BE401185A - - Google Patents

Description

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  " Procédé pour la séparation de l'hormone   folliculeuse   de l'urine des individus en état de gestation". 



   On a constaté que l'on peut séparer à l'état d'esters et   relativement   pure l'hormone folliculeuse en partait comme matière première de l'urine   d'@@   individus en état de gestation ou des préparations ou extraits que l'on en   obtient   par extrac- tion ou d'autrespréparations ou extraits, par   exemple,   qui proviennent du placenta ou d'autres organes, de matières végétales et analogues. 



   A cette fin, on soumet la matière première à un traite- ment préalable qui a pour but d'en éliminer les phénols vo- latils et les matières neutres qu'elle renferme. Ce traite- ment préalable   consiste   opportunément à soumettre l'urine ou 

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 les extraits renfermant l'hormone tout d'abord à une distilla- tion par la vapeur d'eau qui a pour effet d'éliminer les phénols   ;ce   et autres constituants volatils. Le reliquat de la distillation à la vapeur d'eau est ensuite soumis à ébullition avec une so- lution aqueuse d'alcalis ou est dissous dans un solvant organi- que non miscible avec l'eau. Puis la solution ainsi obtenue est extraite par une solution alcaline.

   Par ces deux procédés, on réalise la séparation des   constituants   neutres de la matière première , tandis que l'hormone reste dans la   solution,   alcaline. 



  Après séparation des constituants non dissous, on transforme la solution alcaline par des agents axylants. Le produit de l'acy- lation est isolé et daine par saponification une hormone de valeur. 



   On peut remplacer la solution. alcaline par d'autres matiè- res à réaction alcaline, telles que par exemple des bases orga- niques, de la pyridine et analogues. Comme solvant non miscible à l'eau, on se sert d'éther, de benzol ou analogue. Quand on emploie l'urine comme matière première, on fait tout d'abord bouillir opportunément l'urine pendant un temps suffisant pour en expulser l'ammoniaque complètement ou pour la plus grande partie. Les constituants neutres séparés par traitement à l'al- cali peuvent être séparés de la solution alcaline par   centrifu-   gation, filtration, éventuellement En présence de kieselguhr ou de matières analogues ou de toute autre manière appropriée. 



     EXEMPLE   I. On soumet à   distillation   par la vapeur 20 litres d'urine; le traitement se poursuit   jusqa'à   cessation de déga- gement de combinaisons volatiles. On rend le   résidg   alcalin et on le fait bouillir pendant quelques heures jusqu'à ce que l'ammoniaque soit éliminée pour la plus grande partie. ;Par cette opération, une partie de l'eau s'évapore. Après séparation par 

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 filtration des constituants insolubles, on ajoute du p-toluol- sulfochlorure de préférence dissous dans un peu d'acétone, en agi- tant énergiquement, à la solution   concentrée   et fortement alca- line et on continue à agiter pendant plusieurs heures à une tem- pérature d'environ 30 à 40 .

   Au refroidissement, le produit dtacylation formé se sépare à l'état de masses graisseuses que l'en sépare par filtration. En saponifiant on obtient une hor- mone folliculeuse très active. 



   EXEMPLE 2. 



   On débarrasse par distillation par la vapeur 500 grammes d'un extrait obtenu de la façon usuelle à partir du placenta et ayant environ 50. 000 unités souris par gramme, de ses con-   stitumts   volatils. On fait bouillir le résidu en présence d'al- cali pendant quelques heures et ensuite on le filtre. A cette solution alcaline, on ajoute 250 grs de chlorure de benzoyle en agitant énergiquement. Le benzoate de l'hormone folliculeuse se sépare à l'état de graisse dans le liquide et peut être sé- paré par filtration éventuellement avec   addition   d'un peu de 
Kieselguhr. On peut toutefois aussi traiter le mélange de la réaction par l'éther et le benzoate passe alors dans ce der- nier. Après évaporation de l'éther il reste un résidu rempli de cristaux. 



     EXEMPLE   3. 



   On soumet pendant une journée entière à la distillation par la vapeur 100 grs. d'extrait d'hormone folliculeuse à 
35000 unités souris environ par gramme provenant de l'urine de jument en état de gestation. Le résidu de la distillation par la vapeur   (envirm   80   grs.)   est dissous dans 1,5 litre de solution de potasse   à     5%,et ''si     c'est   nécessaire ,débarrassé de ses constituants neutres non dissous. A la solution alcaline   obtenue ,   en ajoute environ 80 grs. de p-tuluolsulfochlorure dans 
160 cm3 de benzol et l'on agite éner giquement le mélange pen- 

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 dant 6 à 8 heures. On extrait le mélange par l'éther,on traite la solution étherée par l'eau ,on sèche et on évapore l'éther. 



   Le résidu ainsi obtenu est porté à ébullition pendant 3 à 4   @   heures avec 1,5 litre de solution méthanolique de potasse à 
5%. Ensuite dilué par une grande quantité d'eau ; en y ajoute du sel de cuisine, puis on l'extrait à nouveau par l'éther. L'ex- trait éthéré est lavé successivement par l'eau, l'acide chlorhy- drique dilué et à nouveau par l'eau et extrait plusieurs fois par une solution aqueuse de potasse à   5%   jusque ce   @   qu'il ne se produise plus de précipitations quand on acidifie le pro- duit du dernier extrait   alcalin.On   réunit les extraits alcalins ou on les travaille séparément.

   Par   acidification   de ceux-ci, on obtient les cristaux plus ou moins bruns de l'hormone folli- culeuse qui quand la distillation par la vapeur de l'extrait aqueux n'a pas duré suffisamment, contient encore des constituants huileux. Le rendement en produit cristallisé atteint environ 70 à 80% rapportés aux unités souris de la matière de départ. 



  L'hormone cristallisée obtenue renfermer à 4 millions d'unités sourispar gramm e. 



    REVELIDICATIONS.   



   1. Procédé pour la séparation de l'hormone   folliculeuse   de l'urine des individus en état de gestation ou d'extraits qui en proviennent ou qui dérivent d'autres matières premières telles que placenta et autres organes, matières végétales ou analogues, caractérisé par le fait que l'on transforme le liquide hormo- nique après une préparation appropriée en solutions alcalines, qu'on le traite par des agents acylants et que l'on sépare les produits d'acylation obtenus que l'on saponifie ensuite le cas échéant.

Claims (1)

1. 2. Forme de réalisation conforme à la revendication 1, caractériséapar le fait que le traitement préalable consiste en une distillation par la vapeur d'eau. <Desc/Clms Page number 5>

   3. Forme de réalisation du procédé conforme aux reven- dications 1 et 2, caractérisée par le fait que le traitement préliminaire consiste dans la séparation des éléments neutres du liquide hormonique.