JPH0797389A - 血小板凝集阻害物質ｐｉ−２９０ - Google Patents
血小板凝集阻害物質ｐｉ−２９０Info
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- JPH0797389A JPH0797389A JP4225386A JP22538692A JPH0797389A JP H0797389 A JPH0797389 A JP H0797389A JP 4225386 A JP4225386 A JP 4225386A JP 22538692 A JP22538692 A JP 22538692A JP H0797389 A JPH0797389 A JP H0797389A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 血小板凝集阻害作用を有する新規な生理活性
物質を提供すること。 【構成】 下記物理化学的性状を示す血小板凝集阻害物
質ＰＩ−２９０ （ａ）元素分析値（Ｃ15Ｈ19ＮＯ3として計算）： 実測値（％）Ｃ ６８．２４，Ｈ ７．８８，Ｎ ５．
４５，Ｏ １８．４３ 理論値（％）Ｃ ６８．９７，Ｈ ７．２８，Ｎ ５．
３６，Ｏ １８．３９ （ｂ）質量分析値：ＥＩマススペクトル ｍ／ｚ ２６
１（Ｍ+） （ｃ）分子量：２６１ （ｄ）融点：１４３〜１４８℃ （ｅ）比旋光度： ［α］D 25：＋１８１．０５°（ｃ＝０．０２４，ＣＨ
Ｃｌ3） （ｆ）紫外線吸収スペクトル：λmax ２１５ｎｍ（ε
＝５９００）
物質を提供すること。 【構成】 下記物理化学的性状を示す血小板凝集阻害物
質ＰＩ−２９０ （ａ）元素分析値（Ｃ15Ｈ19ＮＯ3として計算）： 実測値（％）Ｃ ６８．２４，Ｈ ７．８８，Ｎ ５．
４５，Ｏ １８．４３ 理論値（％）Ｃ ６８．９７，Ｈ ７．２８，Ｎ ５．
３６，Ｏ １８．３９ （ｂ）質量分析値：ＥＩマススペクトル ｍ／ｚ ２６
１（Ｍ+） （ｃ）分子量：２６１ （ｄ）融点：１４３〜１４８℃ （ｅ）比旋光度： ［α］D 25：＋１８１．０５°（ｃ＝０．０２４，ＣＨ
Ｃｌ3） （ｆ）紫外線吸収スペクトル：λmax ２１５ｎｍ（ε
＝５９００）
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、血小板凝集抑制作用を
有する新規生理活性物質に関する。
有する新規生理活性物質に関する。
【０００２】
【従来の技術】本発明の生理活性物質に物理化学的性状
が近似で血小板凝集阻害作用を有する化合物は知られて
いない。
が近似で血小板凝集阻害作用を有する化合物は知られて
いない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、血小
板凝集阻害作用を有する新規な生理活性物質を提供する
ことにある。
板凝集阻害作用を有する新規な生理活性物質を提供する
ことにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、前記目的
の達成のために多数の菌株を土壌より分離し、その菌株
の培養物について種々検討した結果、ある種の菌株の生
産する化合物が強い血小板凝集抑制作用を有することを
見いだし、本発明を完成するに至った。
の達成のために多数の菌株を土壌より分離し、その菌株
の培養物について種々検討した結果、ある種の菌株の生
産する化合物が強い血小板凝集抑制作用を有することを
見いだし、本発明を完成するに至った。
【０００５】すなわち、本発明は、物理化学的性状が、 （ａ）元素分析値（Ｃ15Ｈ19ＮＯ3として計算）： 実測値（％）Ｃ ６８．２４，Ｈ ７．８８，Ｎ ５．
４５，Ｏ １８．４３ 理論値（％）Ｃ ６８．９７，Ｈ ７．２８，Ｎ ５．
３６，Ｏ １８．３９ （ｂ）質量分析値：ＥＩマススペクトル ｍ／ｚ ２６
１（Ｍ+） （ｃ）分子量：２６１ （ｄ）融点：１４３〜１４８℃ （ｅ）比旋光度： ［α］D 25：＋１８１．０５°（ｃ＝０．０２４，ＣＨ
Ｃｌ3） （ｆ）紫外線吸収スペクトル：λmax ２１５ｎｍ（ε
＝５９００） である化合物である（以下、これをＰＩ−２９０と称す
る。）。
４５，Ｏ １８．４３ 理論値（％）Ｃ ６８．９７，Ｈ ７．２８，Ｎ ５．
３６，Ｏ １８．３９ （ｂ）質量分析値：ＥＩマススペクトル ｍ／ｚ ２６
１（Ｍ+） （ｃ）分子量：２６１ （ｄ）融点：１４３〜１４８℃ （ｅ）比旋光度： ［α］D 25：＋１８１．０５°（ｃ＝０．０２４，ＣＨ
Ｃｌ3） （ｆ）紫外線吸収スペクトル：λmax ２１５ｎｍ（ε
＝５９００） である化合物である（以下、これをＰＩ−２９０と称す
る。）。
【０００６】ＰＩ−２９０を生産する菌株は、微生物の
名称「Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ Ｋ−０
７１７」および微生物寄託番号「微工研菌寄第１３０８
５号（ＦＥＲＭ Ｐ−１３０８５）」として、工業技術
院微生物工業技術研究所に寄託されている。
名称「Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ Ｋ−０
７１７」および微生物寄託番号「微工研菌寄第１３０８
５号（ＦＥＲＭ Ｐ−１３０８５）」として、工業技術
院微生物工業技術研究所に寄託されている。
【０００７】この菌株の菌学的性状を以下に示す。 （１）形態 本菌株は、バレイショ・ブドウ糖寒天培地、オートミー
ル寒天培地、ＹｐＳｓ寒天培地、麦芽エキス寒天培地等
で良好に生育し、また胞子の形成も良好である。オート
ミール寒天培地およびＹｐＳｓ寒天培地上ではコロニー
の表面に多数の透明な分泌液を生産する。本菌株がオー
トミール寒天培地上、２０℃、１４日間の培養で形成し
たコロニーを光学顕微鏡で観察すると、菌糸は隔壁を有
し高度に分岐しており、菌糸から直接に分生子形成細胞
が生じるか、あるいは菌糸の側面に輪生した球状から棍
棒状の膨潤細胞または短い枝などから多数の分生子形成
細胞が生じ、直径２０〜６０μｍの集塊状を呈する。分
生子形成細胞の基部は球状からフラスコ状に膨らみ
（２．８〜１２．０×２．２〜５．０μｍ）、先端から
幅１μｍ、多くは長さが５μｍ程度、まれに１５μｍ程
度までジグザグ伸長し、各曲部の小歯状突起先端にシン
ポジオ型分生子を形成する。分生子は透明、集合体では
わずかに黄色を呈し、表面は平滑、球形から亜球形まれ
に長楕円形を呈する。大きさは２．８〜５．０×２．２
〜５．０μｍである。厚膜胞子の形成は認められない。
ル寒天培地、ＹｐＳｓ寒天培地、麦芽エキス寒天培地等
で良好に生育し、また胞子の形成も良好である。オート
ミール寒天培地およびＹｐＳｓ寒天培地上ではコロニー
の表面に多数の透明な分泌液を生産する。本菌株がオー
トミール寒天培地上、２０℃、１４日間の培養で形成し
たコロニーを光学顕微鏡で観察すると、菌糸は隔壁を有
し高度に分岐しており、菌糸から直接に分生子形成細胞
が生じるか、あるいは菌糸の側面に輪生した球状から棍
棒状の膨潤細胞または短い枝などから多数の分生子形成
細胞が生じ、直径２０〜６０μｍの集塊状を呈する。分
生子形成細胞の基部は球状からフラスコ状に膨らみ
（２．８〜１２．０×２．２〜５．０μｍ）、先端から
幅１μｍ、多くは長さが５μｍ程度、まれに１５μｍ程
度までジグザグ伸長し、各曲部の小歯状突起先端にシン
ポジオ型分生子を形成する。分生子は透明、集合体では
わずかに黄色を呈し、表面は平滑、球形から亜球形まれ
に長楕円形を呈する。大きさは２．８〜５．０×２．２
〜５．０μｍである。厚膜胞子の形成は認められない。
【０００８】なお、培養を３週間に延長したが有性生殖
器官の形成は認められなかった。
器官の形成は認められなかった。
【０００９】（２）培地上での生育状態 各種培地上で、２０℃、１４日間培養した場合の肉眼的
観察結果を次の表１に示した。なお色の表示は日本規格
協会、ＪＩＳ色名帳（１９８５年）の系統色名を引用し
た。
観察結果を次の表１に示した。なお色の表示は日本規格
協会、ＪＩＳ色名帳（１９８５年）の系統色名を引用し
た。
【００１０】
【表１】
【００１１】
【００１２】（３）生理的性質 生育温度範囲および最適温度 本菌株はｐＨ６．０のサブロー液体培地において、１１
〜３２℃の範囲で生育し、最適温度は２５〜２８℃であ
る。 生育ｐＨ範囲および最適ｐＨ 本菌株はＹｐＳｓ液体培地中２６℃においてｐＨ３〜１
０の範囲で生育し、最適ｐＨは７〜８である。 （４）好気性，嫌気性の区別；好気性
〜３２℃の範囲で生育し、最適温度は２５〜２８℃であ
る。 生育ｐＨ範囲および最適ｐＨ 本菌株はＹｐＳｓ液体培地中２６℃においてｐＨ３〜１
０の範囲で生育し、最適ｐＨは７〜８である。 （４）好気性，嫌気性の区別；好気性
【００１３】以上の形態的特徴および培養上の性状か
ら、本菌株が不完全菌亜門中の、Ｂｅａｕｖｅｒｉａ属
の１菌種であることが明らかであり、宇田川俊一，椿啓
介編『菌類図鑑』（１９７８年），Ｇ．Ｓ．ＤＥ ＨＯ
ＯＧ，Ｓｔｕｄｉｅｓ ｉｎＭｙｃｏｌｏｇｙ，Ｎｏ．
１，第１〜４１頁（１９７２年）に報告されている多く
の既知菌株と比較検討した。その結果、本菌株はＢｅａ
ｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ（Ｂａｌｓ．）Ｖｕｉ
ｌｌに最も近い性状を示すことが明かとなり、本菌株を
「Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ Ｋ−０７１
７」と命名した。
ら、本菌株が不完全菌亜門中の、Ｂｅａｕｖｅｒｉａ属
の１菌種であることが明らかであり、宇田川俊一，椿啓
介編『菌類図鑑』（１９７８年），Ｇ．Ｓ．ＤＥ ＨＯ
ＯＧ，Ｓｔｕｄｉｅｓ ｉｎＭｙｃｏｌｏｇｙ，Ｎｏ．
１，第１〜４１頁（１９７２年）に報告されている多く
の既知菌株と比較検討した。その結果、本菌株はＢｅａ
ｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ（Ｂａｌｓ．）Ｖｕｉ
ｌｌに最も近い性状を示すことが明かとなり、本菌株を
「Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ Ｋ−０７１
７」と命名した。
【００１４】ＰＩ−２９０の生産は大略一般の発酵生産
物を生産する場合に準じ、各種の栄養物を含む培地でＢ
ｅａｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ Ｋ−０７１７株
を好気的条件下で培養することにより行なう。
物を生産する場合に準じ、各種の栄養物を含む培地でＢ
ｅａｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ Ｋ−０７１７株
を好気的条件下で培養することにより行なう。
【００１５】培地は主として液体培地を用い、炭素源と
してはグルコース、シュウクロース、廃糖密、スターチ
などを単独または混合して用いる。窒素源としては肉エ
キス、オートミール、酵母エキス、大豆粉、ポリペプト
ンなどを単独または混合して用いる。その他、本菌株の
生育を助けＰＩ−２９０の生産を促進する有機物および
無機塩を必要により添加することができる。消泡剤とし
ては、アデカノール、シリコンなどを用いることができ
る。
してはグルコース、シュウクロース、廃糖密、スターチ
などを単独または混合して用いる。窒素源としては肉エ
キス、オートミール、酵母エキス、大豆粉、ポリペプト
ンなどを単独または混合して用いる。その他、本菌株の
生育を助けＰＩ−２９０の生産を促進する有機物および
無機塩を必要により添加することができる。消泡剤とし
ては、アデカノール、シリコンなどを用いることができ
る。
【００１６】培養方法は振盪培養、通気攪拌培養などの
好気的培養が適しており、ｐＨ３〜１０、１１〜３２℃
で３〜６日間、望ましくはｐＨ７〜８、２５〜２８℃で
５日間培養する。
好気的培養が適しており、ｐＨ３〜１０、１１〜３２℃
で３〜６日間、望ましくはｐＨ７〜８、２５〜２８℃で
５日間培養する。
【００１７】この培養により生産されたＰＩ−２９０を
単離するには発酵生産物を採取する一般的な方法に準じ
て行えばよい。たとえば次の方法が効果的である。
単離するには発酵生産物を採取する一般的な方法に準じ
て行えばよい。たとえば次の方法が効果的である。
【００１８】すなわち、培養終了後、培養液をアセトン
などの有機溶媒で抽出する。次いで、この抽出液を濃縮
後、酢酸エチル、ベンゼン、クロロホルムなどの非水溶
性有機溶媒に転溶し、これを濃縮してシロップ状とす
る。
などの有機溶媒で抽出する。次いで、この抽出液を濃縮
後、酢酸エチル、ベンゼン、クロロホルムなどの非水溶
性有機溶媒に転溶し、これを濃縮してシロップ状とす
る。
【００１９】このシロップを再度ベンゼン、酢酸エチ
ル、アセトン、メタノール、クロロホルムなどの有機溶
媒に溶解し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー、ゲ
ル濾過カラムクロマトグラフィーおよび高速液体カラム
クロマトグラフィーに付すことによりＰＩ−２９０を精
製単離することができる。
ル、アセトン、メタノール、クロロホルムなどの有機溶
媒に溶解し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー、ゲ
ル濾過カラムクロマトグラフィーおよび高速液体カラム
クロマトグラフィーに付すことによりＰＩ−２９０を精
製単離することができる。
【００２０】以上の精製法によって得られたＰＩ−２９
０の理化学的性質を以下に示す。 （ａ）元素分析値（Ｃ15Ｈ19ＮＯ3として計算）： 実測値（％）Ｃ ６８．２４，Ｈ ７．８８，Ｎ ５．
４５，Ｏ １８．４３ 理論値（％）Ｃ ６８．９７，Ｈ ７．２８，Ｎ ５．
３６，Ｏ １８．３９ （ｂ）質量分析値：ＥＩマススペクトル ｍ／ｚ ２６
１（Ｍ+） （ｃ）分子量：２６１ （ｄ）融点：１４３〜１４８℃ （ｅ）比旋光度： ［α］D 25：＋１８１．０５°（ｃ＝０．０２４，ＣＨ
Ｃｌ3） （ｆ）紫外線吸収スペクトル：λmax ２１５ｎｍ（ε
＝５９００） （ｇ）赤外線吸収スペクトル：Ｎｅａｔ法で測定した結
果を図１に示す。 （ｈ） 1Ｈ−ＮＭＲスペクトル：ＣＤＣｌ3中、４００
ＭＨｚで測定した結果を図２に示す。 （ｉ）13Ｃ−ＮＭＲスペクトル：ＣＤＣｌ3中、１００
ＭＨｚで測定した結果を図３に示す。 （ｊ）溶剤に対する溶解性： クロロホルム、酢酸エチルに可溶 ｎ−ヘキサン、ベンゼンに難溶 水に不溶 （ｋ）呈色反応： 陽性：Ｉ2，ニンヒドリン 陰性：Ｈ2ＳＯ4，ＦｅＣｌ3 （ｌ）塩基性、酸性、中性の区別：中性
０の理化学的性質を以下に示す。 （ａ）元素分析値（Ｃ15Ｈ19ＮＯ3として計算）： 実測値（％）Ｃ ６８．２４，Ｈ ７．８８，Ｎ ５．
４５，Ｏ １８．４３ 理論値（％）Ｃ ６８．９７，Ｈ ７．２８，Ｎ ５．
３６，Ｏ １８．３９ （ｂ）質量分析値：ＥＩマススペクトル ｍ／ｚ ２６
１（Ｍ+） （ｃ）分子量：２６１ （ｄ）融点：１４３〜１４８℃ （ｅ）比旋光度： ［α］D 25：＋１８１．０５°（ｃ＝０．０２４，ＣＨ
Ｃｌ3） （ｆ）紫外線吸収スペクトル：λmax ２１５ｎｍ（ε
＝５９００） （ｇ）赤外線吸収スペクトル：Ｎｅａｔ法で測定した結
果を図１に示す。 （ｈ） 1Ｈ−ＮＭＲスペクトル：ＣＤＣｌ3中、４００
ＭＨｚで測定した結果を図２に示す。 （ｉ）13Ｃ−ＮＭＲスペクトル：ＣＤＣｌ3中、１００
ＭＨｚで測定した結果を図３に示す。 （ｊ）溶剤に対する溶解性： クロロホルム、酢酸エチルに可溶 ｎ−ヘキサン、ベンゼンに難溶 水に不溶 （ｋ）呈色反応： 陽性：Ｉ2，ニンヒドリン 陰性：Ｈ2ＳＯ4，ＦｅＣｌ3 （ｌ）塩基性、酸性、中性の区別：中性
【００２１】
【発明の効果】本発明の化合物は、アラキドン酸、アデ
ノシンニリン酸、コラーゲンによる血小板凝集に対し優
れた抑制作用を有するので、血栓症などの治療薬として
有用である。
ノシンニリン酸、コラーゲンによる血小板凝集に対し優
れた抑制作用を有するので、血栓症などの治療薬として
有用である。
【００２２】
【実施例】以下、実施例および試験例を挙げて本発明を
具体的に説明する。
具体的に説明する。
【００２３】実施例 （１）３００ｍｌ容三角フラスコを用いて、１００ｍｌ
当りグルコ−ス２ｇ、ポリペプトン０．５ｇ、酵母エキ
ス０．２ｇ、リン酸一カリウム０．１ｇ、硫酸マグネシ
ウム０．０５ｇの無菌液体培地にＢｅａｕｖｅｒｉａ
ｂａｓｓｉａｎａＫ−０７１７を接種し、２６℃で１２
０時間振とう培養した。
当りグルコ−ス２ｇ、ポリペプトン０．５ｇ、酵母エキ
ス０．２ｇ、リン酸一カリウム０．１ｇ、硫酸マグネシ
ウム０．０５ｇの無菌液体培地にＢｅａｕｖｅｒｉａ
ｂａｓｓｉａｎａＫ−０７１７を接種し、２６℃で１２
０時間振とう培養した。
【００２４】培養終了後、培養液１ｌをアセトン３００
ｍｌで２回抽出し、抽出液を減圧溜去後酢酸エチル２５
０ｍｌで２回抽出した。この酢酸エチル画分を無水硫酸
ナトリウムで脱水後、濃縮乾固し、褐色の油状物質３０
０ｍｇを得た。 （２）前項（１）で得られた油状物質をクロロホルム３
ｍｌに溶解し、薄層板［キーセルゲル６０ Ｆ254（商
品名、メルク社製），２０×２０ｃｍ，厚さ０．５ｍ
ｍ］１枚につき５００ｕｌを吸着させた。これをクロロ
ホルム−メタノール（９９：１）の混合溶媒で展開しＲ
ｆ値０．７６〜０．８７の画分をかきとり、かきとった
シリカゲル粉末を酢酸エチルで抽出し、抽出液を濾過後
減圧乾固し７．３ｍｇを得た。 （３）前項の油状物質７．３ｍｇをエタノール−ｎ−ヘ
キサン（１：１）の混合溶媒に溶解し、以下の条件で行
った高速液体カラムクロマトグラフィーの試料とした。
ｍｌで２回抽出し、抽出液を減圧溜去後酢酸エチル２５
０ｍｌで２回抽出した。この酢酸エチル画分を無水硫酸
ナトリウムで脱水後、濃縮乾固し、褐色の油状物質３０
０ｍｇを得た。 （２）前項（１）で得られた油状物質をクロロホルム３
ｍｌに溶解し、薄層板［キーセルゲル６０ Ｆ254（商
品名、メルク社製），２０×２０ｃｍ，厚さ０．５ｍ
ｍ］１枚につき５００ｕｌを吸着させた。これをクロロ
ホルム−メタノール（９９：１）の混合溶媒で展開しＲ
ｆ値０．７６〜０．８７の画分をかきとり、かきとった
シリカゲル粉末を酢酸エチルで抽出し、抽出液を濾過後
減圧乾固し７．３ｍｇを得た。 （３）前項の油状物質７．３ｍｇをエタノール−ｎ−ヘ
キサン（１：１）の混合溶媒に溶解し、以下の条件で行
った高速液体カラムクロマトグラフィーの試料とした。
【００２５】カラムサイズ １０φ×２５０ｍｍ 担体 センシューパックシリカゲル（センシ
ュー科学社製） 溶媒組成 ７．５％エタノール，９２．５％ｎ−
ヘキサン 流速 ４．５ｍｌ／ｍｉｎ 温度 ２５℃ 検出波長 ２１５ｎｍ 装置 日本分光 ８８０−ＰＵ 保持時間９．０〜９．５分の画分を分取し、３．０ｍｇ
のＰＩ−２９０を得た。
ュー科学社製） 溶媒組成 ７．５％エタノール，９２．５％ｎ−
ヘキサン 流速 ４．５ｍｌ／ｍｉｎ 温度 ２５℃ 検出波長 ２１５ｎｍ 装置 日本分光 ８８０−ＰＵ 保持時間９．０〜９．５分の画分を分取し、３．０ｍｇ
のＰＩ−２９０を得た。
【００２６】試験例 （血小板凝集抑制作用） （１）血小板の調製法 体重２．０〜２．５ｋｇの雄家兎の総頸動脈より採血
し、血液量の１０分の１容の３．８％クエン酸ナトリウ
ム溶液を加えて軽く混和し、１３００×ｇで２分間遠心
分離した上清を多血小板血漿（以下、ＰＲＰという）と
した。沈渣を更に１６００×ｇで１０分間遠心分離して
得られた上清を乏血小板血漿（以下、ＰＰＰという）と
した。 （２）凝集惹起剤の調製法 あらかじめアラキドン酸（シグマ社製）はエタノール
で、アデノシンニリン酸またはコラーゲン（京都第一化
学社製、アグリバック）は生理食塩水で所要濃度に希釈
し、前記成分を個別に含む凝集惹起剤を調製した。 （３）血小板凝集阻害活性測定法 ２００μｌのＰＰＰとの吸光度の差を一定にした後、メ
タノールにて所要濃度に調製した本発明化合物をＰＲＰ
に加え、攪拌した。対照はメタノールのみを使用した。
次いで、上記凝集惹起剤（最終濃度：アラキドン酸の場
合０．４８ｍＭ，アデノシンニリン酸の場合５μＭ，コ
ラーゲンの場合４．８μｇ／ｍｌ）を添加し、吸光度の
変化を二光バイオサイエンス社プレイトレットアグリゲ
ーショントレーサー ４Ａ型血小板凝集計を用い、ボー
ン等の比濁法［Ｂｏｒｎ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，第１
６８巻，第１７８ページ（１９６８年）］により測定
し、本発明化合物の５０％血小板凝集阻害濃度（ＩＣ50
値）を求めた。
し、血液量の１０分の１容の３．８％クエン酸ナトリウ
ム溶液を加えて軽く混和し、１３００×ｇで２分間遠心
分離した上清を多血小板血漿（以下、ＰＲＰという）と
した。沈渣を更に１６００×ｇで１０分間遠心分離して
得られた上清を乏血小板血漿（以下、ＰＰＰという）と
した。 （２）凝集惹起剤の調製法 あらかじめアラキドン酸（シグマ社製）はエタノール
で、アデノシンニリン酸またはコラーゲン（京都第一化
学社製、アグリバック）は生理食塩水で所要濃度に希釈
し、前記成分を個別に含む凝集惹起剤を調製した。 （３）血小板凝集阻害活性測定法 ２００μｌのＰＰＰとの吸光度の差を一定にした後、メ
タノールにて所要濃度に調製した本発明化合物をＰＲＰ
に加え、攪拌した。対照はメタノールのみを使用した。
次いで、上記凝集惹起剤（最終濃度：アラキドン酸の場
合０．４８ｍＭ，アデノシンニリン酸の場合５μＭ，コ
ラーゲンの場合４．８μｇ／ｍｌ）を添加し、吸光度の
変化を二光バイオサイエンス社プレイトレットアグリゲ
ーショントレーサー ４Ａ型血小板凝集計を用い、ボー
ン等の比濁法［Ｂｏｒｎ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，第１
６８巻，第１７８ページ（１９６８年）］により測定
し、本発明化合物の５０％血小板凝集阻害濃度（ＩＣ50
値）を求めた。
【００２７】その結果を表２に示した。
【００２８】
【表２】
【００２９】
【図１】Ｎｅａｔ法で測定したＰＩ−２９０の赤外線吸
収スペクトルを示す。
収スペクトルを示す。
【図２】ＣＤＣｌ3中、４００ＭＨｚで測定したＰＩ−
２９０の1Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
２９０の1Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【図３】ＣＤＣｌ3中、１００ＭＨｚで測定したＰＩ−
２９０の13Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。
２９０の13Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 何 璧梅 中華人民共和国四川省成都市杉板橋路９号 国家医薬管 理局四川抗菌素工業研究所 内 (72)発明者 鏡園 輝美 東京都豊島区高田３丁目24番１号 大正製 薬株式会社内 (72)発明者 陳 曽湘 中華人民共和国四川省成都市杉板橋路９号 国家医薬管 理局四川抗菌素工業研究所 内 (72)発明者 岸本 真理 東京都豊島区高田３丁目24番１号 大正製 薬株式会社内 (72)発明者 花田 和紀 東京都豊島区高田３丁目24番１号 大正製 薬株式会社内
Claims (1)
- 【請求項１】下記物理化学的性状を示す血小板凝集阻害
物質ＰＩ−２９０ （ａ）元素分析値（Ｃ15Ｈ19ＮＯ3として計算）： 実測値（％）Ｃ ６８．２４，Ｈ ７．８８，Ｎ ５．
４５，Ｏ １８．４３ 理論値（％）Ｃ ６８．９７，Ｈ ７．２８，Ｎ ５．
３６，Ｏ １８．３９ （ｂ）質量分析値：ＥＩマススペクトル ｍ／ｚ ２６
１（Ｍ+） （ｃ）分子量：２６１ （ｄ）融点：１４３〜１４８℃ （ｅ）比旋光度： ［α］D 25：＋１８１．０５°（ｃ＝０．０２４，ＣＨ
Ｃｌ3） （ｆ）紫外線吸収スペクトル：λmax ２１５ｎｍ（ε
＝５９００）
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4225386A JPH0797389A (ja) | 1992-08-25 | 1992-08-25 | 血小板凝集阻害物質ｐｉ−２９０ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4225386A JPH0797389A (ja) | 1992-08-25 | 1992-08-25 | 血小板凝集阻害物質ｐｉ−２９０ |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0797389A true JPH0797389A (ja) | 1995-04-11 |
Family
ID=16828549
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4225386A Pending JPH0797389A (ja) | 1992-08-25 | 1992-08-25 | 血小板凝集阻害物質ｐｉ−２９０ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0797389A (ja) |
-
1992
- 1992-08-25 JP JP4225386A patent/JPH0797389A/ja active Pending
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