ES2205131T3

ES2205131T3 - Compuestos de benzotiofeno, productos intermedios, procesos, composiciones y procedimientos.

Info

Publication number: ES2205131T3
Application number: ES97307376T
Authority: ES
Inventors: Kenneth Lee Hauser; Alan David Palkowitz; Kenneth Jeff Thrasher
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 1996-09-24
Filing date: 1997-09-22
Publication date: 2004-05-01
Anticipated expiration: 2017-09-22
Also published as: US6075151A; EP0831089A1; JP3256168B2; DE69724062D1; DE69724062T2; EP0831089B1; US5843963A; ATE247101T1; CA2214919A1; JPH10130262A

Abstract

LA INVENCION PROPORCIONA COMPUESTOS DE BENZOTIOFENO, FORMULACIONES Y METODOS PARA INHIBIR LA PERDIDA OSEA O LA RESORCION OSEA, EN PARTICULAR LA OSTEOPOROSIS, Y ESTADOS PATOLOGICOS RELACIONADOS CON EL SISTEMA CARDIOVASCULAR, INCLUYENDO HIPERLIPIDEMIA Y OTRAS PATOLOGIAS CARDIOVASCULARES.

Description

Compuestos de benzotiofeno, productos intermedios, procesos, composiciones y procedimientos.

La osteoporosis describe un grupo de enfermedades que resultan de diversas etiologías, pero que se caracterizan por la pérdida neta de masa ósea por unidad de volumen. La consecuencia de esta pérdida de masa ósea y que da como resultado la fractura de huesos, es el fallo del esqueleto para proporcionar el soporte para el cuerpo. Uno de los tipos de osteoporosis más comunes es la asociada con la menopausia. La mayoría de las mujeres pierden de aproximadamente 20% a aproximadamente 60% de la masa ósea en el compartimiento trabecular del hueso dentro de los 3 a 6 años después del cese de la menstruación. Esta rápida pérdida está generalmente asociada a con un aumento de la formación y resorción ósea. Sin embargo, el ciclo de resorción es más dominante y el resultado es una pérdida neta de la masa ósea. La osteoporosis es una enfermedad grave y común entre las mujeres postmenopáusicas.

Se estima que hay 25 millones de mujeres, sólo en Estados Unidos, que sufren esta enfermedad. Los resultados de la osteoporosis son personalmente perniciosos, y también representa una gran pérdida económica debida a su cronicidad y a la necesidad de un apoyo extenso y a largo plazo (hospitalización y cuidado asistencial en el hogar) procedente de las secuelas de la enfermedad. Esto es especialmente cierto en los pacientes de mayor edad. Además, aunque generalmente se cree que la osteoporosis no es una amenaza para la vida, una tasa del 20% al 30% de mortalidad está relacionada con la fractura de cadera en las mujeres de mayor edad. Un gran porcentaje de esta tasa de mortalidad se puede asociar directamente con la osteoporosis postmenopáusica.

Los tejidos más vulnerables en el hueso a los efectos de la osteoporosis postmenopáusica es el hueso trabecular. Este tejido es con frecuencia denominado como hueso esponjoso y está concentrado concretamente cerca de los extremos del hueso (cerca de las articulaciones) y en las vértebras de la espina dorsal. El tejido trabecular se caracteriza por pequeñas estructuras óseas que se interconectan unas con otras, así como el más sólido y denso tejido cortical que constituye la superficie externa y la caña central del hueso. Esta red de trabéculas interconectadas proporciona un soporte lateral a la estructura cortical externa y es crítica para la resistencia biomecánica de la estructura global. En la osteoporosis postmenopáusica, es fundamentalmente la resorción neta y la pérdida de las trabéculas lo que conduce al fallo y fractura del hueso. A la luz de pérdida de las trabéculas en las mujeres postmenopáusicas, no resulta sorprendente que la mayoría de las fracturas comunes son las asociadas con huesos que son muy dependientes del soporte trabecular, por ejemplo las vértebras, el cuello de los huesos que soportan peso tal como el fémur y el antebrazo. Además, la fractura de cadera, las fracturas de colles, y las fracturas por aplastamiento vertebral, son las marcas características de la osteoporosis postmenopáusica.

El procedimiento generalmente más aceptado para el tratamiento de la osteoporosis postmenopáusica es la terapia de restitución de estrógenos. Aunque la terapia generalmente tiene éxito, el acatamiento de la terapia por parte de paciente es bajo, fundamentalmente porque el tratamiento con estrógenos produce frecuentemente efectos segundarios no deseables. Un procedimiento adicional del tratamiento sería la administración de un compuesto de bisfosfonato, tal como, por ejemplo, Fosamax® (Merck & Co., Inc.).

A lo largo de todo el periodo premenopáusico, la mayoría de las mujeres tienen menos incidencia en las enfermedades cardiovasculares que los hombres de la misma edad. A continuación de la menopausia, sin embargo, la tasa de enfermedades cardiovasculares en las mujeres aumenta lentamente hasta igualar la tasa vista en los hombres. Esta pérdida de protección se ha vinculado a la pérdida de estrógenos y, en particular, a la pérdida de la capacidad de los estrógenos para regular los niveles de lípidos séricos. La naturaleza de la capacidad de los estrógenos para regular los lípidos séricos, no se comprende bien, pero la evidencia hasta ahora indica que los estrógenos pueden regular a los receptores de los lípidos de baja densidad (LDL) en el hígado para eliminar el exceso de colesterol. Además, parece que los estrógenos tienen algún efecto sobre la biosíntesis del colesterol, y otros efectos beneficiosos sobre la salud cardiovascular.

En la bibliografía está registrado que los niveles de lípidos séricos en las mujeres postmenopáusicas que tienen terapia de restitución de estrógenos vuelven a la concentración encontrada es el estado premenopáusico. Por eso, parece que los estrógenos van a ser un tratamiento razonable para este estado. Sin embargo, los efectos secundarios de la terapia restitución de estrógenos no son aceptables para muchas mujeres, limitando así el uso de esta terapia. Una terapia ideal para este estado será un agente que regule los niveles de lípidos séricos de una forma análoga a la de los estrógenos, pero que está desprovisto de los efectos secundarios y los riesgos asociados con la terapia con estrógenos.

El documento EP 0 703 231 describe derivados de benzo[b]tiofeno 3-bencil sustituidos. Uno de los usos reivindicados para estos compuestos es aliviar los síntomas del síndrome postmenopáusico.

El documento EP 0 675 121 se refiere a procedimientos y productos intermedios en la preparación de compuestos de benzo[b]tiofeno 3-bencil sustituidos.

La presente invención proporciona compuestos de benzo[b]tiofeno, sus formulaciones farmacéuticas, y los procedimientos de uso de tales compuestos para inhibir las patologías anteriormente mencionadas.

La presente invención se refiere a compuestos de fórmula I

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en la que:

R^{1} es -H, -OH, -O(alquilo C_{1}-C_{4}), -OCOAr, -O(CO)OAr, donde Ar es fenilo o fenilo sustituido, -OCO(alquilo C_{1}-C_{6}), -O(CO)O(alquilo C_{1}-C_{6}), o -OSO_{2}(alquilo C_{2}-C_{6});

R^{2} es -H, Cl, -F, -OH, -O(alquilo C_{1}-C_{4}), -OCOAr, -O(CO)OAr, donde Ar es fenilo o fenilo sustituido, -OCO(alquilo C_{1}-C_{6}), o -OSO_{2}(alquilo C_{2}-C_{6});

R^{3} es 1-piperidinilo, 1-pirrolidinilo, metil-1-pirrolidinilo, dimetil-1-pirrolidinilo, 4-morfolino, dimetilamino, dietilamino, diisopropilamino, o 1-hexametilenimino;

R^{4} es -H, alquilo C_{1}-C_{5}, -COAr, -(CO)H, -CO(alquilo C_{1}-_{6}), -SO_{2}(alquilo C_{2}-_{6}), o -SO_{2}Ar, donde Ar es fenilo o fenilo sustituido; y

n es 2 ó 3;

o una sal farmacéuticamente aceptable o su solvato.

La presente invención proporciona también productos intermedios de fórmula II que son útiles para preparar los compuestos farmacéuticamente activos de la presente invención, y se muestran abajo:

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en la que:

R^{1a} es -H o -OR^{7} en la que R^{7} es un grupo protector del hidroxilo;

R^{2a} es -H, -Cl, -F, o -OR^{7} en la que R^{7} es un grupo protector del hidroxilo;

R^{4a} es -CO(alquilo C_{1}-C_{4}) o -(CO)H; y

R^{6} es -H o R^{8}, en la que R^{8} es un grupo protector del hidroxilo que se puede separar selectivamente en presencia de -OR^{7}.

Además, la presente invención proporciona compuestos de fórmula VII, que son útiles para la síntesis de los compuestos de fórmula I:

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en la que: R^{1a}, R^{2a}, R^{4a}, y n tienen sus significados previos y Q es un grupo lábil.

La presente invención se refiere además a formulaciones farmacéuticas que contienen compuestos de fórmula I, y el uso de tales compuestos para aliviar los síntomas de la pérdida ósea o la resorción ósea, en particular la osteoporosis, estados patológicos cardiovasculares, y similares.

Los términos generales utilizados en la descripción de los compuestos aquí descritos tienen sus significados habituales. Por ejemplo, "alquilo C_{1}-C_{6}" se refiere a cadenas alifáticas ramificadas o lineales de 1 a 6 átomos de carbono que incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, n-butilo, pentilo, isopentilo, hexilo, isohexilo, y similares. De forma similar, el término "-O(alquilo) C_{1}-C_{4}" representa un grupo alquilo C_{1}-C_{4} unido mediante un oxígeno tal como, por ejemplo, metoxilo, etoxilo, n-propoxilo, isopropoxilo, y similares. De estos grupos alcoxilo C_{1}-C_{4}, es muy preferido el metoxilo.

El término "fenilo sustituido" se refiere a un grupo fenilo que tiene uno o más sustituyentes seleccionados del grupo consistente en alquilo C_{1}-C_{4}, -O(alquilo) C_{1}-C_{4}, hidroxilo, nitro. Cloro, fluoro, o tri(cloro o fluoro)metilo.

El término "grupo protector del hidroxilo" contempla numerosas funcionalidades utilizadas en la bibliografía para proteger una función hidroxilo durante una secuencia química y que se puede separar para producir el fenol. Incluido dentro de este grupo estarían el acilo, mesilatos, tosilatos, bencilo, alquilsililoxilos, alquilos C_{1}-_{4}, y similares. Hay descritas numerosas reacciones para loa formación y separación de tales grupos protectores en varios trabajos estándar que incluyen, por ejemplo, Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum Press (Londres y Nueva York, 1973); Green, T.W., Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, (Nueva York, 1981); y The Peptides, Vol. I, Schrooder y Lubke, Academic Press (Londres y Nueva York, 1965). Los procedimientos para separar grupos protectores hidroxilo R^{7} preferidos, particularmente metilo y alquilsiloxilo, son esencialmente como se describen en los Ejemplos, infra.

El término "grupo lábil (Q)" significa una entidad química que es capaz de ser desplazada por una función amino a través de unja reacción SN_{2}. Tales reacciones son bien conocida en la técnica y tales grupos incluirán halógenos, mesilatos, tosilatos, y similares. Un grupo lábil preferido será el bromo.

El término "inhibir" incluye su significado generalmente aceptado que incluye prohibir, prevenir, restringir, y disminuir, parar, invertir la progresión, gravedad, o mejorar un síntoma resultante o efecto.

El término "solvato" representa un agregado que comprende una o más moléculas del soluto, tal como un compuesto de fórmula I, con una o más moléculas de disolvente.

Los compuestos de esta invención son derivados del carbono centralmente localizado, por ejemplo, el resto "-CO-",
"-CHOH-", o "-CH_{2}-" en la fórmula I son, por lo tanto, derivados de metanonas, metanoles, o etanos. Por ejemplo, un compuesto de A-CO-B, se denominará [A][B]metanona. Además, los compuestos de fórmula I son derivados del benzo[b]tiofeno que se denomina y se numera según el Ring Index, The American Chemical Society, como sigue:

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Los compuestos preferidos de la presente invención son hidrocloruro de 2-(4-hidroxifenil)-3-{N-[4-(2-(1-piperidinil)etoxi)fenil]amino}-6-hidroxibenzo[b]tiofeno y dihidrocloruro de 2-(4-metoxifenil)-3-{N-[4-(2-(1-piperidinil)etoxi)fenil]amino}-6-metoxibenzo[b]tiofeno.

Se dispone de varias vías de síntesis para preparar los compuestos de la presente invención. La primera ruta sintética está ilustrada en el Esquema I, de más abajo. El material de partida para una ruta de preparación de los compuestos de fórmula I de la presente invención, los compuestos de fórmula III se preparan esencialmente según describe Jones y colaboradores en las Patentes de EE.UU. números 4.418.068 y 4.133.814. La fórmula III tiene la siguiente estructura:

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en la que R^{1a} y R^{2a} son como se definieron anteriormente.

Para los compuestos de fórmula III, un sustituyente preferido R^{7} es metilo o metoximetilo. Los compuestos en los que cada R^{1a} y R^{2a} es metoxilo, así como otros derivados, se preparan a través del procedimiento descrito en Jones y colaboradores, supra.

Las primeras etapas del presente procedimiento para preparar ciertos compuestos de fórmula I incluyen, situar selectivamente un grupo lábil en la posición 3 de un compuesto de fórmula III, acoplar el producto de reacción de la primera etapa con una 4-(hidroxilo protegida)fenilacilamida (fórmula V), y separar el grupo protector del hidroxilo para generar un fenol del compuesto IIb. El procedimiento descrito en el Esquema I de abajo.

Esquema I

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En la primera etapa del Esquema I, se sitúa selectivamente un grupo lábil apropiado en la posición 3 del material de partida de fórmula III mediante procedimientos estándar. Los grupos lábiles apropiados R^{9} incluyen sulfonatos tales como metanosulfonato, 4-bromobencenosulfonato, toluenosulfonato, etanosulfonato, isopropanosulfonato, 4-metoxibencenosulfonato, 4-nitrobencenosulfonato, 2-clorobencenosulfonato, triflato, y similares, halógenos tales como bromo, cloro, y yodo, y otros grupos lábiles relacionados. Sin embargo, para asegurar la colocación apropiada del grupo lábil, se prefieren los denominados halógenos, y se prefiere especialmente el bromo.

La presente reacción se lleva a cabo utilizando procedimientos estándar. Por ejemplo, cuando se utilizan agentes halogenantes preferidos, un equivalente de semejante agente halogenante, preferiblemente bromo, se hace reaccionar con un equivalente del sustrato de fórmula III, en presencia de un disolvente adecuado tal como el cloroformo o el ácido acético. La reacción transcurre a una temperatura de aproximadamente 40ºC a aproximadamente 80ºC y, normalmente, se completa en una a seis horas.

El producto de reacción procedente de la etapa anterior del procedimiento, un compuesto de fórmula IV, se hace reaccionar luego con una 4-(hidroxilo protegida)fenilalquilamina (fórmula V), por ejemplo, en la que R^{4a} es -(CO)H o -CO(alquilo C_{1}-_{4}), para formar compuestos de fórmula II en los que R^{8} es un grupo protector selectivamente separable. Generalmente, el resto protector del 4-hidroxilo del fenol, puede ser cualquier grupo protector conocido que se pueda separar selectivamente sin separar el resto R^{7}, cuando está presente, de un compuesto de fórmula II. Un grupo protector del R^{8} preferido es el bencilo. Las 4-(hidroxilo protegidas)fenilalquilamidas son compuestos bien conocidos y se pueden preparar mediante procedimientos estándar. Por ejemplo, un reactivo preferido, por ejemplo la 4-benciloxifenil-acetamida, se puede sintetizar a partir de la 4-benciloxianilina y el anhídrido acético, que se pueden conseguir comercialmente, mediante procedimientos conocidos en la técnica.

Esta reacción de acoplamiento de IV y V es conocida en la técnica como reacción de tipo Ullman, y se listan diversos procedimientos estándar. [Véase, por ejemplo, Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, cuarta edición, 3-16, (J. March, ed., John Wiley & Sons, Inc. 1992); Jones, C.D., J. Chem. Soc. Perk. Trans. I, 4:407 (1992)].

Aunque se han intentado varias variaciones de las reacciones del tipo Ullman estándar, por ejemplo haciendo reaccionar una anilina y una anilinosulfamida con bromuro de alilo en presencia de un catalizador de cobre, tuvo éxito únicamente una variante conocida como reacción de Goldberg. Más adelante se dan detalles de esta reacción.

En general, se calienta a reflujo, bajo una atmósfera inerte, una cantidad equivalente de los dos sustratos arílicos en presencia de hasta una cantidad equimolar de catalizador de óxido de cobre (I) y un disolvente apropiado. Ejemplos de una sal catalítica de cobre (I) adecuada incluirá, pero no se limitará a, Cu_{2}O, CuI, y Cu_{2}CO_{3}. Preferiblemente, un equivalente de un compuesto de fórmula IV en la que R^{9} es bromo, se hace reaccionar con una cantidad equivalente de 4-benciloxifenilacetamida en presencia de un equivalente de óxido de cobre.

Los disolventes apropiados para esta reacción son los disolventes o mezcla de disolventes que permanecen inerte a lo largo de toda la reacción. Típicamente, son disolventes preferido las bases orgánicas, en particular una base impedida tal como, por ejemplo, 2,4,6-colidina.

La temperatura empleada en esta etapa será suficiente para efectuar la conclusión de la reacción de acoplamiento, e influirá del tiempo requerido para ello. Cuando la mezcla de reacción se calienta a reflujo bajo una atmósfera inerte, tal como nitrógeno, la reacción se completa normalmente en veinte a ciento veinte horas.

A continuación de la reacción de acoplamiento, que forma un compuesto de fórmula IIa, se preparan compuestos de fórmula IIb, a través de procedimientos de reducción bien conocidos, separando selectivamente el grupo R^{6} protector del hidroxilo. Es imperativo que el procedimiento seleccionado no afecte, cuando está presente, a grupo R^{7} protector del hidroxilo.

Cuando R^{8} es el resto bencilo preferido, y R^{7}, cuando está presente, es metilo, la presente etapa del proceso se lleva a cabo a través de procedimientos estándar de hidrogenolisis. Típicamente, el sustrato de fórmula IIa se añade a un disolvente adecuado o a una mezcla de disolventes, seguido de la adición de un donador de protones para acelerar la reacción y un catalizador de la hidrogenación apropiado.

Los catalizadores apropiados incluyen metales nobles y óxidos tales como óxidos de paladio, platino y rodio, sobre un soporte tal como carbono o carbonato de calcio. De estos, el paladio sobre carbono, en particular se prefiere 10% de paladio sobre carbono.

Los disolventes para esta reacción son los disolventes o mezclas de disolventes que permanecen inertes a lo largo de toda la reacción. Típicamente, se prefieren acetato de etilo, alcoholes alifáticos C_{1}-_{4}, en particular etanol.

Para la presente reacción, el ácido clorhídrico sirve como un donador de protones adecuado y preferido.

Cuando transcurre a temperatura ambiente, y en una presión de hidrógeno que oscila entre aproximadamente 207 kPa y 345 kPa, la presente reacción transcurre bastante rápidamente. El progreso de esta reacción se puede controlar mediante técnicas cromatográficas estándar, tal como la cromatografía de capa fina.

Los compuestos de fórmula IIa y IIb se llevan a cabo dentro del género aquí descrito como compuestos de fórmula II, y son útiles para preparar los compuestos farmacéuticamente activos de fórmula I.

Ejemplos de los compuestos de Fórmula II incluyen, pero no se limitan a:

2-(4-metoxifenil)-3-[N-(4-hidroxifenil)acetamido]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno

2-fenil-3-[N-(4-hidroxifenil)acetamido]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno

2-(4-fluorofenil)-3-[N-(4-hidroxifenil)acetamido]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno

2-(4-clorofenil)-3-[N-(4-hidroxifenil)acetamido]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-(4-benciloxifenil)acetamido]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno

2-fenil-3-[N-(4-benciloxifenil)acetamido]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-(4-hidroxifenil)propanoilamido]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-(4-benciloxifenil)butanoilamido]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno

2-(4-clorofenil)-3-[N-(4-benciloxifenil)acetamido]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-(4-hidroxifenil)acetamido]benzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-(4-benciloxifenil)acetamido]benzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-(4-benciloxifenil)formilamido]benzo[b]tiofeno

2-(4-fluorofenil)-3-[N-(4-benciloxifenil)propanoilamido]benzo[b]tiofeno, y similares.

Los compuestos de fórmula IIb se pueden convertir en los compuestos de fórmula Ia mediante una de dos vías sintéticas diferentes, que se ilustran en el Esquema II, de más adelante.

El primer procedimiento es la conversión directa de IIb en Ia, utilizando un reactivo de fórmula VI:

VIR^{3}-(CH_{2})_{n}-Q

en la que R^{3} y n son como se definieron anteriormente, y Q es un grupo lábil, tal como un resto bromo o cloro.

Esquema II

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El proceso de alquilación directa, mostrado en el esquema II, se lleva a cabo a través de procedimientos estándar. Los compuestos de fórmula VI se pueden conseguir comercialmente o se preparan por medios bien conocidos para un experto normal en la materia. Preferiblemente, la sal hidrocloruro de un compuesto de fórmula VI, particularmente preferido es el hidrocloruro de 2-cloroetilpiperidina.

Generalmente, al menos aproximadamente 1 equivalente de sustrato de fórmula IIb se hace reaccionar con 2 equivalentes de un compuesto de fórmulaVI en presencia de, al menos, aproximadamente 4 equivalentes de un carbonato de metal alcalino, preferiblemente carbonato de cesio, y un disolvente adecuado.

Los disolventes para esta reacción son los disolventes o mezclas de disolventes que permanecen inertes a lo largo de toda a reacción. Se prefiere la N,N-dimetilformamida, especialmente su forma anhidra.

La temperatura empleada en esta etapa deberá ser suficiente para efectuar la conclusión de la reacción de alquilación. Típicamente, se prefiere la temperatura ambiente y es suficiente.

La presente reacción, preferiblemente, transcurre bajo una atmósfera inerte, particularmente nitrógeno.

Bajos las condiciones de reacción preferidas, esta reacción transcurrirá hasta la conclusión en aproximadamente 16 a aproximadamente 20 horas. Por supuesto, el progreso de la reacción se puede controlar a través de técnicas cromatográficas estándar.

El segundo procedimiento para preparar compuestos de fórmula Ia a partir de un compuesto de fórmula IIb va a transcurrir a través de un compuesto intermedio (fórmula VII) en una secuencia de dos etapas (véase el Esquema II, supra). Un compuesto de fórmula IIb se hace reaccionar con un exceso de un agente alquilante de la fórmula

Q-(CH_{2})_{n}-Q'

en la que Q y Q' son, cada uno, los mismos a diferentes grupos lábiles, en una solución alcalina. Los grupos lábiles apropiados pueden ser, por ejemplo, cloro, bromo, mesilatos, tosilatos, y similares. Una solución alcalina preferida para esta reacción de alquilación contiene carbonato de potasio en un disolvente inerte tal como, por ejemplo, metiletil-cetona (MEC) o DMF. En esta solución, el grupo 4-hidroxilo del resto fenilo de un compuesto de fórmula IIb existe como un ión fenóxido que desplaza uno de los grupos lábiles del agente alquilante.

Esta reacción transcurre rápidamente cuando la solución alcalina que contiene las sustancias reaccionantes y reactivos se lleva a reflujo y se deja que transcurra hasta la conclusión. Cuando se utiliza MEC como el disolvente preferido, los tiempos de reacción van desde aproximadamente 6 horas a aproximadamente 20 horas.

Los compuestos de fórmula VII son útiles en la síntesis de los compuestos de fórmula I. Los compuestos de fórmula VII incluirán, pero no se limitan a:

2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-(2-bromoetoxi)fenil]acetilamido]-6-metoxibenzo[b]tiofeno

2-fenil-3-[N-[4-(2-bromoetoxi)fenil]acetilamido]-6-metoxibenzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-(2-bromoetoxi)fenil]acetilamido]benzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-(2-bromopropoxi)fenil]acetilamido]-6-metoxibenzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-(2-cloroetoxi)fenil]acetilamido]-6-metoxibenzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-(2-tosiletoxi)fenil]acetilamido]-6-metoxibenzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-(2-bromoetoxi)fenil]butanoilamido]-6-metoxibenzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-(2-bromoetoxi)fenil]formilamido]-6-metoxibenzo[b]tiofeno, y similares.

El producto de reacción (fórmula VII) procedente de esta etapa se hace reaccionar luego con una amina (R^{3}), por ejemplo, 1-piperidina, 1-pirrolidina, metil-1-pirrolidina, dimetil-1-pirrolidina, 4-morfolina, dimetilamina, dietilamina, diisopropilamina, o 1-hexametilenimina, mediante técnicas estándar, para formar un compuesto de fórmula Ia. Preferiblemente, la sal hidrocloruro de piperidina se hace reaccionar con un compuesto de fórmula VII en un disolvente inerte, tal como DMF anhidro, y se calienta a una temperatura en el intervalo de aproximadamente 60ºC a aproximadamente 110ºC. Cuando se calienta la mezcla a una temperatura preferida de aproximadamente 90ºC, la reacción tarda únicamente de aproximadamente 30 minutos a aproximadamente 1 hora. Sin embargo, los cambios en las condiciones de la reacción influirán en el tiempo que esta reacción necesita para que transcurra hasta su conclusión. Por supuesto, el progreso de esta etapa de reacción se puede controlar mediante técnicas cromatográficas estándar.

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La conversión de los compuestos de fórmula Ia en otros compuestos de fórmula I se muestra en el Esquema III y puede implicar; la separación del grupo acilo para formar la serie de diaril-amino (Ib), la separación y reintroducción para formar otro grupo acilo o una serie sulfonilo (Ic), o la reducción de N-acilo a la serie N-alquilo (Id).

Esquema III

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La separación del grupo N-acilo a partir de un compuesto de fórmula Ia se puede llevar a cabo fácilmente bien mediante hidrólisis ácida o básica para formar un compuesto de Ib, donde R^{1a}, R^{2a}, R^{3}, y n tiene sus significados previos. El procedimiento preferido implica calentar un compuesto de fórmula Ia en una solución de alcohol y alcóxido concentrado. Típicamente, se utiliza EtOH como el disolvente orgánico y se utiliza solución de NaOH al 50% como fuente de la base. Se disuelve el sustrato en una mezcla igual de alcohol y de base, y se calienta a la temperatura de reflujo del disolvente combinado. La reacción normalmente requiere entre 6 y 24 horas para su conclusión.

Los compuestos de fórmula Ib son farmacéuticamente activos para los procedimientos aquí descritos. Por consiguiente, tales compuestos están incluidos en la presente definición de compuestos de fórmula I.

Además, los compuestos de fórmula Ib pueden servir como sustratos para preparar compuestos de fórmula Ic donde R^{1a}, R^{2a}, R^{3}, y n tienen sus significados previos y R^{4c} es CO(alquilo C_{1}-C_{6}), -(CO)H, -CO-fenilo, -SO_{2}-fenilo, o -SO_{2}(alquilo C_{2}-C_{6}). Para formar estos compuestos, el nitrógeno está o bien acilado o sulfonado. Esto se puede llevar a cabo fácilmente mediante una diversidad de procedimientos de acilación y alquilación que son bien conocidos en la técnica. Par procedimientos adicionales en tales acilaciones y sulfonaciones, es aplicable la discusión sobre la derivatización de los fenoles (véase más adelante).

Los compuestos de fórmula Ia se pueden convertir también en compuestos de fórmula Id, donde R^{1a}, R^{2a}, R^{3}, y n tienen sus significados previos y R^{4b} es alquilo C_{1}-C_{5}. Esta transformación se puede conseguir mediante la reducción de la amida-carbonilo en Ia en su correspondiente metileno con un reactivo reductor tal como LAH. Estas reducciones son bien conocidas en la técnica y normalmente se llevan a cabo en disolventes inertes tal como THF anhidro, éter, y similares. A estas reacciones se las hace transcurrir con un exceso del agente reductor y a temperaturas de -50 a 30ºC, bajo una atmósfera de nitrógeno. Las reacciones normalmente se completan dentro dos a veinticuatro horas, se pueden utilizar técnicas estándar tales como CCF para controlar la extensión de la reacción.

Los compuestos de fórmula Ia, Ib, Ic, y Id, son farmacológicamente activos para los procedimientos aquí descritos, y están incluidos en la fórmula, como aquí se define. Además, los compuestos de fórmula Ia-d pueden servir como sustratos de otros compuestos de fórmula I, tal como, por ejemplo, compuestos donde R^{1a} y R^{2a} se convierten en R^{1} y R^{2}, respectivamente.

Se obtienen compuestos preferidos de fórmula I escindiendo el grupo protector del hidroxilo R^{7}, cuando está presente, de los compuestos de fórmulas Ia-d a través de procedimientos bien conocidos. Ha descritas numerosas reacciones para la formación y separación de tales grupos protectores en varios trabajos estándar que incluye, por ejemplo, Protectiva Groups in Organic Chemistry, Plenum Press (Londres y Nueva York, 1973); Green, T.W., Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, (Nueva York, 1981); y The Peptides, Vol. I, Schrooder y Lubke, Academic Press (Londres y Nueva York, 1965). Los procedimientos para separar el grupo protector del hidroxilo R^{7}, metilo, esencialmente son como se describe en los ejemplos, infra.

Otros compuestos preferidos de fórmula I se preparan convirtiendo restos hidroxilo en posición 6- y/o 4'-, cuando están presentes, en un resto de la fórmula -O-CO-(alquilo C_{1}-C_{6}), -OCOC_{6}H_{5}, -O(CO)O(alquilo C_{1}-C_{6}) o -O-SO_{2}-(alquilo C_{2}-C_{6}) mediante procedimientos bien conocidos. Tales métodos están descritos en las patentes de EE.UU. números 5.393.763 y 5.482.949, cuyas descripciones se incorporan aquí como referencia.

Por ejemplo, cuando se desea un grupo -O-CO(alquilo C_{1}-C_{6}), se hace reaccionar un compuesto mono- o dihidroxílico de fórmula Ia-d con un agente tal como cianuro, bromuro, cloruro de acilo, o azida, o con un anhídrido apropiado o anhídrido mixto. Las reacciones se llevan convenientemente a cabo en un disolvente básico tal como piridina, lutidina, quinolina, o isoquinolina, o en un disolvente de amina terciaria tal como trietilamina, tributilamina, metilpiperidina, y similares. La reacción se puede también llevar a cabo en un disolvente inerte tal como acetato de etilo, dimetilformamida, dimetilsulfóxido, dioxano, dimetoxietano, acetonitrilo, acetona, metil-etil-cetona, y similares, al que se le ha añadido al menos un equivalente de un eliminador del ácido (excepto como se indica más adelante), tal como una amina terciaria. Si se desea, se pueden usar catalizadores de la acilación tal como 4-dimetilaminopiridina o 4-pirrolidinopiridina. Véase, por ejemplo, Haslam y colaboradores, Tetrahedron, 36: 2409-2433 (1980).

Las presentes reacciones se llevan a cabo a temperaturas moderadas, en el intervalo de aproximadamente -25ºC a aproximadamente 100ºC, frecuentemente bajo una atmósfera inerte tal como nitrógeno gas. Sin embargo, la temperatura ambiente es normalmente adecuada para que transcurra la reacción.

Las reacciones secundarias al acilar el bis-aril-nitrógeno (compuestos de fórmula Ib) se pueden reducir no utilizando cantidades en exceso de reactivo acilante y utilizando temperaturas más bajas. Se pueden separar los isómeros no deseados mediante cromatografía sobre gel de sílice eluidos con mezclas de disolventes, tal como MeOH-CHCl_{3} (1:99) (v/v) o mezclas de EtOAc-hexano.

La acilación de un grupo hidroxilo en posición 6 o posición 4', se puede realizar también mediante reacciones, catalizadas con ácido, de los ácidos carboxílicos apropiados en disolventes orgánicos inertes. Se utilizan catalizadores ácidos tales como ácido sulfúrico, ácido polifosfórico, ácido metanosulfónico y similares.

Los grupos R^{1} y/o R^{2}, anteriormente mencionados, de los compuestos de fórmula Ia-d se pueden proporcionar también formando un éster activo del ácido apropiado, tal como los ésteres formados por tales reactivos conocidos tal como diciclohexilcarbodiimida, acilimidazoles, nitrofenoles, pentaclorofenol, N-hidroxisuccinimida, y 1-hidroxibenzotriazol. Véase, por ejemplo, Bull. Chem. Soc. Japan, 38:1979 (1965), y Chem. Ber., 788 y 2024 (1970).

Cada una de las técnicas anteriores que proporcionan restos -O-CO-(alquilo C_{1}-C_{6}) se lleva a cabo en disolventes como los que se discutieron anteriormente. Aquellas técnicas que no producen un producto ácido en el curso de la reacción, por supuesto, no exigen el uso de un eliminador del ácido en la mezcla de reacción.

Cuando se desea un compuesto de fórmula Ia-d en el que el grupo hidroxilo, en la posición 6 y/o la posición 4, de un compuesto de fórmula I se convierte en un grupo de la fórmula -O-SO_{2}-(alquilo C_{1}-C_{6}), el compuesto mono- y dihidroxílico se hace reaccionar con, por ejemplo, un anhídrido sulfónico o un derivado del ácido sulfónico apropiado, tal como un cloruro de sulfonilo, bromuro, o sal de sulfonil-amonio, como muestra King y Monoir, J. Am. Chem. Soc., 97: 2566-2567 (1975). El compuesto dihidroxílico se puede hacer reaccionar también con el anhídrido sulfónico apropiado o anhídridos sulfónicos mixtos. Tales reacciones se llevan a cabo en condiciones tales como se explicaron anteriormente en la discusión de a reacción con haluros de ácido y similares.

Los compuestos de fórmula Ia-d, sus compuestos de hidroxilo fenólico, y sus correspondientes fenoles derivatizados, combinados, constituyen los compuestos de fórmula I de la actual invención.

Ejemplos de los compuestos de fórmula I incluyen, pero no se limitan a:

2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi)fenil]acetamido]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno

2-(4-hidroxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi)fenil]acetamido]-6-hidroxi-benzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi)fenil]acetamido]-6-hidroxi-benzo[b]tiofeno

2-(4-hidroxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi)fenil]amino]-6-metoxibenzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi)fenil]-N-etilamino]-6-metoxibenzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi)fenil]propanoilamido]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-[3-(1-piperidinil)propoxi)fenil]acetamido]benzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi)fenil]amino]-6-metoxibenzo[b]tiofeno

2-(4-clorofenil)-3-[N-[4-[3-(1-hexametilen)propoxi)fenil]butanoilimido]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno

2-fenil-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi]fenil]-N-metilamino]benzo[b]tiofeno

2-(4-clorofenil)-3-[N-[4-[3-(1-pirrolidinil)propoxi)fenil]-N-butilamino]-6-hidroxi-benzo[b]tiofeno

2-(4-acetiloxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi)fenil]acetamido]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno

2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-[3-(1-piperidinil)etoxi)fenil]acetamido]-6-n-butil-sulfoniloxibenzo[b]tiofeno

2-fenil-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi]fenil]acetamido]-6-benzoiloxibenzo[b]tiofeno

2-(4-benzoiloxifenil)-3-[N-[4-[3-(1-piperidinil)propoxi)fenil]acetamido]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno

2-(4-benzoiloxifenil)-3-[N-[4-[3-(1-hexametilenimino)propoxi]fenil]-N-2-butilamino]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno

2-(4-(4-metoxibenzoiloxi)fenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi]fenil]-N-metilamino]-6-metoxi-benzo[b]tiofeno, y similares.

Aunque la forma exenta de base de compuestos de fórmula I se puede utilizar en los procedimientos de la presente invención, se prefiere preparar usar una forma salina farmacéuticamente aceptable. El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere o bien a sales de adición de base o de ácido que se sabe que no van a ser tóxicas y se utilizan comúnmente en la bibliografía farmacéutica. Las sales farmacéuticamente aceptables generalmente han intensificado las características de solubilidad comparadas con el compuesto a partir del cual se derivan, y por eso son con frecuencia más sensibles a la formulación como líquidos o emulsiones. Los compuestos utilizado en los procedimientos de esta invención forman principalmente sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables con una amplia variedad de ácidos orgánicos e inorgánicos, e incluyen las sales fisiológicamente aceptables que con frecuencia se utilizan en la química farmacéutica. Tales sales también forman parte de esta invención.

Los ácidos orgánicos típicos utilizados para formar tales sales incluyen el clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico, nítrico, sulfúrico, fosfórico, hipo fosfórico y similares. También se pueden utilizar sales derivadas de ácidos orgánicos, tales como ácidos mono y dicarboxílicos alifáticos, ácidos alcanoicos sustituidos con fenilo, ácidos hidroxialcanoicos e hidroxialcanodioicos, ácidos aromáticos, ácidos sulfónicos alifáticos y aromáticos. Tales sales farmacéuticamente aceptables incluyen, por eso, acetato, fenilacetato, trifluoroacetato, acrilato, ascorbato, benzoato, clorobenzoato, dinitrobenzoato, hidroxibenzoato, metoxibenzoato, metilbenzoato, o-acetoxibenzoato, naftalen-2-benzoato, bromuro, isobutirato, fenilbutirato, \beta-hidroxibutirato, butino-1,4-dioato, hexino-1,4-dioato, caproato, caprilato, cloruro, cinamato, citrato, formiato, fumarato, glicolato, heptanoato, hipurato, lactato, malato, maleato, hidroximaleato, malonato, mandelato, mesilato, nicotinato, isonicotinato, nitrato, oxalato, ftalato, tereftalato, fosfato, monohidrogenofosfato, dihidrogenofosfato, metafosfato, pirofosfato, propiolato, propionato, fenilpropionato, salicilato, sebacato, succinato, suberato, sulfato, bisulfato, pirosulfato, sulfito, bisulfito, sulfonato, bencenosulfonato, p-bromofenilsulfonato, clorobencenosulfonato, etanosulfonato, 2-hidroxietanosulfonato, metanosulfonato, naftalen-1-sulfonato, naftalen-2-sulfonato, p-toluenosulfonato, xilenosulfonato, tartrato, y similares. Una sal preferida es la sal de hidrocloruro.

Las sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables se forman, típicamente, haciendo reaccionar un compuesto de fórmula I con una cantidad equimolar o en exceso de ácido. Las sustancias reaccionantes se combinan generalmente en un disolvente mutuo, tal como dietil-éter o acetato de etilo. La sal normalmente precipita de la solución dentro de aproximadamente una hora a 10 días, y se puede aislar por filtración, o el disolvente se puede eliminar por medios convencionales. La presente invención proporciona además formulaciones farmacéuticamente aceptables para administrar a un mamífero, incluyendo seres humanos, que necesiten tratamiento, que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I y un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

Según se utiliza aquí, el término "cantidad eficaz" significa una cantidad de compuesto de la presente invención que es capaz de inhibir, aliviar, mejorar, tratar, o prevenir otros síntomas en los mamíferos, incluyendo los seres humanos, que padecen de pérdida ósea o de resorción ósea, en particular osteoporosis, y estados patológicos cardiovasculares que incluyen hiperlipidemia, y otras patologías cardiovasculares.

En el caso de cánceres dependientes de los estrógenos, el término "cantidad eficaz" significa la cantidad de compuesto de la presente invención que es capaz de aliviar, mejorar, inhibir el crecimiento del cáncer, tratar o prevenir el cáncer y/o sus síntomas en los mamíferos, incluyendo los seres humanos.

Por "formulación farmacéuticamente aceptable" se entiende que el vehículo, diluyente, excipientes de la sal deben ser compatibles con el ingrediente activo (un compuesto de fórmula I) de la formulación, y no debe ser perjudicial para su receptor. Las formulaciones farmacéuticas se pueden preparar por procedimientos conocidos en la técnica. Por ejemplo, los compuestos de esta invención se pueden formular con excipientes, diluyentes, o vehículos corrientes, y se conforman en pastillas, cápsulas, y similares. Ejemplos de excipientes, diluyentes, y vehículos que son adecuados para tales formulaciones incluyen los siguientes: cargas y aditivos tales como almidón, azúcares, manitol, y derivados silícicos; agentes aglomerantes tales como carboximetil-celulosa y otros derivados de la celulosa, alginatos, gelatina, y poli(vinilpirrolidona); agentes humectantes tales como glicerol; agentes disgregantes tales como agar, carbonato de calcio, y bicarbonato de sodio; agentes para retardar la disolución, tal como parafina; aceleradores de la resorción, tal como compuestos de amonio cuaternario; agentes tensioactivos, tales como alcohol cetílico, monoestearato de glicerol; vehículos absorbentes tales como el caolín t la bentonita; y lubricantes, tales como talco, estearato de calcio y magnesio y los polietilenglicoles sólidos. Las formas farmacéuticas finales pueden ser: píldoras, pastillas, polvos, grageas, jarabes, aerosoles, bolsitas, sellos, elixires, suspensiones, emulsiones, ungüentos, supositorios, solución estériles inyectables, o polvos estériles envasados, y similares, dependiendo de del tipo de excipiente utilizado.

Además, los compuestos de esta invención están bien indicados para la formulación como formas de dosificación de liberación sostenida. Las formulaciones también pueden estar constituidas de forma que liberen el ingrediente activo, únicamente o preferiblemente, en una parte concreta del tracto intestinal, posiblemente durante un periodo de tiempo. Tales formulaciones implicarán recubrimientos, envolturas, o matrices protectoras que pueden estar hechas de sustancias poliméricas o ceras.

La dosificación concreta de un compuesto de fórmula I requerido para tratar, inhibir, o prevenir los síntomas y/o enfermedades de un mamífero, incluyendo seres humanos, que padecen las enfermedades anteriores, según esta invención, dependerá de la enfermedad en particular, los síntomas y la severidad. La dosificación, las vías de administración, y la frecuencia de la dosificación lo decide mejor el médico que le está atendiendo. Generalmente, las dosis eficaces y aceptadas serán de 15 mg a 1000 mg, y más típicamente de 15 mg a 80 mg, de una a tres veces por día. Tales dosificaciones se administrarán a un paciente que lo necesite, durante al menos un mes y, típicamente, durante seis meses, o crónicamente.

Las formulaciones que sigue, se dan con fines de ilustración y no pretenden, en ninguna forma, ser limitadoras. Los ingredientes totales activos en tales formulaciones comprenden de 0,1% a 99,9% en peso de la formulación. El término "ingrediente activo" significa un compuesto de fórmula I.

Formulación 1 Cápsulas de gelatina

Ingrediente	Cantidad (mg/cápsula)
Ingrediente activo	0,1-1000
Almidón NF	0-500
Polvo suelto de almidón	0-500
Fluido de silicona de 3,5 cm^{2}/s	0-15

Los ingredientes se mezclan, se les hace pasar a través de un tamiz de luz de malla Nº 45 de EE.UU. (3,5 x 10^{-4} m de abertura del tamiz), y se cargan en cápsulas en gelatina dura.

Formulación 2 Pastillas

Ingrediente	Cantidad (mg/pastilla)
Ingrediente activo	2,5-1000
Almidón	10-50
Celulosa microcristalina	10-20
Poli(vinilpirrolidona)	5
(como solución al 1o% en agua)
Carboximetil-celulosa de sodio	5
Estearato de magnesio	1
Talco	1-5

Se hace pasar el ingrediente activo, el almidón y la celulosa a través de un tamiz de luz de malla Nº 45 de EE.UU. (3,5 x 10^{-4} m de abertura del tamiz) y se mezcló a fondo. La solución de poli(vinilpirrolidona) se mezcla con los polvos resultantes que luego se les hace pasar a través de un tamiz de luz de malla Nº 14 de EE.UU. (1,425 x 10^{-3} m de abertura del tamiz). Los gránulos así producidos se secan a 50-60ºC y se les hizo pasar a través de un tamiz de luz de malla Nº 18 de EE.UU. (3,5 x 10^{-3} m de abertura del tamiz). Previamente, se hizo pasar carboximetilcelulosa de sodio, estearato de magnesio, y talco, a través de un tamiz de luz de malla Nº 60 de EE.UU. (2,5 x 10^{-4} m de abertura del tamiz), se añadió a los gránulos anteriores y se mezcló a fondo. El material resultante se comprime en una máquina para formar pastillas para producir las pastillas.

Formulación 3 Aerosol

Ingrediente	% en peso
Ingrediente activo	0,25
Etanol	29,75
Propulsor 22	70,00
(Clorodifluorometano)
Total	100,00

El ingrediente activo se mezcla con etanol y la mezcla se añade a una porción del propulsor 22, se enfría a -30ºC y se transfiere a un dispositivo de llenado. La cantidad requerida se introduce luego en un recipiente de acero inoxidable y se diluye con el resto del propulsor. Luego se acoplan al recipiente las unidades con válvula.

Formulación 4 Supositorios

Ingrediente	Peso
Ingrediente activo	150 mg
Glicéridos de ácidos grasos saturados	3000 mg

Se hace pasar el ingrediente activo a través de un tamiz de luz de malla Nº 60 de EE.UU. (2,5 x 10^{-4} m de abertura del tamiz), y se pone en suspensión en los glicéridos de ácidos grasos que previamente se han calentado hasta sus puntos de fusión. Se vierte la mezcla en un molde para supositorios y se deja enfriar.

Formulación 5 Suspensiones

Las suspensiones que contienen cada una 0,1-1000 mg de un compuesto de fórmula I por dosis de 5 ml.

Ingrediente	Peso
Ingrediente activo	0,1-1000 mg
Carboximetilcelulosa de sodio	50 mg
Jarabe	1,25 ml
Solución de ácido benzoico (0,1 M)	0,10 ml
Sabor	c.v.
Color	c.v.
Agua purificada hasta el total	Total 5 ml

Se hace pasar un compuesto de fórmula a través de un tamiz de luz de malla Nº 45 de EE.UU. (3,5 x 10^{-4} m de abertura del tamiz), y se mezcla con carboximetilcelulosa de sodio y jarabe para formar una pasta suave. Se añade la solución de ácido benzoico, el sabor y el color diluido en agua y la mezcla se agita a fondo. Se añade agua adicional para llevar la formulación hasta el volumen final.

Se proporcionan los siguientes ejemplos y preparaciones para aclarar la práctica de la presente invención. Todas las publicaciones y solicitudes de patentes mencionadas en la memoria descriptiva son indicativos del nivel de los expertos en la materia a la que pertenece esta invención.

Los datos de RMN para los siguientes ejemplos se generaron en un instrumento de RMN GE 300 MHz, y se utilizó CDCl_{3} a no ser que se indique otra cosa. La intensidad de campo para los espectros RNM de ^{13}C era de 75,5 MHz, a no ser que se indique otra cosa.

Preparación 1 2-(4-metoxifenil)-3-bromo-6-metoxibenzo[b]tiofeno

A una solución de 2-(4-metoxifenil)-6-metoxibenzo[b]tiofeno (27,0 g; 100 milimoles) en 1,10 l de cloroformo a 60ºC se le añadió bromo 15,98 g; 100 milimoles), gota a gota, disuelto en 200 ml de cloroformo. Después de que se hubo completado la adición, se enfrió la reacción a temperatura ambiente, y se separó el disolvente a vacío para proporcionar 34,2 g (100%) de 2-(4-metoxifenil)-3-bromo-6-metoxibenzo[b]tiofeno como un sólido blanco. P.f.: 83-85ºC. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) d 7,70-7,62(m, 4H), 7,17(dd, J = 8,6, 2,0 Hz, 1H), 7,09(d, J = 8,4 Hz, 2H). Espec. Masas FD: 349, 350. Análisis. Calculado para C_{16}H_{13}BrO_{2}S: C, 55,03; H, 3,75. Hallado: C, 54,79; H, 3,76.

Preparación 2 2-(4-metoxifenil)-3-[N-(4-benciloxifenil)acetamido-6-metoxibenzo[b]tiofeno

A una solución de 2-(4-metoxifenil)-3-bromo-6-metoxibenzo[b]tiofeno (34,20 g; 0,098 moles) y N-4-benciloxifenilacetamida (23,7 g; 0,098 moles) en 100 ml de 2,4,6-colidina, bajo N_{2}, se añadió Cu_{2}O (14,0 g, 0,098 moles). La mezcla resultante se calentó a reflujo durante 72 horas. Al enfriar, la reacción se diluyó con CH_{2}Cl_{2} y los sólidos precipitados se separaron por filtración. El filtrado se concentró a vacío, y el residuo se disolvió en EtOAc. La fase orgánica se extrajo luego varias veces con HCl 5,0 N. La fase orgánica se secó (Na_{2}SO_{4}), y se concentró a vacío hasta dar un sólido. La cromatografía (SiO_{2}, CHCl_{3}) proporcionó 2,43 g (5%) de 2-(4-metoxifenil)-3-[N-(4-benciloxifenil)acetamido-6-metoxibenzo[b]tiofeno como una espuma de color ámbar. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) d (doble debido a los rotámeros de amida) 7,70-6,80(m, 16H), 4,90(bs, 2H), 3,78-3,75(m, 6H), 2,11 y 1,78(s, 3H). Espec. Masas FD: 509.

Preparación 3 2-(4-metoxifenil)-3-[N-(4-hidroxifenil)acetamido-6-metoxibenzo[b]tiofeno

Se disolvió 2-(4-metoxifenil)-3-[N-(4-benciloxifenil)acetamido-6-metoxibenzo[b]tiofeno (2,43 g, 4,77 milimoles) en 50 ml de EtOH/EtOAc 1:1, que contiene 5% de HCl conc. A esta solución se le añadió 1,0 g de 5% de Pd/C. La mezcla resultante se hidrogenó, a 275,8 kPa, durante 4 horas. Luego se filtró la mezcla a través de celita para separar el catalizador. El filtrado se concentró a vacío hasta dar un semisólido. La cromatografía (SiO_{2}, CHCl_{3}) proporcionó 1,32 g (83%) de 2-(4-metoxifenil)-3-[N-(4-hidroxifenil)acetamido-6-metoxibenzo[b]tiofeno como una espuma de color ámbar. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) d (doble debido a los rotámeros de amida) 9,53 y 9,36(s, 1H), 7,62-6,51(m, 11H), 3,78 y 3,58(s, 6H), 2,01 y 1,76(s, 3H). Espec. Masas FD: 419. Análisis. Calculado para C_{24}H_{21}NO_{4}S\cdot0,19 CHCl_{3}: C, 65,71; H, 4,73; N 3,17. Hallado: C, 65,80; H, 4,70; N, 3,01.

Ejemplo 1 2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)acetamido-6-metoxibenzo[b]tiofeno

A una solución de 2-(4-metoxifenil)-3-[N-(4-hidroxifenil)acetamido-6-metoxibenzo[b]tiofeno (1,31 g, 3,13 milimoles) y Cs_{2}CO_{3} (4,10 g, 12,50 milimoles) en 15 ml de DMF anhidra, se le añadió hidrocloruro de 2-cloroetilpiperidina (1,15 g, 6,26 milimoles). La mezcla resultante se agitó vigorosamente a temperatura ambiente durante 5 horas. La mezcla de reacción se diluyó con 200 ml de H_{2}O, y luego se extrajo varias veces con EtOAc. La fase orgánica combinada se lavó luego con H_{2}O varias veces y luego se secó (Na_{2}SO_{4}). La concentración a vacío proporcionó un aceite. La cromatografía (1% CH_{3}OH/CHCl_{3}, SiO_{2}) proporcionó 1,49 g (90%) de 2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi]fenil]acetamido-6-metoxibenzo[b]tiofeno como un aceite de color ámbar. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) d (doble debido a los rotámeros de amida) 7,66-6,70(m, 11H), 3,93(m, 2H), 3,78 y 3,58(s, 6H), 2,8-2,30(m, 6H), 2,01 y 1,78(s, 3H), 1,52-1,11(m, 6H). Espec. Masas FD: 530. Análisis. Calculado para C_{31}H_{34}N_{2}O_{4}S: C, 70,16; H, 6,46; N 5,28. Hallado: C, 70,33; H, 6,34; N, 5,35.

Ejemplo 2 Dihidrocloruro de 2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi]fenil]amino-6-metoxibenzo[b]tiofeno

A una solución de 2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi]fenil]acetamido-6-metoxibenzo[b]tiofeno
(1,49 g, 2,80 milimoles) en 10 ml de EtOH absoluto se le añadieron 10 ml de solución de NaOH al 50%. La mezcla resultante se calentó a reflujo durante 18 horas. Tras enfriar, la mezcla se diluye con 200 ml de H_{2}O. La fase acuosa se extrajo luego con EtOAc (3 x 100 ml). La fase orgánica se combinó, se lavó con salmuera, luego se secó (Na_{2}SO_{4}). La concentración a vacío proporcionó una espuma que se sometió a cromatografía (CHCl_{3}, SiO_{2}). El aceite aislado se convirtió en sal de hidrocloruro mediante el tratamiento con Et_{2}O\cdotHCl en EtOAc. El aislamiento por filtración proporcionó 1,37 g (100%) de dihidrocloruro de 2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi]fenil]amino-6-metoxibenzo[b]tiofeno como un sólido blanco. P.f. 126-130ºC. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) d 7,54(d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,48(d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,29(d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,92(d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,91(dd, J = 8,9, 2,2 Hz, 1H), 6,73(d, J = 8,9 Hz, 2H), 6,50(d, J = 8,9 Hz, 2H), 4,21(t, J = 4,7 Hz, 2H), 3,78(s, 3H), 3,71(s, 3H), 3,43-3,31(m, 4H), 2,97-2,90(m, 2H), 1,80-1,61(m, 5H), 1,35(m, 1H). Espec. Masas FD: 488. Análisis. Calculado para C_{29}H_{34}N_{2}O_{3}S\cdot2,0 HCl: C, 62,03; H, 6,10; N, 4,99. Hallado: C, 61,79; H, 6,35; N, 5,27.

Ejemplo 3 Hidrocloruro de 2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi]fenil]amino-6-hidroxibenzo[b]tiofeno

A una solución de hidrocloruro de 2-(4-metoxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi]fenil]amino-6-metoxibenzo[b]tiofeno (0,70 g, 1,25 milimoles) en 40 ml de CH_{2}Cl_{2} anhidro, bajo N_{2} a 10ºC, se le añadió BBr_{3} (0,36 ml, 3,80 milimoles). Se dejo que la solución se calentara gradualmente a temperatura ambiente y se agitó durante un total de 6 horas. La reacción se calmó vertiendo la mezcla en una solución de NaHCO_{3} saturada, en exceso. Se extrajo luego la fase acuosa varias veces con 5% EtOH/EtOAc. La fase orgánica se combinó y se secó (Na_{2}SO_{4}) y luego se concentró a vacío hasta formar una espuma. El producto crudo se sometió a cromatografía (1-6% CH_{3}OH/CHCl_{3}) para proporcionar 325 mg (49%) 2-(4-hidroxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi]fenil]amino-6-metoxibenzo[b]tiofeno como un aceite. Este material se convirtió en la sal de hidrocloruro mediante el tratamiento con Et_{2}O\cdotHCl en EtOAc, y se aisló como un sólido blanco por filtración. Datos para el hidrocloruro de 2-(4-hidroxifenil)-3-[N-[4-[2-(1-piperidinil)etoxi]fenil]amino-6-metoxibenzo[b]tiofeno: p.f. 140-150ºC. RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) d 9,57(s, 2H), 7,40(d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,19(d, J = 10,1 Hz, 1H), 7,16(d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,75(dd, J = 10,1, 2,0 Hz, 1H), 6,70(d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,64(d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,46(d, J = 8,8 Hz, 2H), 4,21(m, 2H), 3,50-3,30(m, 4H), 3,01-2,95(m, 2H), 1,81-1,63(m, 5H), 1,38(m, 1H). Espec. Masas FD: 488. Análisis. Calculado para C_{27}H_{28}N_{2}O_{3}S\cdot1,5 HCl: C, 62,94; H, 5,77; N, 5,44. Hallado: C, 62,99; H, 5,88; N, 5,27.

En los ejemplos que ilustran los procedimientos, se utilizó un modelo postmenopáusico en el que se determinaron los efectos de diferentes tratamientos sobre los lípidos circulantes.

Se consiguieron de Charles River Laboratories Portage, MI) ratas hembras Spraque Dawley de setenta y cinco días, (intervalo de peso de 200 a 225 g). Los animales o bien se ovariectomizaron bilateralmente (VOX) o se expusieron a un procedimiento quirúrgico Sham en Charles River Laboratories, y se expidieron después de una semana. Tras la llegada, se alojaron en jaulas metálicas colgantes, en grupos de 3 ó 4 por jaula y tuvieron acceso ab libitum a la comida (contenido de calcio de aproximadamente 0,5%) y al agua, durante una semana. Se mantuvo la temperatura ambiente a 22,2º \pm 1,7ºC con una humedad relativa mínima del 40%. El periodo luminoso en la habitación era de 12 de luz y 12 horas de oscuridad.

Recogida de tejido tras el régimen de dosificación

Después de un periodo de aclimatación de una semana (por lo tanto, dos semanas después de la VOX) se inició una dosificación diaria con el compuesto de prueba. Se dieron oralmente 17a-etinil-estradiol o el compuesto de prueba, a menos que se establezca otra cosa, como una suspensión en 1% de carboximetilcelulosa o se disolvió en 20% de ciclodextrina. Los animales se dosificaron diariamente durante 4 días. A continuación del régimen de dosificación, se pesaron los animales y se anestesiaron con mezcla de ketamina: xilazina (2:1 V:V) y se recogió una muestra de sangre mediante punción cardiaca. Los animales se sacrificaron luego por asfixia con CO_{2}, se separó el útero mediante una incisión en el medio, y se determinó un peso uterino en húmedo.

Análisis del colesterol

Se dejaron coagular muestras de sangre a temperatura ambiente durante 2 horas, y se obtuvo suero tras una centrifugación durante 10 minutos a 3000 rpm. Se determinó el suero del colesterol utilizando un ensayo de colesterol de lato rendimiento con un Boehringer Mannheim Diagnostics. Se oxidó brevemente el colesterol hasta dar colest-4-en-3-ona y peróxido de hidrógeno. El peróxido de hidrógeno se hizo reaccionar luego con fenol y 4-aminofenazona en presencia de peroxidasa para producir un colorante de p-quinona-imina, que se leyó espectrofotométricamente a 50 nm. Se calculó luego loa concentración de colesterol frente a una curva estándar. Se automatizó el ensayo completo utilizando una Biomek Automated Workstation.

Ensayo de la eosinofil-peroxidasa uterina (EPO)

Se mantuvieron los úteros a 4ºC hasta el momento del análisis enzimático. Se homogeneizaron luego losúteros en 50 volúmenes solución tampón Tris 50 mM (pH - 8,0) que contienen 0,005% de Triton X-100. Tras la adición de 0,01% de peróxido de hidrógeno y o-fenilendiamina 10 mM (concentraciones finales) en solución tampón Tris, se registró un aumento de la absorbancia durante un minuto a 450 nm. La presencia de eosinófilos en el útero es una indicación la actividad estrogénica de un compuesto. Se determinó la velocidad máxima de un intervalo de 15 segundos sobre la porción lineal inicial de la curva de reacción.

Fuente del compuesto

Se obtuvo 17a-etinil-estradiol de Sigma Chemical Co., St. Louis, MO.

Influencia de los compuestos de fórmula I sobre el colesterol sérico y determinación de la actividad agonista/no agonista

Los datos presentados en la Tabla 1 a continuación muestran resultados comparativos entre ratas ovariectomizadas, se trataron las ratas con 17-etinil-estradiol (EE_{2}; una forma de estrógeno oralmente disponible), y las ratas se trataron con ciertos compuestos de la presente invención. Aunque el EE_{2} originó una disminución del colesterol sérico cuando se administró oralmente a razón de 0,1 mg/kg/día, se ejerció también una acción estimulante sobre el útero de forma que el peso uterino tratado con EE_{2} era sustancialmente mayor que el peso uterino de los animales del ensayo ovariectomizados. Esta respuesta uterina a los estrógenos está bien reconocida en la técnica.

No sólo los compuestos de la presente invención redujeron, de forma general, el colesterol sérico comparado con los animales de control ovariectomizados, sino que el peso uterino se aumentó sólo mínimamente hasta disminuir ligeramente con la mayoría de los compuestos de la fórmula probados. Comparado con los compuestos estrogénicos conocidos en la técnica, la ventaja de la reducción del colesterol sérico sin afectar contrariamente al peso uterino es bastante raro y deseable.

Como se expresa en los datos de abajo, se valoró también la estrogenicidad valorando por evaluación la respuesta adversa de la infiltración de eosinófilos en el útero. Los compuestos de la presente invención no originaron ningún aumento del número de eosinófilos observado en la capa estrómica de las ratas ovariectomizadas, mientras que el estradiol origina un aumento sustancial esperado en la infiltración de eosinófilos.

Los datos presentados en la Tabla 1 de abajo reflejan la respuesta de 5 a 6 ratas por tratamiento.

TABLA 1

Compuesto Nº	Dosis	Peso	Eosinófilos	Colester.
	mg/kg^{a}	uterino	uterinos	sérico
		% inc.^{b}	(Vmax)^{c}	% dism.^{d}
EE2^{e}	0,1	124,4*	85,5*	78,1*
Ejemplo 2	0,1	55,4*	10,2	42,8*
	1,0	89,5*	12,9	46,4*
	10,0	86,3*	6,6	66,8*
Ejemplo 3	0,1	45,2*	1,2	63,0*
	1,0	39,4*	4,5	51,7*
	10,0	35,0*	4,8	64,9*

^{a} mg/kg PO
^{b} % de aumento de peso uterino frente a los controles ovariectomizados
^{c} Vmax de eosinofil-peroxidasa
^{d} disminución del colesterol sérico frente a los controles ovarietomizados
^{e} 17-a-etinil-estradiol
* p< 0,05

Además de las ventajas demostradas de los compuestos de la presente invención, los datos anteriores demuestran claramente que los compuestos de fórmula I no son miméticos de los estrógenos. Además, no se observaron efectos perjudiciales toxicológicos (por ejemplo, número de sobrevivientes) con ningún tratamiento.

Procedimiento de ensayo de la osteoporosis

Siguiendo el Procedimiento general de preparación, infra, las ratas se trataron diariamente, durante 35 días, (6 ratas por grupo de tratamiento) y se sacrificaron mediante asfixia con dióxido de carbono el trigésimo sexto día. El periodo de tiempo de 35 días es suficiente para permitir la máxima reducción en la densidad ósea, medida como aquí se describe. En el momento del sacrifico, se extirparon los úteros, se diseccionaron exentos de tejidos extraños, y se expulsó el contenido de líquidos antes de la determinación del peso en húmedo con el fin de confirma la deficiencia de estrógenos asociada con la overiectomía completa. Los úteros se sitúan luego en formalina tamponada neutra, al 10%, para permitir el subsiguiente análisis histológico.

Se separaron cortando los fémures derechos y se generaron rayos-X digitalizados, y se analizaron mediante un programa de análisis de imagen (imagen NIH) en la metáfisis distal. El aspecto proximal de las tibias procedentes de estos animales también se les escanea mediante tomografía cuantitativa computerizada.

Según los procedimientos anteriores, se administraron oralmente a los animales del ensayo los compuestos de la presente invención y etinil-estradiol (EE_{2}) en hidroxipropil-b-ciclodextrina al 20%. Los resultados de los datos de la metáfisis distal del fémur y de la tibia distal se registraron como tanto por ciento de protección respecto a la ovariectomía.

En resumen, la overiectomía de los animales sometidos a ensayo originaron una reducción significativa de la densidad del fémur comparada con los controles tratados con el vehículo, intactos. El etinil-estradiol (EE_{2}) administrado oralmente previene esta pérdida, pero el riesgo de estimulación uterina con este tratamiento, está siempre presente.

Los compuestos de la presente invención previenen también la pérdida ósea de una forma general, dependiente de la dosis. Por consiguiente, los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento de la osteoporosis, originados en particular por el síndrome postmenopáusico.

Claims

1. Un compuesto de fórmula I

Fórmula I

9

en la que:

R^{2} es -H, Cl, -F, -OH, -O(alquilo C_{1}-_{4}), -OCOAr, -O(CO)OAr, donde Ar es fenilo o fenilo sustituido, -OCO(alquilo C_{1}-C_{6}), O(CO)O(alquilo C_{1}-C_{6}) o -OSO_{2}(alquilo C_{2}-C_{6});

R^{4} es -H, alquilo C_{1}-C_{5}, -COAr, -(CO)H, -CO(alquilo C_{1}-C_{6}), -SO_{2}(alquilo C_{2}-C_{6}), o -SO_{2}Ar, donde Ar es fenilo o fenilo sustituido; y

n es 2 ó 3;

o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. Un compuesto según la reivindicación 1, en el que n es 2.

3. Un compuesto según la reivindicación 1, en el que R^{3} es 1-piperidinilo.

4. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y, opcionalmente, una cantidad eficaz de estrógeno o progestina, en combinación con un vehículo, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.

5. Un compuesto de fórmula I según cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para su uso en el alivio de los síntomas del síndrome postmenopáusico.

6. Un compuesto de fórmula I según cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para su uso en el alivio de los síntomas de los estados patológicos, del síndrome postmenopáusico, de la osteoporosis.

7. Un compuesto de fórmula I según cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para su uso en el alivio de los síntomas de los estados patológicos, del síndrome postmenopáusico, relacionados con enfermedades cardiovasculares.

8. Un compuesto de fórmula I según cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para su uso en el alivio de los síntomas de una enfermedad cardiovascular relacionada con la hiperlipidemia

9. Un compuesto de fórmula I según cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para su uso en el alivio de los síntomas de los estados patológicos, del síndrome postmenopáusico, del cáncer dependiente de los estrógenos.

10. Un compuesto de fórmula I según cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para su uso en el alivio de los síntomas del cáncer de útero o de mama.

11. Un compuesto de fórmula I según cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para su uso en el alivio de los síntomas de la enfermedad fibroide uterina.

\newpage

12. Un compuesto de fórmula I según cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para su uso en el alivio de los síntomas de la endometriosis.

13. Un compuesto de fórmula I según cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para su uso en el alivio de los síntomas de la proliferación celular del músculo aórtico liso.

14. Un compuesto de fórmula I según cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para su uso en el alivio de los síntomas de la restenosis.

15. Un compuesto de fórmula II

10

en el que

R^{1a} es -H o -OR^{7} en la que R^{7} es un grupo protector del hidroxilo seleccionado entre acilo, mesilato, tosilato, bencilo, alquilsililoxilo y alilo C_{1}-C_{4};

R^{2a} es -H, -Cl, -F, o -OR^{7} en la que R^{7} es un grupo protector del hidroxilo, como se definió anteriormente;

R^{4a} es -CO(alquilo C_{1}-C_{4}) o -(CO)H; y

R^{6} es -H o R^{8}, en la que R^{8} es un grupo protector del hidroxilo, como el definido para R^{7}, que se puede eliminar selectivamente en presencia de -OR^{7}.

16. Un compuesto de fórmula VII:

11

en el que

R^{1a} es -H o -OR^{7} en la que R^{7} es un grupo protector del hidroxilo como el definido en la reivindicación 15;

R^{2a} es -H, -Cl, -F, o -OR^{7} en la que R^{7} es un grupo protector del hidroxilo, como el definido en la reivindicación 15;

\newpage

R^{4a} es -CO(alquilo C_{1}-C_{4}) o -(CO)H;

n es 2 ó 3; y

Q es un grupo lábil seleccionado de halógeno, mesilato y tosilato.