length=0, Cutoff Score=l, Gap penalty=5, Gap Siže Penalty 0.05, Window Size=500 ili dužina predmetne nukleotidne sekvence, bilo koja, koja je kraća.
[0077] Ako je predmetna sekvenca kraća od ispitivane sekvence zbog 5' ili 3' delecija, ne zbog unutrašnjih delecija, tada se mora izvršiti manuelna ispravka rezultata. Ovo je zbog toga što FASTDB program ne uračunava 5' i 3' skraćenja predmetne sekvence kada se izračunava procenat identičnosti. Za predmetne sekvence skraćene na 5' ili 3' krajevima, u odnosu na ispitivanu sekvencu, procenat identičnosti je ispravljen izračunavanjem broja baza ispitivane sekvence koje su 5' i 3' od predmetne sekvence, koje se ne poklapaju/nisu poravnate, kao procenat ukupnih baza ispitivane sekvence. Da li se nukleotid poklapa/da li je poravnat određuje se pomoću rezultata poravnavanja FASTDB sekvence. Ovaj procenat zatim se oduzima od procenta identičnosti, izračunatog pomoću prethodno navedenog FASTDB programa primenom određenih parametara, da bi se dobio krajnji rezultat procenta identičnosti. Ovaj ispravljeni rezultat je ono što se koristi za svrhe predstavljenog pronalaska. Samo baze izvan 5' i 3' baza predmetne sekvence, kao što je prikazano pomoću FASTDB poravnavanja, koje se ne poklapaju/nisu poravnate sa ispitivanom sekvencom, izračunate su za svrhe manuelnog podešavanja rezultata procenta identičnosti.
[0078] Na primer, predmetna sekvenca od 90 baza poravnata je sa ispitivanom sekvencom od 100 baza da bi se odredio procenat identičnosti. Delecije se javljaju na 5' kraju predmetne sekvence i prema tome, FASTDB poravnavanje ne pokazuje poklapanje/poravnavanje prvih 10 baza na 5' kraju. 10 nesparenih baza predstavljaju 10% sekvence (broj baza na 5' i 3' krajevima ne poklapa se/ukupan broj baza u ispitivanoj sekvenci) tako da se 10% oduzima od rezultata procenta identičnosti izračunatog pomoću FASTDB programa. Ako se preostalih 90 baza savršeno poklapa, krajnji procenat identičnosti bi bio 90%>. U sledećem primeru, predmetna sekvenca od 90 baza upoređivana je sa ispitivanom sekvencom od 100 baza. Ovoga puta delecije su unutrašnje delecije tako da na 5' ili 3' kraju predmetne sekvence nema baza koje se ne poklapaju/nisu poravnate sa ispitivanom sekvencom. U ovom slučaju, procenat identičnosti izračunat pomoću FASTDB nije manuelno ispravljen. Još jednom, samo baze 5' i 3' predmetne sekvence koje se ne poklapaju/nisu poravnate sa ispitivanom sekvencom manuelno su ispravljene. Nikakve druge manuelne ispravke se ne vrše za svrhe predstavljenog izlaganja pronalaska.
[0079] Polipeptid koji ima aminokiselinsku sekvencu najmanje, na primer, 95% "identičnu" ispitivanoj aminokiselinskoj sekvenci koja je ovde opisana, predstavlja daje aminokiselinska sekvenca predmetnog polipeptida identična ispitivanoj sekvenci, osim što predmetna polipeptidna sekvenca može da obuhvata do pet aminokiselinskih promena na svakih 100 aminokiselina ispitivane aminokiselinske sekvence. Drugim rečima, da bi se dobio polipeptid koji ima aminokiselinsku sekvencu najmanje 95% identičnu ispitivanoj aminokiselinskoj sekvenci, do 5% aminokiselinskih ostataka u predmetnoj sekvenci može biti inserirano, deletirano ili supstituisano sa drugom aminokiselinom. Ove promene referentne sekvence mogu se javiti na amino ili karboksi terminalnim položajima referentne aminokiselinske sekvence ili bilo gde između onih terminalnih položaja, umetnute bilo pojedinačno među ostacima u referentnoj sekvenci ili u jednoj ili više uzastopnih grupa unutar referentne sekvence.
[0080] Kao što je praktično, da li je bilo koji određeni polipeptid najmanje 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% ili 99% identičan referentnom polipeptidu, može se odrediti uobičajeno primenom poznatih kompjuterskih programa. Poželjan postupak za određivanje najboljeg ukupnog poklapanja između ispitivane sekvence (sekvenca prema predstavljenom pronalasku) i predmetne sekvence, takođe određen kao globalno ravnanje sekvence, može se odrediti primenom FASTDB kompjuterskog programa na bazi algoritma koji su dali Brutlag et al., Comp. App. Biosci. 6:237-245 (1990). U poravnanju sekvenci, ispitivana i predmetna sekvenca su ili obe nukleotidne sekvence ili obe aminokiselinske sekvence. Rezultat navedenog globalnog ravnanja sekvence je u procentu identičnosti. Poželjni paramteri korišćeni u FASTDB aminokiselinskom poravnavanju su: Matrix=PAM 0, k-tuple=2, Mismatch Penalty=l, Joining Penalty=20, Randomization Group Length=0, Cutoff Score=l, Window Size=sequence length, Gap Penalty=5, Gap Siže Penalty=0.05, Window Size=500 ili dužina predmetne aminokiselinske sekvence, bilo koja je kraća.
[0081] Ako je predmetna sekvenca kraća od ispitivane sekvence zbog N- ili C-terminalnih delecija, ne zbog unutrašnjih delecija, mora se napraviti manuelna ispravka rezultata. Ovo je zbog toga što FASTDB program ne uračunava N- i C-terminalna skraćenja predmetne sekvence prilikom izračunavanja globalnog procenta identičnosti. Za predmetne sekvence skraćene na N- i C-terminusu, u odnosu na ispitivanu sekvencu, procenat identičnosti je ispravljen izračunavanjem broja ostataka ispitivane sekvence koji su N- i C-terminalni predmetne sekvence, koji se nisu poklopili/ nisu poravnati sa odgovarajućim predmetnim ostatkom, kao procenat ukupnih baza ispitivane sekvence. Da li se ostatak poklapa/da li je poravnat određuje se pomoću rezultata FASTDB poravnanja sekvenci. Ovaj procenat je zatim oduzet od procenta identičnosti, izračunatog pomoću prethodno navedenog FASTDB programa primenom određenih parametara, da bi se dobio krajnji rezultat procenta identičnosti. Ovaj krajnji rezultat procenta identičnosti je ono šta se koristi za svrhe predstavljenog pronalaska. Samo ostaci prema N- i C-terminusima predmetne sekvence, koji se ne poklapaju/nisu poravnati sa ispitivanom sekvencom, razmatraju se za svrhe manuelnog podešavanja rezultata procenta identičnosti. To jest, samo položaji ostataka ispitivane sekvence izvan najdaljih N- i C-terminalnih ostataka predmetne sekvence.
[0082] Na primer, predmetna sekvenca od 90 aminokiselinskih ostataka je poravnata sa ispitivanom sekvencom od 100 ostataka da bi se odredio procenat identičnosti. Delecija se javlja na N-terminusu predmetne sekvence i prema tome, FASTDB poravnanje ne pokazuje poklapanje/poravnanje prvih 10 ostataka na N-terminusu. 10 nesparenih ostataka predstavljaju 10% sekvence (broj ostataka na N- i C- terminusima ne poklapa se/ukupan broj ostataka u ispitivanoj sekvenci), tako da se 10% oduzima od rezultata procenta identičnosti izračunatog pomoću FASTDB programa. Ako se preostalih 90 ostataka savršeno poklapa, krajnji procenat identičnosti bi bio 90%. U sledećem primeru, predmetna sekvenca od 90 ostataka je upoređivana sa ispitivanom sekvencom od 100 ostataka. Ovoga puta, delecije su unutrašnje delecije, tako da nema ostataka na N- ili C-terminusima predmetne sekvence koji se ne poklapaju/nisu izravnati sa ispitivanom sekvencom. U ovom slučaju procenat identičnosti izračunat pomoću FASTDB nije manuelno ispravljen. Još jednom, samo položaji ostataka izvan N- i C-terminalnih krajeva predmetne sekvence, kao što je prikazano u FASTDB poravnanju, koje se ne poklapaju/nisu poravnate sa ispitivanom sekvencom manuelno su ispravljene. Nikakve druge manuelne ispravke nisu potrebne za svrhe predstavljenog pronalaska.
[0083] Kao što je ovde korišćena, nukleinska kiselina koja "hibridizuje pod strogim uslovima" do nukleinsko kiselinske sekvence prema pronalasku, označava polinukleotid koji hibridizuje tokom inkubacije na 42°C preko noći u rastvoru koji sadrži 50% formamida, 5x SSC (750 mM NaCl, 75 mM natrijum citrat), 50 mM natrijum fosfat (pH 7.6), 5x Denhardt-ov rastvor, 10%) dekstran sulfat i 20 mg/ml denaturisane, DNK iz sperme pastrmke, nakon čega sledi
ispiranje filtera u 0.1x SSC na oko 65°C.
[0084] Kao što je ovde korišćen, termin Goldžijev lokalizacioni domen odnosi se na aminokiselinsku sekvencu Goldžijevog rezidentnog polipeptida koji je odgovoran za hvatanje polipeptida na položaj unutar Goldžijevog kompleksa. Generalno, lokalizacioni domeni sadrže amino terminalne "repove" enzima.
[0085] Kao što je ovde korišćen, termin efektorna funkcija označava one biološke aktivnosti koje se mogu pripisati Fc regionu (nativna sekvenca Fc regiona ili aminokiselinska sekvenvca varijante Fc regiona) antitela. Primeri efektornih funkcija antitela obuhvataju, ali bez ograničenja na, afinitet vezivanja za Fc receptor, ćelijska citotoksičnost zavisna od antitela (ADCC), ćelijska fagocitoza zavisna od antitela (ADCP), izlučivanje citokina, unos antigena od strane ćelija koje predstavljaju antigene posredovano preko imunog kompleksa, nishodna regulacija receptora ćelijske površine, itd.
[0086] Kao što su ovde korišćeni, termini konstrukcija, inženjering i glikozilacioni inženjering smatra se da obuhvataju svaku manipualciju glikozilacionog obrasca prirodnog ili rekombinantnog polipeptida ili njegovog fragmenta. Glikozilacioni inženjering obuhvata metabolički inženjering glikozilacione mašinerije ćelije, uključujući genetičke manipulacije puteva sinteze oligosaharida da bi se postigla promenjena glikozilacija glikoproteina eksprimiranog u ćelijama. Pored toga, glikozilacioni inženjering obuhvata efekte mutacija i ćelijske sredine na glikozilaciju.
[0087] Kao što je ovde korišćen, termin ćelija domaćin pokriva svaki tip ćelijskog sistema koji može biti dobijen inženjeringom tako da stvara polipeptide i molekule koji vezuju antigen prema predstavljenom pronalasku. U jednoj varijanti, ćelija domaćin je dobijena inženjeringom da bi se omogućila proizvodnja molekula koji vezuje antigen sa modifikovanim gliko-oblicima. U poželjnoj varijanti, molekul koji vezuje antigen je antitelo, fragment antitela ili fuzioni protein. U određenim varijantama, ćelije domaćini su dalje manipulisane kako bi eksprimirale povišene nivoe jednog ili više polipeptida koji imaju aktivnost GnTIII. Ćelije domaćini obuhvataju kultivisane ćelije, npr., sisarske kultivisane ćelije, kao što su CHO ćelije, BHK ćelije, NS0 ćelije, SP2/0 ćelije, YO mijeloma ćelije, P3X63 ćelije mišjeg mijeloma, PER ćelije, PER.C6 ćelije ili hibridoma ćelije, ćelije kvasca, ćelije insekata i biljne ćelije, da navedeno samo neke od njih, ali takođe i ćelije sadržane unutar transgene životinje, transgene biljke ili kultivisanog biljnog ili životinjskog tkiva.
[0088] Kao što je ovde korišćen, termin ćelijska citotoksičnost posredovana preko Fc obuhvata ćelijsku citotoksičnost zavisnu od antitela i ćelijsku citotoskičnost posredovanu preko rastvorljivog Fc-fuzionog, proteina koji sadrži humani Fc-region: To je imuni mehanizam koji dovodi do lize "ćelija na koje ciljno deluju antitela" pomoću "humanih imunih efektornih ćelija", pri čemu:
[0089] Humane imune efektorne ćelije su populacija leukocita koja ima Fc receptore na svojoj površini preko kojih se vezuju za Fc-region antitela ili Fc-fuzione proteine i izvode efektorne funkcije. Takva populacija može da obuhvata, ali bez ograničenja na, mononuklearne ćelije periferne krvi (PBMC) i/ili ćelije prirodne ubice (NK).
[0090] Ćelije na koje ciljno deluju antitela su ćelije vezane od strane antitela ili Fc-fuzionih proteina. Antitela ili Fc fuzioni proteini vezuju se za ciljne ćelije preko proteinskog dela N-terminalnog prema Fc regionu.
[0091] Kao što je ovde korišćen, termin povećana ćelijska citotoksičnost posredovana preko Fc definisana je ili kao povećanje broja "ćelija na koje ciljno deluju antitela" koje su lizirane u datom vremenu, u datoj koncentraciji antitela, ili Fc-fuzionog proteina, u medijumu koji okružuje ciljne ćelije, pomoću mehanizma ćelijske citotoksičnosti posredovane preko Fc koja je definisana u prethodnom tekstu, i/ili smanjenje koncentracije antitela ili Fc-fuzionog proteina, u medijumu koji okružuje ciljne ćelije, potrebnog da bi se postigla liza datog broja "ćelija na koje ciljno deluju antitela", u datom vremenu, pomoću mehanizma ćelijske citotoskičnosti posredovane preko Fc. Povećanje ćelijske citotoksičnosti posredovane preko Fc je u odnosu na ćelijsku citotoksičnost posredovanu preko istog antitela, ili Fc-fuzionog proteina, proizvedenog iz istog tipa ćelija domaćina, primenom standardnih postupaka proizvodnje, prečišćavanja, formulacije i čuvanja, koji su poznati stručnjacima iz date oblasti tehnike, ali koji nisu proizvedeni od strane ćelija domaćina konstruisanih tako da eksprimiraju glikozilltransferazu GnTIII pomoću postupaka koji su ovde opisani.
[0092] Antitelo koje ima povećanu ćelijsku citotoksičnost zavisnu od antitela (ADCC) predstavlja antitelo, kao što je taj termin ovde definisan, koje ima povećanu ADCC kao što je određeno pomoću bilo kog pogodnog postupka poznatog stručnjacima iz date oblasti tehnike. Jedan prihvaćeniin vitroADCC test je kao što sledi: 1) test koristi ciljne ćelije za koje je poznao da eksprimiraju ciljni antigen koji prepoznaje region antitela koji vezuje antigen; 2) test koristi humane mononuklearne ćelije periferne krvi (PBMCs), izolovane iz krvi po slučajnom izboru izabranog zdravog davaoca, kao efektorne ćelije;
3) test je izveden prema sledećem protokolu:
i) PBMC su izolovane primenom standardnih postupaka centrifugiranja prema gustini i suspendovane su u 5 x IO<6>ćelija/ml u RPMI podlozi za ćelijsku kulturu;
ii) ciljne ćelije su uzgajane pomoću standardnih postupaka kulture tkiva, sakupljene iz faze eksponencijalnog rasta sa vijabilnošću većom od 90%, isprane u RPMI podlozi za ćelijsku kulturu, obeležene sa 100 mikro-kirija<51>Cr, isprane dva puta sa podlogom za ćelijsku kulturu, i resuspendovane u podlozi za ćelijsku kulturu u gustini od IO<5>ćelija/ml;
iii) 100 mikrolitara prethodne krajnje suspenzije ciljnih ćelija prebačeno je u svaku komoricu 96-komorne mikrotitarske ploče;
iv) antitelo je serijski razblaženo od 4000 ng/ml do 0.04 ng/ml u podlozi za ćelijsku kulturu i 50 mikrolitara dobijenih rastvora antitela dodato je u ciljne ćelije u 96-komornoj mikrotitarskoj ploči, izvršeno je testiranje u po tri kopije različitih koncentracija antitela koje pokrivaju ceo opseg koncentracija naveden u prethodnom tekstu;
v) za kontrole sa maksimalnim oslobađanjem (MR), u 3 dodatne komorice u ploči koja sadrži obeležene ciljne ćelije, dodato je 50 mikrolitara 2% (zapr./zapr.) vodenog rastvora ne-jonskog deterdženta (Nonidet, Sigma, St. Louis), umesto rastvora antitela (tačka iv u prethodnom tekstu);
vi) za kontrole sa spontanim oslobađanjem (SR), u 3 dodatne komorice u ploči koja sadrži obeležene ciljne ćelije, dodato je 50 mikrolitara RPMI podloge za ćelijsku kulturu umesto rastvora antitela (tačka iv iz prethodnog teksta);
vii) 96-komorna mikrotitarska ploča zatim je centrifugirana na 50 x g, 1 minut i inkubirana 1 čas na 4°C;
viii) 50 mikrolitara PBMC suspenzije (tačka i iz prethodnog teksta) dodato je u svaku komotricu da bi se dobio odnos efektornih:ciljnih ćelija od 25:1 i ploče su postavljene u inkubator pod atmosferom od 5% CO2na 37°C u trajanju od 4 časa;
ix) supernatant bez ćelija iz svake komorice je sakupljen i eksperimentalno oslobođena radioaktivnost (ER) je kvantitativno određena primenom gama brojača;
x) procenat specifične lize je izračunat za svaku koncentraciju antitela prema formuli (ERMR)/(MR-SR) x 100, gde je ER prosečna kvantitativno određena radioaktivnost (videti tačku ix iz prethodnog teksta) za tu koncentraciju antitela, MR je prosečna kvantitativno određena radioaktivnost (videti tačku ix iz prethodnog teksta) za MR kontrole (videti tačku v iz prethodnog teksta), i SR je prosečna kvantitativno određena radioaktivnost (videti tačku ix iz prethodnog teksta) za SR kontrole (videti tačku vi iz prethodnog teksta);
4) "povećana ADCC" definisana je ili kao povećanje maksimalnog procenta specifične lize zabeležene unutar opsega koncentracija antitela koji je prethodno testiran, i/ili smanjenje koncentracije antitela potrebne da se postigle polovina maksimalnog procenta specifične lize zabeležene unutar opsega koncentracija antitela testiranog u prethodnom tekstu. Povećanje ADCC je u odnosu na ADCC, mereno sa prethodno navedenim testom, posredovano preko istog antitela, proizvedenog od strane istog tipa ćelija domaćina, primenom istih standardnih postupaka proizvodnje, prečišćavanja, formulacije i čuvanja, koji su poznati stručnjacima iz date oblasti tehnike, ali takođe nisu proizvedena od strane ćelija domaćina konstruisanih za prekomernu ekspresiju GnTIII.
[0093] U jednom aspektu, predstavljeno izlaganje pronalaska se odnosi na molekule koji vezuju antigen koji imaju specifičnost vezivanja mišjeg B-Lyl antitela, i na otkriće da se njihova efektorna funkcija može pojačati promenjenom glikozilacijom. U poželjnoj varijanti, izlaganje pronalaska je usmereno na himerno antitelo ili njegov fragment, koji sadrži CDR regione prikazane na Slici 7. Posebno, u poželjnoj varijanti, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži: (a) sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od: SEQ ID NO.: 5, SEQ ID NO.: 6 i SEQ ID NO.: 7. (CDRs VH-i); i (b) sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od: SEQ ID NO.: 21, SEQ ID NO.: 22 i SEQ ID NO.: 23. (CDRs VH-2>; i SEQ ID NO: 24. U sledećoj poželjnoj varijanti, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži SEQ ID NO.: 8, SEQ ID NO.: 9 i SEQ ID NO.: 10. (CDRs VL). U jednoj varijanti, bilo koji od ovih polinukleotida kodira fuzioni polipeptid.
[0094] U sledećoj varijanti, molekul koji vezuje antigen sadrži VH domen mišjeg B-ly1 antitela prikazanog na Slici 1, ili njegovu varijantu; i ne-mišji polipeptid. U sledećoj poželjnoj varijanti, pronalazak je usmeren na molekul koji vezuje antigen i koji sadrži Vldomen mišjeg B-Lyl antitela prikazan na Slici 2, ili njegovu varijantu; i ne-mišji polipeptid.
[0095] U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na molekule koji vezuju antigen i koji sadrže jedan ili više skraćenih CDR regiona BLy-l. Takvi skraćeni CDR regioni sadržaće, minimalno, aminokiselinske ostatke koji određuju specifičnost za dati CDR. "Ostatak koji određuje specifilčnost" označava one ostatke koji su direktno uključeni u interakciju sa antigenom. Uopšteno, samo oko jedna petina do jedna trećina ostataka u datom CDR učestvuju u vezivanju za antigen. Ostaci koji određuju specifičnost u određenom CDR mogu se identifikovati, na primer, izračunavanjem međuatomskih kontakata iz trodimenzionalnog modeliranja i određivanjem varijabilnosti sekvence na datom položaju ostatka u skladu sa postupcima koje su opisali Padlan et al., FASEB J 9(1): 133-139 (1995).
[0096] Prema tome, izlaganje pronalaska je takođe usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži najmanje jedan region koji određuje komplementarnost mišjeg B-Lyl antitela, ili njegovu varijantu ili skraćeni oblik koji sadrži najmanje ostatke koji određuju specifičnost za navedeni region koji određuje komplementarnost, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid kodira fuzioni polipeptid. Poželjno, takvi izolovani polinukleotidi kodiraju fuzioni polipeptid koji je molekul koji vezuje antigen. U jednoj varijanti, polinukleotid sadrži tri regiona koji određuju komplementarnost mišjeg B-Lyl antitela, ili njihove varijante ili skraćene oblike koji sadrže najmanje ostatke koji određuju specifičnost za svaki od navedena tri regiona koji određuju komplementarnost. U sledećoj varijanti, polinukleotid kodira ceo varijabilni region lakog ili teškog lanca himernog (npr., humanizovanog) antitela. Izlaganje pronalaska je dalje usmereno na polipeptide kodirane od strane takvih polinukleotida.
[0097] U sledećoj varijanti, izlaganje pronalaska je usmereno na molekul koji vezuje antigen i koji sadrži najmanje jedan region koji određuje komplementarnost mišjeg B-Lyl antitela, ili njegovu varijantu ili skraćeni oblik koji sadrži najmanje ostatke koji određuju specifičnost za navedeni region koji određuje komplementarnost, i koji sadrži sekvencu izvedenu iz heterolognog polipeptida. U jednoj varijanti, molekul koji vezuje antigen sadrži tri regiona koja određuju komplementarnost mišjeg B-Lyl antitela, ili njihove varijante ili skraćene oblike koji sadrže najmanje ostatke koji određuju komplementarnost za svaki od ova tri regiona koja određuju komplementarnost. U sledećem aspektu, molekul koji vezuje antigen sadrži varijabilni region lakog ili teškog lanca antitela. U jednoj posebno korisnoj varijanti, molekul koji vezuje antigen je himerno, npr., humanizovavano, antitelo. Izlaganje pronalaska je usmereno takođe na postupke za pripremu takvih molekula koji vezuju antigen, i upotrebu istih u lečenju bolesti, uključujući B ćelijske limfome.
[0098] Poznato je da je nekoliko mehanizama uključeno u terapeutsku efikasnost anti-CD20 antitela, uključujući ćelijsku citotoksičnost zavisnu od antitela (ADCC), citotoksičnost zavisna od komplementa (CDC) i indukciju zaustavljanja rasta ili apoptozu. Na primer, većina eksperimentalnih dokaza ukazuje na to da rituksimab funkcioniše preko uobičajenih efektornih mehanizama merenih pomoću CDC i ADCC testova. Slično, pokazano je da je otpornost različitih limfoma ćelija na rituksimabin vivofunkcija njihove osetljivosti na CDCin vitro.Nasuprot tome, način delovanjain vivodrugog antitela koje je odobreno za terapeutsku primenu, B 1, ne zahteva ni komplement ni aktivnost prirodnih ćelija ubica (NK), već je efikasnost BIin vivopre posledica njegove sposobnosti da indukuje potentnu apoptozu.
[0099] Uopšteno, anti-CD20 monoklonalna antitela spadaju u dve posebne kategorije na osnovu njihovog mehanizma delovanja u uništavanju limfoma ćelija. Anti-CD20 antitela tip I primarno koriste komplement da ubiju ciljne ćelije, dok antitela tipa II funkcionišu preko različitih mehanizama, primarno apoptoze. Rituksimab i 1F5 su primeri anti-CD20 antitela tipa I, pri čemu je BI primer antitela tipa II. Videti, npr., Cragg, M.S. and Glennie, M.J., Blood 103(7): 2738-2743 (April 2004); Teeling, J.L. et al., Blood 104(6): 1793-1800 (September 2004).
[0100] Predstavljeno izlaganje pronalaska je prvi poznati slučaj u kome je anti-CD20 antitelo tipa II konstruisano tako da ima povišene efektorne funkcije kao što je ADCC, uz istovremeno održavanje potentne sposobnosti za apoptozu. Prema tome, predstavljeno izlaganje pronalaska je usmereno na konstruisano anti-CD20 antitelo tipa II koje ima ADCC kao rezultat navedenog konstruisanja i bez gubitka značajne sposobnosti da indukuje apoptozu. U jednoj varijanti, anti-CD20 antitela tipa II konstruisana su tako da imaju promenjeni obrazac glikozilacije u Fc regionu. U posebnoj varijanti, promenjena glikozilacija sadrži povišeni nivo složenih ostataka podeljenih na dva jednaka dela u Fc regionu. U sledećoj posebnoj varijanti, promenjena glikozilacija sadrži sniženi nivo fukoznih ostataka u Fc regionu. Videti SAD Pat. prij. obj. br. 2004 0093621 za Shitara et al. U sledećoj varijanti, anti-CD20 antitela tipa II podrvgnuta su polipeptidnom inženjeringu kao što je opisano u SAD Pat. br. 6,737,056 za Presta ili SAD Pat. prij. obj. br. 2004 0185045 (Macrogenics) ili SAD Pat. prij. obj. br. 2004 0132101 (Xencor).
[0101] Izlaganje pronalaska je dalje usmereno na postupke za pripremu takvih konstruisanih antitela tipa II i postupci za primenu takvih antitela u lečenju različitih B ćelijskih poremećaja, uključujući B ćelijske limfome.
[0102] Opisana su himerna mišja/humana antitela. Videti, na primer, Morrison, S. L. et al., PNAS II: 6851-6854 (November 1984); evropska patentna objava br. 173494; Boulianna, G. L, at al., Nature 312:642 (December 1984); Neubeiger, M. S. et al., Nature 314:268 (March 1985); evropska patentna objava br. 125023; Tan et al., J. Immunol. 135:8564 (November 1985); Sun, L. K et al., Hvbridoma 5(1):517 (1986); Sahagan et al., J. Immunol. 137:1066-1074 (1986). Videti uopšteno, Muron, Nature 312:597 (December 1984); Dickson, Genetic Engineering News 5(3) (March 1985); Marx, Science 229:455 (August 1985); i Morrison, Science 229:1202-1207 (September 1985). Robinson et al, u PCT objavi br. WO/88104936 opisuju himerno antitelo sa humanim konstantnim regionom i mišjim varijabilnim regionom, koje ima specifičnost za epitop CD20; mišji deo himernog antitela prema Robinson-ovim referencama izveden je od 2H7 mišjeg monoklonalnog antitela (gama 2b, kapa). Dok se u referenci navodi da je opisano himerno antitelo "primarni kandidat" za lečenje B ćelijskih poremećaja, ova tvrdnja se može posmatrati kao sugestija stručnjacima iz date oblasti tehnike da bi se odredilo da li je ili ne ova sugestija tačna za ovo određeno antitelo, naročito zbog toga što referenci nedostaju bilo koji podaci koji bi podržali tvrdnju terapeutske efikasnosti, i značajno, podaci o upotrebi viših sisara kao što su primati ili ljudi.
[0103] Metodologije za stvaranje himernih antitela su dostupne stručnjacima iz date oblasti tehnike. Na primer, lak i težak lanac mogu biti eksprimirani posebno, primenom, na primer, lakog lanca imunoglobulina i teških lanaca imunoglobulina u posebnim plazmidima, ili na jednom (npr., policistronskom) vektoru. Oni zatim mogu biti prečišćeni i sklopljeniin vitrou kompletna antitela; opisane su metodologije za postizanje takvog sklapanja. Videti, na primer, Scharff, M., Harvev Lectures 69:125 (1974). Takođe su opisaniin vitroreakcioni parametri za formiranje IgG antitela od redukovanih izolovanih lakih i teških lanaca. Videti, na primer, Sears et al., Biochem. 16(9):2016-25 (1977).
[0104] U posebno poželjnoj varijanti, himerni ABM koji je ovde opisan je humanizovano antitelo. Postupci za humanizaciju ne-humanih antitela poznati su u tehnici. Na primer, humanizovani ABM koji su ovde opisani mogu biti pripremljeni prema postupcima iz SAD Pat. br. 5,225,539 za Winter, SAD Pat. br. 6,180,370 za Queen et al, ili SAD Pat. br. 6,632,927 za Adair et al.
[0105] Poželjno, humanizovano antitelo ima jedan ili više aminokiselinskih ostataka uvedenih u sebe iz izvora koji je ne-humani. Ovi ne-humani aminokiselinski ostaci su često označeni kao "uvozni" ostaci, koji su tipično uzeti iz "uvoznog" varijabilnog domena. Humanizacija se može uglavnom izvesti praćenjem postupka koji su dali Winter i saradnici (Jones et al., Nature, 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature, 332:323-327 (1988); Verhoeven et al., Science, 239:1534-1536 (1988)), supstitucijom sekvenci hipervarijabilnog regiona za odgovarajuće sekvence humanog antitela. Prema tome, takva "humanizovana" antitela su himerna antitela (SAD Pat. br. 4,816,567) u kojima je značajno manje od intaktnog humanog varijabilnog domena supstituisano odgovarajućom sekvencom iz ne-humane vrste. U praksi, humanizovana antitela su tipično humana antitela u kojima su neki ostaci hipervarijabilnog regiona i moguće neki FR ostaci supstituisani ostacima iz analognih mesta u glodarskim antitelima. Predmetna humanizovana anti-CD20 antitela će sadržati konstantne regione humanog imunoglobulina.
[0106] Izbor humanih varijabilnih domena, kako lakog tako i teškog lanca, za primenu u pripremi humanizovanih antitela veoma je značajan za redukciju antigenosti. Prema takozvanom postupku "najboljeg uklapanja", sekvenca varijabilnog domena glodarskog antitela ispitivana je u odnosu na celokupnu biblioteku poznatih humanih sekvenci varijabilnog domena. Humana sekvenca koja je najbliža onoj od glodara zatim je prihvaćena kao humani okvirni region (FR) za humanizovano antitelo (Sims et al., J. Immunol., 151:2296
(1993); Chothia et al., J. Mol. Biol., 196:901 (1987)). Sledeći postupak za selekciju humane okvirne sekvence je poređenje sekvence svakog pojedinačnog podregiona celog glodarskog okvirnog (tj., FR1, FR2, FR3 i FR4) ili neke kombinacije pojedinačnih podregiona (npr., FR1 i FR2) sa bibliotekom poznatih humanih sekvenci varijabilnog regiona koja odgovara tom okvirnom podregionu (npr., kao što je određeno prema Kabat numerisanju), i izbor humane sekvence za svaki podregion ili kombinacije koja je najbliža onom od glodara (Leung SAD Patentna prijava, objava br. 2003/0040606A1, objavljena 27.02.2003.). Sledeći postupak koristi određeni okvirni region izveden od konsenzus sekvence svih humanih antitela određene podgrupe lakih ili teških lanaca. Isti okvirni region može se koristiti za nekoliko različitih humanizovanih antitela (Čarter et al, Proc. Natl. Acad Sci. USA, 89:4285 (1992); Presta et al., J. Immunol., 151:2623 (1993)).
[0107] Dalje je značajno da antitela budu humanizovana uz zadržavanje visokog afiniteta za antigen i drugih povoljnih bioloških osobina. Da bi se postigao ovaj cilj, prema poželjnom postupku, humanizovana antitela su pripremljena pomoću postupka analize ishodnih sekvenci i različitih konceptualnih humanizovanih proizvoda upotrebom trodimenzionalnih modela ishodnih i humanizovanih sekvenci. Trodimenzionalni modeli imunoglobulina su obično dostupni i poznati su stručnjacima iz date oblasti tehnike. Dostupni su kompjuterski programi koji ilustruju i prikazuju moguće trodimenzionalne konformacione strukture izabranih imunoglobulinskih sekvenci kandidata. Pregled ovih mogućih struktura omogućava analizu verovatne uloge ostataka u funkcionisanju imunoglobulinske sekvence kandidata, tj., analizu ostataka koji utiču na sposobnost imunoglobulina kandidata da vežu svoj antigen. Na ovaj način, FR ostaci mogu biti izabrani i kombinovani od primajućih i uvoznih sekvenci tako da se postižu željene karakteristike antitela, kao što je povećani afinitet za ciljni antigen(e). Uopšteno, ostaci hipervarijabilnog regiona su direktno i najznačajnije uključeni u delovanje na vezivanje antigena.
[0108] U sledećoj varijanti, molekuli koji vezuju antigen koji su ovde opisani su konstruisani tako da imaju povećani afinitet vezivanja prema, na primer, postupcima koji su navedeni u SAD Pat. Prijavi, objava br. 2004/0132066 za Balint et al.
[0109] U jednoj varijanti, molekul koji vezuje antigen koji je ovde opisan konjugovan je za dodatnu grupu, kao što je radioaktivni obeleživač ili toksin. Takvi konjugovani ABM mogu biti proizvedeni pomoću brojnih postupaka koji su dobro poznati u tehnici.
[0110] Niz različitih radionuklida je primenljiv na predstavljeno izlaganje pronalaska i veruje se da su stručnjaci iz date oblasti tehnike sposobni da jednostavno odrede koji radionuklid je najpogodniji u različitim uslovima. Na primer, 131jod je dobro poznat radionuklid korišćen za ciljanu imunoteraiju. Međutim, klinička upotrebljivost<13>'joda može biti ograničena zbog nekoliko faktora uključujući: fizički polu-život od osam dana; dehalogenacija jodovanog antitela kako u krvi tako i na mestima tumora; i emisione karakteristike (npr., velika gama komponenta) koje mogu biti suboptimalne za lokalizovano deponovanje doze u tumoru. Sa dolaskom boljih helatirajućih sredstava, mogućnost za vezivanje metalnih helatirajućih grupa za proteine povećala je mogućnosti da se koriste drugi radionuklidi kao što je "'indijum i<90>itrijum.<90>Itrijum obezbeđuje nekoliko prednosti za upotrebu u radioimunoterapeutskim primenama: 64-časovni polu-život<90>itrijuma je dovoljno dug da bi se omogućilo nagomilavanje antitela od strane tumora i, za razliku od npr.,<13>'joda,<90>itrijum je čist beta emitor visoke energije bez pratećeg gama zračenja pri njegovom raspadu, sa opsegom u tkivu od 100 do 1000 ćelijskih prečnika. Pored toga, minimalna količina prodirućeg zračenja omogućava primenu na ambulatnog pacijenta antitela obeleženih sa<90>itrijumom. Pored toga, internalizacija obeležog antitela nije potrebna za ubijanje ćelija, i lokalna emisija jonizujućeg zračenja trebalo bi da bude letalna za susedne tumorske ćelije kojima nedostaje ciljni antigen.
[0111] Efikasne pojedinačne doze (tj., terapeutski efikasne količine)<90>itrijumom obeleženih anti-CD20 antitela su u opsegu između oko 5 i oko 75 mCi, poželjnije između oko 10 i oko 40 mCi. Efikasne pojedinačne doze<131>jodoom obeleženih anti-CD20 antitela koje ne oštećuju koštanu srž u opsegu su od između oko 5 i oko 70 mCi, poželjnije između oko 5 i oko 40 mCi. Efikasne pojedinačne doze koje izazivaju oštećenja (tj., mogu zahtevati autolognu transplanataciju koštane srži)<13>'jodom obeleženih anti-CD20 antitela u opsegu su od između oko 30 i oko 600 mCi, poželjnije između oko 50 i manje od oko 500 mCi. Zajedno sa himernim anti-CD20 antitelom, zahvaljujući dužem polu-životu u cirkulaciji u odnosu na mišja antitela, efikasne pojedinačne doze<13>'jodom obeleženih himernih anti-CD20 antitela koja ne oštećuje koštanu srž u oposegu su od između oko 5 i oko 40 mCi, poželjnije manje od oko 30 mCi. Kriterijumi za vizuelizaciju za, npr., '"indijumski obeleživač, tipično su manji od oko 5 mCi.
[0112] Terapija sa radioaktivno obeleženim anti-CD20 antitelima može se takođe odvijati primenom pojedinačnog tretmana ili primenom višestrukih tretmana. Zbog radionuklidne komponente, poželjno je da se pre tretmana, periferne matične ćelije ("PSC") ili koštana srž
("BM") "sakupe" za pacijente koji imaju potencijalno fatalnu toksičnost koštane srži koja je rezultat zračenja. BM i/ili PSC su sakupljeni korišćenjem standardnih tehnika, i zatim prečišćeni i zamrznuti za moguću reinfuziju. Pored toga, najpoželjnije je da se pre tretmana na pacijentu izvede diagnostičko dozimetrijsko ispitivanje primenom dijagnostičkog obeleženog antitela (npr., primenom "'indijuma), čija je svrha da se obezbedi da terapeutski obeleženo
antitelo (npr, primenom<90>itrijuma) neće postati suvišno "koncentrovano" u bilo kom normalnom organu ili tkivu.
[0113] U poželjnoj varijanti, predstavljeno izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja kodira polipeptid koji ima aminokiselinsku sekvencu kao što je prikazana u Tabeli 3 u daljem tekstu. Izlaganje pronalaska je dalje usmereno na izolovanu nukleinsku kiselinu koja sadrži sekvencu koja je najmanje 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% ili 99% identična sa nukleotidnom sekvencom prikazanom u Tabeli 2 u daljem tekstu. U sledećoj varijanti, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovanu nukleinsku kiselinu koja sadrži sekvencu koja kodira polipeotid koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je najmanje 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% ili 99% identična sa aminokiselinskom sekvencom u Tabeli 3. Izlaganje pronalaska takođe obuhvata izolovanu nukleinsku kiselinu koja sadrži sekvencu koja kodira polipeptid koji ima aminokiselinsku sekvencu od bilo kog od konstrukata u Tabeli 3 sa konzervativnim aminokiselinskim supstitucijama.
[0114] U sledećoj poželjnoj varijanti, predstavljeno izlaganje pronalaska je usmereno na izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja kodira polipeptid koji ima aminokiselinsku sekvencu prikazanu na SI. 1 ili SI. 2. Izlaganje pronalaska je dalje usmereno na izolovanu nukleinsku kiselinu koja sadrži sekvencu koja je najmanje 80%, 85%>, 90%, 95%>, 96%, 97%, 98%o ili 99% identična sa nukleotidnom sekvencom prikazanom na SI. 5 ili SI. 6. U sledećoj varijanti, izlaganje pronalaska je usmereno na izolovanu nukleinsku kiselinu koja sadrži sekvencu koja kodira polipeptid koji ima aminokiselinsku sekvencu koja je najmanje 80%), 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% ili 99% identična aminokiselinskoj sekvenci sa SI. 5 ili SI. 6. Izlaganje pronalaska takođe obuhvata izolovanu nukleinsku kiselinu koja sadrži sekvencu koja kodira polipeptid koji ima aminokiselinsku sekvencu prema bilo kojoj od SI. 1, SI. 2, SI.
5 ili SI. 6 sa konzervativnim aminokiselinskim supstitucijama.
[0115] U sledećoj varijanti, predstavljeno izlaganje pronalaska je usmereno na ekspresioni vektor i/ili ćeliju domaćina prema patentnim zahtevima koji obuhvataju jedan ili više izolovanih polinukleotida koji su ovde opisani.
[0116] Uopšteno, bilo koji tip kultivisane ćelijske linije može se koristiti za eksprimiranje ABM prema predstavljenom pronalasku. U poželjnoj varijanti, CHO ćelije, BHK ćelije, NS0 ćelije, SP2/0 ćelije, YO mijeloma ćelije, P3X63 ćelije mišjeg mijeloma, PER ćelije, PER.C6 ćelije ili hibridoma ćelije, druge sisarske ćelije, ćelije kvasca, ćelije insekata ili biljne ćelije koriste se kao osnovna ćelijska linija za stvaranje konstruisanih ćelija domaćina koje su ovde opisane.
[0117] Terapeutska efikasnost ABM koja je opisana ovde može biti pojačana njihovom proizvodnjom u ćeliji domaćinu koja dalje eksprimira polinukleotid koji kodira polipeptid koji ima aktivnost GnTIII. U poželjnoj varijanti, polipeptid koji ima aktivnost GnTIII je fuzioni polipeptid koji sadrži Goldžijev lokalizacioni domen Goldžijevog rezidentnog polipeptida. U sledećoj poželjnoj varijanti, ekspresija ABM prema predstavljenom pronalasku u ćeliji domaćinu koja eksprimira polinukleotid koji kodira polipeptid koji ima aktivnost GnTIII ima za rezultat ABM sa povećanim afinitetom vezivanja za Fc receptor i povećanu efektornu funkciju. Prema tome, u jednoj varijanti, predstavljeno izlaganje pronalaska se odnosi na ćeliju domaćina koja sadrži (a) izolovanu nukleinsku kiselinu koja sadrži sekvencu koja kodira polipeptid koji ima aktivnost GnTIII; i (b) izolovani polinukleotid koji kodira ABM kojije ovde opisan, kao što je himerno ili humanizovano antitelo koje vezuje humani CD20. U poželjnoj varijanti, polipeptid koji ima aktivnost GnTIII je fuzioni polipeptid koji sadrži katalitički domen GnTIII i Goldžijev lokalizacioni domen je lokalizacioni domen manozidaze II. Postupci za stvaranje takvih fuzionih polipeptida i njihova upotreba za proizvodnju antitela sa povećanim efektornim funkcijama, opisani su u SAD privremenoj Pat. Prijavi br. 60/495,142.
[0118] U sledećoj poželjnoj varijanti, himerni ABM je himerno antitelo ili njegov fragment, koji ima specifičnost vezivanja mišjeg B-LY1 antitela. U posebno poželjnoj varijanti, himerno antitelo sadrži humani Fc. U sledećoj poželjnoj varijanti, antitelo je primatizovano ili humanizovano.
[0119] U jednoj varijanti, jedan ili nekoliko polinukleotida koji kodiraju ABM predstavljenog izlaganja pronalaska mogu biti eksprimirani pod kontrolom konstitutivnog promotora ili, alternativno, regulisanog ekspresionog sistema. Pogodni regulisani ekspresioni sistemi obuhvataju, ali bez ograničenja na, ekspresioni sistem regulisan tetraciklinom, ekspresioni sistem koji se može indukovati ekdizonom, ekspresioni sistem sa lac prekidačem, ekspresioni sistem koji se može indukovati glukokortikoidom, sistem promotora koji se može indukovati temperaturom i ekspresioni sistem koji se može indukovati metalotionein metalom. Ako su nekoliko različitih nukleinskih kiselina koje kodiraju ABM koje su ovde opisane sadržane unutar sistema ćelije domaćina, neke od njih mogu biti eksprimirane pod kontrolom konstitutivnog promotora, dok su druge eksprimirane pod kontrolom regulisanog promotora. Maksimalni nivo ekspresije smatra se da je naviši mogući nivo ekspresije stabilnog polipeptida koji nema značajan štetan efekat na stopu ćelijskog rasta, i biće određen primenom rutinskog eksperimentisanja. Nivoi ekspresije su određeni pomoću postupaka koji su generalno poznati u tehnici, uključujući Western blot analizu primenom antitela specifičnog za ABM ili antitela specifičnog za peptidni obeleživač fuzionisan za ABM; i Northern blot analizu. Kao sledeća mogućnost, polinukleotid može biti funkcionalno vezan za reporter gen; nivoi ekspresije himernog ABM koji ima značajno istu specifičnost vezivanja mišjeg B-Lyl antitela određeni su merenjem signala koji je u korelaciji sa nivoom ekspresije reporter gena. Reporter gen može biti transkribovan zajedno sa nukleinskom kiselinom (kiselinama) koje kodiraju navedeni fuzioni polipeptid kao jedan iRNK molekul; njihove odgovarajuće kodirajuće sekvence mogu biti vezane bilo preko unutrašnjeg mesta za vezivanje ribozoma (IRES) ili preko cap-nezavisnog pojačivača translacije (CITE). Reporter gen može biti translatiran zajedno sa najmanje jednom nukleinskom kiselinom koja kodira himerni ABM koji ima značajno istu specifičnost vezivanja mišjeg B-Lyl antitela tako daje formiran jedan polipeptidni lanac. Nukleinske kiseline koje kodiraju AMB opisane ovde mogu biti funkcionalno vezane za reporter gen pod kontrolom jednog promotora, tako da su nukleinska kiselina koja kodira fuzioni polipeptid i reporter gen transkribovani u RNK molekul koji je alternativno splajsovan u dva posebna informaciona RNK (iRNK) molekula; jedan od dobijenih iRNK je translatirana u navedeni reporter protein, i druga je translatirana u navedeni fuzioni polipeptid.
[0120] Postupci koji su dobro poznati stručnjacima iz date oblasti tehnike mogu se koristiti za konstruisanje ekspresionih vektora koji sadrže kodirajuću sekvencu ABM molekula koji ima značajno istu specifičnost vezivanja mišjeg B-Lyl antitela zajedno sa odgovarajućim transkripcionim/translacionim kontrolnim signalima. Ovi postupci obuhvatajuin vitrotehnike rekombinantne DNK, sintetičke tehnike iin vivorekombinaciju/genetičku rekombinaciju. Videti, na primer, tehnike opisane u Maniatis et al., MOLECULAR CLONTNG A LABORATORY MANUAL, Cold Spring Harbor Laboratory, N.Y. (1989) i Ausubel et al., CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY, Greene Publishing Associates and Wiley Interscience, N.Y (1989).
[0121] Niz različitih vektorskih sistema sa ekspresijom u domaćinu može se koristiti za ekspresiju kodirajuće sekvence ABM molekula prema predstavljenom pronalasku. Poželjno, sisarske ćelije se koriste kao sistemi ćelija domaćina transficiranih sa rekombinantnom plazmidnom DNK ili kozmidnim DNK ekspresionim vektorima koji sadrže kodirajuću sekvencu proteina od interesa i kodirajuću sekvencu za fuzione polipeptide. Najpoželjnije, CHO ćelije, BHK ćelije, NSO ćelije, SP2/0 ćelije, YO mijeloma ćelije, P3X63 ćelije mišjeg mijeloma, PER ćelije, PER.C6 ćelije ili hibridoma ćelije, druge sisarske ćelije, ćelije kvasca, ćelije insekata ili biljne ćelije koriste se kao sistem ćelije domaćina. Neki primeri ekspresionih sistema i postupaka za selekciju opisani su u sledećoj literaturi, kao i u literaturi koja je citirana u ovoim radovima: Borth et al., Biotechnol. Bioen. 71(4):266-73 (2000-2001), u Werner et al., Arineimittelforschung/Drug Res. 48(8):870-80 (1998), u Andersen and Krummen, Curr. Op. Biotechnol. 13:117-123 (2002), u Chadd and Chamow, Curr. Op. Biotechnol. 12:188-194 (2001), i u Giddings, Curr. Op. Biotechnol. 12: 450-454 (2001). U alternativnim varijantama, mogu biti razmatrani drugi sistemi eukariotskih ćelija domaćina, uključujući ćelije kvasca transformisane sa rekombinantnim ekspresionim vektorima kvasca koji sadrže kodirajuću sekvencu ABM molekula prema predstavljenom pronalasku; sisteme ćelija insekata inficirane sa rekombinantnim virusnim ekspresionim vektorima (npr., baculovirus) koji sadrži kodirajuću sekvencu himernog ABM koji ima značajno istu specifičnost vezivanja mišjeg B-Lyl antitela; sistemi biljnih ćelija inficirani rekombinantnim virusnim ekspresionim vektorima (npr., mozaični virus karfiola, CaMV; mozaični virus duvana, TMV) ili transformisane sa rekombinantim plazmidnim ekspresionim vektorima (npr., Ti plazmid) koji sadrži kodirajuću sekvencu ABM molekula prema pronalasku; ili sistemi životinjskih ćeija inficiranih rekombinantnim virusnim ekspresionim vektorima (npr., adenovirus, vakcinija virus) uključujući ćelijske linije konstruisane tako da sadrže višestruke kopije DNK koja kodira himerni ABM koji ima značajno istu specifičnost vezivanja mišjeg B-Lyl antitela bilo stabilno amplifikovane (CHO/dhfr) ili nestabilno amplifikovane u „double-minute" hromozomima (npr., mišje ćelijske linije). U jednoj varijanti, vektor koji sadrži polinukleotid (e) koji kodiraju ABM prema izlaganju pronalaska je policistronski. Takođe, u jednoj varijanti ABM koji je razmatran u prethodnom tekstu je antitelo ili njegov fragment. U poželjnoj varijanti, ABM je humanizovano antitelo.
[0122] Za postupke ovog izlaganja pronalaska, stabilna ekspresija je generalno poželjnija od prolazne ekspresije zbog toga što ona tipično postiže rezultate koji su ponovljiviji i takođe je pristupačnija za proizvodnju u velikim razmerama. Pre nego što bi se koristili ekspresioni vektori koji sadrže virusne oridžine replikacije, ćelije domaćini mogu biti transformisane sa odgovarajućim kodirajućim nukleinskim kiselinama kontrolisanim od strane odgovarajućih ekspresionih kontrolnih elemanata (npr., promotorske, pojačivačke sekvence, terminatori transkripcije, poliadenilaciona mesta, itd.), i selektabilni marker. Posle uvođenja strane DNK, konstruisane ćelije mogu biti ostavljene da rastu 1-2 dana u obogaćenoj podlozi, i zatim se prebacuju u selektivnu podlogu. Selektabilni marker u rekombinantnom plazmidu daje otpornost na selekciju i omogućava selekciju ćelija koje su stabilno integrisale plazmid u svoje hromozome i rastu da formiraju fokuse koji će zatim biti klonirani i prošireni u ćelijske linije.
[0123] Moguće je koristiti određeni broj selekcionih sistema, uključujući, ali bez ograničenja na, gene za timidin kinazu herpes simplex virusa (Wigler et al, Cell 11:223 (1977)), hipoksantin-guanin fosforiboziltransferazu (Szybalska & Szybalski, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 48:2026 (1962)), i adenin fosforiboziltransferazu (Lowy et al, Cell 22:817 (1980)), koji se mogu koristiti u tk", hgprt"ili aprt"ćelijama, redom. Takođe, otpornost na antimetabolit može se koristiti kao osnova za selekciju dhfr gena, koji daje otpornost na metotreksat (Wigler et al, Natl. Acad. Sci. USA 77:3567 (1989); O'Hare et al., Proc. Natl. Acad Sci. USA 78:1527 (1981)); gpt gena, koji daje otpornost na mikofenolnu kiselinu (Mulligan & Berg, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:2072 (1981)); neo gena, koji daje otpornost na aminoglikozid G-418 (Colberre-Garapin et al., J. Mol. Biol. 150:1 (1981)); i hygro gena, koji daje otpornost na higromicin (Santerre et al., Gene 30:147 (1984). Nedavno, opisani su dodatni selektabilni geni, i to trpB, koji omogućava ćelijama da koriste indol umesto triptofana; hisD, koji omogućava ćelijama da koriste histinol umesto histidina (Hartman & Mulligan, Proc. Natl. Acad Sci.USA85:8047 (1988)); sistem glutamin sintaze; i ODC (ornitin dekarboksilaza) koja daje otpornost na inhibitor ornitin dekarboksilaze, 2-(difluorometil)-DL-ornitin, DFMO (McConlogue, in: Current Communications in Molecular Biology, Cold Spring Harbor Laboratory ed. (1987)).
[0124] Predstavljeno izlaganje pronalaska se dalje odnosi na postupak za modifikaciju glikozilacionog profila ABM molekula koji su ovde opisani koje je proizvela ćelija domaćin, koji sadrži ekspresiju u navedenoj ćeliji domaćinu nukleinske kiseline koja kodira ABM prema izlaganju pronalaska i nukleinske kiseline koja kodira polipeptid sa aktivnošću GnTIII, ili vektor koji sadrži takve nukleinske kiseline. Poželjno, modifikovani polipeptid je IgG ili njegov fragment koji sadrži Fc region. U posebno poželjnoj varijanti ABM je humanizovano antitelo ili njegov fragment.
[0125] Modifikovani ABM molekuli proizvedeni od strane ćelije domaćina prema pronalasku ispoljavaju povećani afinitet vezivanja za Fc receptor i/ili povećanu efektornu funkciju kao rezultat modifikacije. U posebno poželjnoj varijanti, ABM je humanizovano antitelo ili njegov fragment koji sadrži Fc region. Poželjno, povećani afinitet vezivanja za Fc receptor je povećano vezivanje za Fc aktivirajući receptor, kao što je FcyRIIIa receptor. Povećana efektorna funkcija je poželjno povećanje u jednom ili u više od sledećih: povećana ćelijska citotoksičnost zavisna od antitela, povećana ćelijska fagocitoza zavisna od antitela (ADCP), povećano izlučivanje citokina, povećani unos antigena u ćelije koje prikazuju antigen koje je posredovano preko imunog kompleksa, povećana ćelijska citotoksičnost posredovana preko Fc, povećano vezivanje za NK ćelije, povećano vezivanje za makrofage, povećano vezivanje za polimorfonuklearne ćelije (PMN), povećano vezivanje za monocite, povećano unakrsno vezivanje antitela vezanih za ciljno mesto, povećani direktni prenos signala koji indukuje apoptozu, povećano sazrevanje dendritskih ćelija i povećano pripremanje T ćelija.
[0126] Predstavljeno izlaganje pronalaska je takođe usmereno na postupak za proizvodnju ABM opisan ovde, koji ima modifikovane oligosaharide u ćeliji domaćinu, koji sadrži (a) kultivisanje ćelije domaćina koja je konstruisana da eksprimira najmanje jednu nukleinsku kiselinu koja kodira polipeptid koji ima aktivnost GnTIII pod uslovima koji omogućavaju proizvodnju ABM prema predstavljenom izlaganju pronalaska, pri čemu je navedeni polipeptid koji ima aktivnost GnTIII eksprimiran u količini koja je dovoljna da modifikuje oligosaharide u Fc regionu navedenog ABM proizvedenog od strane navedene ćelije domaćina; i (b) izolaciju navedenog ABM. U poželjnoj varijanti, polipeptid koji ima aktivnost GnTIII je fuzioni polipeptid koji sadrži katalitički domen GnTIII. U posebno poželjnoj varijanti, fuzioni polipeotid dalje sadrži Goldžijev lokalizacioni domen Goldžijevog rezidentnog polipeptida.
[0127] Poželjno, Goldžijev lokalizacioni domen je lokalizacioni domen manozidaze II ili GnTI. Alternativno, Goldžijev lokalizacioni domen je izabran iz grupe koju čine: lokalizacioni domen manozidaze I, lokalizacioni domen GnTII i lokalizacioni domen al-6 fukoziltransferaze. ABM molekuli proizvedeni pomoću postupaka koji su ovde opisani imaju povećani afinitet vezivanja Fc receptora i/ili povećanu efektornu funkciju. Poželjno, povećana efektorna funkcija je jedno ili više od sledećih: povećana ćelijska citotoksičnost posredovana preko Fc (uključujući povećanu ćelijsku citotoksičnost zavisnu od antitela), povećana ćelijska fagocitoza zavisna od antitela (ADCP), povećano izlučivanje citokina, povećani unos antigena u ćelije koje prikazuju antigen koje je posredovano preko imunog kompleksa, povećano vezivanje za NK ćelije, povećano vezivanje za makrofage, povećano vezivanje za monocite, povećano vezivanje za polimorfonuklearne ćelije, povećani direktni prenos signala koji indukuje apoptozu, povećano unakrsno vezivanje antitela vezanih za ciljno mesto, povećano sazrevanje dendritskih ćelija ili povećano pripremanje T ćelija. Povećani afinitet vezivanja Fc receptora je poželjno povećano vezivanje za Fc aktivirajuće receptore kao što je Fc RlHa. U posebno poželjnoj varijanti, ABM je humanizovano antitelo ili njegov fragment.
[0128] U sledećoj varijanti, predstavljeno izlaganje pronalaska je usmereno na himerni ABM koji ima značajno istu specifičnost vezivanja mišjeg B-Lyl antitela proizvedenog pomoću postupaka koji su ovde opisani koji ima povećanu proporciju oligosaharida podeljenih na dva jednaka dela u Fc regionu navedenog polipeptida. Razmatrano je da takav ABM obuhvata antitela i njihove fragmente koji sadrže Fc region. U poželjnoj varijanti, ABM je humanizovano antitelo. U jednoj varijanti, procenat oligosaharida podeljenih na dva jednaka dela u Fc regionu ABM molekula je najmanje 50%, poželjnije, najmanje 60%>, najmanje 70%, najmanje 80%>, ili najmanje 90%, i najpoželjnije najmanje 90-95% ukupnih oligosaharida. U sledećoj varijanti, ABM proizveden pomoću postupaka koji su ovde opisani ima povećanu proporciju nefukozilovanih oligosaharida u Fc regionu kao rezultat modifikacije njegovih oligosaharida pomoću postupaka koji su ovde opisani. U jednoj varijanti, procenat nefukozilovanih oligosaharida je najmanje 50%, poželjno, najmanje 60% do 70%, najpoželjnije najmanje 75%. Nefukozilovani oligosaharidi mogu biti hibridnog ili složenog tipa. U posebno poželjnoj varijanti, ABM proizveden od strane ćelija domaćina i postupaka koji su ovde opisani ima povećanu proporciju na dva jednaka dela podeljenih, nefukozilovanih oligosaharida u Fc regionu. Na dva jednaka dela podeljeni, nefukozilovani oligosaharidi mogu biti hibridni ili složeni. Naročito, postupci koji su ovde opisani mogu se koristiti za proizvodnju ABM molekula u kojima je najmanje 15%, poželjnije najmanje 20%>, poželjnije najmanje 25%, poželjnije najmanje 30%, poželjnije najmanje 35% oligosaharida u Fc regionu ABM molekula podeljeno na dva jednaka dela, nefukozilovano. Postupci koji su ovde opisani takođe se mogu koristiti za proizvodnju polipeptida u kojima je najmanje 15%, poželjnije najmanje 20%, poželjnije najmanje 25%, poželjnije najmanje 30%, poželjnije najmanje 35% oligosaharida u Fc regionu polipeptida podeljeno na dva jednaka dela hibridno nefukozilovano.
[0129] U sledećoj varijanti, predstavljeno izlaganje pronalaska je usmereno na himerni ABM koji ima značajno istu specifičnost vezivanja mišjeg B-Lyl antitela konstruisanog tako da ima povećanu efektornu funkciju i/ili povećani afinitet vezivanja Fc receptora, proizveden pomoću postupaka koji su ovde opisani. Poželjno, povećana efektorna funkcija je jedna ili više od sledećih: povećana ćelijska citotoksičnost posredovana preko Fc (uključujući povećanu ćelijsku citotoksičnost zavisnu od antitela), povećanu ćelijsku fagocitozu zavisnu od antitela (ADCP), povećano izlučivanje citokina, povećani unos antigena od strane ćelija koje prikazuju antigen koje je posredovano preko imunog kompleksa, povećano vezivanje za NK ćelije, povećano vezivanje za makrofage, povećano vezivanje za monocite, povećano vezivanje za polimorfonuklearne ćelije, povećani direktni prenos signala koji indukuje apoptozu, povećano unarsno vezivanje antitela koja su vezana za ciljno mesto, povećano sazrevanje dendritskih ćelija ili povećano pripremanje T ćelija. U poželjnoj varijanti, povećani afinitet vezivanja Fc receptora je povećano vezivanje za Fc aktivirajući receptor, najpoželjnije Fc Rllla. U jednoj varijanti, ABM je antitelo, fragment antitela koji sadrži Fc region, ili fuzioni protein koji obuhvata region ekvivalentan Fc regionu imunoglobulina. U posebno poželjnoj varijanti, ABM je humanizovano antitelo.
[0130] Predstavljeno izlaganje pronalaska je dalje usmereno na farmaceutske kompozicije koje sadrže ABM molekule koji su ovde opisani i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0131] Predstavljeno izlaganje pronalaska je dalje usmereno na primenu takvih farmaceutskih kompozicija u postupku za lečenje kancera. Naročito, predstavljeno izlaganje pronalaska je usmereno na postupak za lečenje kancera koji sadrži primenu terapeutski efikasne količine farmaceutske kompozicije koje su ovde opisane.
[0132] Predstavljeno izlaganje pronalaska dalje daje postupke za stvaranje i primenu sistema ćelija domaćina za proizvodnju gliko-formi ABM molekula koji su ovde opisani, koji imaju povećani afinitet vezivanja za Fc receptor, poželjno povećano vezivanje za Fc aktivirajuće receptore, i/ili koji imaju povećane efektorne funkcije, uključujući ćelijsku citotoksičnost zavisnu od antitela. Metodologija gliko-inženjeringa koja se može koristiti sa ABM molekulima koji su ovde opisani detaljnije je opisana u SAD Pat. br. 6,602,684 i privremenoj SAD Patentnoj prijavi br. 60/441,307 i WO 2004/065540. ABM molekuli prema predstavljenom izlaganju pronalaska mogu alternativno biti konstruisani gliko-inženjeringom da bi se redukovali fukozni ostaci u Fc regionu prema tehnikama navedenim u EP 1 176 195 Al.
Stvaranje ćelijskih linija za proizvodnju proteina sa promenjenim glikozilacionim obrascem
[0133] Predstavljeno izlaganje pronalaska daje ekspresione sisteme ćelija domaćina za stvaranje ABM molekula opisanih ovde koji imaju modifikovane glikozilacione obrasce. Naročito, predstavljeno izlaganje pronalaska daje sisteme ćelija domaćina za stvaranje gliko-formi ABM molekula koji su ovde opisani, koje imaju poboljšanu terapeutsku vrednost. Prema tome, izlaganje pronalaska opisuje ekspresione sisteme ćelija domaćina selekcionisane ili konstruisane da eksprimiraju polipeptid koji ima aktivnost GnTIII. U jednoj varijanti, polipeptid koji ima aktivnost GnTIII je fuzionisani polipeptid koji sadrži Goldžijev lokalizacioni domen heterolognog Goldžijevog rezidentnog polipeptida. Naročito, takvi ekspresioni sistemi ćelija domaćina mogu biti konstruisani tako da sadrže rekombinantni molekul nukleinske kiseline koji kodira polipeptida koji ima GnTIII, funkcionalno vezan za konstitutivni ili regulisani promotorski sistem.
[0134] U jednoj posebnoj varijanti, predstavljeno izlaganje pronalaska daje ćeliju domaćina koja je konstruisana da eksprimira najmanje jednu nukleinsku kiselinu koja kodira fuzioni polipeptid koji ima aktivnost GnTIII i koji sadrži Goldžijev lokalizacioni domen heterolognog Goldžijevog rezidentnog polipeptida. U jednom aspektu, ćelija domaćin je konstruisana sa molekulom nukleinske kiseline koji sadrži najmanje jedan gen koji kodira fuzioni polipeptid koji ima aktivnost GnTIII i koji sadrži Goldžijev lokalizacioni domen heterolognog
Goldžijevog rezidentnog polipeptida.
[0135] Generalno, bilo koji tip kultivisane ćelijske linije, uključujući ćelijske linije razmatrane u prethodnom tekstu, mogu se koristiti kao osnova za konstruisanje domaćinskih ćelijskih linija koje su ovde opisane. U poželjnoj varijanti, CHO ćelije, BHK ćelije, NSO ćelije, SP2/0 ćelije, YO mijeloma ćelije, P3X63 ćelije mišjeg mijeloma, PER ćelije, PER.C6 ćelije ili hibridoma ćelije, druge sisarske ćelije, ćelije kvasca, ćelije insekata ili biljne ćelije koriste se kao osnovna ćelijska linija za stvaranje konstruisanih ćelija domaćina koje su ovde opisane.
[0136] Izlaganje pronalaska je određeno tako da obuhvata sve konstruisane ćelije domaćine koje eksprimiraju polipeptid koji ima aktivnost GnTIII, uključujući fuzioni polipeptid koji sadrži Goldžijev lokalizacioni domen heterolognog Goldžijevog rezidentnog polipeptida kao što je ovde definisan.
[0137] Jedna ili nekoliko nukleinskih kiselina koje kodiraju polipeptid koji ima aktivnost GnTIII mogu biti eksprimirane pod kontrolom konstitutivnog promotora ili, alternativno, regulisanog ekspresionog sistema. Takvi sistemi su dobro poznati u tehnici, i obuhvataju sisteme koji su razmatrani u prethodnom tekstu. Ako su nekoliko različitih nukleinskih kiselina koje kodiraju polipeptide koji imaju aktivnost GnTIII i koji sadrže Goldžijev lokalizacioni domen heterolognog Goldžijevog rezidentnog polipeptida, sadržani unutar sistema ćelije domaćina, neki od njih mogu biti eksprimirani pod kontrolom konstitutivnog promotora, dok su drugi eksprimirani pod kontrolom regulisanog promotora. Nivoi ekspresije fuzionih polipeptida koji imaju aktivnost GnTTTI određuju se pomoću postupaka koji su generalno poznati u tehnici, uključujući Western blot analizu, Northern blot analizu, ekspresionu analizu reporter gena ili merenje aktivnosti GnTIII. Alternativno, može se koristiti lektin koji se vezuje za biosintetičke proizvode GnTIII, na primer, E4-PHA lectin. Alternativno, može se koristiti funkcionalni test koji meri povećano vezivanje za Fc receptor ili povećanu efektornu funkciju posredovanu preko antitela proizvedenih od strane ćelija koje su konstruisane sa nukleinskom kiselinom koja kodira polipeptid sa aktivnošću GnTIII.
Identifikacija transfektanata ili transformanata koji eksprimiraju protein koji ima modifikovani obrazac glikozilacije
[0138] Ćelije domaćini koje sadrže kodirajuću sekvencu himernog ABM koji ima značajno istu specifičnost vezivanja mišjeg B-Lyl antitela i koje eksprimiraju biološki aktivne genske proizvode mogu biti identifikovane pomoću najmanje četiri opšta pristupa; (a) DNK-DNK ili DNK-RNK hibridizacija; (b) prisustvo ili odsustvo funkcija "marker" gena; (c) procena nivoa transkripcije kao što je mereno preko ekspresije odgovarajućih iRNK transkripata u ćeliji domaćinu; i (d) detekcija genskog proizvoda kao što je mereno pomoću imunološkog testa ili preko njegove biološke aktivnosti.
[0139] U prvom pristupu, prisustvo kodirajuće sekvence himernog ABM koji ima značajno istu specifičnost vezivanja mišjeg B-Lyl antitela i kodirajuću sekvencu polipeptida koji ima aktivnost GnTIII, može biti detektovano putem DNK-DNK ili DNK-RNK hibridizacije primenom proba koje sadrže nukleotidne sekvence koje su homologe odgovarajućim kodirajućim sekvencama, redom, ili njihovim delovima ili derivatima.
[0140] U drugom pristupu, rekombinantni ekspresioni vektor/sistem domaćina može biti identifikovan i izabran na osnovu prisustva ili odsustva određenih funkcija "marker" gena (npr., aktivnost timidin kinaze, otpornost na antibiotike, otpornost na metotreksat, transformacioni fenotip, formiranje okluzionih tela kod baculovirusa, itd.). Na primer, ako su kodirajuća sekvenca ABM molekula koji su ovde opisani, ili njen fragment, i kodirajuća sekvenca polipeptida koji ima aktivnost GnTIII, inserirani unutar sekvence marker gena vektora, rekombinanti koji sadrže odgovarajuće kodirajuće sekvence mogu biti identifikovani prema odsustvu funkcije marker gena. Alternativno, marker gen može biti postavljen u tandemu sa kodirajućim sekvencama pod kontrolu istog ili različitog promotora koji se koristi za kontrolu ekspresije kodirajućih sekvenci. Ekspresija markera kao odgovor na indukciju ili selekciju ukazuje na ekspresiju kodirajuće sekvence ABM molekula koji su ovde opisani i kodirajuće sekvence polipeptida koji ima aktivnost GnTTTT.
[0141] U trećem pristupu, transkripciona aktivnost za kodirajući region ABM molekula prema pronalasku, ili njegov fragment, i kodirajuća sekvenca polipeptida koji ima aktivnost GnTIII, može biti određena hibridizacionim testovima. Na primer, RNK može biti izolovana i analizirana pomoću Northern blot-a korišćenjem probe koja je homologa kodirajućim sekvencama ABM molekula koji su ovde opisani, ili njihovom fragmentu, i kodirajućim sekvencama polipeptida koji ima aktivnost GnTIII ili njegovim određenim delovima. Alternativno, ukupne nukleinske kiseline ćelije domaćina mogu biti ekstrahovane i analizirane za hibridizaciju sa takvim probama.
[0142] U četvrtom pristupu, ekspresija proteinskih proizvoda može biti određena imunološki, na primer pomoću Western blot-a, imunoloških testova kao što su radioimuno-precipitacija ili enzim-vezani imunološki testovi. Poslednji test koji je uspešan kod ekspresionog sistema, međutim, obuhvata detekciju biološki aktivnih genskih proizvoda.
Stvaranje i primena ABM molekula koji imaju povećanu efektornu funkciju uključujući
ćelijsku citotoksičnost zavisnu od antitela
[0143] U poželjnim varijantama, predstavljeno izlaganje pronalaska daje gliko-forme himernih ABM molekula koji imaju značajno istu specifičnost vezivanja mišjeg B-Lyl antitela i koji imaju povećanu efektornu funkciju uključujući ćelijsku citotoksičnost zavisnu od antitela. Glikozilacioni inženjering antitela opisan je ranije. (Videti, npr., SAD Patent br. 6,602,684).
[0144] Klinička ispitivanja nekonjugovanih monoklonalnih antitela (mAbs) za lečenje nekih tipova kancera nedavno su dala ohrabrujuće rezultate. Dillman, Cancer Biother. & Radiopharm. 12:223-25 (1997); Deo et al, Immunology Today 18:127 (1997). Himerni, nekonjugovani IgGl odobren je za folikularni ili nižeg stadijuma B-ćelijski ne-Hočkin-ov limfom. Dillman, Cancer Biother. & Radiopharm. 12:223-25 (1997), dok drugo nekonjugovano mAb, humanizovani IgGl koje ciljno deluju na solidne tumore dojke, takođe pokazuje perspektivne rezultate u kliničkim ispitivanje faze III. Deo et al., Immunology Today 18:127 (1997). Antigeni ova dva mAb visoko su eksprimirani u njihovim odgovarajućim ćelijama tumora i antitela posreduju potentno uništavanje tumora preko efektornih ćelijain vitroiin vivo.Nasuprot tome, mnoga druga nekonjugovana mAb sa finim tumorskim specifilnostima ne mogu da pokrenu efektorne funkcije dovoljne potencije da bi bila klinički korisna. Frost et al., Cancer 80:317-33 (1997); Surfus et al, J. Immunother. 19:184-91 (1996). Za neka od ovih slabijih mAb, trenutno se testira dodatna terapija citokinima. Dodavanje citokina može da stimuliše ćelijsku citotoksičnost zavisnu od antitela (ADCC) povećanjem aktivnosti i broja limfocita u cirkulaciji. Frost et al., Cancer 80:317-33
(1997); Surfus et al, J. Immunother. 19:184-91 (1996). ADCC, litički napad na ćelije na koje ciljno deluje antitelo, pokrenut je usled vezivanja leukocitnih receptora za konstantni region (Fc) antitela. Deo et al., Immunology Today 18:127 (1997).
[0145] Drugačiji, ali komplementaran, pristup za povećanje ADCC aktivnosti nekonjugovanih IgGl je konstrukcija Fc regiona antitela. Studije konstrukcije proteina pokazale su da FcyRs interaguje sa nižim zglobnim regionom IgG CH2 domena. Lund et al., J. Immunol. 157:4963-69 (1996). Međutim, vezivanje FcyR takođe zahteva prisustvo oligosaharida kovalentno vezanih na konzervativnom Asn 297 u CH2 regionu. Lund et al., Immunol. 157:4963-69 (1996); Wright and Morrison, Trends Biotech. 15:26-31 (1997), što sugeriše da i oligosaharid i polipeptid direktno doprinose mestu interakcije ili da je oligosaharid potreban za održavanje aktivne konformacije CH2 polipeptida. Modifikacija oligosaharidne strukture može se prema tome ispitati kao sredstvo za povećanje afiniteta
interakcije.
[0146] IgG molekul nosi dva N-vezana oligosaharida u svom Fc regionu, po jedan na svakom teškom lancu. Kao svaki glikoprotein, antitelo je proizvedeno kao populacija gliko-formi koje dele isti polipeptidni osnovni lanac, ali imaju različite oligosaharide vezane za glikozilaciona mesta. Oligosaharidi koji se normalno nalaze u Fc regionu serumskog IgG su složenog biantenalnog tipa (Wormald et al., Biochemistrv 36:130-38 (1997), sa niskim nivoom terminalne sialinske kiseline i N-acetilglukozamina (GlcNAc) podeljena na dva jednaka dela, i promenljivim stepenom terminalne galaktozilacije i fukozilacije jezgra. Izvesne studije sugerišu da minimalna ugljenohidratna struktura koja je potrebna za FcyR vezivanje leži unutar oligosaharidnog jezgra. Lund et al., J. Immunol. 157:4963-69 (1996).
[0147] Ćelijske linije izvedene iz miša ili hrčka koje se koriste u industriji i nauci za proizvodnju nekonjugovanih terapeutskih mAb, normalno vezuju potrebne oligosaharidne determinante za Fc mesta. IgG koji su eksprimirani u ovim ćelijskim linijama nemaju, međutim, GlcNAc podeljen na dva jednaka dela, koji se nalazi u malim količinama u serumskim IgG. Lifelv et al., Glycobiology 318:813-22 (1995). Nasuprot tome, nedavno je zabeleženo da humanizovani IgGl (CAMPATH-1H) proizveden iz mijeloma pacova nosi GlcNAc podeljen na dva jednaka dela u nekim od njegovih gliko-formi. Lifely et al., Glycobiology 318:813-22 (1995). Antitelo izvedeno iz ćelija pacova dostiglo je sličnu maksimalnuin vitroADCC aktivnost kao CAMPATH-1H antitela proizvedena u standardnim ćelijskim linijama, ali na značajno nižim koncentracijama antitela.
[0148] CAMPATH antigen je normalno prisutan na visokim nivoima na ćelijama limfoma, i njegovo himerno mAb ima visoku ADCC aktivnost u odsustvu GlcNAc podeljenog na dva jednaka dela. Lifely et al., Glycobiology 318:813-22 (1995). U N-vezanom glikozilacionom putu, GlcNAc podeljen na dva jednaka dela dodaje se pomoću GnTIII. Schachter, Biochem. CellBiol. 64:163-81 (1986).
[0149] Prethodne studije su koristile jednu CHO ćelijsku liniju koja proizvodi antitelo, koja je prethodno konstruisana tako da eksprimira, na način koji je spolja regulisan, različite nivoe enzima kloniranog GnT III gena (Umana, P., et al., Nature Biotechnol. 17:176-180 (1999)). Ovaj pristup je po prvi put ustanovio strogu korelaciju između ekspresije GnTIII i ADCC aktivnosti modifikovanog antitela. Na taj način, izlaganje pronalaska razmatra rekombinantno, himerno antitelo ili njegov fragment sa specifičnošću vezivanja mišjeg B-Lyl antitela, koji ima promenjenu glikozilaciju kao rezultat povećane aktivnosti GnTIII. Povećana aktivnost GnTIII ima za rezultat povećanje procenta oligosaharida podeljen na dva jednaka dela, kao i smanjenje procenta fukoznih ostataka, u Fc regionu ABM molekula. Ovo antitelo, ili njegov fragment, ima povećani afinitet vezivanja za Fc receptor i povećanu efektornu funkciju. Pored toga, izlaganje pronalaska je usmereno na fragment antitela i fuzione proteine koji sadrže region koji je ekvivalentan Fc regionu imunoglobulina.
Terapeutske primene ABM molekula proizvedenih prema postupcima prema izlaganju pronalaska
[0150] ABM molekuli koji su ovde opisani mogu se koristiti pojedinačno za ciljno delovanje i ubijanje ćelija tumorain vivo.ABM molekuli takođe se mogu koristiti zajedno sa odgovarajućim terapeutskim sredstvom za lečenje humanog karcinoma. Na primer, ABM molekuli mogu se koristiti u kombinaciji sa standardnim ili uobičajenim postupcima za lečenje kao što je hemoterapija, terapija zračenjem ili mogu biti konjugovani ili vezani za terapeutski lek, ili toksin, kao i za limfokin ili tumor inhibitorni faktor rasta, za primenu terapeutskog sredstva na mesto karcinoma. Konjugati ABM molekula prema ovom pronalasku koji su od primarnog značaja su (1) imunotoksini (konjugati ABM-a i citotokisčne grupe) i (2) obeleženi (npr. radioaktivno obeleženi, enzimski obeleženi ili fluorohromom obeleženi) ABM molekuli u kojima obeleživač obezbeđuje sredstvo za identifikaciju imunih kompleksa koji obuhvataju obeleženi ABM. ABM molekuli takođe se mogu koristiti za indukciju lize preko prirodnog procesa komplementa, i za interakciju sa citotoksičnim ćelijama zavisnim od antitela koje su normalno prisutne.
[0151] Citotoksična grupa imunotoksina može biti citotoksičan lek ili enzimski aktivan toksin bakterijskog ili biljnog porekla, ili enzimski aktivan fragment ("A lanac") takvog toksina. Enzimski aktivni toksini i njihovi fragmenti koji se koriste su A lanac difterije, ne-vezujući aktivni fragmenti toksina difterije, A lanac egzotoksina (izPseudomonas aeruginosa),ricin A lanac, abrin A lanac, modekcin A lanac, alfa-sarcin,Aleurites forđiiproteini, diantin proteini,Phytolacca americanaproteini (PAPI, PAPU i PAP-S),Momordica charantiainhibitor, kurcin, krotin,Sapaonaria officinalisinhibitor, gelonin, mitogelin, restriktocin, fenomicin i enomicin. U sledećoj varijanti, ABM molekuli su konjugovani za male molkule lekove protiv kancera. Konjugati ABM molekula i takvih citotoksičnih grupa napravljeni su primenom različitih bifunkcionalnih proteinskih kuplujućih sredstava. Primeri takvih reagenasa su SPDP, IT, bifunkcionalni derivati imidoestara kao što je dimetil adipimidat HC1, aktivni estri kao što je disukcinimidil suberat, aldehidi kao što je glutaraldehid, bis-azido jedinjenja kao što je bis (p-azidobenzoil) heksandiamin, bis-diazonijum derivati kao što je bis-(p-diazonijumbenzoil)-etilendiamin, diizocijanati kao što je tolilen 2,6-diizocijanat i bis-aktivna jedinjenja fluora kao što je l,5-difluoro-2,4-dinitrobenzen. Lizirajući deo toksina može biti spojen za Fab fragment ABM molekula. Dodatni odgovarajući toksini su poznati u tehnici, kao što je pokazano u npr., objavljenoj SAD patentnoj prijavi br. 2002/0128448.
[0152] U jednoj varijanti, himerni, gliko-konstruisani ABM koji ima značajno istu specifičnost vezivanja mišjeg B-Lyl antitela, konjugovan je za ricin A lanac. Najkorisnije, ricin A lanac je deglikozilovan i proizveden pomoću rekombinantnih sredstava. Koristan postupak za pripremu ricin imunotoksina opisan je u Vitetta et al., Science 238, 1098 (1987).
[0153] Kada su korišćeni za ubijanje ćelija humanog kancerain vitroza dijagnostičke svrhe, konjugati će se tipično dodati podlozi za ćelijsku kulturu u koncentraciji od najmanje oko 10 nM. Formulacija i način primene zain vitroprimenu nisu kritični. Vodene formulacije koje su kompatitiblne sa podlogom za kulturu ili perfuzionim medijumom normalno će se koristiti. Citotoksičnost se može očitavati uobičajenim tehnikama za određivanje prisustva ili stepena kancera.
[0154] Kao što je razmatrano u prethodnom tekstu, citotoksično radiofarmaceutsko sredstvo za lečenje kancera može se napraviti konjugacijom radioaktivnog izotopa (npr., I, Y, Pr) sa himernim, gliko-konstruisanim ABM koji ima značajno istu specifičnost vezivanja mišjeg B-Lyl antitela. Termin "citotoksična grupa" kao što je ovde korišćen određen je tako da obuhvata takve izotope.
[0155] U sledećoj varijanti, lipozomi su napunjeni sa citotoksičnim lekom i lipozomi su obloženi sa ABM molekulima koji su ovde opisani. Kako na površini malignih B-ćelija ima mnogo CD20 molekula, ovaj postupak omogućava primenu velikih količina leka na tačan tip ćelija.
[0156] Tehnike za konjugaciju takvih terapeutskih sredstava za antitela su dobro poznate (videti, npr., Mon et al, "Monoclonal Antibodies for Immunotargeting of Drugs in Cancer Therapy", in Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Reisfeld et al. (eds.), pp. 243-56 (Alan R. Liss, Inc. 1985); Hellstrom et al., "Antibodies For Drug Delivery", u Controlled Drug Delivery (2nd Ed.), Robinson et al. (eds.), pp. 623-53 (Marcel Dekker, Inc. 1987); Thorpe, "Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review", u Monoclonal Antibodies '84: Biological And Clinical Applications, Pinchera et al. (eds.), pp. 475-506 (1985); i Thorpe et al., "The Preparati on And Cytotoxic Properties Of Antibody-Toxin Conjugates", Immunol. Rev., 62:119-58 (1982)).
[0157] Druge terapeutske primene za ABM molekule koji su ovde opisani obuhvataju konjugaciju ili vezivanje, npr., pomoću tehnika rekombinantne DNK, za enzim koji je sposoban da prevede prolek u citotoksičan lek i upotrebu tog konjugata antitela i enzima u kombinaciji sa prolekom da bi se prolek preveo u citotoksično sredstvo na mestu tumora (videti, npr., Senter et al., "Anti-Tumor Effects of Antibodv-alkaline Phosphatase", Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:4842-46 (1988); "Enhancement of the in vitro and in vivo Antitumor Activites of Phosphorvlated Mitocvcin C and Etoposide Derivatives by Monoclonal Antibodv-Alkaline Phosphatase Conjugates", Cancer Research 49:5789-5792 (1989); i Senter, "Activation of Prodrugs by Antibody-Enzyme Conjugates:ANewApproach to Cancer Therapy,"FASEBJ. 4:188-193 (1990)).
[0158] Sledeća terapeutska primena za ABM molekule koji su ovde opisani obuhvata primenu, bilo nekonjugovanih, u prisustvu komplementa ili kao deo konjugata antitelo-lek ili antitelo-toksin, da bi se ćelije tumora uklonile iz koštane srži pacijenata sa kancerom. Prema ovom pristupu, autologna koštana srž može biti prečišćenaex vivotretmanom sa antitelom i da se koštana srž infuzijom unese nazad u pacijenta [videti, npr., Ramsay et al, "Bone Marrow Purging Using Monoclonal Antibodies", J. Clin. Immunol., 8(2):81-88 (1988)].
[0159] Pored toga, razmatrano je da izlaganje pronalaska sadrži jedno lančani imunotoksin koji sadrži domene za vezivanje antigena koji omogućavaju značajno istu specifičnost vezivanja kao mišje B-Lyl antitelo (npr., polipeptidi koji sadrže CDR regione mišjeg B-Lyl antitela) i dalje sadrže polipeptid toksina. Jednolančani imunotoksini prema pronalasku mogu se koristiti za lečenje humanog karcinomain vivo.
[0160] Slično, fuzioni protein koji sadrži najmanje region ABM molekula prema pronalasku koji vezuje antigen spojen za najmanje funkcionalno aktivni deo drugog proteina koji ima anti-tumorsku aktivnost, npr., limfokin ili onkostatin, može se koristiti za lečenje humanog karcinomain vivo.
[0161] Predstavljeno izlaganje pronalaska opisuje postupak za selektivno ubijanje ćelija tumora koje eksprimiraju CD20. Ovaj postupak sadrži reakciju imunokonjugata (npr., imunotoksina) koji je ovde opisan sa navedenim ćelijama tumora. Ove ćelije tumora mogu biti od humanog karcinoma.
[0162] Pored toga, ovo izlaganje pronalaska opisuje postupak za lečenje karcinoma (na primer, humanih karcinoma)in vivo.Ovaj postupak sadrži primenu na subjekta farmaceutski efikasne količine kompozicije koja sadrži najmanje jedan od imunokonjugata (npr., imunotoksin) koji je ovde opisan.
[0163] U sledećem aspektu, izlaganje pronalaska je usmereno na poboljšani postupak za lečenje B-ćelijskih proliferativnih poremećaja uključujući B-ćelijski limfom, kao i autoimune bolesti koju u potpunosti ili delimično proizvode patogena auto-antitela, na osnovu deplecije B-ćelija koji sadrži primenu terapeutski efikasne količine ABM koji je ovde opisan na humanog subjekta kod koga postoji potreba za tim. U poželjnoj varijanti, ABM je gliko-konstruisano anti-CD20 antitelo sa specifičnošću vezivanja koja je značajno ista kao ona kod mišjeg B-Lyl antitela. U sledećoj poželjnoj varijanti antitelo je humanizovano. Primeri autoimunih bolesti ili poremećaja obuhvataju, ali bez ograničenja na, imuno-posredovane trombocitopenije, kao što je akutna idiopatska trombocitopenijska purpurea i hronična idiopatska trombocitopenijska purpurea, dermatomiozitis, Sydenham-ova horea, lupus nephritis, reumatska groznica, poliglandularni sindromi, Henoch-Schonlein purpura, post-streptokokni nefritis, eritema nodozum, Takayasu-ov arteritis, Addison-ova bolest, eritema multiforme, poliarteritis nodoza, ankilozni spondilitis, Goodpasture-ov sindrom, tromboangitis ubiterans, primarna bilijarna ciroza, Hashimoto-ov tiroiditis, tirotoksikoza, hronični aktivni hepatitis, polimiozitis/ dermatomiozitis, polihondritis, pamfigus vulgaris, Wegener-ova granulomatoza, membranozna nefropatija, amiotrofna lateralna skleroza, dorzalni tabes, polimialgija, perniciozna anemija, brzo progresivni glomerulonefritis i fibrozni alveolitis, inflamatorni odgovori kao što su inflamatorne bolesti kože uključujući psorijazu i dermatitis (npr. atopijski dermatitis); sistemska skleroderma i skleroza; odgovori povezani sa infiamatornom bolesti creva (kao što je Crohn-ova bolest i ulcerozni kolitis); respiratorni distres sindrom (uključujući adultni respiratorni distres sindrom; ARDS); dermatitis; meningitis; encefalitis; uveitis; kolitis; glomerulonefritis; alergijska stanja kao što je ekcem i astma i druga stanja uključujući infiltraciju T ćelija i hronične inflamatorne odgovore; ateroskleroza; leukocitna adheziona deficijencija; reumatoidni artritis; sistemski lupus eritematozus (SLE); dijabetes melitus (npr. dijabetes melitu tipa 1 ili dijabetes melitus zavisan od insulina); multipla skleroza; Reynaud-ov sindrom; autoimuni tiroiditis; alergijski encefalomijelitis; Sjorgen-ov sindrom; juvenilni početak dijabetesa; i imuni odgovori povezani sa akutnom i odloženom hipersenzitivnošću koja je posredovana preko citokina i T-limfocita koja se tipično nalazi kod tuberkuloze, sarkoidoze, polimiozitisa, granulomatoze i vaksulitisa; perniciozna anemija (Addison-ova bolest); bolesti koje uključuju dijapedezu leukocita; inflamatorni poremećaj centralnog nervnog sistema (CNS); sindrom višestruke povrede organa; hemolitička anemija (uključujući, ali bez ograničenja na, krioglobinemiju ili Coombs pozitivnu anemiju); miastenija gravis; bolesti posredovane preko kompleksa antigen-antitelo; bolest anti-glomerularne bazalne membrane; antifosfolipidni sindrom; alergijski neuritis; Graves-ova bolest; Lambert-Eaton mijastenični sindrom; bulozni pemfigoid; pemfigus; autoimune poliendokrinopatije; Reiter-ova bolest; sindrom ukočenog čoveka; Behcet-ova bolest; arteritis džinovskih ćelija; nefritis imunog porekla; IgA nefropatija; IgM polineuropatije; imuna trombocitopenijska purpura (ITP) ili autoimuna trombocitopenija itd. U ovom aspektu pronalaska, ABM molekuli koji su ovde opisani koriste se za čišćenje krvi od normalnih B-ćelija na duži vremenski period.
[0164] U skladu sa izvođenjem ovog izlaganja pronalaska, subjekat može biti čovek, konj, svinja, govedo, miš, pas, mačka i ptica. Druge toplokrvne životinje su takođe ovde obuhvaćene.
[0165] Izlaganje pronalaska dalje opisuje postupke za inhibiciju rasta ćelija humanog tumora, lečenje tumora kod subjekta, i lečenje bolesti proliferativnog tipa kod subjekta. Ovi postupci sadrže primenu na subjekta efikasne količine kompozicije koja je ovde opisana.
[0166] Očigledno je, prema tome, da predstavljeno izlaganje pronalaska obuhvata farmaceutske kompozicije, kombinacije i postupke za lečenje humanih karcinoma, kao što je B ćelijski limfom. Na primer, izlaganje pronalaska obuhvata farmaceutske kompozicije za primenu u lečenju humanih karcinoma koje sadrže farmaceutski efikasnu količinu antitela koje je ovde opisano i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0167] Kompozicije ABM molekula koje su ovde opisane mogu se primenjivati upotrebom uobičajenih načina primene uključujući, ali bez ograničenja na, intravensku, intraperitonealnu, oralnu, intralimfatičku primenu ili primenu direktno u tumor. Intravenska primena je poželjna.
[0168] U jednom aspektu izlaganja pronalaska, terapeutske formulacije koje sadrže ABM molekule koji su ovde opisani pripremljene su za čuvanje mešanjem antitela koje ima željeni stepen čistoće sa izbornim farmaceutski prihvatljivim nosačima, inertnim puniocima ili stabilizatorima (Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)), u obliku liofilizovanih formulacija ili vodenih rastvora. Prihvatljivi nosači, inertni punioci ili stabilizatori su netoksični za primaoce u korišćenim dozama i koncentracijama, i obuhvataju pufere kao što su fosfat, citrat i druge organske kiseline; antioksidante uključujući askorbinsku kiselinu i metionin; konzervanse (kao što je oktadecildimetilbenzil amonijum hlorid; heksametonijum hlorid; benzalkonijum hlorid, benzetonijum hlorid; fenol, butil ili benzil alkohol; alkil parabeni kao što je metil ili propil paraben; katehol; rezorcinol; cikloheksanol; 3-pentanol; i m-krezol); polipeptidi niske molekulske težine (manje od oko 10 ostataka); proteini, kao što su serum albumin, želatin ili imunoglobulini; hidrofilni polimeri kao što je polivinilpirolidon; aminokiseline kao što su glicin, glutamin, asparagin, histidin, arginin ili lizin; monosaharidi, disaharidi, i drugi ugljeni hidrati uključujući glukozu, manozu ili dekstrine; helatirajuća sredstva kao što je EDTA; šećere kao što je saharoza, manitol, trehaloza ili sorbitol; joni suprotnog naelektrisanja koji formiraju so kao što je natrijum; metalni kompleksi (npr., Zn-protein kompleksi); i/ili ne-jonska površinski aktivna sredstva kao što je TWEEN™, PLURONICS™ ili polietilen glikol (PEG).
[0169] Primeri formulacija anti-CD20 ABM opisani su u W098/56418. Ova objava opisuje tečnu formulacije višestruke doze koja sadrži 40 mg/mL rituksimaba, 25 mM acetat, 150 mM trehalozu, 0.9% benzil alkohol, 0.02% polisorbat 20 na pH 5.0 koja ima minimalan rok trajanja od dve godine čuvanja na 2-8°C. Sledeća anti-CD20 formulacija od interesa sadrži 10 mg/mL rituksimaba u 9.0 mg/mL natrijum hlorida, 7.35 mg/mL natrijum citrat dihidrata, 0.7 mg/ML polisorbata 80 i sterilne vode za injekciju, pH 6.5. U predstavljenom pronalasku, RITUXAN® će biti supstituisan sa ABM koji je ovde opisan.
[0170] Liofilizovane formulacije prilagođene za subkutanu primenu opisane su u WO97/04801. Takve liofilizovane formulacije mogu biti rekonstituisane sa pogodnim razblaživačem do visoke koncentracije proteina i rekonstituisana formulacija može biti primenjena subkutano na sisara koji će se ovde lečiti.
[0171] Formulacija može takođe da sadrži više od jednog aktivnog jedinjenja kao što je neophodno za određenu indikaciju koja se leči, poželjno ona sa komplementarnim aktivnostima koja nemaju međusoban štetan uticaj. Na primer, može biti poželjno da se dalje obezbedi citotoksično sredstvo, hemoterapeutsko sredstvo, citokin ili imunosupresivno sredstvo (npr. ono koje deluje na T ćelije, kao što je ciklosporin ili antitelo koje vezuje T ćelije, npr., ono koje vezuje LFA-1). Efikasna količina takvih drugih sredstava zavisi od količine antagonista prisutnog u formulaciji, tipa bolesti, poremećaja ili tretmana, i drugih faktora koji su razmatrani u prethodnom tekstu. Oni se generalno koriste u istim dozama i sa načinima primene kao št je opisano u prethodnom tekstu ili od oko 1 do 99% ranije korišćenih doza.
[0172] Aktivni sastojci mogu takođe biti unutar mikrokapsula pripremljenih, na primer, pomoću tehnika koacervacije ili pomoću međupovršinske polimerizacije, na primer, hidroksimetilcelulozne ili želatinske-mikrokapsule i poli-(metilmetakrilatne) mikrokapsule, redom, u koloidnim sistemima za primenu leka (na primer, lipozomima, albuminskim mikrosferama, mikroemulzijama, nanočesticama i nanokapsulama) ili u makroemulzijama. Takve tehnike su opisane u Remington's Pharmaceutical Sciences 16h edition, Osol, A. Ed.
(1980).
[0173] Mogu biti pripremljeni preparati sa produženim oslobađanjem. Pogodni primeri preparata sa produženim oslobađanjem obuhvataju polu-propustljive matrikse čvrstih hidrofobnih polimera koji sadrže antagonist, pri čemu su ti matriksi u obliku oblikovanih artikala, npr., filmova ili mikrokapsula. Primeri matriksa sa produženim oslobođanjem obuhvataju poliestre, hidrogelove (na primer, poli(2-hidroksietilmetakrilat), ili poli(vinilalkohol)), polilaktide (SAD Pat. br. 3,773,919), kopolimere L-glutaminske kiseline i yetil-L-glutamata, ne-razgradivi etilenvinil acetat, razgradive kopolimere mlečne kiseline i glikolne kiseline kao što je LUPRON DEPOT™ (injektabilne mikrosfere sastavljene od kopolimera mlečne kiseline i glikolne kiseline i leuprolid acetat), i poli-D-(-)-3-hidroksibuternu kiselinu.
[0174] Formulacija za primenu zain vivoprimenu mora biti sterilna. Ona se lako postiže filtracijom kroz sterilne filtracione membrane.
[0175] Kompozicije koje su ovde opisane mogu biti u različitim oblicima doze koje obuhvataju, ali bez ograničenja na, tečne rastvore ili suspenzije, tablete, pilule, praškove, supozitorije, polimerne mikrokapsule ili mikrovezikule, lipozome i rastvore za injekciju ili infuziju. Poželjan oblik zavisi od načina primene i terapeutske primene.
[0176] Kompozicije koje su ovde opisane takođe poželjno obuhvataju uobičajene farmaceutski prihvatljive nosače i adjuvante poznate u tehnici kao što je humani serum albumin, jonske izmenjivače, aluminijum trioksid, lecitin, puferske supstance kao što su fosfati, glicin, sorbinska kiselina, kalijum sorbat i soli ili elektroliti kao što je protamin sulfat.
[0177] Najefikasniji način primene i režim doziranja za farmaceutske kompozicije ovog pronalaska zavise od težine i toka bolesti, zdravstvenog stanja pacijenta i odgovora na tretman i mišljenja nadležnog lekara. Prema tome, doze kompozicija trebalo bi da se titriraju prema pojedinačnom pacijentu. Ipak, efikasna doza kompozicija prema ovom pronalasku generalno će biti u opsegu od oko 0.01 do oko 2000 mg/kg.
[0178] Molekuli koji su ovde opisani mogu biti u različitim oblicima doze koji obuhvataju, ali bez ograničenja na, tečne rastvore ili suspenzije, tablete, pilule, praškove, supozitorije, polimerne mikrokapsule ili mikrovezikule, lipozome, i rastvore za injekciju ili infuziju. Poželjan oblik zavisi od načina primene i terapeutske primene.
[0179] Kompozicija koja sadrži ABM prema predstavljenom pronalasku biće formulisana, dozirana i primenjena na način koji je u skladu sa dobrom medicinskom praksom. Faktori za razmatranje u ovom kontekstu obuhvataju određenu bolest ili poremećaj koji se leči, određenog sisara koji se leči, kliničko stanje pojedinačnog pacijenta, uzrok bolesti ili poremećaja, mesto primene sredstva, postupak primene, režim primene i druge faktore poznate lekarima. Terapeutski efikasna količina antagonista namenjena za primenu biće određena prema takvim faktorima.
[0180] Kao uopšteni predlog, terapeutski efikasna količina antitela koja je primenjena parenteralno po dozi biće u opsegu od oko 0.1 do 20 mg/kg telesne težine pacijenta na dan, sa tipičnim početnim opsegom korišćenog antagonista u opsegu od oko 2 do 10 mg/kg.
[0181] U poželjnoj varijanti, ABM je antitelo, poželjno humanizovano antitelo. Pogodne doze za takvo nekonjugovano antitelo su, na primer, u opsegu od oko 20 mg/m<2>do oko 1000 mg/m<2.>U jednoj varijanti, doza antitela se razlikuje od one koja je trenutno preporučena za RITUXAN®. Na primer, moguće je primeniti na pacijenta jednu ili više doza od značajno manje od 375 mg/m<2>antitela, npr., gde je doza u opsegu od oko 20 mg/m<2>do oko 250 mg/m<2>, na primer od oko 50 mg/m<2>do oko 200 mg/m<2>.
[0182] Pored toga, moguće je primeniti jednu ili više početnih doza antitela, a zatim primeniti jednu ili više naknadnih doza, pri čemu mg/m<2>doza antitela u naknadnoj dozi (dozama) prelazi mg/m<2>dozu antitela u početnoj dozi (dozama). Na primer, početna doza može biti u opsegu od oko 20 mg/m<2>do oko 250 mg/m<2>(npr., od oko 50 mg/m<2>do oko 200 mg/m<2>)inaknadna doza može biti u opsegu od oko 250 mg/m<2>do oko 1000 mg/m<2>.
[0183] Kao što je zabeleženo u prethodnom tekstu, međutim, ove predložene varijante ABM molekula su u velikom stepenu podložne mišljenju lekara. Ključni faktor u izboru odgovarajuće doze i režimu doziranja je dobijeni rezultat, kao što je naznačeno u prethodnom tekstu. Na primer, relativno više doze mogu biti potrebne početno za lečenje tekućih i akutnih bolesti. Da bi se dobili najefikasniji rezultati, u zavisnosti od bolesti ili poremećaja, antagonist se primenjuje što je bliže moguće prvom simptomu, dijagnozi, izgledu ili pojavi bolesti ili poremećaja tokom remisija bolesti ili poremećaja.
[0184] ABM koji je ovde opisan primenjuje se pomoću bilo kojeg pogodnog sredstva, uključujući parenteralnu, subkutanu, intraperitonealnu, intrapulmonarnu i intranazalnu, i, ako je potrebno za lokalni imunosupresivni tretman, intralezionu primenu. Parenteralne infuzije obuhvataju intramuskularnu, intravensku, intraarterijsku, intraperitonealnu ili subkutanu primenu. Pored toga, antagonist može biti pogodno primenjen pulsnom infuzijom, npr., sa opadajućim dozama antagonista. Poželjno, doziranje se izvodi injekcijama, najpoželjnije intravenskim ili subkutanim injekcijama, u zavisnosti delimično od toga da li je primena kratka ili hronična.
[0185] Moguće je primenjivati druga jedinjenja, kao što su citotoksična sredstva, hemoterapeutska sredstva, imunosupresivna sredstva i/ili citokini sa antagonistima. Kombinovana primena obuhvata istovremenu primenu, upotrebom odvojenih formulacija ili pojedinačne farmaceutske formulacije, i zatim primenu po bilo kom redosledu, pri čemu, poželjno postoji vremenski period u kome oba (ili sva) aktivna sredstva istovremeno ispoljavaju svoje biološke aktivnosti.
[0186] Bilo bi jasno da doza kompozicije koja je ovde opisana koja je potrebna da bi se postiglo lečenje može biti dodatno smanjena sa optimizacijom režima doziranja.
[0187] U skladu sa izvođenjem pronalaska, farmaceutski nosač može biti lipidni nosač.
Lipidni nosač može biti fosfolipid. Pored toga, lipidni nosač može biti masna kiselina. Takođe, lipidni nosač može biti deterdžent. Kao što je ovde korišćen, deterdžent je bilo koja supstanca koja menja površinski napon tečnosti, generalno ga snižavajući.
[0188] U jednom primeru pronalaska, deterdžent može biti nejonski deterdžent. Primeri nejonskih deterdženata obuhvataju, ali bez ograničenja na, polisorbat 80 (takođe poznat kao Tween 80 ili (polioksietilensorbitan monooleat), Brij i Triton (na primer Triton WR-1339 i Triton A-20).
[0189] Alternativno, deterdžent može biti jonski deterdžent. Primer jonskog deterdženta obuhvata, ali bez ograničenja na, alkiltrimetilamonijum bromid.
[0190] Pored toga, u skladu sa izlaganjem pronalaska, tečni nosač može biti lipozom. Kao što je korišćen u ovoj prijavi, "lipozom" je bilo koja membranski vezana vezikula koja sadrži bilo koji molekul prema pronalasku ili njihove kombinacije.
[0191] U sledećim varijantama predstavljenog izlaganja pronalaska navedeni su specifični aspekti koji su značajni:
Tačka 1: Izolovani polinukleotid koji sadrži
a. sekvencu koja je izabrana iz grupe koju čine: SEQ ID NO.: 5, SEQ ID NO.: 6 i SEQ ID NO: 7; i
b. sekvencu koja je izabrana iz grupe koju čine: SEQ TD NO: 21, SEQ TD NO: 22 i SEQ TD NO: 23; i
c. sekvencu ID NO: 24.
Tačka 2: Izolovani polinukleotid koji sadrži SEQ ID NO.: 8, SEQ ID NO.: 9 i SEQ ID NO.: 10.
Tačka 3: Izolovani polinukleotid prema tački 1 ili tački 2, koji kodira fuzioni polipeptid. Tačka 4: Izolovani polinukleotid koji sadrži SEQ ID No.: 3.
Tačka 5: Izolovani polinukleotid koji sadrži SEQ ID No.: 4.
Tačka 6: Izolovani polinukleotid prema tački 4 ili 5, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid kodira fuzioni polipeptid.
Tačka 7: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 80% identičnosti sa SEQ ID NO: 3, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid kodira fuzioni polipeptid.
Tačka 8: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 80% identičnosti sa SEQ ID NO: 4, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid kodira fuzioni polipeptid.
Tačka 9: Izolovani polinukleotid koji sadrži
a. sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID No.: 1; i b. sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu Fc regiona antitela, ili njegovog fragmenta, iz određena vrste osim miša.
Tačka 10: Izolovani polinukleotid koji sadrži
a. sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID No.: 2; i b. sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu Fc regiona antitela, ili njegovog fragmenta, iz određena vrste osim miša.
Tačka 11: Izolovani polinukleotid koji kodira polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID No.: 1. Tačka 12: Izolovani polinukleotid koji kodira polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID No.: 2. Tačka 13: Izolovani polinukleotid koji sadrži SEQ ID NO.: 11.
Tačka 14: Izolovani polinukleotid koji sadrži SEQ ID NO.: 12.
Tačka 15: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 80% identičnosti sa SEQ ID NO.: 11 ili sa SEQ ID NO.: 12.
Tačka 16: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 85% identičnosti sa SEQ ID NO.: 11 ili sa SEQ ID NO.: 12.
Tačka 17: Tzolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 90% identičnosti sa SEQ ID NO.: 11 ili sa SEQ ID NO.: 12.
Tačka 18: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 95% identičnosti sa SEQ ID NO.: 11 ili sa SEQ ID NO.: 12.
Tačka 19: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 99% identičnosti sa SEQ ID NO.: 11 ili sa SEQ ID NO.: 12.
Tačka 20: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja kodira polipeotid koji ima SEQ ID NO: 13 (težak lanac aa).
Tačka 21: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja kodira polipeptid koji ima SEQ IDNO: 14 (lak lanac aa).
Tačka 22: Izolovani polinukleotid koji sadrži
a. sekvencu koja kodira polipeptid koji ima Vhregion mišjeg B-Lyl antitela, ili njegove varijante; i
b. sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu Fc regiona antitela, ili njegovog fragmenta, iz određene vrste osim miša.
Tačka 23: Izolovani polinukleotid koji sadrži
a. sekvencu koja kodira polipeptid koji ima Vlregion mišjeg B-Lyl antitela, ili njegove varijante; i
b. sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu Fc regiona antitela, ili njegovog fragmenta, iz određene vrste osim miša.
Tačka 24: Ekspresioni vektor koji sadrži izolovani polinukleotid prema bilo kojoj od tačaka 1-23.
Tačka 25: Vektor prema tački 24, pri čemu je navedeni vektor policistronski.
Tačka 26: Ćelija domaćin koja sadrži ekspresioni vektor prema tački 24.
Tačka 27: Ćelija domaćin koja sadrži izolovani polinukleotid prema bilo kojoj od tačaka 1-23. Tačka 28: Polipeptid koji sadrži sekvencu izvedenu od mišjeg B-Lyl antitela i sekvencu izvedenu od heterolognog polipeptida.
Tačka 29: Molekul koji vezuje antigen koji sadrži polipeptid prema tački 28.
Tačka 30: Molekul koji vezuje antigen prema tački 29, koji vezuje humani CD20.
Tačka 31: Molekul koji vezuje antigen prema tački 29, koji je antitelo.
Tačka 32: Molekul koji vezuje antigen prema tački 31, koji je himerno antitelo.
Tačka 33: Molekul koji vezuje antigen prema tački 31, koji je humanizovano antitelo.
Tačka 34: Molekul koji vezuje antigen prema tački 31, koji je primatizovano antitelo.
Tačka 35: Himerni polipeptid koji sadrži sekvencu SEQ ID NO: 1 ili njegova varijanta. Tačka 36: Himerni polipeptid koji sadrži sekvencu SEQ ID NO: 2 ili njegova varijanta. Tačka 37: Himerni polipeptid koji sadrži: d. polipeptid koji sadrži sekvencu koja je izabrana iz grupe koju čine: SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16 i SEQ ID NO: 17; i
e. polipeptid koji sadrži sekvencu koja je izabrana iz grupe koju čine: SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26 i SEQ ID NO: 27; i
f. SEQ ID NO: 28.
Tačka 38: Himerni polipeptid prema tački 37, dalje sadrži skelet varijabilnog regiona teškog lanca, pri čemu navedeni skelet sadrži alaninski ostatak na položaju 71, prema Kabat numeraciji.
Tačka 39: Himerni polipeptid prema tački 37, dalje sadrži skelet varijabilnog regiona teškog lanca, pri čemu navedeni skelet sadrži argininski ostatak na položaju 94, prema Kabat numeraciji.
Tačka 40: Himerni polipeptid koji sadrži SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19 i SEQ ID NO: 20. Tačka 41: Izolovani polipeptid koji sadrži SEQ ID NO: 13 ili njenu varijantu.
Tačka 42: Izolovani polipeptid koji sadrži SEQ ID NO: 14 ili njenu varijantu.
Tačka 43: Izolovani polipeptid prema bilo kojoj od tačaka 35-40, pri čemu je navedeni polipeptid fuzioni polipeptid.
Tačka 44: Molekul koji vezuje antigen koji sadrži izolovani polipeptid prema tački 43. Tačka 45: Molekul koji vezuje antigen prema tački 44, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen antitelo.
Tačka 46: Antitelo prema tački 45, pri čemu je navedeno antitelo primatizovano antitelo. Tačka 47: Antitelo prema tački 45, pri čemu je navedeno antitelo humanizovano antitelo. Tačka 48: Molekul koji vezuje antigen prema tački 44, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen fragment antitela.
Tačka 49: Fragment antitela prema tački 48, pri čemu je navedeni fragment antitela primatizovan.
Tačka 50: Molekul koji vezuje antigen prema tački 48, pri čemu je navedeni fragment antitela humanizovan.
Tačka 51: Molekul koji vezuje antigen, koji je sposoban ba bude u kompeticiji sa mišjim B-Lyl antitelom za vezivanje za CD20, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen himeran.
Tačka 52: Molekul koji vezuje antigen prema tački 51, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen antitelo.
Tačka 53: Molekul koji vezuje antigen prema tački 52, pri čemu je navedeno antitelo primatizovano.
Tačka 54: Molekul koji vezuje antigen prema tački 51, pri čemu je navedeno rekombinantno antitelo humanizovano.
Tačka 55: Molekul koji vezuje antigen prema tački 51, pri čemu navedeno rekombinantno antitelo sadrži humani Fc region.
Tačka 56: Molekul koji vezuje antigen prema tački 55, pri čemu je navedeni humani Fc region Fc region humanog IgG.
Tačka 57: Molekul koji vezuje antigen prema bilo kojoj od tačaka 29-34 ili 44-56, pri čemu navedeni molekul koji vezuje antigen ima Fc region sa modifikovanim oligosaharidima. Tačka 58: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu je navedeni Fc region modifikovan tako da ima redukovane fukozne ostatke u poređenju sa ne-modifikovanim molekulom koji vezuje antigen.
Tačka 59: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu navedeni Fc region ima povećanu proporciju oligosaharida podeljenih na dva jednaka dela.
Tačka 60: Molekul koji vezuje antigen prema tački 59, pri čemu su navedeni modifikovani oligosaharidi podeljeni na dva jednaka dela, kompleks.
Tačka 61: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu navedeni modifikovani oligosaharidi imaju povećanu proporciju podeljenih na dva jednaka dela, nefukozilovanih oligosaharida u Fc regionu navedenog molekula koji vezuje antigen.
Tačka 62: Molekul koji vezuje antigen prema tački 61, pri čemu su navedeni podeljeni na dva jednaka dela, nefukozilovani oligosaharidi hibridni.
Tačka 63: Molekul koji vezuje antigen prema tački 61, pri čemu su navedeni podeljeni na dva jednaka dela, nefukozilovani oligosaharidi složeni.
Tačka 64: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu su najmanje 20% oligosaharida u Fc regionu navedenog polipeptida su podeljeni na dva jednaka dela, nefukozilovani.
Tačka 65: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu su najmanje 30% oligosaharida u Fc regionu navedenog polipeptida su podeljeni na dva jednaka dela, nefukozilovani.
Tačka 66: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu su najmanje 35% oligosaqharida u Fc regionu navedenog polipeptida su podeljeni na dva jednaka dela, nefukozilovani.
Tačka 67: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu su najmanje 70% oligosaharida u Fc regionu navedenog polipeptida su podeljeni na dva jednaka dela, nefukozilovani.
Tačka 68: Postupak za proizvodnju molekula koji vezuje antigen, koji je sposoban da bude u kompeticiji sa mišjim B-Lyl antitelom za vezivanje za humani CD20, i pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen himerni; pri čemu navedeni postupak sadrži
a. kultivisanje ćelije domaćina prema tački 26 ili tački 27 u podlozi pod uslovima koji omogućavaju ekspresiju navedenog polinukelotida koji kodira navedeni molekul koji vezuje antigen; i
b. dobijanje navedenog molekula koji vezuje antigen iz nastale kulture.
Tačka 69: Postupak prema tački 68, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen antitelo.
Tačka 70: Farmaceutska kompozicija koja sadrži molekul koji vezuje antigen prema bilo kojoj od tačaka 29-34 ili 46-67 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
Tačka 71: Farmaceutska kompozicija prema tački 70, pri čemu navedena kompozicija dalje sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač.
Tačka 72: Farmaceutska kompozicija prema tački 70, pri čemu navedena kompozicija dalje sadrži adjuvant.
Tačka 73: Postupak za lečenje poremećaja koji se može lečiti preko deplecije B-ćelija koji sadrži primenu terapeutski efikasne količine farmaceutske kompozicije prema bilo kojoj od tačaka 70-72 na humanog subjekti kod koga postoji potreba za tim.
Tačka 74: Ćelija domaćin konstruisana tako da eksprimira najmanje jednu nukleinsku kiselinu koja kodira polipeptid koji ima aktivnost P(l,4)-N-acetilglukozaminiltransferaze III u količini koja je dovoljna da se modifikuju oligosaharidi u Fc regionu polipeptida proizvedenog od strane navedene ćelije domaćina, pri čemu je navedeni polipeptid molekul koji vezuje antigen prema bilo kojoj od tačaka 44-67.
Tačka 75: Ćelija domaćin prema tački 74, pri čemu je navedeni polipeptid koji ima aktivnost P(l,4)-N-acetilglukozaminiltransferaze III fuzioni polipeptid.
Tačka 76: Ćelija domaćin prema tački 74, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen - antitelo.
Tačka 77: Ćelija domaćin prema tački 74, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen - fragment antitela.
Tačka 78: Ćelija domaćin prema tački 74, pri čemu navedeni molekul koji vezuje antigen sadrži region ekvivalentan Fc regionu humanog IgG.
Tačka 79: Ćelija domaćin prema tački 74, pri čemu navedeni molekul koji vezuje antigen proizveden od strane navedene ćelije domaćina ispoljava povećani afinitet vezivanja za Fc receptor kao rezultat navedene modifikacije.
Tačka 80: Ćelija domaćin prema tački 74, pri čemu navedeni molekul koji vezuje antigen proizveden od strane navedene ćelije domaćina ispoljava povećanu efektornu funkciju kao rezultat navedene modifikacije.
Tačka 81: Ćelija domaćin prema tački 75, pri čemu navedeni fuzioni polipeptid sadrži katalitički domen P(l,4)-N-acetilglukozaminiltransferaze III.
Tačka 82: Ćelija domaćin prema tački 75, pri čemu navedeni fuzioni polipeptid dalje sadrži
Goldžijev lokalizacioni domen heterolognog Goldžijevog rezidentnog polipeptida.
Tačka 83: Ćelija domaćin prema tački 82, pri čemu je navedeni Goldžijev lokalizacioni domen lokalizacioni domen manozidaze II.
Tačka 84: Ćelija domaćin prema tački 82, pri čemu je navedeni Goldžijev lokalizacioni domen lokalizacioni domen (l,2)-N-acetilglukozaminiltransferaze I.
Tačka 85: Ćelija domaćin prema tački 82, pri čemu je navedeni Goldžijev lokalizacioni domen lokalizacioni domen (l,2)-N-acetilglukozaminiltransferaze II.
Tačka 86: Ćelija domaćin prema tački 82, pri čemu je navedeni Goldžijev lokalizacioni domen lokalizacioni domen manozidaze I.
Tačka 87: Ćelija domaćin prema tački 82, pri čemu je navedeni Goldžijev lokalizacioni domen lokalizacioni domen al-6 fukoziltransferaze.
Tačka 88: Ćelija domaćin prema tački 80, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija
- povećana ćelijska citotoksičnost posredovana preko Fc.
Tačka 89: Ćelija domaćin prema tački 80, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija
- povećano vezivanje za NK ćelije.
Tačka 90: Ćelija domaćin prema tački 80, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija
- povećano vezivanje za makrofage.
Tačka 91: Ćelija domaćin prema tački 80, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija
- povećano vezivanje za polimorfonuklearne ćelije.
Tačka 92: Ćelija domaćin prema tački 80, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija
- povećano vezivanje za monocite.
Tačka 93: Ćelija domaćin prema tački 80, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija
- povećani direktni prenos signala koje indukuje apoptozu.
Tačka 94: Ćelija domaćin prema tački 80, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija
- povećano sazrevanje dendritske ćelije.
Tačka 95: Ćelija domaćin prema tački 80, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija
- povećana priprema T ćelija.
Tačka 96: Ćelija domaćin prema tački 79, pri čemu je navedeni Fc receptor - Fcy aktivirajući receptor.
Tačka 97: Ćelija domaćin prema tački 79, pri čemu je navedeni Fc receptor - FcyRIIIA receptor.
Tačka 98: Ćelija domaćin prema tački 74, pri čemu je navedena ćelija domaćin - CHO ćelija, BHK ćelija, NSO ćelija, SP2/0 ćelija, YO mijeloma ćelija, P3X63 ćelija mišjeg mijeloma, PER ćelija, PER.C6 ćelija ili hibridoma ćelija.
Tačka 99: Ćelija domaćin prema tački 74, koja dalje sadrži najmanje jedan transficirani polinukleotid koji kodira polipeptid prema bilo kojoj od tačaka 28 i 35-41, i pri čemu navedena nukleinska kiselina sadrži sekvencu koja kodira region ekvivalentan Fc regionu humanog imunoglobulina.
Tačka 100: Ćelija domaćin prema tački 74, pri čemu je navedena najmanje jedna nukleinska kiselina koja kodira polipeptid koji ima aktivnost (l,4)-N-acetilglukozaminiltransferaze III funkcionalno vezana za konstitutivni promotorski element.
Tačka 101: Ćelija domaćin prema tački 100, pri čemu je navedeni polipeptid koji ima aktivnost P(l,4)-N-acetilglukozaminiltransferaze III - fuzioni polipeptid.
Tačka 102: Postupak za proizvodnju molekula koji vezuje antigen koji ima modifikovane oligosaharide u ćeliji domaćinu, pri čemu navedeni postupak sadrži: a. kultivisanje ćelije domaćina konstruisane tako da eksprimira najmanje jednu nukleinsku kiselinu koja kodira polipeptid koji ima aktivnost P(l,4)-N-acetilglukozaminiltransferaze III pod uslovima koji omogućavaju proizvodnju navedenog molekula koji vezuje antigen, i koji omogućava modifikaciju oligosaharida prisutnih na Fc regionu navedenog molekula koji vezuje antigen; i
b. izolaciju navedenog molekula koji vezuje antigen, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen sposoban da bude u kompeticiji sa mišjim B-Lyl antitelom za vezivanje za CD20 i pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen ili njegov fragment - himeran.
Tačka 103: Postupak prema tački 102, pri čemu navedeni modifikovani oligosaharidi imaju redukovanu fukozilaciju u poređenju sa ne-modifikovanim oligosaharidima.
Tačka 104: Postupak prema tački 102, pri čemu su navedeni modifikovani oligosaharidi - hibridni.
Tačka 105: Postupak prema tački 102, pri čemu su navedeni modifikovani oligosaharidi složeni.
Tačka 106: Postupak prema tački 102, pri čemu navedeno rekombinantno antitelo ili njegov fragment proizvedeno od strane navedene ćelije domaćina ima povećanu proporciju podeljenih na dva jednaka dela, nefukozilovanih oligosaharida u Fc regionu navedenog polipeptida.
Tačka 107: Postupak prema tački 106, pri čemu su navedeni podeljeni na dva jednaka dela, nefukozilovani oligosaharidi hibridni.
Tačka 108: Postupak prema tački 106, pri čemu su navedeni podeljeni na dva jednaka dela,
nefukozilovani oligosaharidi složeni.
Tačka 109: Postupak prema tački 102, pri čemu su najmanje 20% oligosaharida u Fc regionu navedenog polipeptida su podeljeni na dva jednaka dela, nefukozilovani.
Tačka 110: Postupak prema tački 102, pri čemu su najmanje 30% oligosaharida u Fc regionu navedenog polipeptida su podeljeni na dva jednaka dela, nefukozilovani.
Tačka 111: Postupak prema tački 102, pri čemu su najmanje 35% oligosaharida u Fc regionu navedenog polipeptida su podeljeni na dva jednaka dela, nefukozilovani.
Tačka 112: Molekul koji vezuje antigen koji je konstruisan tako da ima povećanu efektornu funkciju proizveden pomoću postupka prema bilo kojoj od tačaka 102-111.
Tačka 113: Molekul koji vezuje antigen prema tački 112, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen - antitelo.
Tačka 114: Antitelo koje je konstruisano tako da ima povećani afinitet vezivanja za Fc receptor koje je proizvedeno pomoću postupka prema bilo kojoj od tačaka 102-111.
Tačka 115: Molekul koji vezuje antigen prema tački 114, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen - antitelo.
Tačka 116: Molekul koji vezuje antigen prema tački 112, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija povećana ćelijska citotoksičnost posredovana preko Fc.
Tačka 117: Molekul koji vezuje antigen prema tački 112, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija povećano vezivanje za NK ćelije.
Tačka 118: Molekul koji vezuje antigen prema tački 112, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija povećano vezivanje za makrofage.
Tačka 119: Molekul koji vezuje antigen prema tački 112, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija povećano vezivanje za monocite.
Tačka 120: Molekul koji vezuje antigen prema tački 112, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija - povećano vezivanje za polimorfonuklearne ćelije.
Tačka 121: Molekul koji vezuje antigen prema tački 112, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija direktni prenos signala koji indukuje apoptozu.
Tačka 122: Molekul koji vezuje antigen prema tački 112, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija - povećano sazrevanje dendritskih ćelija.
Tačka 123: Molekul koji vezuje antigen prema tački 112, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija - povećana priprema T ćelija.
Tačka 124: Molekul koji vezuje antigen prema tački 114, pri čemu je navedeni Fc receptor - Fc aktivirajući receptor.
Tačka 125: Molekul koji vezuje antigen prema tački 114, pri čemu je navedeni Fc receptor -
FcyRIIIa receptor.
Tačka 126: Molekul koji vezuje antigen proizveden pomoću postupka prema bilo kojoj od tačaka 102 do 111, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen - fragment antitela koji sadrži Fc region i koji je konstruisan tako da ima povećanu efektornu funkciju.
Tačka 127: Molekul koji vezuje antigen proizveden pomoću postupka prema bilo kojoj od tačaka 102 do 111, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen fuzioni protein koji obuhvata polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID NO:l i region ekvivalentan Fc regionu imunoglobulina i koji je konstruisan tako da ima povećanu efektornu funkciju.
Tačka 128: Molekul koji vezuje antigen koji je proizveden pomoću postupka prema bilo kojoj od tačaka 102 do 111, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen - fuzioni protein koji obuhvata polipeptid koji ima sekvencu izabranu iz grupe koju čine SEQ ID No: 30; SEQ ID No: 32; SEQ ID No: 34; SEQ ID No: 36; SEQ ID No: 38; SEQ ID No: 40; SEQ ID No: 42; SEQ ID No: 44; SEQ ID No: 46; SEQ ID No: 48; SEQ ID No: 50; SEQ ID No: 52; SEQ ID No: 54; SEQ ID No: 56; SEQ ID No: 58; SEQ ID No: 60; SEQ ID No: 62; SEQ ID No: 64; SEQ ID No: 66; SEQ ID No: 68; SEQ ID No: 70; i SEQ ID No: 72, i region ekvivalentan Fc regionu imunoglobulina i konstruisan tako da ima povećanu efektornu funkciju.
Tačka 129: Molekul koji vezuje antigen proizveden pomoću postupka prema bilo kojoj od tačaka 102 do 111, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen fuzioni protein koji obuhvata polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID NO: 3 i region ekvivalentan Fc regionu imunoglobulina i konstruisan tako da ima povećanu efektornu funkciju.
Tačka 130: Molekul koji vezuje antigen proizveden pomoću postupka prema bilo kojoj od tačaka 102 do 111, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen - fuzioni protein koji obuhvata polipeptid koji ima sekvencu prema SEQ ID NO: 76 i region ekvivalentan Fc regionu imunoglobulina i konstruisan tako da ima povećanu efektornu funkciju.
Tačka 131: Farmaceutska kompozicija koja sadrži molekul koji vezuje antigen prema bilo kojoj od tačaka 112 do 130 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
Tačka 132: Farmaceutska kompozicija koja sadrži fragment antitela prema tački 126 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
Tačka 133: Farmaceutska kompozicija koja sadrži fuzioni protein prema bilo kojoj od tačaka 127 do 130 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
Tačka 134: Postupak za lečenje bolesti koja se može lečiti deplecijom B-ćelija, koji sadrži primenu terapeutski efikasne količine molekula koji vezuje antigen prema bilo kojoj od tačaka 112 do 130 na humanog subjekt kod koga postoji potreba za tim.
Tačka 135: Izolovani polinukleotid prema tački 4 ili 5 koji dodatno sadrži sekvencu koja
kodira konstantni region lakog ili teškog lanca humanog antitela.
Tačka 136: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu sa najmanje 80% identičnosti sa SEQ ID NO: 24, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid kodira fuzioni polipeptid.
Tačka 137: Ćelija domaćin koja ko-eksprimira izolovani polinukleotid prema tački 136 i polinukleotid koji sadrži sekvencu koja kodira varijabilni region lakog lanca antitela.
Tačka 138: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu su najmanje 50% oligosaharida u Fc regionu podeljeni na dva jednaka dela.
Tačka 139: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu su najmanje 60% oligosaharida u Fc regionu su podeljeni na dva jednaka dela.
Tačka 140: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu su najmanje 70% oligosaharida Fc regiona su podeljeni na dva jednaka dela.
Tačka 141: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu su najmanje 80% oligosaharida u Fc regionu su podeljeni na dva jednaka dela.
Tačka 142: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu su najmanje 90% oligosaharida u Fc regionu su podeljeni na dva jednaka dela.
Tačka 143: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu su najmanje 50% oligosaharida u Fc regionu nefukozilovani.
Tačka 144: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu su najmanje 60% oligosaharida u Fc regionu nefukozilovani.
Tačka 145: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu su najmanje 70% oligosaharida u Fc regionu nefukozilovani.
Tačka 146: Molekul koji vezuje antigen prema tački 57, pri čemu su najmanje 75% oligosaharida u Fc regionu nefukozilovani.
Tačka 147: Postupak prema tački 73, pri čemu je navedeni poremećaj - B ćelijski limfom.
Tačka 148: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja je izabrana iz grupe koju čine SEQ ID No: 29; SEQ ID No: 31; SEQ ID No: 33; SEQ ID No: 35; SEQ ID No: 37; SEQ ID No: 39; SEQ ID No: 41; SEQ ID No: 43; SEQ ID No: 45; SEQ ID No: 47; SEQ ID No: 49; SEQ ID No: 51; SEQ ID No: 53; SEQ ID No: 55; SEQ ID No: 57; SEQ ID No: 59; SEQ ID No: 61; SEQ ID No: 63; SEQ ID No: 65; SEQ ID No: 67; SEQ ID No: 69; i SEQ ID No: 71. Tačka 149: Izolovani polinukleotid prema tački 148, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid sadrži SEQ ID NO: 31.
Tačka 150: Izolovani polinukleotid prema tački 148, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid sadrži SEQ ID NO: 55.
Tačka 151: Izolovani polinukleotid prema tački 148, pri čemu navedeni izolovani
polinukleotid sadrži SEQ ID NO: 59.
Tačka 152: Izolovani polinukleotid koji sadrži SEQ ID No: 75.
Tačka 153: Izolovani polinukleotid prema tački 148 ili 149, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid kodira fuzioni polipeptid.
Tačka 154: Izolovani polinukleotid koji sadrži
a) sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu koja je izabrana iz grupe koju čine SEQ ID NO: 32; SEQ ID NO: 56; i SEQ ID NO: 60; i
b) sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID NO: 76.
Tačka 155: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 80% identičnosti
saa sekvencom koja je izabrana iz grupe koju čine SEQ ID No: 29; SEQ ID No: 31; SEQ ID No: 33; SEQ ID No: 35; SEQ ID No: 37; SEQ ID No: 39; SEQ ID No: 41; SEQ ID No: 43; SEQ ID No: 45; SEQ ID No: 47; SEQ ID No: 49; SEQ ID No: 51; SEQ ID No: 53; SEQ ID No: 55; SEQ ID No: 57; SEQ ID No: 59; SEQ ID No: 61; SEQ ID No: 63; SEQ ID No: 65; SEQ ID No: 67; SEQ ID No: 69; i SEQ ID No: 71, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid kodira fuzioni polipeptid.
Tačka 156: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 80% identičnosti sa SEQ ID NO: 75, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid kodira fuzioni polipeptid.
Tačka 157: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 85% identičnosti sa sekvencom koja je izabrana iz grupe koju čine SEQ ID No: 29; SEQ ID No: 31; SEQ ID No: 33; SEQ ID No: 35; SEQ ID No: 37; SEQ ID No: 39; SEQ ID No: 41; SEQ ID No: 43; SEQ ID No: 45; SEQ ID No: 47; SEQ ID No: 49; SEQ ID No: 51; SEQ ID No: 53; SEQ ID No: 55; SEQ ID No: 57; SEQ ID No: 59; SEQ ID No: 61; SEQ ID No: 63; SEQ ID No: 65; SEQ ID No: 67; SEQ ID No: 69; i SEQ ID No: 71.
Tačka 158: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 85% identičnosti sa SEQ ID No: 75.
Tačka 159: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 90% identičnosti sa sekvencom koja je izabrana iz grupe koju čine SEQ ID No: 29; SEQ ID No: 31; SEQ ID No: 33; SEQ ID No: 35; SEQ ID No: 37; SEQ ID No: 39; SEQ ID No: 41; SEQ ID No: 43; SEQ ID No: 45; SEQ ID No: 47; SEQ ID No: 49; SEQ ID No: 51; SEQ ID No: 53; SEQ ID No: 55; SEQ ID No: 57; SEQ ID No: 59; SEQ ID No: 61; SEQ ID No: 63; SEQ ID No: 65; SEQ ID No: 67; SEQ ID No: 69; i SEQ ID No: 71.
Tačka 160: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 90% identičnosti
sa SEQ ID No: 75.
Tačka 161: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 95% identičnosti sa sekvencom koja je izabrana iz grupe koju čine SEQ ID No: 29; SEQ ID No: 31; SEQ ID No: 33; SEQ ID No: 35; SEQ ID No: 37; SEQ ID No: 39; SEQ ID No: 41; SEQ ID No: 43; SEQ ID No: 45; SEQ ID No: 47; SEQ ID No: 49; SEQ ID No: 51; SEQ ID No: 53; SEQ ID No: 55; SEQ ID No: 57; SEQ ID No: 59; SEQ ID No: 61; SEQ ID No: 63; SEQ ID No: 65; SEQ ID No: 67; SEQ ID No: 69; i SEQ ID No: 71.
Tačka 162: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 95% identičnosti sa SEQ ID No: 75.
Tačka 163: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 99% identičnosti sa sekvencom koja je izabrana iz grupe koju čine SEQ ID No: 29; SEQ ID No: 31; SEQ ID No: 33; SEQ ID No: 35; SEQ ID No: 37; SEQ ID No: 39; SEQ ID No: 41; SEQ ID No: 43; SEQ ID No: 45; SEQ ID No: 47; SEQ ID No: 49; SEQ ID No: 51; SEQ ID No: 53; SEQ ID No: 55; SEQ ID No: 57; SEQ ID No: 59; SEQ ID No: 61; SEQ ID No: 63; SEQ ID No: 65; SEQ ID No: 67; SEQ ID No: 69; i SEQ ID No: 71.
Tačka 164: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja ima najmanje 99% identičnosti sa SEQ ID No: 75.
Tačka 165: Izolovani polinukleotid koji sadrži
a) sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu koja je izabrana iz grupe koju čine SEQ ID No: 30; SEQ ID No: 32; SEQ ID No: 34; SEQ ID No: 36; SEQ ID No: 38; SEQ ID No: 40; SEQ ID No: 42; SEQ ID No: 44; SEQ ID No: 46; SEQ ID No: 48; SEQ ID No: 50; SEQ ID No: 52; SEQ ID No: 54; SEQ ID No: 56; SEQ ID No: 58; SEQ ID No: 60; SEQ ID No: 62; SEQ ID No: 64; SEQ ID No: 66; SEQ ID No: 68; SEQ ID No: 70; i SEQ ID No: 72; i b) sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu Fc regiona antitela, ili njegov fragment, iz određene vrste osim miša.
Tačka 166: Izolovani polinukleotid koji sadrži
a) sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID No: 76; i
b) sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu Fc regiona antitela, ili njegov fragment,
iz određene vrste osim miša.
Tačka 167: Izolovani polinukleotid koji kodira polipeptid koji ima sekvencu izabranau iz grupe koju čine SEQ ID No: 30; SEQ ID No: 32; SEQ ID No: 34; SEQ ID No: 36; SEQ ID No: 38; SEQ ID No: 40; SEQ ID No: 42; SEQ ID No: 44; SEQ ID No: 46; SEQ ID No: 48; SEQ ID No: 50; SEQ ID No: 52; SEQ ID No: 54; SEQ ID No: 56; SEQ ID No: 58; SEQ ID No: 60; SEQ ID No: 62; SEQ ID No: 64; SEQ ID No: 66; SEQ ID No: 68; SEQ ID No: 70; i SEQ ID No: 72.
Tačka 168: Izolovani polinukleotid koji kodira polipeptid koji ima sekvencu SEQ ID No: 76. Tačka 169: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja kodira polipeptid koji ima sekvencu koja je izabrana iz grupe koju čine SEQ ID No: 30; SEQ ID No: 32; SEQ ID No: 34; SEQ ID No: 36; SEQ ID No: 38; SEQ ID No: 40; SEQ ID No: 42; SEQ ID No: 44; SEQ ID No: 46; SEQ ID No: 48; SEQ ID No: 50; SEQ ID No: 52; SEQ ID No: 54; SEQ ID No: 56; SEQ ID No: 58; SEQ ID No: 60; SEQ ID No: 62; SEQ ID No: 64; SEQ ID No: 66; SEQ ID No: 68; SEQ ID No: 70; i SEQ ID No: 72.
Tačka 170: Izolovani polinukleotid koji sadrži sekvencu koja kodira polipeptid koji ima SEQ ID NO: 76.
Tačka 171: Ekspresioni vektor koji sadrži izolovani polinukleotid prema bilo kojoj od tačaka 148-170.
Tačka 172: Vektor prema tački 171, pri čemu je navedeni vektor policistronski.
Tačka 173: Ćelija domaćin koja sadrži ekspresioni vektor prema tački 171.
Tačka 174: Ćelija domaćin koja sadrži izolovani polinukleotid prema bilo kojoj od tačaka 148-170.
Tačka 175: Humanizovani polipeptid koji sadrži sekvencu koja je izabrana iz grupe koju čine SEQ ID No: 30; SEQ ID No: 32; SEQ ID No: 34; SEQ ID No: 36; SEQ ID No: 38; SEQ ID No: 40; SEQ ID No: 42; SEQ ID No: 44; SEQ ID No: 46; SEQ ID No: 48; SEQ ID No: 50; SEQ ID No: 52; SEQ ID No: 54; SEQ ID No: 56; SEQ ID No: 58; SEQ ID No: 60; SEQ ID No: 62; SEQ ID No: 64; SEQ ID No: 66; SEQ ID No: 68; SEQ ID No: 70; i SEQ ID No: 72, ili njenu varijantu.
Tačka 176: Humanizovani polipeptid koji sadrži sekvencu SEQ ID NO: 76, ili njenu varijantu.
Tačka 177: Izolovani polipeptid koji sadrži sekvencu koja je izabrana iz grupe koju čine SEQ ID No: 30; SEQ ID No: 32; SEQ ID No: 34; SEQ ID No: 36; SEQ ID No: 38; SEQ ID No: 40; SEQ ID No: 42; SEQ ID No: 44; SEQ ID No: 46; SEQ ID No: 48; SEQ ID No: 50; SEQ ID No: 52; SEQ ID No: 54; SEQ ID No: 56; SEQ ID No: 58; SEQ ID No: 60; SEQ ID No: 62; SEQ ID No: 64; SEQ ID No: 66; SEQ ID No: 68; SEQ ID No: 70; i SEQ ID No: 72, ili njenu varijantu.
Tačka 178: Izolovani polipeptid koji sadrži SEQ ID NO: 76, ili njenu varijantu.
Tačka 179: Izolovani polipeptid prema bilo kojoj od tačaka 177-178, pri čemu je navedeni polipeptid - fuzioni polipeptid.
Tačka 180: Molekul koji vezuje antigen koji sadrži izolovani polipeptid prema tački 179. Tačka 181: Molekul koji vezuje antigen prema tački 180, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen - antitelo.
Tačka 182: Antitelo prema tački 181, pri čemu je navedeno antitelo - humanizovano antitelo. Tačka 183: Molekul koji vezuje antigen prema tački 180, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen - fragment antitela.
Tačka 184: Molekul koji vezuje antigen prema tački 183, pri čemu je navedeni fragment antitela - humanizovan.
Tačka 185: Molekul koji vezuje antigen prema tački 180, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen - rekombinantno antitelo.
Tačka 186: Molekul koji vezuje antigen prema tački 185, pri čemu je navedeno rekombinantno antitelo - humanizovano.
Tačka 187: Molekul koji vezuje antigen prema tački 180, pri čemu navedeno rekombinantno antitelo sadrži humani Fc region.
Tačka 188: Molekul koji vezuje antigen prema tački 187, pri čemu je navedeni humani Fc region - Fc region humanog IgG.
Tačka 189: Molekul koji vezuje antigen prema bilo kojoj od tačaka 180-188, pri čemu molekul koji vezuje antigen ima Fc region sa modifikovanim oligosaharidima.
Tačka 190: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu je navedeni Fc region modifikovan tako da ima redukovane fukozne ostatke u poređenju sa ne-modifikovanim molekulom koji vezuje antigen.
Tačka 191: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu navedeni Fc region ima povećanu proporciju oligosaharida podeljenih na dva jednaka dela.
Tačka 192: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu su navedeni modifikovani oligosaharidi podeljeni na dva jednaka dela su kompleks.
Tačka 193: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu navedeni modifikovani oligosaharidi imaju povećanu proporciju podeljenih na dva jednaka dela, nefukozilovanih oligosaharida u Fc regionu navedenog molekula koji vezuje antigen.
Tačka 194: Molekul koji vezuje antigen prema tački 193, pri čemu su navedeni podeljeni na dva jednaka dela, nefukozilovani oligosaharidi hibridni.
Tačka 195: Molekul koji vezuje antigen prema tački 193, pri čemu su navedeni podeljeni na
dva jednaka dela, nefukozilovani oligosaharidi - složeni.
Tačka 196: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu su najmanje 20% oligosaharida u Fc regionu navedenog polipeptida podeljenih na dva jednaka dela, nefukozilovani.
Tačka 197: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu su najmanje 30% oligosaharida u Fc regionu navedenog polipeptida podeljenih na dva jednaka dela, nefukozilovani.
Tačka 198: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemus u najmanje 35% oligosaharida u Fc regionu navedenog polipeptida podeljenih na dva jednaka dela, nefukozilovani.
Tačka 199: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu su najmanje 70% oligosaharida u Fc regionu navedenog polipeptida podeljenih na dva jednaka dela, nefukozilovani.
Tačka 200: Postupak za proizvodnju molekula koji vezuje antigen, koji je sposoban za kompeticiju sa mišjim BLyl antitelom za vezivanje za humani CD20, i pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen - himeran; pri čemu navedeni postupak sadrži
a) kultivisanje ćelije domaćina prema tački 173 ili tački 174 u podlozi pod uslovima koji omogućavaju ekspresiju navedenog polinukleotida koji kodira navedeni molekul koji vezuje
antigen; i
b) dobijanje navedenog molekula koji vezuje antigen.
Tačka 201: Postupak prema tački 200, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen -
antitelo.
Tačka 202: Postupak prema tački 200, pri čemu je navedeni himerni molekul koji vezuje antigen - humanizovan.
Tačka 203: Farmaceutska kompozicija koja sadrži molekul koji vezuje antigen prema bilo kojoj od tačaka 189-199 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
Tačka 204: Farmaceutska kompozicija prema tački 203, pri čemu navedena kompozicija dalje sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač.
Tačka 205: Farmaceutska kompozicija prema tački 203, pri čemu navedena kompozicija dalje sadrži adjuvant.
Tačka 206: Postupak za lečenje poremećaja koji se može lečiti deplecijom B-ćelija, koji sadrži primenu terapeutski efikasne količine farmaceutske kompozicije prema bilo kojoj od
tačaka 203-205 na humanog subjekta kod koga postoji potreba za tim.
Tačka 207: Ćelija domaćin konstruisana tako da eksprimira najmanje jednu nukleinsku kiselinu koja kodira polipeptid koji ima aktivnost P(l,4)-N-acetilglukozaminiltransferaze III u količini koja je dovoljna da modifikuje oligosaharide u Fc regionu polipeptida proizvedenog od strane ćelije domaćina, pri čemu je navedeni polipeptid molekul koji vezuje antigen prema bilo kojoj od tačaka 180-197.
Tačka 208: Ćelija domaćin prema tački 207, pri čemu je navedeni polipeptid koji ima aktivnost p(l,4)-N-acetilglukozaminiltransferaze 111. fuzioni polipeptid.
Tačka 209: Ćelija domaćin prema tački 207, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen
- antitelo.
Tačka 210: Ćelija domaćin prema tački 207, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen
- fragment antitela.
Tačka 211: Ćelija domaćin prema tački 207, pri čemu navedeni molekul koji vezuje antigen sadrži region ekvivalentan Fc regionu humanog IgG.
Tačka 212: Ćelija domaćin prema tački 207, pri čemu navedeni molekul koji vezuje antigen proizveden od strane ćelije domaćina ispoljava povećani afinitet vezivanja Fc receptora kao rezultat navedene modifikacije.
Tačka 213: Ćelija domaćin prema tački 207, pri čemu navedeni molekul koji vezuje antigen proizveden od strane ćelije domaćina ispoljava povećanu efektornu funkciju kao rezultat navedene modifikacije.
Tačka 214: Ćelija domaćin prema tački 208, pri čemu navedeni fuzioni polipeptid sadrži katalitički domen P(l,4)-N-acetilglukozaminiltransferaze III.
Tačka 215: Ćelija domaćin prema tački 208, pri čemu navedeni fuzioni polipeptid dalje sadrži Goldžijev lokalizacioni domen heterolognog Goldžijevog rezidentnog polipeptida.
Tačka 216: Ćelija domaćin prema tački 215, pri čemu je navedeni Goldžijev lokalizacioni domen - lokalizacioni domen manozidaze II.
Tačka 217: Ćelija domaćin prema tački 215, pri čemu je navedeni Goldžijev lokalizacioni domen - lokalizacioni domen (l,2)-N-acetilglukozaminiltransferaze I.
Tačka 218: Ćelija domaćin prema tački 215, pri čemu je navedeni Goldžijev lokalizacioni domen - lokalizacioni domen (1,2)-N- acetilglukozaminiltransferaze II.
Tačka 219: Ćelija domaćin prema tački 215, pri čemu je navedeni Goldžijev lokalizacioni domen - lokalizacioni domen manozidaze I.
Tačka 220: Ćelija domaćin prema tački 215, pri čemu je navedeni Goldžijev lokalizacioni domen - lokalizacioni domen al-6 fukoziltransferaze.
Tačka 221: Ćelija domaćin prema tački 213, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija - povećana ćelijska citotoskičnost posredovana preko Fc.
Tačka 222: Ćelija domaćin prema tački 213, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija - povećano vezivanje za NK ćelije.
Tačka 223: Ćelija domaćin prema tački 213, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija povećano vezivanje za makrofage.
Tačka 224: Ćelija domaćin prema tački 213, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija - povećano vezivanje za polimorfonuklearne ćelije.
Tačka 225: Ćelija domaćin prema tački 213, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija - povećano vezivanje za monocite.
Tačka 226: Ćelija domaćin prema tački 213, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija - povećani direktni prenos signala koji indukuje apoptozu.
Tačka 227: Ćelija domaćin prema tački 213, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija povećano sazrevanje dendritskih ćelija.
Tačka 228: Ćelija domaćin prema tački 213, pri čemu je navedena povećana efektorna funkcija - povećana priprema T ćelija.
Tačka 229: Ćelija domaćin prema tački 212, pri čemu je navedeni Fc receptor - Fc aktivirajući receptor.
Tačka 230: Ćelija domaćin prema tački 212, pri čemu je navedeni Fc receptor - FcyRIIIA receptor.
Tačka 231: Ćelija domaćin prema tački 207, pri čemu je navedena ćelija domaćin - CHO ćelija, BHK ćelija, NSO ćelija, SP2/0 ćelija, YO mijeloma ćelija, P3X63 ćelija mišjeg mijeloma, PER ćelija, PER.C6 ćelija ili hibridoma ćelija.
Tačka 232: Ćelija domaćin prema tački 207, koja dalje sadrži najmanje jedan transficirani polinukleotid koji kodira polipeptid prema bilo kojoj od tačaka 28 i 35-41, i pri čemu navedena nukleinska kiselina sadrži sekvencu koja kodira region ekvivalentan Fc regionu humanog imunoglobulina.
Tačka 233: Ćelija domaćin prema tački 207, pri čemu je navedena najmanje jedna nukleinska kiselina koja kodira polipeptid koji ima aktivnost P(l,4)-N-acetilglukozaminiltransferaze III funkcionalno vezana za konstitutivni promotorski element.
Tačka 234: Ćelija domaćin prema tački 233, pri čemu je navedeni polipeptid koji ima aktivnost P(l,4)-N- acetilglukozaminil transferaze III - fuzioni polipeptid.
Tačka 235: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu su najmanje 50% oligosaharida u Fc regionu - podeljeni na dva jednaka dela.
Tačka 236: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu su najmanje 60% oligosaharida u Fc regionu - podeljeni na dva jednaka dela.
Tačka 237: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu su najmanje 70% oligosaharida u Fc regionu - podeljeni na dva jednaka dela.
Tačka 238: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu su najmanje 80% oligosaharida u Fc regionu - podeljeni na dva jednaka dela.
Tačka 239: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu su najmanje 90% oligosaharida u Fc regionu - podeljeni na dva jednaka dela.
Tačka 240: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu su najmanje 50% oligosaharida u Fc regionu - nefukozilovani.
Tačka 241: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu su najmanje 60% oligosaharida u Fc regionu - nefukozilovani.
Tačka 242: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu su najmanje 70% oligosaharida u Fc regionu - nefukozilovani.
Tačka 243: Molekul koji vezuje antigen prema tački 189, pri čemu su najmanje 75% oligosaharida u Fc regionu - nefukozilovani.
Tačka 244: Postupak prema tački 206, pri čemu je navedeni poremećaj - B ćelijski limfom. Tačka 245: Izolovani polinukleotid koji sadrži najmanje jedan region koji određuje komplementarnost mišjeg BLyl antitela, ili njegovu varijantu ili njegov skraćeni oblik koji sadrži najmanje ostatke koji određuju specifičnost za navedeni region koji određuje komplementarnost, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid kodira fuzioni polipeptid.
Tačka 246: Izolovani polinukleotid prema tački 245, pri čemu je navedeni region koji određuje komplementarnost izabran iz grupe koju čine: [SPISAK SVIH B-Lyl CDR
SEKVENCI].
Tačka 247: Izolovani polinukleotid prema tački 245, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid kodira molekul koji vezuje antigen.
Tačka 248: Izolovani polinukleotid koji sadrži najmanje tri regiona koji određuju komplementarnost mišjeg B-Lyl antitela, ili njihove varijante ili njihove skraćene oblike koji sadrže najmanje ostatke koji određuju specifičnost za svaki od navedena tri regiona koji određuju komplementarnost, pri čemu navedeni izolovani polinukleotid kodira fuzioni polipeptid.
Tačka 249: Izolovani polinukleotid prema tački 248, pri čemu navedeni regioni koji određuju komplementarnost sadrže najmanje jednu sekvencu koja je izabrana iz grupe koju čine: SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6 i SEQ ID NO: 7; i najmanje jednu sekvencu koja je izabrana iz grupe koju čine: SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22 i SEQ ID NO: 23; i SEQ ID NO: 24, ili varijante ili skraćene oblike navedenih sekvenci koji sadrže najmanje ostatke koji određuju specifičnost za svaki od navedenih regiona koji određuju komplementarnost.
Tačka 250: Izolovani polipeptid koji je kodiran od strane izolovanih polinukleotida prema bilo kojoj od tačaka 245-249.
Tačka 251: Molekul koji vezuje antigen koji sadrži najmanje jedan region koji određuje komplementarnost mišjeg B-Lyl antitela, ili njegovu varijantu ili njegov skraćeni oblik koji sadrži najmanje ostatke koji određuju specifičnost za navedeni region koji određuje komplementarnost, i dalje sadrži sekvencu izvedenu iz heterolognog polipeptida.
Tačka 252: Molekul koji vezuje antigen prema tački 251, pri čemu molekul koji vezuje antigen sadrži najmanje tri regiona koji određuju komplementarnost mišjeg B-Lyl antitela, ili njihove varijante ili njihove skraćene oblike koji sadrže najmanje ostatke koji određuju specifičnost za svaki od navedenih regiona koji određuju komplementarnost.
Tačka 253: Molekul koji vezuje antigen prema tački 252, pri čemu navedeni molekul koji vezuje antigen sadrži varijabilni region lakog ili teškog lanca antitela.
Tačka 254: Molekul koji vezuje antigen prema tački 252, pri čemu je navedeni molekul koji vezuje antigen himerno ili humanizovano antitelo.
Tačka 255: Konstruisano anti-CD20 antitelo tipa II koje ima povećanu ADCC kao rezultat navedene konstrukcije bez značajnog gubitka da indukuje apoptozu ciljnih ćelija.
Tačka 256: Konstruisano anti-CD20 antitelo tipa IT prema tački 255, pri čemu je navedeno antitelo konstruisano tako da ima promenjeni obrazac glikozilacije u Fc regionu.
Tačka 257: Konstruisano anti-CD20 antitelo tipa II prema tački 256, pri čemu je navedena promenjena glikozilacija - povećanje količine složenih oligosaharida podeljenih na dva jednaka dela.
Tačka 258: Konstruisano anti-CD20 antitelo tipa II prema tački 256, pri čemu je navedena promenjena glikozilacija - smanjenje količine fukoznih ostataka.
Tačka 259: Konstruisano anti-CD20 antitelo tipa II prema tački 255, pri čemu je navedeno antitelo konstruisano tako da ima promenjenu aminokiselinsku sekvencu u Fc regionu.
[0192] Primeri dati u daljem tekstu detaljnije objašnjavaju pronalazak. Sledeće pripreme i primeri dati su da bi omogućili stručnjacima iz date oblasti tehnike da jasnije razumeju i izvedu predstavljeni pronalazak.
PRIMERI
[0193] [NAPOMENA: Osim ukoliko nije drugačije naznačeno, numeričke oznake položaja posebnih aminokiselinskih ostataka u sledećim Primerima su prema sistemu Kabat numeracije.]
PRIMER 1
Materijal i metode
Kloniranje i ekspresija rekombinantnog antitela B-Lyl
[0194] Hibridoma ćelije koje eksprimiraju B-Lyl uzgajane su u RPMI koja sadrži 10% FBS i 4 mM L-glutamin. 6 x IO<6>ćelija sa vijabilnosti > 90% sakupljeno je i ukupna RNK je izolovana primenom Qiagen RNAeasy midi kompleta. cDNK koje kodiraju varijabilne lake i teške lance B-Lyl amplifikovane su pomoću RT-PCR. Reakcija RT-PCR izvedena je primenom sledećih uslova: 30 min 50°C za sintezu prvog lanca cDNK; 15 min 95°C početna denaturacija; 30 ciklusa od 1 min 94°C, 1 min 45°C, 1.5 min 72°C; i krajnji korak produžavanja 10 min na 72°C. Očekivana veličina PCR proizvoda potvrđena je gel elektroforezom. PCR proizvodi su klonirani u pogodneE. colivektore i DNK sekvenciranje je potvrdilo da su izolovani geni koji kodiraju varijabilni laki i težak lanac.
[0195] Za konstrukciju himernih B-Lyl ekspresionih vektora, sintetičke signalne sekvence i odgovarajuća restrikciona mesta su fuzionisani sa varijabilnim lancima pomoću dodatnih reakcija PCR-a. Posle krajnje potvrde tačne DNK sekvence varijabilnih lanaca, kombinovani su sa odgovarajućim konstantnim regionima humanog IgGl. Pošto su geni konstruisani, klonirani su pod kontrolom MPSV promotora i ushodno od sintetičkog polyA mesta, primenom dva posebna vektora, po jednog za svaki lanac, čime se dobijaju plazmidi pETR1808 (ekspresioni vektor teškog lanca) i pETR1813 (ekspresioni vektor lakog lanca). Svaki vektor nosi EBV OriP sekvencu.
[0196] Himerno B-Lyl proizvedeno je ko-transfekcijom HEK293-EBNA ćelija sa vektorima pETR1808 i pETR1813 primenom kalcijum fosfat-transfekcionog pristupa. Eksponencijalno rastuće HEK293-EBNA ćelije su transficirane pomoću kalcijum fosfatnog postupka. Ćelije su uzgajane kao prijanjajuće jednoslojne kulture u T posudama primenom DMEM podloge za kuluturu dopunjene sa 10%> FCS, i transficirane su kada su bile konfluentne između 50 i 80%>. Za transfekciju T75 posude, 8 miliona ćelija je zasejano 24 časa pre transfekcije u 14 ml DMEM podloge za kulturu koja je dopunjena sa FCS (u 10% zapr./zapr. krajnja), 250 ug/ml neomicina, i ćelije su postavljene na 37°C u inkubator sa 5% CO2atmosferom preko noći. Za svaku T75 posudu koja će biti transficirana, rastvor DNK, CaCb i vode je pripremljen mešanjem 47 ng ukupne plazmidne vektorske DNK podeljene jednako između ekspresionih vektora lakog i teškog lanca, 235 ul IM CaCb rastvora, i dodavanjem vode do krajnje zapremine od 469 ul. Ovom rastvoru dodato je 469 ul 50 mM HEPES, 280 mM NaCl, 1.5 mM Na2HP04 rastvor na pH 7.05, ovo je odmah mešano 10 sekundi i ostavljeno da odstoji na sobnoj temperaturi 20 sekundi. Suspenzija je razblažena sa 12 ml DMEM dopunjenog sa 2% FCS, i dodata u T75 umesto postojeće podloge. Ćelije su inkubirane na 37°C, 5% CO2u trajanju od oko 17 do 20 časova, zatim je podloga zamenjena sa 12 ml DMEM, 10%> FCS. Za proizvodnju nemodifikovanog antitela "chB-Ly 1", ćelije su transficirane samo sa ekspresionim vektorima pETR1808 i pETR1813 antitela u odnosu 1:1. Za proizvodnju gliko-konstruisanog antitela "chB-Ly 1", ćelije su ko-transficirane sa četiri plazmida, dva za ekspresiju antitela (pETR1808 i pETR1813), jedan za ekspresiju fuzionog GnTIII polipeptida (pETR1519) ijedan za ekspresiju manozidaze II (pCLF9) u odnosu od 4:4:1:1, redom. Na dan 5 posle transfekcije, sakupljen je supernatant, centrifugiran je 5 min na 1200 rpm, a zatim je izvršeno drugo centrifugiranje u trajanju od 10 min na 4000 rpm i održavan na 4°C.
[0197] chB-Lyl i chB-Lyl-ge prečišćeni su iz supernatanta kulture primenom tri uzastopna hromatografska koraka, koraka Protein A hromatografije, katjonsko izmenjivačke hromatografije i ekskluzione hromatografije na Superdex 200 koloni (Amersham Pharmacia) izmenom pufera u fosfatno puferisani slani rastvor i sakupljanjem pika monomernog antitela iz ovog poslednjeg koraka. Koncentracija antitela je određena primenom spektrofotometra iz apsorbance na 280 nm.
Oligosaharidna analiza
[0198] Oligosaharidi su enzimatski oslobođeni iz antitela pomoću razlaganja sa PNGaseF, pri čemu su antitela dalje imobilizovana na PVDF membranu ili u rastvoru.
[0199] Dobijeni rastvor koji sadrži oslobođene oligosaharide pripremljen je direktno za MALDI/TOFMS analizu ili je dalje razložen sa EndoH glikozidazom pre pripreme uzoraka za MALDI/TOF-MS analizu.
Postupak oslobađanja oligosaharida za antitela imobilizovana na PVDF membrani
[0200] Komorice 96-komorne ploče napravljene sa PVDF (Immobilon P, Millipore, Bedford, Massachusetts) membranom ovlažene su sa 100 ul metanola i tečnost je izvučena kroz PVDF membranu primenom vakuuma primenjenog na multiskrin vakum kondenzator (Millipore, Bedford, Massachusetts). PVDF membrane su isprane tri puta sa 300 ul vode. Komorice su zatim isprane sa 50 ul RCM pufera (8M Urea, 360 mM Tris, 3.2 mM EDTA, pH 8.6). Između 30-40 mg antitela je sipano u komoricu koja sadrži 10 ul RCM pufera. Tečnost u komorici je izvučena kroz membranu primenom vakuuma, i membrana je zatim isprana dva puta sa 50 ul RCM pufera. Redukcija disulfidnih mostova izvedena je dodavanjem 50 ul 0.1M ditiotreitola u RCM i inkubacijom na 37°C u trajanju od 1 časa.
[0201] Posle redukcije, primenjen je vakuum da bi se uklonio ditiotreitolski rastvor iz komorice. Komorice su isprane tri puta sa 300 ul vode pre izvođenja karboksimetilacije cisteinskih ostataka dodavanjem 50 ul 0.1 M jodosirćetne kiseline u RCM pufer i inkubacijom na sobnoj temperaturi u mraku u trajanju od 30 min.
[0202] Posle karboksimetilacije, komorice su ispražnjene vakuumom i zatim isprane tri puta sa 300 ul vode. PVDF membrana je zatim blokiraba, da bi se sprečila adsorpcija endoglikozidaze, inkubacijom 100 ul 1% vodenog rastvora polivinilpirolidona 360 na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Blokirajući reagens je zatim uklonjen blagim vakuumom, nakon čega su usledila tri ispiranja sa 300 ul vode.
[0203] N-vezani oligosaharidi su oslobođeni dodavanjem 2.5 mU peptid-N-glikozidaze F (rekombinantna N-Glikanaza, GLYKO, Novato, CA) i 0.1 mU Sialidaze (GLYKO, Novato, CA), da bi se uklonili svi potencijalni naelektrisani monosaharidni ostaci, u krajnjoj zapremini od 25 ul u 20 mM NaHCCb, pH 7.0). Razlaganje je izvedeno za 3 časa na 37°C.
Postupak oslobađanja oligosaharida za antitela u rastvoru
[0204] Između 40 i 50 ug antitela je mešano sa 2.5 mU PNGaseF (Glyko, U.S.A.) u 2 mM Tris, pH 7.0 u krajnjoj zapremini od 25 mikrolitara, i mešavina je inkubirana 3 časa na 37°C.
Upotreba razgradnje PNGaseF-oslobođenih oligosaharida endoglikozidazom H za dodelu hibridnih oligosaharidnih struktura podeljenih na dva jednaka dela - MALDI/TOF-MS neutralnim oligosaharidnim pikovima
[0205] PNGaseF-oslobođeni oligosaharidi su zatim razloženi sa endoglikozidazom H (EC 3.2.1.96). Za razlaganje sa endoglikozidazom H, 15 mU endoglikozidaze H (Roche, Switzerland) dodato je u proizvod razgradnje sa PNGaseF (postupak antitela u rastvoru iz prethodnog teksta) da bi se dobila krajnja zapremina od 30 mikrolitara, i mešavina je inkubirana 3 časa na 37°C. Endoglikozidaza H razdvaja N-acetilglukozaminske ostatke od hitobioznog jezgra N-vezanih oligosaharida. Enzim može samo da razloži oligomanozu i najhibridniji tip glikana, pri čemu ologosaharidi složenog tipa nisu hidrolizovani.
Priprema preparata za MALDI/TOF-MS
[0206] Proizvodi enzimatskog razlaganja koji sadrže oslobođene oligosaharide inkubirani su još 3 časa na sobnoj temperaturi posle dodavanja sirćetne kiseline do krajnje koncentracije od 150 mM, i zatim su propušteni kroz 0.6 ml katjonsko izmenjivačke smole (AG50W-X8 smola, vodonični oblik, 100-200 mreža, BioRad, Switzerland) pakovane u mikro-bio-spin hromatografsku kolonu (BioRad, Svvitzerland) da bi se uklonili katjoni i proteini. Jedan mikrolitar dobijenog uzorka je nanet na nerđajuću čeličnu ciljnu ploču, i mešan na ploči sa 1 ul sDHB matriksa. sDHB matriks je pripremljen rastvaranjem 2 mg 2,5-dihidroksibenzoeve kiseline plus 0.1 mg 5-metoksisalicilne kiseline u 1 ml etanola/10 mM vodenog rastvora natrijum hlorida 1:1 (zapr./zapr.). Uzorci su sušeni na vazduhu, dodato je 0.2 ul etanola i uzorci su konačno ostavljeni da rekristališu na vazduhu.
MALDT/TOF-MS
[0207] MALDI-TOF maseni spektrometar je korišćen da bi se dobili maseni spektri Vovager Elite (Perspective Biosvstems). Instrument je radio u linearnoj konfiguraciji, sa ubrzanjem od 20 kV i zadržavanjem od 80 ns. Spoljašnja kalibracija uz upotrebu oligosaharidnih standarda korišćena je za dodeljivanje mase jonima. Spektri od 200 laserskih snopova sabrani su da bi se dobio krajnji spektar.
Deplecija B ćelija cele krvi
[0208] 495 ul heparinizovana krv od zdravog davaoca podeljena u 5 ml polistirenske epruvete, dodato je 5 ul 100-puta koncentrovanih uzoraka antitela (1-1000 ng/ml krajnja koncentracija) ili samo PBS i epruvete su inkubirane na 37°. Posle 24 časa, 50 ul krvi je prebačeno u novu epruvetu i obojeno sa anti-CD3-FITC, anti-CD19-PE i anti-CD45-CvChrome (Becton-Dickinson) za 15 min na sobnoj temperaturi u mraku. Pre analize, 500 ul FACS pufera (PBS koji sadrži 2% FCS i 5 mM EDTA) dodato je u epruvete. CD3-FITC i CD 19-PE fluorescencija uzoraka krvi analizirana je protočnom citometrijom postavljanjem praga na CD45-CyChrome. Deplecija B ćelija je određena postavljanjem na grafikon odnosa CD19<+>B ćelija prema CD3<+>T ćelijama.
Vezivanje anti-CD20 antitela za Raji ćelije
[0209] 500.000 u 180 ul FACS pufera (PBS koji sadrži 2% FCS i 5 mM, EDTA) prebačeni su u 5 ml polistirenske epruvete i dodato je 20 ul 10-puta koncentrisanog anti-CD20 antitela (1-5000 ng/ml krajnja koncentracija) ili samo PBS i epruvete su inkubirane na 4°C 30 min. Zatim, uzorci su isprani dva puta sa FACS puferom i istaloženi na 300 x g u trajanju od 3 min. Supernatant je usisan i ćelije su sipane u 100 €>1 FACS pufer i dodat je 1 ml anti-Fc-specifičnih F(ab')2-FITC fragmenata (Jackson Immuno Research Laboratories, USA) i epruvete su inkubirane na 4°C 30 min. Uzorci su isprani dva puta sa FACS puferom i sipani u 500 ml FACS pufera koji sadrži 0.5 ug/ml PI za analizu pomoću protočne citometrije. Vezivanje je određeno pravljenjem grafikona geometrijske sredine fluorescencije prema koncentracijama antitela.
PRIMER 2
Pristup sa akceptorom visoke homologije
[0210] Ispitivanje visoke homologije akceptorskog okvirnog regiona antitela, izvedeno je poravnavanjem mišje B-lyl proteinske sekvence sa zbirkom sekvenci humane germinativne linije i biranjem te humane sekvenca koja je pokazala najveću identičnost sekvenci. Ovde, sekvenca VH110 iz VBase baze podataka izabrana je kao okvirna akceptorska sekvenca teškog lanca, i VK240 sekvenca je izabrana kao okvirni akceptor za laki lanac. Na ova dva akceptorska okvirna regiona, graftovana su tri regiona koj određuju komplementarnost (CDRs) mišjih varijabilnih domena lakog i teškog lanca. S obzirom na to da okvirni region 4 nije deo varijabinog regiona V gena germinativne linije, poravnanje za taj položaj izvedeno je pojedinačno. JH4 region je izabran za težak lanac, i JK4 region je izabran za lak lanac. Molekularno modeliranje dizajniranog imunoglobulinskog domena otkrilo je jednu tačku koja potencijalno zahteva mišje aminokiselinske ostatke umesto humanih izvan CDR. Ponovno uvođenje mišjih aminokiselinskih ostataka u humani okvirni region stvorilo bi takozvane povratne mutacije. Na primer, humani akcpetorski aminokiselinski ostatak na Kabat položaju 27 je povratno mutiran u tirozinski ostatak. Humanizovane varijante antitela su dizajnirane tako da ili obuhvataju ili nemaju povratne mutacije. Laki lanac humanizovanog antitela ne zahteva nikakve povratne mutacije. Posle dizajniranja proteinskih sekvenci, DNK sekvence koje kodiraju ove proteine sintetisane su kao što je detaljno opisano u daljem tekstu.
Pristup sa mešovitim okvirnim regionima
[0211] U cilju da se izbegne uvođenje povratnih mutacija na kritičnim položajima aminokiselinskih ostataka (kritični za održavanje dobrog afiniteta vezivanja antigena ili funkcija antitela) humanog akspetorskog okvirnog regiona, ispitivano je da li ceo okvirni region 1 (FR1), ili okvirni regioni 1 (FR1) i 2 (FR2) zajedno, mogu biti zamenjeni sekvencama humanog antitela koja već ima donorske ostatke, ili funkcionalno ekvivalentne, na onim značajnim položajima u prirodnoj humanoj sekvenci germinativne linije. Za ovu svrhu, VH okvirni regioni 1 i 2 mišje Blyl sekvence poravnati su pojedinačno sa sekvencama humane germinativne linije. Ovde, najveća identičnost sekvenci nije bila značajna, i nije korišćena za izbor akceptroskih okvirnih regiona, već je usmesto toga pretpostavljeno da je poklapanje nekoliko kritičnih ostataka značajnije. Ti kritični ostaci sadrže ostatke 24, 71 i 94 (Kabat numeracija), i takođe one ostatke na položaju 27, 28 i 30 (Kabat numeracija), koji leže izvan CDR1 definicije po Kabat-u, ali često su uključeni u vezivanje antigena. TMGT sekvenca VH3 315 izabrana je kao pogodna. Posle dizajniranja proteinskih sekvenci, DNK sekvence koje kodiraju ove proteine sintetisane su kao što je detaljno opisano u daljem tekstu. Primenom ovog pristupa nisu potrebne povratne mutacije ni za laki niti za težak lanac, u cilju zadržavanja dobrih nivoa vezivanja antigena.
Sinteza gena antitela
[0212] Posle dizajniranja aminokiselinske sekvence V regiona humanizovanog antitela, DNK sekvenca mora biti stvorena. Podaci o DNK sekvenci pojedinačnih okvirnih regiona nađeni su u bazama podataka za sekvence humane germinativne linije. DNK sekvenca CDR regiona je uzeta iz podataka za odgovarajuću mišju cDNK. Sa ovim sekvencama, cela DNK sekvenca je virtuelno sklopljena. Imajući podatke o ovoj DNK sekvenci, dijagnostička restrikciona mesta su uvedena u virtuelnu sekvencu, uvođenjem „tihih" mutacija, stvaranjem mesta prepoznavanja za restrikcione endonukleaze. Da bi se dobio fizički lanac DNK, izvedena je sinteza gena (npr., Wheeler et al. 1995). U ovom postupku, oligonukleotidi su dizajnirani od gena od interesa, tako da je serija oligonukleotida izvedena iz kodirajućeg lanca, a druga serija je iz ne-kodirajućeg lanca. 3' i 5' krajevi svakog oligonukleotida (osim prvog i poslednjeg u nizu) uvek pokazuju komplementarne sekvence sa dva prajmera izvedena iz suprotnog lanca. Kada se ovi oligonukleotidi stave u reakcioni pufer pogodan za bilo koju polimerazu koja je stabilna na toploti, i dodavanjem Mg<2+>, dNTP i DNK polimeraze, svaki oligonukleotid je produžen od svog 3' kraja. Novo-formirani 3' kraj jednog prajmera zatim se spaja sa sledećim prajmerom suprotnog lanca, i dalje produžava svoju sekvencu pod uslovima pogodnim za produženje DNK lanca zavisno od obrasca. Krajnji proizvod je kloniran u uobičajeni vektor za širenjeu E. coli.
Proizvodnja antitela
[0213] Vodeće sekvence humanog teškog i lakog lanca (za sekreciju) dodate su ushodno od prethodnih sekvenci varijabilnog regiona i one su zatim spojene ushodno od sekvenci humanog IgGl kapa konstantnog teškog i lakog lanca, redom, primenom standardnih tehnika molekularne biologije. Dobijene DNK sekvence teškog i lakog lanca celog antitela sub-klonirane su u sisarske ekspresione vektore (jedan za lak lanac i jedan za težak lanac) pod kontrolom MPSV promotora i ushodno od sintetičkog polyA mesta, pri čemu svaki vektor nosi EBV OriP sekvencu, kao što je opisano u Primeru 1 iz prethodnog teksta. Antitela su proizvedena kao što je opisano u Primeru 1 u prethodnom tekstu, i to ko-transfekcijom HEK293-EBNA sa ekspresionim vektorima teškog i lakog lanca sisarskog antitela, sakupljanjem kondicionirane podloge za kulturu 5 do 7 dana posle infekcije, i prečišćavanjem izlučenih antitela pomoću Protein A afinitetne hromatografije, nakon čega sledi katjonsko izmenjivačka hromatografija i krajnji korak ekskluziona hromatografija da bi se izolovala čista monomerna IgGl antitela. Antitela su formulisana u 25 mM kalijum fosfatu, 125 mM natrijum hloridu, 100 mM rastvoru glicina od pH 6.7. Gliko-konstruisane varijante humanizovanih varijanti antitela proizvedene su ko-transfekcijom ekspresionih vektora antitela zajedno sa ekspresionim vektorima GnT-III glikoziltransferase, ili zajedno sa ekspresionim vektorom GnT-III plus ekspresionim vektorom Goldžijeve manozidaze II, kao što je opisano za himerno antitelo u Primeru 1 u prethodnom tekstu. Gliko-konstruisana antitela su prečišćena i formulisana kao što je opisano u prethodnom tekstu za ne-gliko-konstruisana antitela. Oligosaharidi vezani za Fc region antitela analizirani su pomoću MALDI/TOFMS kao što je opisano u daljem tekstu.
Analiza oligosaharida
[0214] Postupak oslobađanja oligosaharida za antitela u rastvoru Između 40 i 50 ug antitela mešano je sa 2.5 mU PNGaseF (Glyko, U.S.A.) u 2 mM Tris, pH 7.0 u krajnjoj zapremini od 25 mikrolitara, i mešavina je inkubirana 3 časa na 37°C.
Priprema preparata za MALDI/TOF-MS
[0215] Proizvodi enzimatskog razlaganja koji sadrže oslobođene oligosaharide inkubirani su dodatnih 3 časa na sobnoj temperaturi posle dodavanja sirćetne kiseline do krajnje koncentracije od 150 mM, i zatim su propušteni kroz 0.6 ml katjonsko izmenjivačke smole (AG50W-X8 smola, vodonični oblik, 100-200 mreža, BioRad, Svvitzerland) pakovane u mikro-bio-spin hromatografsku kolonu (BioRad, Switzerland) da bi se uklonili katjoni i proteini. Jedan mikrolitar dobijenog uzorka je nanet na nerđajuću čeličnu ciljnu ploču, i mešan na ploči sa 1 ul sDHB matriksa. sDHB matriks je pripremljen rastvaranjem 2 mg 2,5-dihidroksibenzoeve kiseline plus 0.1 mg 5-metoksisalicilne kiseline u 1 ml etanola/10 mM vodenom rastvoru natrijum hlorida 1:1 (zapr./zapr.). Uzorci su sušeni na vazduhu, dodato je 0.2 ul etanola, i uzorci su konačno ostavljeni da rekristališu na vazduhu.
MALDI/TOF-MS
[0216] MALDI-TOF maseni spektrometar korišćen za dobijanje masenih spektara bio je Vovager Elite (Perspective Biosystems). Instrument je radio u linearnoj konfiguraciji, sa ubzanjem od 20 kV i zadržavanjem od 80 ns. Spoljašnja kalibracija uz primenu oligosaharidnih standarda korišćena je za dodelu mase jonima. Spektri od 200 laserskih snopova sabrani su da bi se dobio krajnji spektar.
Test vezivanja antigena
[0217] Prečišćene, monomerne humanizovane varijante antitela testirane su za vezivanje za humani CD20 na ciljnim ćelijama Raji B-ćelijskog limfoma primenom testa na bazi protočne citometrije, kao što je opisano za himerno B-lyl antitelo u Primeru 1 u prethodnom tekstu.
Vezivanje monomernih IgGl glikovarijanti za NK ćelije i CHO ćelijsku liniju koja eksprimira FchRIIIA
[0218] Humane NK ćelije su izolovane iz sveže izolovanih mononuklearnih ćelija periferne krvi (PBMC) primenom negativne selekcije za CD 16-i CD56-pozitivne ćelije (MACS svstem, Miltenvi Biotec GmbH, Bergisch Gladbach/Germanv). Čistoća određena preko ekspresije CD56 bila je između 88-95%. Sveže izolovane NK ćelije su inkubirane u PBS bez jona kalcijuma i magnezijuma (3 x IO<5>ćelija/ml) u trajanju od 20 minuta na 37°C da bi se uklonio IgG vezan za NK ćelije. Ćelije su inkubirane u IO<6>ćelija/ml u različitim koncentracijama anti-CD20 antitela (0, 0.1, 0.3, 1, 3, 10 ug/ml) u PBS, 0.1% BSA. Posle nekoliko ispiranja, vezivanje antitela je detektovano inkubacijom sa 1:200 FITC-konjugovanim F(ab')2 kozjim anti-humanim, F(ab')2 specifičnim IgG (Jackson ImmunoReasearch, West Grove, PA/USA) i anti-humanim CD56-PE (BD Biosciences, Allschwil/Switzerland). Anti-Fc-gama RIIIA 3G8 F(ab')2 fragmenti (Ancell, Bavport, MN/USA) dodati su u koncentraciji od 10 ug/ml da bi bili u kompeticiji za vezivanje glikovarijanti antitela (3 ug/ml). Intenzitet fluorescencije koji se odnosi na vezane varijante antitela određen je za CD56-pozitivne ćelije na FACSCalibur (BD Biosciences, Allschwil /Switzerland). CHO ćelije su transficirane elektroporacijom (280 V, 950 uF, 0.4 cm) sa ekspresionim vektorom koji kodira Fc gamaRIIIA-Vall58 a-lanac iy-lanac. Transfektanti su selekcionisani dodavanjem 6 ug/ml puromicina i stabilni klonovi su analizirani pomoću FACS primenom 10 ul FTTC-konjugovanog-anti-Fc-gamaRTTT 3G8 monoklonalnog antitela (BD Biosciences, Allschwil/Switzerland) za IO<6>ćelija. Vezivanje IgGl za CHO ćelije koje eksprimiraju Fc gamaRIIIAVall58 izvedeno je analogno vezivanju NK ćelije koje je opisano u prethodnom tekstu.
Test ADCC
[0219] Humane mononuklearne ćelije periferne krvi (PBMC) korišćene su kao efektorne ćelije i pripremljene su primenom Histopaque-1077 (Sigma Diagnostics Inc., St. Louis, M063178 USA) i praćenjem u glavnim crtama uputstava proizvođača. Ukratko, venska krv je uzeta sa heparinizovanim špricevima od dobrovoljaca. Krv je razblažena 1:0.75-1.3 sa PBS (ne sadrži Ca<++>ili Mg<++>) i prevučena na Histopaque-1077. Gradijent je centrifugiran na 400 x g u trajanju od 30 min na sobnoj temperaturi (RT) bez prekida. Razdelna površina koja sadrži PBMC sakupljena je i isprana sa PBS (50 ml po ćelijama iz dva gradijenta) i sakupljena centrifugiranjem na 300 x g u trajanju od 10 minuta na sobnoj temperaturi. Posle resuspendovanja taloga sa PBS, PBMC su brojane i isprane drugi put centrifugiranjem na 200 x g u trajanju od 10 minuta na sobnoj temperaturi. Ćelije su zatim resuspendovane u odgovarajuću podlogu za kasnije procedure.
[0220] Odnos efektornih i ciljnih ćelija koji je korišćen za testove ADCC bio je 25:1 i 10:1 za PBMC i NK ćelije, redom. Efektorne ćelije su pripremljene u AIM-V podlozi u odgovarajućoj koncentraciji u cilju dodavanja 50 ul po komorici sa okruglim dnom 96-komornih ploča. Ciljne ćelije su ćelije humanog B limfoma (npr., Raji ćelije) uzgajane u DMEM koji sadrži 10% FCS. Ciljne ćelije su isprane u PBS, izbrojane i resuspendovane u AIM-V na 0.3 miliona po ml u cilju dodavanja 30 000 ćelija u 100 ul po mikrokomorici. Antitela su razblažena u AIM-V, dodata po 50 ul u prethodno postavljene na ploču ciljne ćelije i ostavljena da se vežu za ciljna mesta 10 minuta na sobnoj temperaturi. Zatim, efektorne ćelije su dodate i ploča je inkubirana 4 časa na 37°C u vlažnoj atmosferi koja sadrži 5% CO2. Ubijanje ciljnih ćelija je procenjeno merenjem oslobađanja laktat dehidrogenaze (LDH) iz oštećenih ćelija primenom kompleta za detekciju citotoksičnosti (Roche Diagnostics, Rotkreuz, Switzerland). Posle 4-časovne inkubacije, ploče su centrifugirane na 800 x g. 100 ul supernatanta iz svake komorice prebačeno je u novu 96-komornu ploču sa providnim ravnim dnom. 100 ul obojenog supstratnog pufera iz kompleta dodato je po komorici. Vmax vrednosti reakcije boje određivane su u ELISA čitaču na 490 nm najmanje 10 min primenom SOFTmax PRO softvera (Molecular Devices, Sunnyvale, CA94089, USA). Spontano oslobađanje LDH mereno je iz komorica koje sadrže samo ciljne i efektorne ćelije, ali ne i antitela. Maksimalno oslobađanje je određeno iz komorica koje sadrže samo ciljne ćelije i 1% Triton X-100. Procenat ubijanja ćelija posredovanog preko specifičnog antitela izračunat je na sledeći način: ((x-SR)/(MR - SR)* 100, gde je x srednja vređnost za Vmax na specifičnoj koncentraciji antitela, SR je srednja vrednost za Vmax spontanog oslobađanja i MR je srednja vrednost za Vmax maksimalnog oslobađanja.
Test citotoksičnosti zavisne od komplementa
[0221] Ciljne ćelije su brojane, isprane sa PBS, resuspendovane u AIM-V (Invitrogen) na 1 milion ćelija po ml. 50 ul ćelija je sipano po komorici u 96-komornu ploču sa ravnim dnom. Razblaženja antitela pripremljena su u AIM-V i dodata po 50 ul u ćelije. Antitela su ostavljena da se vežu za ćelije u trajanju 10 minuta na sobnoj temperaturi. Komplement humanog seruma (Quidel) sveže je otopljen, razblažen 3-puta sa AIM-V i dodat u komorice po 50 ul. Zečji komplement (Cedarlane Laboratories) je pripremljen kao što je opisao proizvođač, razblažen 3-puta sa AIM-V i dodat u komorice od po 50 ul. Kao kontrola, izvori komplementa su zagrevani 30 min na 56°C pre dodavanja u test. Test ploče su inkubirane 2 časa na 37°C. Ubijanje ćelija je određeno merenjem oslobađanja LDH. Ukratko, ploče su centrifugirane na 300 x g u trajanju od 3 min. 50 ul supernatanta po komorici prebačeno je u novu 96-komornu ploču i dodato je 50 ul test reagensa iz kompleta za citotoksičnost (Roche). Kinetičko merenje sa ELISA čitačem odredilo je Vmax koja odgovara koncentraciji LDH u supernatantu. Maksimalno oslobađanje određeno je inkubacijom ćelija u prisustvu 1% Trition X-100.
Test deplecije B-ćelija cele krvi
[0222] Deplecija normalnih B-ćelija u celoj krvi od strane anti-CD20 antitela izvedena je kao stoje opisano u Primeru 1 u prethodnom tekstu.
Test apoptoze
[0223] Apoptotička potencija antitela testirana je inkubacijom antitela u 10 ug/ml (uslovi zasićenja u vezi sa vezivanjem antitela) sa ciljnim ćelijama (u koncentraciji ciljne ćelije od 5 x 10<5>ćelija/ml) preko noći (16-24 časa). Uzorci su obojeni sa AnnV-FITC i analizirani pomoću FACS. Test je izveden u po tri kopije.
[0224] Detekcija je izvedena protočnom citometrijom praćenjem izgleda apoptotičkih markera kao što je aneksin V i fosfatidil serin. Negativna kontrola (bez indukcije apoptoze) ne sadrži nikakvo antitelo, već samo fosfatno puferisani slani rastvor. Pozitivna kontrola (maksimalna apoptoza) sadrži 5 mikromola snažnog induktora apoptoze kamptotecina (CPT).
Rezultati i diskusija
[0225] Poređenje vezivanja za humani CD20 antigen varijanti antitela B-HH1, B-HH2, B-HH3, bilo u kompleksu sa himernim B-lyl lakim lancem (mVL, kao što je opisano u Primeru 1 u prethodnom tekstu) ili sa humanizovanim B-lyl lakim lancem (KV1), i matičnim, himernim antitelom chB-lyl (opisano u Primeru 1 u prethodnom tekstu) pokazuje da sva antitela imaju sličnu EC50 vrednost, ali B-HH1 konstrukt vezuje sa nižim intenzitetom/stehiometrijom od varijanti B-HH2 i B-HH3 (Slika 11). B-HH1 može se razlikovati od B-HH2 i B-HH3 po njegovim delimično humanim CDR1 i CDR2 regionima
(Kabat definicija), kao i Ala/Thr polimorfizmu na položaju 28 (Kabat numeracija). Ovo ukazuje da su položaj 28, ceo CDR1, i/ili ceo CDR2 značajni za interakciju antitela/antigena.
[0226] Poređenje B-HL1, B-HH1 i himernog chB-lyl matičnog antitela pokazalo je odsustvo bilo kakve aktivnosti vezivanja u B-HL1 konstruktu, i oko polovinu intenziteta/stehiometrije vezivanja B-HH1 u poređenju sa B-lyl (Slika 12). I B-HL1 kao i B-HH1 su dizajnirani na osnovu akceptorskih okvirnih regiona izvedenih iz humane VH1 klase. Među drugim razlikama, položaj 71 (Kabat numeracija; Kabat položaj 71 odgovara položaju 72 SEQ ID NO: 48) B-HL1 konstrukta je upadljiva razlika, što ukazuje na njegov pretpostavljeni značaj za vezivanje antigena.
[0227] Prilikom poređenja rezultata vezivanja antigena sa Slika 9 do 13, BHH2-KV1, BHLB-KV1 i BHL11-KV1 varijante pokazuju najbolji afinitet vezivanja, među različitim humanizovanim varijantama antitela koje su testirane, za humani CD20 na površini humanih ćelija. Razlike između B-HH2, sa jedne strane, i B-HL8 i B-HL11 sa druge strane, nalaze se samo u FR1 i FR2 regionima, sa sva tri identična CDR regiona (uporediti, npr., SEQ ID NO: 32, 56 i 60, koje nisu numerisane prema Kabat-u, ali čiju Kabat numeraciju lako može odrediti stručnjak iz date oblasti tehnike). B-HL8 i B-HL11 imaju svoje FR1 i FR2 sekvence izvedene iz humane VH3 klase, pri čemu je ceo B-HH2 okvirni region - izveden iz humanog VH1. B-HL11 je derivat B-HL8 sa jednom mutacijom GlulGln (položaj 1 je isti i u Kabat numeraciji i u uobičajenom sistemu numeracije koji se koristi za listing sekvenci), pri čemu je Gln aminokiselinski ostatak u B-HH2 konstruktu. Ovo znači da GlulGln izmena ne menja afinitet ili intenzitet vezivanja. Druge razlike između B-HH2 i B-HL8 su 14 okvirnih ostataka, od kojih će jedan ili više da utiču na na ponašanje vezivanja antigena ovog antitela.
[0228] B-HL4 konstrukt je izveden od B-HH2 antitela zamenom FR1 iz B-HH2 sa onim od sekvence VH145 humane germinativne linije. Ovaj konstrukt pokazuje veoma smanjen kapacitet vezivanja antigena, uprkos tome što ima različite aminokiseline na samo tri položaja unutar FR1. Ovi ostaci se nalaze na položajima 2, 14 i 30 (Kabat numeracija). Od njih, položaj 30 mogao bi biti uticajan položaj, s obzirom na to da je deo Chothia definicije za CDR1. Ukupna analiza svih krivih vezivanja sa Slika 9 do 13 ukazuje na to da su sledeći ostaci humanizovanog B-lyl teškog lanca (Kabat numeracija) značajni za vezivanje za CD20: N35 (kraj Kabat CDR1), ceo Kabat CDR1, ceo Kabat CDR2 i ceo Kabat CDR3, ostaci A71 i R94 (u ovom slučaju R94 ne može biti zamenjen treoninom) i Y27. A28 i S30 takođe doprinose, ali u manjem stepenu. Pored toga, Kabat CDR3 i svi pravilni ostaci su značajni za vezivanje antigena. Povratne mutacije nisu uvedene u humanizovani laki lanac, koji ima graftovan ceo Kabat CDR1, CDR2 i CDR3. Pri indukciji apoptoze (Slike 14, 15 i 21), najpotentnija varijanta je humanizovana B-lyl varijanta BHH2-KV1 (čak potentnija od originalnog chB-lyl i mnogo više potentnija od antitela sa sekvencom identičnom rituksimabu, C2B8). Druge humanizovane varijante (derivati BHL8) koje mogu da imaju povećanu apoptozu su: BHL12 do B-HL17 (videti Tabelu) i BHH8 (mešoviti okvirni regioni) i BHH9 ("mešoviti okvirni regioni" sa jednom povratnom mutacijom, S30T). Položaji 9 i 48 (Kabat numeracija) mogu da budu u konatktu sa antigenom. Varijante BHH4 do BHH7 su druge humanizovane B-lyl varijante koje ne uvode dodatne ne-humane sekvence.
[0229] Značajne osobine humanizovanog B-lyl antitela su daje to anti-CD20 antitelo tipa 11 kao što je definisano u Cragg, M.S. and Glennie, M.J., Blood 103(7):2738-2743 (April 2004). Ono prema tome ne indukuje, posle vezivanja sa CD20, nikakvu značajnu otpornost na ekstrakciju CD20 ne-jonskim deterdžentom sa površine CD20<+>humanih ćelija, primenom testa opisanog za ove svrhe u Polyak, M.J. and Deans, J.P., Blood 99(9):3256-3262 (2002). Ono je sigurno indukovalo značajno manju otpornost na ekstrakciju CD20 ne-jonskim deterdžentom nego što je to slučaj kod C2B8 antitela (drugo anti-CD20 antitelo sa identičnom sekvencom rituksimabu, (Videti SAD pat. obj. br. 2003 0003097 to Reff). Kao što se očekuje od anti-CD20 antitela tipa II, humanizovano B-lyl nije imalo nikakvu značajnu aktivnost liziranja posredovanu preko komplementa i sigurno veliku aktivnost liziranja posredovanu preko komplementa u odnosu na anti-CD20 antitelo C2B8 (himerni IgGl sa identičnom sekvencom kao rituksimab). Sledeća značajna osobina humanizovanog B-lyl antitela je ta što je ono veoma potentno u testu homotipske agregacije. U ovom testu, CD20-pozitivne humane ćelije, Daudi ćelije, inkubirane su u podlozi za ćelijsku kulturu do 24 časa na 37°C u atmosferi sa 5%C02u inkubatoru za sisarske ćelije kao što je detaljno opisano u (Deans-ovom radu), sa antitelom u koncentraciji od 1 mikrograma po ml i paralelno u koncentraciji od 5 mikrograma po ml. Za poređenje, kontrola, paralelna inkubacija ćelija izvedene su pod identičnim uslovima ali uz primenu anti-CD20 antitela C2B8. U različitim vremenskim tačkama, uključujući 8 časova i 24 časa inkubacije, ćelije su pregledane vizuelno primenom mikroskopa. Nađeno je da je humanizovano B-lyl antitelo dovelo do snažne homotipske agregacije, sa agregatima koji su značajno veći on onih indukovanih dodavanjem C2B8 kontrolnog antitela. Pored toga, i u skladu sa antitelom koje je anti-CD20 tip II, indukovalo je više nivoe apoptoze kada su CD20-pozitivne humane ćelije inkubirane sa humanizovanim B-lyl antitelom, u odnosu na kontrolu pod identičnim uslovima primenom C2B8 himernog IgGl antitela sa identičnom sekvencom kao rituksimab.
[0230] Gliko-konstruisane varijante humanizovanih antitela proizvedene su ko-ekspresijom GnTIII glikoziltransferaze, zajedno sa genima antitela, u sisarskim ćelijama. Ovo je dovelo do povećanja u frakciji ne-fukozilovanih oligosaharida vezanih za Fc region antitela, uključujući ne-fukozilovane oligosaharide podeljene na dva jednaka dela, kao što je opisano u WO2004/065540 (Slike 17-19). Gliko-konstruisana antitela imala su značajno više nivoe vezivanja za humane Fc gamaRIII receptore (Slika 20) i takođe aktivnost ADCC (Slika 16), u odnosu na ne-gliko-konstruisano antitelo i u odnosu na C2B8 antitelo. Humanizovano B-lyl antitelo je takođe bilo potentnije u indukciji deplecije humanih B-ćelija u testu cele krvi (Slika 16) od kontrolnog C2B8 antitela. Ovo je tačno kako za ne-gliko-konstruisano B-lyl antitelo tako i za njegovu gliko-konstruisanu verziju. Gliko-konstruisano antitelo bilo je približno 1000-puta potentnije od C2B8 kontrolnog anti-CD20 antitela u depleciji B-ćelija u testu cele krvi. Ovo poređenje je značajno kako za ne-gliko-konstruisane tako i za gliko-konstruisane humanizovane oblike B-lyl antitela, zbog toga što je ono pokazalo da su u testovima gde su kombinovane aktivnosti zavisne od Fc receptora, kao što je ADCC, plus liza posredovana preko komplementa, plus indukcija apoptoze, oba oblika B-lyl bila značajno potentnija od C2B8, iako oba oblika B-lyl imaju izrazito nižu aktivnost lize posredovanu preko komplementa. ADCC, aktivnosti ubijanja ćelija zavisne od Fc receptora i indukcija apoptoze bili su prisutni u ovoj boljoj aktivnosti varijanti humanizovanog B-lyl antitela. Pored toga, u testu apoptoze, i gliko-konstruisani i ne-gliko-konstruisani oblici ovog tipa II anti-CD20 antitela bili su potentni, pri čemu su Fc-konstruisane varijante sa povećanim afinitetom vezivanja za Fc gama receptore čak potentnije u indukciji apoptoze od ne-Fc-konstruisane varijante, i pri čemu su sve varijante značajno potentnije od kontrolnog antitela. Tačan mehanizam za povećanu homotipsku agregaciju i indukciju apoptoze posredovanu preko anti-CD20 antitela tipa II nije poznat i prateće vezivanje za druge molekule na površini CD20-pozitivnih ćelija, kao što su Fc gama receptori, može da utiče na ovu značajnu osobinu. Prema tome, značajno je pokazati da su anti-CD20 antitela tipa II koja su konstruisana u svom Fc regionu za povećani afinitet vezivanja za Fc gama receptore, uključujući Fc gamaRIII i sa povezanim povećanjem u ADCC aktivnosti, još uvek bila sposobna da indukuju jaku apoptozu, čak više nego ne-Fc-konstruisana, i homotipsku agregaciju. Indukcija apoptoze je značajnain vivo,jer postoje mesta u telu gde se mogu naći ciljne CD20-pozitivne ćelije, ali gde je pristup Fc gamaRIII-pozitivnim ćelijama teži nego u krvi, takva mesta su, na primer, limfni čvorovi. Na ovim mestima, indukcija apoptoze samim anti-CD20 antitelom može biti kritična za dobru efikasnost terapije anti-CD20 antitelom kod ljudi, kako za lečenje hematoloških maligniteta kao što su ne-Hočkin-ovi limfomi i B-ćelijska hronična limfocitna leukemija, tako i za lečenje autoimunih bolesti kao što je reumatoidni artritis i lupus putem pristupa deplecije B-ćelija. Povećani afinitet vezivanja za Fc gamaRIII i viša ADCC humanizovanog, Fc-konstruisanog anti-CD20 antitela tipa II takođe može biti veoma značajna karakteristika takvih terapija. Konačno, smanjena ili neznatna aktivnot lize posredovana preko komplementa ovih anti-CD20 antitela tipa II, uključujući humanizovane i Fc-konstruisane varijante, takođe može biti značajna jer je veća aktivacija komplementa od strane anti-CD20 antitela povezana sa povećanim, neželjenim sporednim efektima.

Claims (23)

1. Humanizovano anti-CD20 antitelo tipa II koje sadrži (a) varijabilni region teškog lanca koji sadrži SEQ ID NO:32 ili varijabilni region teškog lanca koji sadrži SEQ ID NO: 32 koji sadrži supstituciju M34I, i (b) varijabilni region lakog lanca koji sadrži SEQ ID NO:76.
2. Antitelo prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time navedeno antitelo sadrži varijabilni region teškog lanca SEQ ID NO: 40.
3. Ekspresioni vektor koji sadrži polinukleotid koji kodira varijabilni region teškog lanca prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2 i polinukleotid koji kodira varijabilni region lakog lanca prema patentnom zahtevu 1.
4. Vektor prema patentnom zahtevu 3, koji je policistronski.
5. Ćelija domaćin koja sadrži ekspresioni vektor prema patentnom zahtevu 3 ili patentnom zahtevu 4 ili polinukleotid koji kodira varijabilni region teškog lanca prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2 i polinukleotid koji kodira varijabilni region lakog lanca prema patentnom zahtevu 1.
6. Ćelija domaćin prema patentnom zahtevu 5, naznačena time što je navedena ćelija domaćin konstruisana tako da eksprimira najmanje jednu nukleinsku kiselinu koja kodira polipeptid koji ima aktivnost P(l,4)-N-acetilglukozilaminiltransferaze III.
7. Ćelija domaćin prema patentnom zahtevu 6, naznačena time što, navedeni polipeptid koji ima aktivnost P(l,4)-N-acetilglukozilaminiltransferaze III je fuzioni polipeptid koji dalje sadrži Goldži lokalizacioni domen heterolognog Goldži rezidentnog polipeptida.
8. Ćelija domaćin prema patentnom zahtevu 7, naznačena time što je navedeni domen lokalizacije Goldžijevog kompleksa izabran od lokalizacionog domena manozidaze II, lokalizacionog domena (3(l,2)-N-acetilglukozaminiltransferaze I, |3(1,2)-N-acetilglukozaminiltransferaze II, manozidaze I ili al-6 jezgra fukoziltransferaze.
9. Postupak za proizvodnju humanizovanog anti-CD20 antitela tipa II prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2 koji sadrži kultivisanje ćelije domaćina prema bilo kom od patentnih zahteva 5 do 8 pod uslovima koji omogućavaju proizvodnju navedenog antitela i izolaciju navedenog antitela iz navedene kulture.
10. Humanizovano anti-CD20 antitelo tipa II, naznačeno time što je antitelo dobijeno pomoću postupka prema patentnom zahtevu 9.
11. Antitelo prema bilo kom od patentnih zahteva 1, 2 ili 10, ili dobijeno pomoću postupka prema patentnom zahtevu 9, naznačeno time što navedeno antitelo sadrži glikoinženjeringom dobijen Fc region.
12. Antitelo prema patentnom zahtevu 11, naznačeno time što navedeno antitelo ima povećanje u frakciji ne-fukozilovanih oligosaharida vezanih za navedeni glikoinženjeringom dobijeni Fc region.
13. Antitelo prema patentnom zahtevu 11, naznačeno time što navedeno antitelo ima povećanje u frakciji podeljenih na dva jednaka dela, ne-fukozilovanih oligosaharida vezanih za navedeni glikoinženjeringom dobijeni Fc region.
14. Antitelo prema patentnom zahtevu 11, naznačeno time što navedeno antitelo ima značajano više nivoe vezivanja za humane FcgamaRIIT receptore u odnosu na antitelo koje nije dobijeno glikoinženjeringom.
15. Antitelo prema patentnom zahtevu 11, naznačeno time što navedeno antitelo ima značajno više nivoe ADCC aktivnosti u odnosu na antitelo koje nije dobijeno glikoinženjeringom.
16. Farmaceutska kompozicija koja sadrži antitelo prema bilo kom od patentnih zahteva 1, 2 ili 10 do 15, ili dobijeno pomoću postupka prema patentnom zahtevu 9 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
17. Antitelo prema bilo kom od patentnih zahteva 1, 2 ili 10 do 15, ili dobijeno pomoću postupka prema patentnom zahtevu 9, za upotrebu kao lek za lečenje B-ćelijskog poremećaja.
18. Antitelo prema patentnom zahtevu 17, naznačeno time što navedeni B-ćelijski poremećaj je B-ćelijski limfom.
19. Upotreba antitela prema bilo kom od patentnih zahteva 1, 2 ili 10 do 15, ili dobijenog pomoću postupka prema patentnom zahtevu 9, za proizvodnju leka za lečenje poremećaja koji se može lečiti pomoću B-ćelijske deplecije.
20. Antitelo prema bilo kom od patentnih zahteva 1, 2 ili 10 do 15 ili dobijeno pomoću postupka prema patentnom zahtevu 9, za upotrebu kao lek za lečenje poremećaja koji se može lečiti pomoću B-ćelijske deplecije.
21. Antitelo za upotrebu prema patentnom zahtevu 20 ili upotreba antitela prema patentnom zahtevu 19, naznačeno time što navedeni poremećaj je hematološki malignitet ili autoimuna bolest.
22. Antitelo za upotrebu ili upotreba antitela prema patentnom zahtevu 21, naznačeno time što je navedeni hematološki malignitet B-ćelijski limfom, ne-Hodgkin-ov limfom ili B-ćelijska hronična limfocitna leukemija.
23. Antitelo za upotrebu ili upotreba antitela prema patentnom zahtevu 21, naznačeno time što navedena autoimuna bolest je reumatoidni artritis ili lupus.
RS20170173A 2003-11-05 2004-11-05 Molekuli koji se vezuju za antigen sa povećanim afinitetom vezivanja za fc receptor i efektornom funkcijom RS55723B1 (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US51709603P 2003-11-05 2003-11-05
EP09004064.3A EP2077282B1 (en) 2003-11-05 2004-11-05 Antigen binding molecules with increased Fc receptor binding affinity and effector function

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS55723B1 true RS55723B1 (sr) 2017-07-31

Family

ID=34572912

Family Applications (5)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20150731A RS54450B1 (sr) 2003-11-05 2004-11-05 Molekuli koji se vezuju za antigen sa povećanim afinitetom vezivanja za fc receptor i efektornom funkcijom
RS20190202A RS58420B1 (sr) 2003-11-05 2004-11-05 Cd20 antitela sa povećanim afinitetom za vezivanje fc receptora i efektornom funkcijom
RS20170173A RS55723B1 (sr) 2003-11-05 2004-11-05 Molekuli koji se vezuju za antigen sa povećanim afinitetom vezivanja za fc receptor i efektornom funkcijom
RS20180868A RS57466B1 (sr) 2003-11-05 2004-11-05 Molekuli koji se vezuju za antigen sa povećanim afinitetom vezivanja za fc receptor i efektornom funkcijom
RSP-2010/0225A RS51334B (sr) 2003-11-05 2004-11-05 Cd20 antitela sa povećanim afinitetom vezivanja za fc receptor i efektornom funkcijom

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20150731A RS54450B1 (sr) 2003-11-05 2004-11-05 Molekuli koji se vezuju za antigen sa povećanim afinitetom vezivanja za fc receptor i efektornom funkcijom
RS20190202A RS58420B1 (sr) 2003-11-05 2004-11-05 Cd20 antitela sa povećanim afinitetom za vezivanje fc receptora i efektornom funkcijom

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20180868A RS57466B1 (sr) 2003-11-05 2004-11-05 Molekuli koji se vezuju za antigen sa povećanim afinitetom vezivanja za fc receptor i efektornom funkcijom
RSP-2010/0225A RS51334B (sr) 2003-11-05 2004-11-05 Cd20 antitela sa povećanim afinitetom vezivanja za fc receptor i efektornom funkcijom

Country Status (40)

Country Link
US (8) US9296820B2 (sr)
EP (5) EP2380910B1 (sr)
JP (5) JP4653109B2 (sr)
KR (3) KR101220691B1 (sr)
CN (4) CN104829719A (sr)
AT (1) ATE463513T1 (sr)
AU (1) AU2004287643C1 (sr)
BE (1) BE2016C008I2 (sr)
BR (2) BRPI0416262B1 (sr)
CA (1) CA2544865C (sr)
CR (1) CR11848A (sr)
CY (6) CY1110301T1 (sr)
DE (1) DE602004026470D1 (sr)
DK (5) DK2380911T3 (sr)
EA (4) EA015009B1 (sr)
EC (2) ECSP066603A (sr)
ES (5) ES2708095T3 (sr)
FR (1) FR15C0076I2 (sr)
HK (1) HK1213574A1 (sr)
HR (5) HRP20100303T1 (sr)
HU (5) HUE038955T2 (sr)
IL (4) IL175367A (sr)
LT (4) LT2077282T (sr)
LU (2) LU92632I2 (sr)
MA (1) MA31040B1 (sr)
ME (3) ME03330B (sr)
MX (2) MXPA06004836A (sr)
NL (1) NL300801I2 (sr)
NO (6) NO346533B1 (sr)
NZ (2) NZ547589A (sr)
PL (5) PL2348051T3 (sr)
PT (5) PT2380911T (sr)
RS (5) RS54450B1 (sr)
SG (3) SG160348A1 (sr)
SI (5) SI2077282T1 (sr)
TN (1) TNSN06126A1 (sr)
TR (2) TR201903329T4 (sr)
UA (1) UA91823C2 (sr)
WO (1) WO2005044859A2 (sr)
ZA (1) ZA200604547B (sr)

Families Citing this family (921)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4334141B2 (ja) * 1998-04-20 2009-09-30 グリカート バイオテクノロジー アクチェンゲゼルシャフト 抗体依存性細胞傷害性を改善するための抗体のグリコシル化操作
EP1423510A4 (en) 2001-08-03 2005-06-01 Glycart Biotechnology Ag ANTIBODY GLYCOSYLATION VARIANTS WITH INCREASED ANTIBODY-DEPENDENT CELLULAR CYTOTOXICITY
TWI353991B (en) 2003-05-06 2011-12-11 Syntonix Pharmaceuticals Inc Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids
KR101351122B1 (ko) 2003-05-09 2014-01-14 듀크 유니버시티 Ｃｄ２０-특이적 항체 및 이를 이용한 방법
HUE038955T2 (hu) 2003-11-05 2018-12-28 Roche Glycart Ag Antigén-kötõ molekulák fokozott Fc receptor-kötõ affinitással és effektor funkcióval
US20060062787A1 (en) * 2004-07-22 2006-03-23 Genentech, Inc. Method for treating Sjogren's syndrome
BRPI0514068B8 (pt) 2004-08-04 2021-05-25 Applied Molecular Evolution Inc anticorpo anti-cd20, e, composição farmacêutica
CN101087807A (zh) 2004-10-05 2007-12-12 健泰科生物技术公司 治疗血管炎的方法
BRPI0607315B1 (pt) 2005-02-07 2022-05-17 Roche Glycart Ag Molécula de ligação ao antígeno anti-egfr humanizada e seus usos, composição farmacêutica, e método para detectar a presença de egfr em uma amostra
EP1888649A2 (en) * 2005-05-09 2008-02-20 GlycArt Biotechnology AG Antigen binding molecules having modified fc regions and altered binding to fc receptors
US7601335B2 (en) * 2005-05-20 2009-10-13 Genentech, Inc. Pretreatment of a biological sample from an autoimmune disease subject
KR20080032065A (ko) * 2005-06-03 2008-04-14 제넨테크, 인크. 푸코실화 수준이 조절된 항체의 생성 방법
SG164379A1 (en) 2005-07-21 2010-09-29 Genmab As Potency assays for antibody drug substance binding to an fc receptor
AU2006290433B2 (en) * 2005-08-26 2012-06-07 Roche Glycart Ag Modified antigen binding molecules with altered cell signaling activity
AU2012216702B2 (en) * 2005-08-26 2014-12-04 Roche Glycart Ag Modified antigen binding molecules with altered cell signaling activity
US8470318B2 (en) * 2005-11-07 2013-06-25 The Rockefeller University Polypeptides with enhanced anti-inflammatory and decreased cytotoxic properties and relating methods
AU2006312148B2 (en) * 2005-11-07 2012-04-12 The Rockefeller University Reagents, methods and systems for selecting a cytotoxic antibody or variant thereof
US20080206246A1 (en) * 2006-04-05 2008-08-28 Ravetch Jeffrey V Polypeptides with enhanced anti-inflammatory and decreased cytotoxic properties and relating methods
MY149159A (en) 2005-11-15 2013-07-31 Hoffmann La Roche Method for treating joint damage
JP2009518314A (ja) 2005-12-02 2009-05-07 ジェネンテック・インコーポレーテッド Ｉｌ−２２に結合する抗体およびｉｌ−２２ｒに結合する抗体を含む、サイトカインシグナリングに関連する疾患および障害の処置のための組成物および方法
US8101365B2 (en) 2006-01-05 2012-01-24 Genentech, Inc. Anti-EphB4 antibodies and methods using same
US20070249014A1 (en) 2006-02-10 2007-10-25 Invitrogen Corporation Labeling and detection of post translationally modified proteins
AR059851A1 (es) 2006-03-16 2008-04-30 Genentech Inc Anticuerpos de la egfl7 y metodos de uso
AU2007235413B2 (en) * 2006-04-05 2012-08-02 The Rockefeller University Polypeptides with enhanced anti-inflammatory and decreased cytotoxic properties and relating methods
PT2032606E (pt) 2006-05-30 2014-02-05 Genentech Inc Anticorpos e imunoconjugados e respetivas utilizações
JP2009539870A (ja) * 2006-06-06 2009-11-19 ジェネンテック・インコーポレーテッド 血管発生の調節ための組成物および方法
AR062223A1 (es) * 2006-08-09 2008-10-22 Glycart Biotechnology Ag Moleculas de adhesion al antigeno que se adhieren a egfr, vectores que los codifican, y sus usos de estas
NZ576032A (en) 2006-10-12 2012-03-30 Genentech Inc Antibodies to lymphotoxin-alpha
PT2845866T (pt) 2006-10-27 2017-08-09 Genentech Inc Anticorpos e imunoconjugados e utilizações dos mesmos
AU2013202392B2 (en) * 2006-12-20 2016-02-25 Mmrglobal, Inc. Antibodies and methods for making and using them
US8465741B2 (en) 2006-12-20 2013-06-18 Mmrglobal, Inc. Antibodies and methods for making and using them
RU2474585C2 (ru) 2007-01-22 2013-02-10 Дженентек, Инк. Осаждение и очистка белков полиэлектролитами
EP2125013A4 (en) * 2007-01-26 2010-04-07 Bioinvent Int Ab DLL4 SIGNALING INHIBITOR AND ITS USES
US7834154B2 (en) 2007-02-09 2010-11-16 Genentech, Inc. Anti-ROBO4 antibodies and uses therefor
US7960139B2 (en) 2007-03-23 2011-06-14 Academia Sinica Alkynyl sugar analogs for the labeling and visualization of glycoconjugates in cells
FR2915398B1 (fr) * 2007-04-25 2012-12-28 Lab Francais Du Fractionnement "ensemble de moyens pour le traitement d'une pathologie maligne, d'une maladie auto-immune ou d'une maladie infectieuse"
PT3072525T (pt) 2007-05-14 2018-04-20 Astrazeneca Ab Métodos para reduzir os níveis de basófilos
NZ581468A (en) 2007-06-25 2012-09-28 Esbatech Alcon Biomed Res Unit Methods of modifying antibodies, and modified antibodies with improved functional properties
PE20140625A1 (es) 2007-07-16 2014-05-29 Genentech Inc ANTICUERPOS ANTI-CD79b E INMUNOCONJUGADOS HUMANIZADOS
PT2474557E (pt) 2007-07-16 2014-12-03 Genentech Inc Anticorpos e imunoconjugados anti-cd79b e métodos de utilização
US20110243931A1 (en) * 2007-09-02 2011-10-06 Thomas Friess Combination therapy with type i and type ii anti-cd20 antibodies
ES2687808T3 (es) 2007-09-26 2018-10-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Región constante de anticuerpo modificado
US20090098118A1 (en) 2007-10-15 2009-04-16 Thomas Friess Combination therapy of a type ii anti-cd20 antibody with an anti-bcl-2 active agent
US20090110688A1 (en) * 2007-10-24 2009-04-30 Georg Fertig Combination therapy of type ii anti-cd20 antibody with a proteasome inhibitor
US20090202475A1 (en) 2007-11-07 2009-08-13 Genentech, Inc. Compositions and methods for treatment of microbial disorders
TWI468417B (zh) 2007-11-30 2015-01-11 Genentech Inc 抗－ｖｅｇｆ抗體
US20090162359A1 (en) 2007-12-21 2009-06-25 Christian Klein Bivalent, bispecific antibodies
WO2009080541A1 (en) * 2007-12-21 2009-07-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibody formulation
KR20100102172A (ko) * 2007-12-21 2010-09-20 제넨테크, 인크. 리툭시마브-난치성 류마티스성 관절염 환자의 요법
US9266967B2 (en) 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
DK2657253T3 (en) 2008-01-31 2017-10-09 Genentech Inc Anti-CD79b antibodies and immune conjugates and methods of use
BRPI0909227B8 (pt) * 2008-03-25 2021-05-25 Roche Glycart Ag uso de um anticorpo b-ly1 humanizado e um ou mais agentes quimioterápicos selecionados do grupo consistindo em ciclofosfamida,vincristina e doxorubicina para a fabricação de um medicamento para o tratamento de um linfoma não hodgkin de células b (nhl)
NZ601815A (en) * 2008-03-31 2014-10-31 Genentech Inc Compositions and methods for treating and diagnosing asthma
JP2011517960A (ja) * 2008-04-22 2011-06-23 ザ ロックフェラー ユニバーシティー 抗炎症化合物の識別方法
WO2009134738A1 (en) * 2008-04-29 2009-11-05 Genentech, Inc. Responses to immunizations in rheumatoid arthritis patients treated with a cd20 antibody
KR101054362B1 (ko) * 2008-07-03 2011-08-05 재단법인 목암생명공학연구소 재조합 단백질의 푸코스 함량을 감소시키는 방법
DK2318832T3 (da) 2008-07-15 2014-01-20 Academia Sinica Glycan-arrays på PTFE-lignende aluminiumcoatede objektglas og relaterede fremgangsmåder
AR073295A1 (es) 2008-09-16 2010-10-28 Genentech Inc Metodos para tratar la esclerosis multiple progresiva. articulo de fabricacion.
AU2009303526B2 (en) 2008-10-14 2015-01-15 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants and uses thereof
WO2010075249A2 (en) 2008-12-22 2010-07-01 Genentech, Inc. A method for treating rheumatoid arthritis with b-cell antagonists
MX2011006870A (es) 2008-12-23 2011-07-19 Genentech Inc Variantes de inmunoglobulina con union alterada a proteina a.
TWI544077B (zh) 2009-03-19 2016-08-01 中外製藥股份有限公司 Antibody constant region change body
KR20150036824A (ko) 2009-03-20 2015-04-07 제넨테크, 인크. 이중특이적 항-ｈｅｒ 항체
ES2549769T3 (es) 2009-03-25 2015-11-02 Genentech, Inc. Anticuerpos anti-FGFR3 y métodos que emplean los mismos
CN103755808B (zh) 2009-03-25 2016-02-10 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗-α5β1抗体及其应用
AR075982A1 (es) * 2009-03-31 2011-05-11 Roche Glycart Ag Terapia de combinacion de un anticuerpo afucosilado y una o mas de las citoquinas seleccionadas de gm- csf humano, m -csf humano y/o il-3 humano y composicion
BRPI1014089A2 (pt) 2009-04-02 2016-04-19 Roche Glycart Ag anticorpos multiespecíficos que compreendem anticorpos de comprimento completo e fragmentos fab de cadeia simples
PT2417156E (pt) 2009-04-07 2015-04-29 Roche Glycart Ag Anticorpos trivalentes, biespecíficos
CN102361884A (zh) 2009-04-07 2012-02-22 罗氏格黎卡特股份公司 双特异性抗-ErbB-2/抗-c-Met抗体
CN102378768A (zh) 2009-04-07 2012-03-14 罗氏格黎卡特股份公司 双特异性抗-ErbB-3/抗-c-Met抗体
WO2010146059A2 (en) 2009-06-16 2010-12-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Biomarkers for igf-1r inhibitor therapy
US9676845B2 (en) 2009-06-16 2017-06-13 Hoffmann-La Roche, Inc. Bispecific antigen binding proteins
EP2456547B2 (en) 2009-07-24 2024-03-06 F. Hoffmann-La Roche AG Stirrer system
TW201106972A (en) 2009-07-27 2011-03-01 Genentech Inc Combination treatments
ES2513292T3 (es) 2009-07-31 2014-10-24 Genentech, Inc. Inhibición de metástasis tumoral usando anticuerpos anti-G-CSF
BR112012003066A2 (pt) 2009-08-14 2016-11-16 Roche Glycart Ag uso de um anticorpo anti-cd20 defucosilado e composição compreendendo um anticorpo anti-cd20 defucosilado
TWI409079B (zh) * 2009-08-14 2013-09-21 Roche Glycart Ag 非典型岩藻醣化ｃｄ２０抗體與苯達莫斯汀（ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ）之組合療法
GB0914691D0 (en) 2009-08-21 2009-09-30 Lonza Biologics Plc Immunoglobulin variants
TWI412375B (zh) 2009-08-28 2013-10-21 Roche Glycart Ag 人類化抗ｃｄｃｐ１抗體
TW201113037A (en) 2009-08-28 2011-04-16 Hoffmann La Roche Antibodies against CDCP1 for the treatment of cancer
JP5887270B2 (ja) 2009-09-02 2016-03-16 ジェネンテック， インコーポレイテッド 突然変異体ｓｍｏｏｔｈｅｎｅｄおよびその使用方法
AR078161A1 (es) * 2009-09-11 2011-10-19 Hoffmann La Roche Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento.
CN102712696A (zh) 2009-09-16 2012-10-03 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 包含卷曲螺旋和/或系链的蛋白质复合体及其用途
MX2012004029A (es) 2009-10-07 2012-05-08 Macrogenics Inc Polipeptidos que contienen la region fc que exhiben funcion efectora mejorada debido a alteraciones del grado de fucosilacion, y metodos para su uso.
EP2491059B1 (en) 2009-10-22 2015-02-25 F.Hoffmann-La Roche Ag Anti-hepsin antibodies and methods using same
WO2011056497A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Activin receptor type iib compositions and methods of use
WO2011056494A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Activin receptor-like kinase-1 antagonist and vegfr3 antagonist combinations
WO2011056502A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Bone morphogenetic protein receptor type ii compositions and methods of use
HUE041426T2 (hu) 2009-11-02 2019-05-28 Univ Washington Terápiás nukleáz-készítmények és eljárások
CA2780221A1 (en) 2009-11-04 2011-05-12 Fabrus Llc Methods for affinity maturation-based antibody optimization
KR101968766B1 (ko) 2009-11-05 2019-04-12 제넨테크, 인크. 이종 폴리펩티드의 분비를 위한 방법 및 조성물
US11377485B2 (en) 2009-12-02 2022-07-05 Academia Sinica Methods for modifying human antibodies by glycan engineering
US10087236B2 (en) 2009-12-02 2018-10-02 Academia Sinica Methods for modifying human antibodies by glycan engineering
US8486397B2 (en) 2009-12-11 2013-07-16 Genentech, Inc. Anti-VEGF-C antibodies and methods using same
PH12012501157A1 (en) 2009-12-22 2012-10-29 Roche Glycart Ag Anti-her3 antibodies and uses thereof
MX2012007379A (es) 2009-12-23 2012-08-31 Genentech Inc Anticuerpos anti-bv8 y usos de los mismos.
AR080154A1 (es) * 2010-02-10 2012-03-14 Immunogen Inc Anticuerpos cd20 y su utilizacion
CN102741695B (zh) 2010-02-11 2015-08-26 霍夫曼-拉罗奇有限公司 3d adcc nk facs测定法
ES2519348T3 (es) 2010-02-18 2014-11-06 Genentech, Inc. Antagonistas de neurregulina y uso de los mismos en el tratamiento del cáncer
KR101899835B1 (ko) 2010-03-24 2018-09-19 제넨테크, 인크. 항-ｌｒｐ６ 항체
TW201138821A (en) 2010-03-26 2011-11-16 Roche Glycart Ag Bispecific antibodies
US9441032B2 (en) 2010-04-07 2016-09-13 Agency For Science, Technology And Research Binding molecules against Chikungunya virus and uses thereof
EP2374816B1 (en) 2010-04-07 2016-09-28 Agency For Science, Technology And Research Binding molecules against Chikungunya virus and uses thereof
WO2011130332A1 (en) 2010-04-12 2011-10-20 Academia Sinica Glycan arrays for high throughput screening of viruses
JP6042801B2 (ja) 2010-04-27 2016-12-14 ロシュ グリクアート アーゲー ｍＴＯＲインヒビターとのアフコシル化ＣＤ２０抗体の併用療法
DK2568976T3 (en) 2010-05-10 2016-01-11 Academia Sinica Zanamivir-phosphonate congener with the anti-influenza activity, and determining the sensitivity oseltamivir in influenza viruses
WO2011147834A1 (en) 2010-05-26 2011-12-01 Roche Glycart Ag Antibodies against cd19 and uses thereof
NZ701208A (en) 2010-06-03 2016-05-27 Genentech Inc Immuno-pet imaging of antibodies and immunoconjugates and uses thereof
CN103080136B (zh) 2010-06-18 2015-08-12 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗Axl抗体及使用方法
WO2011161119A1 (en) 2010-06-22 2011-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies against insulin-like growth factor i receptor and uses thereof
WO2011161189A1 (en) 2010-06-24 2011-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-hepsin antibodies and methods of use
PT2591006T (pt) 2010-07-09 2019-07-29 Bioverativ Therapeutics Inc Moléculas de cadeia simples processáveis e polipéptidos preparados utilizando as mesmas
NZ605449A (en) 2010-07-09 2015-03-27 Genentech Inc Anti-neuropilin antibodies and methods of use
EP2409989A1 (en) 2010-07-19 2012-01-25 International-Drug-Development-Biotech Method to improve glycosylation profile for antibody
EP2409993A1 (en) 2010-07-19 2012-01-25 International-Drug-Development-Biotech Anti-CD19 antibody having ADCC function with improved glycosylation profile
EP2409712A1 (en) 2010-07-19 2012-01-25 International-Drug-Development-Biotech Anti-CD19 antibody having ADCC and CDC functions and improved glycosylation profile
FR2962908A1 (fr) 2010-07-20 2012-01-27 Lfb Biotechnologies Formulation d'anticorps anti-cd20
WO2012010582A1 (en) 2010-07-21 2012-01-26 Roche Glycart Ag Anti-cxcr5 antibodies and methods of use
KR20130045914A (ko) 2010-08-03 2013-05-06 에프. 호프만-라 로슈 아게 만성 림프구성 백혈병(cll) 생체지표
BR112013002532A2 (pt) 2010-08-05 2016-05-31 Hoffmann La Roche proteína de fusão de citocina anti-viral do anticorpo anti-mhc
CA2807552A1 (en) 2010-08-06 2012-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
PE20171512A1 (es) 2010-08-13 2017-10-20 Roche Glycart Ag Anticuerpos anti-fap
BR112013002444A2 (pt) 2010-08-13 2016-05-24 Roche Glycart Ag anticorpo, polinucleotídeo e polipeotídeo isolados, composição, vetor, cécula hospedeira, conjulgado de anticorpo, formulação farmacêutica, uso do anticorpo, métodos para produzir um anticorpo, tratar um indivíduo, induzir a lise celular de uma célula tumorosa e diagnosticar uma doença em um indivíduo
WO2012022734A2 (en) 2010-08-16 2012-02-23 Medimmune Limited Anti-icam-1 antibodies and methods of use
NZ604510A (en) 2010-08-17 2013-10-25 Csl Ltd Dilutable biocidal compositions and methods of use
AR082693A1 (es) * 2010-08-17 2012-12-26 Roche Glycart Ag Terapia de combinacion de un anticuerpo anti-cd20 afucosilado con un anticuerpo anti-vegf
CN103068846B9 (zh) 2010-08-24 2016-09-28 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 包含二硫键稳定性Fv片段的双特异性抗体
KR101603001B1 (ko) 2010-08-25 2016-03-11 에프. 호프만-라 로슈 아게 Il-18r1에 대한 항체 및 그의 용도
SG10201408229WA (en) 2010-08-31 2015-02-27 Genentech Inc Biomarkers and methods of treatment
EP2857499A1 (en) 2010-10-01 2015-04-08 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
US8481680B2 (en) 2010-10-05 2013-07-09 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
KR101933197B1 (ko) 2010-11-08 2018-12-27 제넨테크, 인크. 피하 투여용 항―ｉｌ―6 수용체 항체
AU2011326564A1 (en) 2010-11-10 2013-05-09 Genentech, Inc. Methods and compositions for neural disease immunotherapy
CN103443125B (zh) 2010-11-30 2019-05-03 霍夫曼-拉罗奇有限公司 低亲和力血脑屏障受体抗体及其用途
TWI736437B (zh) 2010-11-30 2021-08-11 日商中外製藥股份有限公司 細胞傷害誘導治療劑
CN103261229A (zh) 2010-12-16 2013-08-21 罗切格利卡特公司 无岩藻糖基化cd20抗体与mdm2抑制剂的联合疗法
KR101615420B1 (ko) 2010-12-16 2016-04-26 제넨테크, 인크. Th2 억제에 관한 진단 및 치료
AU2011349443B2 (en) 2010-12-20 2015-12-24 Genentech, Inc. Anti-mesothelin antibodies and immunoconjugates
CN103261230A (zh) 2010-12-22 2013-08-21 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗pcsk9抗体及使用方法
EP2655413B1 (en) 2010-12-23 2019-01-16 F.Hoffmann-La Roche Ag Polypeptide-polynucleotide-complex and its use in targeted effector moiety delivery
RU2013139267A (ru) 2011-02-10 2015-03-20 Рош Гликарт Аг Улучшенная иммунотерапия
WO2012116926A1 (en) 2011-02-28 2012-09-07 F. Hoffmann-La Roche Ag Antigen binding proteins
JP5768147B2 (ja) 2011-02-28 2015-08-26 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 一価抗原結合タンパク質
LT2691417T (lt) 2011-03-29 2018-10-25 Roche Glycart Ag Antikūno fc variantai
CA2831613A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Moderna Therapeutics, Inc. Delivery and formulation of engineered nucleic acids
CA2828890A1 (en) 2011-04-07 2012-10-11 Genentech, Inc. Anti-fgfr4 antibodies and methods of use
CA2834626A1 (en) 2011-04-29 2012-11-01 University Of Washington Therapeutic nuclease compositions and methods
WO2012146630A1 (en) 2011-04-29 2012-11-01 F. Hoffmann-La Roche Ag N-terminal acylated polypeptides, methods for their production and uses thereof
EP2707723B1 (en) 2011-05-12 2016-02-10 Genentech, Inc. Multiple reaction monitoring lc-ms/ms method to detect therapeutic antibodies in animal samples using framework signature pepides
WO2012158704A1 (en) 2011-05-16 2012-11-22 Genentech, Inc. Fgfr1 agonists and methods of use
WO2012171996A1 (en) 2011-06-15 2012-12-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-human epo receptor antibodies and methods of use
FR2976811A1 (fr) 2011-06-22 2012-12-28 Lfb Biotechnologies Utilisation d'un anticorps anti-cd20 a haute adcc pour le traitement de la maladie de waldenstrom
PL2723773T3 (pl) 2011-06-22 2018-07-31 F.Hoffmann-La Roche Ag Eliminacja komórek docelowych przez obecne w krążeniu, swoiste dla wirusa, cytotoksyczne limfocyty T z wykorzystaniem kompleksów zawierających MHC klasy I
RU2013155695A (ru) 2011-06-30 2015-08-10 Дженентек, Инк. Препараты антител против с-мет
JP2014525412A (ja) 2011-08-17 2014-09-29 ジェネンテック， インコーポレイテッド 難治性腫瘍における血管新生の阻害
BR112014003431A2 (pt) 2011-08-17 2017-06-13 Genentech Inc anticorpo, ácido nucleico, célula hospedeira, método de produção de um anticorpo, imunoconjugado, formulação farmacêutica, agente farmacêutico, uso do anticorpo, método de tratamento de um indivíduo que tem câncer e método de aumento de tempo para recorrência de tumor
KR101870555B1 (ko) 2011-08-23 2018-06-22 로슈 글리카트 아게 T 세포 활성화 항원 및 종양 항원에 대해 특이적인 이중특이적 항체 및 이의 사용 방법
JP2014534806A (ja) 2011-08-23 2014-12-25 ロシュ グリクアート アーゲー 抗ｍｃｓｐ抗体
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
CN103930781A (zh) 2011-09-15 2014-07-16 霍夫曼-拉罗奇有限公司 促进分化的方法
AU2012312515A1 (en) 2011-09-19 2014-03-13 Genentech, Inc. Combination treatments comprising c-met antagonists and B-raf antagonists
HK1200850A1 (en) 2011-09-23 2015-08-14 罗氏格黎卡特股份公司 Bispecific anti-egfr/anti igf-1r antibodies
CN107287660A (zh) * 2011-09-30 2017-10-24 中外制药株式会社 离子浓度依赖性结合分子文库
EP3495389A1 (en) 2011-09-30 2019-06-12 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd Antibodies against tl1a and uses thereof
PT3682905T (pt) 2011-10-03 2022-04-07 Modernatx Inc Nucleósidos, nucleótidos e ácidos nucleicos modificados e respetivas utilizações
US20130089562A1 (en) 2011-10-05 2013-04-11 Genenthech, Inc. Methods of treating liver conditions using notch2 antagonists
PE20141562A1 (es) 2011-10-14 2014-11-12 Genentech Inc Anticuerpos anti-htra1 y metodos de uso
US9358250B2 (en) 2011-10-15 2016-06-07 Genentech, Inc. Methods of using SCD1 antagonists
WO2013059531A1 (en) 2011-10-20 2013-04-25 Genentech, Inc. Anti-gcgr antibodies and uses thereof
WO2013059740A1 (en) 2011-10-21 2013-04-25 Foundation Medicine, Inc. Novel alk and ntrk1 fusion molecules and uses thereof
KR20140097205A (ko) 2011-10-28 2014-08-06 제넨테크, 인크. 흑색종을 치료하는 치료 조합물 및 방법
JP2015504413A (ja) 2011-10-28 2015-02-12 パトリス リミテッド Ｐａｔ−ｌｍ１エピトープおよびそれを使用するための方法
CN103906533A (zh) 2011-11-07 2014-07-02 米迪缪尼有限公司 多特异性和多价结合蛋白及其用途
SG11201402485UA (en) 2011-11-21 2014-06-27 Genentech Inc Purification of anti-c-met antibodies
US20130302274A1 (en) 2011-11-25 2013-11-14 Roche Glycart Ag Combination therapy
EP2788024A1 (en) 2011-12-06 2014-10-15 F.Hoffmann-La Roche Ag Antibody formulation
ES2923757T3 (es) 2011-12-16 2022-09-30 Modernatx Inc Composiciones de ARNm modificado
US9527927B2 (en) 2011-12-20 2016-12-27 Medimmune, Llc Modified polypeptides for bispecific antibody scaffolds
EP2794662A1 (en) 2011-12-22 2014-10-29 F.Hoffmann-La Roche Ag Full length antibody display system for eukaryotic cells and its use
SG10201700169PA (en) 2011-12-22 2017-02-27 Hoffmann La Roche Expression vector element combinations, novel production cell generation methods and their use for the recombinant production of polypeptides
CN107881196A (zh) 2011-12-22 2018-04-06 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 表达载体组织、新的生产用细胞产生方法及其在重组产生多肽中的用途
AR089434A1 (es) 2011-12-23 2014-08-20 Genentech Inc Procedimiento para preparar formulaciones con alta concentracion de proteinas
SG10201601747XA (en) 2012-01-18 2016-04-28 Genentech Inc Anti-LRP5 Antibodies And Methods Of Use
RU2014133547A (ru) 2012-01-18 2016-03-10 Дженентек, Инк. Способы применения модуляторов fgf19
MX2014009565A (es) 2012-02-10 2014-11-10 Genentech Inc Anticuerpos monocatenarios y otros heteromultimeros.
BR112014019741A2 (pt) 2012-02-11 2020-12-22 Genentech, Inc Usos de um antagonista da via wnt, uso de uma terapia anticâncer, método de identificação de um indivíduo com câncer, métodos para prever, método de inibição da proliferação de uma célula de câncer, uso de um antagonista da translocação de r-spondina e antagonista da translocação de r-spondina isolado
KR102069397B1 (ko) 2012-02-15 2020-01-22 에프. 호프만-라 로슈 아게 Ｆｃ-수용체 기재 친화성 크로마토그래피
WO2013151664A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 modeRNA Therapeutics Modified polynucleotides for the production of proteins
WO2013148315A1 (en) 2012-03-27 2013-10-03 Genentech, Inc. Diagnosis and treatments relating to her3 inhibitors
AR090549A1 (es) 2012-03-30 2014-11-19 Genentech Inc Anticuerpos anti-lgr5 e inmunoconjugados
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
US10501512B2 (en) 2012-04-02 2019-12-10 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US10130714B2 (en) 2012-04-14 2018-11-20 Academia Sinica Enhanced anti-influenza agents conjugated with anti-inflammatory activity
KR20150006000A (ko) 2012-05-01 2015-01-15 제넨테크, 인크. 항-pmel17 항체 및 면역접합체
WO2013170191A1 (en) 2012-05-11 2013-11-14 Genentech, Inc. Methods of using antagonists of nad biosynthesis from nicotinamide
SI2849723T1 (sl) 2012-05-18 2018-09-28 Genentech, Inc. Formulacije z visoko koncentracijo monoklonskih protiteles
WO2013177062A2 (en) 2012-05-21 2013-11-28 Genentech, Inc. Methods for improving safety of blood-brain barrier transport
EP2852840B1 (en) 2012-05-23 2019-10-09 F.Hoffmann-La Roche Ag Selection method for therapeutic agents
AR091462A1 (es) 2012-06-15 2015-02-04 Genentech Inc Anticuerpos anti-pcsk9, formulaciones, dosificacion y metodos de uso
MX2014015557A (es) 2012-06-21 2015-02-24 Univ Indiana Res & Tech Corp Polipeptidos de fusion de region fc de polipeptido de ligando receptor de incretina y conjugados con función efectora fc alterada.
KR20150030744A (ko) 2012-06-27 2015-03-20 에프. 호프만-라 로슈 아게 표적에 특이적으로 결합하는 하나 이상의 결합 단위를 포함하는 항체 Ｆｃ－영역 접합체의 제조 방법 및 그의 용도
ES2597228T3 (es) 2012-06-27 2017-01-17 F. Hoffmann-La Roche Ag Procedimiento para la selección y la producción de entidades de objetivación, como dianas, altamente selectivas y multiespecíficas, personalizadas, las cuales contienen por lo menos dos entidades de unión diferentes, y utilización de éstas
WO2014004549A2 (en) 2012-06-27 2014-01-03 Amgen Inc. Anti-mesothelin binding proteins
MX354303B (es) 2012-07-04 2018-02-23 Hoffmann La Roche Anticuerpos de anti-biotina y metodos de uso.
SG11201407420RA (en) 2012-07-04 2015-02-27 Hoffmann La Roche Covalently linked antigen-antibody conjugates
EP2869837B1 (en) 2012-07-04 2016-09-14 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-theophylline antibodies and methods of use
PL2870247T3 (pl) 2012-07-05 2019-10-31 Hoffmann La Roche Układ ekspresji i wydzielania
AU2013288932A1 (en) 2012-07-09 2014-12-11 Genentech, Inc. Immunoconjugates comprising anti - CD79b antibodies
CA2874904A1 (en) 2012-07-09 2014-01-16 Genentech, Inc. Immunoconjugates comprising anti-cd22 antibodies
BR112015000437A2 (pt) 2012-07-09 2017-06-27 Genentech Inc imunoconjugados, formulação farmacêutica, métodos de tratamento e de inbir a proliferação de uma célula
KR20150027829A (ko) 2012-07-09 2015-03-12 제넨테크, 인크. 항-cd22 항체를 포함하는 면역접합체
SI3495387T1 (sl) 2012-07-13 2021-12-31 Roche Glycart Ag Bispecifična protitelesa proti VEGF/proti ANG-2 in njihova uporaba pri zdravljenju bolezni očesnih žil
PL3434695T3 (pl) * 2012-08-07 2021-05-17 Roche Glycart Ag Ulepszona immunoterapia
US9914956B2 (en) 2012-08-18 2018-03-13 Academia Sinica Cell-permeable probes for identification and imaging of sialidases
JP6211084B2 (ja) 2012-08-21 2017-10-11 アカデミア シニカＡｃａｄｅｍｉａ Ｓｉｎｉｃａ ベンゾシクロオクチン化合物およびその使用
MX367126B (es) 2012-08-29 2019-08-06 Hoffmann La Roche Transporte para atravesar la barrera hematoencefálica.
EP3919079A1 (en) 2012-09-07 2021-12-08 Genentech, Inc. Combination therapy of a type ii anti-cd20 antibody with a selective bcl-2 inhibitor
WO2014054804A1 (ja) 2012-10-05 2014-04-10 協和発酵キリン株式会社 ヘテロダイマータンパク質組成物
MX2015003616A (es) 2012-10-08 2015-06-05 Roche Glycart Ag Anticuerpos sin fc que comprenden dos fragmentos fab y metodos de uso.
EP2727941A1 (en) 2012-11-05 2014-05-07 MAB Discovery GmbH Method for the production of multispecific antibodies
EP4223770A3 (en) 2012-11-05 2023-10-18 Foundation Medicine, Inc. Novel fusion molecules and uses thereof
EP2727942A1 (en) 2012-11-05 2014-05-07 MAB Discovery GmbH Bispecific antibodies against human EGFR, HER2, and HER3
WO2014067642A1 (en) 2012-11-05 2014-05-08 Mab Discovery Gmbh Method for the production of multispecific antibodies
EP2914621B1 (en) 2012-11-05 2023-06-07 Foundation Medicine, Inc. Novel ntrk1 fusion molecules and uses thereof
EP2727943A1 (en) 2012-11-05 2014-05-07 MAB Discovery GmbH Trispecific antibodies against human EGFR, HER2 and HER3
CN104755500B (zh) 2012-11-08 2020-10-02 霍夫曼-拉罗奇有限公司 结合HER3 β-发夹的HER3抗原结合蛋白
BR112015010817A8 (pt) 2012-11-13 2018-01-23 Genentech Inc anticorpos anti-hemaglutinina isolado, método de tratamento, inibição ou prevenção de infecções, composição, composição farmacêutica, ácido nucleico isolado, célula hospedeira, método de produção de anticorpos e uso do anticorpo anti-hemaglutinina
PT2922554T (pt) 2012-11-26 2022-06-28 Modernatx Inc Arn modificado nas porções terminais
EP2931749B1 (fr) 2012-12-17 2019-04-24 Laboratoire Francais du Fractionnement et des Biotechnologies Societe Anonyme Utilisation d'anticorps monoclonaux pour le traitement de l'inflammation et d'infections bacteriennes
JP6475167B2 (ja) 2012-12-21 2019-02-27 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ジスルフィド結合した多価ｍｈｃクラスｉを含む多機能タンパク質
US20140194368A1 (en) * 2013-01-04 2014-07-10 Beech Tree Labs, Inc. Method of Treating Cancer by Administration of Low Levels of Heat Shock Protein 70 (HSP70)
AR094403A1 (es) 2013-01-11 2015-07-29 Hoffmann La Roche Terapia de combinación de anticuerpos anti-her3
RU2519546C1 (ru) * 2013-01-16 2014-06-10 Общество С Ограниченной Ответственностью "Биоинтегратор" (Ооо "Биоинтегратор") КОНЪЮГАТЫ И МАЛЫЕ МОЛЕКУЛЫ, ВЗАИМОДЕЙСТВУЮЩИЕ С РЕЦЕПТОРОМ CD16а
CA2898326C (en) 2013-01-18 2022-05-17 Foundation Medicine, Inc. Methods of treating cholangiocarcinoma
WO2014116749A1 (en) 2013-01-23 2014-07-31 Genentech, Inc. Anti-hcv antibodies and methods of using thereof
AU2014213009B2 (en) 2013-02-01 2019-01-03 Kira Biotech Pty Limited Anti-CD83 antibodies and use thereof
PT2953971T (pt) 2013-02-07 2023-05-02 Csl Ltd Proteínas de ligação à il-11r e suas utilizações
KR20160002713A (ko) 2013-02-13 2016-01-08 라보라토이레 프란카이즈 듀 프락티온네먼트 에트 데스 바이오테크놀로지스 고도로 갈락토실화된 항-tnf-알파 항체 및 이의 용도
WO2014128235A1 (en) 2013-02-22 2014-08-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Methods of treating cancer and preventing drug resistance
WO2014131694A1 (en) 2013-02-26 2014-09-04 Roche Glycart Ag Bispecific t cell activating antigen binding molecules
MX2015010789A (es) 2013-02-26 2015-11-26 Roche Glycart Ag Anticuerpos anti-pcsm.
CN110437337B (zh) 2013-02-26 2024-07-30 罗切格利卡特公司 双特异性t细胞活化性抗原结合分子
JP2016510751A (ja) 2013-03-06 2016-04-11 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗がん剤耐性を治療及び予防する方法
AU2014248886B2 (en) 2013-03-12 2019-06-27 University Of Utah Research Foundation Compositions and methods for inducing apoptosis
MX365567B (es) 2013-03-13 2019-06-07 Genentech Inc Formulaciones de anticuerpo.
WO2014152358A2 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Genentech, Inc. Combinations of a mek inhibitor compound with an her3/egfr inhibitor compound and methods of use
US9562099B2 (en) 2013-03-14 2017-02-07 Genentech, Inc. Anti-B7-H4 antibodies and immunoconjugates
MX2015010777A (es) 2013-03-14 2016-04-25 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados anti-b7-h4.
EP2968565A2 (en) 2013-03-14 2016-01-20 Genentech, Inc. Methods of treating cancer and preventing cancer drug resistance
MX374811B (es) 2013-03-15 2025-03-06 Ac Immune Sa Anticuerpos anti-tau y métodos de uso.
PL2970422T3 (pl) 2013-03-15 2018-09-28 F.Hoffmann-La Roche Ag Polipeptydy IL-22 i białka fuzyjne IL-22 Fc i sposoby zastosowania
HK1214533A1 (zh) 2013-03-15 2016-07-29 基因泰克公司 治疗癌症和预防癌症耐药性的方法
BR112015021521A2 (pt) 2013-03-15 2017-10-10 Genentech Inc anticorpos anti-crth2 e métodos para seu uso
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
KR20150131269A (ko) 2013-03-15 2015-11-24 제넨테크, 인크. Pd-1 및 pd-l1 관련 상태를 치료하기 위한 바이오마커 및 방법
CN114717206A (zh) 2013-03-15 2022-07-08 Atyr 医药公司 组氨酰-trna合成酶-fc缀合物
MX2015011444A (es) 2013-03-15 2015-12-16 Genentech Inc Composiciones y metodos para el diagnostico y tratamiento del cancer hepatico.
UA118028C2 (uk) 2013-04-03 2018-11-12 Рош Глікарт Аг Біспецифічне антитіло, специфічне щодо fap і dr5, антитіло, специфічне щодо dr5, і спосіб їх застосування
TW201920285A (zh) 2013-04-29 2019-06-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 遏止FcRn結合之抗IGF-1R抗體及其治療血管性眼疾之用途
CA2904805A1 (en) 2013-04-29 2014-11-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Fc-receptor binding modified asymmetric antibodies and methods of use
CA2904806C (en) 2013-04-29 2021-11-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Human fcrn-binding modified antibodies and methods of use
SI2992016T1 (en) 2013-05-02 2018-01-31 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of an afucosylated cd20 antibody with a cd79b antibody-drug conjugate
ES2693370T3 (es) * 2013-05-02 2018-12-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Politerapia de un anticuerpo CD20 afucosilado con un conjugado de anticuerpo CD22-fármaco
SG11201509566RA (en) 2013-05-20 2015-12-30 Genentech Inc Anti-transferrin receptor antibodies and methods of use
WO2014210397A1 (en) 2013-06-26 2014-12-31 Academia Sinica Rm2 antigens and use thereof
EP3013347B1 (en) 2013-06-27 2019-12-11 Academia Sinica Glycan conjugates and use thereof
MX374785B (es) 2013-08-01 2025-03-06 Five Prime Therapeutics Inc Anticuerpos anti-fgfr2iiib afucosilados.
US20150093399A1 (en) 2013-08-28 2015-04-02 Bioasis Technologies, Inc. Cns-targeted conjugates having modified fc regions and methods of use thereof
EP3041484B1 (en) 2013-09-06 2021-03-03 Academia Sinica Human inkt cell activation using glycolipids with altered glycosyl groups
BR112016004450A2 (pt) 2013-09-17 2017-10-17 Genentech Inc métodos para tratar uma doença, para aumentar a eficácia de um tratamento, para adiar e/ou prevenir desenvolvimento da reincidência e/ou resistência de uma doença, para aumentar a sensibilidade a um inibidor, para estender o período de sensibilidade a um inibidor e para estender a duração de resposta a um inibidor
US10023626B2 (en) 2013-09-30 2018-07-17 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
WO2015050959A1 (en) 2013-10-01 2015-04-09 Yale University Anti-kit antibodies and methods of use thereof
SG11201602522VA (en) 2013-10-02 2016-04-28 Medimmune Llc Neutralizing anti-influenza a antibodies and uses thereof
KR20160067219A (ko) 2013-10-03 2016-06-13 모더나 세라퓨틱스, 인코포레이티드 저밀도 지단백질 수용체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드
BR112016006929A2 (pt) 2013-10-11 2017-09-19 Hoffmann La Roche Anticorpo, ácido nucleico, vetor de expressão, célula hospedeira, métodos de preparação de anticorpo, de tratamento de pacientes e de geração de um anticorpo, composição farmacêutica e uso do anticorpo
EP3054987B1 (en) 2013-10-11 2019-10-09 The United States of America, represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Tem8 antibodies and their use
WO2015054670A1 (en) 2013-10-11 2015-04-16 Genentech, Inc. Nsp4 inhibitors and methods of use
US20150147333A1 (en) 2013-10-18 2015-05-28 Genentech, Inc. Anti-rspo antibodies and methods of use
JP6715767B2 (ja) 2013-10-23 2020-07-01 ジェネンテック， インコーポレイテッド 好酸球性疾患の診断及び治療方法
SI3063275T1 (sl) 2013-10-31 2020-02-28 Resolve Therapeutics, Llc Terapevtske fuzije nukleaza-albumin in postopki
LT3071597T (lt) 2013-11-21 2020-10-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Antikūnai prieš alfa-sunukleiną ir jų naudojimo būdai
WO2015082446A1 (en) 2013-12-02 2015-06-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Treatment of cancer using an anti-cdcp1 antibody and a taxane
KR20210125114A (ko) 2013-12-09 2021-10-15 알라코스 인크. 항-Siglec-8 항체 및 그의 사용 방법
AR098743A1 (es) 2013-12-13 2016-06-08 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados anti-cd33
MX2016007965A (es) 2013-12-17 2016-10-28 Genentech Inc Terapia de combinacion que comprende agonistas de union a ox40 y antagonistas de union al eje pd-1.
HUE050159T2 (hu) 2013-12-17 2020-11-30 Genentech Inc Anti-CD3 antitestek és alkalmazási eljárások
ES2763429T5 (es) 2013-12-17 2023-06-21 Hoffmann La Roche Procedimientos de tratamiento de cánceres usando antagonistas de la unión al eje de PD-1 y taxanos
US20150210772A1 (en) 2013-12-17 2015-07-30 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using pd-1 axis binding antagonists and an anti-cd20 antibody
TWI728373B (zh) 2013-12-23 2021-05-21 美商建南德克公司 抗體及使用方法
EP3089758B1 (en) 2014-01-03 2021-01-27 F.Hoffmann-La Roche Ag Covalently linked helicar-anti-helicar antibody conjugates and uses thereof
BR112016014945A2 (pt) 2014-01-03 2018-01-23 F. Hoffmann-La Roche Ag conjugado, formulação farmacêutica e uso
WO2015101586A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific anti-hapten/anti-blood brain barrier receptor antibodies, complexes thereof and their use as blood brain barrier shuttles
WO2015103549A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
PL3092251T3 (pl) 2014-01-06 2021-08-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Jednowartościowe moduły transportera wahadłowego przez barierę krew-mózg
CN110903398B (zh) 2014-01-15 2023-08-15 豪夫迈·罗氏有限公司 具有修饰的FCRN和保持的蛋白A结合性质的Fc区变体
US10150818B2 (en) 2014-01-16 2018-12-11 Academia Sinica Compositions and methods for treatment and detection of cancers
KR20160104727A (ko) 2014-01-16 2016-09-05 아카데미아 시니카 암의 치료 및 검출을 위한 조성물 및 방법
WO2015112909A1 (en) 2014-01-24 2015-07-30 Genentech, Inc. Methods of using anti-steap1 antibodies and immunoconjugates
US20170044232A1 (en) 2014-02-04 2017-02-16 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
TW202239429A (zh) 2014-02-08 2022-10-16 美商建南德克公司 治療阿茲海默症之方法
NZ723884A (en) 2014-02-08 2023-02-24 Genentech Inc Methods of treating alzheimer’s disease
SI3105253T1 (sl) 2014-02-12 2018-10-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Protitelesa anti-Jagged1 in načini njihove uporabe
JP2017507939A (ja) 2014-02-21 2017-03-23 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｉｌ−１３／ｉｌ−１７二重特異性抗体及びその使用
JP6825909B2 (ja) 2014-02-28 2021-02-03 アラコス インコーポレイテッド シグレック−８関連疾患を処置するための方法および組成物
SG11201607519VA (en) 2014-03-14 2016-10-28 Genentech Inc Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
US20170107294A1 (en) 2014-03-21 2017-04-20 Nordlandssykehuset Hf Anti-cd14 antibodies and uses thereof
RU2688349C2 (ru) 2014-03-21 2019-05-21 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг In vitro прогнозирование времени полужизни антител in vivo
EP3122900A1 (en) 2014-03-24 2017-02-01 F. Hoffmann-La Roche AG Cancer treatment with c-met antagonists and correlation of the latter with hgf expression
TWI797430B (zh) 2014-03-27 2023-04-01 中央研究院 反應性標記化合物及其用途
KR20160146747A (ko) 2014-03-31 2016-12-21 제넨테크, 인크. 항혈관신생제 및 ox40 결합 효능제를 포함하는 조합 요법
SG11201607969XA (en) 2014-03-31 2016-10-28 Genentech Inc Anti-ox40 antibodies and methods of use
CA2943299A1 (en) 2014-04-11 2015-10-15 Medimmune, Llc Bispecific her2 antibodies
WO2015164615A1 (en) 2014-04-24 2015-10-29 University Of Oslo Anti-gluten antibodies and uses thereof
JP2017522861A (ja) 2014-05-22 2017-08-17 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｇｐｃ３抗体及びイムノコンジュゲート
KR20170005016A (ko) 2014-05-23 2017-01-11 제넨테크, 인크. MiT 바이오마커 및 그의 사용 방법
JP2017518989A (ja) 2014-05-27 2017-07-13 アカデミア シニカＡｃａｄｅｍｉａ Ｓｉｎｉｃａ 抗ｃｄ２０糖操作抗体群およびその使用
KR20170010003A (ko) 2014-05-27 2017-01-25 아카데미아 시니카 박테로이드 기원의 푸코시다제 및 이의 사용 방법
US10118969B2 (en) 2014-05-27 2018-11-06 Academia Sinica Compositions and methods relating to universal glycoforms for enhanced antibody efficacy
EP4116329A1 (en) 2014-05-27 2023-01-11 Academia Sinica Anti-her2 glycoantibodies and uses thereof
JP7063538B2 (ja) 2014-05-28 2022-05-09 アカデミア シニカ 抗ＴＮＦα糖操作抗体群およびその使用
EP3613433B1 (en) 2014-05-30 2022-01-05 Shanghai Henlius Biotech, Inc. Anti-epidermal growth factor receptor (egfr) antibodies
MX2016016233A (es) 2014-06-11 2017-03-31 Genentech Inc Anticuerpos anti-lgr5 y sus usos.
WO2015191986A1 (en) 2014-06-13 2015-12-17 Genentech, Inc. Methods of treating and preventing cancer drug resistance
CN106687476B (zh) 2014-06-26 2020-11-13 豪夫迈·罗氏有限公司 抗brdu抗体及使用方法
EP3166627A1 (en) 2014-07-11 2017-05-17 Genentech, Inc. Notch pathway inhibition
CN106604933B (zh) 2014-07-11 2021-08-10 文塔纳医疗系统公司 抗pd-l1抗体及其诊断用途
WO2016011035A2 (en) 2014-07-15 2016-01-21 Medlmmune, Llc Neutralizing anti-influenza b antibodies and uses thereof
PL3177643T3 (pl) 2014-08-04 2019-09-30 F.Hoffmann-La Roche Ag Dwuswoiste cząsteczki wiążące antygen aktywujące komórki T
DK3186284T3 (da) 2014-08-28 2022-05-09 Bioatla Inc Betinget aktive kimæriske antigenreceptorer til modificerede t-celler
TWI751102B (zh) 2014-08-28 2022-01-01 美商奇諾治療有限公司 對ｃｄ１９具專一性之抗體及嵌合抗原受體
EP3191500A4 (en) 2014-09-08 2018-04-11 Academia Sinica HUMAN iNKT CELL ACTIVATION USING GLYCOLIPIDS
JP2017528468A (ja) * 2014-09-10 2017-09-28 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ガラクトース操作型免疫グロブリン１抗体
TW201625689A (zh) 2014-09-12 2016-07-16 建南德克公司 抗－ｂ７－ｈ４抗體及免疫結合物
SI3191135T1 (sl) 2014-09-12 2021-01-29 Genentech, Inc. Anti-HER2 protitelesa in imunokonjugati
MA40579A (fr) 2014-09-12 2016-03-17 Genentech Inc Anticorps anti-cll-1 et immunoconjugués
ES2949173T3 (es) 2014-09-15 2023-09-26 Hoffmann La Roche Formulaciones de anticuerpo
CA2957148A1 (en) 2014-09-17 2016-03-24 Genentech, Inc. Immunoconjugates comprising anti-her2 antibodies and pyrrolobenzodiazepines
CA2979671C (en) 2014-09-23 2020-03-10 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates
JP2017536102A (ja) 2014-10-16 2017-12-07 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗アルファ−シヌクレイン抗体及び使用方法
AU2015336931B2 (en) 2014-10-23 2021-04-29 Kira Biotech Pty Limited CD83 binding proteins and uses thereof
US10626176B2 (en) 2014-10-31 2020-04-21 Jounce Therapeutics, Inc. Methods of treating conditions with antibodies that bind B7-H4
KR20170086540A (ko) 2014-11-03 2017-07-26 제넨테크, 인크. T 세포 면역 하위세트를 검출하기 위한 검정 및 그의 사용 방법
CA2966507A1 (en) 2014-11-03 2016-05-12 Genentech, Inc. Methods and biomarkers for predicting efficacy and evaluation of an ox40 agonist treatment
CA2961439A1 (en) 2014-11-05 2016-05-12 Genentech, Inc. Anti-fgfr2/3 antibodies and methods using same
RU2713131C1 (ru) 2014-11-06 2020-02-03 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг ВАРИАНТЫ Fc-ОБЛАСТИ С МОДИФИЦИРОВАННЫМИ СВОЙСТВАМИ СВЯЗЫВАНИЯ FcRn И БЕЛКА А
PT3215528T (pt) 2014-11-06 2019-10-11 Hoffmann La Roche Variantes da região fc com ligação modificada ao fcrn e métodos de utilização
CA2963974A1 (en) 2014-11-06 2016-05-12 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ox40 binding agonists and tigit inhibitors
JP6929771B2 (ja) 2014-11-10 2021-09-01 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗インターロイキン−３３抗体及びその使用
JP2018500882A (ja) 2014-11-10 2018-01-18 ジェネンテック， インコーポレイテッド 腎症の動物モデルおよびそれを治療するための薬剤
US10160795B2 (en) 2014-11-14 2018-12-25 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to Ebola virus glycoprotein and their use
ES2788979T3 (es) 2014-11-14 2020-10-23 Hoffmann La Roche Moléculas de unión a antígeno que comprenden un trímero de ligando de la familia de TNF
CN106999583A (zh) 2014-11-17 2017-08-01 豪夫迈·罗氏有限公司 包含ox40结合激动剂和pd‑1轴结合拮抗剂的组合疗法
JP6779876B2 (ja) 2014-11-19 2020-11-04 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗トランスフェリン受容体抗体及びその使用方法
EP3221364B1 (en) 2014-11-19 2020-12-16 Genentech, Inc. Antibodies against bace1 and use thereof for neural disease immunotherapy
EP3221361B1 (en) 2014-11-19 2021-04-21 Genentech, Inc. Anti-transferrin receptor / anti-bace1 multispecific antibodies and methods of use
SG11201704056XA (en) 2014-11-20 2017-06-29 Hoffmann La Roche Combination therapy of t cell activating bispecific antigen binding molecules cd3 abd folate receptor 1 (folr1) and pd-1 axis binding antagonists
RS61010B1 (sr) 2014-11-20 2020-11-30 Hoffmann La Roche Bispecifični antigen vezujući molekuli koji aktiviraju t ćelije protiv folr1 i cd3
ES2808853T3 (es) 2014-11-20 2021-03-02 Hoffmann La Roche Cadenas ligeras comunes y procedimientos de uso
WO2016087416A1 (en) 2014-12-03 2016-06-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Multispecific antibodies
MX386587B (es) 2014-12-05 2025-03-19 Genentech Inc ANTICUERPOS ANTI-CD79b Y MÉTODOS DE USO.
SG11201703750XA (en) 2014-12-10 2017-06-29 Genentech Inc Blood brain barrier receptor antibodies and methods of use
EA201791366A1 (ru) 2014-12-19 2018-02-28 Чугаи Сейяку Кабусики Кайся Антитела к c5 и способы их применения
MX2017005774A (es) 2014-12-19 2017-07-28 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpos antimiostatina, polipeptidos que contienen regiones fc variantes, y metodos de uso.
US20160200815A1 (en) 2015-01-05 2016-07-14 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies that inhibit tim-3:lilrb2 interactions and uses thereof
CN107660214B (zh) 2015-01-08 2022-02-08 根马布股份公司 针对cd3和cd20的双特异性抗体
US10495645B2 (en) 2015-01-16 2019-12-03 Academia Sinica Cancer markers and methods of use thereof
US20160208018A1 (en) 2015-01-16 2016-07-21 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for ror1
US9975965B2 (en) 2015-01-16 2018-05-22 Academia Sinica Compositions and methods for treatment and detection of cancers
US20180016327A1 (en) 2015-01-22 2018-01-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha A Combination of Two or More Anti-C5 Antibodies and Methods of Use
AU2015378564A1 (en) 2015-01-24 2017-07-13 Academia Sinica Novel glycan conjugates and methods of use thereof
CN107636170A (zh) 2015-02-04 2018-01-26 健泰科生物技术公司 突变型Smoothened及其使用方法
CN114773469B (zh) 2015-02-05 2025-12-19 中外制药株式会社 包含离子浓度依赖性的抗原结合结构域的抗体，fc区变体，il-8-结合抗体及其应用
US10301377B2 (en) 2015-02-24 2019-05-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Middle east respiratory syndrome coronavirus immunogens, antibodies, and their use
EP3271723A1 (en) 2015-03-16 2018-01-24 F. Hoffmann-La Roche AG Methods of detecting and quantifying il-13 and uses in diagnosing and treating th2-associated diseases
WO2016146833A1 (en) 2015-03-19 2016-09-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Biomarkers for nad(+)-diphthamide adp ribosyltransferase resistance
HRP20200583T1 (hr) 2015-03-20 2020-07-10 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Protutijela koja neutraliziraju gp120 i njihova upotreba
JP6815329B2 (ja) 2015-03-23 2021-01-20 バイエル ファーマ アクチエンゲゼルシャフト 抗ｃｅａｃａｍ６抗体およびその使用
MA53297A (fr) 2015-03-23 2022-05-04 Jounce Therapeutics Inc Anticorps anti-icos
CN114456272A (zh) 2015-04-03 2022-05-10 优瑞科生物技术公司 靶向afp肽/mhc复合体的构建体及其用途
EP3286315B1 (en) 2015-04-24 2021-05-26 F. Hoffmann-La Roche AG Methods of identifying bacteria comprising binding polypeptides
WO2016174917A1 (ja) * 2015-04-30 2016-11-03 富士フイルム株式会社 装飾シート
EP3778640A1 (en) 2015-05-01 2021-02-17 Genentech, Inc. Masked anti-cd3 antibodies and methods of use
WO2016179194A1 (en) 2015-05-04 2016-11-10 Jounce Therapeutics, Inc. Lilra3 and method of using the same
CN116196414A (zh) 2015-05-11 2023-06-02 豪夫迈·罗氏有限公司 治疗狼疮性肾炎的组合物和方法
DK3294770T4 (da) 2015-05-12 2024-05-21 Hoffmann La Roche Terapeutiske og diagnostiske fremgangsmåder til cancer
EP3303632B2 (en) 2015-05-29 2023-05-10 F. Hoffmann-La Roche AG Therapeutic and diagnostic methods for cancer
EP3302563A1 (en) 2015-05-29 2018-04-11 H. Hoffnabb-La Roche Ag Humanized anti-ebola virus glycoprotein antibodies and methods of use
HK1249016A1 (zh) 2015-06-02 2018-10-26 豪夫迈‧罗氏有限公司 使用抗il-34抗体治疗神经疾病的组合物和方法
WO2016196975A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health & Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
WO2016193497A1 (en) 2015-06-04 2016-12-08 Ospedale San Raffaele Srl Inhibitor of igfbp3/tmem219 axis and diabetes
CA2986080C (en) 2015-06-04 2023-12-05 Ospedale San Raffaele Srl Inhibitor of igfbp3 for the treatment of intestinal disorders
NZ775762A (en) 2015-06-05 2025-02-28 Genentech Inc Anti-tau antibodies and methods of use
AU2016274585A1 (en) 2015-06-08 2017-12-14 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using anti-OX40 antibodies
EP3303397A1 (en) 2015-06-08 2018-04-11 H. Hoffnabb-La Roche Ag Methods of treating cancer using anti-ox40 antibodies and pd-1 axis binding antagonists
US10017577B2 (en) 2015-06-15 2018-07-10 Genentech, Inc. Antibodies and immunoconjugates
US10323094B2 (en) 2015-06-16 2019-06-18 Genentech, Inc. Humanized and affinity matured antibodies to FcRH5 and methods of use
TW201718647A (zh) 2015-06-16 2017-06-01 建南德克公司 抗-cll-1抗體及使用方法
EP3310811B1 (en) 2015-06-16 2021-06-16 Genentech, Inc. Anti-cd3 antibodies and methods of use
HK1254432A1 (zh) 2015-06-17 2019-07-19 Allakos Inc. 用於治疗纤维性疾病的方法和组合物
ES3043088T3 (en) 2015-06-17 2025-11-24 Hoffmann La Roche Anti-her2 antibodies and methods of use
HRP20260689T1 (hr) 2015-06-17 2026-07-17 F. Hoffmann-La Roche Ag Postupci za liječenje lokalno uznapredovalog ili metastatskog raka dojke primjenom antagonista vezivanja osi pd-1 i taksana
CN107847592B (zh) * 2015-06-24 2022-01-21 豪夫迈·罗氏有限公司 用于在淋巴瘤或白血病中诱导淋巴细胞增多的针对人csf-1r的抗体
EP3108897A1 (en) 2015-06-24 2016-12-28 F. Hoffmann-La Roche AG Antibodies against human csf-1r for use in inducing lymphocytosis in lymphomas or leukemias
JP7021955B2 (ja) 2015-06-24 2022-03-03 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｈｅｒ２及び血液脳関門受容体に特異的な三重特異性抗体及び使用方法
AU2016282334B2 (en) 2015-06-24 2022-07-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-transferrin receptor antibodies with tailored affinity
CN108026172B (zh) 2015-06-26 2022-04-29 赛诺菲生物技术公司 单克隆抗il-1racp抗体
WO2017004091A1 (en) 2015-06-29 2017-01-05 Genentech, Inc. Type ii anti-cd20 antibody for use in organ transplantation
ES2878316T3 (es) 2015-06-29 2021-11-18 Ventana Med Syst Inc Materiales y procedimientos para realizar ensayos histoquímicos de pro-epirregulina y anfirregulina humanas
FR3038517B1 (fr) 2015-07-06 2020-02-28 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Utilisation de fragments fc modifies en immunotherapie
CN105384825B (zh) 2015-08-11 2018-06-01 南京传奇生物科技有限公司 一种基于单域抗体的双特异性嵌合抗原受体及其应用
EP3341415B1 (en) 2015-08-28 2021-03-24 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-hypusine antibodies and uses thereof
JP6904947B2 (ja) 2015-09-22 2021-07-21 スプリング バイオサイエンス コーポレーション 抗ｏｘ４０抗体及びその診断用途
JP6959912B2 (ja) 2015-09-23 2021-11-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｖｅｇｆ抗体の最適化変異体
ES2768957T3 (es) 2015-09-24 2020-06-24 Abvitro Llc Composiciones de anticuerpos contra el VIH y métodos de uso
SG10202007764TA (en) 2015-09-25 2020-09-29 Genentech Inc Anti-tigit antibodies and methods of use
AU2016332900C1 (en) 2015-09-29 2024-07-04 Amgen Inc. ASGR inhibitors
AR106188A1 (es) 2015-10-01 2017-12-20 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-cd19 humano humanizados y métodos de utilización
MY206406A (en) 2015-10-02 2024-12-16 Hoffmann La Roche Bispecific antibodies specific for a costimulatory tnf receptor
MA43028B1 (fr) 2015-10-02 2021-09-30 Hoffmann La Roche Anticorps bispécifiques pour pd1 et tim3
EP3150636A1 (en) 2015-10-02 2017-04-05 F. Hoffmann-La Roche AG Tetravalent multispecific antibodies
MX2018003822A (es) 2015-10-02 2018-06-22 Hoffmann La Roche Anticuerpos biespecificos contra el cd20 humano y el receptor de transferrina humano y metodos de uso.
CR20180243A (es) 2015-10-02 2018-07-31 Genentech Inc Conjugados de anticuerpo-fármaco de pirrolobenzodiazepina y métodos de uso
AR106189A1 (es) 2015-10-02 2017-12-20 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS BIESPECÍFICOS CONTRA EL A-b HUMANO Y EL RECEPTOR DE TRANSFERRINA HUMANO Y MÉTODOS DE USO
JP7044700B2 (ja) 2015-10-02 2022-03-30 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 二重特異性抗ｃｅａｘｃｄ３ ｔ細胞活性化抗原結合分子
PE20181349A1 (es) 2015-10-07 2018-08-22 Hoffmann La Roche Anticuerpos biespecificos con tetravalencia para un receptor de fnt coestimulador
AU2016335750B2 (en) 2015-10-07 2023-05-25 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services IL-7R-alpha specific antibodies for treating acute lymphoblastic leukemia
US10604577B2 (en) 2015-10-22 2020-03-31 Allakos Inc. Methods and compositions for treating systemic mastocytosis
US10968277B2 (en) 2015-10-22 2021-04-06 Jounce Therapeutics, Inc. Gene signatures for determining ICOS expression
EP3184547A1 (en) 2015-10-29 2017-06-28 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-tpbg antibodies and methods of use
EP4015533A1 (en) 2015-10-29 2022-06-22 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-variant fc-region antibodies and methods of use
TW201730211A (zh) 2015-10-30 2017-09-01 建南德克公司 抗因子d抗體及結合物
BR112018007703A2 (pt) 2015-10-30 2018-11-06 Genentech Inc anticorpos, ácido nucleico isolado, métodos de produção de um anticorpo e de tratamento de um distúrbio, composição farmacêutica, terapia de combinação e uso do anticorpo
EP4011911A1 (en) 2015-11-03 2022-06-15 The United States of America as represented by The Secretary Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 gp41 and their use
WO2017079768A1 (en) 2015-11-08 2017-05-11 Genentech, Inc. Methods of screening for multispecific antibodies
SG10201913538VA (en) 2015-11-23 2020-02-27 Five Prime Therapeutics Inc Fgfr2 inhibitors alone or in combination with immune stimulating agents in cancer treatment
IL313608A (en) 2015-12-09 2024-08-01 Hoffmann La Roche Antibody against CD20 type II to reduce the formation of antibodies against drugs
EP3178848A1 (en) 2015-12-09 2017-06-14 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody for reducing formation of anti-drug antibodies
CN108401431B (zh) 2015-12-18 2022-01-25 中外制药株式会社 抗-c5抗体及使用方法
EA201891420A1 (ru) 2015-12-18 2019-02-28 Чугаи Сейяку Кабусики Кайся Антитела к миостатину, полипептиды, содержащие варианты fc-областей, и способы их применения
BR112018011029A2 (pt) 2016-01-08 2018-11-21 Hoffmann La Roche métodos para tratar ou atrasar a progressão do câncer e para melhorar a função imune em um indivíduo com câncer, usos de um antagonista de ligação e de um anticorpo biespecífico, composições e kits
EP3405489A1 (en) 2016-01-20 2018-11-28 Genentech, Inc. High dose treatments for alzheimer's disease
AU2017213826A1 (en) 2016-02-04 2018-08-23 Curis, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
WO2017151502A1 (en) 2016-02-29 2017-09-08 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for cancer
WO2017148880A1 (en) * 2016-03-01 2017-09-08 F. Hoffmann-La Roche Ag Obinutuzumab variants having altered cell death induction
CN109195996A (zh) 2016-03-08 2019-01-11 中央研究院 N-聚醣及其阵列的模组化合成方法
CN109153719B (zh) 2016-03-15 2022-12-30 中外制药株式会社 使用pd-1轴结合拮抗剂和抗gpc3抗体治疗癌症的方法
JP7015244B2 (ja) 2016-03-22 2022-02-02 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト プロテアーゼ活性化ｔ細胞二重特異性分子
CN108700598A (zh) 2016-03-25 2018-10-23 豪夫迈·罗氏有限公司 多路总抗体和抗体缀合的药物量化测定法
CN117986363A (zh) 2016-03-31 2024-05-07 恩格姆生物制药公司 结合蛋白及其使用方法
EP3443004A1 (en) 2016-04-14 2019-02-20 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-rspo3 antibodies and methods of use
EP4656204A3 (en) 2016-04-15 2026-06-03 BioAtla, Inc. Anti-axl antibodies, antibody fragments and their immunoconjugates and uses thereof
PL3443350T3 (pl) 2016-04-15 2021-05-31 F. Hoffmann-La Roche Ag Sposoby monitorowania i leczenia nowotworu
WO2017181079A2 (en) 2016-04-15 2017-10-19 Genentech, Inc. Methods for monitoring and treating cancer
WO2017192589A1 (en) 2016-05-02 2017-11-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to influenza ha and their use and identification
JP6675017B2 (ja) 2016-05-02 2020-04-01 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ コントースボディ−単鎖標的結合物質
EP3241845A1 (en) 2016-05-06 2017-11-08 MAB Discovery GmbH Humanized anti-il-1r3 antibodies
EP3243836A1 (en) 2016-05-11 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG C-terminally fused tnf family ligand trimer-containing antigen binding molecules
JP7089483B2 (ja) 2016-05-11 2022-06-22 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 修飾された抗テネイシン抗体及び使用方法
EP3455254B1 (en) 2016-05-11 2021-07-07 F. Hoffmann-La Roche AG Antigen binding molecules comprising a tnf family ligand trimer and a tenascin binding moiety
EP4122958A1 (en) 2016-05-13 2023-01-25 BioAtla, Inc. Anti-ror2 antibodies, antibody fragments, their immunoconjugates and uses thereof
EP3243832A1 (en) 2016-05-13 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG Antigen binding molecules comprising a tnf family ligand trimer and pd1 binding moiety
CN109152843A (zh) 2016-05-20 2019-01-04 豪夫迈·罗氏有限公司 Protac抗体缀合物及其使用方法
CN109313200B (zh) 2016-05-27 2022-10-04 豪夫迈·罗氏有限公司 用于表征位点特异性抗体-药物缀合物的生物分析性方法
EP3252078A1 (en) 2016-06-02 2017-12-06 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer
TWI760396B (zh) 2016-06-17 2022-04-11 日商中外製藥股份有限公司 抗肌抑素抗體及使用方法
EP3257866A1 (en) 2016-06-17 2017-12-20 Academisch Medisch Centrum Modified anti-tnf antibody and use thereof in the treatment of ibd
JP7133477B2 (ja) 2016-06-24 2022-09-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ポリユビキチン多重特異性抗体
EP3478722A1 (en) * 2016-06-30 2019-05-08 F. Hoffmann-La Roche AG Improved adoptive t-cell therapy
MA45554A (fr) 2016-07-01 2019-05-08 Resolve Therapeutics Llc Fusions de binucléase optimisées.
JP6983824B2 (ja) 2016-07-04 2021-12-17 エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft 新規抗体フォーマット
WO2018014260A1 (en) 2016-07-20 2018-01-25 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Multispecific antigen binding proteins and methods of use thereof
MA45784A (fr) 2016-07-29 2019-06-05 Juno Therapeutics Inc Anticorps anti-idiotypes dirigés contre anti-cd19 anticorps
CA3027018A1 (en) 2016-07-29 2018-02-01 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Bispecific antibody exhibiting increased alternative fviii-cofactor-function activity
CN116271014A (zh) 2016-08-05 2023-06-23 中外制药株式会社 用于预防或治疗il-8相关疾病的组合物
WO2018029124A1 (en) 2016-08-08 2018-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Therapeutic and diagnostic methods for cancer
PL3896091T3 (pl) 2016-08-10 2024-04-29 Legend Biotech Ireland Limited Chimeryczne receptory antygenowe nakierowane na bcma i sposoby ich zastosowania
CA3034057A1 (en) 2016-08-22 2018-03-01 CHO Pharma Inc. Antibodies, binding fragments, and methods of use
CN107384932B (zh) 2016-08-31 2020-10-20 北京天广实生物技术股份有限公司 抗人cd20人源化单克隆抗体mil62、其制备方法及用途
CA3035081A1 (en) 2016-09-02 2018-03-08 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Composition and methods of treating b cell disorders
US11168148B2 (en) 2016-09-07 2021-11-09 The Regents Of The University Of California Antibodies to oxidation-specific epitopes
SG10201607778XA (en) 2016-09-16 2018-04-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-Dengue Virus Antibodies, Polypeptides Containing Variant Fc Regions, And Methods Of Use
CN116731197A (zh) 2016-09-19 2023-09-12 豪夫迈·罗氏有限公司 基于补体因子的亲和层析
TWI787203B (zh) 2016-09-23 2022-12-21 美商建南德克公司 Il-13拮抗劑用於治療異位性皮炎之用途
CN109843926B (zh) 2016-09-30 2023-01-20 豪夫迈·罗氏有限公司 针对cd3的双特异性抗体
KR20190062505A (ko) 2016-10-03 2019-06-05 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 Hpv-특이적 결합 분자
JP7050770B2 (ja) 2016-10-05 2022-04-08 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 抗体薬物コンジュゲートの調製方法
KR102804118B1 (ko) 2016-10-06 2025-05-09 제넨테크, 인크. 암에 대한 치료 및 진단 방법
WO2018068201A1 (en) 2016-10-11 2018-04-19 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies and variants thereof against ctla-4
EP3532091A2 (en) 2016-10-29 2019-09-04 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-mic antibidies and methods of use
LT3535298T (lt) 2016-11-02 2021-12-27 Jounce Therapeutics, Inc. Antikūnai prieš pd-1 ir jų panaudojimas
EP3541843A1 (en) 2016-11-15 2019-09-25 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies
JOP20190100A1 (ar) 2016-11-19 2019-05-01 Potenza Therapeutics Inc بروتينات ربط مولد ضد مضاد لـ gitr وطرق استخدامها
CA3036983A1 (en) 2016-11-21 2018-05-24 Cureab Gmbh Anti-gp73 antibodies and immunoconjugates
EP3551220B1 (en) 2016-12-07 2025-01-29 Genentech, Inc. Anti-tau antibodies and methods of use
EP3551655A2 (en) 2016-12-07 2019-10-16 Genentech, Inc. Anti-tau antibodies and methods of their use
WO2018111890A1 (en) 2016-12-12 2018-06-21 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using anti-pd-l1 antibodies and antiandrogens
JP7125400B2 (ja) 2016-12-19 2022-08-24 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 標的化４－１ｂｂ（ｃｄ１３７）アゴニストとの併用療法
KR102692708B1 (ko) 2016-12-20 2024-08-07 에프. 호프만-라 로슈 아게 항-cd20/항-cd3 이중특이성 항체 및 4-1bb(cd137) 작용물질의 병용 요법
JOP20190134A1 (ar) 2016-12-23 2019-06-02 Potenza Therapeutics Inc بروتينات رابطة لمولد ضد مضادة لنيوروبيلين وطرق استخدامها
CA3047070A1 (en) 2017-01-03 2018-07-12 F.Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antigen binding molecules comprising anti-4-1bb clone 20h4.9
TW201825515A (zh) 2017-01-04 2018-07-16 美商伊繆諾金公司 Ｍｅｔ抗體以及其免疫結合物及用途
TW201831517A (zh) 2017-01-12 2018-09-01 美商優瑞科生物技術公司 靶向組織蛋白h3肽/mhc複合體之構築體及其用途
EP3580235B1 (en) 2017-02-10 2024-05-01 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
CN116715775A (zh) 2017-02-10 2023-09-08 豪夫迈·罗氏有限公司 抗类胰蛋白酶抗体、其组合物及其用途
MX2019010295A (es) 2017-03-01 2019-11-21 Genentech Inc Métodos de diagnóstico y terapéuticos para el cáncer.
EP3600442A1 (en) 2017-03-22 2020-02-05 Genentech, Inc. Optimized antibody compositions for treatment of ocular disorders
CN117205311A (zh) 2017-03-28 2023-12-12 基因泰克公司 治疗神经退行性疾病的方法
WO2018178055A1 (en) 2017-03-29 2018-10-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antigen binding molecule for a costimulatory tnf receptor
WO2018178076A1 (en) 2017-03-29 2018-10-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antigen binding molecule for a costimulatory tnf receptor
JOP20190203A1 (ar) 2017-03-30 2019-09-03 Potenza Therapeutics Inc بروتينات رابطة لمولد ضد مضادة لـ tigit وطرق استخدامها
CN110402255B (zh) 2017-04-04 2022-12-02 豪夫迈·罗氏有限公司 新颖的能够特异性结合cd40和fap的双特异性抗原结合分子
CA3052532A1 (en) 2017-04-05 2018-10-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antibodies specifically binding to pd1 and lag3
MY200973A (en) 2017-04-11 2024-01-26 Inhibrx Inc Multispecific Polypeptide Constructs Having Constrained Cd3 Binding And Methods Of Using The Same
CN110621787A (zh) 2017-04-14 2019-12-27 豪夫迈·罗氏有限公司 用于癌症的诊断和治疗方法
ES2994451T3 (en) 2017-04-20 2025-01-24 Atyr Pharma Inc Compositions for treating lung inflammation
TW201841656A (zh) 2017-04-21 2018-12-01 美商建南德克公司 Ｋｌｋ５拮抗劑用於治療疾病之用途
EP3615574B1 (en) 2017-04-26 2026-06-24 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs specifically recognizing glypican 3 and uses thereof
TWI791519B (zh) 2017-04-27 2023-02-11 美商提薩羅有限公司 針對淋巴細胞活化基因-3（lag-3）之抗體藥劑及其用途
BR112019022912A2 (pt) 2017-05-05 2020-05-26 Allakos Inc. Métodos e composições para tratar doenças oculares alérgicas
EP3401332A1 (en) 2017-05-08 2018-11-14 MAB Discovery GmbH Anti-il-1r3 antibodies for use in inflammatory conditions
DK3624837T3 (da) 2017-05-16 2025-09-29 Five Prime Therapeutics Inc Anti-fgfr2-antistoffer i kombination med kemoterapeutiske midler til kræftbehandling
JP2020521791A (ja) 2017-06-02 2020-07-27 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト がんの治療のためのｉｉ型抗ｃｄ２０抗体及び抗ｃｄ２０／ｃｄ３０二重特異性抗体
WO2019011918A1 (en) 2017-07-10 2019-01-17 International - Drug - Development - Biotech TREATMENT OF LYMPHOCYTE B MALIGNANCIES USING AFUCOSYLATED PRO-APOPTOTIC ANTI-CD19 ANTIBODIES IN COMBINATION WITH ANTI-CD20 ANTIBODIES OR CHEMOTHERAPEUTIC AGENTS
AU2018304458B2 (en) 2017-07-21 2021-12-09 Foundation Medicine, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for cancer
CN111201030B (zh) 2017-07-25 2024-11-01 真和制药有限公司 通过阻断tim-3和其配体的相互作用治疗癌症
JP2020528061A (ja) 2017-07-26 2020-09-17 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト ＢＥＴ阻害剤、Ｂｃｌ−２阻害剤及び抗ＣＤ２０抗体を用いた併用療法
EP3658589B1 (en) 2017-07-26 2023-09-27 Forty Seven, Inc. Anti-sirp-alpha antibodies and related methods
AU2018314765C1 (en) 2017-08-08 2025-11-20 Bruker Spatial Biology, Inc. Obinutuzumab treatment of a DLBCL patient subgroup
CN107881160A (zh) 2017-08-11 2018-04-06 百奥泰生物科技(广州)有限公司 一种由基因组被编辑的cho宿主细胞产生的具有独特糖谱的重组抗体及其制备方法
CN111511762B (zh) 2017-08-21 2025-05-06 天演药业公司 抗cd137分子及其用途
CN111315767B (zh) 2017-08-22 2025-03-18 萨纳生物有限责任公司 可溶性干扰素受体及其用途
EP3456738B1 (en) * 2017-09-19 2024-07-17 Tillotts Pharma Ag Antibody variants
JP7382922B2 (ja) 2017-09-20 2023-11-17 中外製薬株式会社 Ｐｄ－１系結合アンタゴニストおよびｇｐｃ３標的化剤を使用する併用療法のための投与レジメン
US11952408B2 (en) 2017-10-03 2024-04-09 Juno Therapeutics, Inc. HPV-specific binding molecules
CN119264274A (zh) 2017-10-12 2025-01-07 免疫苏醒公司 Vegfr-抗体轻链融合蛋白
PL3697818T3 (pl) 2017-10-19 2025-03-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Leczenie CD20-dodatniego chłoniaka z limfocytów B obinutuzumabem
EP3704155A2 (en) 2017-11-01 2020-09-09 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy with targeted ox40 agonists
CN111246884A (zh) 2017-11-01 2020-06-05 豪夫迈·罗氏有限公司 新颖的含有tnf家族配体三聚体的抗原结合分子
PE20210844A1 (es) 2017-11-01 2021-05-10 Hoffmann La Roche Contorsbodies 2 + biespecificos
MA49911A (fr) 2017-11-01 2020-06-24 Juno Therapeutics Inc Anticorps et récepteurs antigéniques chimériques spécifiques de l'antigene de maturation des lymphocytes b
WO2019090263A1 (en) 2017-11-06 2019-05-09 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for cancer
EP4640703A3 (en) 2017-11-14 2026-04-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-c1s antibodies and methods of use
CN111615520A (zh) 2017-12-01 2020-09-01 辉瑞大药厂 抗cxcr5抗体及其组合物和用途
CN111212660A (zh) 2017-12-14 2020-05-29 豪夫迈·罗氏有限公司 Cea cd3双特异性抗体和pd-1轴结合拮抗剂在治疗癌症的剂量方案中的用途
EP3724225A1 (en) 2017-12-15 2020-10-21 Juno Therapeutics, Inc. Anti-cct5 binding molecules and methods of use thereof
EP3502140A1 (en) 2017-12-21 2019-06-26 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy of tumor targeted icos agonists with t-cell bispecific molecules
US20190211098A1 (en) 2017-12-22 2019-07-11 Genentech, Inc. Use of pilra binding agents for treatment of a disease
EP4219559A3 (en) 2017-12-22 2023-10-18 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies for lilrb2
SG11202004158QA (en) 2017-12-28 2020-06-29 Nanjing Legend Biotech Co Ltd Single-domain antibodies and variants thereof against tigit
KR102845020B1 (ko) 2017-12-28 2025-08-12 난징 레전드 바이오테크 씨오., 엘티디. Pd-l1에 대한 항체 및 변이체
US11976109B2 (en) 2018-01-02 2024-05-07 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to ebola virus glycoprotein and their use
KR20240134250A (ko) 2018-01-04 2024-09-06 아이코닉 테라퓨틱스, 인코포레이티드 항-조직 인자 항체, 항체-약물 결합체, 및 관련 방법
US11466077B2 (en) 2018-01-05 2022-10-11 Ac Immune Sa Misfolded TDP-43 binding molecules
EP3508499A1 (en) 2018-01-08 2019-07-10 iOmx Therapeutics AG Antibodies targeting, and other modulators of, an immunoglobulin gene associated with resistance against anti-tumour immune responses, and uses thereof
US12247060B2 (en) 2018-01-09 2025-03-11 Marengo Therapeutics, Inc. Calreticulin binding constructs and engineered T cells for the treatment of diseases
CA3084518A1 (en) 2018-01-15 2019-07-18 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies and variants thereof against pd-1
EP3740505A1 (en) 2018-01-16 2020-11-25 Lakepharma Inc. Bispecific antibody that binds cd3 and another target
PL3743088T3 (pl) 2018-01-26 2023-03-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Kompozycje i sposoby stosowania il-22 fc
CN111655717A (zh) 2018-01-26 2020-09-11 豪夫迈·罗氏有限公司 IL-22 Fc融合蛋白及使用方法
AU2019214183B2 (en) 2018-02-01 2022-04-07 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Fully human anti-B cell maturation antigen (BCMA) single chain variable fragment, and application thereof
WO2019148445A1 (en) 2018-02-02 2019-08-08 Adagene Inc. Precision/context-dependent activatable antibodies, and methods of making and using the same
CN111699004A (zh) 2018-02-06 2020-09-22 豪夫迈·罗氏有限公司 眼科疾病的治疗
CR20200391A (es) 2018-02-08 2020-10-19 Genentech Inc Moléculas biespecíficas de unión al antígeno y métodos de uso
KR20220098056A (ko) 2018-02-09 2022-07-08 제넨테크, 인크. 비만 세포 매개 염증성 질환에 대한 치료 및 진단 방법
CA3091646A1 (en) 2018-02-14 2019-08-22 Abba Therapeutics Ag Anti-human pd-l2 antibodies
CN111971299A (zh) 2018-02-21 2020-11-20 美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表) HIV-1 Env的中和抗体及其用途
CA3091139A1 (en) 2018-02-21 2019-08-29 Genentech, Inc. Dosing for treatment with il-22 fc fusion proteins
US20200399376A1 (en) 2018-02-26 2020-12-24 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
TWI841551B (zh) 2018-03-13 2024-05-11 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 使用靶向4-1bb (cd137)之促效劑的組合療法
PL3765489T3 (pl) 2018-03-13 2025-02-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Terapeutyczne połączenie agonistów 4-1BB z przeciwciałami anty-CD20
US20200040103A1 (en) 2018-03-14 2020-02-06 Genentech, Inc. Anti-klk5 antibodies and methods of use
EP3765517A1 (en) 2018-03-14 2021-01-20 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof
CA3087423A1 (en) 2018-03-14 2019-09-19 Beijing Xuanyi Pharmasciences Co., Ltd. Anti-claudin 18.2 antibodies
TWI827585B (zh) 2018-03-15 2024-01-01 日商中外製藥股份有限公司 對茲卡病毒具有交叉反應性的抗登革病毒抗體及其使用方法
SG11202008593PA (en) 2018-03-21 2020-10-29 Five Prime Therapeutics Inc ANTIBODIES BINDING TO VISTA AT ACIDIC pH
AU2019241350B2 (en) 2018-03-30 2025-10-02 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies against LAG-3 and uses thereof
TW202011029A (zh) 2018-04-04 2020-03-16 美商建南德克公司 偵測及定量fgf21之方法
CN112566698A (zh) 2018-04-05 2021-03-26 朱诺治疗学股份有限公司 T细胞受体和表达该t细胞受体的工程化细胞
WO2019195770A1 (en) 2018-04-06 2019-10-10 Atyr Pharma, Inc. Compositions and methods comprising anti-nrp2 antibodies
TW202010757A (zh) 2018-04-11 2020-03-16 美商英伊布里克斯公司 具有經受限cd3結合的多重特異性多肽構築體以及相關方法及用途
CR20200459A (es) 2018-04-13 2020-11-11 Hoffmann La Roche Moléculas de unión a antígeno dirigidas a her2 que comprendan 4-1bbl
EP3560945A1 (en) 2018-04-27 2019-10-30 F. Hoffmann-La Roche AG Methods for purification of polypeptides using polysorbates
JP2021525806A (ja) 2018-06-01 2021-09-27 タユー ファシャ バイオテック メディカル グループ カンパニー， リミテッド 疾患または状態を処置するための組成物およびそれらの使用
WO2019227490A1 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Compositions and methods for imaging
EP3805400A4 (en) 2018-06-04 2022-06-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule showing changed half-life in cytoplasm
TWI920652B (zh) 2018-06-07 2026-04-01 美商思進公司 喜樹鹼結合物
CN112469440B (zh) 2018-06-18 2024-09-06 优瑞科生物技术公司 靶向前列腺特异性膜抗原(psma)的构建体和其用途
JP7513530B2 (ja) 2018-06-22 2024-07-09 ジェンマブ ホールディング ビー．ブイ． 抗ｃｄ３７抗体および抗ｃｄ２０抗体、組成物、ならびにそれらの使用方法
TWI890148B (zh) 2018-06-23 2025-07-11 美商建南德克公司 以pd-1軸結合拮抗劑、鉑劑及拓撲異構酶ii抑制劑治療肺癌之方法
WO2020010250A2 (en) 2018-07-03 2020-01-09 Elstar Therapeutics, Inc. Anti-tcr antibody molecules and uses thereof
TW202035447A (zh) 2018-07-04 2020-10-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 新穎雙特異性促效性4-1bb抗原結合分子
US12097199B2 (en) 2018-07-09 2024-09-24 Takeda Pharmaceutical Company Limited Administration of SUMO-activating enzyme inhibitor and anti-CD20 antibodies
MY201995A (en) 2018-07-09 2024-03-28 Five Prime Therapeutics Inc Antibodies binding to ilt4
WO2020014306A1 (en) 2018-07-10 2020-01-16 Immunogen, Inc. Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof
AU2019301120A1 (en) 2018-07-11 2021-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to VISTA at acidic pH
EP3823611A1 (en) 2018-07-18 2021-05-26 Genentech, Inc. Methods of treating lung cancer with a pd-1 axis binding antagonist, an antimetabolite, and a platinum agent
JP7072715B2 (ja) 2018-07-20 2022-05-20 サーフィス オンコロジー インコーポレイテッド 抗ｃｄ１１２ｒ組成物及び方法
WO2020023553A1 (en) 2018-07-24 2020-01-30 Inhibrx, Inc. Multispecific polypeptide constructs containing a constrained cd3 binding domain and a receptor binding region and methods of using the same
AU2019312366B2 (en) 2018-07-26 2025-08-14 Atyr Pharma, Inc. Compositions and methods for treating NRP2-associated diseases
US12435137B2 (en) 2018-08-03 2025-10-07 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule containing two antigen-binding domains that are linked to each other
US12172106B2 (en) 2018-08-09 2024-12-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for assessing binding affinity of an antibody variant to the neonatal Fc receptor
MX2021001431A (es) 2018-08-10 2021-05-12 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Molecula de union al antigeno anti grupo de diferenciacion 137 (cd137) y su uso.
US12259395B2 (en) 2018-08-17 2025-03-25 Ab Studio Inc. Catabodies and methods of use thereof
GB201814281D0 (en) 2018-09-03 2018-10-17 Femtogenix Ltd Cytotoxic agents
WO2020052543A1 (en) 2018-09-10 2020-03-19 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies against cd33 and constructs thereof
CA3111401A1 (en) 2018-09-19 2020-03-26 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for bladder cancer
AU2019342133B8 (en) 2018-09-21 2025-08-07 Genentech, Inc. Diagnostic methods for triple-negative breast cancer
CN113286812B (zh) 2018-09-27 2025-05-30 西里欧发展公司 掩蔽型细胞因子多肽
CN112654641A (zh) 2018-10-01 2021-04-13 豪夫迈·罗氏有限公司 具有与cd40的三价结合的双特异性抗原结合分子
US11242396B2 (en) 2018-10-01 2022-02-08 Hoffmann-La Roche Inc. Bispecific antigen binding molecules comprising anti-FAP clone 212
EP3632929A1 (en) 2018-10-02 2020-04-08 Ospedale San Raffaele S.r.l. Antibodies and uses thereof
PE20211213A1 (es) 2018-10-05 2021-07-05 Five Prime Therapeutics Inc Formulaciones de anticuerpos anti-fgfr2
US12331320B2 (en) 2018-10-10 2025-06-17 The Research Foundation For The State University Of New York Genome edited cancer cell vaccines
AU2019356573B2 (en) 2018-10-11 2025-12-18 Inhibrx Biosciences, Inc. PD-1 single domain antibodies and therapeutic compositions thereof
WO2020081493A1 (en) 2018-10-16 2020-04-23 Molecular Templates, Inc. Pd-l1 binding proteins
EP3867646A1 (en) 2018-10-18 2021-08-25 F. Hoffmann-La Roche AG Diagnostic and therapeutic methods for sarcomatoid kidney cancer
GB2596411B (en) * 2018-10-29 2023-09-20 Tigatx Inc Compositions and methods comprising IgA antibody constructs
CN119033684A (zh) 2018-10-29 2024-11-29 豪夫迈·罗氏有限公司 抗体制剂
WO2020089380A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Bayer Aktiengesellschaft REVERSAL AGENTS FOR NEUTRALIZING THE THERAPEUTIC ACTIVITY OF ANTI-FXIa ANTIBODIES
JP7627216B2 (ja) 2018-11-16 2025-02-05 メモリアル スローン ケタリング キャンサー センター ムチン－１６に対する抗体およびそれを使用する方法
CN116003597A (zh) 2018-11-27 2023-04-25 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性识别粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体α的抗体及其用途
MX2021006578A (es) 2018-12-05 2021-07-07 Genentech Inc Procedimientos de diagnostico y composiciones para la inmunoterapia contra el cancer.
BR112021010908A2 (pt) 2018-12-06 2021-08-31 Genentech, Inc. Método para tratamento de linfoma difuso de grandes células b, kit e imunoconjugado
EP3894427A1 (en) 2018-12-10 2021-10-20 Genentech, Inc. Photocrosslinking peptides for site specific conjugation to fc-containing proteins
KR20250116790A (ko) 2018-12-12 2025-08-01 카이트 파마 인코포레이티드 키메라 항원 수용체 및 car-t 세포 및 사용 방법
EP3883609A2 (en) 2018-12-20 2021-09-29 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Ebola virus glycoprotein-specific monoclonal antibodies and uses thereof
CN113227131B (zh) 2018-12-20 2025-03-04 豪夫迈·罗氏有限公司 经修饰的抗体Fc及其使用方法
US20200223925A1 (en) 2018-12-21 2020-07-16 Hoffmann-La Roche Inc. Tumor-targeted superagonistic cd28 antigen binding molecules
CR20210326A (es) 2018-12-21 2021-09-10 Hoffmann La Roche Moléculas agonistas de unión al antígeno cd28 que actúan sobre el tumor
BR112021012631A2 (pt) 2018-12-26 2021-12-14 Xilio Dev Inc Anticorpos anti-ctla4 e métodos de uso dos mesmos
WO2020141145A1 (en) 2018-12-30 2020-07-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-rabbit cd19 antibodies and methods of use
CN115120716A (zh) 2019-01-14 2022-09-30 健泰科生物技术公司 用pd-1轴结合拮抗剂和rna疫苗治疗癌症的方法
WO2020148379A1 (en) 2019-01-17 2020-07-23 Bayer Aktiengesellschaft Methods to determine whether a subject is suitable of being treated with an agonist of soluble guanylyl cyclase (sgc)
CN113795511B (zh) 2019-01-23 2024-07-23 大有华夏生物医药集团有限公司 抗pd-l1双抗体及其用途
WO2020153467A1 (ja) 2019-01-24 2020-07-30 中外製薬株式会社 新規がん抗原及びそれらの抗原に対する抗体
GB201901197D0 (en) 2019-01-29 2019-03-20 Femtogenix Ltd G-A Crosslinking cytotoxic agents
EA202192103A1 (ru) 2019-01-29 2021-12-15 Джуно Терапьютикс, Инк. Антитела и химерные антигенные рецепторы, специфичные к орфанному рецептору типа рецеторной тирозинкиназы 1 (ror1)
KR20210124308A (ko) 2019-01-30 2021-10-14 트루바인딩 아이엔씨. 항-gal3 항체 및 이의 용도
JP7579795B2 (ja) 2019-02-21 2024-11-08 マレンゴ・セラピューティクス，インコーポレーテッド ＮＫｐ３０に結合する抗体分子およびその使用
AU2020226893B2 (en) 2019-02-21 2025-02-27 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to T cell related cancer cells and uses thereof
CN113710706A (zh) 2019-02-27 2021-11-26 豪夫迈·罗氏有限公司 用于抗tigit抗体和抗cd20抗体或抗cd38抗体治疗的给药
BR112021017144A2 (pt) 2019-03-08 2021-11-09 Genentech Inc Ensaio para detectar uma proteína associada à membrana, métodos para quantificar a concentração de proteína circulante, para determinar se um paciente com linfoma de células b tem probabilidade de exibir uma resposta a uma terapia anti-cd20, para determinar a afinidade de um anticorpo anti-cd20, para determinar a ativação de células t e método de tratamento de um tumor
MA55296A (fr) 2019-03-14 2022-03-23 Hoffmann La Roche Traitement du cancer avec des anticorps bispécifiques de her2xcd3 en combinaison avec un mab anti-her2
CN113677403B (zh) 2019-04-12 2024-12-27 豪夫迈·罗氏有限公司 包含脂质运载蛋白突变蛋白的双特异性抗原结合分子
JPWO2020213724A1 (sr) 2019-04-19 2020-10-22
KR20220002967A (ko) 2019-04-19 2022-01-07 제넨테크, 인크. 항 mertk 항체 및 이의 사용 방법
MX2021013222A (es) 2019-05-03 2022-01-06 Genentech Inc Metodos para tratar el cancer con un anticuerpo anti-pd-l1.
WO2020227228A2 (en) 2019-05-03 2020-11-12 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
BR112021022815A2 (pt) 2019-05-14 2021-12-28 Genentech Inc Métodos para tratar linfoma folicular, kits, imunoconjugados e polatuzumabe vedotina
CA3137649A1 (en) 2019-05-15 2020-11-19 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha An antigen-binding molecule, a pharmaceutical composition, and a method
CN118359709A (zh) 2019-05-21 2024-07-19 佐治亚大学研究基金会有限公司 结合人类偏肺病毒融合蛋白的抗体及其用途
CN114008073B (zh) 2019-05-23 2025-08-12 Ac免疫有限公司 抗tdp-43结合分子及其用途
WO2020243021A2 (en) 2019-05-24 2020-12-03 Foundation Medicine, Inc. Ntrk fusion molecules and uses thereof
CN113905757B (zh) * 2019-06-05 2026-01-13 中外制药株式会社 抗体切割位点结合分子
BR112021026293A2 (pt) 2019-06-26 2022-03-03 Hoffmann La Roche Moléculas de ligação, anticorpos humanizados, ácido nucleico isolado, célula hospedeira, métodos para produzir a molécula de ligação ao antígeno, para tratar um indivíduo e suprarregular ou prolongar a atividade de células t citotóxicas, composição farmacêutica e uso da molécula
EP3990492A1 (en) 2019-06-27 2022-05-04 F. Hoffmann-La Roche AG Novel icos antibodies and tumor-targeted antigen binding molecules comprising them
MX2022000174A (es) 2019-07-02 2022-05-20 Us Health Anticuerpos monoclonales que se enlazan a egfrviii y sus usos.
CA3146023A1 (en) 2019-07-05 2021-01-14 Iomx Therapeutics Ag Antibodies binding igc2 of igsf11 (vsig3) and uses thereof
EP3997121A4 (en) 2019-07-09 2024-03-27 Beijing SoloBio Genetechnology Company Ltd. ANTIBODIES THAT SPECIFICALLY RECOGNIZE PSEUDOMONAS PCRV AND THEIR USES
WO2021010326A1 (ja) 2019-07-12 2021-01-21 中外製薬株式会社 抗変異型ｆｇｆｒ３抗体およびその使用
TWI832183B (zh) 2019-08-06 2024-02-11 香港商新旭生技股份有限公司 結合至病理性tau種類之抗體及其用途
ES3064633T3 (en) 2019-09-12 2026-04-28 Hoffmann La Roche Compositions and methods of treating lupus nephritis
CA3149719A1 (en) 2019-09-19 2021-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to vista at acidic ph
MX2022003266A (es) 2019-09-20 2022-04-11 Genentech Inc Dosis para anticuerpos anti-triptasa.
AU2020351734A1 (en) 2019-09-27 2022-04-14 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-TIGIT and anti-PD-L1 antagonist antibodies
AU2020358854B2 (en) 2019-10-03 2026-08-13 Atyr Pharma, Inc. Compositions and methods comprising anti-NRP2 antibodies
CR20220166A (es) 2019-10-18 2022-06-15 Genentech Inc Métodos para usar inmunoconjugados anti-cd79b para tratar linfoma difuso de linfocitos b grandes
IL292458A (en) 2019-11-06 2022-06-01 Genentech Inc Diagnostic and treatment methods for the treatment of hematological cancer
US20220396839A1 (en) 2019-11-12 2022-12-15 Foundation Medicine, Inc. Methods of detecting a fusion gene encoding a neoantigen
CN116478292A (zh) 2019-11-15 2023-07-25 恩瑟拉有限责任公司 Tmem219抗体及其治疗性用途
EP3822288A1 (en) 2019-11-18 2021-05-19 Deutsches Krebsforschungszentrum, Stiftung des öffentlichen Rechts Antibodies targeting, and other modulators of, the cd276 antigen, and uses thereof
EP4061839A1 (en) 2019-11-21 2022-09-28 Enthera S.R.L. Igfbp3 antibodies and therapeutic uses thereof
WO2021113776A1 (en) 2019-12-06 2021-06-10 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies to bcma-targeted binding domains and related compositions and methods
WO2021113780A1 (en) 2019-12-06 2021-06-10 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies to gprc5d-targeted binding domains and related compositions and methods
CR20220330A (es) 2019-12-13 2022-08-04 Genentech Inc Anticuerpos anti-ly6g6d y métodos de uso.
JP7702954B2 (ja) 2019-12-27 2025-07-04 ハイファイバイオ， インコーポレイテッド 抗ｏｘ４０抗体およびその使用
MY202559A (en) 2019-12-27 2024-05-08 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-ctla-4 antibody and use thereof
WO2021138474A2 (en) 2020-01-03 2021-07-08 Marengo Therapeutics, Inc. Anti-tcr antibody molecules and uses thereof
JP7675083B2 (ja) 2020-01-09 2025-05-12 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 新規４－１ｂｂｌ三量体含有抗原結合分子
CN110818795B (zh) 2020-01-10 2020-04-24 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 抗tigit抗体和使用方法
WO2021194481A1 (en) 2020-03-24 2021-09-30 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
WO2022050954A1 (en) 2020-09-04 2022-03-10 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
EP4097129A1 (en) 2020-01-29 2022-12-07 Inhibrx, Inc. Cd28 single domain antibodies and multivalent and multispecific constructs thereof
BR112022015077A2 (pt) 2020-01-31 2022-10-04 Genentech Inc Métodos para induzir células t cd8+ específicas de neoepítopos em um indivíduo com um tumor e para induzir o tráfico de células t cd8+, vacinas de rna, vacina de rna para uso e antagonistas de ligação
US12617858B2 (en) 2020-01-31 2026-05-05 The Cleveland Clinic Foundation Anti-Müllerian hormone receptor 2 antibodies and methods of use
IL295382B1 (en) 2020-02-12 2026-08-01 Chugai Seiyaku Kk Anti-CD137 antigen-binding molecule for use in cancer treatment
TWI890283B (zh) 2020-02-14 2025-07-11 美商基利科學股份有限公司 結合ccr8之抗體及融合蛋白及其用途
WO2021168292A1 (en) 2020-02-20 2021-08-26 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Epstein-barr virus monoclonal antibodies and uses thereof
EP3868396A1 (en) 2020-02-20 2021-08-25 Enthera S.R.L. Inhibitors and uses thereof
KR20220145859A (ko) 2020-02-28 2022-10-31 상하이 헨리우스 바이오테크, 인크. 항cd137 작제물, 다중 특이적 항체 및 그 용도
JP7715722B2 (ja) 2020-02-28 2025-07-30 上海復宏漢霖生物技術股▲フン▼有限公司 抗ｃｄ１３７コンストラクト及びその使用
EP4118114A1 (en) 2020-03-13 2023-01-18 Genentech, Inc. Anti-interleukin-33 antibodies and uses thereof
CA3169626A1 (en) 2020-03-19 2021-09-23 Genentech, Inc. Isoform-selective anti-tgf-beta antibodies and methods of use
EP4107186A1 (en) 2020-03-23 2022-12-28 Genentech, Inc. Tocilizumab and remdesivir combination therapy for covid-19 pneumonia
EP4107184A1 (en) 2020-03-23 2022-12-28 Genentech, Inc. Method for treating pneumonia, including covid-19 pneumonia, with an il6 antagonist
JP2023518814A (ja) 2020-03-23 2023-05-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｃｏｖｉｄ－１９肺炎における、ｉｌ－６アンタゴニストに対する応答を予測するためのバイオマーカー
CA3169967A1 (en) 2020-03-24 2021-09-30 Genentech, Inc. Tie2-binding agents and methods of use
AR121706A1 (es) 2020-04-01 2022-06-29 Hoffmann La Roche Moléculas de unión a antígeno biespecíficas dirigidas a ox40 y fap
CN115698717A (zh) 2020-04-03 2023-02-03 基因泰克公司 癌症的治疗和诊断方法
WO2021207662A1 (en) 2020-04-10 2021-10-14 Genentech, Inc. Use of il-22fc for the treatment or prevention of pneumonia, acute respiratory distress syndrome, or cytokine release syndrome
MX2022013198A (es) 2020-04-24 2022-11-14 Genentech Inc Metodos de uso de inmunoconjugados anti-cd79b.
JP2023523145A (ja) 2020-04-27 2023-06-02 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア リポ蛋白（ａ）に対するイソ型非依存性抗体
EP4143345A1 (en) 2020-04-28 2023-03-08 Genentech, Inc. Methods and compositions for non-small cell lung cancer immunotherapy
JP2023527962A (ja) 2020-05-03 2023-07-03 レヴィーナ （スジョウ） バイオファーマ カンパニー， リミテッド 抗ｔｒｏｐ２抗体を含む抗体薬物複合体（ａｄｃ）、かかるａｄｃを含む組成物、ならびにそれらを作製および使用する方法
EP4149547A4 (en) 2020-05-13 2024-08-14 Adagene AG Compositions and methods for treating cancer
MX2022014786A (es) 2020-05-26 2023-01-16 Truebinding Inc Metodos para tratar enfermedades inflamatorias mediante el bloqueo de galectina-3.
WO2021238886A1 (en) 2020-05-27 2021-12-02 Staidson (Beijing) Biopharmaceuticals Co., Ltd. Antibodies specifically recognizing nerve growth factor and uses thereof
WO2021247769A1 (en) 2020-06-02 2021-12-09 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-cd93 constructs and uses thereof
CN116529260A (zh) 2020-06-02 2023-08-01 当康生物技术有限责任公司 抗cd93构建体及其用途
JP2023529206A (ja) 2020-06-12 2023-07-07 ジェネンテック， インコーポレイテッド がん免疫療法のための方法及び組成物
WO2021257503A1 (en) 2020-06-16 2021-12-23 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating triple-negative breast cancer
WO2021257124A1 (en) 2020-06-18 2021-12-23 Genentech, Inc. Treatment with anti-tigit antibodies and pd-1 axis binding antagonists
CR20220637A (es) 2020-06-19 2023-01-31 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a cd3 y cd19
CR20220627A (es) 2020-06-23 2023-02-17 Hoffmann La Roche Moléculas agonistas de unión al antígeno cd28 que se derigen a her2
CN115916830A (zh) 2020-06-25 2023-04-04 豪夫迈·罗氏有限公司 抗cd3/抗cd28双特异性抗原结合分子
EP4175668A1 (en) 2020-07-06 2023-05-10 iOmx Therapeutics AG Antibodies binding igv of igsf11 (vsig3) and uses thereof
EP4178529A1 (en) 2020-07-07 2023-05-17 F. Hoffmann-La Roche AG Alternative surfactants as stabilizers for therapeutic protein formulations
CA3186065A1 (en) 2020-07-16 2022-01-20 Xiaohu FAN Cd19 binding molecules and uses thereof
JP7846667B2 (ja) 2020-07-16 2026-04-15 レジェンド バイオテック アイルランド リミテッド Ｃｄ２０結合分子及びその使用
GB2597532A (en) 2020-07-28 2022-02-02 Femtogenix Ltd Cytotoxic compounds
IL300121A (en) 2020-07-29 2023-03-01 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-cd93 constructs and uses thereof
JP7904195B2 (ja) 2020-08-03 2026-08-12 ジェネンテック， インコーポレイテッド リンパ腫のための診断及び治療方法
KR20230095918A (ko) 2020-08-05 2023-06-29 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 Ror1-표적 결합 도메인에 대한 항이디오타입 항체 및 관련 조성물 및 방법
TW202221016A (zh) 2020-08-07 2022-06-01 美商建南德克公司 Ｆｌｔ３配位體融合蛋白及使用方法
CN116615452A (zh) 2020-08-14 2023-08-18 Ac免疫有限公司 人源化抗tdp-43结合分子及其用途
EP4204448A2 (en) 2020-08-27 2023-07-05 cureab GmbH Anti-golph2 antibodies for macrophage and dendritic cell differentiation
EP4214241A2 (en) 2020-09-15 2023-07-26 Bayer Aktiengesellschaft Novel anti-a2ap antibodies and uses thereof
WO2022060412A1 (en) 2020-09-17 2022-03-24 Genentech, Inc. Results of empacta: a randomized, double-blind, placebo-controlled, multicenter study to evaluate the efficacy and safety of tocilizumab in hospitalized patients with covid-19 pneumonia
MX2023002191A (es) 2020-09-18 2023-03-03 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo anti antigenos de leucocitos humanos (hla) isoforma dq2.5 y su uso para el tratamiento de la enfermedad celiaca.
PH12023550779A1 (en) 2020-09-28 2023-11-20 Angitia Biomedicines Ltd Anti-sclerostin constructs and uses thereof
TW202446417A (zh) 2020-10-05 2024-12-01 美商建南德克公司 用抗 fcrh5/抗 cd3 雙特異性抗體進行治療之給藥
AU2021363536A1 (en) 2020-10-20 2023-02-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of PD-1 axis binding antagonists and LRRK2 inhitibors
EP4232475A1 (en) 2020-10-20 2023-08-30 Kantonsspital St. Gallen Antibodies or antigen-binding fragments specifically binding to gremlin-1 and uses thereof
WO2022093981A1 (en) 2020-10-28 2022-05-05 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ptpn22 inhibitors and pd-l1 binding antagonists
CN116635425A (zh) 2020-11-03 2023-08-22 德国癌症研究中心公共法律基金会 靶细胞限制性、共刺激性、双特异性二价抗cd28抗体
EP4240493A2 (en) 2020-11-04 2023-09-13 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies and anti-cd79b antibody drug conjugates
WO2022098638A2 (en) 2020-11-04 2022-05-12 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies
JP7716473B2 (ja) 2020-11-04 2025-07-31 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｃｄ２０／抗ｃｄ３二重特異性抗体の皮下投薬
WO2022101458A1 (en) 2020-11-16 2022-05-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy with fap-targeted cd40 agonists
EP4251187A4 (en) 2020-11-25 2025-09-10 Xilio Dev Inc TUMOR-SPECIFIC CLASSIBLE LINKERS
CN116723861A (zh) 2020-12-02 2023-09-08 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 抗GARP/TGFβ抗体及使用方法
TW202237638A (zh) 2020-12-09 2022-10-01 日商武田藥品工業股份有限公司 烏苷酸環化酶ｃ（ｇｃｃ）抗原結合劑之組成物及其使用方法
TW202237639A (zh) 2020-12-09 2022-10-01 日商武田藥品工業股份有限公司 鳥苷酸環化酶ｃ（ｇｃｃ）抗原結合劑之組成物及其使用方法
WO2022132904A1 (en) 2020-12-17 2022-06-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibodies targeting sars-cov-2
EP4740951A3 (en) 2020-12-22 2026-08-05 Foundation Medicine, Inc. Igh rearrangements and uses thereof
CN116829598A (zh) 2021-01-06 2023-09-29 豪夫迈·罗氏有限公司 采用pd1-lag3双特异性抗体和cd20 t细胞双特异性抗体的组合疗法
WO2022162587A1 (en) 2021-01-27 2022-08-04 Centre Hospitalier Universitaire Vaudois (C.H.U.V.) Anti-sars-cov-2 antibodies and use thereof in the treatment of sars-cov-2 infection
CN117120084A (zh) 2021-01-28 2023-11-24 维肯芬特有限责任公司 用于调节b细胞介导的免疫应答的方法和手段
KR20230147098A (ko) 2021-01-28 2023-10-20 백신벤트 게엠베하 B 세포 매개 면역 반응을 조절하기 위한 방법 및 수단(method and means for modulating b-cell mediated immune responses)
KR20230147099A (ko) 2021-01-28 2023-10-20 백신벤트 게엠베하 B 세포 매개 면역 반응을 조절하기 위한 방법 및 수단(method and means for modulating b-cell mediated immune responses)
CN117396502A (zh) 2021-02-09 2024-01-12 佐治亚大学研究基金会有限公司 针对肺炎球菌抗原的人类单克隆抗体
AU2022221297A1 (en) 2021-02-09 2023-08-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Antibodies targeting the spike protein of coronaviruses
WO2022172085A2 (en) 2021-02-15 2022-08-18 Takeda Pharmaceutical Company Limited Cell therapy compositions and methods for modulating tgf-b signaling
CA3211686A1 (en) 2021-02-26 2022-09-01 Bayer Aktiengesellschaft Inhibitors of il-11 or il-11ra for use in the treatment of abnormal uterine bleeding
TW202317612A (zh) 2021-03-01 2023-05-01 美商艾希利歐發展股份有限公司 用於治療癌症的ｃｔｌａ４及ｐｄ１／ｐｄｌ１抗體之組合
WO2022187272A1 (en) 2021-03-01 2022-09-09 Xilio Development, Inc. Combination of masked ctla4 and pd1/pdl1 antibodies for treating cancer
WO2022184082A1 (en) 2021-03-03 2022-09-09 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates comprising an anti-bcma antibody
CN117715933A (zh) 2021-03-05 2024-03-15 当康生物技术有限责任公司 抗vista的构建体及其用途
EP4454652A3 (en) 2021-03-15 2025-05-21 F. Hoffmann-La Roche AG Compositions and methods for treating lupus nephritis
WO2022197877A1 (en) 2021-03-19 2022-09-22 Genentech, Inc. Methods and compositions for time delayed bio-orthogonal release of cytotoxic agents
WO2022204724A1 (en) 2021-03-25 2022-09-29 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-igfbp7 constructs and uses thereof
IL307233A (en) 2021-03-30 2023-11-01 Bayer Ag Anti-SEMA3A antibodies and uses thereof
AR125344A1 (es) 2021-04-15 2023-07-05 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo anti-c1s
WO2022228706A1 (en) 2021-04-30 2022-11-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody
CA3213632A1 (en) 2021-04-30 2022-11-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Dosing for combination treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and anti-cd79b antibody drug conjugate
EP4337266A1 (en) 2021-05-12 2024-03-20 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
WO2022241082A1 (en) 2021-05-14 2022-11-17 Genentech, Inc. Agonists of trem2
KR20240007171A (ko) 2021-05-14 2024-01-16 제넨테크, 인크. 모수네투주맙 및 폴라투주맙 베도틴을 이용한 cd20 양성 증식성 장애의 치료 방법
WO2022243261A1 (en) 2021-05-19 2022-11-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Agonistic cd40 antigen binding molecules targeting cea
AR126009A1 (es) 2021-06-02 2023-08-30 Hoffmann La Roche Moléculas agonistas de unión al antígeno cd28 que se dirigen a epcam
JP2024520261A (ja) 2021-06-04 2024-05-24 中外製薬株式会社 抗ｄｄｒ２抗体およびその使用
IL308015A (en) 2021-06-09 2023-12-01 Hoffmann La Roche Combination of a particular braf inhibitor (paradox breaker) and a pd-1 axis binding antagonist for use in the treatment of cancer
CA3221924A1 (en) 2021-06-11 2022-12-15 Genentech, Inc. Method for treating chronic obstructive pulmonary disease with an st2 antagonist
WO2022263638A1 (en) 2021-06-17 2022-12-22 Centre Hospitalier Universitaire Vaudois (C.H.U.V.) Anti-sars-cov-2 antibodies and use thereof in the treatment of sars-cov-2 infection
EP4355785A1 (en) 2021-06-17 2024-04-24 Amberstone Biosciences, Inc. Anti-cd3 constructs and uses thereof
CN117616123B (zh) 2021-06-25 2024-11-08 中外制药株式会社 抗ctla-4抗体
IL308633B2 (en) 2021-06-25 2025-12-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Use of anti-ctla-4 antibody
CN118103397A (zh) 2021-07-08 2024-05-28 舒泰神(加州)生物科技有限公司 特异性识别tnfr2的抗体及其用途
JP7833531B2 (ja) 2021-07-14 2026-03-19 舒泰神（北京）生物製薬股フン有限公司 Ｃｄ４０を特異的に認識する抗体およびその使用
JP2024526880A (ja) 2021-07-22 2024-07-19 ジェネンテック， インコーポレイテッド 脳標的化組成物及びその使用方法
US20240336697A1 (en) 2021-08-07 2024-10-10 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
CN117897409A (zh) 2021-08-13 2024-04-16 基因泰克公司 抗类胰蛋白酶抗体的给药
WO2023021055A1 (en) 2021-08-19 2023-02-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Multivalent anti-variant fc-region antibodies and methods of use
WO2023028591A1 (en) 2021-08-27 2023-03-02 Genentech, Inc. Methods of treating tau pathologies
JP2024532620A (ja) 2021-08-30 2024-09-05 ラッセン・セラピューティクス１・インコーポレイテッド 抗ＩＬ－１１Ｒα抗体
TW202325727A (zh) 2021-08-30 2023-07-01 美商建南德克公司 抗聚泛素多特異性抗體
AU2022345251A1 (en) 2021-09-17 2024-03-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Synthetic humanized llama nanobody library and use thereof to identify sars-cov-2 neutralizing antibodies
CN118339188A (zh) 2021-09-21 2024-07-12 齐鲁普吉湾生物治疗公司 用于制备融合蛋白和双特异性抗体的异二聚体Fc
WO2023056403A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Genentech, Inc. Methods for treatment of hematologic cancers using anti-tigit antibodies, anti-cd38 antibodies, and pd-1 axis binding antagonists
EP4413998A4 (en) 2021-10-08 2026-02-25 Chugai Pharmaceutical Co Ltd METHOD FOR PREPARING A PRE-FILLED SYRINGE FORMULATION
JP2024540374A (ja) 2021-11-05 2024-10-31 アメリカン ダイアグノスティックス アンド セラピー， エルエルシー （エーディーエックスアールエックス） がん胎児性抗原に対するモノクローナル抗体、及びそれらの使用
WO2023086807A1 (en) 2021-11-10 2023-05-19 Genentech, Inc. Anti-interleukin-33 antibodies and uses thereof
EP4433167A1 (en) 2021-11-16 2024-09-25 AC Immune SA Novel molecules for therapy and diagnosis
WO2023091887A1 (en) 2021-11-16 2023-05-25 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating systemic lupus erythematosus (sle) with mosunetuzumab
EP4445911A4 (en) 2021-12-06 2025-10-22 Beijing Solobio Genetechnology Co Ltd BISPECIFIC ANTIBODY THAT BINDS SPECIFICALLY TO KLEBSIELLA PNEUMONIAE O1 AND O2 ANTIGENS AND COMPOSITION
CN118488965A (zh) 2021-12-17 2024-08-13 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 抗ox40抗体、多特异性抗体及其使用方法
AU2022411573A1 (en) 2021-12-17 2024-06-27 Shanghai Henlius Biologics Co., Ltd. Anti-ox40 antibodies and methods of use
CR20240246A (es) 2021-12-20 2024-07-19 Hoffmann La Roche Anticuerpos agonistas anti-ltbr y anticuerpos biespecificos que los comprenden
UY40097A (es) 2022-01-07 2023-07-14 Johnson & Johnson Entpr Innovation Inc Materiales y métodos de proteínas de unión a il-1b
CA3251161A1 (en) 2022-02-10 2023-08-17 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibodies that broadly target coronaviruses
AU2023221539A1 (en) 2022-02-16 2024-08-22 Ac Immune Sa Humanized anti-tdp-43 binding molecules and uses thereof
CA3252736A1 (en) 2022-02-18 2023-08-24 Rakuten Medical, Inc. Anti-PD-L1 (Programmed Death-Ligand 1) Antibody Molecules, Coding Polynucleotides, and Methods of Use
JP2025509286A (ja) 2022-03-10 2025-04-11 ビバソル， インコーポレイテッド 抗体－薬物コンジュゲートおよびその使用
US20230414750A1 (en) 2022-03-23 2023-12-28 Hoffmann-La Roche Inc. Combination treatment of an anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and chemotherapy
KR20240163119A (ko) 2022-03-25 2024-11-18 상하이 헨리우스 바이오테크, 인크. 항-msln 항체 및 사용 방법
WO2023192827A1 (en) 2022-03-26 2023-10-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Bispecific antibodies to hiv-1 env and their use
EP4499229A1 (en) 2022-03-28 2025-02-05 F. Hoffmann-La Roche AG Interferon gamma variants and antigen binding molecules comprising these
WO2023192881A1 (en) 2022-03-28 2023-10-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
WO2023191816A1 (en) 2022-04-01 2023-10-05 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
IL316153A (en) 2022-04-08 2024-12-01 Ac Immune Sa Anti-tdp-43 binding molecules
TW202545564A (zh) 2022-04-13 2025-12-01 美商建南德克公司 治療性蛋白質之醫藥組成物及使用方法
WO2023198727A1 (en) 2022-04-13 2023-10-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Pharmaceutical compositions of anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies and methods of use
AU2023258146A1 (en) 2022-04-20 2024-09-05 Kantonsspital St. Gallen Antibodies or antigen-binding fragments pan-specifically binding to gremlin-1 and gremlin-2 and uses thereof
PE20242350A1 (es) 2022-05-03 2024-12-16 Genentech Inc Anticuerpos anti-ly6e, inmunoconjugados y usos de estos
EP4524158A4 (en) 2022-05-09 2025-12-17 Staidson Beijing Biopharmaceuticals Co Ltd Antibody that specifically recognizes gdf15 and use thereof
JP2025517650A (ja) 2022-05-11 2025-06-10 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ＦｃＲＨ５／抗ＣＤ３二重特異性抗体による処置のための投与
WO2023235699A1 (en) 2022-05-31 2023-12-07 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies to lilrb4 and uses thereof
US11965032B1 (en) 2022-06-01 2024-04-23 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
US11807689B1 (en) * 2022-06-01 2023-11-07 Tg Therapeutics, Inc. Anti-CD20 antibody compositions
JP2025523387A (ja) 2022-06-07 2025-07-23 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｐｄ－ｌ１アンタゴニストおよび抗ｔｉｇｉｔアンタゴニスト抗体を含む、肺がん治療の有効性を判定するための方法
US20250382354A1 (en) 2022-06-08 2025-12-18 Institute For Research In Biomedicine (Irb) Cross-specific antibodies, uses and methods for discovery thereof
CN119585308A (zh) 2022-07-13 2025-03-07 基因泰克公司 针对用抗fcrh5/抗cd3双特异性抗体进行的治疗的给药
KR20250040020A (ko) 2022-07-19 2025-03-21 제넨테크, 인크. 항-fcrh5/항-cd3 이중특이성 항체로 치료하기 위한 투약법
EP4558226A1 (en) 2022-07-19 2025-05-28 Staidson Biopharma Inc. Antibodies specifically recognizing b- and t-lymphocyte attenuator (btla) and uses thereof
CN119654349A (zh) 2022-07-22 2025-03-18 基因泰克公司 抗steap1抗原结合分子及其用途
EP4558529A1 (en) 2022-07-22 2025-05-28 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to human pad4 and uses thereof
EP4565329A1 (en) 2022-08-01 2025-06-11 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Monoclonal antibodies that bind to the underside of influenza viral neuraminidase
CN120077064A (zh) 2022-08-05 2025-05-30 詹森生物科技公司 用于治疗脑肿瘤的转铁蛋白受体结合蛋白
EP4565331A1 (en) 2022-08-05 2025-06-11 Janssen Biotech, Inc. Cd98 binding constructs for treating brain tumors
CN121293357A (zh) 2022-08-22 2026-01-09 雅博得乐医疗公司 Dll3结合分子及其用途
US20260061051A1 (en) 2022-08-26 2026-03-05 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for delta-like ligand 3 (dll3)
EP4581366A1 (en) 2022-09-01 2025-07-09 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for bladder cancer
US20260078185A1 (en) 2022-09-07 2026-03-19 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-vista constructs and uses thereof
WO2024054822A1 (en) 2022-09-07 2024-03-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Engineered sars-cov-2 antibodies with increased neutralization breadth
US12054552B2 (en) 2022-09-21 2024-08-06 Sanofi Biotechnology Humanized anti-IL-1R3 antibody and methods of use
WO2024064826A1 (en) 2022-09-22 2024-03-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
WO2024067344A1 (zh) 2022-09-27 2024-04-04 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性识别light的抗体及其应用
WO2024068996A1 (en) 2022-09-30 2024-04-04 Centre Hospitalier Universitaire Vaudois (C.H.U.V.) Anti-sars-cov-2 antibodies and use thereof in the treatment of sars-cov-2 infection
CN120693395A (zh) 2022-10-20 2025-09-23 北京三诺佳邑生物技术有限责任公司 特异性结合TRAIL或FasL的抗体组合以及双特异性抗体
JP2026500084A (ja) 2022-10-25 2026-01-06 ジェネンテック， インコーポレイテッド 多発性骨髄腫の治療方法および診断方法
WO2024094741A1 (en) 2022-11-03 2024-05-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy with anti-cd19/anti-cd28 bispecific antibody
US20240165227A1 (en) 2022-11-04 2024-05-23 Gilead Sciences, Inc. Anticancer therapies using anti-ccr8 antibody, chemo and immunotherapy combinations
IL320029A (en) 2022-11-08 2025-06-01 Genentech Inc Compositions and methods for treating childhood idiopathic nephrotic syndrome
WO2024100200A1 (en) 2022-11-09 2024-05-16 Cis Pharma Ag Anti-l1-cam antibodies and their uses for diagnostic and therapeutic applications
WO2024108053A1 (en) 2022-11-17 2024-05-23 Sanofi Ceacam5 antibody-drug conjugates and methods of use thereof
WO2024111657A1 (ja) 2022-11-25 2024-05-30 中外製薬株式会社 タンパク質の製造方法
WO2024137381A1 (en) 2022-12-19 2024-06-27 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies for treating sars-cov-2 infection
EP4637924A2 (en) 2022-12-23 2025-10-29 iOmx Therapeutics AG Cross-specific antigen binding proteins (abp) targeting leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily b1 (lilrb1) and lilrb2, combinations and uses thereof
EP4491230A1 (en) 2023-07-14 2025-01-15 iOmx Therapeutics AG Cross-specific antigen binding proteins (abp) targeting leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily b1 (lilrb1) and lilrb2, combinations and uses thereof
WO2024148240A1 (en) 2023-01-06 2024-07-11 Lassen Therapeutics 1, Inc. ANTI-IL-11Rα ANTIBODIES FOR TREATING THYROID EYE DISEASE
EP4646433A1 (en) 2023-01-06 2025-11-12 Lassen Therapeutics, Inc. Anti-il-18bp antibodies
TW202430560A (zh) 2023-01-06 2024-08-01 美商拉森醫療公司 抗ｉｌ－１８ｂｐ抗體
WO2024184494A1 (en) 2023-03-08 2024-09-12 Ac Immune Sa Anti-tdp-43 binding molecules and uses thereof
EP4428159A1 (en) 2023-03-10 2024-09-11 Istituto Romagnolo per lo Studio dei Tumori "Dino Amadori" - IRST S.r.l. Melanoma targeting human antibodies and therapeutic uses thereof
EP4428158A1 (en) 2023-03-10 2024-09-11 Istituto Romagnolo per lo Studio dei Tumori "Dino Amadori" - IRST S.r.l. Lung cancer targeting human antibodies and therapeutic uses thereof
CN120835901A (zh) 2023-03-13 2025-10-24 豪夫迈·罗氏有限公司 采用pd1-lag3双特异性抗体和hla-g t细胞双特异性抗体的组合疗法
CN121985963A (zh) 2023-04-05 2026-05-05 维硕公司 抗体偶联药物及其用途
WO2024211236A2 (en) 2023-04-05 2024-10-10 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
WO2024211234A1 (en) 2023-04-05 2024-10-10 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
EP4695282A1 (en) 2023-04-12 2026-02-18 Shanghai Kangabio Co., Limited Multifunctional molecules comprising masked interleukin 12 and methods of use
KR20260012304A (ko) 2023-04-17 2026-01-26 피크 바이오, 인크. 항체 및 항체-약물 접합체 및 사용 방법 및 합성 공정 및 중간체
WO2024233341A1 (en) 2023-05-05 2024-11-14 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
AU2024268933A1 (en) 2023-05-10 2025-11-20 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods and compositions for treating cancer
WO2024243355A1 (en) 2023-05-24 2024-11-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibodies that target the rh5 complex of blood-stage plasmodium falciparum
EP4720121A1 (en) 2023-06-01 2026-04-08 F. Hoffmann-La Roche AG Immunostimulatory antigen binding molecules that specifically bind to bcma
TW202504918A (zh) 2023-06-01 2025-02-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 靶向ｂｃｍａ及ｃｄ２８的雙特異性抗體
WO2024254455A1 (en) 2023-06-08 2024-12-12 Genentech, Inc. Macrophage signatures for diagnostic and therapeutic methods for lymphoma
EP4725501A1 (en) 2023-06-09 2026-04-15 Staidson (Beijing) Biopharmaceuticals Co., Ltd. Antibody specifically binding to masp3, and multi-specific antibody specifically binding to masp3 and masp2
EP4729546A1 (en) 2023-06-16 2026-04-22 Jiangsu BioJeTay Biotechnology Co., Ltd. Antibody specifically recognizing factor xiia and use thereof
WO2024261013A1 (en) 2023-06-21 2024-12-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy with fap-targeted lymphotoxin beta receptor agonists
TW202504929A (zh) 2023-06-22 2025-02-01 美商建南德克公司 用於癌症治療之方法及組成物
WO2025014896A1 (en) 2023-07-07 2025-01-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Humanized 40h3 antibody
WO2025024265A1 (en) 2023-07-21 2025-01-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of assessing citrullination and activity of pad4 modulators
EP4747276A1 (en) 2023-07-21 2026-05-27 The United States of America, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services Bispecific antibodies that broadly target coronaviruses
CN121548587A (zh) 2023-07-24 2026-02-17 豪夫迈·罗氏有限公司 多特异性抗体
WO2025034806A1 (en) 2023-08-08 2025-02-13 Wisconsin Alumni Research Foundation Single-domain antibodies and variants thereof against fibroblast activation protein
AU2024323186A1 (en) 2023-08-09 2026-01-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Mono and multispecific anti-trem2 antibodies, methods and uses thereof
AU2024320793A1 (en) 2023-08-09 2026-03-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Mono and multispecific anti-trem2 antibodies, methods and uses thereof
CR20260043A (es) 2023-08-09 2026-03-26 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-proteína a-beta, métodos y usos de estos
AU2024324215A1 (en) 2023-08-11 2026-02-26 Abalytics Oncology, Inc. Anti-ctla-4 antibodies and related binding molecules and methods and uses thereof
CN122003435A (zh) 2023-09-03 2026-05-08 科越医药(美国)有限责任公司 包含抗因子d部分的多特异性构建体
WO2025064539A1 (en) 2023-09-19 2025-03-27 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Herv-e antibodies and methods of their use
EP4537907A1 (en) 2023-10-10 2025-04-16 Enthera S.r.l. Cd248 inhibitors and uses thereof
CN122422333A (zh) 2023-10-17 2026-07-17 百时美施贵宝公司 Gspt1降解化合物、抗cd33抗体和抗体-药物缀合物及其用途
TW202517674A (zh) 2023-10-19 2025-05-01 德商拜耳廠股份有限公司 抗gpc3抗體及其放射性結合物
WO2025106474A1 (en) 2023-11-14 2025-05-22 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for treating cancer with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2025106427A1 (en) 2023-11-14 2025-05-22 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing and protective monoclonal antibodies against respiratory syncytial virus (rsv)
WO2025111402A1 (en) 2023-11-21 2025-05-30 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Anti-amyloid beta antibodies and related compositions and methods thereof
WO2025117384A1 (en) 2023-12-01 2025-06-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Broadly neutralizing influenza hemagglutinin stem-directed antibodies
AU2024406222A1 (en) 2023-12-20 2026-06-04 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies targeting il-18 receptor beta (il-18rβ) and related methods
IL328694A (en) 2023-12-21 2026-07-01 Us Health Broad neutralizing antibodies against SARS-COV-2 and SARS-COV variants
WO2025151752A1 (en) 2024-01-10 2025-07-17 Xilio Development, Inc. Masked il-2 cytokines and methods of use thereof
WO2025167631A1 (zh) 2024-02-05 2025-08-14 北京三诺佳邑生物技术有限责任公司 特异性结合HBV pre-S1抗原、PD-L1抗原和CD3抗原的多特异性抗体及其应用
WO2025174974A1 (en) 2024-02-14 2025-08-21 Bristol-Myers Squibb Company Anti-cd33 antibodies and uses thereof
AU2025225534A1 (en) 2024-02-23 2026-08-13 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Treatment of cardiovascular disease with antxr1 antibodies
WO2025184416A1 (en) 2024-02-27 2025-09-04 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Single-domain antibodies and bispecific antibodies against hiv-1 and their use
WO2025184421A1 (en) 2024-02-28 2025-09-04 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors and antibodies specific for delta-like ligand 3 (dll3) and related methods
WO2025199352A2 (en) 2024-03-20 2025-09-25 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies specific for solute carrier family 34 member 2 (slc34a2)
US20250295801A1 (en) 2024-03-21 2025-09-25 Seagen Inc. Cd25 antibodies, antibody drug conjugates, and uses thereof
TW202602494A (zh) 2024-04-12 2026-01-16 美商建南德克公司 格菲妥單抗與化學療法之組合治療
WO2025218725A1 (zh) * 2024-04-18 2025-10-23 徕特康(苏州)生物制药有限公司 靶向cd20和cd89的髓细胞衔接子抗体及其用途
TW202604943A (zh) 2024-04-24 2026-02-01 美商建南德克公司 治療狼瘡性腎炎之組成物及方法
WO2025238187A1 (en) 2024-05-15 2025-11-20 Cis Biopharma Ag Immunoconjugates targeting l1-cam
WO2025240670A2 (en) 2024-05-15 2025-11-20 Abalytics Oncology, Inc. Anti-pd-1 antibodies and related binding molecules and methods and uses thereof
WO2025242909A1 (en) 2024-05-24 2025-11-27 Paul Scherrer Institut CD30-targeting antibody-radioligand conjugates and their therapeutic use
TW202606758A (zh) 2024-05-31 2026-02-16 美商維泰克斯製藥公司 抗cd74抗體組合物及方法
WO2025262564A1 (en) 2024-06-17 2025-12-26 Pfizer Inc. Use of anti-cxcr5 antibodies
WO2026003224A2 (en) 2024-06-26 2026-01-02 Iomx Therapeutics Ag Bispecific antigen binding proteins (abp) targeting immune checkpoint molecules and both leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily b1 (lilrb1) and lilrb2; combinations and uses thereof
WO2026013218A1 (en) 2024-07-10 2026-01-15 Ac Immune Sa Anti-tdp-43 vectors, binding molecules and uses thereof
EP4684803A1 (en) 2024-07-25 2026-01-28 CeMM - Forschungszentrum für Molekulare Medizin GmbH Antibody conjugated chemical inducers of degradation of rbm39 and therapeutic uses thereof
WO2026030464A1 (en) 2024-07-30 2026-02-05 Genentech, Inc. Dosage regimen for reducing cytokine release syndrome (crs) with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies in multiple myeloma therapy
WO2026030473A1 (en) 2024-07-31 2026-02-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services West nile virus neutralizing monoclonal antibodies
WO2026050244A1 (en) 2024-08-26 2026-03-05 Angitia Incorporated Limited Methods of treating or preventing osteoporosis and low bone mass
WO2026072685A1 (en) 2024-09-25 2026-04-02 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating lupus nephritis
EP4729541A1 (en) 2024-10-16 2026-04-22 Paolo Fiorina Anti- igfbp7 antibodies and uses thereof
WO2026093351A1 (en) 2024-11-01 2026-05-07 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination treatment of an anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and chemotherapy
WO2026102349A1 (en) 2024-11-08 2026-05-15 Genentech, Inc. Anti-interleukin-23 receptor vhh antibodies and uses thereof
WO2026128512A1 (en) 2024-12-09 2026-06-18 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies to nipah virus and their use
WO2026148120A2 (en) 2024-12-31 2026-07-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Car with dual-variable domain and enhanced tcr-signaling targeting ct-rcc-1 peptide and methods of use
WO2026165109A1 (en) 2025-01-28 2026-08-06 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Tem8 monoclonal antibodies and their use

Family Cites Families (174)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7097A (en) 1850-02-19 Elevating- and lowering carriage-tops
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
EP0173494A3 (en) 1984-08-27 1987-11-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Chimeric receptors by dna splicing and expression
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US6893625B1 (en) * 1986-10-27 2005-05-17 Royalty Pharma Finance Trust Chimeric antibody with specificity to human B cell surface antigen
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
DE68920693T2 (de) 1988-03-30 1995-05-24 Toray Industries Gefriergetrocknete Zusammensetzung, die ein mit Meerrettichperoxydase markiertes Fab'-Fragment eines gegen menschliches Beta-Interferon gerichteten Antikörpers und Trehalose enthält; EIA Kit, der diese Zusammensetzung enthält.
US5047335A (en) 1988-12-21 1991-09-10 The Regents Of The University Of Calif. Process for controlling intracellular glycosylation of proteins
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
CA2095141A1 (en) 1990-11-05 1992-05-06 Ingegerd Hellstrom Synergistic therapy with combinations of anti-tumor antibodies and biologically active agents
ATE139900T1 (de) * 1992-11-13 1996-07-15 Idec Pharma Corp Therapeutische verwendung von chimerischen und markierten antikörper gegen menschlichen b lymphozyt beschränkter differenzierung antigen für die behandlung von b-zell-lymphoma
US7744877B2 (en) * 1992-11-13 2010-06-29 Biogen Idec Inc. Expression and use of anti-CD20 Antibodies
US5736137A (en) 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
US5595721A (en) 1993-09-16 1997-01-21 Coulter Pharmaceutical, Inc. Radioimmunotherapy of lymphoma using anti-CD20
US20030180290A1 (en) * 1995-06-07 2003-09-25 Idec Pharmaceuticals Corporation Anti-CD80 antibody having ADCC activity for ADCC mediated killing of B cell lymphoma cells alone or in combination with other therapies
CA2226575C (en) 1995-07-27 2011-10-18 Genentech, Inc. Stabile isotonic lyophilized protein formulation
US6001358A (en) 1995-11-07 1999-12-14 Idec Pharmaceuticals Corporation Humanized antibodies to human gp39, compositions containing thereof
JP2000516594A (ja) 1996-07-26 2000-12-12 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 免疫細胞介在全身性疾患の改良された治療法
UA76934C2 (en) * 1996-10-04 2006-10-16 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Reconstructed human anti-hm 1.24 antibody, coding dna, vector, host cell, method for production of reconstructed human antibody, pharmaceutical composition and drug for treating myeloma containing reconstructed human anti-hm 1.24 antibody
ES2293661T3 (es) 1996-11-27 2008-03-16 Genentech, Inc. Purificacion por afinidad de polipeptido en una matriz de proteinas a.
US6306393B1 (en) 1997-03-24 2001-10-23 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies
US6991790B1 (en) 1997-06-13 2006-01-31 Genentech, Inc. Antibody formulation
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
ATE230277T1 (de) 1997-06-13 2003-01-15 Genentech Inc Stabilisierte antikörperformulierung
US20040191256A1 (en) * 1997-06-24 2004-09-30 Genentech, Inc. Methods and compositions for galactosylated glycoproteins
JP2002506353A (ja) 1997-06-24 2002-02-26 ジェネンテック・インコーポレーテッド ガラクトシル化糖タンパク質の方法及び組成物
CA2307166A1 (en) 1997-10-31 1999-05-14 Genentech, Inc. Methods and compositions comprising glycoprotein glycoforms
US6528624B1 (en) 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
SK14812000A3 (sk) * 1998-04-03 2001-08-06 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Chimérny reťazec protilátky, chimérna protilátka, v oblasť, humanizovaný reťazec protilátky, humanizovaná protilátka, dna, expresný vektor, hostiteľ, spôsob prípravy a liečivo
JP4334141B2 (ja) * 1998-04-20 2009-09-30 グリカート バイオテクノロジー アクチェンゲゼルシャフト 抗体依存性細胞傷害性を改善するための抗体のグリコシル化操作
ATE370961T1 (de) 1998-05-06 2007-09-15 Genentech Inc Reinigung von antikörpern durch ionenaustauschchromatographie
PT1974747E (pt) 1998-08-11 2012-09-05 Biogen Idec Inc Terapias de combinação para linfomas de células b compreendendo a administração de anticorpo anti-cd20
WO2000010007A2 (en) 1998-08-17 2000-02-24 California Institute Of Technology Devices and methods for analysis of non-ionic solutes
US6224866B1 (en) 1998-10-07 2001-05-01 Biocrystal Ltd. Immunotherapy of B cell involvement in progression of solid, nonlymphoid tumors
ES2351149T3 (es) 1998-11-09 2011-02-01 Biogen Idec Inc. Anticuerpo quimérico dirigido contra cd20, el rituxan, para uso en el tratamiento de la leucemia linfocítica crónica.
MXPA01004649A (es) 1998-11-09 2002-05-06 Idec Pharma Corp Tratamiento con anticuerpo quimerico anti-cd20 para pacientes que reciben transplantes de medula osea o celulas madre de sangre periferica.
HUP0104865A3 (en) * 1999-01-15 2004-07-28 Genentech Inc Polypeptide variants with altered effector function
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
EP2275540B1 (en) 1999-04-09 2016-03-23 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
IL146005A0 (en) * 1999-05-07 2002-07-25 Genentech Inc Treatment of autoimmune diseases with antagonists which bind to b cell surface markers
DE60042785D1 (de) 1999-06-09 2009-10-01 Immunomedics Inc Immuntherapie von autoimmunerkrankungen durch die verwendung von b-zell spezifischen antikörpern
EP1216056A1 (en) 1999-07-12 2002-06-26 Genentech Inc. Blocking immune response to a foreign antigen using an antagonist which binds to cd20
WO2001010462A1 (en) 1999-08-11 2001-02-15 Idec Pharmaceuticals Corporation Treatment of patients having non-hodgkins lymphoma with bone marrow involvement with anti-cd20 antibodies
US6451284B1 (en) 1999-08-11 2002-09-17 Idec Pharmaceuticals Corporation Clinical parameters for determining hematologic toxicity prior to radioimmunotheraphy
US8557244B1 (en) 1999-08-11 2013-10-15 Biogen Idec Inc. Treatment of aggressive non-Hodgkins lymphoma with anti-CD20 antibody
CN1169952C (zh) 1999-10-10 2004-10-06 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院 抗cd20单克隆抗体的重链和轻链可变区基因及其应用
KR20020072277A (ko) 1999-11-08 2002-09-14 아이덱 파마슈티칼즈 코포레이션 항-ｃｄ20 항체 및/또는 화학요법 및 방사선요법과결합하여 항-ｃｄ40ｌ 항체를 이용한 ｂ세포 악성종양의치료방법
US20020028178A1 (en) * 2000-07-12 2002-03-07 Nabil Hanna Treatment of B cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications
US20020006404A1 (en) * 1999-11-08 2002-01-17 Idec Pharmaceuticals Corporation Treatment of cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications
EP1266014A2 (en) 2000-03-24 2002-12-18 Peter Kufer Multifunctional polypeptides comprising a binding site to an epitope of the nkg2d receptor complex
EP1283722A1 (en) 2000-03-31 2003-02-19 Idec Pharmaceuticals Corporation Combined use of anti-cytokine antibodies or antagonists and anti-cd20 for the treatment of b cell lymphoma
WO2001080884A1 (en) 2000-04-25 2001-11-01 Idec Pharmaceuticals Corporation Intrathecal administration of rituximab for treatment of central nervous system lymphomas
AU6836301A (en) 2000-06-20 2002-01-02 Idec Pharma Corp Treatment of b-cell associated diseases such as malignancies and autoimmune diseases using a cold anti-cd20 antibody/radiolabeled anti-cd22 antibody combination
JP2004502742A (ja) 2000-07-12 2004-01-29 アイデック　ファーマスーティカルズ　コーポレイション Ｂ細胞を消滅させる抗体及び免疫調節抗体を併用するｂ細胞悪性疾患の治療関連出願
NZ523912A (en) * 2000-07-31 2005-03-24 Biolex Inc Expression of biologically active polypeptides in duckweed
DE10043452A1 (de) 2000-09-04 2002-03-14 Basf Ag Formkörper mit einer tonmineralischen Beschichtung
WO2002022212A2 (en) 2000-09-18 2002-03-21 Idec Pharmaceuticals Corporation Combination therapy for treatment of autoimmune diseases using b cell depleting/immunoregulatory antibody combination
AU2002213357A1 (en) * 2000-10-20 2002-05-06 Idec Pharmaceuticals Corporation Variant igg3 rituxan r and therapeutic use thereof
US7754208B2 (en) * 2001-01-17 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
US20030211107A1 (en) * 2002-01-31 2003-11-13 Kandasamy Hariharan Use of CD23 antagonists for the treatment of neoplastic disorders
US20020159996A1 (en) * 2001-01-31 2002-10-31 Kandasamy Hariharan Use of CD23 antagonists for the treatment of neoplastic disorders
CA2436180C (en) * 2001-01-31 2011-11-08 Idec Pharmaceutical Corporation Immunoregulatory antibodies and uses thereof
US20030103971A1 (en) * 2001-11-09 2003-06-05 Kandasamy Hariharan Immunoregulatory antibodies and uses thereof
US20030077826A1 (en) 2001-02-02 2003-04-24 Lena Edelman Chimeric molecules containing a module able to target specific cells and a module regulating the apoptogenic function of the permeability transition pore complex (PTPC)
US20020147312A1 (en) 2001-02-02 2002-10-10 O'keefe Theresa Hybrid antibodies and uses thereof
JP4679035B2 (ja) 2001-04-02 2011-04-27 ジェネンテック， インコーポレイテッド 併用療法
EP1383800A4 (en) 2001-04-02 2004-09-22 Idec Pharma Corp RECOMBINANT ANTIBODIES CO-EXPRESSED WITH GNTIII
WO2003061694A1 (en) 2001-05-10 2003-07-31 Seattle Genetics, Inc. Immunosuppression of the humoral immune response by anti-cd20 antibodies
US7321026B2 (en) 2001-06-27 2008-01-22 Skytech Technology Limited Framework-patched immunoglobulins
AU2002368077B2 (en) * 2001-07-12 2010-03-04 Jefferson Foote Super humanized antibodies
EP1423510A4 (en) 2001-08-03 2005-06-01 Glycart Biotechnology Ag ANTIBODY GLYCOSYLATION VARIANTS WITH INCREASED ANTIBODY-DEPENDENT CELLULAR CYTOTOXICITY
IL159422A0 (en) * 2001-09-20 2004-06-01 Cornell Res Foundation Inc Methods and compositions for treating or preventing skin disorders using binding agents specific for prostate-specific membrane antigen
PL213948B1 (pl) * 2001-10-25 2013-05-31 Genentech Inc Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje
US20040093621A1 (en) 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
CA2471551C (en) 2001-12-27 2014-09-30 Glycofi, Inc. Methods to engineer mammalian-type carbohydrate structures
CA2476166C (en) 2002-02-14 2011-11-15 Immunomedics, Inc. Anti-cd20 antibodies and fusion proteins thereof and methods of use
US7432063B2 (en) 2002-02-14 2008-10-07 Kalobios Pharmaceuticals, Inc. Methods for affinity maturation
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US20030180292A1 (en) * 2002-03-14 2003-09-25 Idec Pharmaceuticals Treatment of B cell malignancies using anti-CD40L antibodies in combination with anti-CD20 antibodies and/or chemotherapeutics and radiotherapy
CA2478294C (en) 2002-03-19 2013-09-03 Plant Research International B.V. Gntiii (udp-n-acetylglucosamine:beta-d mannoside beta (1,4)-n-acetylglucosaminyltransferase iii) expression in plants
DE60315815T2 (de) 2002-03-21 2008-05-21 Eli Lilly And Co., Indianapolis ANTAGONISTISCHE HUMANE ANTI-hFAS-LIGAND-ANTIKÖRPER UND FRAGMENTE DAVON
AU2003210060B2 (en) 2002-03-22 2010-02-25 Aprogen, Inc. Humanized antibody and process for preparing same
US20030190689A1 (en) * 2002-04-05 2003-10-09 Cell Signaling Technology,Inc. Molecular profiling of disease and therapeutic response using phospho-specific antibodies
WO2003084570A1 (en) * 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. DRUG CONTAINING ANTIBODY COMPOSITION APPROPRIATE FOR PATIENT SUFFERING FROM FcϜRIIIa POLYMORPHISM
CA2481920A1 (en) * 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Antibody composition-containing medicament
WO2004000102A2 (en) * 2002-06-19 2003-12-31 Abgenix, Inc. Method for predicting response to epidermal growth factor receptor-directed therapy
PT1534335E (pt) 2002-08-14 2012-02-28 Macrogenics Inc Anticorpos específicos de fcγriib e processos para a sua utilização
EP1539966B1 (en) 2002-09-12 2010-06-30 Greenovation Biotech GmbH Protein production method
KR100944575B1 (ko) 2002-10-17 2010-02-25 젠맵 에이/에스 Ｃｄ20에 대한 인간 모노클로날 항체
US20050058649A1 (en) * 2002-12-02 2005-03-17 Landes Gregory M. Antibodies directed to phospholipase A2 and uses thereof
WO2004060053A2 (en) 2002-12-16 2004-07-22 Genentech, Inc. Transgenic mice expressing human cd20
HUE035898T2 (en) * 2002-12-16 2018-05-28 Genentech Inc Immunoglobulin variants and their applications
AU2003294912B2 (en) 2002-12-20 2009-06-04 Greenovation Biotech Gmbh Production of heterologous glycosylated proteins in bryophyte cells
US7960512B2 (en) * 2003-01-09 2011-06-14 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
US7355008B2 (en) 2003-01-09 2008-04-08 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
KR101498588B1 (ko) 2003-01-22 2015-03-05 로슈 글리카트 아게 융합 구성체와 Ｆｃ 수용체 결합 친화도 및 이펙터 기능이 증가된 항체를 생성하기 위한 이의 용도
WO2004065417A2 (en) * 2003-01-23 2004-08-05 Genentech, Inc. Methods for producing humanized antibodies and improving yield of antibodies or antigen binding fragments in cell culture
BRPI0408317A (pt) * 2003-03-14 2006-03-07 Pharmacia Corp anticorpos do receptor de igf-i para o tratamento de cáncer
ME00426B (me) * 2003-04-09 2011-10-10 Genentech Inc Liječenje autoimunih bolesti kod pacijenata sa neadekvatnim odgovorom na tnf-alfa inhibitor
AR044388A1 (es) 2003-05-20 2005-09-07 Applied Molecular Evolution Moleculas de union a cd20
ES2537738T3 (es) 2003-06-05 2015-06-11 Genentech, Inc. Terapia de combinación para trastornos de células B
US20050163775A1 (en) * 2003-06-05 2005-07-28 Genentech, Inc. Combination therapy for B cell disorders
WO2005017529A1 (en) 2003-07-29 2005-02-24 Genentech, Inc. Assay for human anti cd20 antibodies and uses therefor
US20050042664A1 (en) * 2003-08-22 2005-02-24 Medimmune, Inc. Humanization of antibodies
EP1660129A2 (en) * 2003-08-29 2006-05-31 Genentech, Inc. Anti-cd20 therapy of ocular disorders
HUE038955T2 (hu) * 2003-11-05 2018-12-28 Roche Glycart Ag Antigén-kötõ molekulák fokozott Fc receptor-kötõ affinitással és effektor funkcióval
AU2004303848A1 (en) * 2003-12-19 2005-07-07 Genentech, Inc. Detection of CD20 in transplant rejection
JP2007514787A (ja) * 2003-12-19 2007-06-07 ジェネンテック・インコーポレーテッド 自己免疫疾患の治療におけるｃｄ２０の検出
JP4503617B2 (ja) 2003-12-23 2010-07-14 ライナット ニューロサイエンス コーポレイション アゴニスト抗ｔｒｋＣ抗体および該抗体を用いる方法
AU2005214988A1 (en) 2004-02-17 2005-09-01 Absalus, Inc. Super-humanized antibodies against respiratory syncytial virus
ZA200608572B (en) * 2004-04-16 2008-06-25 Genentech Inc Assay for antibodies
BRPI0509412A (pt) 2004-04-16 2007-09-04 Genentech Inc método de tratamento de policondrite ou mononeurite multiplex em mamìferos e artigo industrializado
RU2006140377A (ru) 2004-04-16 2008-05-27 Дженентек, Инк. (Us) Способ усиления уничтожения в-клеток
RU2006142857A (ru) 2004-05-05 2008-06-10 Дженентек, Инк. (Us) Профилактика аутоиммунного заболевания
EP1769243A2 (en) 2004-05-15 2007-04-04 Genentech, Inc. Cross-screening system and methods for detecting a molecule having binding affinity for a target molecule
JP2008501706A (ja) 2004-06-04 2008-01-24 ジェネンテック・インコーポレーテッド 疾患の治療方法
SG183012A1 (en) 2004-06-04 2012-08-30 Genentech Inc Method for treating multiple sclerosis
US7501121B2 (en) * 2004-06-17 2009-03-10 Wyeth IL-13 binding agents
US20060062787A1 (en) * 2004-07-22 2006-03-23 Genentech, Inc. Method for treating Sjogren's syndrome
CA2577133A1 (en) * 2004-08-19 2006-03-23 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
RU2007112952A (ru) * 2004-09-08 2008-10-20 Дженентек, Инк. (Us) Способы применения лигандов рецепторов смерти и cd20-антител
JP2008513367A (ja) 2004-09-08 2008-05-01 ジェネンテック・インコーポレーテッド デスレセプターリガンド及びｃｄ２０抗体の使用方法
WO2006031825A2 (en) * 2004-09-13 2006-03-23 Macrogenics, Inc. Humanized antibodies against west nile virus and therapeutic and prophylactic uses thereof
CN101087807A (zh) 2004-10-05 2007-12-12 健泰科生物技术公司 治疗血管炎的方法
EP1838348B1 (en) 2004-12-15 2013-06-26 Janssen Alzheimer Immunotherapy Humanized amyloid beta antibodies for use in improving cognition
NZ555286A (en) * 2004-12-17 2010-04-30 Genentech Inc Antiangiogenesis therapy of autoimmune disease in patients who have failed prior therapy
EP2290088A1 (en) 2004-12-22 2011-03-02 Genentech, Inc. Methods for producing soluble multi-menbrane-spanning proteins
US20060188495A1 (en) 2005-01-13 2006-08-24 Genentech, Inc. Treatment method
DOP2006000029A (es) 2005-02-07 2006-08-15 Genentech Inc Antibody variants and uses thereof. (variantes de un anticuerpo y usos de las mismas)
TW200714289A (en) 2005-02-28 2007-04-16 Genentech Inc Treatment of bone disorders
AR053579A1 (es) 2005-04-15 2007-05-09 Genentech Inc Tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal (eii)
CA2607475A1 (en) 2005-04-22 2006-11-02 Genentech, Inc. Method for treating dementia or alzheimer's disease with a cd20 antibody
EP1883424A2 (en) 2005-05-18 2008-02-06 Biogen Idec Inc. Methods for treating fibrotic conditions
US7601335B2 (en) 2005-05-20 2009-10-13 Genentech, Inc. Pretreatment of a biological sample from an autoimmune disease subject
KR20080032065A (ko) * 2005-06-03 2008-04-14 제넨테크, 인크. 푸코실화 수준이 조절된 항체의 생성 방법
AU2006290433B2 (en) 2005-08-26 2012-06-07 Roche Glycart Ag Modified antigen binding molecules with altered cell signaling activity
MY149159A (en) 2005-11-15 2013-07-31 Hoffmann La Roche Method for treating joint damage
CA2629306A1 (en) 2005-11-23 2007-05-31 Genentech, Inc. Methods and compositions related to b cell assays
US20070136826A1 (en) 2005-12-02 2007-06-14 Biogen Idec Inc. Anti-mouse CD20 antibodies and uses thereof
US7708944B1 (en) 2006-06-13 2010-05-04 Research Foundation Of State University Of New York Ultra-sensitive, portable capillary sensor
CA2682406A1 (en) 2007-04-02 2008-10-09 Genentech, Inc. Biological markers predictive of rheumatoid arthritis response to b-cell antagonists
US20090004189A1 (en) 2007-06-18 2009-01-01 Genentech, Inc. Biological markers predictive of rheumatoid arthritis response to b-cell antagonists
EP2586788B1 (en) 2007-07-09 2017-11-29 Genentech, Inc. Prevention of disulfide bond reduction during recombinant production of polypeptides
KR100898362B1 (ko) 2007-07-10 2009-05-18 주식회사 그리폰 다목적 신발
US20110243931A1 (en) 2007-09-02 2011-10-06 Thomas Friess Combination therapy with type i and type ii anti-cd20 antibodies
GB0718684D0 (en) 2007-09-24 2007-10-31 Roche Products Ltd Treatment method
US20090214561A1 (en) 2007-09-24 2009-08-27 David Robert Close Treatment method
US20090098118A1 (en) 2007-10-15 2009-04-16 Thomas Friess Combination therapy of a type ii anti-cd20 antibody with an anti-bcl-2 active agent
US20090110688A1 (en) 2007-10-24 2009-04-30 Georg Fertig Combination therapy of type ii anti-cd20 antibody with a proteasome inhibitor
HUE024877T2 (en) 2007-10-30 2016-02-29 Genentech Inc Antibody purification by cation exchange chromatography
KR20100102172A (ko) 2007-12-21 2010-09-20 제넨테크, 인크. 리툭시마브-난치성 류마티스성 관절염 환자의 요법
CN101945890A (zh) 2007-12-21 2011-01-12 健泰科生物技术公司 抗cd20抗体的结晶
US20090162351A1 (en) 2007-12-21 2009-06-25 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of inhibitors of p38 MAP kinase
WO2009080541A1 (en) 2007-12-21 2009-07-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibody formulation
BRPI0909227B8 (pt) 2008-03-25 2021-05-25 Roche Glycart Ag uso de um anticorpo b-ly1 humanizado e um ou mais agentes quimioterápicos selecionados do grupo consistindo em ciclofosfamida,vincristina e doxorubicina para a fabricação de um medicamento para o tratamento de um linfoma não hodgkin de células b (nhl)
WO2009134738A1 (en) 2008-04-29 2009-11-05 Genentech, Inc. Responses to immunizations in rheumatoid arthritis patients treated with a cd20 antibody
US8021850B2 (en) 2008-07-14 2011-09-20 Ribo Guo Universal tandem solid-phases based immunoassay
AR073295A1 (es) 2008-09-16 2010-10-28 Genentech Inc Metodos para tratar la esclerosis multiple progresiva. articulo de fabricacion.
KR20110097772A (ko) 2008-11-17 2011-08-31 제넨테크, 인크. 생리적 조건하에 거대분자의 응집을 감소시키는 방법 및 제제
BRPI0916072A2 (pt) 2008-11-17 2015-11-10 Genentech Inc "uso de uma formulação, formulação farmacêutica, usos de um anticorpo 2h7 humanizado, método, método para aumentar a biodisponibilidade de um anticorpo e método de diálise in vitro"
AR075982A1 (es) 2009-03-31 2011-05-11 Roche Glycart Ag Terapia de combinacion de un anticuerpo afucosilado y una o mas de las citoquinas seleccionadas de gm- csf humano, m -csf humano y/o il-3 humano y composicion
BR112012003066A2 (pt) 2009-08-14 2016-11-16 Roche Glycart Ag uso de um anticorpo anti-cd20 defucosilado e composição compreendendo um anticorpo anti-cd20 defucosilado
TWI409079B (zh) 2009-08-14 2013-09-21 Roche Glycart Ag 非典型岩藻醣化ｃｄ２０抗體與苯達莫斯汀（ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ）之組合療法
JP5996429B2 (ja) 2009-09-03 2016-09-21 ジェネンテック， インコーポレイテッド 関節リウマチの治療、診断及びモニターするための方法
AR078161A1 (es) 2009-09-11 2011-10-19 Hoffmann La Roche Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento.
WO2011131749A1 (en) 2010-04-23 2011-10-27 Glaxo Group Limited New 14 and 15 membered macrolides for the treatment of neutrophil dominated inflammatory diseases
KR20130045914A (ko) 2010-08-03 2013-05-06 에프. 호프만-라 로슈 아게 만성 림프구성 백혈병(cll) 생체지표
AR082693A1 (es) 2010-08-17 2012-12-26 Roche Glycart Ag Terapia de combinacion de un anticuerpo anti-cd20 afucosilado con un anticuerpo anti-vegf
RU2013140975A (ru) 2011-02-28 2015-04-10 Дженентек, Инк. Биологические маркеры и способы прогнозирования восприимчивости к антагонистам в-клеток
US8592156B2 (en) 2011-08-08 2013-11-26 Roche Molecular Systems, Inc. Predicting response to anti-CD20 therapy in DLBCL patients
WO2014039885A1 (en) 2012-09-06 2014-03-13 Freedom Innovations, Llc Method and system for a prosthetic device with multiple levels of functionality enabled through multiple control systems
EP3919079A1 (en) 2012-09-07 2021-12-08 Genentech, Inc. Combination therapy of a type ii anti-cd20 antibody with a selective bcl-2 inhibitor

Also Published As

Publication number Publication date
NL300801I2 (nl) 2017-09-19
PL1692182T3 (pl) 2010-09-30
SI2348051T1 (sl) 2019-03-29
HK1167682A1 (en) 2012-12-07
KR20060130579A (ko) 2006-12-19
NZ588860A (en) 2012-03-30
BR122020013239B1 (pt) 2022-05-10
CN104829719A (zh) 2015-08-12
MX337587B (es) 2016-03-11
EP2077282A2 (en) 2009-07-08
US9296820B2 (en) 2016-03-29
LTC2380910I2 (lt) 2018-01-25
IL175367A (en) 2014-11-30
JP6125770B2 (ja) 2017-05-10
HRP20170398T2 (hr) 2019-06-28
JP2010081940A (ja) 2010-04-15
NZ547589A (en) 2009-05-31
US20160076009A1 (en) 2016-03-17
ECSP21023271A (es) 2021-05-31
DK2348051T3 (en) 2019-03-18
CN102373215B (zh) 2014-07-30
JP2018027088A (ja) 2018-02-22
CY2016004I1 (el) 2016-08-31
NO347530B1 (no) 2023-12-11
SI1692182T1 (sl) 2010-06-30
RS58420B1 (sr) 2019-04-30
PL2380911T3 (pl) 2018-10-31
IL235172A0 (en) 2014-11-30
HUS1600013I1 (hu) 2016-04-28
SI2077282T1 (sl) 2017-03-31
CA2544865C (en) 2019-07-09
ATE463513T1 (de) 2010-04-15
IL232954A (en) 2015-09-24
FR15C0076I1 (sr) 2016-01-01
UA91823C2 (ru) 2010-09-10
MXPA06004836A (es) 2006-07-06
CN102373215A (zh) 2012-03-14
HUE026669T2 (en) 2016-06-28
CY1120252T1 (el) 2019-07-10
JP2008500017A (ja) 2008-01-10
DK2380911T3 (en) 2018-08-06
EA200600905A1 (ru) 2006-12-29
SI2380910T1 (sl) 2015-11-30
US8883980B2 (en) 2014-11-11
DK2380910T3 (en) 2015-10-19
KR101220691B1 (ko) 2013-01-14
HUE038955T2 (hu) 2018-12-28
SG10202008722QA (en) 2020-10-29
IL175367A0 (en) 2006-09-05
EA015009B1 (ru) 2011-04-29
ME02332B (me) 2016-06-30
EP2077282A3 (en) 2009-08-05
ES2550311T3 (es) 2015-11-06
HK1167681A1 (en) 2012-12-07
NO20220904A1 (no) 2006-08-03
EA202091901A1 (ru) 2020-11-24
RS54450B1 (sr) 2016-06-30
ES2672640T3 (es) 2018-06-15
HK1100005A1 (en) 2007-08-31
CY2015001I2 (el) 2016-06-22
EA201100128A1 (ru) 2011-06-30
PT2077282T (pt) 2017-02-14
US20160075793A1 (en) 2016-03-17
PL2348051T3 (pl) 2019-05-31
PT2380910E (pt) 2015-11-26
JP6235521B2 (ja) 2017-11-22
DE602004026470D1 (de) 2010-05-20
IL207347A (en) 2015-08-31
AU2004287643C1 (en) 2012-05-31
ES2708095T3 (es) 2019-04-08
NO20062289L (no) 2006-08-03
LT2077282T (lt) 2017-03-10
US20050123546A1 (en) 2005-06-09
ES2615507T3 (es) 2017-06-07
EP2380910A1 (en) 2011-10-26
NO341893B1 (no) 2018-02-12
EP2380911A1 (en) 2011-10-26
EA025962B1 (ru) 2017-02-28
HK1213574A1 (zh) 2016-07-08
US20160075794A1 (en) 2016-03-17
SG160348A1 (en) 2010-04-29
EP1692182A2 (en) 2006-08-23
JP2012254083A (ja) 2012-12-27
TR201903329T4 (tr) 2019-04-22
RS57466B1 (sr) 2018-09-28
TNSN06126A1 (en) 2007-11-15
HRP20190333T1 (hr) 2019-05-03
HUE031632T2 (en) 2017-07-28
PT2380911T (pt) 2018-07-04
LU93001I2 (fr) 2016-05-17
CN1902231B (zh) 2015-05-20
EP2348051B1 (en) 2018-12-19
DK1692182T3 (da) 2010-05-31
MA31040B1 (fr) 2010-01-04
NO20220263A1 (no) 2006-08-03
PL2077282T3 (pl) 2017-08-31
EP2348051A2 (en) 2011-07-27
BRPI0416262B1 (pt) 2022-04-12
NO20210499A1 (no) 2006-08-03
EA036531B1 (ru) 2020-11-19
CN102373214A (zh) 2012-03-14
KR101364858B1 (ko) 2014-02-19
ME03330B (me) 2019-10-20
PT1692182E (pt) 2010-05-13
NO20171989A1 (no) 2006-08-03
PT2348051T (pt) 2019-02-04
LU92632I2 (fr) 2015-11-02
WO2005044859A3 (en) 2005-08-04
CY2015001I1 (el) 2016-06-22
ECSP066603A (es) 2006-10-17
PL2380910T3 (pl) 2015-12-31
KR101364902B1 (ko) 2014-02-21
LT2348051T (lt) 2019-02-25
KR20110129990A (ko) 2011-12-02
ME01775B (me) 2011-02-28
HRP20170398T1 (hr) 2017-05-19
US20240301079A1 (en) 2024-09-12
US20210002382A1 (en) 2021-01-07
EA201300481A1 (ru) 2014-01-30
EP2380910B1 (en) 2015-09-30
RS51334B (sr) 2011-02-28
EP2348051A3 (en) 2012-12-19
CN102373214B (zh) 2014-07-09
IL207347A0 (en) 2010-12-30
SG10201504094SA (en) 2015-06-29
KR20120104419A (ko) 2012-09-20
ES2341009T3 (es) 2010-06-14
JP4653109B2 (ja) 2011-03-16
CR11848A (es) 2011-04-04
CY1118719T1 (el) 2017-07-12
CY2016004I2 (el) 2016-08-31
HRP20151418T1 (hr) 2016-01-29
CY1110301T1 (el) 2015-01-14
FR15C0076I2 (fr) 2016-03-11
NO2018020I1 (no) 2018-06-27
IL232954A0 (en) 2014-07-31
WO2005044859A2 (en) 2005-05-19
NO347800B1 (no) 2024-03-25
EP1692182B1 (en) 2010-04-07
HUE042914T2 (hu) 2019-07-29
EP2380911B1 (en) 2018-05-09
AU2004287643A1 (en) 2005-05-19
EP2077282B1 (en) 2016-12-28
JP2015134814A (ja) 2015-07-27
CN1902231A (zh) 2007-01-24
CA2544865A1 (en) 2005-05-19
TR201809892T4 (tr) 2018-07-23
NO346533B1 (no) 2022-09-26
US20090010921A1 (en) 2009-01-08
SI2380911T1 (en) 2018-07-31
US20230212303A1 (en) 2023-07-06
CY1121206T1 (el) 2020-05-29
HRP20181204T1 (hr) 2018-09-21
DK2077282T3 (en) 2017-01-30
BRPI0416262A (pt) 2007-01-09
ZA200604547B (en) 2007-07-25
HRP20100303T1 (hr) 2010-07-31
AU2004287643B2 (en) 2011-11-17
BE2016C008I2 (sr) 2021-08-16
LT2380911T (lt) 2018-07-10
NO346167B1 (no) 2022-04-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20240301079A1 (en) Antigen binding molecules with increased fc receptor binding affinity and effector function
EA047444B1 (ru) АНТИТЕЛА, ОБЛАДАЮЩИЕ ПОВЫШЕННОЙ АФФИННОСТЬЮ К СВЯЗЫВАНИЮ С Fc-РЕЦЕПТОРОМ И ЭФФЕКТОРНОЙ ФУНКЦИЕЙ