RS66304B1 - Modifikovani nukleosidi, nukleotidi i nukleinske kiseline i njihove primene - Google Patents

Modifikovani nukleosidi, nukleotidi i nukleinske kiseline i njihove primene

Info

Publication number
RS66304B1
RS66304B1 RS20241417A RSP20241417A RS66304B1 RS 66304 B1 RS66304 B1 RS 66304B1 RS 20241417 A RS20241417 A RS 20241417A RS P20241417 A RSP20241417 A RS P20241417A RS 66304 B1 RS66304 B1 RS 66304B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
modified
nucleotides
cell
mrna
acid
Prior art date
Application number
RS20241417A
Other languages
English (en)
Inventor
Jason P Schrumm
Suhaib Siddiqi
Kenechi Ejebe
Original Assignee
Modernatx Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=45893552&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS66304(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Modernatx Inc filed Critical Modernatx Inc
Publication of RS66304B1 publication Critical patent/RS66304B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
    • A61K48/0066—Manipulation of the nucleic acid to modify its expression pattern, e.g. enhance its duration of expression, achieved by the presence of particular introns in the delivered nucleic acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
    • C07H21/02—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with ribosyl as saccharide radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2887—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD20
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/102—Mutagenizing nucleic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1136—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against growth factors, growth regulators, cytokines, lymphokines or hormones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1138—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against receptors or cell surface proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/67—General methods for enhancing the expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
    • G01N33/559—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody through a gel, e.g. Ouchterlony technique
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/33—Chemical structure of the base
    • C12N2310/334—Modified C
    • C12N2310/3341—5-Methylcytosine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/33—Chemical structure of the base
    • C12N2310/335—Modified T or U

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Opis
OSNOV PRONALASKA
[0001] RNK koje se javljaju u prirodi se sintetišu iz četiri osnovna ribonukleotida: ATP, CTP, UTP i GTP, ali mogu da sadrže i post-transkripciono modifikovane nukleotide. Dalje, oko stotinu različitih nukleozidnih modifikacija je identifikovano u RNK (Rozenski, J, Crain, P, and McCloskey, J. (1999). The RNA Modification Database: 1999 update. Nucl Acids Res 27: 196-197). Međutim, nije jasna uloga nukleozidnih modifikacija u imunostimulatornom potencijalu, stabilnosti i efikasnosti translacije RNK, kao i posledične koristi od njih za povećanje ekspresije proteina i proizvodnju terapeutika.
[0002] U vezi sa prethodnim metodologijama kojima se utiče na ekspresiju proteina postoje brojni problemi. Na primer, heterologu dezoksiribonukleinsku kiselinu (DNK) koja se uvodi u ćeliju, mogu da naslede ćerke-ćelije (bez obzira na to da li se heterologa DNK integrisala u hromozom) ili potomci. Uvedena DNK može da se integriše u genomsku DNK ćelijedomaćina sa određenom učestalošću, što dovodi do izmena i/ili oštećenja genomske DNK ćelije-domaćina. Osim toga, neophodno je da se odigra više koraka pre nego što se protein napravi. Kada je već ušla u ćeliju, DNK mora da se transportuje u nukleus gde se transkribuje u RNK. RNK transkribovana sa DNK mora zatim da uđe u citoplazmu gde se translatira u protein. Usled toga što su neophodni višestruki koraci obrade, javlja se odlaganje pre nego što se generiše protein od interesa. Dalje, u ćelijama se teško postiže ekspresija DNK; često DNK uđe u ćelije, ali se ne eksprimira ili se ne eksprimira brzinom ili u koncentraciji koja ima smisla. Ovo naročito može da predstavlja problem kada se DNK uvodi u ćelije kao što su primarne ćelije ili modifikovane ćelijske linije.
[0003] U stanju tehnike postoji potreba za biološkim modalitetima koji bi se bavili modulacijom intracelularne translacije nukleinskih kiselina.
WO 2007/024708 A2 se odnosi na RNK koja sadrži određene modifikovane nukleozide, posebno pseudouridin, za koji je utvrđeno da smanjuje imunogenost RNK.
KRATAK OPIS PRONALASKA
[0004] Predmetni pronalazak obezbeđuje sintetisanje iRNK, koji obuhvata 1-metilpseudouridin za primenu u lečenju, pri čemu je 100% nukleotida koji sadrže uracil u iRNK zamenjeno nukleotidima koji sadrže N1-metil-pseudouridin.
[0005] Ostali aspekti pronalaska su navedeni u patentnim zahtevima.
[0006] Modifikovani nukleozidi, modifikovani nukleotidi i modifikovane nukleinske kiseline mogu da ispolje smanjeni urođeni imunski odgovor kada se uvedu u populaciju ćelija, kako in vivo tako i ex vivo. Ovi modifikovani nukleozidi, modifikovani nukleotidi i modifikovane nukleinske kiseline mogu da poremete vezivanje sa nukleinskom kiselinom, partnera za interakciju sa velikim žljebom. Zbog smanjene imunogenosti i smanjenja interakcija sa velikim žljebom, ovi modifikovani nukleozidi, modifikovani nukleotidi i modifikovane nukleinske kiseline mogu da budu efikasnije tokom proizvodnje proteina od, npr., nemodifikovanih nukleinskih kiselina.
[0007] 1-metil-pseudoridin može da poremeti vezivanje vezujućeg partnera velikog žljeba sa iRNK.
[008] Predmetni prikaz se dalje odnosi na farmaceutske kompozicije koje imaju
[009] Osim ako nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini koji se ovde koriste imaju isto značenje koje obično podrazumeva prosečan stručnjak u oblasti kojoj ovaj pronalazak pripada. Ovde su opisani postupci i materijali; drugi pogodni postupci i materijali poznati u stanju tehnike takođe mogu da se koriste. Materijali, metode i primeri su samo ilustrativni i nije predviđeno da budu ograničavajući. U slučaju konflikta, predmetna specifikacija koja uključuje definicije će imati prevagu.
[0010] Druge karakteristike i prednosti pronalaska proizilaze iz dealjnog opisa i slika datih u nastavku, kao i iz patentnog.
KRATAK OPIS CRTEŽA
[0011]
SL. 1A i 1B prikazuju nedenaturišuće agarozne gelove za svaku in vitro transkribovanu modifikovanu RNK.
SL. 2A i 2B prikazuju enzimski imunosorbentni test (ELISA) za humani faktor stimulacije kolonija granulocita (G-CSF) in vitro transfektovanih ćelija Human Keratinocyte, gde svaka naznačena modRNK kodira humani G-CSF, a linija označava nivo zasićenja maksimalne detektabilne granice izlučenog G-CSF u testu.
SL. 3A-N prikazuju linijske grafikone serije enzimskih imunosorbentnih testova (ELISA) za humani faktor stimulacije kolonija granulocita (G-CSF) izlučen iz in vitro transfektovanih ćelija Human Keratinocyte u različitim vremenskim tačkama i sa svakom naznačenom humanom G-CSF-kodirajućom modRNK u naznačenim dozama. Linija označava nivo zasićenja maksimalne detektabilne granice izlučenog G-CSF u testu.
SL. 4A i 4B prikazuju grafikone sa stubićima serije enzimskih imunosorbentnih testova (ELISA) za endogeni ćelijski humani faktor nekroze tumora- α (TNF- α) izlučen iz in vitro transfektovanih ćelija Human Keratinocyte posle 24 sata, gde se doza svake naznačene hu-G-CSF-kodirajuće modRNK povećava.
SL. 4C i 4D prikazuju grafikone sa stubićima serije enzimskih imunosorbentnih testova (ELISA) za endogeni ćelijski humani interferon-β (IFN-β) izlučen iz in vitro transfektovanih ćelija Human Keratinocyte posle 24 sata, gde se doza svake naznačene hu-G-CSF-kodirajuće modRNK povećava.
SL. 4E i 4F prikazuju grafikone sa stubićima serije enzimskih imunosorbentnih testova (ELISA) za humani G-CSF izlučen iz in vitro transfektovanih ćelija Human Keratinocyte na 24 sata, gde se doza svake naznačene hu-G-CSF-kodirajuće modRNK povećavala.
SL. 5A je tabela koja prikazuje rezultate enzimskog imunosorbentnog testa (ELISA) za humani G-CSF sekretovan iz in vitro transfektovanih ćelija Human Keratinocyte koje su uzorkovane iz pojedinačnih bunarčića sa ko-kulturom u ploči za kulturu tkiva sa 24 bunarčića 42 sata nakon transfekcije sa po 750ng svake naznačene hu-G-CSF-kodirajuće modRNK.
SL. 5B prikazuje sliku agaroznog gela RT-PCR proizvoda za hu-G-CSF modRNK iz ćelijskih ekstrakata ko-kulture, 42 sata nakon transfekcije sloja hranilica humanih keratinocita sa hu-G-CSG modRNK i netransfektovanih Kasumi-1 i KG-1 ćelija gajenih na umetku.
SL. 5C i 5D prikazuju grafikone rezultata za test ćelijske proliferacije indukovane pomoću hu-G-CSF-modRNK za Kasumi-1 (SL. 5C) i KG-1 (SL. 5D) ćelije, koji su normalizovani u odnosu na netransfektovane ćelije. Naznačen je identitet Hu-G-CSF modRNK koja je transfektovana u ćelije hranilice humanih keratinocita.
SL. 6A-L prikazuju grafikone sa spektrima UV apsorbance za primere modRNK molekula koji inkorporiraju navedeni modifikovani nukleotid.
DETALJAN OPIS
[0012] iRNK za primenu predmetnog pronalaska prikazuje smanjen urođeni imunski odgovor kada se uvede u populaciju ćelija.1-metil-pseudouridin ima -NH(CH)- grupu na strani gde se nalazi veliki žljeb koja prekida interakcije sa vezujućim partnerima velikog žljeba, koje inače dovode do urođenih imunskih odgovora.
[0013] U principu, egzogene nemodifikovane nukleinske kiseline, naročito virusne nukleinske kiseline, kada se uvedu u ćeliju, indukuju urođeni imunski odgovor koji dovodi do proizvodnje citokina i interferona (IFN) i ćelijske smrti. Međutim, od velikog je interesa za terpeutike da se iRNK isporuči unutar ćelije in vivo, tako da dovede do unutarćelijske translacije iRNK i proizvodnje kodiranog proteina. Od naročitog značaja je isporučivanje i funkcionisanje iRNK, pošto su nukleinske kiseline koje se odlikuju integracijom u ciljnu ćeliju u principu neprecizne po svom nivou ekspresije, mogu oštećujuće da se prenose na ćelije potomke i susedne ćelije, i nose sa sobom značajan rizik od izazivanja mutacija. Ovde su delimično date iRNK koje kodiraju korisne polipeptide sposobne da modulišu funkciju ćelije i/ili aktivnost, kao i metode za pravljenje i korišćenje. Kao što je ovde opisano, ove iRNK su sposobne da smanje urođenu imunsku aktivnost populacije ćelija u koju su uvedene, čime se povećava efikasnost proizvodnje proteina u toj ćelijskoj populaciji. Dalje, opisana je jedna ili više dodatnih korisnih aktivnosti i/ili svojstva iRNK prema predmetnom prikazu.
[0014] Dalje, modifikacije velikog žljeba mogu da omoguće izmene, npr. smanjenje interakcije modifikovanih nukleozida, modifikovanih nukleotida i modifikovanih nukleinskih kiselina sa vezujućim partnerom velikog žljeba.
[0015] Shodno tome, u prvom aspektu, predmetni prikaz daje iRNK za primenu u skladu sa priloženim patentnim zahtevima.
[0016] iRNK može da obuhvata dodatni nukleotid koji sadrži hemijske modifikacije, pri čemu nukleotid može da ima izmenjeno vezivanje sa interagujućim, npr. vezujućim partnerima glavnog žljeba.
[0017] U nekim primerima izvođenja, hemijske modifikacije su locirane na strani gde se nalaze veliki žljeb nukleobaze, i pri čemu hemijske modifikacije mogu da uključuju zamenu ili supstituciju atoma citidinske nukleobaze aminom, SH, alkil (npr., metil ili etil), ili halo (npr., hloro ili fluoro) grupom.
[0018] U nekim primerima izvođenja, hemijske modifikacije su locirane na strani nukleobaze gde se nalaze veliki žljeb, i pri čemu hemijska modifikacija može da uključuje zamenu ili supstituciju atoma citidinske nukleobaze aminom, SH, metil ili etil, ili hloro ili fluoro grupom.
[0019] U nekim primerima izvođenja, hemijske modifikacije mogu da budu locirane na šećernoj komponenti nukleotida.
[0020] U nekim primerima izvođenja, hemijske modifikacije mogu da budu locirane na fosfatnoj okosnici nukleotida.
[0021] U nekim primerima izvođenja, hemijske modifikacije mogu da izmene elektrohemiju one strane nukleotida gde se nalazi veliki žljeb.
[0022] U nekim primerima izvođenja, iRNK je deo farmaceutske kompozicije.
Definicije
[0023] Na različitim mestima u predmetnoj specifikaciji, supstituenti jedinjenja su prikazani u grupama ili u opsezima. Posebno je predviđeno da predmetni prikaz uključuje svaku pojedinačnu podkombinaciju članova ovih grupa i opsega. Na primer, specifično je predviđeno da termin "C1-6 alkil" prikazuje pojedinačno metil, etil, C3 alkil, C4 alkil, C5 alkil i C6 alkil.
[0024] Dalje je predviđeno da jedinjenja budu stabilna. Kako se ovde koristi, "stabilan" se odnosi na jedinjenje koje je dovoljno robusno da preživi izolaciju do korisnog stepena čistoće iz reakcione smeše, i poželjno je sposobno da se formuliše u efikasno terapeutsko sredstvo.
[0025] Dalje se ceni da određene karakteristike prema predmetnom prikazu, koje su, radi jasnoće, opisane u kontekstu odvojenih primera izvođenja, takođe mogu da budu obezbeđene u kombinaciji odvojenog primera izvođenja. Nasuprot tome, različite karakteristike predmetnog prikaza koje su, radi kratkoće, opisane u kontekstu jednog primera izvođenja, takođe mogu da budu obezbeđene odvojeno ili u bilo kojoj pogodnoj podkombinaciji.
[0026] Kako se ovde koristi, termin "alkil" označava zasićenu ugljovodoničnu grupu koja je ravnolančana ili razgranata. Primeri alkil grupa uključuju metil (Me), etil (Et), propil (npr. npropil i izopropil), butil (npr. n-butil, izobutil, t-butil), pentil (npr. n-pentil, izopentil, neopentil) i slično. Alkil grupa može da sadrži od 1 do oko 20, od 2 do oko 20, od 1 do oko 12, od 1 do oko 8, od 1 do oko 6, od 1 do oko 4 ili od 1 do oko 3 atoma ugljenika.
[0027] Kako se ovde koristi, "alkenil" se odnosi na alkil grupu koja ima jednu ili više dvostrukih veza ugljenik-ugljenik. Primeri alkenil grupa uključuju etenil, propenil i slično.
[0028] Kako se ovde koristi, "alkoksi" se odnosi na -O-alkil grupu. Primeri alkoksi grupa uključuju metoksi, etoksi, propoksi (npr. n-propoksi i izopropoksi), t-butoksi i slično.
[0029] Kako se ovde koristi, "alkinil" se odnosi na alkil grupu koja ima jednu ili više trostrukih veza ugljenik-ugljenik. Primeri alkinil grupa uključuju etinil, propinil i slično.
[0030] Kako se ovde koristi, "aril" se odnosi na monociklične ili policiklične (npr., koji imaju 2, 3 ili 4 spojena prstena) aromatične ugljovodonike kao što su, na primer, fenil, naftil, antracenil, fenantrenil, indanil, indenil i slično. U nekim primerima izvođenja, aril grupe imaju od 6 do oko 20 atoma ugljenika.
[0031] Kako se ovde koristi, "halo" ili "halogen" uključuje fluoro, hloro, bromo i jodo.
[0032] Kako se ovde koristi, "terapeutsko sredstvo" se odnosi na bilo koji agens koji, kada se daje subjektu, ima terapeutski, dijagnostički i/ili profilaktički efekat i/ili izaziva željeni biološki i/ili farmakološki efekat.
[0033] Kako se ovde koristi, "životinja" se odnosi na bilo kog člana životinjskog carstva. U nekim primerima izvođenja, "životinja" se odnosi na ljude u bilo kojoj fazi razvoja. U nekim primerima izvođenja, "životinja" se odnosi na životinje koje nisu ljudi u bilo kojoj fazi razvoja. U određenim primerima izvođenja, životinja koja nije čovek je sisar (npr., glodar, miš, pacov, zec, majmun, pas, mačka, ovca, govedo, primat ili svinja). U nekim primerima izvođenja, životinje uključuju, ali nisu ograničene na, sisare, ptice, gmizavce, vodozemce, ribe i crve. U nekim primerima izođenja, životinja je transgena životinja, genetski modifikovana životinja ili klon.
[0034] Kako se ovde koristi, "približno" ili "oko", primenjeno na jednu ili više vrednosti od interesa, odnosi se na vrednost koja je slična navedenoj referentnoj vrednosti. U određenim primerima izvođenja, izraz „približno“ ili „oko“ odnosi se na opseg vrednosti koje spadaju u okvire 25%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% ili manje u bilo kom smeru (veće ili manje od) navedene referentne vrednosti osim ako nije drugačije navedeno ili na drugi način očigledno iz konteksta (osim kada bi takav broj premašio 100% moguće vrednosti).
[0035] Kako se ovde koristi, "povezan sa", "konjugovan", "povezan", "prikačen" i "vezan", kada se koristi u odnosu na dva ili više ostatka, znači da su delovi fizički povezani ili povezani sa jednim drugi, bilo direktno ili preko jednog ili više dodatnih delova koji služe kao vezivni agens, da bi se formirala struktura koja je dovoljno stabilna tako da delovi ostaju fizički povezani pod uslovima u kojima se struktura koristi, npr., fiziološkim uslovima.
[0036] Kako se ovde koristi, "biološki aktivan" se odnosi na karakteristiku bilo koje supstance koja ima aktivnost u biološkom sistemu i/ili organizmu. Na primer, supstanca koja, kada se da u organizam, ima biološki efekat na taj organizam, smatra se biološki aktivnom. U posebnim primerima izvođenja, kada je nukleinska kiselina biološki aktivna, deo te nukleinske kiseline koji deli najmanje jednu biološku aktivnost cele nukleinske kiseline se obično naziva "biološki aktivan" deo.
[0037] Kako se ovde koristi, "konzervativan" se odnosi na nukleotide ili aminokiselinske ostatke polinukleotidne sekvence ili aminokiselinske sekvence, respektivno, koje su one koje se javljaju nepromenjene na istoj poziciji dve ili više srodnih sekvenci koje se porede. Nukleotidi ili aminokiseline koje su relativno konzervativne su one koje su konzervativne među više srodnim sekvencama od nukleotida ili aminokiselina koje se pojavljuju negde drugde u sekvencama. U nekim primerima izvođenja se kaže da su dve ili više sekvenci "potpuno konzervativne" ako su 100% identične jedna drugoj. U nekim primerima izvođenja, za dve ili više sekvenci se kaže da su "visoko konzervativne" ako su najmanje 70% identične, najmanje 80% identične, najmanje 90% identične, ili najmanje 95% identične jedna drugoj. U nekim primerima izvođenja, za dve ili više sekvenci se kaže da su "visoko konzervativne" ako su oko 70% identične, oko 80% identične, oko 90% identične, oko 95%, oko 98% ili oko 99% identične jedna drugoj . U nekim primerima izvođenja se kaže da su dve ili više sekvenci "konzervativne" ako su najmanje 30% identične, najmanje 40% identične, najmanje 50% identične, najmanje 60% identične, najmanje 70% identične, najmanje 80% identično, najmanje 90% identično ili najmanje 95% identično jedna drugoj. U nekim primerima izvođenja se kaže da su dve ili više sekvenci "konzervativne" ako su oko 30% identične, oko 40% identične, oko 50% identične, oko 60% identične, oko 70% identične, oko 80% identične, oko 90 % identične, oko 95% identične, oko 98% identične, ili oko 99% identične jedna drugoj.
[0038] Kako se ovde koristi, "ekspresija" sekvence nukleinske kiseline se odnosi na jedan ili više od sledećih događaja: (1) proizvodnju RNK matrice na osnovu DNK sekvence (npr., transkripcijom); (2) obradu RNK transkripta (npr., splajsovanjem, editovanjem, obrazovanjem 5' kape, i/ili obradom 3' kraja); (3) transkaciju RNK u polipeptid ili protein; i (4) post-translacionu modifikaciju polipeptida ili proteina.
[0039] Kako se ovde koristi, "funkcionalni" biološki molekul je biološki molekul u obliku u kojem ispoljava osobinu i/ili aktivnost kojom se karakteriše.
[0040] Kako se ovde koristi, "in vitro" se odnosi na događaje koji se dešavaju u veštačkoj sredini, npr., u epruveti ili reakcionom sudu, u ćelijskoj kulturi, u Petri šolji, itd., a ne u organizmu (npr. životinja, biljka, ili mikrob).
[0041] Kako se ovde koristi, "in vivo" se odnosi na događaje koji se dešavaju u organizmu (npr., životinja, biljka, ili mikrob).
[0042] Kako se ovde koristi, „izolovan“ se odnosi na supstancu ili entitet koji je (1) odvojen od najmanje nekih komponenti sa kojima je bio povezan kada je prvobitno proizveden (bilo u prirodi ili u eksperimentalnom okruženju), i/ili (2) proizveden, pripremljen i/ili pripravljen ljudskom rukom. Izolovane supstance i/ili entiteti mogu da se odvoje od najmanje oko 10%, oko 20%, oko 30%, oko 40%, oko 50%, oko 60%, oko 70%, oko 80%, oko 90% ili više drugih komponenti sa kojima su inicijalno bili povezani. U nekim primerima izvođenja, izolovani agensi su čistiji od oko 80%, oko 85%, oko 90%, oko 91%, oko 92%, oko 93%, oko 94%, oko 95%, oko 96%, oko 97%, oko 98%, oko 99%, ili čistiji od oko 99%. Kako se ovde koristi, supstanca je "čista" ako je suštinski bez drugih komponenti.
[0043] Kako se ovde koristi, "subjekat" ili "pacijent" se odnosi na bilo koji organizam kod koga može da se primeni kompozicija u skladu sa predmetnim prikazom, npr., u eksperimentalne, dijagnostičke, profilaktičke i/ili terapeutske svrhe. Tipični subjekti uključuju životinje (npr., sisare kao što su miševi, pacovi, zečevi, ne-ljudski primati i ljudi) i/ili biljke.
[0044] Kako se ovde koristi, "suštinski" se odnosi na kvalitativan uslov da se neka karakteristika ili svojstvo ispoljava u potpunoj ili skoro potpunoj meri ili stepenu. Prosečan stručnjak u oblasti biologije, razumeće da biološki i hemijski fenomeni retko, ili nikada, idu do kraja i/ili nastavljaju do potpunosti ili postižu ili izbegavaju apsolutni rezultat. Termin "suštinski" se stoga ovde koristi da obuhvati potencijalni nedostatak kompletnosti svojstven mnogim biološkim i hemijskim fenomenima.
[0045] Kod pojedinca koji "pati od" bolesti, poremećaja i/ili stanja, postavljena je dijagnoza ili se ispoljava jedan ili više simptoma bolesti, poremećaja i/ili stanja.
[0046] Kod pojedinca koji je "podložan" bolesti, poremećaju i/ili stanju nije postavljena dijagnoza i/ili možda nisu ispoljeni simptomi bolesti, poremećaja i/ili stanja. U nekim primerima izvođenja, pojedinac koji je podložan bolesti, poremećaju i/ili stanju (na primer, rak) može da se karakteriše jednim ili više od sledećeg: (1) genetskom mutacijom koja je povezana sa razvojem bolesti, poremećaja, i/ili stanja; (2) genetskim polimorfizmom koji je povezan sa razvojem bolesti, poremećaja i/ili stanja; (3) povećanom i/ili smanjenom ekspresijom i/ili aktivnošću proteina i/ili nukleinske kiseline koja je povezana sa bolešću, poremećajem i/ili stanjem; (4) navikama i/ili stilovima života koji su povezani sa razvojem bolesti, poremećaja i/ili stanja; (5) porodičnom istorijom bolesti, poremećaja i/ili stanja; i (6) izlaganjem i/ili infekcijom mikrobom koji je povezan sa razvojem bolesti, poremećaja i/ili stanja. U nekim primerima izvođenja, pojedinac koji je podložan bolesti, poremećaju i/ili stanju će razviti bolest, poremećaj i/ili stanje. U nekim primerima izvođenja, pojedinac koji je podložan bolesti, poremećaju i/ili stanju neće razviti bolest, poremećaj i/ili stanje.
[0047] Kako se ovde koristi, "terapeutski efikasna količina" označava količinu nekog sredstva koje se isporučuje (npr., nukleinske kiseline, leka, terapeutskog sredstva, dijagnostičkog sredstva, profilaktičkog sredstva, itd.), a koja je dovoljna, kada se primeni kod subjekta koji pati od, ili je podložan, bolesti, poremećaju, i/ili stanju, da se leči, poboljšaju simptomi, dijagnostifikuje, spreči i/ili odloži početak bolesti, poremećaja i/ili stanja.
[0048] Kako se ovde koristi, "transkripcioni faktor" se odnosi na DNK-vezujući protein koji reguliše transkripciju DNK u RNK, na primer, aktivacijom ili represijom transkripcije. Neki transkripcioni faktori utiču samo na regulaciju transkripcije, dok drugi deluju zajedno sa drugim proteinima. Neki transkripcioni faktor mogu i da aktiviraju i da suprimiraju transkripciju pod određenim uslovima. U principu, transkripcioni faktori vezuju specifičnu ciljnu sekvencu ili sekvence veoma slične specifičnoj konsenzusnoj sekvenci u regulatornom regionu ciljnog gena. Transkripcioni faktori mogu da regulišu transkripciju ciljnog gena sami ili u kompleksu sa drugim molekulima.
[0049] Kako se ovde koristi, "lečenje" se odnosi na delimično ili potpuno ublažavanje, poboljšanje, poboljšanje, ublažavanje, odlaganje početka, inhibiranje progresije, smanjenje ozbiljnosti i/ili smanjenje incidencije jednog ili više simptoma ili karakteristika određenog bolest, poremećaj i/ili stanje. Na primer, "lečenje" raka može se odnositi na inhibiciju preživljavanja, rasta i/ili širenja tumora. Tretman se može dati subjektu koji ne pokazuje znake bolesti, poremećaja i/ili stanja i/ili subjektu koji pokazuje samo rane znake bolesti, poremećaja i/ili stanja u cilju smanjenja rizika razvoja patologije povezane sa bolešću, poremećajem i/ili stanjem. U nekim primerima izvođenja, tretman obuhvata isporuku proteina povezanog sa terapeutski aktivnom nukleinskom kiselinom subjektu kome je to potrebno.
[0050] Kako se ovde koristi, "nemodifikovana" se odnosi na nukleinsku kiselinu pre nego što je modifikovana, npr. adenozin, gvanozin, citozin, timidin i uracil, ili prirodna aminokiselina. Ovde opisana jedinjenja mogu da budu asimetrična (npr., koja imaju jedan ili više stereocentara). Svi stereoizomeri, kao što su enantiomeri i dijastereomeri, su predviđeni, osim ako nije drugačije naznačeno. Jedinjenja koja sadrže asimetrično supstituisane atome
1
ugljenika mogu se izolovati u optički aktivnim ili racemskim oblicima. Postupci o tome kako da se pripreme optički aktivni oblici od optički aktivnih početnih materijala su poznati u tehnici, kao što je razdvajanje racemskih smeša ili stereoselektivna sinteza. Mnogi geometrijski izomeri olefina, C=N dvostruke veze i slično mogu takođe biti prisutni u ovde opisanim jedinjenjima, a svi takvi stabilni izomeri su razmatrani. Cis i trans geometrijski izomeri jedinjenja su opisani i mogu da budu izolovani kao smeša izomera ili kao odvojeni izomerni oblici.
[0051] Jedinjenja takođe uključuju tautomerne oblike. Tautomerni oblici nastaju zamenom jednostruke veze sa susednom dvostrukom vezom zajedno sa istovremenom migracijom protona. Tautomerni oblici uključuju prototropne tautomere koji su izomerna stanja protonacije koja imaju istu empirijsku formulu i isto ukupno naelektrisanje. Primeri prototropnih tautomera uključuju keton - enol parove, amid - imidna kiselina parove, laktam -laktim parove, amid - imidna kiselina parove, enamin - imin parove i prstenaste forme gde proton može da zauzme dve ili više pozicija u heterocikličnom sistemu, npa primer , 1H- i 3H-imidazol, 1H-, 2H- i 4H- 1,2,4-triazol, 1H- i 2H- izoindol i 1H- i 2H-pirazol. Tautomerni oblici mogu da budu u ravnoteži ili sterno zaključani u jedan oblik odgovarajućom supstitucijom.
[0052] Jedinjenja mogu takođe da uključuju sve izotope atoma koji se javljaju u intermedijerima ili finalnim jedinjenjima. Izotopi uključuju one atome koji imaju isti atomski broj, ali različite masene brojeve. Na primer, izotopi vodonika uključuju tricijum i deuterijum.
[0053] Predviđeno je da termin "jedinjenje" kako se ovde koristi, uključuje sve stereoizomere, geometrijske izomere, tautomere i izotope prikazanih struktura.
[0054] U nekim primerima izvođenja, jedninjenja prema predmetnom prikazu su suštinski izolovana. Pod "suštinski izolovana" se podrazumeva da je jedinjenje najmanje delimično ili u značajnoj meri izdvojeno od okruženja u kome se formiralo ili je detektovano. Delimično izdvajanje može da uključuje, na primer, kompoziciju obogaćenu jedinjenjem prema predmetnom prikazu. Izdvajanje u značajnoj meri može da uključuje kompozicije koje sadrže najmanje oko 50%, najmanje oko 60%, najmanje oko 70%, najmanje oko 80%, najmanje oko 90%, najmanje oko 95%, najmanje oko 97%, ili najmanje oko 99% po težini jedinjenja prema predmetnom prikazu, ili njegove soli. Postupci za izolovanje jedninjenja ili njihovih doli su rutinski u stanju tehnike.
[0055] Jedninjenja, i njihove soli, takođe mogu da se pripremaju u kombinaciji sa molekulima rastvarača ili vode kako bi se rutinskim postupcima obrazovali solvati i hidrati.
[0056] Predmetni prikaz takođe uključuje farmaceutski prihvatljive soli ovde opisanih jedinjenja. Kako se ovde koristi, "farmaceutski prihvatljive soli" se odnose na derivate prikazanih jedinjenja gde je parentalno jedinjenje modifikovano konvertovanjem postojeće kiseline ili baze u njen oblik soli. Primeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju, ali nisu ograničeni na, soli mineralnih ili organskih kiselina baznih ostataka kao što su amini; alkalije ili organske soli kiselih ostataka kao što su karboksilne kiseline; i slično. Farmaceutski prihvatljive soli prema predmetnom prikazu pronalaska uključuju konvencionalne netoksične soli parentalnog jedinjenja formirane, na primer, od netoksičnih neorganskih ili organskih kiselina. Farmaceutski prihvatljive soli prema predmetnom prikazu mogu se sintetizovati iz parentalnog jedinjenja koje sadrži bazni ili kiseli deo konvencionalnim hemijskim metodama. U principu, takve soli mogu da se dobiju reakcijom slobodnih kiselinskih ili baznih oblika ovih jedinjenja sa stehiometrijskom količinom odgovarajuće baze ili kiseline u vodi ili u organskom rastvaraču, ili u smeši ova dva; u principu, poželjni su nevodeni medijumi kao što su etar, etil acetat, etanol, izopropanol ili acetonitril. Liste pogodnih soli nalaze se u publikacijama Remington’s Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p.1418 i Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977).
[0057] Izraz "farmaceutski prihvatljiv" se ovde koristi kada se odnosi na ona jedinjenja, materijale, kompozicije i/ili oblike doziranja koji su, u okviru razumne medicinske procene, pogodni za upotrebu u kontaktu sa tkivima ljudskih bića i životinje bez prekomerne toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora ili drugih problema ili komplikacija, srazmerno razumnom odnosu koristi/rizik.
[0058] Kako se ovde koristi, "prolekovi" se odnose na bilo koje nosače, tipično kovalentno vezane, koji oslobađaju aktivni izvorni lek kada se daju subjektu sisara. Prolekovi se mogu pripremiti modifikovanjem funkcionalnih grupa prisutnih u jedinjenjima na takav način da se modifikacije cepaju, bilo u rutinskoj manipulaciji ili in vivo, do parentalnih jedinjenja. Prolekovi obuhvataju jedinjenja u kojima su hidroksilne, amino, sulfhidrilne ili karboksilne grupe vezane za bilo koju grupu koja se, kada se primeni kod sisara, cepa da bi formirala slobodnu hidroksilnu, amino, sulfhidrilnu ili karboksilnu grupu respektivno. Primeri prolekova uključuju, ali nisu ograničeni na, acetat, format i benzoat derivate alkoholnih i amin funkcionalnih grupa u jedinjenjima prema ovom pronalasku. O pripremi i upotrebi prolekova se govori u publikacijama T. Higuchi and V. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems," Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series i Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987.
Modifikovani nukleozidi i nukleotidi
[0059] Kako je ovde opisano, "nukleozid" je definisan kao jedinjenje koje sadrži molekul šećera sa pet ugljenika (pentozu ili ribozu) ili njegov derivat, i organsku bazu, purin ili pirimidin, ili njihov derivat. Kao što je ovde opisano, "nukleotid" je definisan kao nukleozid koji se sastoji od fosfatne grupe. Ovde opisani nukleozidi i nukleotidi su u principu hemijski modifikovani na strani gde se nalazi veliki žljeb.
[0060] Tabela 1 u nastavku teksta identifikuje hemijske strane svakog od kanonskih nukleotida. Krugovi identifikuju atome koji čine odgovarajuće hemijske regione.
[0061] U nekim primerima izvođenja, modifikovani nukleozidi uključuju 5-aza-citidin, pseudoizocitidin, 3-metil-citidin, N4-acetilcitidin, 5-formilcitidin, N4-metilcitidin, 5-hidroksimetilcitidin, 1-metil-pseudoizocitidin, pirolo-citidin, pirolo-pseudoizocitidin, 2-tiocitidin, 2-tio-5-metil-citidin, 4-tio-pseudoizocitidin, 4-tio-1-metil-pseudoizocitidin, 4-tio-1-metil-1-deaza-pseudoizocitidin, 1-metil-1-deaza-pseudoizocitidin, zebularin, 5-aza-zebularin, 5-metil-zebularin, 5-aza-2-tio-zebularin, 2-tio-zebularin, 2-metoksi-citidin, 2-metoksi-5-metil-citidin, 4-metoksi-pseudoizocitidin i 4-metoksi-1-metil-pseudoizocitidin.
1
[0062] U nekim drugim primerima izvođenja, modifikovani nukleozidi uključuju 2-aminopurin, 2, 6-diaminopurin, 7-deaza-adenin, 7-deaza-8-aza-adenin, 7-deaza-2-aminopurin, 7-deaza-8-aza-2-aminopurin, 7-deaza-2,6-diaminopurin, 7-deaza-8-aza-2,6-diaminopurin, 1-metiladenozin, N6-metiladenozin, N6-izopenteniladenozin, N6-(cishidroksiizopentenil)adenozin, 2-metil-tio-N6-(cis-hidroksiizopentenil) adenozin, N6-glicinilkarbamoiladenozin, N6-treonilkarbamoiladenozin, 2-metiltio-N6-treonil karbamoiladenozin, N6,N6-dimetiladenozin, 7-metiladenin, 2-metiltio-adenin i 2-metoksiadenin.
[0063] U nekim primerima izvođenja, modifikovani nukleozidi uključuju inozin, 1-metilinozin, viozin, vibutozin, 7-deaza-guanozin, 7-deaza-8-aza-guanozin, 6-tio-guanozin, 6-tio-7-deaza-guanozin, 6-tio-7-deaza-8-aza-guanozin, 7-metil-guanozin, 6-tio-7-metil-guanozin, 7-metilinozin, 6-metoksi-guanozin, 1-metilguanozin, N2-metilguanozin, N2,N2-dimetilguanozin, 8-okso-guanozin, 7-metil-8-okso-guanozin, 1-metil-6-tio-guanozin, N2-metil-6-tio-guanozina, i N2,N2-dimetil-6-tio-guanozin.
[0064] Dodatni nukleozid i nukleotid mogu da budu jedinjenje formule I:
pri čemu:
Z je O ili S;
svaki od Y<1>je nezavisno izabran od -OR<a1>, -NR<a1>R<b1>i -SR<a1>;
svaki od Y<2>je nezavisno izabran od O, NR<a>, S ili linkera koji sadrži atom odabran iz grupe koja se sastoji od C, O, N i S;
svaki od Y<3>je nezavisno izabran od O i S;
Y<4>je izabran od H, -OR<a>, -SR<a>i -NHR<a>;
n je 0, 1, 2 ili 3;
m je 0, 1, 2 ili 3;
B je nukleobaza;
R<a>je H, C1-20 alkil, C2-20 alkenil, C2-20 alkinil, ili C6-20 aril;
svaki R<a1>i R<b1>je nezavisno H ili kontrajon; i
-Y<3>-R<c1>je OH ili SH na pH od oko 1 ili -Y<3>-R<c1>je O<->ili S<->na fiziološkom pH;
ili -Y<3>-R<c1>je C1-20 alkoksi, C2-20 -O-alkenil, ili C1-20 -O-alkinil;
pri čemu, kada je B nemodifikovana nukleobaza izabrana od citozina, guanina i adenina, tada najmanje jedno od Z, Y<1>ili Y<2>nije O ili OH.
[0065] U nekim primerima izvođenja, B je nukleobaza formule II-a, ili II-c:
pri čemu:
označava jednostruku ili dvostruku vezu;
X je O ili S;
U i W su svaki nezavisno C ili N;
V je O, S, C ili N;
pri čemu, kada V predstavlja C, tada R<1>predstavlja H, C1-6 alkil, C1-6 alkenil, C1-6 alkinil, halo, ili -OR<c>, pri čemu je svaki C1-20 alkil, C2-20 alkenil, C2-20 alkinil izborno supstituisan sa -OH, -NR<a>R<b>, -SH, - C(O)R<c>, -C(O)OR<c>, -NHC(O)R<c>, ili -NHC(O)OR<c>;
i pri čemu, kada V predstavlja O, S ili N, tada je R<1>odsutan;
R<2>je H, -OR<c>, -SR<c>, -NR<a>R<b>, ili halo;
ili kada V predstavlja C tada R<1>i R<2>zajedno sa atomima ugljenika sa kojima su povezani mogu da formiraju prsten od 5 ili 6 članova, izborno supstituisan sa 1-4 supstituenta izabrana od halo, - OH, -SH, -NR<a>R<b>, C1-20 alkila, C2-20 alkenila, C2-20 alkinila, C1-20 alkoksi, ili C1-
20 tioalkila;
R<3>je H ili C1-20 alkil;
R<4>je H ili C1-20 alkil; pri čemu, kada označava dvostruku vezu, tada je R<4>odsutno, ili N-R<4>, zajedno posmatrano, formira pozitivno naelektrisani N supstituisan sa C1-20 alkilom;
1
svaki R<a>i R<b>je nezavisno H, C1-20 alkil, C2-20 alkenil, C2-20 alkinil, ili C6-20 aril; i R<c>je H, C1-20 alkil, C2-20 alkenil, fenil, benzil, polietilen glikolna grupa, ili aminopolietilen glikolna grupa.
[0066] U nekim primerima izvođenja, B je nukleobaza formule II-a1, II-a2, II-a3, II-a4 ili II-a5:
[0067] U nekim primerima izvođenja, B je nukleobaza odabrana iz grupe koja se sastoji od citozina, guanina i adenina.
[0068] U nekim primerima izvođenja, B je citidin ili njegov derivat.
[0069] U nekim primerima izvođenja dodatni nukleotid je jedinjenje formule I-a:
[0070] U nekim primerima izvođenja dodatni nukleotid je odabran iz grupe koja je sastoji od:
1
[0071] U nekim primerima izvođenja, hemijska modifikacija velikog žljeba može da uključuje zamenu vodonika na C-5 u citozinu halo grupom ili metil grupom.
[0072] Na primer, modifikovani nukleotid može da bude:
[0073] U dodatnom primeru izvođenja, hemijska modifikacija velikog žljeba može da uključuje kondenzovani prsten koji se formira od NH2 na C-4 poziciji i atoma ugljenika na C-5 poziciji.
[0074] Na primer, modifikovani nukleotid može da bude:
[0075] U nekim primerima izvođenja, modifikovani nukleotid je 5'-O-(1-tiofosfat)-adenozin, 5'-O-(1-tiofosfat)-citidin, 5'-O-(1-tiofosfat)-guanozin, 5'-O-(1-tiofosfat)-uridin ili 5'-O-(1-tiofosfat)-pseudouridin.
1
[0076] α-tio supstituisana fosfatna komponenta je obezbeđena kako bi pružila stabilnost RNK i DNK polimerima preko ne-prirodnih fosforotioatnih veza okosnice. Fosforotioatna DNK i RNK imaju povećanu otpornost na nukleazu i posledično imaju duži poluživot u ćelijskom
1
okruženju. Očekuje se da će nukleinske kiseline povezane preko fosforotioata takođe smanjiti urođeni imunski odgovor putem slabijeg vezivanja/aktivacije molekula ćelijskog urođenog imuniteta.
[0077] Modifikovani nukleotidi i kombinacije modifikovanih nukleotida dati su u tabeli 2 u nastavku teksta.
Tabela 2
1
Sinteza modifikovanih nukleotida
[0078] Ovde prikazani modifikovani nukleozidi i nukleotidi mogu da se pripremaju od lako dostupnih polaznih materijala pomoću sledećih opštih metoda i procedura. Podrazumeva se da tamo gde su dati tipični ili poželjni uslovi procesa (tj. temperature reakcije, vremena, molski odnosi reaktanata, rastvarači, pritisci, itd.); drugi uslovi procesa takođe mogu da se koriste, osim ako nije drugačije navedeno. Optimalni reakcioni uslovi mogu da variraju u zavisnosti od konkretnih reaktanata ili rastvarača koji se koriste, ali takve uslove može da odredi stručnjak u oblasti putem procedura rutinske optimizacije.
[0079] Ovde opisani procesi mogu da se prate prema bilo kom pogodnom metodu poznatom u stanju tehnike. Na primer, formiranje proizvoda može da se prati spektroskopskim sredstvima, kao što su spektroskopija nuklearne magnetne rezonance (npr.,<1>H ili<13>C) infracrvena spektroskopija, spektrofotometrija (npr., UV-vidljiva), ili masena spektrometrija, ili hromatografijom kao što je tečna hromatografija visokog učinka (HPLC) ili hromatografija u tankom sloju.
[0080] Pripremanje modifikovanih nukleozida i nukleotida može da uključuje protekciju i deprotekciju različitih hemijskih grupa. Stručnjak u oblasti može lako da utvrdi da li postoji potreba za protekcijom i deprotekcijom i da odabere odgovarajuće protektivne grupe. Hemija protektivnih grupa može da se nađe, na primer, u publikaciji Greene, et al., Protective Groups in Organic Synthesis, 2d. Ed., Wiley & Sons, 1991.
[0081] Reakcije ovde opisanih procesa mogu da se izvode u odgovarajućim rastvaračima, koje stručnjak u oblasti organske sinteze može lako da izabere. Pogodni rastvarači mogu da
2
budu u suštini nereaktivni sa polaznim materijalima (reaktantima), intermedijerima, ili proizvodima na temperaturama na kojima se odvijaju reakcije, tj. temperaturama koje mogu da variraju od temperature smrzavanja rastvarača do temperature ključanja rastvarača. Data reakcija može da se izvodi u jednom rastvaraču ili smeši više od jednog rastvarača. Odgovarajući rastvarači za dati reakcioni korak mogu da se izaberu u zavisnosti od toga koji je konkretno korak reakcije u pitanju. Razdvajanje racemskih smeša modifikovanih nukleozida i nukleotida može da se izvodi bilo kojim od brojnih postupaka koji su poznatih u stanju tehnike. Primer postupka uključuje frakcionu rekristalizaciju pomoću "kiseline za hiralno razdvajanje" koja predstavlja optički aktivnu organsku kiselinu koja formira so. Pogodna sredstva za razdvajanje za postupke frakcione rekristalizacije su, na primer, optički aktivne kiseline, kao što su D i L oblici vinske kiseline, diacetilvinska kiselina, dibenzoilvinska kiselina, bademova kiselina, jabučna kiselina, mlečna kiselina ili različite optički aktivne kamforsulfonske kiseline. Razdvajanje racemskih smeša takođe može da se izvodi eluiranjem na koloni napunjenoj optički aktivnim sredstvom za razdvajanje (npr. dinitrobenzoilfenilglicin). Pogodnu kompoziciju rastvarača za eluiranje može da odredi stručnjak u oblasti.
[0082] Primeri sinteze modifikovanih nukleotida date su u tekstu koji sledi, na Šemama 1 i 2.
[0083] Modifikovani nukleozidi i nukleotidi takođe mogu da se pripremaju prema sintetičkim metodama opisanim u publikaciji Ogata et al. Journal of Organic Chemistry 74:2585-2588, 2009; Purmal et al. Nucleic Acids Research 22(1): 72-78, 1994; Fukuhara et al. Biochemistry 1(4):563-568, 1962; i Xu et al. Tetrahedron 48(9): 1729-1740, 1992.
Modifikovane nukleinske kiseline
[0084] Ovde opisani imaju korisna svojstva, uključujući značajno smanjenje ili odsustvo suštinske indukcije urođenog imunskog odgovora ćelije u koju je uvedena iRNK, ili njegovu supresiju. Pošto ove modifikovane iRNK poboljšavaju efikasnost proizvodnje proteina, intracelularno zadržavanje iRNK i vijabilnost ćelija sa kojima su u kontaktu, kao i zato što poseduju smanjenu imunogenost, ovih iRNK u poređenju sa nemodifikovanim iRNK, posedovanje ovih svojstava se u ovom dokumentu označava kao "poboljšane iRNK".
[0085] Termin "nukleinska kiselina", u svom najširem smislu, uključuje bilo koje jedinjenje i/ili supstancu koja je ili može da bude, ugrađena u oligonukleotidni lanac. Nukleinske kiseline za upotrebu u skladu sa predmetnim prikazom su iRNK.
[0086] Obezbeđene su nukleinske kiseline koje sadrže translatabilni region i jednu, dve, ili više od dve različite nukleozidne modifikacije. U nekim primerima izvođenja, modifikovana nukleinska kiselina ispoljava smanjenu degradaciju u ćeliji u koju je uvedena nukleinska kiselina, u poređenju sa odgovarajućom nemodifikovanom nukleinskom kiselinom. Kao što je ovde opisano, nukleinske kiseline prema predmetnom pronalasku suštinski ne indukuju urođeni imunski odgovor ćelije u koju je iRNK uvedena.
[0087] U određenim primerima izvođenja, poželjno je da se modifikovana nukleinska kiselina koja je uvedena u ćeliju intracelularno razgradi, na primer, ukoliko je poželjna vremenski precizno definisana proizvodnja proteina. Dakle, ovaj pronalazak obezbeđuje modifikovanu nukleinsku kiselinu koja sadrži degradacioni domen, na koji može da se deluje na usmeren način unutar ćelije.
[0088] Ostale komponente nukleinske kiseline su izborne i u nekim primerima izvođenja su korisne. Na primer, obezbeđeni su 5' netranslatirani region (UTR) i/ili 3'UTR. Takođe su obezbeđene nukleinske kiseline koje sadrže Kozak sekvencu.
[0089] Dodatno, obezbeđene su nukleinske kiseline koje sadrže jednu ili više intronskih nukleotidnih sekvenci koje mogu da budu isečene iz nukleinske kiseline.
[0090] Dodatno, obezbeđene su nukleinske kiseline koje sadrže unutrašnje mesto za ulazak u ribozom (IRES). IRES može da deluje kao jedino vezujuće mesto za ribozom, ili može da posluži kao jedno od više vezujućih mesta za ribozom na iRNK. iRNK koja sadrži više od jednog funkcionalnog vezujućeg mesta za ribozom može da kodira nekoliko peptida ili polipeptida koji se nezavisno translatiraju pomoću ribozoma ("multicistronska iRNK"). Kada su nukleinske kiseline obezbeđene sa IRES, dodatno izborno je obezbeđen drugi translatabilni region. Primeri IRES sekvenci koje mogu da se upotrebljavaju u skladu sa predmetnim prikazom uključuju, bez ograničenja, sekvence iz pikornavirusa (npr. FMDV), virusa štetočina (CFFV), polio virusa (PV), virusa encefalomiokarditisa (ECMV), virusa slinavke i šapa (FMDV), virusa hepatitisa C (HCV), virusa klasične svinjske kuge (CSFV), virusa leukemije miša (MLV), majmunskog virusa imunodeficijencije (SIV) ili virusa paralize zrikavaca (CrPV).
[0091] U nekim primerima izvođenja, sekvence nukleinske kiseline dodatno sadrže jedinjenje formule I-d:
2
pri čemu:
Z je O ili S;
svaki od Y<1>je nezavisno izabran od -OR<a1>, -NR<a1>R<b1>i -SR<a1>;
svaki od Y<2>je nezavisno izabran od O, NR<a>, S ili linkera koji sadrži atom odabran iz grupe koja se sastoji od C, O, N i S;
svaki od Y<3>je nezavisno izabran od O i S;
Y<4>je izabran od H, -OR<a>, -SR<a>i -NHR<a>;
B je nukleobaza;
R<a>je H, C1-20 alkil, C2-20 alkenil, C2-20 alkinil, ili C6-20 aril;
svaki R<a1>i R<b1>je nezavisno H ili kontrajon; i -Y<3>-R<c1>je OH ili SH na pH od oko 1 ili -Y<3>-R<c1>je O<->ili S<->na fiziološkom pH;
ili -Y<3>-R<c1>je C1-20 alkoksi, C2-20 -O-alkenil, ili C1-20 -O-alkinil;
pri čemu, kada je B nemodifikovana nukleobaza izabrana od citozina, guanina, timidina, uracila i adenina, tada najmanje jedno od Z, Y<1>ili Y<2>nije O ili OH.
[0092] U nekim primerima izvođenja, B je nukleobaza formule II-a ili II-c:
pr emu:
označava jednostruku ili dvostruku vezu;
X je O ili S;
U i W su svaki nezavisno C ili N;
V je O, S, C ili N;
pri čemu, kada V je C, tada R<1>je H, C1-6 alkil, C1-6 alkenil, C1-6 alkinil, halo, ili -OR<c>, pri čemu je svaki C1-20 alkil, C2-20 alkenil, C2-20 alkinil izborno supstituisan sa -OH, -NR<a>R<b>, -SH, - C(O)R<c>, -C(O)OR<c>, -NHC(O)R<c>, ili -NHC(O)OR<c>;
i pri čemu, kada V predstavlja O, S, ili N, tada je R<1>odsutno;
R<2>je H, -OR<c>, -SR<c>, -NR<a>R<b>ili halo;
ili, kada V predstavlja C, tada R<1>i R<2>zajedno sa atomima ugljenika sa kojima su povezani mogu da formiraju prsten od 5 ili 6 članova, izborno supstituisan sa 1-4 supstituenta izabrana od halo, - OH, -SH, -NR<a>R<b>, C1-20 alkila, C2-20 alkenila, C2-20 alkinila, C1-20 alkoksi, ili C1-
20 tioalkila;
R<3>je H ili C1-20 alkil;
R<4>je H ili C1-20 alkil; pri čemu, kada označava dvostruku vezu, tada je R<4>odsutno, ili N-R<4>, zajedno posmatrano, formira pozitivno naelektrisani N supstituisan C1-20 alkilom;
svaki R<a>i R<b>je nezavisno H, C1-20 alkil, C2-20 alkenil, C2-20 alkinil, ili C6-20 aril; i R<c>je H, C1-20 alkil, C2-20 alkenil, fenil, benzil, polietilen glikolna grupa, ili aminopolietilen glikolna grupa.
[0093] U nekim primerima izvođenja, B je nukleobaza formule II-al, II-a2, II-a3, II-a4, ili II-a5:
[0094] U nekim primerima izvođenja, najmanje 25% citozina je zamenjeno jedinjenjem formule I-a (npr., najmanje oko 30%, najmanje oko 35%, najmanje oko 40%, najmanje oko 45%, najmanje oko 50%, najmanje oko 55%, najmanje oko 60%, najmanje oko 65%, najmanje oko 70%, najmanje oko 75%, najmanje oko 80%, najmanje oko 85%, najmanje oko 90%, najmanje oko 95%, ili oko 100%).
Interagujući partneri velikog žljeba
2
[0095] Kao što je ovde opisano, fraza "interagujući partner velikog žljeba" odnosi se na receptore za prepoznavanje RNK koji detektuju i reaguju na RNK ligande kroz interakcije, npr. vezivanje, sa stranom nukleotida ili nukleinske kiseline gde je veliki žljeb. Kao takvi, RNK ligandi koji sadrže modifikovane nukleotide ili nukleinske kiseline, kako je ovde opisano, smanjuju interakcije sa vezujućim partnerima velikog žljeba, i stoga smanjuju urođeni imunski odgovor, ili ekspresiju i sekreciju proinflamatornih citokina, ili oba.
[0096] Primer interagujućih, npr. vezujućih partnera glavnog žleba, uključuju, ali nisu ograničeni na, sledeće nukleaze i helikaze. Unutar membrana, TLR receptori (Tollslični receptori) 3, 7 i 8 mogu da reaguju na jednolančane i dvolančane RNK molekule. Unutar citoplazme, članovi superfamilije 2 klase DEX(D/H) helikaza i ATPaza mogu da osete RNK molekule kako bi se inicirali antivirusni odgovori. Ove helikaze uključuju RIG-I (gen I inducibilan retinoičnom kiselinom) i MDA5 (gen 5 povezan sa diferencijacijom melanoma). Drugi primeri uključuju proteine koji sadrže domen laboratorija za genetiku i fiziologiju 2 (LGP2), i HIN-200 domen, ili proteine koji sadrže helikazni domen.
Prevencija ili smanjenje aktivacije urođenog ćelijskog imunskog odgovora pomoću modifikovanih nukleinskih kiselina
[0097] Termin "urođeni imunski odgovor" uključuje ćelijski odgovor na egzogene nukleinske kiseline, uključujući jednolančane nukleinske kiseline, u principu virusnog ili bakterijskog porekla, što uključuje indukciju ekspresije i oslobađanja citokina, posebno interferona, i ćelijsku smrt. Sinteza proteina je takođe smanjena tokom urođenog ćelijskog imunskog odgovora. Iako je korisno eliminisati urođeni imunski odgovor u ćeliji, predmetni prikaz obezbeđuje modifikovane iRNK koje značajno smanjuju imunski odgovor, uključujući signalizaciju interferona, bez potpunog eliminisanja takvog odgovora. U nekim primerima izvođenja, imunski odgovor je smanjen za 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99%, 99,9%, ili veći od 99,9% u poređenju sa imunskim odgovorom izazvanim odgovarajućom nemodifikovanom nukleinskom kiselinom. Takvo smanjenje se može meriti ekspresijom ili nivoom aktivnosti interferona tipa 1 ili ekspresijom gena regulisanih interferonom, kao što su toll-slični receptori (npr. TLR7 i TLR8). Smanjenje urođenog imunskog odgovora se takođe može meriti smanjenjem ćelijske smrti nakon jedne ili više primena modifikovanih RNK u ćelijskoj populaciji; npr., ćelijska smrt je 10%, 25%, 50%, 75%, 85%, 90%, 95%, ili preko 95% manja od učestalosti ćelijske smrti uočene sa
2
odgovarajućom nemodifikovanom nukleinskom kiselinom. Štaviše, ćelijska smrt može da utiče na manje od 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5%, 1%, 0,1%, 0,01% ili manje od 0,01% ćelija u kontaktu sa modifikovanim nukleinskim kiselinama.
[0098] Predmetni prikaz je obezbeđen za ponovljeno uvođenje (npr., transfekcija) modifikovanih nukleinskih kiselina u ciljnu ćelijsku populaciju in vivo. Korak dovođenja ćelijske populacije u kontakt može da se ponovi jednom ili više puta (kao što su dva, tri, četiri, pet ili više od pet puta). U nekim primerima izvođenja korak dovođenja u kontakt ćelijske populacije sa modifikovanim nukleinskim kiselinama se ponavlja nekoliko puta, koliko je dovoljno da se postigne unapred određena efikasnost translacije proteina u ćelijskoj populaciji. Imajući u vidu smanjenu citotoksičnost ciljne populacije ćelija koju obezbeđuju modifikacije nukleinske kiseline, ove ponovljene transfekcije moguće je postići u raznovrsnom nizu ćelijskih tipova.
Polipeptidne varijante
[0099] Obezbeđene su nukleinske kiseline koje kodiraju varijante polipeptida, koji imaju izvesnu identičnost sa referentnom polipeptidnom sekvencom. Termin "identičnost" kao što je poznato u stanju tehnike, odnosi se na odnos između sekvenci dva ili više peptida, koji je utrvrđen upoređivanjem sekvenci. U stanju tehnike, "identičnost" takođe označava stepen srodnosti sekvence između peptida, što se određuje brojem podudaranja između nizova dva ili više aminokiselinskih ostataka. „Identičnost“ meri procenat identičnih podudaranja između manje od dve ili više sekvenci sa poravnanjima praznina (ako ih ima) kojima se bavi određeni matematički model ili računarski program (tj. „algoritmi“). Identičnost srodnih peptida može se lako izračunati poznatim metodama. Takve metode uključuju, ali nisu ograničene na, one opisane u publikacijama Computational Molecular Biology, Lesk, A. M., ed., Oxford University Press, New York, 1988; Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D. W., ed., Academic Press, New York, 1993; Computer Analysis of Sequence Data, Part 1, Griffin, A. M. i Griffin, H. G., eds., Humana Press, New Jersey, 1994; Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje, G., Academic Press, 1987; Sequence Analysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J., eds., M. Stockton Press, New York, 1991; i Carillo et al., SIAM J. Applied Math.48, 1073 (1988).
[0100] U nekim primerima izvođenja, polipeptidna varijanta ima istu ili sličnu aktivnost kao referentni polipeptid. Alternativno, varijanta ima izmenjenu aktivnost (npr. povećanu ili smanjenu) u odnosu na referentni polipeptid. U principu, varijante konkretnog polinukleotida
2
ili polipeptida prema predmetnom prikazu će imati najmanje oko 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% ili veću identičnost sekvence sa tim konkretnim referentnim polinukleotidom ili polipeptidom kao što je određeno programima za poravnanje sekvenci i parametrima koji su ovde opisani i poznati stručnjacima u ovoj oblasti.
[0101] Kao što su stručnjaci prepoznali, fragmenti proteina, funkcionalni domeni proteina i homologi proteini takođe spadaju u opseg primene predmetnog prikaza. Na primer, ovim je obezbeđen bilo koji proteinski fragment referentnog proteina (što znači polipeptidna sekvenca najmanje jedan aminokiselinski ostatak kraća od referentne polipeptidne sekvence, ali inače identična) dužine 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100 ili više od 100 amino kiselina. U drugom primeru, bilo koji protein koji uključuje deo od oko 20, oko 30, oko 40, oko 50, ili oko 100 amino kiselina koje su oko 40%, oko 50%, oko 60%, oko 70%, oko 80%, oko 90%, oko 95%, ili oko 100% identične sa bilo kojom od ovde opisanih sekvenci mogu da se koriste u skladu sa predmetnim prikazom. U nekim primerima izvođenja, proteinska sekvenca koja se koristi u skladu sa predmetnim prikazom uključuje 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, ili više mutacija kao što je prikazano u bilo kojoj od sekvenci koje su ovde navedene ili na koje se ovde poziva.
Kompleksi polipeptid-nukleinska kiselina
[0102] Korektna translacija proteina uključuje fizičku agregaciju brojnih polipeptida i nukleinskih kiselina povezanih sa iRNK. iRNK može da bude vezana za jedan ili više polipeptida. Proteini su u principu obezbeđeni u količini efikasnoj da spreči ili smanji urođeni imunski odgovor ćelije u koju je kompleks uveden.
Sinteza modifikovanih nukleinskih kiselina
[0103] Nukleinske kiseline za upotrebu u skladu sa predmetnim prikazom mogu da se pripremaju prema bilo kojoj dostupnoj tehnici uključujući, ali ne ograničavajući se na hemijsku sintezu, enzimsku sintezu, koja se u principu naziva in vitro transkripcija, enzimsku ili hemijsku degradaciju dužeg prekursora, itd. Postupci sinteze RNK molekula su poznate u stanju tehnike (videti, npr., Gait, M.J. (cd.) Oligonucleotide synthesis: a practical approach, Oxford [Oxfordshire], Washington, DC: IRL Press, 1984; i Herdewijn, P. (ed.)
2
Oligonucleotide synthesis: methods and applications, Methods in Molecular Biology, v. 288 (Clifton, N.J.) Totowa, N.J.: Humana Press, 2005).
[0104] Ovde prikazani modifikovani nukleozidi i nukleotidi mogu da se pripremaju od lako dostupnih polaznih materijala pomoću sledećih opštih metoda i procedura. Podrazumeva se da tamo gde su dati tipični ili poželjni uslovi procesa (tj. temperature reakcije, vremena, molski odnosi reaktanata, rastvarači, pritisci, itd.); drugi uslovi procesa takođe mogu da se koriste, osim ako nije drugačije navedeno. Optimalni reakcioni uslovi mogu da variraju u zavisnosti od konkretnih reaktanata ili rastvarača koji se koriste, ali takve uslove može da odredi stručnjak u oblasti putem procedura rutinske optimizacije.
[0105] Ovde opisani procesi mogu da se prate prema bilo kom pogodnom metodu poznatom u stanju tehnike. Na primer, formiranje proizvoda može da se prati spektroskopskim sredstvima, kao što su spektroskopija nuklearne magnetne rezonance (npr.,<1>H ili<13>C) infracrvena spektroskopija, spektrofotometrija (npr., UV-vidljiva), ili masena spektrometrija, ili hromatografijom kao što je tečna hromatografija visokog učinka (HPLC) ili hromatografija u tankom sloju.
[0106] Pripremanje modifikovanih nukleozida i nukleotida može da uključuje protekciju i deprotekciju različitih hemijskih grupa. Stručnjak u oblasti može lako da utvrdi da li postoji potreba za protekcijom i deprotekcijom i da odabere odgovarajuće protektivne grupe. Hemija protektivnih grupa može da se nađe, na primer, u publikaciji Greene, et al., Protective Groups in Organic Synthesis, 2d. Ed., Wiley & Sons, 1991.
[0107] Reakcije ovde opisanih procesa mogu da se izvode u odgovarajućim rastvaračima, koje stručnjak u oblasti organske sinteze može lako da izabere. Pogodni rastvarači mogu da budu suštinski nereaktivni sa polaznim materijalima (reaktantima), intermedijerima, ili proizvodima na temperaturama na kojima se odvijaju reakcije, tj. temperaturama koje mogu da variraju od temperature smrzavanja rastvarača do temperature ključanja rastvarača. Data reakcija se može da se izvodi u jednom rastvaraču ili smeši više od jednog rastvarača. U zavisnosti od konkretnog koraka reakcije, mogu da se izaberu odgovarajući rastvarači za određeni reakcioni korak.
[0108] Razdvajanje racemskih smeša modifikovanih nukleozida i nukleotida može da se izvodi bilo kojim od brojnih postupaka koji su poznati u stanju tehnice. Primer postupka uključuje frakcionu rekristalizaciju pomoću "kiseline za hiralno razdvajanje" koja predstavlja optički aktivnu organsku kiselinu koja formira so. Pogodna sredstva za razdvajanje za postupke frakcione rekristalizacije su, na primer, optički aktivne kiseline, kao što su D i L oblici vinske kiseline, diacetilvinska kiselina, dibenzoilvinska kiselina, bademova kiselina,
2
jabučna kiselina, mlečna kiselina ili različite optički aktivne kamforsulfonske kiseline. Razdvajanje racemskih smeša takođe može da se izvodi eluiranjem na koloni napunjenoj optički aktivnim sredstvom za razdvajanje (npr. dinitrobenzoilfenilglicin). Pogodnu kompoziciju rastvarača za eluiranje može da odredi stručnjak u oblasti. Modifikovane nukleinske kiseline ne moraju biti jednolično modifikovane duž cele dužine molekula. Različite nukleotidne modifikacije i/ili strukture okosnice mogu da postoje na različitim pozicijama u nukleinskoj kiselini. Stručnjak u oblasti će razumeti da analozi nukleotida ili druge modifikacije mogu da budu locirani na bilo kojoj poziciji(ima) nukleinske kiseline tako da funkcija nukleinske kiseline nije značajno smanjena. Modifikacija može da bude i 5' ili 3' terminalna modifikacija.
[0109] U nekim primerima izvođenja, nukleinske kiseline mogu da sadrže modifikovano najmanje 5%, najmanje 10%, najmanje 25%, najmanje 50%, najmanje 80%, najmanje 90% ili 100% citozina u nukleinskoj kiselini je zamenjeno modifikovanim citozinom. Modifikovani citozin može da se zameni jedinjenjem koje ima jednu jedinstvenu strukturu, ili može da se zameni većim brojem jedinjenja koja imaju različite strukture (npr., 2, 3, 4 ili više jedinstvenih struktura).
[0110] U principu, najmanja dužina modifikovane iRNK prema predmetnom prikazu može da bude dužina iRNK sekvence koja je dovoljna da kodira dipeptid. U drugom primeru izvođenja, dužina iRNK sekvence je dovoljna da kodira tripeptid. U drugom primeru izvođenja, dužina iRNK sekvence je dovoljna da kodira tetrapeptid. U drugom primeru izvođenja, dužina iRNK sekvence je dovoljna da kodira pentapeptid. U drugom primeru izvođenja, dužina iRNK sekvence je dovoljna da kodira heksapeptid. U drugom primeru izvođenja, dužina iRNK sekvence je dovoljna da kodira heptapeptide. U drugom primeru izvođenja, dužina iRNK sekvence je dovoljna da kodira oktapeptid. U drugom primeru izvođenja, dužina iRNK sekvence je dovoljna da kodira nonapeptid. U drugom primeru izvođenja, dužina iRNK sekvence je dovoljna da kodira dekapeptid.
[0111] Primeri dipeptida koje mogu da kodiraju modifikovane sekvence nukleinske kiseline uključuju, ali nisu ograničeni na, karnozin i anserin.
[0112] U dodatnom primeru izvođenja, iRNK je duža od 30 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, molekul RNK je duži od 35 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 40 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 45 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 55 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 60 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 60 nucleotides. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 80 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 90 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 100 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 120 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 140 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 160 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 180 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 200 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 250 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 300 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 350 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 400 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 450 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 500 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 600 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 700 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 800 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 900 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 1000 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 1100 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 1200 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 1300 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 1400 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 1500 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 1600 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 1800 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 2000 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 2500 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 3000 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 4000 nukleotida. U drugom primeru izvođenja, dužina iznosi najmanje 5000 nukleotida, ili više od 5000 nukleotida.
Upotrebe modifikovanih nukleinskih kiselina
Terapeutska sredstva
[0113] Ovde opisana modifikovana nukleinska kiselina može da primeni kod subjekta, pri čemu se modifikovana nukleinska kiselina translatira in vivo da bi se proizveo terapeutski peptid kod subjekta. U skladu sa tim, ovde su obezbeđene kompozicije, metode, kompleti i reagensima za lečenje ili prevenciju bolesti ili stanja kod ljudi i drugih sisara. Aktivni
1
terapeutski agensi prema predmetnom prikazu uključuju modifikovane nukleinske kiseline ili ćelije koje sadrže modifikovane nukleinske kiseline.
[0114] U određenim primerima izvođenja obezbeđeni su kombinovani terapeutici koji sadrže jednu ili više modifikovanih nukleinskih kiselina koje sadrže translatabilne regione koji kodiraju za protein ili proteine koji podstiču imunitet subjekta sisara zajedno sa proteinom koji indukuje ćelijsku toksičnost zavisnu od antitela. Na primer, obezbeđeni su terapeutici koji sadrže jednu ili više nukleinskih kiselina koje kodiraju trastuzumab i faktor stimulacije kolonija granulocita (G-CSF). Konkretno, takvi kombinovani terapeutici su korisni kod Her2+ pacijenata sa karcinomom dojke koji razviju indukovanu rezistenciju na trastuzumab. (videti, npr., Albrecht, Immunotherapy. 2(6):795-8 (2010)).
[0115] Može da bude indukovana translacija rekombinantnog polipeptida u ćelijskoj populaciji. Ćelijska populacija je u kontaktu sa efikasnom količinom kompozicije koja sadrži nukleinsku kiselinu prema zahtevima translatabilne regione koji kodira rekombinantni polipeptid. Populacija je u kontaktu pod takvim uslovima da je nukleinska kiselina lokalizovana u jednoj ili više ćelija ćelijske populacije i da se rekombinantni polipeptid translatira u ćeliji sa nukleinske kiseline.
[0116] Efikasna količina kompozicije je obezbeđena na osnovu, bar delimično, ciljnog tkiva, tipa ciljne ćelije, načina primene, fizičkih karakteristika nukleinske kiseline (npr. veličine i obima modifikovanih nukleozida) i drugih determinanti. U principu, efikasna količina kompozicije obezbeđuje efikasnu proizvodnju proteina u ćeliji, poželjno efikasniju od kompozicije koja sadrži odgovarajuću nemodifikovanu nukleinsku kiselinu. Povećana efikasnost se može pokazati povećanom transfekcijom ćelija (tj. procentom ćelija transficiranih nukleinskom kiselinom), povećanom translacijom proteina iz nukleinske kiseline, smanjenom degradacijom nukleinske kiseline (kao što je pokazano, npr. produženim trajanjem transfekcije proteina iz modifikovanog nukleinska kiselina) ili smanjenim urođenim imunskim odgovor ćelije domaćina.
[0117] Aspekti predmetnog prikaza su usmereni na postupke indukovanja in vivo translacije rekombinantnog polipeptida kod sisara kome je to potrebno. U ovom slučaju se primenom ovde opisanih postupaka isporučivanja kod subjekta primenjuje efikasna količina kompozicije koja sadrži nukleinsku kiselinu u skladu sa zahtevima koja kodira rekombinantni polipeptid. Nukleinska kiselina je obezbeđena u količini i pod drugim uslovima tako da je nukleinska kiselina lokalizovana u ćeliji subjekta i da se rekombinantni polipeptid translatira u ćeliji sa nukleinske kiseline. Ćelija u kojoj je nukleinska kiselina lokalizovana, ili tkivo u
2
kome je ćelija prisutna, može biti ciljano sa jednom ili više od jedne runde primene nukleinske kiseline.
[0118] Drugi aspekti predmetnog prikaza se odnose na transplantaciju ćelija koje sadrže modifikovane nukleinske kiseline kod subjekta sisara. Primena ćelija kod sisarskih subjekata je poznata stručnjacima u ovoj oblasti, kao što je lokalna implantacija (npr. lokalna ili potkožna primena), isporuka organa ili sistemska injekcija (npr. intravenozna injekcija ili inhalacija), kao što je formulacija ćelija u farmaceutski prihvatljivom nosaču. Kompozicije koje sadrže modifikovane nukleinske kiseline su formulisane za primenu intramuskularno, transarterijalno, intraperitonealno, intravenski, intranazalno, subkutano, endoskopski, transdermalno ili intratekalno. U nekim primerima izvođenja, kompozicija je formulisana za produženo oslobađanje.
[0119] Subjekat kod koga se primenjuje terapeutsko sredstvo pati od ili je izložen riziku od razvoja bolesti, poremećaja ili štetnog stanja.
[0120] U određenim primerima izvođenja, primenjena modifikovana nukleinska kiselina usmerava proizvodnju jednog ili više rekombinantnih polipeptida koji obezbeđuju funkcionalnu aktivnost koja je suštinski odsutna u ćeliji u kojoj je rekombinantni polipeptid translatiran. Na primer, funkcionalna aktivnost koja nedostaje može biti enzimske, strukturne ili regulatorne prirode.
[0121] U drugim primerima izvođenja, primenjena modifikovana nukleinska kiselina usmerava proizvodnju jednog ili više rekombinantnih polipeptida koji zamenjuju polipeptid (ili više polipeptida) koji je suštinski odsutan u ćeliji u kojoj je rekombinantni polipeptid translatiran. Takvo odsustvo može biti posledica genetske mutacije kodirajućeg gena ili njegovog regulatornog puta. Alternativno, rekombinantni polipeptid funkcioniše tako da antagonizuje aktivnost endogenog proteina koji je prisutan u, na površini ili se izlučuje iz ćelije. Obično je aktivnost endogenog proteina štetna za subjekta, na primer, radi se o mutaciji endogenog proteina što dovodi do izmenjene aktivnosti ili lokalizacije. Pored toga, rekombinantni polipeptid antagonizuje, direktno ili indirektno, aktivnost biološke grupe koja je prisutna u, na površini ili se izlučuje iz ćelije. Primeri antagonizovanih bioloških delova uključuju lipide (npr., holesterol), lipoprotein (npr. lipoprotein niske gustine), nukleinsku kiselinu, ugljene hidrate ili toksine sa malim molekulima.
[0122] Rekombinantni proteini koji su ovde opisani su projektovani za lokalizaciju unutar ćelije, potencijalno unutar specifičnog odeljka kao što je jezgro, ili su projektovani za sekreciju iz ćelije ili translokaciju u plazma membranu ćelije.
[0123] Kao što je ovde opisano, korisna karakteristika modifikovanih nukleinskih kiselina prema predmetnom prikazu je sposobnost da smanji urođeni imunski odgovor ćelije na egzogenu nukleinsku kiselinu.
Terapeutici za bolesti i stanja
[0124] U nekim primerima izvođenja, iRNK prema pronalasku, predviđena je za korišćenje u postupcima za lečenje ili prevenciju simptoma bolesti koje karakteriše nedostatak ili aberantna aktivnost proteina, zamenom nedostajuće aktivnosti proteina ili prevazilaženjem aberantne proteinske aktivnosti. Zbog brzog pokretanja proizvodnje proteina nakon uvođenja modifikovanih iRNK molekula, u poređenju sa virusnim DNK vektorima, iRNK prema predmetnom prikazu su posebno korisna u lečenju akutnih bolesti kao što su sepsa, moždani udar i infarkt miokarda. Štaviše, nedostatak regulacije transkripcije modifikovanih iRNK molekula prema predmetnom prikazu je koristan po tome što je moguće postići tačnu titraciju proizvodnje proteina.
[0125] Bolesti koje karakteriše disfunkcionalna ili aberantna aktivnost proteina uključuju, ali nisu ograničene na, kancer i proliferativne bolesti, genetske bolesti (npr. cistična fibroza), autoimune bolesti, dijabetes, neurodegenerativne bolesti, kardiovaskularne bolesti i metaboličke bolesti. Predmetni prikaz dozvoljava korišćenje u postupku za lečenje takvih stanja ili bolesti kod subjekta uvođenjem nukleinske kiseline ili terapeutika na bazi ćelija koji sadrže ovde date modifikovane nukleinske kiseline, pri čemu modifikovane nukleinske kiseline kodiraju protein koji antagonizuje ili na drugi način prevazilazi aberantnu proteinsku aktivnost prisutnu u ćeliji subjekta. Specifični primeri disfunkcionalnog proteina su varijante misens mutacije gena za transmembranski regulator provodljivosti cistične fibroze (CFTR), koji proizvode disfunkcionalnu proteinsku varijantu CFTR proteina, koja izaziva cističnu fibrozu.
[0126] Višestruke bolesti karakteriše nedostajuća (ili značajno smanjena tako da ne dolazi do odgovarajućeg funkcionisanja proteina) aktivnost proteina. Ovi proteini možda nisu prisutni ili su suštinski nefunkcionalni. Predmetni prikaz dozvoljava korišćenje u postupku za lečenje takvih stanja ili bolesti kod subjekta uvođenjem nukleinske kiseline ili terapeutika na bazi ćelija koji sadrže modifikovane nukleinske kiseline, pri čemu modifikovane nukleinske kiseline kodiraju protein koji zamenjuje aktivnost proteina koji nedostaju u ciljnim ćelijama subjekta. Specifični primeri disfunkcionalnog proteina su varijante nonsens mutacija gena za
4
transmembranski regulator provodljivosti cistične fibroze (CFTR), koje proizvode nefunkcionalnu proteinsku varijantu CFTR proteina, koja izaziva cističnu fibrozu.
[0127] Postpupci lečenja cistične fibroze kod sisara mogu da se postignu dovođenjem u kontakt ćelije subjekta sa modifikovanom nukleinskom kiselinom koja ima translatabilni region koji kodira funkcionalni CFTR polipeptid, pod uslovima u kojima je prisutna efikasna količina CTFR polipeptida u ćeliji. Poželjne ciljne ćelije su epitelne ćelije, recimo pluća, a postupci primene se određuju s obzirom na ciljno tkivo; tj. za isporuku u pluća molekuli RNK su formulisani za primenu inhalacijom.
[0128] U nekom drugom primeru izvođenja, predmetni prikaz dozvoljava korišćenje u postupku za lečenje hiperlipidemije kod subjekta, uvođenjem u ćelijsku populaciju subjekta modifikovanog molekula iRNK koji kodira sortilin, protein koji je nedavno okarakterisan u genomskim studijama, čime se poboljšava hiperlipidemija kod subjekta. SORT1 gen kodira transmembranski protein trans-Golgi mreže (TGN) označen kao sortilin. Genetske studije su pokazale da jedna od pet osoba ima polimorfizam jednog nukleotida, rs12740374, u 1p13 lokusu SORT1 gena koji ih predisponira da imaju niske nivoe lipoproteina niske gustine (LDL) i lipoproteina veoma niske gustine (VLDL) . Svaka kopija manjinskog alela, prisutna kod oko 30% ljudi, menja LDL holesterol za 8 mg/dL, dok dve kopije manjinskog alela, prisutne kod oko 5% populacije, snižavaju LDL holesterol za 16 mg/dL. Takođe se pokazalo da nosioci manjinskog alela imaju 40% smanjen rizik od infarkta miokarda. Funkcionalne in vivo studije na miševima opisuju da je prekomerna ekspresija SORT1 u tkivu jetre miša dovela do značajno nižeg nivoa LDL holesterola, čak 80% nižeg, i da je utišavanje SORT1 povećalo LDL holesterol za približno 200% (Musunuru K et al. From noncoding variant to phenotype via SORT1 at the 1p13 cholesterol locus. Nature 2010; 466: 714-721).
Postupci isporučivanja nukleinskih kiselina u ćelije
[0129] In vivo isporuka nukleinske kiseline se može poboljšati. Na primer, kompozicija koja sadrži poboljšanu nukleinsku kiselinu takođe u principu sadrži reagens za transfekciju ili drugo jedinjenje koje povećava efikasnost poboljšanog unosa nukleinske kiseline u ćelije domaćina. Poboljšana nukleinska kiselina pokazuje pojačano zadržavanje u ćelijskoj populaciji, u odnosu na odgovarajuću nemodifikovanu nukleinsku kiselinu. Zadržavanje poboljšane nukleinske kiseline je veće od zadržavanja nemodifikovane nukleinske kiseline. U nekim primerima izvođenja, on je najmanje oko 50%, 75%, 90%, 95%, 100%, 150%, 200% ili više od 200% veći od zadržavanja nemodifikovane nukleinske kiseline. Takva prednost zadržavanja može se postići jednim krugom transfekcije sa pojačanom nukleinskom kiselinom, ili se može dobiti nakon ponovljenih krugova transfekcije.
[0130] U nekim primerim izvođenja, poboljšana nukleinska kiselina se isporučuje u ciljnu ćelijsku populaciju sa jednom ili više dodatnih nukleinskih kiselina. Takva isporuka može biti u isto vreme, ili se pojačana nukleinska kiselina isporučuje pre isporuke jedne ili više dodatnih nukleinskih kiselina. Dodatna jedna ili više nukleinskih kiselina mogu da budu modifikovane nukleinske kiseline ili nemodifikovane nukleinske kiseline. Razume se da početno prisustvo pojačanih nukleinskih kiselina ne indukuje suštinski urođeni imunski odgovor ćelijske populacije i, štaviše, da urođeni imunski odgovor neće biti aktiviran kasnijim prisustvom nemodifikovanih nukleinskih kiselina. S tim u vezi, poboljšana nukleinska kiselina možda sama po sebi ne sadrži translatabilni region, ako je protein za koji se želi da bude prisutan u ciljnoj ćelijskoj populaciji translatiran sa nemodifikovanih nukleinskih kiselina.
Komponente za ciljano delovanje
[0131] U nekim primerima izvođenja, obezbeđene su modifikovane nukleinske kiseline za ekspresiju partnera koji se vezuje za proteine ili receptora na površini ćelije, a koji funkcioniše tako što ciljano usmerava ćeliju u određeni prostor u tkivu ili u interakciju sa specifičnim delom, bilo in vivo ili in vitro. Pogodni partneri za vezivanje proteina uključuju antitela i njihove funkcionalne fragmente, skela proteine ili peptide. Pored toga, modifikovane nukleinske kiseline mogu da se koriste za usmeravanje sinteze i ekstracelularne lokalizacije lipida, ugljenih hidrata ili drugih bioloških komponenti.
Trajno utišavanje genske ekspresije
[0132] iRNK se može koristiti u metodi za epigenetičko utišavanje ekspresije gena kod sisara, koja sadrži iRNK gde translatabilni region kodira polipeptid ili polipeptide koji su sposobni da usmere metilaciju histona H3 specifičnu za sekvencu da iniciraju formiranje heterohromatina i redukuju gensku transkripciju oko specifičnih gena u cilju utišavanja gen. Na primer, mutacija za dobijanje funkcije u genu Janus kinaze 2 odgovorna je za familiju mijeloproliferativnih bolesti.
Farmaceutske kompozicije
[0133] Farmaceutske kompozicije mogu izborno da sadrže jednu ili više dodatnih terapeutski aktivnih supstanci. U nekim primerima izvođenja, preparati se daju ljudima. Za potrebe predmetnog prikaza, fraza "aktivni sastojak" se u principu odnosi na protein koji sadrži kompleks kao što je ovde opisano.
[0134] Iako su opisi farmaceutskih kompozicija dati ovde uglavnom usmereni na farmaceutske kompozicije koje su pogodne za primenu na ljudima, stručnjak će razumeti da su takve kompozicije u principu pogodne za primenu životinjama svih vrsta. Modifikacija farmaceutskih kompozicija pogodnih za davanje ljudima da bi se kompozicije učinile pogodnim za davanje različitim životinjama je dobro shvaćeno, a obično kvalifikovani veterinarski farmakolog može da dizajnira i/ili izvrši takvu modifikaciju sa običnim, ako ih ima, eksperimentisanjem. Subjekti kojima se razmatra primena farmaceutskih kompozicija uključuju, ali nisu ograničeni na, ljude i/ili druge primate; sisari, uključujući komercijalno relevantne sisare kao što su goveda, svinje, konji, ovce, mačke, psi, miševi i/ili pacovi; i/ili ptice, uključujući komercijalno relevantne ptice kao što su kokoške, patke, guske i/ili ćurke.
[0135] Formulacije ovde opisanih farmaceutskih kompozicija mogu da budu pripremljene bilo kojim metodom poznatim ili razvijenim u farmakologiji. U principu, takve pripremne metode uključuju korak dovođenja aktivnog sastojka u vezu sa ekscipijensom i/ili jednim ili više drugih pomoćnih sastojaka, a zatim, ako je potrebno i/ili poželjno, oblikovanje i/ili pakovanje proizvoda u željeni pojedinačni - ili jedinica sa više doza.
[0136] Farmaceutska kompozicija u skladu sa predmetnim prikazom može biti pripremljena, upakovana i/ili prodata u rasutom stanju, kao pojedinačna jedinična doza, i/ili kao više pojedinačnih doza. Kako se ovde koristi, "jedinična doza" je diskretna količina farmaceutske kompozicije koja sadrži unapred određenu količinu aktivnog sastojka. Količina aktivnog sastojka je u principu jednaka dozi aktivnog sastojka koja bi bila primenjena kod subjekta i/ili pogodnom delu takve doze kao što je, na primer, polovina ili jedna trećina takve doze .
[0137] Relativne količine aktivnog sastojka, farmaceutski prihvatljivog ekscipijensa i/ili bilo kojih dodatnih sastojaka u farmaceutskoj kompoziciji u skladu sa predmetnim prikazom će varirati, u zavisnosti od identiteta, veličine i/ili stanja subjekta koji se leči i dalje u zavisnosti od puta kojim se kompozicija primenjuje. Na primer, kompozicija može da sadrži između 0,1% i 100% (tež./tež.) aktivnog sastojka.
[0138] Farmaceutske formulacije mogu dodatno da sadrže farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, koji, kako se ovde koristi, uključuje bilo koji ili sve rastvarače, disperzione medije, razblaživače ili druge tečne nosače, disperzione ili suspenzijske pomoćne supstance, površinski aktivne agense, izotonične agense, zgušnjivače ili emulgatore agensi, konzervansi, čvrsta veziva, maziva i slično, kako odgovaraju određenom željenom obliku doze. Remington's The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition, A. R. Gennaro (Lippincott, Williams & Wilkins, Baltimore, MD, 2006) prikazuje različite ekscipijense koji se koriste u formulisanju farmaceutskih kompozicija i poznate tehnike za njihovu pripremu. Osim u onoj meri u kojoj je bilo koji uobičajeni ekscipijens nekompatibilan sa supstancom ili njenim derivatima, kao što je stvaranje bilo kakvog neželjenog biološkog efekta ili druga štetna interakcija sa bilo kojom drugom komponentom (komponentama) farmaceutske kompozicije, njegova upotreba se razmatra u okviru ovog prikaza.
[0139] U nekim primerima izvođenja, farmaceutski prihvatljiv ekscipijens je najmanje 95%, najmanje 96%, najmanje 97%, najmanje 98%, najmanje 99% ili 100% čist. U nekim primerima izvođenja, ekscipijens je odobren za upotrebu kod ljudi i za veterinarsku upotrebu. U nekim primerima izvođenja, ekscipijens je odobren od strane Uprave za hranu i lekove Sjedinjenih Država. U nekim slučajevima, ekscipijens je farmaceutskog kvaliteta. U nekim slučajevima, ekscipijens ispunjava standarde Farmakopeje Sjedinjenih Država (USP), Evropske farmakopeje (EP), Britanske farmakopeje i/ili Međunarodne farmakopeje.
[0140] Farmaceutski prihvatljivi ekscipijensi koji se koriste u proizvodnji farmaceutskih kompozicija uključuju, ali nisu ograničeni na, inertne razblaživače, sredstva za dispergovanje i/ili granulaciju, površinski aktivne agense i/ili emulgatore, sredstva za dezintegraciju, vezivna sredstva, konzervanse, puferske agense, sredstva za podmazivanje i/ili ulja. Takvi ekscipijensi mogu da budu izborno uključeni u farmaceutske formulacije. Ekscipijensi kao što su kakao puter i voskovi za supozitorije, sredstva za bojenje, sredstva za oblaganje, zaslađivači, arome i/ili mirisi mogu da budu prisutni u kompoziciji, prema proceni osobe koja ih formuliše.
[0141] Primeri razblaživača uključuju, ali nisu ograničeni na, kalcijum karbonat, natrijum karbonat, kalcijum fosfat, dikalcijum fosfat, kalcijum sulfat, kalcijum hidrogen fosfat, natrijum fosfat laktozu, saharozu, celulozu, mikrokristalnu celulozu, kaolin, manitol, sorbitol, inozitol, natrijum hlorid, suvi skrob, kukuruzni skrob, šećer u prahu, itd., i/ili njihove kombinacije.
[0142] Primeri sredstava za granulaciju i/ili dispergovanje uključuju, ali nisu ograničeni na, krompirov skrob, kukuruzni skrob, skrob tapioke, natrijum skrob glikolat, gline, alginsku kiselinu, guar gumu, pulpu citrusa, agar, bentonit, celulozu i proizvode od drveta, prirodni sunđer, katjonske izmenjivačke smole, kalcijum karbonat, silikate, natrijum karbonat, umreženi poli(vinil-pirolidon) (krospovidon), natrijum karboksimetil skrob (natrijum skrob glikolat), karboksimetil celulozu, umreženu natrijum karboksimetil celulozu (kroskarmelozu), metilcelulozu, preželatinizovani skrob (skrob 1500), mikrokristalni skrob, skrob nerastvorljiv u vodi, kalcijum karboksimetil celulozu, magnezijum aluminijum silikat (Veegum), natrijum lauril sulfat, jedinjenja kvaternarnog amonijaka, itd., i/ili njihove kombinacije.
[0143] Primeri površinski aktivnih agenasa i/ili emulgatora uključuju, ali nisu ograničeni na, prirodne emulgatore (npr. akaciju, agar, alginska kiselina, natrijum alginat, tragakant, hondruks, holesterol, ksantan, pektin, želatin, žumance, kazein, vunena mast, holesterol, vosak i lecitin), koloidne gline (npr. bentonit [aluminijum silikat] i Veegum<®>[magnezijum aluminijum silikat]), derivate amino kiselina dugog lanca, alkohole visoke molekulske težine (npr. stearil alkohol, cetil alkohol, oleil alkohol, triacetin monostearat, etilen glikol distearat, gliceril monostearat i propilen glikol monostearat, polivinil alkohol), karbomere (npr. karboksi polimetilen, poliakrilna kiselina, polimer akrilne kiseline i karboksivinil polimer), karagenan, derivate celuloze (npr. karboksimetil celuloza natrijum, celuloza u prahu, hidroksimetil celuloza, hidroksipropil celuloza, hidroksipropil metilceluloza, metilceluloza), estri sorbitana i masnih kiselina (npr. polioksietilen sorbitan monolaurat [Tween<®>20], polioksietilen sorbitan [Tween<®>60], polioksietilen sorbitan monooleat [Tween<®>80], sorbitan monopalmitat [Span<®>40], sorbitan monostearat [Span<®>60], sorbitan tristearat [Span<®>65], gliceril sorbitan monooleat [Span<®>80]), polioksietilen estre (npr. polioksietilen monostearat [Mirj<®>45], polioksietilen hidrogenizovano ricinusovo ulje, polietoksilovano ricinusovo ulje, polioksimetilen stearat i Solutol<®>), estre saharoze i masnih kiselina, estre polietilen glikola i masnih kiselina (e.g. Cremophor<®>), polioksietilen etre, (npr. polioksietilen lauril etar(npr. Brij<®>30]), poli(vinil-pirolidon), dietilen glikol monolaurat, trietanolamin oleat, natrijum oleat, kalijum oleat, etil oleat, oleinsku kiselinu, etil laurat, natrijum lauril sulfat, Pluronic<®>F 68, Poloxamer<®>188, cetrimonijum bromid, cetilpiridinijum hlorid, benzalkonijum hlorid, dokuzat natrijum, itd. i/ili njihove kombinacije.
[0144] Primeri vezivnih sredstava uključuju, ali nisu ograničeni na, skrob (npr. kukuruzni skrob i skrobnu pastu); želatin; šećere (npr. saharoza, glukoza, dekstroza, dekstrin, melasa, laktoza, laktitol, manitol,); prirodne i sintetičke gume (npr. akacija, natrijum alginat, ekstrakt irske mahovine, panvar guma, gati guma, sluz isapol ljuski, karboksimetilceluloza, metilceluloza, etilceluloza, hidroksietilceluloza, hidroksipropil celuloza, hidroksipropil metilceluloza, mikrokristalna celuloza, celuloza acetat, poli(vinil-pirolidon), magnezijum aluminijum silikat (Veegum<®>) i arabogalaktan ariša); alginate; polietilen oksid; polietilen glikol; neorganske soli kalcijuma; silicijumsku kiselina; polimetakrilate; voskove; vodu; alkohol; itd.; i njihove kombinacije.
[0145] Primeri konzervanasa mogu da uključuju, ali nisu ograničeni na, antioksidanse, helatne agense, antimikrobne konzervanse, antifungalne konzervanse, alkoholne konzervanse, kisele konzervanse i/ili druge konzervanse. Primeri antioksidanasa uključuju, ali nisu ograničeni na, alfa tokoferol, askorbinsku kiselinu, akobil palmitat, butilovani hidroksianizol, butilovani hidroksitoluen, monotioglicerol, kalijum metabisulfit, propansku kiselinu, propil galat, natrijum askorbat, natrijum bisulfit, natrijum metabisulfit i/ili natrijum sulfit. Primeri helatnih agenasa uključuju etilendiamintetrasirćetnu kiselinu (EDTA), monohidrat limunske kiseline, dinatrijum edetat, dikalijum edetat, edetinsku kiselinu, fumarnu kiselinu, jabučnu kiselinu, fosfornu kiselinu, natrijum edetat, vinsku kiselinu i/ili trinatrijum edetat. Primeri antimikrobnih konzervansa uključuju, ali nisu ograničeni na, benzalkonijum hlorid, benzetonijum hlorid, benzil alkohol, bronopol, cetrimid, cetilpiridinijum hlorid, hlorheksidin, hlorobutanol, hlorokrezol, hloroksilenol, krezol, etil alkohol, glicerin, heksetidin, imidurea, fenol, fenoksietanol, feniletil alkohol, fenilmerkuri nitrat, propilen glikol i/ili timerosal. Primeri antifungalnih konzervansa uključuju, ali nisu ograničeni na, butil paraben, metil paraben, etil paraben, propil paraben, benzoevu kiselinu, hidroksibenzoevu kiselinu, kalijum benzoat, kalijum sorbat, natrijum benzoat, natrijum propionat i/ili sorbinsku kiselinu. Primeri alkoholnih konzervansa uključuju, ali nisu ograničeni na, etanol, polietilen glikol, fenol, fenolna jedinjenja, bisfenol, hlorobutanol, hidroksibenzoat i/ili feniletil alkohol. Primeri kiselih konzervansa uključuju, ali nisu ograničeni na, vitamin A, vitamin C, vitamin E, beta-karoten, limunsku kiselinu, sirćetnu kiselinu, dehidrosirćetnu kiselinu, askorbinsku kiselinu, sorbinsku kiselinu i/ili fitinsku kiselinu. Ostali konzervansi uključuju, ali nisu ograničeni na, tokoferol, tokoferol acetat, deteroksim mezilat, cetrimid, butilovani hidroksianizol (BHA), butilovani hidroksitoluen (BHT), etilendiamin, natrijum lauril sulfat (SLS), natrijum lauril etar sulfat (SLES), natrijum bisulfit, natrijum metabisulfit, kalijum sulfit, kalijum metabisulfit, Glydant Plus<®>, Phenonip<®>, metilparaben, Germall<®>115, Germaben<®>II, Neolone<™>, Kathon<™>i/ili Euxyl<®>.
[0146] Primeri puferskih sredstava uključuju, ali nisu ograničeni na, rastvore citratnog pufera, rastvore acetatnog pufera, rastvore fosfatnog pufera, amonijum hlorid, kalcijum karbonat, kalcijum hlorid, kalcijum citrat, kalcijum glubionat, kalcijum gluceptat, kalcijum glukonat, dglukonsku kiselinu, kalcijum glicerofosfat, kalcijum laktat, propionsku kiselinu, kalcijum levulinat, pentansku kiselinu, dvobazni kalcijum fosfat, fosfornu kiselinu, trobazni kalcijum fosfat, kalcijum hidroksid fosfat, kalijum acetat, kalijum hlorid, kalijum glukonat, kalijumove smeše, dvobazni kalijum fosfat, monobazni kalijum fosfat, kalijum fosfatne smeše, natrijum acetat, natrijum bikarbonat, natrijum hlorid, natrijum citrat, natrijum laktat, dvobazni
4
natrijum fosfat, monobazni natrijum fosfat, natrijum fosfatne smeše, trometamin, magnezijum hidroksid, aluminijum hidroksid, alginsku kiselinu, vodu bez pirogena, izotonični fiziološki rastvor, Ringerov rastvor, etil alkohol, itd. i/ili njihove kombinacije.
[0147] Primeri lubrikanata uključuju, ali nisu ograničeni na, magnezijum stearat, kalcijum stearat, stearinsku kiselinu, silicijum, talk, slad, gliceril behanat, hidrogenizovana biljna ulja, polietilen glikol, natrijum benzoat, natrijum acetat, natrijum hlorid, leucin, magnezijum lauril sulfat, natrijum lauril sulfat, itd. i njihove kombinacije.
[0148] Primeri ulja uključuju, ali nisu ograničeni na, ulje badema, koštica kajsije, avokada, babasua, bergamota, semena crne ribizle, boražine, kleke, kamilice, uljane repice, kima, karnaube, ricinusa, cimeta, kakao puter, ulje kokosa, jetre bakalara, semena kafe, kukuruza, pamuka, emua, eukaliptusa, noćurka, ribe, lanenog semena, geraniola, tikve, semenki grožđa, lešnika, miloduha, izopropil miristat, ulje jojobe, kukui oraha, lavandina, lavande, limuna, mej čanga, makadamia oraha, sleza, semena manga, semena bele limnante, američke vidrice, muskatnog oraščića, masline, narandže, atlantske sluzoglavke, palme, palminea koštice, koštica breskve, kikirikija, semena maka, semena bundeve, semena repice, pirinčanih mekinja, ruzmarina, šafranike, sandalovine, šakvane, čubra, susama, pasjeg trna, šea puter, silikon, ulje soje, suncokreta, čajevca, čička, cubake, vetivera, oraha i pšeničnih klica. Primeri ulja uključuju, ali nisu ograničeni na, butil stearat, kaprilni triglicerid, kaprinski triglicerid, ciklometikon, dietil sebakat, dimetikon 360, izopropil miristat, mineralno ulje, oktildodekanol, oleil alkohol, silikonsko ulje i/ili njihove kombinacije.
[0149] Tečni dozni oblici za oralnu i parenteralnu primenu uključuju, ali nisu ograničeni na, farmaceutski prihvatljive emulzije, mikroemulzije, rastvore, suspenzije, sirupe i/ili eliksire. Pored aktivnih sastojaka, tečni dozni oblici mogu da sadrže inertne razblaživače koji se obično koriste u stanju tehnike, kao što su, na primer, voda ili drugi rastvarači, sredstva za solubilizaciju i emulgatori kao što su etil alkohol, izopropil alkohol, etil karbonat, etil acetat, benzil alkohol, benzil benzoat, propilen glikol, 1,3-butilen glikol, dimetilformamid, ulja (posebno, semena pamuka, kikirikija, kukuruza, klica, maslinovo, ricinusovo i susamovo ulje), glicerol, tetrahidrofurfuril alkohol, polietilen glikoli, estri sorbitana i masnih kiselina njihove smeše. Pored inertnih razblaživača, oralne kompozicije mogu da uključuju pomoćne supstance kao što su sredstva za vlaženje, agensi za emulgovanje i suspendovanje, zaslađivači, arome i/ili mirisni agensi. U nekim primerima izvođenja za parenteralnu primenu, kompozicije se mešaju sa agensima za solubilizaciju kao što su Cremophor®, alkoholi, ulja, modifikovana ulja, glikoli, polisorbati, ciklodekstrini, polimeri i/ili njihove kombinacije.
[0150] Preparati za injekcije, na primer, sterilne injektabilne vodene ili uljane suspenzije mogu da budu formulisane u skladu sa poznatim stanjem tehnike korišćenjem odgovarajućih disperzionih agenasa, sredstava za vlaženje i/ili sredstava za suspendovanje. Sterilni preparati za injekcije mogu da budu sterilni rastvori za injekcije, suspenzije i/ili emulzije u netoksičnim parenteralno prihvatljivim razblaživačima i/ili rastvaračima, na primer, kao rastvor u 1,3-butandiolu. Među prihvatljivim nosačima i rastvaračima koji se mogu koristiti su voda, Ringerov rastvor po Farmakopeji Sjedinjenih država, i izotonični rastvor natrijum hlorida. Sterilna, fiksna ulja se konvencionalno koriste kao rastvarač ili medijum za suspendovanje. U tu svrhu može da se koristi bilo koje blago fiksno ulje uključujući sintetičke mono- ili digliceride. Masne kiseline kao što je oleinska kiselina mogu da se koriste u pripremi injekcija.
[0151] Formulacije za injekcije mogu da se sterilišu, na primer, filtriranjem kroz filter koji zadržava bakterije, i/ili ugrađivanjem sredstava za sterilizaciju u obliku sterilnih čvrstih kompozicija koje mogu da se rastvore ili disperguju u sterilnoj vodi ili nekom drugom sterilnom medijumu za injekcije pre upotrebe.
[0152] Da bi se produžio efekat aktivnog sastojka, često je poželjno da se uspori apsorpcija aktivnog sastojka iz subkutane ili intramuskularne injekcije. Ovo se može postići upotrebom tečne suspenzije kristalnog ili amorfnog materijala sa slabom rastvorljivošću u vodi. Brzina apsorpcije leka tada zavisi od njegove brzine rastvaranja koja, zauzvrat, može zavisiti od veličine kristala i kristalnog oblika. Alternativno, odložena apsorpcija parenteralno primenjenog oblika leka se postiže rastvaranjem ili suspendovanjem leka u uljanom nosaču. Injekcioni depo oblici se prave formiranjem mikrokapsuliranih matrica leka u biorazgradivim polimerima kao što je polilaktid-poliglikolid. U zavisnosti od odnosa leka prema polimeru i prirode određenog polimera koji se koristi, brzina oslobađanja leka se može kontrolisati. Primeri drugih biorazgradivih polimera uključuju poli(ortoestre) i poli(anhidride). Formulacije za depo injekcije se pripremaju hvatanjem leka u lipozome ili mikroemulzije koje su kompatibilne sa telesnim tkivima.
[0153] Kompozicije za rektalnu ili vaginalnu primenu su tipično supozitorije koje se mogu pripremiti mešanjem kompozicija sa odgovarajućim neiritirajućim ekscipijensima kao što su kakao puter, polietilen glikol ili vosak za supozitorije koji su čvrsti na sobnoj temperaturi, ali tečni na telesnoj temperaturi i stoga se tope u rektumu ili vaginalnoj šupljini i oslobađaju aktivni sastojak.
[0154] Čvrsti dozni oblici za oralnu primenu uključuju kapsule, tablete, pilule, prahove i granule. U takvim čvrstim oblicima doze, aktivni sastojak je pomešan sa najmanje jednim inertnim, farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom kao što je natrijum citrat ili dikalcijum fosfat i/ili punioci ili ekstenderi (npr. skrobovi, laktoza, saharoza, glukoza, manitol i silicijumska kiselina), veziva (npr. karboksimetilceluloza, alginati, želatin, polivinilpirolidinon, saharoza i bagrem), sredstva za ovlaživanje (npr. glicerol), sredstva za dezintegraciju (npr. agar, kalcijum karbonat, krompirov ili tapioka skrob, alginska kiselina, rastvor silicijum-karbonata, itd. agensi (npr. parafin), akceleratori apsorpcije (npr. jedinjenja kvaternarnog amonijuma), sredstva za vlaženje (npr. cetil alkohol i glicerol monostearat), apsorbenti (npr. kaolin i bentonit glina) i maziva (npr. talk, kalcijum stearat, magnezijum poetil stearat, magnezijum poetil čvrsti materijal natrijum lauril sulfat) i njihove smeše. U slučaju kapsula, tableta i pilula, dozni oblik može da sadrži puferske agense.
[0155] Čvrste kompozicije sličnog tipa mogu da se koriste kao punioci u mekim i tvrdo punjenim želatinskim kapsulama korišćenjem ekscipijenasa kao što su laktoza ili mlečni šećer, kao i polietilen glikoli visoke molekularne težine i slično. Čvrsti dozni oblici tableta, dražeja, kapsula, pilula i granula mogu se pripremiti sa oblogama i školjkama kao što su enteričke prevlake i druge obloge dobro poznate u oblasti farmaceutske formulacije. Oni mogu izborno da sadrže sredstva za zamućenje i mogu da budu takvog sastava da oslobađaju aktivni sastojak(e) samo, ili poželjno, u određenom delu crevnog trakta, izborno, na odložen način. Primeri kompozicija za ugradnju koji se mogu koristiti uključuju polimerne supstance i voskove. Čvrste kompozicije sličnog tipa mogu da se koriste kao punioci u mekim i tvrdo punjenim želatinskim kapsulama koristeći ekscipijense kao što su laktoza ili mlečni šećer, kao i polietilen glikoli visoke molekularne težine i slično.
[0156] Dozni oblici za topikalnu i/ili transdermalnu primenu kompozicije mogu da uključuju masti, paste, kreme, losione, gelove, prahove, rastvore, sprejeve, inhalante i/ili flastere. U principu, aktivni sastojak se meša pod sterilnim uslovima sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom i/ili bilo kojim potrebnim konzervansima i/ili puferima po potrebi. Dodatno, predmetni prikaz razmatra upotrebu transdermalnih flastera, koji često imaju dodatnu prednost obezbeđivanja kontrolisane isporuke jedinjenja u telo. Takvi dozni oblici se mogu pripremiti, na primer, rastvaranjem i/ili doziranjem jedinjenja u odgovarajućem medijumu. Alternativno ili dodatno, brzina se može kontrolisati bilo obezbeđivanjem membrane za kontrolu brzine i/ili dispergovanjem jedinjenja u polimernoj matrici i/ili gelu.
[0157] Pogodna sredstva uređaji za upotrebu prilikom isporučivanja ovde opisanih intradermalnih farmaceutskih kompozicija uključuju sredstva sa kratkim iglama kao što su sredstva opisana u SAD patentima 4,886,499; 5,190,521; 5,328,483; 5,527,288; 4,270,537; 5,015,235; 5,141,496 i 5,417,662.
4
Intradermalne kompozicije se mogu davati pomoću uređaja koji ograničavaju efektivnu dužinu prodiranja igle u kožu, kao što su oni opisani u PCT objavi WO 99/34850 i njenim funkcionalnim ekvivalentima. Pogodni su uređaji za mlazno ubrizgavanje koji isporučuju tečne kompozicije u dermis preko tečnog mlaznog injektora i/ili preko igle koja probija stratum corneum i proizvodi mlaz koji dopire do dermisa. Uređaji za mlazno ubrizgavanje opisani su, na primer, u američkim patentima 5,480,381; 5,599,302; 5,334,144; 5,993,412; 5,649,912; 5,569,189; 5,704,911; 5,383,851; 5,8 93,397; 5,466,220; 5,339,163; 5,312,335; 5,503,627; 5,064,413; 5,520,639; 4,596,556; 4,790, 824; 4,941,880; 4,940,460; i PCT objavama WO 97/37705 i WO 97/13537. Pogodni su uređaji za isporuku balističkog praha/čestica koji koriste komprimovani gas da ubrzaju vakcinu u obliku praha kroz spoljašnje slojeve kože do dermisa.. Alternativno ili dodatno, konvencionalni špricevi mogu da se koriste u klasičnoj mantouk metodi intradermalne primene.
[0158] Formulacije pogodne za lokalnu primenu uključuju, ali nisu ograničene na, tečne i/ili polutečne preparate kao što su linimenti, losioni, ulje u vodi i/ili emulzije vode u ulju kao što su kreme, masti i/ili paste, i/ili rastvori i/ili suspenzije. Formulacije koje se daju lokalno mogu, na primer, da sadrže od oko 1% do oko 10% (tež./tež.) aktivnog sastojka, iako koncentracija aktivnog sastojka može biti visoka kao granica rastvorljivosti aktivnog sastojka u rastvaraču. Formulacije za topikalnu primenu mogu dalje da sadrže jedan ili više dodatnih sastojaka opisanih ovde.
[0159] Farmaceutski preparat se može pripremiti, upakovati i/ili prodati u formulaciji pogodnoj za plućnu primenu preko bukalne šupljine. Takva formulacija može da sadrži suve čestice koje sadrže aktivni sastojak i koje imaju prečnik u opsegu od oko 0,5 nm do oko 7 nm ili od oko 1 nm do oko 6 nm. Takve kompozicije su pogodno u obliku suvih prahova za primenu pomoću uređaja koji sadrži rezervoar suvog praha u koji se struja potisnog gasa može usmeriti da disperguje prah i/ili korišćenjem samopokretnog rastvarača/kontejnera za doziranje praha, kao što je uređaj koji sadrži aktivni sastojak rastvoren i/ili suspendovan u propelantu niskog ključanja u zatvorenoj posudi. Takvi prahovi sadrže čestice u kojima najmanje 98% čestica po težini ima prečnik veći od 0,5 nm i najmanje 95% čestica po broju ima prečnik manji od 7 nm. Alternativno, najmanje 95% čestica po težini ima prečnik veći od 1 nm, a najmanje 90% čestica po broju ima prečnik manji od 6 nm. Kompozicije suvog praha mogu da uključuju čvrsti razblaživač finog praha kao što je šećer i pogodno se obezbeđuju u obliku jedinične doze.
[0160] Propelanti sa niskom tačkom ključanja u principu uključuju tečne propelante koji imaju tačku ključanja ispod 65 °F na atmosferskom pritisku. U principu, pogonsko gorivo može da sačinjava 50% do 99,9% (tež./tež.) kompozicije, a aktivni sastojak može činiti 0,1% do 20% (tež./tež.) kompozicije. Propelant može dalje da sadrži dodatne sastojke kao što su tečni nejonski i/ili čvrsti anjonski surfaktant i/ili čvrsti razblaživač (koji može imati veličinu čestica istog reda kao čestice koje sadrže aktivni sastojak).
[0161] Farmaceutske kompozicije formulisane za isporuku u pluća mogu da obezbede aktivni sastojak u obliku kapljica rastvora i/ili suspenzije. Takve formulacije se mogu pripremiti, upakovati i/ili prodati kao vodeni i/ili razblaženi alkoholni rastvori i/ili suspenzije, izborno sterilne, koje sadrže aktivni sastojak, i mogu se prikladno primeniti korišćenjem bilo kog uređaja za nebulizaciju i/ili atomizaciju. Takve formulacije mogu dalje da sadrže jedan ili više dodatnih sastojaka uključujući, ali ne ograničavajući se na, aromu kao što je natrijum saharin, isparljivo ulje, pufersko sredstvo, površinski aktivno sredstvo i/ili konzervans kao što je metilhidroksibenzoat. Kapljice koje se dobijaju ovim putem primene mogu imati prosečan prečnik u opsegu od oko 0,1 nm do oko 200 nm.
[0162] Formulacije koje su ovde opisane kao korisne za isporuku u pluća su korisne za intranazalnu isporuku farmaceutske kompozicije. Druga formulacija pogodna za intranazalnu primenu je grubi prah koji sadrži aktivni sastojak i ima prosečnu česticu od oko 0,2 µm do 500 µm. Takva formulacija se primenjuje na način na koji se uzima burmut, odnosno brzom inhalacijom kroz nosni prolaz iz posude sa prahom koja se drži blizu nosa.
[0163] Formulacije pogodne za nazalnu primenu mogu, na primer, da sadrže od oko 0,1% (tež./tež.) do čak 100% (tež./tež.) aktivnog sastojka, i mogu sadržati jedan ili više dodatnih sastojci opisani ovde. Farmaceutska kompozicija može biti pripremljena, upakovana i/ili prodata u formulaciji pogodnoj za bukalnu primenu. Takve formulacije mogu, na primer, biti u obliku tableta i/ili pastila napravljenih korišćenjem konvencionalnih metoda, i mogu, na primer, sa 0,1% do 20% (tež./tež.) aktivnog sastojka, a ostatak sadrži oralno rastvorljivu i/ili razgradivu kompoziciju i, izborno, jedan ili više ovde opisanih dodatnih sastojaka. Alternativno, formulacije pogodne za bukalnu primenu mogu da sadrže prašak i/ili aerosolizovani i/ili atomizovani rastvor i/ili suspenziju koja sadrži aktivni sastojak. Takve praškaste, aerosolizovane i/ili aerosolizovane formulacije, kada su dispergovane, mogu imati prosečnu veličinu čestica i/ili kapljica u opsegu od oko 0,1 nm do oko 200 nm, i mogu dalje da sadrže jedan ili više bilo kojih dodatnih sastojaka opisanih ovde.
[0164] Farmaceutska kompozicija može biti pripremljena, upakovana i/ili prodata u formulaciji pogodnoj za oftalmičku primenu. Takve formulacije mogu, na primer, biti u
4
obliku kapi za oči uključujući, na primer, 0,1/1,0% (tež./tež.) rastvor i/ili suspenziju aktivnog sastojka u vodenom ili uljanom tečnom ekscipijensu. Takve kapi mogu dalje da sadrže puferska sredstva, soli i/ili jedan ili više drugih sastojaka koji su ovde opisani. Druge formulacije za oftalmički primenu koje su korisne uključuju formulacije koje sadrže aktivni sastojak u mikrokristalnom obliku i/ili u lipozomskom preparatu. Kapi za uši i/ili kapi za oči su obuhvaćene obimom predmetnog prikaza.
[0165] Opšta razmatranja u vezi sa formulacijom i/ili proizvodnjom farmaceutskih agenasa mogu se naći, na primer, u publikaciji Remington: The Science and Practice of Pharmacy 21st ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2005.
Primena
[0166] Predmetni prikaz dozvoljava primenu kompleksa u skladu sa predmetnim prikazom kod subjekta kome je to potrebno. Kompleksi, ili njihove farmaceutske ili profilaktičke kompozicije, mogu da se primenjuju kod subjekta korišćenjem bilo koje količine i bilo koje rute primene koja je efikasna za prevenciju, lečenje bolesti, poremećaja i/ili stanja (npr., bolest, poremećaj i/ili stanje koje se odnosi na deficite radne memorije). Tačna potrebna količina će varirati od subjekta do subjekta, u zavisnosti od vrste, starosti i opšteg stanja subjekta, težine bolesti, konkretne kompozicije, načina njene primene, načina njenog delovanja i slično. Kompozicije se, u skladu sapredmetnim prikazom, tipično formulišu u obliku jedinične doze radi lakše primene i uniformnosti doziranja. Podrazumeva se, međutim, da će o ukupnoj dnevnoj upotrebi kompozicija prema predmetnom prikazu odlučivati ordinirajući lekar, u okviru razumne medicinske procene. Specifičan terapeutski efikasan, profilaktički efikasan ili odgovarajući nivo doze za vizuelizaciju za svakog određenog pacijenta zavisiće od niza faktora uključujući poremećaj koji se leči i ozbiljnost poremećaja; aktivnost specifičnog jedinjenja koje se koristi; specifične kompozicije koja se koristi; starosti, telesne težine, opšteg zdravlja, pola i ishrane pacijenta; vreme primene, ruta primene i brzina izlučivanja specifičnog jedinjenja koje se koristi; trajanje lečenja; lekove koji se koriste u kombinaciji ili istovremeno sa specifičnim upotrebljenim jedinjenjem; i slične faktore koji su dobro poznati u oblasti medicine. U nekim primerima izvođenja, kompleksi i/ili njihove farmaceutske ili profilaktičke kompozicije primenjuju se sistemskom intravenskom injekcijom. U specifičnim primerima izvođenja, kompleksi i/ili njihove farmaceutske ili profilaktičke kompozicije mogu da se primenjuju intravenski i/ili oralno. U određenim slučajevima, proteini ili kompleksi, i/ili njihove farmaceutske, profilaktičke,
4
dijagnostičke ili vizuelizacione kompozicije, mogu da se primenjuju na način koji omogućava proteinu ili kompleksu da prođe krvno-moždanu barijeru, vaskularnu barijeru ili drugu epitelnu barijeru.
[0167] Međutim, predmetni prikaz obuhvata isporuku kompleksa i/ili njihovih farmaceutskih ili profilaktičkih kompozicija, bilo kojim odgovarajućim putem, uzimajući u obzir verovatan napredak u naukama o isporuci lekova.
[0168] Uopšteno govoreći, najprikladniji način primene zavisiće od niza faktora uključujući prirodu kompleksa koji sadrži proteine povezane sa najmanje jednim agensom koji treba da se isporuči (npr. njegova stabilnost u okruženju gastrointestinalnog trakta, krvotok, itd.), stanje pacijenta (npr., da li je pacijent u stanju da toleriše određene puteve primene), itd. Predmetni prikaz obuhvata isporuku farmaceutskih ili profilaktičkih kompozicija bilo kojom odgovarajućom rutom uzimajući u obzir verovatan napredak u nauci o isporuci lekova.
[0169] U određenim primerima izvođenja, kompozicije u skladu sa predmetnim prikazom mogu se davati u nivoima doziranja dovoljnim da isporuče od oko 0,0001 mg/kg do oko 100 mg/kg, od oko 0,01 mg/kg do oko 50 mg/kg, od oko 0,1 mg/kg kg do oko 40 mg/kg, od oko 0,5 mg/kg do oko 30 mg/kg, od oko 0,01 mg/kg do oko 10 mg/kg, od oko 0,1 mg/kg do oko 10 mg/kg, ili od oko 1 mg/kg do oko 25 mg/kg telesne težine subjekta dnevno, jedan ili više puta dnevno, da bi se dobio željeni terapeutski ili profilaktički efekat. Željena doza se može davati tri puta dnevno, dva puta dnevno, jednom dnevno, svaki drugi dan, svaki treći dan, svake nedelje, svake dve nedelje, svake tri nedelje ili svake četiri nedelje. U određenim primerima izvođenja, željena doza se može primeniti korišćenjem višestrukih primena (npr. dve, tri, četiri, pet, šest, sedam, osam, devet, deset, jedanaest, dvanaest, trinaest, četrnaest ili više ordinacija).
[0170] Kompleksi se mogu koristiti u kombinaciji sa jednim ili više drugih terapeutskih, profilaktičkih, dijagnostičkih ili vizuelizacionih sredstava. Pod "kombinacijom sa", nije namera da se implicira da se agensi moraju davati u isto vreme i/ili formulisati za isporuku zajedno, iako su ovi postupci isporuke unutar obima predmetnog prikaza. Kompozicije mogu da se primenjuju istovremeno sa, pre ili posle jednog ili više drugih željenih terapijskih ili medicinskih procedura. U principu, svaki agens će se primenjivati u dozi i/ili prema vremenskom rasporedu koji je određen za taj agens. U nekim primerima izvođenja, predmetni prikaz obuhvata isporuku farmaceutskih, profilaktičkih, dijagnostičkih ili vizuelizacionih kompozicija u kombinaciji sa agensima koji poboljšavaju njihovu bioraspoloživost, smanjuju i/ili modifikuju njihov metabolizam, inhibiraju njihovo izlučivanje i/ili modifikuju njihovu distribuciju u telu.
4
[0171] Dalje će biti cenjeno da terapeutski, profilaktički, dijagnostički ili vizuelizacioni aktivni agensi koji se koriste u kombinaciji mogu da se primenjuju zajedno u jednoj kompoziciji ili da se primenjuju odvojeno u različitim kompozicijama. U principu, očekuje se da se agensi koji se koriste u kombinaciji sa koriste na nivoima koji ne prelaze nivoe na kojima se koriste pojedinačno. U nekim primerima izvođenja, nivoi koji se koriste u kombinaciji biće niži od onih koji se koriste pojedinačno.
[0172] Posebna kombinacija terapija (terapeutika ili procedura) koja se koristi u kombinovanom režimu će uzeti u obzir kompatibilnost željenih terapeutika i/ili procedura i željeni terapeutski efekat koji treba da se postigne. Takođe će biti cenjeno da primenjene terapije mogu postići željeni efekat za isti poremećaj (na primer, kompozicija korisna za lečenje kancera u skladu sa predmetnim prikazom može se davati istovremeno sa hemoterapeutskim agensom), ili mogu postići različite efekte (npr. kontrola svih štetnih efekata).
Kitovi
[0173] Predmetni prikaz obezbeđuje različite kitove za pogodno i/ili efikasno sprovođenje predmetnog prikaza. Kitovi obično sadrže količine i/ili broj komponenti koje su dovoljne da se korisniku omogući da izvrši višestruke tretmane subjekta(a).
[0174] iRNK za korišćenje pronalaska može da bude sadržana u bilo kom od sledećih kitova. U jednom aspektu izvođenje obezbeđuke kitove za proizvodnju proteina, koji sadrže prvu izolovanu nukleinsku kiselinu u skladu za zahtevima, pri čemu je nukleinska kiselina sposobna da izbegne urođeni imunski odgovor ćelije u koju se uvodi prva izolovana nukleinska kiselina, kao i pakovanje i uputstva.
[0175] U nekim primerima izvođenja, iRNK dodatno sadrži najmanje jedan nukleozid odabran iz grupe koja se sastoji od 5-aza-citidina, pseudoisocitidina, 3-metil-citidina, N4-acetilcitidina, 5-formilcitidina, N4-metilcitidina, 5-hidroksimetilcitidina, 1-metilpseudoizocitidina, pirolo-citidina, pirolo-pseudoizocitidina, 2-tio-citidina, 2-tio-5-metilcitidina, 4-tio-pseudoizocitidina, 4-tio-1-metil-pseudoizocitidina, 4-tio-1-metil-1-deazapseudoizocitidina, 1-metil-1-deaza-pseudoizocitidina, zebularina, 5-aza-zebularina, 5-metilzebularina, 5-aza-2-tio-zebularina, 2-tio-zebularina, 2-metoksi-citidina, 2-metoksi-5-metilcitidina, 4-metoksi-pseudoisocitidina, i 4-metoksi-1-metil-pseudoizocitidina.
4
[0176] U nekim primerima izvođenja, iRNK dodatno sadrži najmanje jedan nukleozid odabran iz grupe koja se sastoji od 2-aminopurina, 2, 6-diaminopurina, 7-deaza-adenina, 7-deaza-8-aza-adenina, 7-deaza-2-aminopurina, 7-deaza-8-aza-2-aminopurina, 7-deaza-2,6-diaminopurina, 7-deaza-8-aza-2,6-diaminopurina, 1-metiladenozina, N6-metiladenozina, N6-izopenteniladenozina, N6-(cis-hidroksiizopentenil) adenozina, 2-metiltio-N6-(cishidroksiizopentenil) adenozina, N6-glicinilkarbamoiladenozina, N6-treonilkarbamoiladenozina, 2-metiltio-N6-treonil karbamoiladenozina, N6,N6-dimetiladenozina, 7-metiladenina, 2-metiltio-adenina, i 2-metoksi-adenina.
[0177] U nekim primerima izvođenja, iRNK dodatno sadrži najmanje jedan nukleozid odabran iz grupe koja se sastoji od inozina, 1-metil-inozina, viozina, vibutozina, 7-deazaguanozina, 7-deaza-8-aza-guanozina, 6-tio-guanozina, 6-tio-7-deaza-guanozina, 6-tio-7-deaza-8-aza-guanozina, 7-metil-guanozina, 6-tio-7-metil-guanozina, 7-metilinozina, 6-metoksi-guanozina, 1-metilguanozina, N2-metilguanozina, N2,N2-dimetilguanozina, 8-oksoguanozina, 7-metil-8-okso-guanozina, 1-metil-6-tio-guanozina, N2-metil-6-tio-guanozina i N2,N2-dimetil-6-tio-guanozina.
PRIMERI
[0178] Dodatni opis pronalaska dat je u sledećim primerima, koji ne ograničavaju opseg pronalaska naveden u patentnim zahtevima.
Primer 1. In vitro transkripcija modifikovane iRNK
Materijali i metode
[0179] Molekuli modifikovane iRNK (modRNK) su napravljeni putem standardnih laboratorijskih metoda i materijala za in vitro transkripciju s tim izuzetkom što je smeša nukleotida sadržala modifikovane nukleotide. Otvoreni okvir čitanja (ORF) gena od interesa je oivičen 5' netranslatiranim regionom (UTR) koji sadrži jak Kozak signal za inicijaciju translacije i alfa-globin 3' UTR koji se završava oligo(dT) sekvencom za matrično dodavanje poliA repa za modRNK molekule koji ne inkorporiraju analoge adenozina. ModRNK molekuli koji sadrže adenozin su sintetizovani bez oligo (dT) sekvence da bi se omogućilo
4
post-transkripciono dodavanje poli(A) repa poli (A) polimerazom. ModRNK molekuli su modifikovani inkorporiranjem hemijski modifikovanih nukleotida navedenih u tabeli 3 (dole) tokom in vitro transkripcije sa 100% zamenom odgovarajućeg prirodnog nukleotida ili delimičnom zamenom odgovarajućeg prirodnog nukleotida u naznačenom procentu.
[0180] U tabeli 3 je naveden hemijski identitet svakog hemijski distinktno modifikovanog nukleotida inkorporiranog u modifikovanu iRNK sa brojčanom oznakom za datu hemiju.
Tabela 3
[0181] Agarozna gel elektroforeza modRNK: Individualne modRNK (200-400 ng u zapremini od 20 µl) nanesene su u bunar na nedenaturišući gel 1,2% Agarose E-Gel (Invitrogen, Carlsbad, CA) i puštene 12-15 minuta u skladu sa protokolom proizvođača (SL.
1A). Tabele 4 i 5 u daljem tekstu prikazuju koji je modifikovani nukleotid (tabela 4) ili nukleinska kiselina (tabela 5) nanešen u svakoj koloni. Ovi podaci pokazuju koji su hemijski modifikovani nukleotidi transkribovani u hemijski modifikovane iRNK molekule, kao i kvalitet svake individualne modRNK. Ovi podaci pokazuju da su nukleotidi sa hemijskim modifikacijama na stranama nukleotida gde se nalaze veliki žljeb i mali žljeb bili u stanju da se transkribuju u modRNK.
1
Tabela 4
2 Tabela 5
[0182] Agarozna gel elektroforeza RT-PCR proizvoda: Pojedinačni reverzno transkribovani PCR proizvodi (200-400ng) naneseni su u bunar na nedenaturišući gel 1,2% Agarose E-Gel (Invitrogen, Carlsbad, CA) i pušteni 12-15 minuta prema protokolu proizvođača (SL. 1B). Tabela 5 u tekstu koji sledi pokazuje koji je modifikovani nukleotid nanesen u svakoj koloni.
[0183] Nanodrop kvantifikacija modRNK i podaci UV spektra: modRNK molekuli u TE puferu (1 µl) su korišćeni za očitavanja Nanodrop UV apsorbancije kako bi se kvantifikovao prinos svake modRNK iz reakcije transkripcije in vitro (tragovi UV apsorbance su prikazani na slikama 6A-6L). Ovi podaci pokazuju koji su hemijski modifikovani nukleotidi transkribovani u hemijski modifikovane iRNK molekule. Ovi podaci takođe pokazuju da su nukleotidi sa hemijskim modifikacijama na stranama gde se nalaze veliki žljeb i mali žljeb nukleotida bili u stanju da se transkribuju u modRNK. Ovi podaci dalje pokazuju da su nukleotidi prema predmetnom pronalasku transkripciono kompetentni i kompatibilni sa inkorporacijom u modRNK, koje mogu da imaju izmenjene UV spektre usled prisustva datog modifikovanog nukleotida. Na primer, modRNK molekuli koji sadrže pirolo-C imaju povećanje UV apsorbance na nižoj talasnoj dužini usled prisustva pirolo prstena modifikovanog C nukleotida. U drugom primeru, modRNK molikuli koji sadrže 2-aminoadeninski nukleotid imaju povećanje UV apsorbance na višoj talasnoj dužini usled prisustva egzocikličnog amina izvan purinskog prstena. Nukleotidi koji nisu transkripciono kompetentni i koji ne mogu da se inkorporiraju u modRNK imaju skremblovan UV spektar koji ukazuje na odsustvo proizvoda reakcije transkripcije.
Primer 2. Transfekcija modifikovane RNK
[0184] Reverzna transfekcija: Za eksperimente izvedene na ploči za kulturu tkiva sa 24 bunarčića koji su obloženi kolagenom, keratinociti su zasejani pri gustini ćelija od 1 × 10<5>. Za eksperimente izvedene u ploči za kulturu tkiva sa 96 bunarčića koji su obloženi kolagenom, keratinociti su zasejani pri gustini ćelija od 0,5 × 10<5>. Za svaku modRNK koja se transfektuje, pripremljena je smeša modRNK:RNKiMAX kao što je opisano i pomešana sa ćelijama u ploči sa više bunarčića u vremenskom periodu, npr., 6 sati, od zasejavanja ćelija, pre nego što su ćelije adherirale na ploču za gajenje tkiva.
[0185] Direktna transfekcija: U ploču za kulturu tkiva sa 24 bunarčića koji su obloženi kolagenom, keratinociti su zasejani pri gustini ćelija od 0,7 × 10<5>. Za eksperimente izvedene u ploči za kulturu tkiva sa 96 bunarčića koji su obloženi kolagenom, keratinociti su zasejani pri gustini ćelija od 0,3 × 10<5>. Keratinociti su zatim gajeni do konfluentnosti od >70% tokom više od 24 sata. Za svaku modRNK koja se transfektuje, pripremljena je smeša modRNK:
4
RNKiMAX kao što je opisano i transfektovana na ćelije u ploči sa više bunarčića tokom 24 sata nakon zasejavanja ćelija i adhezije na ploču za kulturu tkiva.
Skrining modRNK translacije: G-CSF ELISA
[0186] SL. 2A i 2B prikazuju enzimski imunosorbentni test (ELISA) za humani faktor stimulacije kolonija granulocita (hu-G-CSF) in vitro transfektovanih ćelija Human Keratinocyte. Keratinociti su gajeni u EpiLife medijumu sa suplementom S7 kompanije Invitrogen, pri konfluenciji od >70%. Keratinociti sa SL. 2A su reverzno transfektovani sa 300 ng naznačene hemijski modifikovane iRNK u kompleksu sa RNKiMAX kompanije Invitrogen. Keratinociti sa SL. 2B su direktno transfektovani sa 300 ng modRNK u kompleksu sa RNKiMAX kompanije Invitrogen. RNK:RNKiMAX kompleks je formiran tako što je najpre inkubirana RNK sa medijumom bez suplementa Supplement-free EpiLife u 5X volumetrijskom razblaženju, 10 minuta na sobnoj temperaturi. U drugoj bočici, RNKiMAX reagens je inkubiran sa medijumom bez suplementa Supplement-free EpiLife Media u 10X volumetrijskom razblaženju, 10 minuta na sobnoj temperaturi. Bočica sa RNK je zatim pomešana sa bočicom sa RNKiMAX i inkubirana 20-30 na sobnoj temperaturi pre nego što je dodata ćelijama u kapima. Koncentracija izlučenog huG-CSF u medijumu za gajenje izmerena je 18 sati nakon transfekcije za svaku od hemijski modifikovanih iRNK u triplikatu. Sekrecija humanog faktora stimulacije kolonija granulocita (G-CSF) iz transfektovanih humanih keratinocita je kvantifikovana pomoću ELISA kitova kompanija Invitrogen ili R&D Systems (Minneapolis, MN) prateći preporučena uputstva proizvođača. Ovi podaci pokazuju da su huG-CSF modRNK molekuli sačinjeni od hemijski distinktnih nukleotidnih analoga (SEQ ID NO: 2) u stanju da se translatiraju u ćelijama Human Keratinocyte i da se huG-CSF transportuje izvan ćelija i oslobađa u ekstracelularnu sredinu. Ovi podaci pokazuju koji modifikovani nukleotidi se translatiraju u protein kada su inkorporirani u hemijski modifikovanu iRNK. Ovi podaci pokazuju da modifikovana RNK koja sadrži nukleotide sa hemijskim modifikacijama na strani pirimidinskih analoga gde se nalazi veliki žljeb, imaju najviše nivoe izlučenog hu-G-CSF u medijumu za gajenje ćelija.
modRNK doza i trajanje: G-CSF ELISA
[0187] SL. 3A-N prikazuju enzimske imunosorbentne testove (ELISA) za humani faktor stimulacije kolonija granulocita (G-CSF) in vitro transfektovanih ćelija Human Keratinocyte. Keratinociti su gajeni u EpiLife medijumu sa suplementom S7 kompanije Invitrogen, pri konfluenciji od >70%. Keratinociti su reverzno transfektovani sa 0ng, 46,875ng, 93,75ng, 187,5ng, 375ng, 750ng ili 1500ng modRNK u kompleksu sa RNKiMAX kompanije Invitrogen. modRNK:RNKiMAX je formiran kao što je opisano. Koncentracija izlučenog huG-CSF u medijumu za gajenje merena je 0, 6, 12, 24 i 48 sati nakon transfekcije za svaku koncentraciju svake od modRNK u triplikatu. Sekrecija humanog faktora stimulacije kolonije granulocita (G-CSF) iz transfektovanih humanih keratinocita je kvantifikovana pomoću ELISA kitova kompanija Invitrogen ili R&D Systems, prateći preporučena uputstva proizvođača. Ovi podaci pokazuju da su huG-CSF modRNK molekuli sačinjeni od hemijski distinktnih nukleotidnih analoga (SEQ ID NO: X i tabela 6) izlučivali hu-G-CSF protein na način zavisan od doze modRNK iz ćelija Human Keratinocyte i da se huG-CSF transportuje izvan ćelije i oslobađa u ekstracelularnu sredinu. Ovi podaci pokazuju koji modifikovani RNK molekuli koji sadrže modifikovane nukleotidne analoge najduže i u najvišim nivoiuma održavaju ekspresiju hu-G-CSF. Ovi podaci pokazuju da modifikovana RNK koja sadrži modifikovane nukleotide sa hemijskim modifikacijama na strani pirimidinskih analoga gde se nalazi veliki žljeb, imaju najviše nivoe izlučenog hu-G-CSF u ćelijskom medijumu za gajenje i da 750ng modRNK dovodi do najvišeg nivoa izlučenog hu-G-CSF.
Primer 3. Ćelijski urođeni imunski odgovor na modRNK
IFN-β ELISA i TNF-α ELISA:
[0188] SL. 4A-F prikazuju enzimski imunosorbentni test (ELISA) humani faktor nekroze tumora-α (TNF-α) (SL. 4A i 4B); humani interferon-β (IFN-β) (SL. 4C i 4D); i za humani faktor stimulacije kolonija granulocita (G-CSF) (SL. 4E i 4F) izlučene iz in vitro transfektovanih ćelija Human Keratinocyte. Keratinociti su gajeni u EpiLife medijumu sa suplementom kompanije Invitrogen, Human Keratinocyte Growth Supplement u odsustvu hidrokortizona, pri konfluenciji od >70%. Na SL. 4A i 4B, keratinociti su reverzno transfektovani u triplikatu sa 0ng, 93,75ng, 187,5ng, 375ng, 750ng, 1500ng ili 3000ng naznačene hemijski modifikovane iRNK u kompleksu sa RNKiMAX kompanije Invitrogen, kao što je opisano. Izlučeni TNF-α u medijumu kulture je izmeren 24 sata nakon transfekcije za svaki od hemijski modifikovanih iRNK molekula, pomoću ELISA kita kompanije Invitrogen, prema protokolima proizvođača.
[0189] Na SL.4C i 4D, izlučeni IFN-β u istom medijumu za gajenje je meren 24 sata nakon transfekcije, za svaki od hemijski modifikovanih iRNK molekula pomoću ELISA kita kompanije Invitrogen u skladu sa protokolima proizvođača. Na SL. 4E i 4F, koncentracija izlučenog hu-G-CSF u istom medijumu za gajenje merena je 24 sata nakon transfekcije za svaki od hemijski modifikovanih iRNK molekula. Sekrecija humanog faktora stimulacije kolonija granulocita (G-CSF) iz transfektovanih humanih keratinocita je kvantifikovana pomoću ELISA kita kompanija Invitrogen ili R&D Systems (Minneapolis, MN) u skladu sa preporučenim uputstvima proizvođača. Ovi podaci pokazuju koje modifikovane RNK koje sadrže modifikovane nukleotide su bile sposobne da izazovu smanjeni ćelijski urođeni imunski odgovor u poređenju sa prirodnim i drugim hemijski modifikovanim nukleotidima merenjem tipičnih citokina tipa I, TNF-α i IFN-β. Ovi podaci pokazuju da modifikovani RNK molekuli koji sadrže modifikovane nukleotide sa hemijskim modifikacijama na strani pirimidinskih analoga gde se nalazi veliki žljeb, imaju najniže nivoe izlučenog TNF-α i IFN-β u medijum ćelijske kulture, pri čemu u isto vreme održavaju visoke nivoe sekrecije hu-G-CSF kodiranog od strane modRNK u medijum ćelijske kulture.
Primer 4. Test za ćelijsku proliferaciju indukovanu modifikovanom RNK za humani faktor stimulacije kolonija granulocita
[0190] SL. 5A-D prikazuju da hu-G-CSF kodiran od strane modRNK, koga proizvodi sloj ćelija hranilica humanih keratinocita, indukuje proliferaciju humanih mijeloblastnih ćelija KG-1 i Kasumi-1 koje eksprimiraju G-CSF-receptor, pri čemu su ćelijske populacije razdvojene semi-permeabilnom membranom.
[0191] Humani keratinociti su gajeni u EpiLife medijumu sa suplementom S7 kompanije Invitrogen, Human Keratinocyte Growth Supplement u odsustvu hidrokortizona pri konfluenciji od >70% u Transwell<®>(Corning, Lowell, MA) ploči za gajenje ko-kulture tkiva sa 24 bunarčića koji su obloženi kolagenom. Keratinociti su reverzno transfektovani sa 750ng naznačene hemijski modifikovane iRNK u kompleksu sa RNKiMAX kompanije Invitrogen, kao što je opisano, u triplikatu. Kompleks modRNK:RNKiMAX je obrazovan kao što je opisano. Medijum za keratinocite je menjan 6-8 sati nakon transfekcije. 42 sata nakon transfekcije, umetak za Transwell<®>ploču sa 24 bunarčića sa semipermeabilnom poliestarskom membranom sa porama od 0,4µm stavljen je u ploču za gajenje sa hu-G-CSF modRNK-transfektovanim keratinocitima. SL. 5A je tabela koja pokazuje rezultate enzimskog imunosorbentnog testa (ELISA) za humani G-CSF izlučen iz in vitro transfektovanih Human Keratinocyte ćelija koje su uzorkovane iz individualnih bunarčića u ploči za ko-kulturu tkiva sa 24 bunarčića, 42 sata nakon transfekcije sa 750ng svake naznačene hu-G-CSF-kodirajuće modRNK.
[0192] Humane mijeloblastne ćelije, Kasumi-1 (SL. 5C) ili KG-1 ćelije (SL. 5D) (0,2 × 10<5>ćelija) zasejane su u bunarčić sa umetkom i ćelijska proliferacija je kvantifikovana 42 sata nakon inicijacije ko-kulture, pomoću testa CyQuant Direct Cell Proliferation Assay (Invitrogen) u zapremini od 100-120 µl u ploči sa 96 bunarčića. Proliferacija mijeloblastnih ćelija indukovana pomoću hu-G-CSF kodiranog od strane modRNK, izražena je kao procentualna ćelijska proliferacija normalizovana u odnosu na kontrolne bunarčiće sa kokulturom netransfektovanih keratinocita/mijeloblasta. Koncentracija izlučenog hu-G-CSF u bunarčićima sa ko-kulturama, kako sa umetkom keratinocita, tako i sa umetkom mijeloblasta, merena je 42 sata nakon inicijacije ko-kulture, za svaku modRNK u duplikatu. Sekrecija humanog faktora stimulacije kolonija granulocita (G-CSF) je kvantifikovana pomoću ELISA kita kompanije Invitrogen, prema preporučnim uputstvima proizvođača.
[0193] Transfektovane modRNK za hu-G-CSF u ćelijama hranilicama humanih keratinocita i netransfektovanim humanim mijeloblastnim ćelijama, detektovane su pomoću RT-PCR. Ukupna RNK iz ćelija uzorka je ekstrahovana i lizirana pomoću kita RNeasy (Qiagen, Valencia, CA), prateći uputstva proizvođača. Ekstrahovana ukupna RNK je podvrgnuta RT-PCR reakciji u cilju specifične amplifikacije modRNK-G-CSF, pomoću kita ProtoScript<®>M-MuLV Taq RT-PCR (New England BioLabs, Ipswich, MA), prateći uputstva proizvođača, sa hu-G-CSF-specifičnim prajmerima (videti u tekstu koji sledi). Proizvodi RT-PCR reakcije su vizuelizovani 1,2% agaroznom gel elektroforezom (SL. 5B). Tabela 6 koja sledi, pokazuje koji su modRNK molekuli pušteni na agaroznom gelu.
Tabela 6
[0194] Ovi podaci pokazuju da ćelije humanih keratinocita koje sadrže hu-G-CSF modRNK molekule koji se sastoje od hemijski različitih analoga nukleotida luče hu-G-CSF protein i da je izlučeni hu-G-CSF fiziološki aktivan u izazivanju proliferacije humanih ćelija mijeloblasta koje eksprimiraju G-CSF receptor. Ovi podaci takođe pokazuju da izlučeni protein hu-G-CSF može da prolazi kroz semi-permeabilnu membranu i da deluje na različitu ćelijsku populaciju koja ne proizvodi G-CSF. Pored toga, ovi podaci pokazuju da je hu-G-CSF modRNK-transfektovana u ćelije humanih keratinocita u okruženju ko-kulture bila prisutna samo u transfektovanim ćelijama keratinocita, a ne u netransfektovanim ćelijama mijeloblasta. Dalje, ovi podaci pokazuju da hemijski sastav modifikovanih nukleotida hu-G-CSF modRNK nije uticao na rezultujuću aktivnost proteina.
Primer 5. Efekat modRNK na ćelijsku vijabilnost
Citotoksičnost i apoptoza:
[0195] Ovaj eksperiment pokazuje ćelijsku vijabilnost, citotoksičnost i apoptozu za Human Keratinocyte ćelije in vitro transfektovane distinktnom modRNK. Keratinociti su gajeni u EpiLife medijumu sa suplementom kompanije Invitrogen, Human Keratinocyte Growth Supplement u odsustvu hidrokortizona pri konfluenciji od >70%. Keratinociti su reverzno transfektovani sa 0ng, 46,875ng, 93,75ng, 187,5ng, 375ng, 750ng, 1500ng, 3000ng, ili 6000ng modRNK kompleksovane sa RNKiMAX kompanije Invitrogen. Obrazovan je kompleks modRNK:RNKiMAX. Koncentracija sekretovanog huG-CSF u medijumu za gajenje je merena 0, 6, 12, 24 i 48 sati nakon transfekcije za svaku koncentraciju svake modRNK u triplikatu. Sekrecija humanog faktora stimulacije kolonija granulocita (G-CSF) iz transfektovanih humanih keratinocita je kvantifikovana pomoću ELISA kita kompanije Invitrogen ili kompanije R&D Systems prateći preporučena uputstva proizvođača. Ćelijska vijabilnost, citotoksičnost i apoptoza su merene 0, 12, 48, 96 i 192 sata nakon transfekcije pomoću kita ApoToxGlo kompanije Promega (Madison, WI) u skladu sa uputstvima proizvođača.
Primer 6. Ko-kultura
[0196] Modifikovana iRNK koju čine hemijski distinktni modifikovani nukleotidi koji kodiraju humani faktor stimulacije kolonija granulocita (G-CSF) može da stimuliše ćelijsku proliferaciju transfekciono inkompetentnih ćelija u okruženju ko-kulture. Ko-kultura uključuje vrlo transfektabilne tipove ćelija kao što su humani keratinociti i transfekciono inkompetentan tip ćelija, kao što su bela krvna zrnca (WBC). Modifikovana iRNK koja kodira G-CSF može da se transfektuje u vrlo transfektabilnu ćeliju čime omogućava proizvodnju i sekreciju G-CSF proteina u ekstracelularnu sredinu gde G-CSF deluje na način sličan parakrinom delovanju kako bi stimulisao proliferaciju belih krvnih zrnaca koja eksprimiraju G-CSF receptor. Uvećana populacija WBC može da se koristi za lečenje imunokompromitovanih pacijenata ili za delimičnu rekonstituciju WBC populacije kod imunosuprimiranog pacijenta, što smanjuje rizik od oportunih infekcija.
[0197] Drugi primer, vrlo transfektabilna ćelija kao što je fibroblast može da bude transfektovana sa izvesnim faktorima rasta koji podržavaju i stimulišu rast, održavanje ili diferencijaciju slabo transfektabilnih embrionskih matičnih ćelija ili indukovanih pluripotentnih matičnih ćelija.
Primer 7. Dodavanje kape na 5'-guanozin na modifikovanim nukleinskim kiselinama (modRNK molekulima)
[0198] Kloniranje, sintezu gena i sekvenciranje vektora izvršio je DNA2.0 Inc. (Menlo Park, CA). Sekvenca i inserirana sekvenca su ovde navedene. ORF je obrađen restriktivnom digestijom pomoću Xbal i korišćen za sintezu cDNA putem tail PCR i ne-tail PCR tehnike. cDNA proizvod tail-PCR reakcije je korišćen kao matrica za reakciju sinteze modifikovane iRNK upotrebom 25 mM smeše svakog modifikovanog nukleotida (svi modifikovani nukleotidi su sintetisani po narudžbini ili kupljeni od TriLink Biotech, San Diego, CA osim pirolo-C trifosfata koji je kupljen od firme Glen Research, Sterling VA; nemodifikovani nukleotidi su kupljeni od firme Epicenter Biotechnologies, Madison, WI) i CellScript MegaScript™ (Epicenter Biotechnologies, Madison, WI) kita za sintezu kompletne iRNK. Reakcija in vitro transkripcije se odvijala 4 sata na 37°C. modRNK molekulima sa inkorporiranim analozima adenozina dodat je poli (A) rep pomoću poli (A) polimeraze kvasca (Affymetrix, Santa Clara, CA). Za PCR reakcije je korišćena master smeša HiFi PCR 2X Master Mix<™>(Kapa Biosystems, Woburn, MA). modRNK molekulima je posttranskripciono dodata kapa korišćenjem rekombinantnog enzima Vaccinia Virus Capping Enzyme (New England BioLabs, Ipswich, MA) i rekombinantne 2'-O-metiltransferaze
1
(Epicenter Biotechnologies, Madison, WI) da bi se obrazovala 5'-guanozin Cap1 struktura. Cap 2 struktura i Cap 3 strukture mogu da se obrazuju pomoću dodatnih 2'-O-metiltransferaza. In vitro transkribovani iRNK proizvod je stavljen na agarozni gel i vizuelizovan. modRNK je prečišćena pomoću kita za prečišćavanje Ambion/Applied Biosystems (Austin, TX) MEGAClear RNK<™>. Za PCR se koristio kit za prečišćavanje PCR PureLink<™>(Invitrogen, Carlsbad, CA). Proizvod je kvantifikovan na instrumentu Nanodrop<™>UV Absorbance (ThermoFisher, Waltham, MA). Kvalitet, kvalitet UV apsorpcije i vizualizacija proizvoda izvedena je na 1,2% agaroznom gelu. Proizvod je resuspendovan u TE puferu.
Dodavanje 5' kape na strukturu modifikovane nukleinske kiseline (iRNK):
[0199] Dodavanje kape na 5'-modRNK može da se završi istovremeno sa odvijanjem reakcije in vitro-transkripcije pomoću sledećih RNK analoga kape, kako bi se obrazovala struktura 5'-guanozin kape u skladu sa protokolima proizvođača: 3'-0-Me-m<7>G(5')ppp(5')G; G(5')ppp(5')A; G(5')ppp(5')G; m<7>G(5')ppp(5')A; m<7>G(5')ppp(5')G (New England BioLabs, Ipswich, MA). Dodavanje kape na 5'-modRNK može da se završi i post-transkripciono pomoću enzima Vaccinia Virus Capping Enzyme kako bi se obrazovala "Cap 0" struktura: m<7>G(5')ppp(5')G (New England BioLabs, Ipswich, MA). Cap 1 struktura može da se obrazuje i pomoću enzima Vaccinia Virus Capping Enzyme i 2'-O metil-transferaze kako bi nastao: m7G(5')ppp(5')G-2'-O-metil. Cap 2 struktura može da se obrazuje od Cap 1 strukture koju prati 2'-O-metilacija 5'-antepenultimativnog nukleotida pomoću 2'-O metil-transferaze. Cap 3 struktura može da se obrazuje od Cap 2 strukture koju prati 2'-O-metilacija 5'-preantepenultimativnog nukleotida pomoću 2'-O metil-transferaze. Enzimi se poželjno dobijaju iz rekombinantnog izvora.
Sekvence:
[0200] G-CSF cDNA:
2
Prajmeri za cDNA sintezu:
Direktni prajmer: 5'- TTG GAC CCT CGT ACA GAA GCT AAT ACG (SEQ ID NO: 4)
Reverzni prajmer za matrično dodavanje Poli (A) repa: 5'- T(120)CT TCC TAC TCA GGC TTT ATT CAA AGA CCA (SEQ ID NO: 5)
Reverzni prajmer za posttranskripciono dodavanje Poli (A) repa polimerazom: 5'-CTT CCT ACT CAG GCT TTA TTC AAA GAC CA (SEQ ID NO: 6)
G-CSF modRNK RT-PCR prajmeri:
Direktni prajmer: 5'- TGG CCG GTC CCG CGA CCC AA (SEQ ID NO: 7)
Reverzni prajmer: 5'- GCT TCA CGG CTG CGC AAG AT (SEQ ID NO: 8)
DRUGI PRIMERI IZVOĐENJA
[0201] Treba imati u vidu da je objašnjenje pronalaska dato u kombinaciji sa detaljnim opisom, ali prethodno naveden opis ilustruje, ali ne ograničava, opseg pronalaska definisan opsegom priloženih patentnih zahteva. Drugi aspekti, prednosti i modifikacije obuhvaćeni su opsegom zahteva navedenih u nastavku.
4

Claims (4)

Patentni zahtevi
1. iRNK koja obuhvata 1-metil-pseudouridin za primenu u lečenju, pri čemu je 100% nukleozida koji sadrže uracil u iRNK zamenjeno nukleozidima koji sadrža N1-metilpseudouridin.
2. iRNK za primenu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu se primena odnosi na lečenje ili prevenciju bolesti ili stanja kod sisara.
3. iRNK za primenu prema nekom od prethodnih patentnih zahteva, pri čemu se primena odnosi na lečenje ili prevenciju bolesti ili stanja kod ljudi.
4. iRNK za primenu prema nekom od prethodnih patentnih zahteva, pri čemu se iRNK može dobiti in vitro transkripcijom i pri čemu su N1-metil-pseudouridin-fosfat, ATP, CTP i GTP jedini NTP koji se koriste za pripremu iRNK u in vitro transkripciji.
RS20241417A 2010-10-01 2011-10-03 Modifikovani nukleosidi, nukleotidi i nukleinske kiseline i njihove primene RS66304B1 (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US40441310P 2010-10-01 2010-10-01
EP22173763.8A EP4108671B1 (en) 2010-10-01 2011-10-03 Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS66304B1 true RS66304B1 (sr) 2025-01-31

Family

ID=45893552

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20241417A RS66304B1 (sr) 2010-10-01 2011-10-03 Modifikovani nukleosidi, nukleotidi i nukleinske kiseline i njihove primene
RS20220707A RS63430B1 (sr) 2010-10-01 2011-10-03 Ribonukleinske kiseline koje sadrže n1-metil-pseudouracile i njihove primene

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20220707A RS63430B1 (sr) 2010-10-01 2011-10-03 Ribonukleinske kiseline koje sadrže n1-metil-pseudouracile i njihove primene

Country Status (27)

Country Link
US (12) US20120237975A1 (sr)
EP (8) EP2857499A1 (sr)
JP (1) JP2013543381A (sr)
CN (3) CN104531812A (sr)
AU (2) AU2011308496A1 (sr)
BR (1) BR112013007862A2 (sr)
CA (3) CA2813466A1 (sr)
CY (1) CY1125421T1 (sr)
DE (1) DE19177059T1 (sr)
DK (2) DK3590949T3 (sr)
ES (4) ES3005233T3 (sr)
FI (1) FI4108671T3 (sr)
HR (2) HRP20241701T1 (sr)
HU (2) HUE058896T2 (sr)
IL (1) IL225493A0 (sr)
LT (2) LT4108671T (sr)
MX (1) MX2013003681A (sr)
NZ (1) NZ608972A (sr)
PL (2) PL3590949T3 (sr)
PT (2) PT3590949T (sr)
RS (2) RS66304B1 (sr)
RU (1) RU2013120302A (sr)
SG (2) SG10201508149TA (sr)
SI (2) SI3590949T1 (sr)
SM (2) SMT202400513T1 (sr)
WO (2) WO2012045075A1 (sr)
ZA (2) ZA201303161B (sr)

Families Citing this family (252)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10347710B4 (de) 2003-10-14 2006-03-30 Johannes-Gutenberg-Universität Mainz Rekombinante Impfstoffe und deren Verwendung
US9012219B2 (en) 2005-08-23 2015-04-21 The Trustees Of The University Of Pennsylvania RNA preparations comprising purified modified RNA for reprogramming cells
DE102005046490A1 (de) 2005-09-28 2007-03-29 Johannes-Gutenberg-Universität Mainz Modifikationen von RNA, die zu einer erhöhten Transkriptstabilität und Translationseffizienz führen
PL3338765T3 (pl) 2009-12-01 2019-06-28 Translate Bio, Inc. Pochodna steroidowa dla dostarczania mrna w ludzkich chorobach genetycznych
KR101878502B1 (ko) 2009-12-07 2018-07-13 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실바니아 세포 리프로그래밍을 위한 정제된 변형 ｒｎａ를 포함하는 ｒｎａ 제제
WO2012000104A1 (en) 2010-06-30 2012-01-05 Protiva Biotherapeutics, Inc. Non-liposomal systems for nucleic acid delivery
ES2646669T3 (es) 2010-07-06 2017-12-14 Glaxosmithkline Biologicals Sa Procedimientos de aumento de una respuesta inmunitaria mediante el suministro de ARN
SI2591114T1 (sl) 2010-07-06 2016-10-28 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Imunizacija velikih sesalcev z majhnimi odmerki RNA
AU2011276234B2 (en) 2010-07-06 2016-02-25 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Liposomes with lipids having an advantageous pKa- value for RNA delivery
CA2807552A1 (en) 2010-08-06 2012-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
WO2012031043A1 (en) 2010-08-31 2012-03-08 Novartis Ag Pegylated liposomes for delivery of immunogen-encoding rna
ES3005233T3 (en) 2010-10-01 2025-03-14 Modernatx Inc Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
EP3520813B1 (en) 2010-10-11 2023-04-19 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Antigen delivery platforms
US8853377B2 (en) 2010-11-30 2014-10-07 Shire Human Genetic Therapies, Inc. mRNA for use in treatment of human genetic diseases
TWI719112B (zh) * 2011-03-16 2021-02-21 賽諾菲公司 雙重ｖ區類抗體蛋白質之用途
JP2014511687A (ja) 2011-03-31 2014-05-19 モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッド 工学操作された核酸の送達および製剤
PL3892295T3 (pl) 2011-05-24 2023-07-24 BioNTech SE Zindywidualizowane szczepionki przeciwnowotworowe
PT2717893T (pt) 2011-06-08 2019-08-20 Translate Bio Inc Composições de nanopartículas lipídicas e métodos para transferência de arnm
EP3854413A1 (en) 2011-07-06 2021-07-28 GlaxoSmithKline Biologicals SA Immunogenic combination compositions and uses thereof
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
EP2763701B1 (en) 2011-10-03 2018-12-19 Moderna Therapeutics, Inc. Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
RU2691027C2 (ru) 2011-12-05 2019-06-07 Фэктор Байосайенс Инк. Способы и препараты для трансфекции клеток
US8497124B2 (en) 2011-12-05 2013-07-30 Factor Bioscience Inc. Methods and products for reprogramming cells to a less differentiated state
EP2791362B1 (en) 2011-12-12 2019-07-03 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Proteins comprising mrsa pbp2a and fragments thereof, nucleic acids encoding the same, and compositions and their use to prevent and treat mrsa infections
JP2015501844A (ja) 2011-12-16 2015-01-19 モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドＭｏｄｅｒｎａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ． 修飾ヌクレオシド、ヌクレオチドおよび核酸組成物
WO2013143555A1 (en) 2012-03-26 2013-10-03 Biontech Ag Rna formulation for immunotherapy
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
WO2013151663A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 modeRNA Therapeutics Modified polynucleotides for the production of membrane proteins
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US9254311B2 (en) 2012-04-02 2016-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of proteins
WO2013185067A1 (en) 2012-06-08 2013-12-12 Shire Human Genetic Therapies, Inc. Nuclease resistant polynucleotides and uses thereof
WO2013185069A1 (en) 2012-06-08 2013-12-12 Shire Human Genetic Therapies, Inc. Pulmonary delivery of mrna to non-lung target cells
WO2014028429A2 (en) 2012-08-14 2014-02-20 Moderna Therapeutics, Inc. Enzymes and polymerases for the synthesis of rna
EP2914728B1 (en) 2012-11-01 2020-07-08 Factor Bioscience Inc. Methods and products for expressing proteins in cells
ES2921623T3 (es) 2012-11-26 2022-08-30 Modernatx Inc ARN modificado terminalmente
EP2925348B1 (en) 2012-11-28 2019-03-06 BioNTech RNA Pharmaceuticals GmbH Individualized vaccines for cancer
EP2931319B1 (en) 2012-12-13 2019-08-21 ModernaTX, Inc. Modified nucleic acid molecules and uses thereof
JP2016504050A (ja) 2013-01-17 2016-02-12 モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドＭｏｄｅｒｎａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ． 細胞表現型の改変のためのシグナルセンサーポリヌクレオチド
US10066238B2 (en) * 2013-02-11 2018-09-04 University Of Louisville Research Foundation, Inc. Methods for producing antibodies
US20160024181A1 (en) 2013-03-13 2016-01-28 Moderna Therapeutics, Inc. Long-lived polynucleotide molecules
ES2882110T3 (es) * 2013-03-14 2021-12-01 Translate Bio Inc Métodos y composiciones para administrar anticuerpos codificados con ARNm
ES2981185T3 (es) 2013-03-14 2024-10-07 Translate Bio Inc Métodos para la purificación de ARN mensajero
US10258698B2 (en) 2013-03-14 2019-04-16 Modernatx, Inc. Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions
EP2968586B1 (en) 2013-03-14 2018-07-25 Translate Bio, Inc. Cftr mrna compositions and related methods and uses
EP4614148A3 (en) 2013-03-15 2025-12-17 Translate Bio, Inc. Synergistic enhancement of the delivery of nucleic acids via blended formulations
EP2971033B8 (en) 2013-03-15 2019-07-10 ModernaTX, Inc. Manufacturing methods for production of rna transcripts
EP2971161B1 (en) 2013-03-15 2018-12-26 ModernaTX, Inc. Ribonucleic acid purification
EP2983804A4 (en) 2013-03-15 2017-03-01 Moderna Therapeutics, Inc. Ion exchange purification of mrna
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
US10077439B2 (en) 2013-03-15 2018-09-18 Modernatx, Inc. Removal of DNA fragments in mRNA production process
DE102013005361A1 (de) 2013-03-28 2014-10-02 Eberhard Karls Universität Tübingen Medizinische Fakultät Polyribonucleotid
WO2014180490A1 (en) 2013-05-10 2014-11-13 Biontech Ag Predicting immunogenicity of t cell epitopes
HUE056760T2 (hu) 2013-07-11 2022-03-28 Modernatx Inc A CRISPR-hez kapcsolódó fehérjéket és a szintetikus SGRNS-ket kódoló szintetikus polinukleotidokat tartalmazó készítmények és felhasználási módjaik
WO2015034925A1 (en) 2013-09-03 2015-03-12 Moderna Therapeutics, Inc. Circular polynucleotides
WO2015048744A2 (en) 2013-09-30 2015-04-02 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
WO2015051169A2 (en) 2013-10-02 2015-04-09 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotide molecules and uses thereof
KR20160067219A (ko) 2013-10-03 2016-06-13 모더나 세라퓨틱스, 인코포레이티드 저밀도 지단백질 수용체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드
CA2928040A1 (en) 2013-10-22 2015-04-30 Shire Human Genetic Therapies, Inc. Cns delivery of mrna and uses thereof
WO2015061467A1 (en) 2013-10-22 2015-04-30 Shire Human Genetic Therapies, Inc. Lipid formulations for delivery of messenger rna
MX2016005239A (es) 2013-10-22 2016-08-12 Shire Human Genetic Therapies Tratamiento con acido ribonucleico mensajero para la fenilcetonuria.
US11224642B2 (en) 2013-10-22 2022-01-18 Translate Bio, Inc. MRNA therapy for argininosuccinate synthetase deficiency
EP3082760A1 (en) 2013-12-19 2016-10-26 Novartis AG LEPTIN mRNA COMPOSITIONS AND FORMULATIONS
CN105940110A (zh) 2014-01-31 2016-09-14 菲克特生物科学股份有限公司 用于核酸产生和递送的方法和产品
DK3134131T3 (en) 2014-04-23 2022-02-07 Modernatx Inc Nucleic acid vaccines
JP6571679B2 (ja) 2014-04-25 2019-09-04 トランスレイト バイオ， インコーポレイテッド メッセンジャーｒｎａの精製方法
US10022455B2 (en) 2014-05-30 2018-07-17 Translate Bio, Inc. Biodegradable lipids for delivery of nucleic acids
WO2015196128A2 (en) 2014-06-19 2015-12-23 Moderna Therapeutics, Inc. Alternative nucleic acid molecules and uses thereof
CA2952824C (en) 2014-06-24 2023-02-21 Shire Human Genetic Therapies, Inc. Stereochemically enriched compositions for delivery of nucleic acids
CA2953265C (en) 2014-07-02 2023-09-26 Shire Human Genetic Therapies, Inc. Encapsulation of messenger rna
CA2955238A1 (en) 2014-07-16 2016-01-21 Moderna Therapeutics, Inc. Circular polynucleotides
WO2016045732A1 (en) 2014-09-25 2016-03-31 Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh Stable formulations of lipids and liposomes
GB201418965D0 (sr) * 2014-10-24 2014-12-10 Ospedale San Raffaele And Fond Telethon
WO2016077125A1 (en) 2014-11-10 2016-05-19 Moderna Therapeutics, Inc. Alternative nucleic acid molecules containing reduced uracil content and uses thereof
MA56412A (fr) 2014-12-05 2022-05-04 Translate Bio Inc Thérapie par l'arn messager pour le traitement des maladies articulaires
WO2016128060A1 (en) 2015-02-12 2016-08-18 Biontech Ag Predicting t cell epitopes useful for vaccination
WO2016131052A1 (en) 2015-02-13 2016-08-18 Factor Bioscience Inc. Nucleic acid products and methods of administration thereof
WO2016130943A1 (en) 2015-02-13 2016-08-18 Rana Therapeutics, Inc. Hybrid oligonucleotides and uses thereof
WO2016149508A1 (en) 2015-03-19 2016-09-22 Shire Human Genetic Therapies, Inc. Mrna therapy for pompe disease
DK3294885T3 (da) 2015-05-08 2020-08-10 Curevac Real Estate Gmbh Fremgangsmåde til at fremstille rna
PL4108769T3 (pl) 2015-05-29 2024-02-05 CureVac Manufacturing GmbH Sposób wytwarzania i oczyszczania rna obejmujący co najmniej jeden etap filtracji o przepływie stycznym
MA42502A (fr) 2015-07-21 2018-05-30 Modernatx Inc Vaccins contre une maladie infectieuse
US11364292B2 (en) 2015-07-21 2022-06-21 Modernatx, Inc. CHIKV RNA vaccines
WO2017020026A1 (en) 2015-07-30 2017-02-02 Modernatx, Inc. Concatemeric peptide epitopes rnas
US11564893B2 (en) 2015-08-17 2023-01-31 Modernatx, Inc. Methods for preparing particles and related compositions
WO2017049286A1 (en) 2015-09-17 2017-03-23 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides containing a morpholino linker
SI3350333T1 (sl) 2015-09-17 2022-04-29 ModernaTX,Inc. Polinukleotidi, ki zajemajo stabilizacijsko repno regijo
EP3359670B2 (en) 2015-10-05 2024-02-14 ModernaTX, Inc. Methods for therapeutic administration of messenger ribonucleic acid drugs
WO2017059902A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh 3' utr sequences for stabilization of rna
CN108473969B9 (zh) 2015-10-14 2024-08-23 川斯勒佰尔公司 用于增强生产的rna相关酶的修饰
WO2017070601A1 (en) 2015-10-22 2017-04-27 Modernatx, Inc. Nucleic acid vaccines for varicella zoster virus (vzv)
EP3364981A4 (en) 2015-10-22 2019-08-07 ModernaTX, Inc. VACCINE AGAINST THE HUMAN CYTOMEGALOVIRUS
MD3718565T2 (ro) 2015-10-22 2022-09-30 Modernatx Inc Vaccinuri împotriva virusului respirator
EP3364950A4 (en) 2015-10-22 2019-10-23 ModernaTX, Inc. VACCINES AGAINST TROPICAL DISEASES
CN108430456B (zh) 2015-10-22 2022-01-18 摩登纳特斯有限公司 癌症疫苗
AU2016342376A1 (en) 2015-10-22 2018-06-07 Modernatx, Inc. Sexually transmitted disease vaccines
US12318489B2 (en) 2015-10-26 2025-06-03 Translate Bio Ma, Inc. Nanoparticle formulations for delivery of nucleic acid complexes
WO2017098468A1 (en) 2015-12-09 2017-06-15 Novartis Ag Label-free analysis of rna capping efficiency using rnase h, probes and liquid chromatography/mass spectrometry
CA3007955A1 (en) 2015-12-10 2017-06-15 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticles for delivery of therapeutic agents
US10465190B1 (en) 2015-12-23 2019-11-05 Modernatx, Inc. In vitro transcription methods and constructs
EP3405579A1 (en) 2016-01-22 2018-11-28 Modernatx, Inc. Messenger ribonucleic acids for the production of intracellular binding polypeptides and methods of use thereof
TW201738256A (zh) * 2016-04-04 2017-11-01 日產化學工業股份有限公司 蛋白質產生方法
KR102369898B1 (ko) 2016-04-08 2022-03-03 트랜슬레이트 바이오 인코포레이티드 다량체 코딩 핵산 및 그 용도
US20180126003A1 (en) * 2016-05-04 2018-05-10 Curevac Ag New targets for rna therapeutics
EP3241905A1 (en) * 2016-05-06 2017-11-08 Miltenyi Biotec GmbH Method for introducing nucleic acids into a cell
US12128113B2 (en) 2016-05-18 2024-10-29 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding JAGGED1 for the treatment of Alagille syndrome
JP7088911B2 (ja) 2016-05-18 2022-06-21 モデルナティエックス インコーポレイテッド リラキシンをコードするポリヌクレオチド
CN109312313A (zh) 2016-06-13 2019-02-05 川斯勒佰尔公司 用于治疗鸟氨酸转氨甲酰酶缺乏症的信使rna疗法
US12385034B2 (en) 2016-06-24 2025-08-12 Modernatx, Inc. Methods and apparatus for filtration
JP2019520829A (ja) 2016-07-07 2019-07-25 ルビウス セラピューティクス， インコーポレイテッド 外来性ｒｎａを発現する治療的細胞系に関連する組成物及び方法
IL308824A (en) 2016-08-17 2024-01-01 Factor Bioscience Inc Nucleic acid products and methods of administration thereof
WO2018035380A1 (en) 2016-08-17 2018-02-22 Solstice Biologics, Ltd. Polynucleotide constructs
JP6983455B2 (ja) 2016-09-14 2021-12-17 モデルナティーエックス， インコーポレイテッド 高純度ｒｎａ組成物及びその調製のための方法
US11390899B2 (en) * 2016-09-26 2022-07-19 SOLA Biosciences, LLC Cell-associated secretion-enhancing fusion proteins
AU2017345766A1 (en) 2016-10-21 2019-05-16 Modernatx, Inc. Human cytomegalovirus vaccine
EP3532070A1 (en) 2016-10-26 2019-09-04 Modernatx, Inc. Messenger ribonucleic acids for enhancing immune responses and methods of use thereof
CN110167587A (zh) 2016-11-11 2019-08-23 摩登纳特斯有限公司 流感疫苗
EP3551193A4 (en) 2016-12-08 2020-08-19 Modernatx, Inc. NUCLEIC ACID VACCINES AGAINST RESPIRATORY VIRUSES
EP3555289A1 (en) 2016-12-13 2019-10-23 ModernaTX, Inc. Rna affinity purification
EP3568158A4 (en) 2017-01-11 2020-11-18 The Board of Trustees of the Leland Stanford Junior University R-SPONDIN SUBSTITUTION MOLECULES (RSPO)
WO2018140821A1 (en) 2017-01-26 2018-08-02 Surrozen, Inc. Tissue-specific wnt signal enhancing molecules and uses thereof
US10093706B2 (en) 2017-01-30 2018-10-09 Indiana University Research And Technology Corporation Dominant positive hnRNP-E1 polypeptide compositions and methods
EP3576780A1 (en) 2017-02-01 2019-12-11 Modernatx, Inc. Immunomodulatory therapeutic mrna compositions encoding activating oncogene mutation peptides
WO2018151816A1 (en) 2017-02-16 2018-08-23 Modernatx, Inc. High potency immunogenic compositions
AU2018224326B2 (en) 2017-02-27 2024-01-04 Translate Bio, Inc. Novel codon-optimized CFTR mRNA
TW202428301A (zh) 2017-02-28 2024-07-16 法商賽諾菲公司 治療性rna
WO2018170270A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Modernatx, Inc. Varicella zoster virus (vzv) vaccine
WO2018170245A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Modernatx, Inc. Broad spectrum influenza virus vaccine
US11752206B2 (en) 2017-03-15 2023-09-12 Modernatx, Inc. Herpes simplex virus vaccine
MA47787A (fr) 2017-03-15 2020-01-22 Modernatx Inc Vaccin contre le virus respiratoire syncytial
WO2018170347A1 (en) 2017-03-17 2018-09-20 Modernatx, Inc. Zoonotic disease rna vaccines
WO2018187590A1 (en) 2017-04-05 2018-10-11 Modernatx, Inc. Reduction or elimination of immune responses to non-intravenous, e.g., subcutaneously administered therapeutic proteins
CN106929513A (zh) * 2017-04-07 2017-07-07 东南大学 mRNA编码的纳米抗体及其应用
MX2019013752A (es) 2017-05-16 2020-07-20 Translate Bio Inc Tratamiento de la fibrosis quística mediante el suministro de arnm que codifica cftr optimizado en codones.
ES2952779T3 (es) 2017-05-18 2023-11-06 Modernatx Inc ARN mensajero modificado que comprende elementos de ARN funcionales
WO2018217897A1 (en) * 2017-05-23 2018-11-29 David Weiner Compositions and method for inducing an immune response
WO2018224166A1 (en) 2017-06-09 2018-12-13 Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh Methods for predicting the usefulness of disease specific amino acid modifications for immunotherapy
WO2018232357A1 (en) 2017-06-15 2018-12-20 Modernatx, Inc. Rna formulations
WO2019006455A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Solstice Biologics, Ltd. AUXILIARIES OF CHIRAL PHOSPHORAMIDITIS AND METHODS OF USE THEREOF
CN111094330A (zh) * 2017-07-03 2020-05-01 转矩医疗股份有限公司 编码免疫刺激融合分子的多核苷酸及其用途
WO2019036685A1 (en) 2017-08-18 2019-02-21 Modernatx, Inc. METHODS FOR HPLC ANALYSIS
WO2019036683A1 (en) 2017-08-18 2019-02-21 Modernatx, Inc. ANALYTICAL METHODS BY HPLC
CN111212905A (zh) 2017-08-18 2020-05-29 摩登纳特斯有限公司 Rna聚合酶变体
WO2019046809A1 (en) 2017-08-31 2019-03-07 Modernatx, Inc. METHODS OF MANUFACTURING LIPID NANOPARTICLES
US10653767B2 (en) 2017-09-14 2020-05-19 Modernatx, Inc. Zika virus MRNA vaccines
US20210180053A1 (en) 2017-11-01 2021-06-17 Novartis Ag Synthetic rnas and methods of use
US11167043B2 (en) 2017-12-20 2021-11-09 Translate Bio, Inc. Composition and methods for treatment of ornithine transcarbamylase deficiency
EP3735270A1 (en) 2018-01-05 2020-11-11 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding anti-chikungunya virus antibodies
WO2019148101A1 (en) 2018-01-29 2019-08-01 Modernatx, Inc. Rsv rna vaccines
US20190314291A1 (en) 2018-01-30 2019-10-17 Modernatx, Inc. Compositions and methods for delivery of agents to immune cells
EP3773745A1 (en) 2018-04-11 2021-02-17 ModernaTX, Inc. Messenger rna comprising functional rna elements
JP7366057B2 (ja) 2018-04-19 2023-10-20 チェックメイト ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 合成ｒｉｇ－ｉ様受容体アゴニスト
EP3820499A4 (en) 2018-07-09 2022-07-13 Surrozen Operating, Inc. TISSUE SPECIFIC WNT SIGNAL ENHANCEMENT MOLECULES AND USES
CN118421617A (zh) 2018-08-24 2024-08-02 川斯勒佰尔公司 用于纯化信使rna的方法
WO2020047467A2 (en) 2018-08-30 2020-03-05 Tenaya Therapeutics, Inc. Cardiac cell reprogramming with myocardin and ascl1
EP3849589A1 (en) 2018-09-14 2021-07-21 ModernaTX, Inc. Methods and compositions for treating cancer using mrna therapeutics
AU2019345067A1 (en) 2018-09-19 2021-04-08 Modernatx, Inc. High-purity peg lipids and uses thereof
US12151029B2 (en) 2018-09-19 2024-11-26 Modernatx, Inc. PEG lipids and uses thereof
WO2020061457A1 (en) 2018-09-20 2020-03-26 Modernatx, Inc. Preparation of lipid nanoparticles and methods of administration thereof
US12331320B2 (en) 2018-10-10 2025-06-17 The Research Foundation For The State University Of New York Genome edited cancer cell vaccines
WO2020097409A2 (en) 2018-11-08 2020-05-14 Modernatx, Inc. Use of mrna encoding ox40l to treat cancer in human patients
EP3883592A1 (en) 2018-11-21 2021-09-29 Translate Bio, Inc. Treatment of cystic fibrosis by delivery of nebulized mrna encoding cftr
US11351242B1 (en) 2019-02-12 2022-06-07 Modernatx, Inc. HMPV/hPIV3 mRNA vaccine composition
US11851694B1 (en) 2019-02-20 2023-12-26 Modernatx, Inc. High fidelity in vitro transcription
JP2022521094A (ja) 2019-02-20 2022-04-05 モデルナティエックス インコーポレイテッド 共転写キャッピング用ｒｎａポリメラーゼバリアント
CN113874502A (zh) 2019-03-11 2021-12-31 摩登纳特斯有限公司 补料分批体外转录方法
WO2020190750A1 (en) 2019-03-15 2020-09-24 Modernatx, Inc. Hiv rna vaccines
MA55887A (fr) 2019-05-07 2022-03-16 Modernatx Inc Microarn de cellules immunitaires exprimés de manière différentielle pour la régulation de l'expression de protéines
JP2022531461A (ja) 2019-05-07 2022-07-06 モデルナティエックス インコーポレイテッド 免疫細胞活性を破壊するポリヌクレオチド及びその使用方法
US20220387628A1 (en) 2019-06-24 2022-12-08 Modernatx, Inc. Messenger rna comprising functional rna elements and uses thereof
WO2020263883A1 (en) 2019-06-24 2020-12-30 Modernatx, Inc. Endonuclease-resistant messenger rna and uses thereof
JP7699552B2 (ja) 2019-07-03 2025-06-27 ファクター バイオサイエンス インコーポレイテッド カチオン性脂質及びその使用
WO2021007515A1 (en) 2019-07-11 2021-01-14 Tenaya Therapeutics, Inc. Cardiac cell reprogramming with micrornas and other factors
US10501404B1 (en) 2019-07-30 2019-12-10 Factor Bioscience Inc. Cationic lipids and transfection methods
EP4027982A1 (en) 2019-09-11 2022-07-20 ModernaTX, Inc. Lnp-formulated mrna therapeutics and use thereof for treating human subjects
WO2021055609A1 (en) 2019-09-20 2021-03-25 Translate Bio, Inc. Mrna encoding engineered cftr
JP7707161B2 (ja) 2019-10-23 2025-07-14 チェックメイト ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 合成ｒｉｇ－ｉ様受容体アゴニスト
US12194089B2 (en) 2020-02-04 2025-01-14 CureVac SE Coronavirus vaccine
US11241493B2 (en) 2020-02-04 2022-02-08 Curevac Ag Coronavirus vaccine
CA3173567A1 (en) 2020-03-02 2021-09-10 Tenaya Therapeutics, Inc. Gene vector control by cardiomyocyte-expressed micrornas
AU2021232005A1 (en) * 2020-03-04 2022-09-29 Flagship Pioneering Innovations Vi, Llc Methods and compositions for modulating a genome
US12194157B2 (en) 2020-04-09 2025-01-14 Finncure Oy Carrier for targeted delivery to a host
AU2021252164A1 (en) 2020-04-09 2022-12-15 Finncure Oy Mimetic nanoparticles for preventing the spreading and lowering the infection rate of novel coronaviruses
CN113521269A (zh) 2020-04-22 2021-10-22 生物技术Rna制药有限公司 冠状病毒疫苗
WO2021243207A1 (en) 2020-05-28 2021-12-02 Modernatx, Inc. Use of mrnas encoding ox40l, il-23 and il-36gamma for treating cancer
CA3187138A1 (en) * 2020-06-26 2021-12-30 Carisma Therapeutics Inc. Mrna transfection of immune cells
JP2023538260A (ja) 2020-08-06 2023-09-07 モダーナティエックス・インコーポレイテッド ペイロード分子を気道上皮に送達するための組成物
US11406703B2 (en) 2020-08-25 2022-08-09 Modernatx, Inc. Human cytomegalovirus vaccine
US12419948B2 (en) 2020-08-31 2025-09-23 The Broad Institute, Inc. Immunogenic compositions and use thereof
KR20230118715A (ko) 2020-10-14 2023-08-11 조지 메이슨 리서치 파운데이션 인코포레이티드 이온화 가능 지질 및 이의 제조 및 사용 방법
CA3198268A1 (en) 2020-11-16 2022-05-19 Surrozen Operating, Inc. Liver-specific wnt signal enhancing molecules and uses thereof
CA3200234A1 (en) 2020-11-25 2022-06-02 Daryl C. Drummond Lipid nanoparticles for delivery of nucleic acids, and related methods of use
JP2023552468A (ja) 2020-12-09 2023-12-15 ビオンテック・ソシエタス・エウロパエア Ｒｎａの製造
US20240156946A1 (en) 2020-12-22 2024-05-16 CureVac SE Rna vaccine against sars-cov-2 variants
WO2022150717A1 (en) 2021-01-11 2022-07-14 Modernatx, Inc. Seasonal rna influenza virus vaccines
JP2024504614A (ja) * 2021-01-14 2024-02-01 トランスレイト バイオ， インコーポレイテッド ｍＲＮＡがコードする抗体を送達する方法および組成物
WO2022157548A1 (en) 2021-01-24 2022-07-28 Forrest Michael David Inhibitors of atp synthase - cosmetic and therapeutic uses
US12343375B2 (en) 2021-02-09 2025-07-01 University Of Louisville Research Foundation, Inc. Spray dried formulation of a cholera toxin B subunit variant
US11524023B2 (en) 2021-02-19 2022-12-13 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticle compositions and methods of formulating the same
KR20230175196A (ko) 2021-03-23 2023-12-29 리코드 테라퓨틱스, 인크. 폴리뉴클레오티드 조성물, 관련된 제제, 및 이의 사용 방법
EP4314046A4 (en) * 2021-04-01 2025-03-19 ModernaTX, Inc. Mucosal expression of antibody structures and isotypes by mRNA
US20220363937A1 (en) 2021-05-14 2022-11-17 Armstrong World Industries, Inc. Stabilization of antimicrobial coatings
TW202320736A (zh) 2021-07-26 2023-06-01 美商現代公司 用於製備脂質奈米粒子組成物之製程
TW202320737A (zh) 2021-07-26 2023-06-01 美商現代公司 製備用於將酬載分子遞送至氣道上皮之脂質奈米粒子組成物之製程
CN113736768B (zh) * 2021-08-18 2023-06-23 新发药业有限公司 假尿苷合成酶突变体、突变基因及其在制备维生素b2中的应用
EP4392140A1 (en) 2021-08-24 2024-07-03 BioNTech SE In vitro transcription technologies
WO2023064469A1 (en) 2021-10-13 2023-04-20 Modernatx, Inc. Compositions of mrna-encoded il15 fusion proteins and methods of use thereof
EP4419716A1 (en) 2021-10-21 2024-08-28 CureVac Netherlands B.V. Cancer neoantigens
EP4419081A1 (en) 2021-10-22 2024-08-28 Sail Biomedicines, Inc. Mrna vaccine composition
CN118829423A (zh) 2021-11-12 2024-10-22 摩登纳特斯有限公司 用于将有效载荷分子递送至气道上皮的组合物
KR20240107356A (ko) 2021-11-23 2024-07-09 세일 바이오메디슨스, 인크. 박테리아-유래 지질 조성물 및 이의 용도
US12186387B2 (en) 2021-11-29 2025-01-07 BioNTech SE Coronavirus vaccine
WO2023122080A1 (en) 2021-12-20 2023-06-29 Senda Biosciences, Inc. Compositions comprising mrna and lipid reconstructed plant messenger packs
US12529047B1 (en) 2021-12-21 2026-01-20 Modernatx, Inc. mRNA quantification methods
WO2023154818A1 (en) 2022-02-09 2023-08-17 Modernatx, Inc. Mucosal administration methods and formulations
WO2023196988A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 Modernatx, Inc. Methods of use of mrnas encoding il-12
WO2023196898A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Beta globin mimetic peptides and their use
US20230330264A1 (en) 2022-04-15 2023-10-19 Smartcella Solutions Ab COMPOSITIONS AND METHODS FOR EXOSOME-MEDIATED DELIVERY OF mRNA AGENTS
EP4531819A2 (en) 2022-05-25 2025-04-09 Akagera Medicines, Inc. Lipid nanoparticles for delivery of nucleic acids and methods of use thereof
WO2024002985A1 (en) 2022-06-26 2024-01-04 BioNTech SE Coronavirus vaccine
WO2024010841A2 (en) 2022-07-06 2024-01-11 Molecular Axiom, Llc Compositions and methods for treating pancreatic cancer
JP2025527722A (ja) * 2022-08-26 2025-08-22 トライリンク バイオテクノロジーズ， エルエルシー 高度に精製された５’キャップ付きオリゴヌクレオチドを作製するための効率的な方法
WO2024083345A1 (en) 2022-10-21 2024-04-25 BioNTech SE Methods and uses associated with liquid compositions
EP4608442A1 (en) 2022-10-28 2025-09-03 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Nucleic acid based vaccine
WO2024102434A1 (en) 2022-11-10 2024-05-16 Senda Biosciences, Inc. Rna compositions comprising lipid nanoparticles or lipid reconstructed natural messenger packs
WO2024107827A1 (en) 2022-11-16 2024-05-23 The Broad Institute, Inc. Therapeutic exploitation of sting channel activity
WO2024133884A2 (en) * 2022-12-23 2024-06-27 Sanofi Optimized tailing of messenger rna
EP4655007A1 (en) 2023-01-23 2025-12-03 Yale University Antibody oligonucleotide conjugates
KR20250153793A (ko) 2023-01-27 2025-10-27 세일 바이오메디슨스, 인크. 변형된 지질 조성물 및 이의 용도
AU2024213258A1 (en) 2023-01-31 2025-06-26 Seqirus Inc. Capping assay
WO2024178305A1 (en) 2023-02-24 2024-08-29 Modernatx, Inc. Compositions of mrna-encoded il-15 fusion proteins and methods of use thereof for treating cancer
JP2026509481A (ja) 2023-03-15 2026-03-19 京都府公立大学法人 ペプチド発現コンストラクトおよびその使用
EP4683665A1 (en) 2023-03-23 2026-01-28 ModernaTX, Inc. Peg targeting compounds for delivery of therapeutics
EP4683666A1 (en) 2023-03-23 2026-01-28 ModernaTX, Inc. Peg targeting compounds for delivery of therapeutics
WO2024197310A1 (en) 2023-03-23 2024-09-26 Modernatx, Inc. Peg targeting compounds for delivery of therapeutics
EP4698150A1 (en) 2023-04-19 2026-02-25 Sail Biomedicines, Inc. Delivery of polynucleotides from lipid nanoparticles comprising rna and ionizable lipids
WO2024220752A2 (en) 2023-04-19 2024-10-24 Sail Biomedicines, Inc. Rna therapeutic compositions
WO2024220712A2 (en) 2023-04-19 2024-10-24 Sail Biomedicines, Inc. Vaccine compositions
WO2024238723A1 (en) 2023-05-16 2024-11-21 Omega Therapeutics, Inc. Methods and compositions for modulating pcsk9 expression
CN121772943A (zh) 2023-05-16 2026-03-31 旗舰实验室114公司 调节靶基因的甲基化的方法和组合物
WO2025019742A1 (en) 2023-07-19 2025-01-23 Omega Therapeutics, Inc. Methods and compositions for modulating ctnnb1 expression
WO2025059215A1 (en) 2023-09-12 2025-03-20 Aadigen, Llc Methods and compositions for treating or preventing cancer
WO2025072383A1 (en) 2023-09-25 2025-04-03 The Broad Institute, Inc. Viral open reading frames, uses thereof, and methods of detecting the same
WO2025068553A1 (en) 2023-09-28 2025-04-03 Universität Basel Catalytic moieties for treating cancer
WO2025076013A1 (en) 2023-10-01 2025-04-10 Vaccine Company, Inc. Engineered middle east respiratory syndrome proteins and related methods
WO2025097055A2 (en) 2023-11-02 2025-05-08 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods of use of t cells in immunotherapy
WO2025129158A1 (en) 2023-12-15 2025-06-19 The Broad Institute, Inc. Engineered arc delivery vesicles and uses thereof
WO2025144938A1 (en) 2023-12-26 2025-07-03 Emmune, Inc. Systems for nucleic acid transfer
WO2025194138A1 (en) 2024-03-14 2025-09-18 Tessera Therapeutics, Inc. St1cas9 compositions and methods for modulating a genome
WO2025224710A1 (en) 2024-04-26 2025-10-30 Vaccine Company, Inc. Engineered orthopoxvirus proteins and related methods
WO2025235563A1 (en) 2024-05-07 2025-11-13 Omega Therapeutics, Inc. Epigenetic modulation for upregulation of genes
WO2025250843A1 (en) 2024-05-29 2025-12-04 Vaccine Company, Inc. Self-assembling escrt recruiting domains (erd) and methods of use thereof
WO2026036000A1 (en) 2024-08-08 2026-02-12 Invaio Sciences, Inc. Nature-derived lipid particles for use in agriculture

Family Cites Families (1163)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2008526A (en) 1932-11-03 1935-07-16 Wappler Frederick Charles Method and means for treating living tissue
US3467096A (en) 1966-04-12 1969-09-16 Ferrell S Horn Multiple hypodermic syringe arrangement
BE757653A (fr) 1969-10-21 1971-04-16 Ugine Kuhlmann Nouveaux medicaments derives d'acides nucleiques et procedes pour leur preparation
BE786542A (fr) 1971-07-22 1973-01-22 Dow Corning Dispositif d'aspiration permettant d'obtenir des echantillons de cellules
US3906092A (en) 1971-11-26 1975-09-16 Merck & Co Inc Stimulation of antibody response
US4270537A (en) 1979-11-19 1981-06-02 Romaine Richard A Automatic hypodermic syringe
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US5132418A (en) 1980-02-29 1992-07-21 University Patents, Inc. Process for preparing polynucleotides
US4458066A (en) 1980-02-29 1984-07-03 University Patents, Inc. Process for preparing polynucleotides
US4500707A (en) 1980-02-29 1985-02-19 University Patents, Inc. Nucleosides useful in the preparation of polynucleotides
US4411657A (en) 1980-05-19 1983-10-25 Anibal Galindo Hypodermic needle
US4668777A (en) 1981-03-27 1987-05-26 University Patents, Inc. Phosphoramidite nucleoside compounds
US4415732A (en) 1981-03-27 1983-11-15 University Patents, Inc. Phosphoramidite compounds and processes
US4973679A (en) 1981-03-27 1990-11-27 University Patents, Inc. Process for oligonucleo tide synthesis using phosphormidite intermediates
US4401796A (en) 1981-04-30 1983-08-30 City Of Hope Research Institute Solid-phase synthesis of polynucleotides
US4373071A (en) 1981-04-30 1983-02-08 City Of Hope Research Institute Solid-phase synthesis of polynucleotides
US4474569A (en) 1982-06-28 1984-10-02 Denver Surgical Developments, Inc. Antenatal shunt
US4737462A (en) 1982-10-19 1988-04-12 Cetus Corporation Structural genes, plasmids and transformed cells for producing cysteine depleted muteins of interferon-β
US4588585A (en) 1982-10-19 1986-05-13 Cetus Corporation Human recombinant cysteine depleted interferon-β muteins
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4579849A (en) 1984-04-06 1986-04-01 Merck & Co., Inc. N-alkylguanine acyclonucleosides as antiviral agents
US4957735A (en) 1984-06-12 1990-09-18 The University Of Tennessee Research Corporation Target-sensitive immunoliposomes- preparation and characterization
US4959314A (en) 1984-11-09 1990-09-25 Cetus Corporation Cysteine-depleted muteins of biologically active proteins
US5036006A (en) 1984-11-13 1991-07-30 Cornell Research Foundation, Inc. Method for transporting substances into living cells and tissues and apparatus therefor
US5116943A (en) 1985-01-18 1992-05-26 Cetus Corporation Oxidation-resistant muteins of Il-2 and other protein
CA1288073C (en) 1985-03-07 1991-08-27 Paul G. Ahlquist Rna transformation vector
US4596556A (en) 1985-03-25 1986-06-24 Bioject, Inc. Hypodermic injection apparatus
EP0204401A1 (en) 1985-04-09 1986-12-10 Biogen, Inc. Method of improving the yield of polypeptides produced in a host cell by stabilizing mRNA
US5017691A (en) 1986-07-03 1991-05-21 Schering Corporation Mammalian interleukin-4
US5153319A (en) 1986-03-31 1992-10-06 University Patents, Inc. Process for preparing polynucleotides
US4879111A (en) 1986-04-17 1989-11-07 Cetus Corporation Treatment of infections with lymphokines
US4886499A (en) 1986-12-18 1989-12-12 Hoffmann-La Roche Inc. Portable injection appliance
GB8704027D0 (en) 1987-02-20 1987-03-25 Owen Mumford Ltd Syringe needle combination
US4790824A (en) 1987-06-19 1988-12-13 Bioject, Inc. Non-invasive hypodermic injection device
US4940460A (en) 1987-06-19 1990-07-10 Bioject, Inc. Patient-fillable and non-invasive hypodermic injection device assembly
US4941880A (en) 1987-06-19 1990-07-17 Bioject, Inc. Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly
CA1340843C (en) 1987-07-31 1999-12-07 J. Lawrence Burg Selective amplification of target polynucleotide sequences
US6090591A (en) 1987-07-31 2000-07-18 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Selective amplification of target polynucleotide sequences
JP2846018B2 (ja) 1988-01-21 1999-01-13 ジェネンテク，インコーポレイテッド 核酸配列の増幅および検出
CA1340807C (en) 1988-02-24 1999-11-02 Lawrence T. Malek Nucleic acid amplification process
JP2650159B2 (ja) 1988-02-24 1997-09-03 アクゾ・ノベル・エヌ・ベー 核酸増幅方法
DE68923027D1 (de) 1988-03-04 1995-07-20 Cancer Res Campaign Tech Antigene.
US5339163A (en) 1988-03-16 1994-08-16 Canon Kabushiki Kaisha Automatic exposure control device using plural image plane detection areas
AU631545B2 (en) 1988-04-15 1992-12-03 Protein Design Labs, Inc. Il-2 receptor-specific chimeric antibodies
US5168038A (en) 1988-06-17 1992-12-01 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University In situ transcription in cells and tissues
US5021335A (en) 1988-06-17 1991-06-04 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University In situ transcription in cells and tissues
US5130238A (en) 1988-06-24 1992-07-14 Cangene Corporation Enhanced nucleic acid amplification process
US5759802A (en) 1988-10-26 1998-06-02 Tonen Corporation Production of human serum alubumin A
FR2638359A1 (fr) 1988-11-03 1990-05-04 Tino Dalto Guide de seringue avec reglage de la profondeur de penetration de l'aiguille dans la peau
US5047524A (en) 1988-12-21 1991-09-10 Applied Biosystems, Inc. Automated system for polynucleotide synthesis and purification
US5262530A (en) 1988-12-21 1993-11-16 Applied Biosystems, Inc. Automated system for polynucleotide synthesis and purification
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
EP0737750B1 (en) 1989-03-21 2003-05-14 Vical, Inc. Expression of exogenous polynucleotide sequences in a vertebrate
US5693622A (en) 1989-03-21 1997-12-02 Vical Incorporated Expression of exogenous polynucleotide sequences cardiac muscle of a mammal
US6673776B1 (en) 1989-03-21 2004-01-06 Vical Incorporated Expression of exogenous polynucleotide sequences in a vertebrate, mammal, fish, bird or human
US5703055A (en) 1989-03-21 1997-12-30 Wisconsin Alumni Research Foundation Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery
US6214804B1 (en) 1989-03-21 2001-04-10 Vical Incorporated Induction of a protective immune response in a mammal by injecting a DNA sequence
US6867195B1 (en) 1989-03-21 2005-03-15 Vical Incorporated Lipid-mediated polynucleotide administration to reduce likelihood of subject's becoming infected
US5012818A (en) 1989-05-04 1991-05-07 Joishy Suresh K Two in one bone marrow surgical needle
IE66597B1 (en) 1989-05-10 1996-01-24 Akzo Nv Method for the synthesis of ribonucleic acid (RNA)
US5332671A (en) 1989-05-12 1994-07-26 Genetech, Inc. Production of vascular endothelial cell growth factor and DNA encoding same
US5240855A (en) 1989-05-12 1993-08-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Particle gun
CA2020958C (en) 1989-07-11 2005-01-11 Daniel L. Kacian Nucleic acid sequence amplification methods
US5545522A (en) 1989-09-22 1996-08-13 Van Gelder; Russell N. Process for amplifying a target polynucleotide sequence using a single primer-promoter complex
FR2740360B1 (fr) 1995-10-25 1997-12-26 Rhone Poulenc Chimie Granules redispersables dans l'eau comprenant une matiere active sous forme liquide
US5064413A (en) 1989-11-09 1991-11-12 Bioject, Inc. Needleless hypodermic injection device
US5215899A (en) 1989-11-09 1993-06-01 Miles Inc. Nucleic acid amplification employing ligatable hairpin probe and transcription
NO904633L (no) 1989-11-09 1991-05-10 Molecular Diagnostics Inc Amplifikasjon av nukleinsyrer ved transkriberbar haarnaalsprobe.
US5312335A (en) 1989-11-09 1994-05-17 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5633076A (en) 1989-12-01 1997-05-27 Pharming Bv Method of producing a transgenic bovine or transgenic bovine embryo
US5697901A (en) 1989-12-14 1997-12-16 Elof Eriksson Gene delivery by microneedle injection
US5194370A (en) 1990-05-16 1993-03-16 Life Technologies, Inc. Promoter ligation activated transcription amplification of nucleic acid sequences
JPH06500014A (ja) 1990-07-25 1994-01-06 シンジーン，インコーポレイテッド 多数の核酸相補体を生成させる環状伸長法
US5489677A (en) 1990-07-27 1996-02-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms
US5190521A (en) 1990-08-22 1993-03-02 Tecnol Medical Products, Inc. Apparatus and method for raising a skin wheal and anesthetizing skin
US6140496A (en) 1990-10-09 2000-10-31 Benner; Steven Albert Precursors for deoxyribonucleotides containing non-standard nucleosides
US5527288A (en) 1990-12-13 1996-06-18 Elan Medical Technologies Limited Intradermal drug delivery device and method for intradermal delivery of drugs
US6100024A (en) 1991-02-08 2000-08-08 Promega Corporation Methods and compositions for nucleic acid detection by target extension and probe amplification
CA2736076A1 (en) 1991-03-18 1992-09-19 New York University Monoclonal and chimeric antibodies specific for human tumor necrosis factor
US5426180A (en) 1991-03-27 1995-06-20 Research Corporation Technologies, Inc. Methods of making single-stranded circular oligonucleotides
ES2134212T3 (es) 1991-04-25 1999-10-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo humano reconstituido contra el receptor de la interleuquina 6 humano.
US5169766A (en) 1991-06-14 1992-12-08 Life Technologies, Inc. Amplification of nucleic acid molecules
US5199441A (en) 1991-08-20 1993-04-06 Hogle Hugh H Fine needle aspiration biopsy apparatus and method
GB9118204D0 (en) 1991-08-23 1991-10-09 Weston Terence E Needle-less injector
SE9102652D0 (sv) 1991-09-13 1991-09-13 Kabi Pharmacia Ab Injection needle arrangement
US5298422A (en) 1991-11-06 1994-03-29 Baylor College Of Medicine Myogenic vector systems
US5824307A (en) 1991-12-23 1998-10-20 Medimmune, Inc. Human-murine chimeric antibodies against respiratory syncytial virus
JPH07503372A (ja) 1992-01-23 1995-04-13 バイカル・インコーポレイテッド 生体外遺伝子導入
US5328483A (en) 1992-02-27 1994-07-12 Jacoby Richard M Intradermal injection device with medication and needle guard
JP3368603B2 (ja) 1992-02-28 2003-01-20 オリンパス光学工業株式会社 遺伝子治療用処置具
US6174666B1 (en) 1992-03-27 2001-01-16 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Method of eliminating inhibitory/instability regions from mRNA
US6132419A (en) 1992-05-22 2000-10-17 Genetronics, Inc. Electroporetic gene and drug therapy
US5514545A (en) 1992-06-11 1996-05-07 Trustees Of The University Of Pennsylvania Method for characterizing single cells based on RNA amplification for diagnostics and therapeutics
US6670178B1 (en) 1992-07-10 2003-12-30 Transkaryotic Therapies, Inc. In Vivo production and delivery of insulinotropin for gene therapy
US5383851A (en) 1992-07-24 1995-01-24 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
ATE152180T1 (de) 1992-07-31 1997-05-15 Behringwerke Ag Verfahren zur einführung von definierten sequenzen am 3' ende von polynukleotiden
US5273525A (en) 1992-08-13 1993-12-28 Btx Inc. Injection and electroporation apparatus for drug and gene delivery
US5240885A (en) 1992-09-21 1993-08-31 Corning Incorporated Rare earth-doped, stabilized cadmium halide glasses
US5569189A (en) 1992-09-28 1996-10-29 Equidyne Systems, Inc. hypodermic jet injector
US5334144A (en) 1992-10-30 1994-08-02 Becton, Dickinson And Company Single use disposable needleless injector
WO1994009838A1 (en) 1992-11-04 1994-05-11 Denver Biomaterials, Inc. Apparatus for removal of pleural effusion fluid
US5736137A (en) 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
DE69303494T2 (de) 1992-11-13 1997-01-16 Idec Pharma Corp Therapeutische verwendung von chimerischen und markierten antikörper gegen menschlichen b lymphozyt beschränkter differenzierung antigen für die behandlung von b-zell-lymphoma
NZ261259A (en) 1993-01-12 1996-12-20 Biogen Inc Humanised recombinant anti-vla4 antibody and diagnostic compositions and medicaments
FR2703253B1 (fr) 1993-03-30 1995-06-23 Centre Nat Rech Scient Applicateur d'impulsions electriques pour traitement de tissus biologiques.
US7135312B2 (en) 1993-04-15 2006-11-14 University Of Rochester Circular DNA vectors for synthesis of RNA and DNA
US5773244A (en) 1993-05-19 1998-06-30 Regents Of The University Of California Methods of making circular RNA
US5851829A (en) 1993-07-16 1998-12-22 Dana-Farber Cancer Institute Method of intracellular binding of target molecules
US5672491A (en) 1993-09-20 1997-09-30 The Leland Stanford Junior University Recombinant production of novel polyketides
US6432711B1 (en) 1993-11-03 2002-08-13 Diacrin, Inc. Embryonic stem cells capable of differentiating into desired cell lines
US6096503A (en) 1993-11-12 2000-08-01 The Scripps Research Institute Method for simultaneous identification of differentially expresses mRNAs and measurement of relative concentrations
US7435802B2 (en) 1994-01-25 2008-10-14 Elan Pharaceuticals, Inc. Humanized anti-VLA4 immunoglobulins
US5840299A (en) 1994-01-25 1998-11-24 Athena Neurosciences, Inc. Humanized antibodies against leukocyte adhesion molecule VLA-4
DE69533295T3 (de) 1994-02-16 2009-07-16 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary, The Department Of Health And Human Services Melanoma-assoziierte Antigene, Epitope davon und Impstoffe gegen Melanoma
WO1995024176A1 (en) 1994-03-07 1995-09-14 Bioject, Inc. Ampule filling device
IL112820A0 (en) 1994-03-07 1995-05-26 Merck & Co Inc Coordinate in vivo gene expression
US5466220A (en) 1994-03-08 1995-11-14 Bioject, Inc. Drug vial mixing and transfer device
EP0754242A4 (en) 1994-03-18 1997-06-11 Lynx Therapeutics Inc SYNTHESIS AND SUBSTANCE, HYBRIDIZATION AND NUCLEASE-RESISTANT PROPERTIES OF OLIGONUCLEOTID-N3'-m (7) P5'-PHOSPHORAMIDATE
WO1995026204A1 (en) 1994-03-25 1995-10-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Immune stimulation by phosphorothioate oligonucleotide analogs
US5457041A (en) 1994-03-25 1995-10-10 Science Applications International Corporation Needle array and method of introducing biological substances into living cells using the needle array
US6074642A (en) 1994-05-02 2000-06-13 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Use of antibodies specific to human complement component C5 for the treatment of glomerulonephritis
CA2190149C (en) 1994-05-18 2011-01-04 Jens Kossmann Dna sequences coding for enzymes capable of facilitating the synthesis of linear .alpha.-1,4 glucans in plants, fungi and microorganisms
AU2656295A (en) 1994-06-02 1996-01-04 Chiron Corporation Nucleic acid immunization using a virus-based infection/transfection system
GB9412230D0 (en) 1994-06-17 1994-08-10 Celltech Ltd Interleukin-5 specific recombiant antibodies
US6239116B1 (en) 1994-07-15 2001-05-29 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
AU3272695A (en) 1994-08-12 1996-03-07 Immunomedics Inc. Immunoconjugates and humanized antibodies specific for b-cell lymphoma and leukemia cells
US5641665A (en) 1994-11-28 1997-06-24 Vical Incorporated Plasmids suitable for IL-2 expression
US5665545A (en) 1994-11-28 1997-09-09 Akzo Nobel N.V. Terminal repeat amplification method
US5588960A (en) 1994-12-01 1996-12-31 Vidamed, Inc. Transurethral needle delivery device with cystoscope and method for treatment of urinary incontinence
US5807718A (en) 1994-12-02 1998-09-15 The Scripps Research Institute Enzymatic DNA molecules
ES2294786T3 (es) 1995-01-06 2008-04-01 Plant Research International B.V. Secuencias de adn que codifican enzimas que sintetizan polimeros carbohidratos y metodo para producir plantas transgenicas.
US5599302A (en) 1995-01-09 1997-02-04 Medi-Ject Corporation Medical injection system and method, gas spring thereof and launching device using gas spring
US5795587A (en) 1995-01-23 1998-08-18 University Of Pittsburgh Stable lipid-comprising drug delivery complexes and methods for their production
US5824497A (en) 1995-02-10 1998-10-20 Mcmaster University High efficiency translation of mRNA molecules
EP0727187B1 (en) 1995-02-15 2003-08-06 Joseph Eldor Multiple hole spinal needle
DE69621507T2 (de) 1995-03-28 2003-01-09 Japan Science And Technology Corp., Kawaguchi Verfahren zur molekularen Indexierung von Genen unter Verwendung von Restriktionsenzymen
US5869230A (en) 1995-03-30 1999-02-09 Beth Israel Hospital Association Gene transfer into the kidney
US5986054A (en) 1995-04-28 1999-11-16 The Hospital For Sick Children, Hsc Research And Development Limited Partnership Genetic sequences and proteins related to alzheimer's disease
FR2733762B1 (fr) 1995-05-02 1997-08-01 Genset Sa Methode de couplage specifique de la coiffe de l'extremite 5' d'un fragment d'arnm et preparation d'arnm et d'adnc complet
US5700642A (en) 1995-05-22 1997-12-23 Sri International Oligonucleotide sizing using immobilized cleavable primers
US5730723A (en) 1995-10-10 1998-03-24 Visionary Medical Products Corporation, Inc. Gas pressured needle-less injection device and method
US6051429A (en) 1995-06-07 2000-04-18 Life Technologies, Inc. Peptide-enhanced cationic lipid transfections
US6111095A (en) 1995-06-07 2000-08-29 Merck & Co., Inc. Capped synthetic RNA, analogs, and aptamers
US5889136A (en) 1995-06-09 1999-03-30 The Regents Of The University Of Colorado Orthoester protecting groups in RNA synthesis
US5766903A (en) 1995-08-23 1998-06-16 University Technology Corporation Circular RNA and uses thereof
US6265389B1 (en) 1995-08-31 2001-07-24 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Microencapsulation and sustained release of oligonucleotides
WO1997011085A1 (en) 1995-09-19 1997-03-27 University Of Massachusetts Inhibited biological degradation of oligodeoxynucleotides
US5830879A (en) 1995-10-02 1998-11-03 St. Elizabeth's Medical Center Of Boston, Inc. Treatment of vascular injury using vascular endothelial growth factor
US6265387B1 (en) 1995-10-11 2001-07-24 Mirus, Inc. Process of delivering naked DNA into a hepatocyte via bile duct
EP0771873A3 (en) 1995-10-27 1998-03-04 Takeda Chemical Industries, Ltd. Neuronal cell-specific receptor protein
CU22584A1 (es) 1995-11-17 1999-11-03 Centro Inmunologia Molecular Composiciones farmacéuticas que contienen un anticuerpo monoclonal que reconoce el antígeno de diferenciación leucocitario humano cd6 y sus usos para el diagnóstico y tratamiento de la psoriasis
US6090382A (en) 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
US5962271A (en) 1996-01-03 1999-10-05 Cloutech Laboratories, Inc. Methods and compositions for generating full-length cDNA having arbitrary nucleotide sequence at the 3'-end
US5893397A (en) 1996-01-12 1999-04-13 Bioject Inc. Medication vial/syringe liquid-transfer apparatus
US6261584B1 (en) 1996-02-02 2001-07-17 Alza Corporation Sustained delivery of an active agent using an implantable system
US6395292B2 (en) 1996-02-02 2002-05-28 Alza Corporation Sustained delivery of an active agent using an implantable system
WO1997030064A1 (en) 1996-02-16 1997-08-21 Stichting Rega Vzw Hexitol containing oligonucleotides and their use in antisense strategies
US6534312B1 (en) 1996-02-22 2003-03-18 Merck & Co., Inc. Vaccines comprising synthetic genes
US6090391A (en) 1996-02-23 2000-07-18 Aviron Recombinant tryptophan mutants of influenza
US6300487B1 (en) 1996-03-19 2001-10-09 Cell Therapuetics, Inc. Mammalian lysophosphatidic acid acyltransferase
SE9601245D0 (sv) 1996-03-29 1996-03-29 Pharmacia Ab Chimeric superantigens and their use
TW517061B (en) 1996-03-29 2003-01-11 Pharmacia & Amp Upjohn Ab Modified/chimeric superantigens and their use
GB9607549D0 (en) 1996-04-11 1996-06-12 Weston Medical Ltd Spring-powered dispensing device
US5712127A (en) 1996-04-29 1998-01-27 Genescape Inc. Subtractive amplification
US5853719A (en) 1996-04-30 1998-12-29 Duke University Methods for treating cancers and pathogen infections using antigen-presenting cells loaded with RNA
US7329741B2 (en) 1996-06-05 2008-02-12 Chiron Corporation Polynucleotides that hybridize to DP-75 and their use
WO1997046680A1 (en) 1996-06-05 1997-12-11 Chiron Corporation Dna encoding dp. 75 and a process for its use
WO1997048370A2 (en) 1996-06-21 1997-12-24 Merck & Co., Inc. Vaccines comprising synthetic genes
JP2002515786A (ja) 1996-06-28 2002-05-28 ソントラ メディカル，エル．ピー． 経皮輸送の超音波増強
US5939262A (en) 1996-07-03 1999-08-17 Ambion, Inc. Ribonuclease resistant RNA preparation and utilization
US5677124A (en) 1996-07-03 1997-10-14 Ambion, Inc. Ribonuclease resistant viral RNA standards
US7288266B2 (en) 1996-08-19 2007-10-30 United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Liposome complexes for increased systemic delivery
US5849546A (en) 1996-09-13 1998-12-15 Epicentre Technologies Corporation Methods for using mutant RNA polymerases with reduced discrimination between non-canonical and canonical nucleoside triphosphates
US6114148C1 (en) 1996-09-20 2012-05-01 Gen Hospital Corp High level expression of proteins
EP0932678B2 (en) 1996-09-24 2010-03-10 Genentech, Inc. A family of genes encoding apoptosis-related peptides, peptides encoded thereby and methods of use thereof
US6214966B1 (en) 1996-09-26 2001-04-10 Shearwater Corporation Soluble, degradable poly(ethylene glycol) derivatives for controllable release of bound molecules into solution
JP4111403B2 (ja) 1996-10-11 2008-07-02 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティー オブ カリフォルニア 免疫刺激ポリヌクレオチド／免疫調節分子複合体
EP0839912A1 (en) 1996-10-30 1998-05-06 Instituut Voor Dierhouderij En Diergezondheid (Id-Dlo) Infectious clones of RNA viruses and vaccines and diagnostic assays derived thereof
GB9623051D0 (en) 1996-11-06 1997-01-08 Schacht Etienne H Delivery of DNA to target cells in biological systems
US5980887A (en) 1996-11-08 1999-11-09 St. Elizabeth's Medical Center Of Boston Methods for enhancing angiogenesis with endothelial progenitor cells
US6143559A (en) * 1996-11-18 2000-11-07 Arch Development Corporation Methods for the production of chicken monoclonal antibodies
US5759179A (en) 1996-12-31 1998-06-02 Johnson & Johnson Medical, Inc. Needle and valve assembly for use with a catheter
DK0971946T3 (da) 1997-01-21 2006-10-30 Gen Hospital Corp Selektion af proteiner ved anvendelse af RNA-protein-fusioner
EP0855184A1 (en) 1997-01-23 1998-07-29 Grayson B. Dr. Lipford Pharmaceutical composition comprising a polynucleotide and an antigen especially for vaccination
US6696291B2 (en) 1997-02-07 2004-02-24 Merck & Co., Inc. Synthetic HIV gag genes
CA2280195A1 (en) 1997-02-07 1998-08-13 Merck & Co., Inc. Synthetic hiv gag genes
US6228640B1 (en) 1997-02-07 2001-05-08 Cem Cezayirli Programmable antigen presenting cell of CD34 lineage
US6251665B1 (en) 1997-02-07 2001-06-26 Cem Cezayirli Directed maturation of stem cells and production of programmable antigen presenting dentritic cells therefrom
US6406705B1 (en) 1997-03-10 2002-06-18 University Of Iowa Research Foundation Use of nucleic acids containing unmethylated CpG dinucleotide as an adjuvant
US6306393B1 (en) 1997-03-24 2001-10-23 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of B-cell malignancies using anti-CD22 antibodies
US6261281B1 (en) 1997-04-03 2001-07-17 Electrofect As Method for genetic immunization and introduction of molecules into skeletal muscle and immune cells
US5914269A (en) 1997-04-04 1999-06-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide inhibition of epidermal growth factor receptor expression
WO1998047913A2 (en) 1997-04-18 1998-10-29 The University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey Inhibition of hiv-1 replication by a tat rna-binding domain peptide analog
US5958688A (en) 1997-04-28 1999-09-28 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Characterization of mRNA patterns in neurites and single cells for medical diagnosis and therapeutics
US6235883B1 (en) 1997-05-05 2001-05-22 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
US5989911A (en) 1997-05-09 1999-11-23 University Of Massachusetts Site-specific synthesis of pseudouridine in RNA
US5993412A (en) 1997-05-19 1999-11-30 Bioject, Inc. Injection apparatus
US6124091A (en) 1997-05-30 2000-09-26 Research Corporation Technologies, Inc. Cell growth-controlling oligonucleotides
US6589940B1 (en) 1997-06-06 2003-07-08 Dynavax Technologies Corporation Immunostimulatory oligonucleotides, compositions thereof and methods of use thereof
WO1998055495A2 (en) 1997-06-06 1998-12-10 Dynavax Technologies Corporation Immunostimulatory oligonucleotides, compositions thereof and methods of use thereof
WO1999001579A1 (en) 1997-07-01 1999-01-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the delivery of oligonucleotides via the alimentary canal
US5994511A (en) 1997-07-02 1999-11-30 Genentech, Inc. Anti-IgE antibodies and methods of improving polypeptides
BR9815493A (pt) 1997-07-21 2000-10-31 Pharmacia & Upjohn Ab Citólise dirigida de células-alvo, agentes e composições que causam citólise, e compostos que podem ser usados para produzir os agentes
AU8763898A (en) 1997-07-31 1999-02-22 St. Elizabeth's Medical Center Of Boston, Inc. Method for the treatment of grafts
PT2044950E (pt) 1997-09-18 2012-09-18 Univ Pennsylvania Cassetes de imunização adn de vif atenuadas para vacinas genéticas
WO1999014346A2 (en) * 1997-09-19 1999-03-25 Sequitur, Inc. SENSE mRNA THERAPY
US6004573A (en) 1997-10-03 1999-12-21 Macromed, Inc. Biodegradable low molecular weight triblock poly(lactide-co-glycolide) polyethylene glycol copolymers having reverse thermal gelation properties
EP1021548A1 (en) 1997-10-07 2000-07-26 University Of Maryland Biotechnology Institute Method for introducing and expressing rna in animal cells
JP2001520048A (ja) 1997-10-20 2001-10-30 ジェンザイム トランスジェニックス コーポレイション 新規な改変されたＭＳＰ−１核酸配列並びに細胞システムにおいてｍＲＮＡレベル及び蛋白質発現を増大させる方法
US6019747A (en) 1997-10-21 2000-02-01 I-Flow Corporation Spring-actuated infusion syringe
WO1999022009A1 (en) 1997-10-24 1999-05-06 Megabios Corporation Methods for preparing polynucleotide transfection complexes
CA2309766C (en) 1997-11-20 2008-09-30 Vical Incorporated Treatment of cancer using cytokine-expressing polynucleotides and compositions therefor
US7655777B2 (en) 1997-11-24 2010-02-02 Monsanto Technology Llc Nucleic acid molecules associated with the tocopherol pathway
US6267987B1 (en) 1997-12-12 2001-07-31 Samyang Corporation Positively charged poly[alpha-(omega-aminoalkyl) glycolic acid] for the delivery of a bioactive agent via tissue and cellular uptake
US6517869B1 (en) 1997-12-12 2003-02-11 Expression Genetics, Inc. Positively charged poly(alpha-(omega-aminoalkyl)lycolic acid) for the delivery of a bioactive agent via tissue and cellular uptake
WO1999033982A2 (en) 1997-12-23 1999-07-08 Chiron Corporation Human genes and gene expression products i
US6383811B2 (en) 1997-12-30 2002-05-07 Mirus Corporation Polyampholytes for delivering polyions to a cell
EP2138191A1 (en) 1998-01-05 2009-12-30 University Of Washington Enhanced transport using membrane disruptive agents
IT1298087B1 (it) 1998-01-08 1999-12-20 Fiderm S R L Dispositivo per il controllo della profondita' di penetrazione di un ago, in particolare applicabile ad una siringa per iniezioni
EP1045714A1 (en) 1998-01-08 2000-10-25 Sontra Medical, L.P. Sonophoretic enhanced transdermal transport
US8287483B2 (en) 1998-01-08 2012-10-16 Echo Therapeutics, Inc. Method and apparatus for enhancement of transdermal transport
US6365346B1 (en) 1998-02-18 2002-04-02 Dade Behring Inc. Quantitative determination of nucleic acid amplification products
US5955310A (en) 1998-02-26 1999-09-21 Novo Nordisk Biotech, Inc. Methods for producing a polypeptide in a bacillus cell
US6432925B1 (en) 1998-04-16 2002-08-13 John Wayne Cancer Institute RNA cancer vaccine and methods for its use
US6429301B1 (en) 1998-04-17 2002-08-06 Whitehead Institute For Biomedical Research Use of a ribozyme to join nucleic acids and peptides
GB9808327D0 (en) 1998-04-20 1998-06-17 Chiron Spa Antidiotypic compounds
AU3534199A (en) 1998-04-23 1999-11-08 Takara Shuzo Co., Ltd. Method For Synthesizing DNA
US6395253B2 (en) 1998-04-23 2002-05-28 The Regents Of The University Of Michigan Microspheres containing condensed polyanionic bioactive agents and methods for their production
US20020064517A1 (en) 1998-04-30 2002-05-30 Stewart A. Cederholm-Williams Fibrin sealant as a transfection/transformation vehicle for gene therapy
US20090208418A1 (en) 2005-04-29 2009-08-20 Innexus Biotechnology Internaltional Ltd. Superantibody synthesis and use in detection, prevention and treatment of disease
BR9911062A (pt) 1998-05-20 2001-02-06 Expression Genetics Inc Veìculo de gene polimérico de poli-l-lisina enxertado por polietileno glicol de direcionamento de hepatócito
US6503231B1 (en) 1998-06-10 2003-01-07 Georgia Tech Research Corporation Microneedle device for transport of molecules across tissue
US7091192B1 (en) 1998-07-01 2006-08-15 California Institute Of Technology Linear cyclodextrin copolymers
TR200100254T2 (tr) 1998-07-13 2001-06-21 Expression Genetics, Inc. Eriyebilir ve bakterilerle ayrışabilir bir gen iletim taşıyıcısı olarak poly-l-lysine benzeri bir poliyester.
US6222030B1 (en) 1998-08-03 2001-04-24 Agilent Technologies, Inc. Solid phase synthesis of oligonucleotides using carbonate protecting groups and alpha-effect nucleophile deprotection
PL195870B1 (pl) 1998-08-11 2007-11-30 Biogen Idec Inc Zastosowanie przeciwciała anty-CD20, zastosowanieznakowanego radioaktywnie przeciwciała anty-CD20,zastosowanie przeciwciała anty-CD20 do przygotowania leku zwierającego przeciwciało i chemioterapięoraz zastosowanie przeciwciała anty-CD20 do przygotowania leku zawierającego przeciwciało i szpik kostny
GB9817662D0 (en) 1998-08-13 1998-10-07 Crocker Peter J Substance delivery
US20090148906A1 (en) 1998-09-29 2009-06-11 Shire Human Genetic Therapies, Inc. A Delaware Corporation Optimized messenger rna
US6924365B1 (en) 1998-09-29 2005-08-02 Transkaryotic Therapies, Inc. Optimized messenger RNA
CA2348779A1 (en) 1998-11-03 2000-05-11 Yale University Multidomain polynucleotide molecular sensors
DK1616572T3 (da) 1998-11-09 2010-12-06 Biogen Idec Inc Kimært anti-CD20-antistof, rituxan, til anvendelse i behandling af kronisk lymfatisk leukæmi
HK1041811A1 (zh) 1998-11-09 2002-07-26 Idec药物公司 接受bmt或pbsc移植患者的抗cd20嵌合抗体治疗
WO2000027340A2 (en) 1998-11-12 2000-05-18 The Children's Medical Center Corporation USE OF t-RNA AND FRAGMENTS FOR INHIBITING ANGIOGENESIS AND COMPOSITIONS THEREOF
US6210931B1 (en) 1998-11-30 2001-04-03 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Ribozyme-mediated synthesis of circular RNA
US20040171980A1 (en) 1998-12-18 2004-09-02 Sontra Medical, Inc. Method and apparatus for enhancement of transdermal transport
JP2002533134A (ja) 1998-12-23 2002-10-08 ヒューマン ジノーム サイエンシーズ， インコーポレイテッド ペプチドグリカン認識タンパク質
AU2685200A (en) 1999-02-22 2000-09-14 European Molecular Biology Laboratory Translation system
US6255476B1 (en) 1999-02-22 2001-07-03 Pe Corporation (Ny) Methods and compositions for synthesis of labelled oligonucleotides and analogs on solid-supports
US7629311B2 (en) 1999-02-24 2009-12-08 Edward Lewis Tobinick Methods to facilitate transmission of large molecules across the blood-brain, blood-eye, and blood-nerve barriers
EP2286792A1 (en) 1999-02-26 2011-02-23 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Microemulsions with an adsorbent surface, comprising a microdroplet emulsion
AU778809B2 (en) 1999-03-29 2004-12-23 Statens Serum Institut Method for producing a nucleotide sequence construct with optimised codons for an HIV genetic vaccine based on primary, early HIV isolate and synthetic envelope BX08 constructs
EP1985639B1 (en) 1999-04-09 2013-08-14 Life Technologies AS Process for the preparation of monodisperse polymer particles
ATE311199T1 (de) 1999-05-07 2005-12-15 Genentech Inc Behandlung von autoimmunkrankheiten mit antagonisten die oberflächenmarker von b zellen binden
US8663692B1 (en) 1999-05-07 2014-03-04 Pharmasol Gmbh Lipid particles on the basis of mixtures of liquid and solid lipids and method for producing same
US6346382B1 (en) 1999-06-01 2002-02-12 Vanderbilt University Human carbamyl phosphate synthetase I polymorphism and diagnostic methods related thereto
US6611707B1 (en) 1999-06-04 2003-08-26 Georgia Tech Research Corporation Microneedle drug delivery device
WO2000075356A1 (en) 1999-06-04 2000-12-14 Lin Shi Lung Rna polymerase chain reaction
US6743211B1 (en) 1999-11-23 2004-06-01 Georgia Tech Research Corporation Devices and methods for enhanced microneedle penetration of biological barriers
US6303573B1 (en) 1999-06-07 2001-10-16 The Burnham Institute Heart homing peptides and methods of using same
AU776268B2 (en) 1999-06-08 2004-09-02 Aventis Pasteur Immunostimulant oligonucleotide
EP1194167B1 (en) 1999-06-09 2009-08-19 Immunomedics, Inc. Immunotherapy of autoimmune disorders using antibodies which target b-cells
US6949245B1 (en) 1999-06-25 2005-09-27 Genentech, Inc. Humanized anti-ErbB2 antibodies and treatment with anti-ErbB2 antibodies
EP1196426A4 (en) 1999-06-30 2003-09-03 Advanced Cell Tech Inc CYTOPLASMATIC TRANSFER FOR DE-DIFFERENTIATION OF VASCELL CELLS
US6514948B1 (en) 1999-07-02 2003-02-04 The Regents Of The University Of California Method for enhancing an immune response
IL147026A0 (en) 1999-07-09 2002-08-14 American Home Prod Method and compositions for preventing the formation of aberrant rna during transcripting of a plasmid sequence
US8557244B1 (en) 1999-08-11 2013-10-15 Biogen Idec Inc. Treatment of aggressive non-Hodgkins lymphoma with anti-CD20 antibody
CN102766210B (zh) 1999-08-24 2015-07-08 E.R.施贵宝&圣斯有限责任公司 人ctla-4抗体及其应用
US20050112141A1 (en) 2000-08-30 2005-05-26 Terman David S. Compositions and methods for treatment of neoplastic disease
US20040106567A1 (en) 1999-09-07 2004-06-03 Hagstrom James E. Intravascular delivery of non-viral nucleic acid
DE69943068D1 (de) 1999-09-09 2011-02-03 Curevac Gmbh Transfer von mRNA unter Verwendung von polykationischen Verbindungen
WO2001021810A1 (en) 1999-09-17 2001-03-29 Aventis Pasteur Limited Chlamydia antigens and corresponding dna fragments and uses thereof
US6623457B1 (en) 1999-09-22 2003-09-23 Becton, Dickinson And Company Method and apparatus for the transdermal administration of a substance
WO2002064799A2 (en) 1999-09-28 2002-08-22 Transkaryotic Therapies, Inc. Optimized messenger rna
US6528262B1 (en) 1999-10-06 2003-03-04 Quark Biotech, Inc. Method for enrichment of natural antisense messenger RNA
US7060291B1 (en) 1999-11-24 2006-06-13 Transave, Inc. Modular targeted liposomal delivery system
US6613026B1 (en) 1999-12-08 2003-09-02 Scimed Life Systems, Inc. Lateral needle-less injection apparatus and method
US6277974B1 (en) 1999-12-14 2001-08-21 Cogent Neuroscience, Inc. Compositions and methods for diagnosing and treating conditions, disorders, or diseases involving cell death
US6245929B1 (en) 1999-12-20 2001-06-12 General Electric Company Catalyst composition and method for producing diaryl carbonates, using bisphosphines
AU2019201A (en) 1999-12-22 2001-07-03 Basell Technology Company B.V. Alpha-olefin polymerization catalyst system which contains an aromatic silane compound
WO2001051092A2 (en) 2000-01-07 2001-07-19 University Of Washington Enhanced transport of agents using membrane disruptive agents
AU2001232485A1 (en) 2000-01-13 2001-07-24 Amsterdam Support Diagnostics B.V. A universal nucleic acid amplification system for nucleic acids in a sample
WO2001055341A2 (en) 2000-01-31 2001-08-02 The Regents Of The University Of California Immunomodulatory polynucleotides in treatment of an infection by an intracellular pathogen
CA2395811A1 (en) 2000-01-31 2001-08-02 Human Genome Sciences, Inc. Nucleic acids, proteins, and antibodies
US6602498B2 (en) 2000-02-22 2003-08-05 Shearwater Corporation N-maleimidyl polymer derivatives
IL151378A0 (en) 2000-02-24 2003-04-10 Univ Washington Humanized antibodies that sequester amyloid beta peptide
CA2401327C (en) 2000-03-03 2014-05-06 Valentis, Inc. Nucleic acid formulations comprising poly-amino acids for gene delivery and methods of use
US20020081597A1 (en) 2000-03-31 2002-06-27 Genentech, Inc. Compositions and methods for detecting and quantifying gene expression
CN1981868A (zh) 2000-03-31 2007-06-20 拜奥根Idec公司 抗细胞因子抗体或拮抗剂与抗－cd20在b细胞淋巴瘤治疗中的联合应用
US6565572B2 (en) 2000-04-10 2003-05-20 Sdgi Holdings, Inc. Fenestrated surgical screw and method
US6368801B1 (en) 2000-04-12 2002-04-09 Molecular Staging, Inc. Detection and amplification of RNA using target-mediated ligation of DNA by RNA ligase
EP1274720A4 (en) 2000-04-12 2004-08-18 Human Genome Sciences Inc FUSION PROTEINS CONTAINING ALBUMIN
US20010046496A1 (en) 2000-04-14 2001-11-29 Brettman Lee R. Method of administering an antibody
US6375972B1 (en) 2000-04-26 2002-04-23 Control Delivery Systems, Inc. Sustained release drug delivery devices, methods of use, and methods of manufacturing thereof
US7871598B1 (en) 2000-05-10 2011-01-18 Novartis Ag Stable metal ion-lipid powdered pharmaceutical compositions for drug delivery and methods of use
US20040229271A1 (en) 2000-05-19 2004-11-18 Williams Richard B. Compositions and methods for the identification and selection of nucleic acids and polypeptides
WO2001092523A2 (en) 2000-05-30 2001-12-06 Curagen Corporation Human polynucleotides and polypeptides encoded thereby
EP1292331A2 (en) 2000-06-07 2003-03-19 Biosynexus Incorporated Immunostimulatory rna/dna hybrid molecules
DK1292615T3 (da) 2000-06-23 2007-02-19 Wyeth Corp Modificerede morbillivirus V-proteiner
CA2414884A1 (en) 2000-07-03 2002-01-10 Chiron S.P.A. Immunisation against chlamydia pneumoniae
US6440096B1 (en) 2000-07-14 2002-08-27 Becton, Dickinson And Co. Microdevice and method of manufacturing a microdevice
ATE346947T1 (de) 2000-07-21 2006-12-15 Glaxo Group Ltd Kodon-optimierte papillomavirussequenzen
US6902734B2 (en) 2000-08-07 2005-06-07 Centocor, Inc. Anti-IL-12 antibodies and compositions thereof
US6696038B1 (en) 2000-09-14 2004-02-24 Expression Genetics, Inc. Cationic lipopolymer as biocompatible gene delivery agent
US20040142474A1 (en) 2000-09-14 2004-07-22 Expression Genetics, Inc. Novel cationic lipopolymer as a biocompatible gene delivery agent
WO2002024873A1 (en) 2000-09-20 2002-03-28 Christopher Ralph Franks Stem cell therapy
EP1322338A4 (en) 2000-10-04 2005-04-13 Univ Pennsylvania COMPOSITIONS AND METHODS OF USING A CAPSID PROTEIN FROM VARIOUS FLAVIVIRUS AND PESTIVIRUS
US6998115B2 (en) 2000-10-10 2006-02-14 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable poly(β-amino esters) and uses thereof
US7202226B2 (en) 2000-10-23 2007-04-10 Detroit R & D Augmentation of wound healing by elF-4E mRNA and EGF mRNA
US20030077604A1 (en) 2000-10-27 2003-04-24 Yongming Sun Compositions and methods relating to breast specific genes and proteins
US20020132788A1 (en) 2000-11-06 2002-09-19 David Lewis Inhibition of gene expression by delivery of small interfering RNA to post-embryonic animal cells in vivo
US7521054B2 (en) 2000-11-17 2009-04-21 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Reduction of the nonspecific animal toxicity of immunotoxins by mutating the framework regions of the Fv to lower the isoelectric point
EP2339035A1 (en) 2000-12-07 2011-06-29 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Endogenous retroviruses up-regulated in prostate cancer
US7708915B2 (en) 2004-05-06 2010-05-04 Castor Trevor P Polymer microspheres/nanospheres and encapsulating therapeutic proteins therein
US20020130430A1 (en) 2000-12-29 2002-09-19 Castor Trevor Percival Methods for making polymer microspheres/nanospheres and encapsulating therapeutic proteins and other products
SG149684A1 (en) 2001-01-19 2009-02-27 Vironovative Bv A virus causing respiratory tract illness in susceptible animals
EP1224943A1 (en) 2001-01-19 2002-07-24 Crucell Holland B.V. Fibronectin as a tumor marker detected by phage antibodies
US20040110191A1 (en) 2001-01-31 2004-06-10 Winkler Matthew M. Comparative analysis of nucleic acids using population tagging
EP1366196A4 (en) 2001-02-14 2004-07-07 Baylor College Medicine RNA AMPLIFICATION METHODS AND COMPOSITIONS
US6652886B2 (en) 2001-02-16 2003-11-25 Expression Genetics Biodegradable cationic copolymers of poly (alkylenimine) and poly (ethylene glycol) for the delivery of bioactive agents
DE10109897A1 (de) 2001-02-21 2002-11-07 Novosom Ag Fakultativ kationische Liposomen und Verwendung dieser
US7232425B2 (en) 2001-03-02 2007-06-19 Sorenson Development, Inc. Apparatus and method for specific interstitial or subcutaneous diffusion and dispersion of medication
CN100471956C (zh) 2001-03-09 2009-03-25 基因流股份有限公司 新型表达载体
JP2002262882A (ja) 2001-03-12 2002-09-17 Nisshinbo Ind Inc Ｒｎａの増幅法
FR2822164B1 (fr) 2001-03-19 2004-06-18 Centre Nat Rech Scient Polypeptides derives des arn polymerases, et leurs utilisations
US6520949B2 (en) 2001-04-02 2003-02-18 Martin St. Germain Method and apparatus for administering fluid to animals subcutaneously
DE10119005A1 (de) 2001-04-18 2002-10-24 Roche Diagnostics Gmbh Verfahren zur Proteinexpression ausgehend von stabilisierter linearer kurzer DNA in zellfreien in vitro-Transkription/Translations-Systemen mit Exonuklease-haltigen Lysaten oder in einem zellulären System enthaltend Exonukleasen
US20030171253A1 (en) 2001-04-19 2003-09-11 Averil Ma Methods and compositions relating to modulation of A20
IL158514A0 (en) 2001-04-23 2004-05-12 Amaxa Gmbh Buffer solution for electroporation and a method comprising the use of the same
US7560424B2 (en) 2001-04-30 2009-07-14 Zystor Therapeutics, Inc. Targeted therapeutic proteins
US6777187B2 (en) 2001-05-02 2004-08-17 Rubicon Genomics, Inc. Genome walking by selective amplification of nick-translate DNA library and amplification from complex mixtures of templates
US6527216B2 (en) 2001-05-08 2003-03-04 Magnatech International Llp Electronic length control wire pay-off system and method
US20050137155A1 (en) 2001-05-18 2005-06-23 Sirna Therapeutics, Inc. RNA interference mediated treatment of Parkinson disease using short interfering nucleic acid (siNA)
US8137911B2 (en) 2001-05-22 2012-03-20 Cellscript, Inc. Preparation and use of single-stranded transcription substrates for synthesis of transcription products corresponding to target sequences
CA2449054C (en) 2001-05-30 2011-01-04 The Scripps Research Institute Integrin targeting liposome for nucleic acid delivery
EP1903054A3 (de) 2001-06-05 2008-07-23 CureVac GmbH Stabilisierte mRNA mit erhöhtem G/C-Gehalt und optimierter Codon Usage für die Gentherapie
AU2002317824A1 (en) 2001-06-18 2003-01-02 Novartis Pharma Gmbh Novel g-protein coupled receptors and dna sequences thereof
US7547551B2 (en) 2001-06-21 2009-06-16 University Of Antwerp. Transfection of eukaryontic cells with linear polynucleotides by electroporation
US7785610B2 (en) 2001-06-21 2010-08-31 Dynavax Technologies Corporation Chimeric immunomodulatory compounds and methods of using the same—III
AU2002352554A1 (en) 2001-06-26 2003-03-03 Novartis Ag G protein coupled receptors and dna sequences thereof
SE0102327D0 (sv) 2001-06-28 2001-06-28 Active Biotech Ab A novel engineered superantigen for human therapy
US20040236092A1 (en) 2001-07-13 2004-11-25 Roman Dziarski Peptidologlycan recognition protein encoding nucleic acids and methods of use thereof
US6586524B2 (en) 2001-07-19 2003-07-01 Expression Genetics, Inc. Cellular targeting poly(ethylene glycol)-grafted polymeric gene carrier
DE60237696D1 (de) 2001-08-01 2010-10-28 Univ Utah Am n-terminus trunkierte isoformen von zyklischen phosphodiesterasen pde3a
US20050106659A1 (en) 2001-08-27 2005-05-19 Klemens Kaupmann Novel g-protein coupled receptor and dna sequences thereof
US20040142325A1 (en) 2001-09-14 2004-07-22 Liat Mintz Methods and systems for annotating biomolecular sequences
AR045702A1 (es) 2001-10-03 2005-11-09 Chiron Corp Composiciones de adyuvantes.
DE10148886A1 (de) 2001-10-04 2003-04-30 Avontec Gmbh Inhibition von STAT-1
US7276489B2 (en) 2002-10-24 2007-10-02 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by optimal presentation of 5′ ends
DE60231901D1 (de) 2001-11-14 2009-05-20 Toyo Boseki Dna-synthesepromotoren, mit dna-polymerase assoziierte faktoren und nutzung davon
WO2003044482A2 (en) 2001-11-16 2003-05-30 The University Of Tennessee Research Corporation Recombinant antibody fusion proteins and methods for detection of apoptotic cells
US20050032062A1 (en) 2001-11-29 2005-02-10 Salah-Dine Chibout Methods for the assessment and prognosis of sarcoidosis
CA2409775C (en) 2001-12-03 2010-07-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Reversibly modified thermostable enzymes for dna synthesis and amplification in vitro
DE60235413D1 (de) 2001-12-07 2010-04-01 Novartis Vaccines & Diagnostic Bei prostatakrebs hochreguliertes endogenes retrovirus
EP1521594B1 (en) 2001-12-07 2013-10-02 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Endogenous retrovirus polypeptides linked to oncogenic transformation
US20060275747A1 (en) 2001-12-07 2006-12-07 Hardy Stephen F Endogenous retrovirus up-regulated in prostate cancer
EP1458755A2 (en) 2001-12-17 2004-09-22 Novartis AG Novel g-protein coupled receptors and dna sequences thereof
DE10162480A1 (de) 2001-12-19 2003-08-07 Ingmar Hoerr Die Applikation von mRNA für den Einsatz als Therapeutikum gegen Tumorerkrankungen
WO2003059194A2 (en) 2001-12-21 2003-07-24 Alcon, Inc. Use of synthetic inorganic nanoparticles as carriers for ophthalmic and otic drugs
WO2003059381A2 (en) 2002-01-18 2003-07-24 Curevac Gmbh Immunogenic preparations and vaccines on the basis of mrna
AU2003203079B8 (en) 2002-02-04 2009-01-15 Oncothyreon Inc. Immunostimulatory, covalently lipidated oligonucleotides
CA2473144C (en) 2002-02-05 2013-05-28 Genentech, Inc. Protein purification
FR2835749B1 (fr) 2002-02-08 2006-04-14 Inst Nat Sante Rech Med Composition pharmaceutique ameliorant le transfert de gene in vivo
DE10207178A1 (de) 2002-02-19 2003-09-04 Novosom Ag Komponenten für die Herstellung amphoterer Liposomen
AR038568A1 (es) 2002-02-20 2005-01-19 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-a beta y su uso
US7354742B2 (en) 2002-02-22 2008-04-08 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Method for generating amplified RNA
EP1572941A4 (en) 2002-02-26 2009-03-18 Maxygen Inc NEW FLAVIVIRUS ANTIGENES
US7498414B2 (en) 2002-03-04 2009-03-03 Imclone Systems Incorporated Human antibodies specific to KDR and uses thereof
WO2003075892A1 (en) 2002-03-13 2003-09-18 Novartis Ag Pharmaceutical microparticles
US7074596B2 (en) 2002-03-25 2006-07-11 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Synthesis and use of anti-reverse mRNA cap analogues
CA2480775C (en) 2002-04-04 2016-05-31 Coley Pharmaceutical Gmbh Immunostimulatory g,u-containing oligoribonucleotides
US7399583B2 (en) 2002-04-17 2008-07-15 Novartis Ag Method for the identification of inhibitors of the binding of ARE-containing mRNA and a HuR protein
GB0209539D0 (en) 2002-04-26 2002-06-05 Avecia Ltd Monomer Polymer and process
EP1361277A1 (en) 2002-04-30 2003-11-12 Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) Optimization of transgene expression in mammalian cells
SG187991A1 (en) 2002-05-02 2013-03-28 Wyeth Corp Calicheamicin derivative-carrier conjugates
US7374930B2 (en) 2002-05-21 2008-05-20 Expression Genetics, Inc. GLP-1 gene delivery for the treatment of type 2 diabetes
US20040018525A1 (en) 2002-05-21 2004-01-29 Bayer Aktiengesellschaft Methods and compositions for the prediction, diagnosis, prognosis, prevention and treatment of malignant neoplasma
DE10224200C1 (de) 2002-05-31 2003-08-21 Artus Ges Fuer Molekularbiolog Vermehrung von Ribonukleinsäuren
WO2003101401A2 (en) 2002-06-03 2003-12-11 Chiron Corporation Use of nrg4, or inhibitors thereof, in the treatment of colon and pancreatic cancer
SE0201907D0 (sv) 2002-06-19 2002-06-19 Atos Medical Ab Plaster for tracheostoma valves
EP1519714B1 (en) 2002-06-28 2010-10-20 Protiva Biotherapeutics Inc. Method and apparatus for producing liposomes
US20040122216A1 (en) 2002-07-01 2004-06-24 Jacob Nielsen Recombinant tissue protective cytokines and encoding nucleic acids thereof for protection, restoration, and enhancement of responsive cells, tissues, and organs
DE10229872A1 (de) 2002-07-03 2004-01-29 Curevac Gmbh Immunstimulation durch chemisch modifizierte RNA
GB0215509D0 (en) 2002-07-04 2002-08-14 Novartis Ag Marker genes
DE60336736D1 (de) 2002-07-16 2011-05-26 VGX Pharmaceuticals LLC Codon-optimierte synthetische plasmide
AU2003252136A1 (en) 2002-07-24 2004-02-09 Ptc Therapeutics, Inc. METHODS FOR IDENTIFYING SMALL MOLEDULES THAT MODULATE PREMATURE TRANSLATION TERMINATION AND NONSENSE MEDIATED mRNA DECAY
EP1393745A1 (en) 2002-07-29 2004-03-03 Hybridon, Inc. Modulation of immunostimulatory properties of oligonucleotide-based compounds by optimal presentation of 5'ends
US6653468B1 (en) 2002-07-31 2003-11-25 Isis Pharmaceuticals, Inc. Universal support media for synthesis of oligomeric compounds
EP1386925A1 (en) 2002-07-31 2004-02-04 Girindus AG Method for preparing oligonucleotides
EP1873180B1 (en) 2002-08-14 2014-05-07 Novartis AG Ophthalmic device made from a radiation-curable prepolymer
EP2277551B1 (en) 2002-09-06 2013-05-08 Cerulean Pharma Inc. Cyclodextrin-based polymers for delivering the therapeutic agents covalently bound thereto
AU2003270555B2 (en) 2002-09-09 2009-01-29 Nektar Therapeutics Method for preparing water-soluble polymer derivatives bearing a terminal carboxylic acid
US7534872B2 (en) 2002-09-27 2009-05-19 Syngen, Inc. Compositions and methods for the use of FMOC derivatives in DNA/RNA synthesis
KR20110017020A (ko) 2002-10-17 2011-02-18 젠맵 에이/에스 Ｃｄ20에 대한 인간 모노클로날 항체
AU2003301576A1 (en) 2002-10-22 2004-05-13 Eisai Co., Ltd. Gene expressed specifically in dopamine-producing neuron precursor cells after termination of division
US7413857B2 (en) 2002-11-21 2008-08-19 Epicentre Technologies Methods for using riboprimers for strand displacement replication of target sequences
US7491234B2 (en) 2002-12-03 2009-02-17 Boston Scientific Scimed, Inc. Medical devices for delivery of therapeutic agents
EP1944320A1 (en) 2002-12-16 2008-07-16 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants and uses thereof
US7625872B2 (en) 2002-12-23 2009-12-01 Dynavax Technologies Corporation Branched immunomodulatory compounds and methods of using the same
US7169892B2 (en) 2003-01-10 2007-01-30 Astellas Pharma Inc. Lipid-peptide-polymer conjugates for long blood circulation and tumor specific drug delivery systems
US20080227085A1 (en) 2003-01-17 2008-09-18 Pellegrini Matthew C Methods and Systems for the Identification of Rna Regulatory Sequences and Compounds that Modulate their Function
EP2500437B1 (en) 2003-01-21 2016-11-30 PTC Therapeutics, Inc. Methods for identifying compounds that modulate untranslated region-dependent gene expression and methods of using same
US8426194B2 (en) 2003-01-21 2013-04-23 Ptc Therapeutics, Inc. Methods and agents for screening for compounds capable of modulating VEGF expression
US9068234B2 (en) 2003-01-21 2015-06-30 Ptc Therapeutics, Inc. Methods and agents for screening for compounds capable of modulating gene expression
US20040147027A1 (en) 2003-01-28 2004-07-29 Troy Carol M. Complex for facilitating delivery of dsRNA into a cell and uses thereof
AU2004210679A1 (en) 2003-02-10 2004-08-26 Elan Pharmaceuticals, Inc. Immunoglobulin formulation and method of preparation thereof
US20040167090A1 (en) 2003-02-21 2004-08-26 Monahan Sean D. Covalent modification of RNA for in vitro and in vivo delivery
CA2450289A1 (en) 2003-03-20 2005-05-19 Imclone Systems Incorporated Method of producing an antibody to epidermal growth factor receptor
US7320961B2 (en) 2003-03-24 2008-01-22 Abbott Laboratories Method for treating a disease, disorder or adverse effect caused by an elevated serum concentration of an UGT1A1 substrate
EP2194123B1 (en) 2003-03-25 2012-08-22 Stratagene California DNA polymerase fusions and uses thereof
WO2004092329A2 (en) 2003-04-08 2004-10-28 Galenica Pharmaceuticals, Inc. Semi-synthetic saponin analogs with carrier and immune stimulatory activities for dna and rna vaccines
SI1613350T1 (sl) 2003-04-09 2009-08-31 Genentech Inc Zdravljenje avtoimunske bolezni pri bolniku z neustreznim odzivom na inhibitor TNF-alfa
MXPA05011896A (es) 2003-05-05 2006-05-25 Univ Ben Gurion Preparaciones polimericas reticuladas inyectables y sus usos.
TWI353991B (en) 2003-05-06 2011-12-11 Syntonix Pharmaceuticals Inc Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids
US7348004B2 (en) 2003-05-06 2008-03-25 Syntonix Pharmaceuticals, Inc. Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids
ES2333598T5 (es) 2003-05-06 2013-09-04 Biogen Idec Hemophilia Inc Proteinas quimericas del factor de coagulacion fc para tratar la hemofilia.
US9567591B2 (en) 2003-05-15 2017-02-14 Mello Biotechnology, Inc. Generation of human embryonic stem-like cells using intronic RNA
GB0313132D0 (en) 2003-06-06 2003-07-09 Ich Productions Ltd Peptide ligands
WO2005009346A2 (en) 2003-06-24 2005-02-03 Mirus Corporation Inhibition of gene function by delivery of polynucleotide-based gene expression inhibitors to mammalian cells in vivo
GB0316089D0 (en) 2003-07-09 2003-08-13 Xo Bioscience Ltd Differentiation method
US8592197B2 (en) 2003-07-11 2013-11-26 Novavax, Inc. Functional influenza virus-like particles (VLPs)
US7575572B2 (en) 2003-07-15 2009-08-18 Spinal Generations, Llc Method and device for delivering medicine to bone
US20050013870A1 (en) 2003-07-17 2005-01-20 Toby Freyman Decellularized extracellular matrix of conditioned body tissues and uses thereof
NZ544797A (en) 2003-07-18 2011-04-29 Amgen Fremont Inc Specific antibodies that bind HGF and neutralise binding of HGF to met
DE10335833A1 (de) 2003-08-05 2005-03-03 Curevac Gmbh Transfektion von Blutzellen mit mRNA zur Immunstimulation und Gentherapie
US20050048112A1 (en) 2003-08-28 2005-03-03 Jorg Breitenbach Solid pharmaceutical dosage form
US8668926B1 (en) 2003-09-15 2014-03-11 Shaker A. Mousa Nanoparticle and polymer formulations for thyroid hormone analogs, antagonists, and formulations thereof
US7135010B2 (en) 2003-09-30 2006-11-14 Damage Control Surgical Technologies, Inc. Method and apparatus for rapid deployment chest drainage
CN1890384A (zh) 2003-10-06 2007-01-03 诺瓦提斯公司 与炎性疾病的治疗功效相关的遗传多态性的用途
DE10347710B4 (de) 2003-10-14 2006-03-30 Johannes-Gutenberg-Universität Mainz Rekombinante Impfstoffe und deren Verwendung
US20050130201A1 (en) 2003-10-14 2005-06-16 Dharmacon, Inc. Splint-assisted enzymatic synthesis of polyribounucleotides
PT1692182E (pt) 2003-11-05 2010-05-13 Roche Glycart Ag Anticorpos de cd20 com uma afinidade de ligação acrescida ao receptor fc e uma função efectora acrescida
WO2005047536A2 (en) 2003-11-13 2005-05-26 Novartis Ag Detection of genomic amplification and deletion in cancer
US20070054278A1 (en) 2003-11-18 2007-03-08 Applera Corporation Polymorphisms in nucleic acid molecules encoding human enzyme proteins, methods of detection and uses thereof
US7699852B2 (en) 2003-11-19 2010-04-20 Zimmer Spine, Inc. Fenestrated bone tap and method
US20050153333A1 (en) 2003-12-02 2005-07-14 Sooknanan Roy R. Selective terminal tagging of nucleic acids
WO2005055945A2 (en) 2003-12-08 2005-06-23 Gel-Del Technologies, Inc. Mucoadhesive drug delivery devices and methods of making and using thereof
US7674884B2 (en) 2003-12-10 2010-03-09 Novimmune S.A. Neutralizing antibodies and methods of use thereof
WO2005062854A2 (en) 2003-12-19 2005-07-14 University Of Cincinnati Polyamides for nucleic acid delivery
JP4943161B2 (ja) 2003-12-23 2012-05-30 ジェネンテック， インコーポレイテッド 新規抗ｉｌ１３モノクローナル抗体での癌の処置
WO2005072710A2 (en) 2004-01-28 2005-08-11 Johns Hopkins University Drugs and gene carrier particles that rapidly move through mucous barriers
US20070224635A1 (en) 2004-01-30 2007-09-27 Maxygen Holdings, Ltd. Regulated Stop Codon Readthrough
US7309487B2 (en) 2004-02-09 2007-12-18 George Inana Methods and compositions for detecting and treating retinal diseases
EP1716179A2 (en) 2004-02-12 2006-11-02 Morphotek, Inc. Monoclonal antibodies that specifically bind to folate receptor alpha
US20070265220A1 (en) * 2004-03-15 2007-11-15 City Of Hope Methods and compositions for the specific inhibition of gene expression by double-stranded RNA
WO2005090405A1 (ja) 2004-03-24 2005-09-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha インターロイキン－６受容体に対するヒト型化抗体のサブタイプ
WO2005098433A2 (en) 2004-04-01 2005-10-20 Novartis Ag Diagnostic assays for alzheimer’s disease
WO2005103081A2 (en) 2004-04-20 2005-11-03 Genmab A/S Human monoclonal antibodies against cd20
ES2246694B1 (es) 2004-04-29 2007-05-01 Instituto Cientifico Y Tecnologico De Navarra, S.A. Nanoparticulas pegiladas.
WO2005108411A2 (en) 2004-05-05 2005-11-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Substituted pixyl protecting groups for oligonucleotide synthesis
CA2566079A1 (en) 2004-05-12 2005-12-01 Terrence L. Scott Nucleic acid microspheres, production and delivery thereof
CA2568772A1 (en) 2004-06-01 2005-12-15 San Diego State University Foundation Expression system based on recombinant vesicular stomatitis virus synthesizing t7 rna polymerase
WO2005120152A2 (en) 2004-06-07 2005-12-22 Protiva Biotherapeutics, Inc. Cationic lipids and methods of use
ATE536418T1 (de) 2004-06-07 2011-12-15 Protiva Biotherapeutics Inc Lipidverkapselte interferenz-rna
CA2608862C (en) 2004-06-11 2020-05-05 Trustees Of Tufts College Silk-based drug delivery system
WO2006046978A2 (en) 2004-06-28 2006-05-04 Argos Therapeutics, Inc. Cationic peptide-mediated transformation
CA2571292C (en) 2004-06-30 2013-05-21 Nektar Therapeutics Al, Corporation Polymer-factor ix moiety conjugates
WO2006093526A2 (en) 2004-07-21 2006-09-08 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides comprising a modified or non-natural nucleobase
DE102004035227A1 (de) 2004-07-21 2006-02-16 Curevac Gmbh mRNA-Gemisch zur Vakzinierung gegen Tumorerkrankungen
US7603349B1 (en) 2004-07-29 2009-10-13 Yahoo! Inc. User interfaces for search systems using in-line contextual queries
GB0417487D0 (en) 2004-08-05 2004-09-08 Novartis Ag Organic compound
SE0402025D0 (sv) 2004-08-13 2004-08-13 Active Biotech Ab Treatment of hyperproliferative disease with superantigens in combination with another anticancer agent
US7291208B2 (en) 2004-08-13 2007-11-06 Gore Enterprise Holdings, Inc. Grooved active and passive adsorbent filters
CA2478458A1 (en) 2004-08-20 2006-02-20 Michael Panzara Treatment of pediatric multiple sclerosis
CA2577938C (en) 2004-08-26 2013-04-16 Himanshu Brahmbhatt Delivering functional nucleic acids to mammalian cells via bacterially derived, intact minicells
DE102004042546A1 (de) 2004-09-02 2006-03-09 Curevac Gmbh Kombinationstherapie zur Immunstimulation
US7501486B2 (en) 2004-09-07 2009-03-10 Burnham Institute For Medical Research Peptides that selectively home to heart vasculature and related conjugates and methods
US8663599B1 (en) 2004-10-05 2014-03-04 Gp Medical, Inc. Pharmaceutical composition of nanoparticles
EP1811018A4 (en) 2004-10-12 2007-11-28 Tissue Targeting Japan Inc PROGENITOR FOR BRAIN DISPOSAL FROM BONE MARROW
EP1815206B1 (en) 2004-10-13 2016-04-06 PTC Therapeutics, Inc. Compounds for nonsense suppression, and methods for their use
US8057821B2 (en) 2004-11-03 2011-11-15 Egen, Inc. Biodegradable cross-linked cationic multi-block copolymers for gene delivery and methods of making thereof
EP1812569A2 (en) 2004-11-08 2007-08-01 K.U. Leuven Research and Development Modified nucleosides for rna interference
JP2008520741A (ja) 2004-11-23 2008-06-19 ピーティーシー セラピューティクス， インコーポレイテッド 翻訳制御によるｖｅｇｆ生成を阻害するための活性因子としてのテトラヒドロカルバゾール
US7964571B2 (en) 2004-12-09 2011-06-21 Egen, Inc. Combination of immuno gene therapy and chemotherapy for treatment of cancer and hyperproliferative diseases
ES2407979T3 (es) 2004-12-10 2013-06-17 Kala Pharmaceuticals, Inc. Copolímeros de bloques de poli(éter-anhídrido) funcionalizados
US9068969B2 (en) 2004-12-28 2015-06-30 Ptc Therapeutics, Inc. Cell based methods and systems for the identification of RNA regulatory sequences and compounds that modulate their functions
US8535702B2 (en) 2005-02-01 2013-09-17 Boston Scientific Scimed, Inc. Medical devices having porous polymeric regions for controlled drug delivery and regulated biocompatibility
WO2006095259A2 (en) 2005-03-11 2006-09-14 Novartis Ag Biomarkers for cardiovascular side-effects induced by cox-2 inhibitory compounds
US8415325B2 (en) 2005-03-31 2013-04-09 University Of Delaware Cell-mediated delivery and targeted erosion of noncovalently crosslinked hydrogels
EP2083088A3 (en) 2005-04-07 2009-10-14 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Cancer-related genes
CA2604885A1 (en) 2005-04-07 2006-10-19 Guoying Yu Cacna1e in cancer diagnosis, detection and treatment
EP1885403B1 (en) 2005-04-12 2013-05-08 Nektar Therapeutics Poly(ethyleneglycol) conjugates of Lysostaphin
EP1877075A4 (en) 2005-04-25 2008-07-30 Pfizer ANTIBODY TO MYOSTATIN
EP1899467A2 (en) 2005-04-26 2008-03-19 Coley Pharmaceutical GmbH Modified oligoribonucleotide analogs with enhances immunostimulatory activity
PL2161336T5 (pl) 2005-05-09 2017-10-31 Ono Pharmaceutical Co Ludzkie przeciwciała monoklonalne przeciwko białku Programmed Death 1 (PD-1) oraz sposoby leczenia raka z zastosowaniem samych przeciwciał anty-PD-1 lub w połączeniu z innymi środkami immunoterapeutycznymi
US20070072175A1 (en) 2005-05-13 2007-03-29 Biogen Idec Ma Inc. Nucleotide array containing polynucleotide probes complementary to, or fragments of, cynomolgus monkey genes and the use thereof
US20060265771A1 (en) 2005-05-17 2006-11-23 Lewis David L Monitoring microrna expression and function
DE102005023170A1 (de) 2005-05-19 2006-11-23 Curevac Gmbh Optimierte Formulierung für mRNA
WO2006133148A2 (en) 2005-06-03 2006-12-14 Genentech, Inc. Method of producing antibodies with modified fucosylation level
US7550264B2 (en) 2005-06-10 2009-06-23 Datascope Investment Corporation Methods and kits for sense RNA synthesis
PT2279758E (pt) 2005-06-16 2015-05-27 Nektar Therapeutics Conjugados possuindo uma ligação degradável e reagentes poliméricos úteis na preparação de tais conjugados
US8202835B2 (en) 2005-06-17 2012-06-19 Yitzchak Hillman Disease treatment via antimicrobial peptides or their inhibitors
MX2007016039A (es) 2005-06-17 2008-10-27 Univ North Carolina Metodos, sistemas y materiales de fabricacion de nanoparticulas.
US8101385B2 (en) 2005-06-30 2012-01-24 Archemix Corp. Materials and methods for the generation of transcripts comprising modified nucleotides
CA2613442C (en) 2005-06-30 2016-08-23 Archemix Corp. Materials and methods for the generation of fully 2'-modified nucleic acid transcripts
WO2007014363A2 (en) 2005-07-27 2007-02-01 Genentech, Inc. Vectors for inducible expression of hairpin rna and use thereof
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
HUE043492T2 (hu) 2005-08-23 2019-08-28 Univ Pennsylvania Módosított nukleozidokat tartalmazó RNS és eljárások az alkalmazására
US9012219B2 (en) 2005-08-23 2015-04-21 The Trustees Of The University Of Pennsylvania RNA preparations comprising purified modified RNA for reprogramming cells
US20070048741A1 (en) 2005-08-24 2007-03-01 Getts Robert C Methods and kits for sense RNA synthesis
EP2308504A3 (en) 2005-09-01 2011-11-30 Novartis Vaccines and Diagnostics GmbH Multiple vaccines including serogroup C meningococcus
JP2009507030A (ja) 2005-09-01 2009-02-19 セルジーン・コーポレーション ワクチン及び抗感染症療法のための免疫調節性化合物の免疫学的使用
US8420605B2 (en) 2005-09-07 2013-04-16 The University Of Strathclyde Hydrogel compositions
US20120021042A1 (en) 2005-09-15 2012-01-26 Steffen Panzner Efficient Method For Loading Amphoteric Liposomes With Nucleic Acid Active Substances
DE102005046490A1 (de) 2005-09-28 2007-03-29 Johannes-Gutenberg-Universität Mainz Modifikationen von RNA, die zu einer erhöhten Transkriptstabilität und Translationseffizienz führen
EP2385141B1 (en) 2005-10-07 2013-08-07 SpeeDx Pty Ltd Multicomponent nucleic acid enzymes and methods for their use
US20070087437A1 (en) 2005-10-14 2007-04-19 Jifan Hu Methods for rejuvenating cells in vitro and in vivo
ES2377884T3 (es) 2005-11-04 2012-04-02 Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. Vacunas contra la gripe que incluyen combinaciones de adyuvantes particulados e inmunopotenciadores
US20070105124A1 (en) 2005-11-08 2007-05-10 Getts Robert C Methods and kits for nucleic acid amplification
EP1960538A2 (en) 2005-11-18 2008-08-27 Bioline Limited A method for enhancing enzymatic dna polymerase reactions
US10155816B2 (en) 2005-11-28 2018-12-18 Genmab A/S Recombinant monovalent antibodies and methods for production thereof
ATE551349T1 (de) 2005-11-30 2012-04-15 Epict Technologies Corp Methode unter verwendung von reversibel blockierten markierungsoligonukleotiden
TWI389709B (zh) 2005-12-01 2013-03-21 Novartis Ag 經皮治療系統
WO2008051245A2 (en) 2005-12-02 2008-05-02 Novartis Ag Nanoparticles for use in immunogenic compositions
US8603457B2 (en) 2005-12-02 2013-12-10 University Of Rochester Nonsense suppression and genetic codon alteration by targeted modification
US8242081B2 (en) 2005-12-06 2012-08-14 Centre National De La Recherche Scientifique Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules
US7579318B2 (en) 2005-12-06 2009-08-25 Centre De La Recherche De La Scientifique Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules
EP2546359A1 (en) 2005-12-08 2013-01-16 Novartis AG Effects of inhibitors of FGFR3 on gene transcription
CN101864392B (zh) 2005-12-13 2016-03-23 国立大学法人京都大学 核重新编程因子
WO2007069068A2 (en) 2005-12-16 2007-06-21 Diatos Cell penetrating peptide conjugates for delivering nucleic acids into cells
WO2007077042A1 (en) 2006-01-06 2007-07-12 Topotarget Switzerland Sa New method for the treatment of gout or pseudogout
US8178660B2 (en) 2006-01-13 2012-05-15 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Vaccines and immunotherapeutics using codon optimized IL-15 and methods for using the same
US20070178103A1 (en) 2006-01-30 2007-08-02 Fey Georg H CD19-specific immunotoxin and treatment method
US8946155B2 (en) 2006-02-03 2015-02-03 Opko Biologics Ltd. Long-acting polypeptides and methods of producing and administering same
US9458444B2 (en) 2006-02-03 2016-10-04 Opko Biologics Ltd. Long-acting coagulation factors and methods of producing same
US8476234B2 (en) 2006-02-03 2013-07-02 Prolor Biotech Inc. Long-acting coagulation factors and methods of producing same
DE102006007433A1 (de) 2006-02-17 2007-08-23 Curevac Gmbh Adjuvanz in Form einer Lipid-modifizierten Nukleinsäure
WO2007097561A1 (en) 2006-02-20 2007-08-30 Ewha University - Industry Collaboration Foundation Peptide having cell membrane penetrating activity
MX2008010841A (es) 2006-02-21 2008-10-27 Nektar Therapeutics Al Corp Polimeros degradables segmentados y conjugados hechos de los mismos.
WO2007100789A2 (en) 2006-02-24 2007-09-07 Wyeth Gpat3 encodes a mammalian, microsomal acyl-coa:glycerol 3-phosphate acyltransferase
AU2007221154A1 (en) 2006-02-24 2007-09-07 Novartis Ag Microparticles containing biodegradable polymer and cationic polysaccharide for use in immunogenic compositions
US7910152B2 (en) 2006-02-28 2011-03-22 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Poly(ester amide)-based drug delivery systems with controlled release rate and morphology
HUE047230T2 (hu) 2006-02-28 2020-04-28 Biogen Ma Inc Gyulladásos és autoimmun betegségek natalizumabbal való kezelésének módszerei
GB0605217D0 (en) 2006-03-15 2006-04-26 Novartis Ag Method and compositions for assessing acute rejection
WO2007109244A2 (en) 2006-03-21 2007-09-27 Morehouse School Of Medicine Novel nanoparticles for delivery of active agents
CA2648099C (en) 2006-03-31 2012-05-29 The Brigham And Women's Hospital, Inc System for targeted delivery of therapeutic agents
JP2009532466A (ja) 2006-04-04 2009-09-10 エスティーシー．ユーエヌエム 薬物送達用の膨潤性粒子
WO2007120863A2 (en) 2006-04-14 2007-10-25 Epicentre Technologies Kits and methods for generating 5' capped rna
EP1852127A1 (en) 2006-05-02 2007-11-07 Charité - Universitätsmedizin Berlin Use of a B-cell-depleting antibody for treatment of polyoma virus infections
EP2019691B1 (en) 2006-05-15 2020-08-12 Massachusetts Institute of Technology Polymers for functional particles
CA2649810A1 (en) 2006-05-24 2007-11-29 Laboratoires Serono S.A. Cladribine regimen for treating multiple sclerosis
US9150626B2 (en) 2006-06-02 2015-10-06 President And Fellows Of Harvard College Protein surface remodeling
EP2046383B1 (en) 2006-07-04 2014-11-19 Genmab A/S Cd20 binding molecules for the treatment of copd
DE602007013559D1 (de) 2006-07-07 2011-05-12 Univ Aarhus Nanoteilchen zur abgabe von nukleinsäure
DK2038310T3 (da) 2006-07-12 2010-09-27 Novartis Ag Aktinisk tværbindelige copolymerer til fremstilling af kontaktlinser
JP2009544287A (ja) 2006-07-20 2009-12-17 ノバルティス アーゲー 癌を処置、診断、または検出するためのａｍｉｇｏ−２インヒビター
WO2008013785A2 (en) 2006-07-24 2008-01-31 Singh-Broemer And Company, Inc. Solid nanoparticle formulation of water insoluble pharmaceutical substances with reduced ostwald ripening
WO2008016473A2 (en) 2006-07-28 2008-02-07 Applera Corporation Dinucleotide mrna cap analogs
JP2010507361A (ja) 2006-07-31 2010-03-11 キュアバック ゲーエムベーハー 具体的には免疫刺激剤／アジュバントとしての、一般式（Ｉ）：ＧｌＸｍＧｎ、または一般式（ＩＩ）：ＣｌＸｍＣｎで表される核酸
DE102006035618A1 (de) 2006-07-31 2008-02-07 Curevac Gmbh Nukleinsäure der Formel (I): GlXmGn, insbesondere als immunstimulierendes Adjuvanz
MX2009001445A (es) 2006-08-07 2009-02-18 Genzyme Corp Terapia de combinacion.
WO2008022046A2 (en) 2006-08-18 2008-02-21 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Dicer substrate rna peptide conjugates and methods for rna therapeutics
US8658211B2 (en) 2006-08-18 2014-02-25 Arrowhead Madison Inc. Polyconjugates for in vivo delivery of polynucleotides
AU2007292221B2 (en) 2006-09-06 2013-08-29 The Regents Of The University Of California Selectively targeted antimicrobial peptides and the use thereof
EP2059532B1 (en) 2006-09-07 2012-12-26 Crucell Holland B.V. Human binding molecules capable of neutralizing influenza virus h5n1 and uses thereof
WO2008030557A2 (en) 2006-09-08 2008-03-13 Johns Hopkins University Compositions and methods for enhancing transport through mucus
US8454948B2 (en) 2006-09-14 2013-06-04 Medgenics Medical Israel Ltd. Long lasting drug formulations
GB0619182D0 (en) 2006-09-29 2006-11-08 Leuven K U Res & Dev Oligonucleotide arrays
WO2008042973A2 (en) 2006-10-03 2008-04-10 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid containing formulations
CA2665343C (en) 2006-10-05 2014-12-16 The Johns Hopkins University Water-dispersible oral, parenteral, and topical formulations for poorly water soluble drugs using smart polymeric nanoparticles
DE102006051516A1 (de) * 2006-10-31 2008-05-08 Curevac Gmbh (Basen-)modifizierte RNA zur Expressionssteigerung eines Proteins
US8414927B2 (en) 2006-11-03 2013-04-09 Boston Scientific Scimed, Inc. Cross-linked polymer particles
US7999087B2 (en) 2006-11-15 2011-08-16 Agilent Technologies, Inc. 2′-silyl containing thiocarbonate protecting groups for RNA synthesis
US8242258B2 (en) 2006-12-03 2012-08-14 Agilent Technologies, Inc. Protecting groups for RNA synthesis
US8399007B2 (en) 2006-12-05 2013-03-19 Landec Corporation Method for formulating a controlled-release pharmaceutical formulation
PL2121011T3 (pl) 2006-12-06 2014-10-31 Novartis Ag Szczepionki zawierające antygeny czterech szczepów wirusa grypy
US9034348B2 (en) 2006-12-11 2015-05-19 Chi2Gel Ltd. Injectable chitosan mixtures forming hydrogels
WO2008076437A2 (en) 2006-12-18 2008-06-26 Acceleron Pharma Inc. Activin-actrii antagonists and uses for increasing red blood cell levels
WO2008140615A2 (en) 2006-12-21 2008-11-20 Novozymes, Inc. Modified messenger rna stabilizing sequences for expressing genes in bacterial cells
US20100184659A1 (en) 2006-12-21 2010-07-22 Warren Jaworowicz Sustained-Release Formulations Comprising Crystals, Macromolecular Gels, and Particulate Suspensions of Biologic Agents
DE102006061015A1 (de) 2006-12-22 2008-06-26 Curevac Gmbh Verfahren zur Reinigung von RNA im präparativen Maßstab mittels HPLC
WO2008078180A2 (en) 2006-12-22 2008-07-03 Archemix Corp. Materials and methods for the generation of transcripts comprising modified nucleotides
US8338166B2 (en) 2007-01-04 2012-12-25 Lawrence Livermore National Security, Llc Sorting, amplification, detection, and identification of nucleic acid subsequences in a complex mixture
DE102007001370A1 (de) * 2007-01-09 2008-07-10 Curevac Gmbh RNA-kodierte Antikörper
WO2008091799A2 (en) 2007-01-22 2008-07-31 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Cell-based methods for identifying inhibitors of parkinson's disease-associated lrrk2 mutants
EP2423219B1 (en) 2007-01-30 2015-04-29 Epivax, Inc. Regulatory T cell epitopes, compositions and uses thereof
US8859229B2 (en) 2007-02-02 2014-10-14 Yale University Transient transfection with RNA
TW201803890A (zh) 2007-02-02 2018-02-01 艾瑟勒朗法瑪公司 衍生自ＡｃｔＲＩＩＢ的變體與其用途
WO2008096370A2 (en) 2007-02-05 2008-08-14 Natco Pharma Limited An efficient and novel purification method of recombinant hg-csf
US8333799B2 (en) 2007-02-12 2012-12-18 C. R. Bard, Inc. Highly flexible stent and method of manufacture
US8242087B2 (en) 2007-02-27 2012-08-14 K.U.Leuven Research & Development Phosphate modified nucleosides useful as substrates for polymerases and as antiviral agents
JP5467415B2 (ja) * 2007-03-02 2014-04-09 ベーリンガー インゲルハイム ファルマ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディトゲゼルシャフト タンパク質製造の改良
EP1964922A1 (en) * 2007-03-02 2008-09-03 Boehringer Ingelheim Pharma GmbH &amp; Co. KG Improvement of protein production
EP2120876B1 (en) 2007-03-05 2015-03-04 Washington University Nanoparticle delivery systems for membrane-integrating peptides
JP2010521966A (ja) 2007-03-20 2010-07-01 ミレニアム・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド α４β７インテグリンに結合するヒト化免疫グロブリンをコードする核酸
PT2152358E (pt) 2007-04-27 2011-06-07 Echo Therapeutics Inc Dispositivo de permeação da pele para detecção de analito ou distribuição transdérmica de droga
JP2010526087A (ja) 2007-04-30 2010-07-29 グラクソスミスクライン・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー 抗ｉｌ−５抗体を投与するための方法
US8703204B2 (en) 2007-05-03 2014-04-22 Bend Research, Inc. Nanoparticles comprising a cholesteryl ester transfer protein inhibitor and anon-ionizable polymer
US7682789B2 (en) 2007-05-04 2010-03-23 Ventana Medical Systems, Inc. Method for quantifying biomolecules conjugated to a nanoparticle
LT2494993T (lt) 2007-05-04 2018-12-27 Marina Biotech, Inc. Aminorūgščių lipidai ir jų panaudojimas
WO2009023311A2 (en) 2007-05-07 2009-02-19 Alba Therapeutics Corporation Transcutaneous delivery of therapeutic agents
JP5296328B2 (ja) 2007-05-09 2013-09-25 独立行政法人理化学研究所 １本鎖環状ｒｎａおよびその製造方法
KR101625363B1 (ko) 2007-05-10 2016-05-30 애질런트 테크놀로지스, 인크. Ｒｎａ 합성을 위한 티오카본-보호기
DK3072525T3 (en) 2007-05-14 2018-04-30 Astrazeneca Ab PROCEDURES FOR REDUCING BASOFILE CELL LEVELS
WO2008144365A2 (en) 2007-05-17 2008-11-27 Novartis Ag Method for making dry powder compositions containing ds-rna based on supercritical fluid technology
KR20100017169A (ko) 2007-05-22 2010-02-16 노파르티스 아게 Ｆｇｆ２１-관련 장애의 치료, 진단 및 검출 방법
AU2008259907B2 (en) 2007-05-30 2014-12-04 Northwestern University Nucleic acid functionalized nanoparticles for therapeutic applications
US20100184051A1 (en) 2007-05-30 2010-07-22 The General Hospital Corporation Methods of generating pluripotent cells from somatic cells
EP2167523B1 (en) 2007-06-19 2014-07-23 Board of Supervisors of Louisiana State University and Agricultural and Mechanical College Synthesis and use of anti-reverse phosphorothioate analogs of the messenger rna cap
EP2173872B1 (en) 2007-06-29 2014-04-02 CellScript, Inc. Copy dna and sense rna
US8367318B2 (en) 2007-07-23 2013-02-05 Dharmacon, Inc. Screening of micro-RNA cluster inhibitor pools
US9144546B2 (en) 2007-08-06 2015-09-29 Clsn Laboratories, Inc. Nucleic acid-lipopolymer compositions
US20090042825A1 (en) 2007-08-06 2009-02-12 Majed Matar Composition, method of preparation & application of concentrated formulations of condensed nucleic acids with a cationic lipopolymer
AU2008290545A1 (en) 2007-08-23 2009-02-26 Novartis Ag Methods for detecting oligonucleotides
US20110243931A1 (en) 2007-09-02 2011-10-06 Thomas Friess Combination therapy with type i and type ii anti-cd20 antibodies
WO2009030254A1 (en) 2007-09-04 2009-03-12 Curevac Gmbh Complexes of rna and cationic peptides for transfection and for immunostimulation
US8506928B2 (en) 2007-09-07 2013-08-13 The Regents Of The University Of California Methods and compounds for targeting tissues
US20110086904A1 (en) 2007-09-17 2011-04-14 The Trustees Of The University Of Pennsylvania GENERATION OF HYPERSTABLE mRNAs
EP3156414B1 (en) 2007-09-26 2019-12-04 Intrexon Corporation Synthetic 5'utrs, expression vectors, and methods for increasing transgene expression
WO2009042892A1 (en) 2007-09-26 2009-04-02 Oregon Health & Science University Cyclic undecapeptides and derivatives as multiple sclerosis therapies
SI2644192T1 (sl) 2007-09-28 2017-08-31 Pfizer Inc. Ciljanje rakavih celic z uporabo nanodelcev
EP2042193A1 (en) 2007-09-28 2009-04-01 Biomay AG RNA Vaccines
US8470560B2 (en) 2007-10-03 2013-06-25 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army CR-2 binding peptide P28 as molecular adjuvant for DNA vaccines
WO2009046738A1 (en) 2007-10-09 2009-04-16 Curevac Gmbh Composition for treating lung cancer, particularly of non-small lung cancers (nsclc)
WO2009046739A1 (en) 2007-10-09 2009-04-16 Curevac Gmbh Composition for treating prostate cancer (pca)
CA2917512C (en) 2007-10-12 2025-08-05 President And Fellows Of Harvard College VACCINE NANOTECHNOLOGY
US20090098118A1 (en) 2007-10-15 2009-04-16 Thomas Friess Combination therapy of a type ii anti-cd20 antibody with an anti-bcl-2 active agent
WO2009052830A1 (en) 2007-10-22 2009-04-30 Genmab A/S Novel antibody therapies
JP2011502478A (ja) 2007-11-01 2011-01-27 ユニバーシティー オブ ロチェスター 安定性が増大した組換え型第ｖｉｉｉ因子
CN101970003A (zh) 2007-11-09 2011-02-09 诺华有限公司 抗cd40抗体的应用
EP2223934B1 (en) 2007-11-14 2012-10-03 Institute Of Microbiology, Chinese Academy Of Sciences Polypeptides for inhibiting influenza virus infection
EP2222709B1 (en) 2007-11-30 2016-11-23 Glaxo Group Limited Antigen-binding constructs
EP2848688A1 (en) 2007-12-10 2015-03-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of factor VII gene
CN103911378A (zh) 2007-12-11 2014-07-09 斯克利普斯研究所 涉及mRNA翻译增强因子的组合物和方法
EP2229459B1 (en) 2007-12-13 2014-08-27 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for prevention or treatment of RSV infection
EP2072618A1 (en) 2007-12-14 2009-06-24 Johannes Gutenberg-Universität Mainz Use of RNA for reprogramming somatic cells
CN101945667A (zh) 2007-12-21 2011-01-12 健泰科生物技术公司 利妥昔单抗不应性类风湿性关节炎患者的疗法
JP5526785B2 (ja) 2008-01-23 2014-06-18 味の素株式会社 Ｌ−アミノ酸の製造法
JPWO2009093384A1 (ja) 2008-01-24 2011-05-26 独立行政法人産業技術総合研究所 ポリヌクレオチド及びポリヌクレオチド類似体並びにこれらを用いた遺伝子発現制御方法
CN101932707B (zh) 2008-01-31 2013-08-21 库瑞瓦格有限责任公司 作为免疫刺激剂/佐剂的式(I)(NuGlXmGnNv)a的核酸及其衍生物
EP2250252A2 (en) 2008-02-11 2010-11-17 Cambridge Enterprise Limited Improved reprogramming of mammalian cells, and the cells obtained
WO2009102467A2 (en) 2008-02-13 2009-08-20 Intarcia Therapeutics, Inc. Devices, formulations, and methods for delivery of multiple beneficial agents
DE102008009920A1 (de) 2008-02-15 2009-08-20 Aj Innuscreen Gmbh Mobiles Gerät für die Nukleinsäureisolierung
US8506966B2 (en) 2008-02-22 2013-08-13 Novartis Ag Adjuvanted influenza vaccines for pediatric use
US20120027813A1 (en) 2008-02-22 2012-02-02 Novartis Vaccines And Diagnostics Srl Adjuvanted influenza vaccines for pediatric use
US20100004313A1 (en) 2008-02-29 2010-01-07 Tbd Modified Poloxamers for Gene Expression and Associated Methods
AU2009223313A1 (en) 2008-03-14 2009-09-17 Egen, Inc. Biodegradable cross-linked branched poly (alkylene imines)
NZ587632A (en) 2008-03-14 2012-06-29 Biocon Ltd An anti-cd6 monoclonal antibody and a method thereof
JP5917143B2 (ja) 2008-03-28 2016-05-11 グラクソスミスクライン・リミテッド・ライアビリティ・カンパニーＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ ＬＬＣ 処置方法
NZ588583A (en) 2008-04-15 2012-08-31 Protiva Biotherapeutics Inc Novel lipid formulations for nucleic acid delivery
WO2009127230A1 (en) * 2008-04-16 2009-10-22 Curevac Gmbh MODIFIED (m)RNA FOR SUPPRESSING OR AVOIDING AN IMMUNOSTIMULATORY RESPONSE AND IMMUNOSUPPRESSIVE COMPOSITION
CN102036652B (zh) 2008-04-25 2016-04-13 西北大学 适于螯合胆甾醇的纳米结构
JP2011523353A (ja) 2008-04-28 2011-08-11 プレジデント アンド フェロウズ オブ ハーバード カレッジ 細胞透過のための過剰に荷電されたタンパク質
WO2009134717A1 (en) 2008-04-30 2009-11-05 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, Centers For Disease Control And Prevention Chimeric west nile/dengue viruses
US9394538B2 (en) 2008-05-07 2016-07-19 Shi-Lung Lin Development of universal cancer drugs and vaccines
EP2323716B1 (en) 2008-05-08 2015-03-04 MiniPumps, LLC Drug-delivery pumps
US8697098B2 (en) 2011-02-25 2014-04-15 South Dakota State University Polymer conjugated protein micelles
ES2404131T3 (es) 2008-05-13 2013-05-24 University Of Washington Copolímeros de dibloques y sus complejos con polinucleótidos para el suministro en células
EP2297323A1 (en) 2008-05-21 2011-03-23 Hartmann, Gunther 5' triphosphate oligonucleotide with blunt end and uses thereof
JP2011520472A (ja) 2008-05-29 2011-07-21 ハナル バイオファーマ カンパニー リミテッド 増加されたタンパク質分解酵素抵抗性を表す修飾型エリスロポエチン（ｅｐｏ）ポリペプチド及びその医薬組成物
FR2931824B1 (fr) 2008-05-29 2014-11-28 Centre Nat Rech Scient Procede de synthese d'arn par voie chimique.
US20100086922A1 (en) 2008-05-30 2010-04-08 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Assessment of chromosomal alterations to predict clinical outcome of bortezomib treatment
PL215513B1 (pl) 2008-06-06 2013-12-31 Univ Warszawski Nowe boranofosforanowe analogi dinukleotydów, ich zastosowanie, czasteczka RNA, sposób otrzymywania RNA oraz sposób otrzymywania peptydów lub bialka
TWI451876B (zh) 2008-06-13 2014-09-11 Lilly Co Eli 聚乙二醇化之離脯胰島素化合物
WO2010005726A2 (en) 2008-06-16 2010-01-14 Bind Biosciences Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles with mtor inhibitors and methods of making and using same
HUE035770T2 (en) 2008-06-16 2018-05-28 Pfizer Process for the preparation of diblock copolymers functionalized with targeting material for use in the preparation of therapeutic nanoparticles
EA020954B1 (ru) 2008-06-16 2015-03-31 Бинд Терапьютикс, Инк. Загруженные лекарственным средством полимерные наночастицы, фармацевтическая композиция и способ лечения рака
US20100009424A1 (en) 2008-07-14 2010-01-14 Natasha Forde Sonoporation systems and methods
CA2730737A1 (en) 2008-07-15 2010-01-21 Novartis Ag Immunogenic amphipathic peptide compositions
WO2010009065A2 (en) 2008-07-15 2010-01-21 Novartis Ag Amphipathic peptide compositions
WO2010025510A1 (en) 2008-09-03 2010-03-11 Xenome Ltd Libraries of peptide conjugates and methods for making them
EP2326656B1 (en) 2008-09-06 2017-01-25 Chemgenes Corporation Rna synthesis - phosphoramidites for synthetic rna in the reverse direction, and application in convenient introduction of ligands, chromophores and modifications of synthetic rna at the 3' - end
US20120100558A1 (en) 2008-09-08 2012-04-26 Hanash Samir M Lung cancer diagnosis
WO2010030763A2 (en) 2008-09-10 2010-03-18 Bind Biosciences, Inc. High throughput fabrication of nanoparticles
TW201438738A (zh) 2008-09-16 2014-10-16 建南德克公司 治療進展型多發性硬化症之方法
WO2010033906A2 (en) 2008-09-19 2010-03-25 President And Fellows Of Harvard College Efficient induction of pluripotent stem cells using small molecule compounds
WO2010037408A1 (en) 2008-09-30 2010-04-08 Curevac Gmbh Composition comprising a complexed (m)rna and a naked mrna for providing or enhancing an immunostimulatory response in a mammal and uses thereof
WO2010042490A1 (en) 2008-10-06 2010-04-15 Boston Medical Center Corporation A single lentiviral vector system for induced pluripotent (ips) stem cells derivation
JP5777519B2 (ja) 2008-10-09 2015-09-09 テクミラ ファーマシューティカルズ コーポレイション 改良されたアミノ脂質および核酸の送達方法
US8535655B2 (en) 2008-10-10 2013-09-17 Polyactiva Pty Ltd. Biodegradable polymer—bioactive moiety conjugates
US8343498B2 (en) 2008-10-12 2013-01-01 Massachusetts Institute Of Technology Adjuvant incorporation in immunonanotherapeutics
US8603532B2 (en) 2008-10-20 2013-12-10 Massachusetts Institute Of Technology Nanostructures for drug delivery
US20120015899A1 (en) 2008-10-25 2012-01-19 Plant Bioscience, Limited Modified plant virus particles and uses therefor
MX2011004859A (es) 2008-11-07 2011-08-03 Massachusetts Inst Technology Lipidoides de aminoalcohol y usos de los mismos.
EP4241767B1 (en) 2008-11-10 2024-10-23 Arbutus Biopharma Corporation Novel lipids and compositions for the delivery of therapeutics
WO2010057203A2 (en) 2008-11-17 2010-05-20 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Hdl particles for delivery of nucleic acids
EP2191840A1 (en) 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and melphalan
CA2746514C (en) 2008-12-10 2018-11-27 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Gnaq targeted dsrna compositions and methods for inhibiting expression
EP2196476A1 (en) 2008-12-10 2010-06-16 Novartis Ag Antibody formulation
WO2010068918A2 (en) 2008-12-12 2010-06-17 The Regents Of The University Of California Novel targets for treatment of hypercholesterolemia
WO2010068866A2 (en) 2008-12-12 2010-06-17 Bind Biosciences Therapeutic particles suitable for parenteral administration and methods of making and using same
EP2379064B1 (en) 2008-12-15 2020-02-26 Pfizer Inc. Long circulating nanoparticles for sustained release of therapeutic agents
EA201170940A1 (ru) 2009-01-16 2012-02-28 ГЛЭКСОСМИТКЛАЙН ЭлЭлСи Лечение рака с использованием комбинации бендамустина и анти-cd20-антитела
WO2010084371A1 (en) 2009-01-26 2010-07-29 Mitoprod Novel circular interfering rna molecules
US20120101148A1 (en) 2009-01-29 2012-04-26 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. lipid formulation
WO2010088927A1 (en) 2009-02-09 2010-08-12 Curevac Gmbh Use of pei for the improvement of endosomal release and expression of transfected nucleic acids, complexed with cationic or polycationic compounds
US20140141089A1 (en) 2009-02-11 2014-05-22 Colorado School Of Mines Nanoparticles, Compositions Thereof, and Methods of Use, and Methods of Making the Same
CA2753362C (en) 2009-02-24 2018-06-19 The Scripps Research Institute Reengineering mrna primary structure for enhanced protein production
TW201613969A (en) 2009-03-05 2016-04-16 Abbvie Inc IL-17 binding proteins
WO2010102066A1 (en) 2009-03-05 2010-09-10 Bend Research, Inc. Dextran polymer powder for inhalation administration of pharmaceuticals
WO2010141135A2 (en) 2009-03-05 2010-12-09 Trustees Of Boston University Bacteriophages expressing antimicrobial peptides and uses thereof
US8569065B2 (en) 2009-03-13 2013-10-29 Egen, Inc. Compositions and methods for the delivery of biologically active RNAs
AU2010226434A1 (en) 2009-03-20 2011-10-13 Egen, Inc. Polyamine derivatives
WO2010111290A1 (en) * 2009-03-23 2010-09-30 University Of Utah Research Foundation Methods and compositions related to modified guanine bases for controlling off-target effects in rna interference
JP5622254B2 (ja) 2009-03-31 2014-11-12 国立大学法人東京大学 二本鎖リボ核酸ポリイオンコンプレックス
EP3281947B1 (en) 2009-04-03 2020-02-12 The University of Chicago Compositions and methods related to protein a (spa) variants
ES2845212T3 (es) 2009-04-13 2021-07-26 Inst Nat Sante Rech Med Partículas de HPV y usos de las mismas
WO2010121141A1 (en) 2009-04-17 2010-10-21 Biogen Idec Ma Inc. Compositions and methods to treat acute myelogenous leukemia
WO2010123501A1 (en) 2009-04-22 2010-10-28 Massachusetts Institute Of Technology Innate immune suppression enables repeated delivery of long rna molecules
CA2993053A1 (en) 2009-04-27 2010-11-04 Novartis Ag Antagonistic activin receptor iib (actriib) antibodies for increasing muscle growth
WO2010129033A2 (en) 2009-04-29 2010-11-11 Calmune Corporation Modified antibodies for passive immunotherapy
US8287910B2 (en) 2009-04-30 2012-10-16 Intezyne Technologies, Inc. Polymeric micelles for polynucleotide encapsulation
US8715736B2 (en) 2009-04-30 2014-05-06 Florida Agricultural And Mechanical University Nanoparticle formulations for skin delivery
SG176553A1 (en) 2009-05-05 2012-01-30 Muthiah Manoharan Lipid compositions
US12371522B2 (en) 2011-10-12 2025-07-29 The Johns Hopkins University Bioreducible poly (beta-amino ester)s for siRNA delivery
DE202009007116U1 (de) 2009-05-18 2010-10-14 Amoena Medizin-Orthopädie-Technik GmbH Antidekubituskissen
US8574835B2 (en) 2009-05-29 2013-11-05 Life Technologies Corporation Scaffolded nucleic acid polymer particles and methods of making and using
EP2440556A1 (en) 2009-06-10 2012-04-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of phosphatidylinositol 3-kinase
TR201811076T4 (tr) 2009-06-10 2018-08-27 Arbutus Biopharma Corp Geliştirilmiş lipit formulasyonu.
AU2010260148A1 (en) 2009-06-15 2012-02-02 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid formulated dsRNA targeting the PCSK9 gene
US20110097329A1 (en) 2009-06-26 2011-04-28 Massachusetts Institute Of Technology Compositions and methods for treating cancer and modulating stress granule formation
US8569256B2 (en) 2009-07-01 2013-10-29 Protiva Biotherapeutics, Inc. Cationic lipids and methods for the delivery of therapeutic agents
US8283333B2 (en) 2009-07-01 2012-10-09 Protiva Biotherapeutics, Inc. Lipid formulations for nucleic acid delivery
EP2451475A2 (en) * 2009-07-06 2012-05-16 Novartis AG Self replicating rna molecules and uses thereof
EP3165234B1 (de) 2009-07-31 2019-04-03 ethris GmbH Rna mit einer kombination aus unmodifizierten und modifizierten nucleotiden zur proteinexpression
EP2281579A1 (en) 2009-08-05 2011-02-09 BioNTech AG Vaccine composition comprising 5'-Cap modified RNA
US20110053829A1 (en) 2009-09-03 2011-03-03 Curevac Gmbh Disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates for the transfection of nucleic acids
US20110070227A1 (en) 2009-09-18 2011-03-24 Anna-Marie Novotney-Barry Treatment of Autoimmune and Inflammatory Diseases
US8859284B2 (en) 2009-10-22 2014-10-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Navy Delivery of nanoparticles to neurons
US8449916B1 (en) 2009-11-06 2013-05-28 Iowa State University Research Foundation, Inc. Antimicrobial compositions and methods
WO2011060250A1 (en) 2009-11-13 2011-05-19 Bend Research, Inc. Cationic dextran polymer derivatives
WO2011062965A2 (en) 2009-11-18 2011-05-26 University Of Washington Through Its Center For Commercialization Targeting monomers and polymers having targeting blocks
US8530429B2 (en) 2009-11-24 2013-09-10 Arch Cancer Therapeutics, Inc. Brain tumor targeting peptides and methods
PL3338765T3 (pl) 2009-12-01 2019-06-28 Translate Bio, Inc. Pochodna steroidowa dla dostarczania mrna w ludzkich chorobach genetycznych
DE102009056884B4 (de) 2009-12-03 2021-03-18 Novartis Ag Impfstoff-Adjuvantien und verbesserte Verfahren zur Herstellung derselben
US20110245756A1 (en) 2009-12-03 2011-10-06 Rishi Arora Devices for material delivery, electroporation, sonoporation, and/or monitoring electrophysiological activity
WO2011069164A2 (en) 2009-12-06 2011-06-09 Biogen Idec Ma Inc. Factor viii-fc chimeric and hybrid polypeptides, and methods of use thereof
WO2011071860A2 (en) 2009-12-07 2011-06-16 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions for nucleic acid delivery
US20130189741A1 (en) 2009-12-07 2013-07-25 Cellscript, Inc. Compositions and methods for reprogramming mammalian cells
KR101878502B1 (ko) 2009-12-07 2018-07-13 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실바니아 세포 리프로그래밍을 위한 정제된 변형 ｒｎａ를 포함하는 ｒｎａ 제제
WO2011069528A1 (en) 2009-12-09 2011-06-16 Curevac Gmbh Lyophilization of nucleic acids in lactate-containing solutions
WO2011069529A1 (en) 2009-12-09 2011-06-16 Curevac Gmbh Mannose-containing solution for lyophilization, transfection and/or injection of nucleic acids
TR201906255T4 (tr) 2009-12-11 2019-05-21 Pfizer Terapötik partiküllerin liyofilize edilmesine yönelik stabil formülasyonlar.
ES2780156T3 (es) 2009-12-15 2020-08-24 Pfizer Composiciones terapéuticas de nanopartículas poliméricas con alta temperatura de transición vítrea o copolímeros de alto peso molecular
EA201290497A1 (ru) 2009-12-15 2013-01-30 Байнд Байосайенсиз, Инк. Терапевтические полимерные наночастицы, включающие кортикостероиды, и способы получения таковых
DE102009058769A1 (de) 2009-12-16 2011-06-22 MagForce Nanotechnologies AG, 10589 Temperaturabhängige Aktivierung von katalytischen Nukleinsäuren zur kontrollierten Wirkstofffreisetzung
CN102791294A (zh) 2009-12-16 2012-11-21 布里格姆妇女医院股份有限公司 用于多种药物递送的粒子
EP3494963A1 (en) 2009-12-18 2019-06-12 The University of British Columbia Methods and compositions for delivery of nucleic acids
EP2338520A1 (de) 2009-12-21 2011-06-29 Ludwig Maximilians Universität Konjugat mit Zielfindungsligand und dessen Verwendung
AU2010334911A1 (en) 2009-12-23 2012-07-12 Novartis Ag Lipids, lipid compositions, and methods of using them
WO2011088309A1 (en) 2010-01-14 2011-07-21 Regulus Therapeutics Inc. Microrna compositions and methods
EP3023495B1 (en) 2010-02-24 2019-05-08 Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. Compositions for targeted delivery of sirna
CA2791278C (en) 2010-02-25 2015-11-24 The Johns Hopkins University Sustained delivery of therapeutic agents to an eye compartment
WO2011112608A1 (en) 2010-03-08 2011-09-15 University Of Rochester Synthesis of nanoparticles using reducing gases
WO2011116072A1 (en) 2010-03-16 2011-09-22 Escape Therapeutics, Inc. Hybrid hydrogel scaffold compositions and methods of use
US20130149783A1 (en) 2010-03-16 2013-06-13 James William Yockman Cleavable modifications to reducible poly (amido ethylenimines)s to enhance nucleotide delivery
US20110230816A1 (en) 2010-03-18 2011-09-22 Tyco Healthcare Group Lp Gels for Transdermal Delivery
US9149432B2 (en) 2010-03-19 2015-10-06 Massachusetts Institute Of Technology Lipid vesicle compositions and methods of use
GB201005005D0 (en) 2010-03-25 2010-05-12 Angeletti P Ist Richerche Bio New vaccine
EP2553019A1 (en) 2010-03-26 2013-02-06 Mersana Therapeutics, Inc. Modified polymers for delivery of polynucleotides, method of manufacture, and methods of use thereof
WO2011119262A1 (en) 2010-03-26 2011-09-29 Cerulean Pharma Inc. Methods and systems for generating nanoparticles
US20110247090A1 (en) 2010-04-02 2011-10-06 Intrexon Corporation Synthetic 5'UTRs, Expression Vectors, and Methods for Increasing Transgene Expression
EP2555794A4 (en) 2010-04-05 2014-01-15 Univ Chicago COMPOSITIONS AND METHODS RELATING TO PROTEIN A (SPA) ANTIBODIES AS IMMUNE REACTION AMPLIFIERS
JP2013529894A (ja) 2010-04-07 2013-07-25 ノバルティス アーゲー パルボウイルスｂ１９のウイルス様粒子を生成するための方法
WO2011127255A1 (en) 2010-04-08 2011-10-13 Merck Sharp & Dohme Corp. Preparation of lipid nanoparticles
CA2795695A1 (en) 2010-04-09 2011-10-13 The University Of Tokyo Microrna-controlled recombinant vaccinia virus and use thereof
WO2011127456A2 (en) 2010-04-09 2011-10-13 Pacira Pharmaceuticals, Inc. Method for formulating large diameter synthetic membrane vesicles
KR101196667B1 (ko) 2010-04-15 2012-11-02 포항공과대학교 산학협력단 피에이치 민감성 금속 나노 입자를 이용한 항암제 전달 시스템
CA2832672A1 (en) 2010-04-16 2011-10-20 Nuevolution A/S Bi-functional complexes and methods for making and using such complexes
EP3072961A1 (en) 2010-04-16 2016-09-28 Children's Medical Center Corporation Sustained polypeptide expression from synthetic, modified rnas and uses thereof
EP2377938A1 (en) 2010-04-16 2011-10-19 Eukarys Capping-prone RNA polymerase enzymes and their applications
US20130260460A1 (en) 2010-04-22 2013-10-03 Isis Pharmaceuticals Inc Conformationally restricted dinucleotide monomers and oligonucleotides
EP2563455A4 (en) 2010-04-28 2014-02-19 Kimberly Clark Co METHOD FOR INCREASING THE PERMEABILITY OF AN EPITHELIAL BARRIER
US20130156845A1 (en) 2010-04-29 2013-06-20 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid formulated single stranded rna
US20130052644A1 (en) 2010-04-30 2013-02-28 Baltazar Gomez-Mancilla Predictive Markers Useful in the Treatment of Fragile X Syndrome (FXS)
WO2011143230A1 (en) 2010-05-10 2011-11-17 Alnylam Pharmaceuticals Methods and compositions for delivery of active agents
US20130123338A1 (en) 2010-05-12 2013-05-16 Protiva Biotherapeutics, Inc. Novel cationic lipids and methods of use thereof
US10077232B2 (en) 2010-05-12 2018-09-18 Arbutus Biopharma Corporation Cyclic cationic lipids and methods of use
EP2387999A1 (en) 2010-05-21 2011-11-23 CureVac GmbH Histidine-containing solution for transfection and/or injection of nucleic acids and uses thereof
US8802863B2 (en) 2010-05-24 2014-08-12 Sirna Therapeutics, Inc. Amino alcohol cationic lipids for oligonucleotide delivery
US8748667B2 (en) 2010-06-04 2014-06-10 Sirna Therapeutics, Inc. Low molecular weight cationic lipids for oligonucleotide delivery
SG186347A1 (en) 2010-06-14 2013-01-30 Hoffmann La Roche Cell-penetrating peptides and uses therof
US20130236968A1 (en) 2010-06-21 2013-09-12 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Multifunctional copolymers for nucleic acid delivery
CA2803239A1 (en) 2010-06-25 2011-12-29 Novartis Ag Combinations of meningococcal factor h binding proteins
WO2012002760A2 (ko) 2010-07-01 2012-01-05 포항공과대학교 산학협력단 세균유래 마이크로베시클을 이용한 암치료 및 암진단 방법
ES2655701T3 (es) 2010-07-02 2018-02-21 The University Of Chicago Composiciones y métodos relacionados con variantes de la proteína A (SpA)
AU2011276234B2 (en) 2010-07-06 2016-02-25 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Liposomes with lipids having an advantageous pKa- value for RNA delivery
US9192661B2 (en) 2010-07-06 2015-11-24 Novartis Ag Delivery of self-replicating RNA using biodegradable polymer particles
SI2591114T1 (sl) 2010-07-06 2016-10-28 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Imunizacija velikih sesalcev z majhnimi odmerki RNA
EP3449910A1 (en) 2010-07-06 2019-03-06 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Cationic oil-in-water emulsions
US9770463B2 (en) 2010-07-06 2017-09-26 Glaxosmithkline Biologicals Sa Delivery of RNA to different cell types
ES2646669T3 (es) 2010-07-06 2017-12-14 Glaxosmithkline Biologicals Sa Procedimientos de aumento de una respuesta inmunitaria mediante el suministro de ARN
US11291635B2 (en) 2010-07-06 2022-04-05 Glaxosmithkline Biological Sa Virion-like delivery particles for self-replicating RNA molecules
EP3508573A1 (en) 2010-07-09 2019-07-10 Bioverativ Therapeutics Inc. Systems for factor viii processing and methods thereof
PT3552619T (pt) 2010-07-09 2025-10-23 Bioverativ Therapeutics Inc Polipéptidos de fator ix e métodos de uso dos mesmos
WO2012009406A2 (en) 2010-07-13 2012-01-19 University Of Utah Research Foundation Gold particles and methods of making and using the same in cancer treatment
GB201012410D0 (en) 2010-07-23 2010-09-08 Medical Res Council Intracellular immunity
US8968746B2 (en) 2010-07-30 2015-03-03 Curevac Gmbh Complexation of nucleic acids with disulfide-crosslinked cationic components for transfection and immunostimulation
CA2807552A1 (en) 2010-08-06 2012-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
WO2012021516A2 (en) 2010-08-09 2012-02-16 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Nanoparticle-oligonucletide hybrid structures and methods of use thereof
WO2012019630A1 (en) 2010-08-13 2012-02-16 Curevac Gmbh Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded protein
AU2011291582A1 (en) 2010-08-20 2013-03-07 Cerulean Pharma Inc. Conjugates, particles, compositions, and related methods
ES2531577T3 (es) 2010-08-20 2015-03-17 Novartis Ag Conjuntos de agujas para la administración de vacuna soluble contra la gripe
WO2012024595A2 (en) 2010-08-20 2012-02-23 University Of Washington Circumferential aerosol device for delivering drugs to olfactory epithelium and brain
WO2012031043A1 (en) 2010-08-31 2012-03-08 Novartis Ag Pegylated liposomes for delivery of immunogen-encoding rna
KR20130100278A (ko) 2010-08-31 2013-09-10 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 올리고뉴클레오티드의 전달을 위한 신규 단일 화학 존재물 및 방법
TR201908635T4 (tr) 2010-08-31 2019-07-22 Glaxosmithkline Biologicals Sa Protein kodlayıcı rna?nın lipozomal verilmesine uygun lipitler.
EP3556396B1 (en) 2010-08-31 2022-04-20 Theraclone Sciences, Inc. Human immunodeficiency virus (hiv)-neutralizing antibodies
BR112013004879A2 (pt) 2010-08-31 2018-04-24 Novartis Ag lipossomas pequenos para entrega de rna que codifica imunogénio
WO2012031205A2 (en) 2010-09-03 2012-03-08 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Lipid-polymer hybrid particles
JP5793194B2 (ja) 2010-09-09 2015-10-14 ザ・ユニバーシティ・オブ・シカゴＴｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｏｆ Ｃｈｉｃａｇｏ 感染防御ブドウ球菌抗原が関与する方法および組成物
WO2012034077A2 (en) 2010-09-09 2012-03-15 The University Of Chicago Compositions and methods related to attenuated staphylococcal strains
WO2012039979A2 (en) 2010-09-10 2012-03-29 The Johns Hopkins University Rapid diffusion of large polymeric nanoparticles in the mammalian brain
US8466122B2 (en) 2010-09-17 2013-06-18 Protiva Biotherapeutics, Inc. Trialkyl cationic lipids and methods of use thereof
MX349088B (es) 2010-09-20 2017-07-10 Merck Sharp & Dohme Lípidos catiónicos novedosos de bajo peso molecular para la entrega de oligonucleótidos.
EP2619307A1 (en) 2010-09-21 2013-07-31 RiboxX GmbH Method for synthesizing rna using dna template
EP2618821A4 (en) 2010-09-24 2014-08-13 Brigham & Womens Hospital NANOSTRUCTURED GELS FOR CONTROLLED RELEASE OF CAPSUED MEDIUM
WO2012050975A2 (en) 2010-09-29 2012-04-19 The University Of North Carolina At Chapel Hill Novel circular mammalian rna molecules and uses thereof
KR20130114115A (ko) 2010-09-30 2013-10-16 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 올리고뉴클레오티드 전달을 위한 저분자량 양이온성 지질
ES3005233T3 (en) 2010-10-01 2025-03-14 Modernatx Inc Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
US10078075B2 (en) 2011-12-09 2018-09-18 Vanderbilt University Integrated organ-on-chip systems and applications of the same
EP3520813B1 (en) 2010-10-11 2023-04-19 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Antigen delivery platforms
WO2012053297A1 (ja) 2010-10-19 2012-04-26 三菱電機株式会社 レーザ加工機制御装置およびレーザ加工機制御方法
CN103153347A (zh) 2010-10-21 2013-06-12 默沙东公司 用于寡核苷酸递送的新型低分子量阳离子脂质
WO2012154202A1 (en) 2010-10-29 2012-11-15 Merck Sharp & Dohme Corp. Recombinant subunit dengue virus vaccine
CA2816977C (en) 2010-11-05 2019-10-29 The Johns Hopkins University Compositions and methods relating to reduced mucoadhesion
US8518871B2 (en) 2010-11-09 2013-08-27 The Regents Of The University Of California Skin permeating and cell entering (SPACE) peptides and methods of use thereof
MX346784B (es) 2010-11-12 2017-03-31 Inovio Pharmaceuticals Inc Antigenos prostaticos de consenso, molecula de acido nucleico que los codifica y vacuna y usos que los comprenden.
WO2012068295A1 (en) 2010-11-16 2012-05-24 Selecta Biosciences, Inc. Immunostimulatory oligonucleotides
SI2640842T1 (sl) 2010-11-17 2018-09-28 Aduro Biotech, Inc. Postopki in sestavki za induciranje imunskega odziva na EGFRvIII
JP5813778B2 (ja) 2010-11-19 2015-11-17 イデラ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＩｄｅｒａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． トール様受容体に基づく免疫反応を調節するための免疫調節オリゴヌクレオチド（ｉｒｏ）化合物
US8853377B2 (en) 2010-11-30 2014-10-07 Shire Human Genetic Therapies, Inc. mRNA for use in treatment of human genetic diseases
WO2012072096A1 (en) 2010-12-03 2012-06-07 Biontech Ag Method for cellular rna expression
CA2821622C (en) 2010-12-16 2019-09-03 Sprna Gmbh Pharmaceutical composition consisting of rna having alkali metal as counter ion and formulated with dications
US8501930B2 (en) 2010-12-17 2013-08-06 Arrowhead Madison Inc. Peptide-based in vivo siRNA delivery system
CA2825370A1 (en) 2010-12-22 2012-06-28 President And Fellows Of Harvard College Continuous directed evolution
WO2012089225A1 (en) 2010-12-29 2012-07-05 Curevac Gmbh Combination of vaccination and inhibition of mhc class i restricted antigen presentation
ES2605990T3 (es) 2010-12-29 2017-03-17 F. Hoffmann-La Roche Ag Conjugados de molécula pequeña para la administración intracelular de ácidos nucleicos
CA2862765A1 (en) 2011-01-04 2012-07-12 Brown University Nanotubes as carriers of nucleic acids into cells
WO2012094574A2 (en) 2011-01-06 2012-07-12 The Johns Hopkins University Stabilized polyribonucleotide nanoparticles
US20140080766A1 (en) 2011-01-07 2014-03-20 Massachusetts Institute Of Technology Compositions and methods for macromolecular drug delivery
JP5902197B2 (ja) 2011-01-11 2016-04-13 アルニラム・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド Ｐｅｇ化脂質および薬剤送達のためのそれらの使用
WO2012099805A2 (en) 2011-01-19 2012-07-26 Ocean Nanotech, Llc Nanoparticle based immunological stimulation
JP2014505064A (ja) 2011-01-26 2014-02-27 セニックス バイオサイエンス ゲーエムベーハー 自然に存在する細胞内輸送経路を介して化合物を送達するための送達システム及びコンジュゲート
US10363309B2 (en) 2011-02-04 2019-07-30 Case Western Reserve University Targeted nanoparticle conjugates
US20140066363A1 (en) 2011-02-07 2014-03-06 Arun K. Bhunia Carbohydrate nanoparticles for prolonged efficacy of antimicrobial peptide
WO2012116715A1 (en) 2011-03-02 2012-09-07 Curevac Gmbh Vaccination in newborns and infants
US20120207840A1 (en) 2011-02-10 2012-08-16 Aura Biosciences, Inc. Virion Derived Protein Nanoparticles For Delivering Diagnostic Or Therapeutic Agents For The Treatment Of Non-Melanoma Skin Cancer
AU2012217788A1 (en) 2011-02-14 2013-08-29 Swift Biosciences, Inc. Polynucleotide primers and probes
WO2012112730A2 (en) 2011-02-15 2012-08-23 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for delivering nucleic acid to a cell
US20140081012A1 (en) 2011-02-15 2014-03-20 The University Of North Carolina At Chapel Hill Nanoparticle, liposomes, polymers, agents and proteins modified with reversible linkers
EP2489371A1 (en) 2011-02-18 2012-08-22 Instituto Nacional de Investigacion y Tecnologia Agraria y Alimentaria Carrier peptides for drug delivery
WO2012113413A1 (en) 2011-02-21 2012-08-30 Curevac Gmbh Vaccine composition comprising complexed immunostimulatory nucleic acids and antigens packaged with disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates
US8865881B2 (en) 2011-02-22 2014-10-21 California Institute Of Technology Delivery of proteins using adeno-associated virus (AAV) vectors
US8696637B2 (en) 2011-02-28 2014-04-15 Kimberly-Clark Worldwide Transdermal patch containing microneedles
WO2012116714A1 (en) 2011-03-02 2012-09-07 Curevac Gmbh Vaccination in elderly patients
US20140112950A1 (en) 2011-03-02 2014-04-24 Manmohan Singh Combination vaccines with lower doses of antigen and/or adjuvant
AU2012225497A1 (en) 2011-03-07 2013-10-24 Massachusetts Institute Of Technology Methods for transfecting cells with nucleic acids
WO2012125680A1 (en) 2011-03-16 2012-09-20 Novartis Ag Methods of treating vasculitis using an il-17 binding molecule
US20130345234A1 (en) 2011-03-17 2013-12-26 Humphrey Athelstan Roy Gardner Fgfr and ligands thereof as biomarkers for breast cancer in hr positive subjects
WO2012125987A2 (en) 2011-03-17 2012-09-20 Massachusetts Institute Of Technology Delivery system
US10357568B2 (en) 2011-03-24 2019-07-23 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Adjuvant nanoemulsions with phospholipids
US9238716B2 (en) 2011-03-28 2016-01-19 Massachusetts Institute Of Technology Conjugated lipomers and uses thereof
CN103476949A (zh) 2011-03-28 2013-12-25 诺瓦提斯公司 与细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂相关的标志物
JP2014511687A (ja) 2011-03-31 2014-05-19 モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッド 工学操作された核酸の送達および製剤
JP2014511694A (ja) 2011-04-03 2014-05-19 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレーション ドゥーイング ビジネス アズ マサチューセッツ ジェネラル ホスピタル 修飾型ｒｎａ（ｍｏｄ−ｒｎａ）を使用する効率的なインビボタンパク質発現
US9284343B2 (en) 2011-04-04 2016-03-15 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services 2′-O-aminooxymethyl nucleoside derivatives for use in the synthesis and modification of nucleosides, nucleotides and oligonucleotides
WO2012142132A1 (en) 2011-04-11 2012-10-18 Life Technologies Corporation Polymer particles and methods of making and using same
WO2012142240A1 (en) 2011-04-13 2012-10-18 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Coated mesoporous nanoparticles
WO2013158127A1 (en) 2012-04-16 2013-10-24 Molecular Transfer, Inc. Agents for improved delivery of nucleic acids to eukaryotic cells
US20140178894A1 (en) 2011-04-20 2014-06-26 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Culture medium suitable for the culture of undifferentiated cells
EP2701734B1 (en) 2011-04-26 2019-09-25 Molecular Express, Inc. Liposomal formulations
WO2012149536A1 (en) 2011-04-28 2012-11-01 The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. Neutralizing antibodies to nipah and hendra virus
EP2701686A4 (en) 2011-04-28 2014-11-05 Stc Unm LIPID BINCHES SUPPORTED ON POROUS NANOPARTICLES (PROTOCELLS) FOR TARGETED ADMINISTRATION, AND METHODS OF USE THEREOF
JP2014515759A (ja) 2011-04-29 2014-07-03 ノバルティス アーゲー 扁平上皮がんを治療する方法関連出願
KR20140041505A (ko) 2011-04-29 2014-04-04 셀렉타 바이오사이언시즈, 인크. 조절 b 세포 유도를 위한 관용원성 합성 나노운반체
EP2705143B1 (en) 2011-05-02 2021-02-17 Wayne State University A protein-induced pluripotent cell technology uses thereof
UA116189C2 (uk) 2011-05-02 2018-02-26 Мілленніум Фармасьютікалз, Інк. КОМПОЗИЦІЯ АНТИ-α4β7 АНТИТІЛА
US8945588B2 (en) 2011-05-06 2015-02-03 The University Of Chicago Methods and compositions involving protective staphylococcal antigens, such as EBH polypeptides
US9650745B2 (en) 2011-05-10 2017-05-16 Basf Se Oil-in-water emulsions
US9283279B2 (en) 2011-05-11 2016-03-15 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Targeted polymeric conjugates and uses thereof
EP2706983A1 (en) 2011-05-12 2014-03-19 Helmut Vockner Novel pharmaceutical formulation
DK2706988T3 (da) 2011-05-12 2020-01-20 Yissum Res Dev Co Of Hebrew Univ Jerusalem Ltd Liposomer omfattende polymer konjugerede lipider og relateret brug
CN103842374A (zh) 2011-05-13 2014-06-04 诺华股份有限公司 融合前的rsv f抗原
US8691750B2 (en) 2011-05-17 2014-04-08 Axolabs Gmbh Lipids and compositions for intracellular delivery of biologically active compounds
CN103687957A (zh) 2011-05-17 2014-03-26 现代治疗公司 工程化核酸及其用于非人类脊椎动物的方法
US8978170B2 (en) 2011-05-20 2015-03-17 Kohler Co. Toilet installation system and method
PL3892295T3 (pl) 2011-05-24 2023-07-24 BioNTech SE Zindywidualizowane szczepionki przeciwnowotworowe
SG194615A1 (en) 2011-05-25 2013-12-30 Novartis Ag Biomarkers for lung cancer
US20140308363A1 (en) 2011-05-31 2014-10-16 Bind Therapeutics, Inc. Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same
CN107115314B (zh) 2011-06-02 2022-04-29 加利福尼亚大学董事会 膜包封的纳米颗粒及使用方法
US20140094461A1 (en) 2011-06-02 2014-04-03 Novartis Ag Biomarkers for hedgehog inhibitor therapy
EP2717911A1 (en) 2011-06-06 2014-04-16 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Protein tyrosine phosphatase, non-receptor type 11 (ptpn11) and triple-negative breast cancer
PT2717893T (pt) 2011-06-08 2019-08-20 Translate Bio Inc Composições de nanopartículas lipídicas e métodos para transferência de arnm
DK3336082T3 (da) 2011-06-08 2020-04-27 Translate Bio Inc Spaltelige lipider
WO2012170607A2 (en) 2011-06-10 2012-12-13 Novartis Ag Use of pcsk9 antagonists
WO2012168491A1 (en) 2011-06-10 2012-12-13 Novartis Ag Pharmaceutical formulations of pcsk9 antagonists
US8636696B2 (en) 2011-06-10 2014-01-28 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Transdermal device containing microneedles
MX345704B (es) 2011-06-10 2017-02-10 Novartis Tiergesundheit Ag Vacuna bovinas y métodos.
US8916696B2 (en) 2011-06-12 2014-12-23 City Of Hope Aptamer-mRNA conjugates for targeted protein or peptide expression and methods for their use
WO2012172495A1 (en) 2011-06-14 2012-12-20 Novartis Ag Compositions and methods for antibodies targeting tem8
US9457183B2 (en) 2011-06-15 2016-10-04 Tripep Ab Injection needle and device
JP2014519338A (ja) 2011-06-16 2014-08-14 ノバルティス アーゲー 治療薬として使用される可溶性タンパク質
JP6113155B2 (ja) 2011-06-20 2017-04-12 ユニバーシティ オブ ピッツバーグ − オブ ザ コモンウェルス システム オブ ハイヤー エデュケイション 計算で最適化した広い反応性を示すｈ１ｎ１インフルエンザの抗原
US9862926B2 (en) 2011-06-27 2018-01-09 Cellscript, Llc. Inhibition of innate immune response
AU2012333211A1 (en) 2011-06-28 2013-12-19 Inovio Pharmaceuticals, Inc. A miniminally invasive dermal electroporation device
DK2726099T3 (en) 2011-07-01 2018-11-05 Novartis Ag Method of treating metabolic disorders
JP2014520506A (ja) 2011-07-04 2014-08-25 コモンウェルス サイエンティフィック アンド インダストリアル リサーチ オーガニゼイション 核酸複合体
AU2012280901B2 (en) 2011-07-06 2016-11-10 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Oil-in-water emulsions that contain nucleic acids
CA2841047A1 (en) 2011-07-06 2013-01-10 Novartis Ag Immunogenic compositions and uses thereof
EP4014966A1 (en) 2011-07-06 2022-06-22 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Liposomes having useful n:p ratio for delivery of rna molecules
RU2649133C2 (ru) 2011-07-06 2018-03-29 Новартис Аг Катионные эмульсии масло-в-воде
EP3854413A1 (en) 2011-07-06 2021-07-28 GlaxoSmithKline Biologicals SA Immunogenic combination compositions and uses thereof
EP2729501A2 (en) 2011-07-07 2014-05-14 Life Technologies Corporation Polymer particles, nucleic acid polymer particles and methods of making and using the same
WO2013009736A2 (en) 2011-07-10 2013-01-17 President And Fellows Of Harvard College Compositions and methods for self-assembly of polymers with complementary macroscopic and microscopic scale units
US20130012566A1 (en) 2011-07-10 2013-01-10 Aura Biosciences, Inc. Virion Derived Protein Nanoparticles For Delivering Diagnostic Or Therapeutic Agents For The Treatment of Alopecia
WO2013009717A1 (en) 2011-07-10 2013-01-17 Elisabet De Los Pinos Virion derived protein nanoparticles for delivering diagnostic or therapeutic agents for the treatment of skin-related diseases
GB2492999A (en) 2011-07-20 2013-01-23 Univ Central Lancashire Neutron detector
US20140148503A1 (en) 2011-07-20 2014-05-29 University Of Iowa Research Foundation Nucleic acid aptamers
JP6018197B2 (ja) 2011-07-21 2016-11-02 クローダ インターナショナル パブリック リミティド カンパニー 分枝状ポリエーテル−ポリアミドブロックコポリマー並びにそれらの製造方法及び使用方法
US9493549B2 (en) 2011-07-25 2016-11-15 The Rockefeller University Antibodies directed toward the HIV-1 GP120 CD4 binding site with increased potency and breadth
ES2687129T3 (es) 2011-07-25 2018-10-23 Glaxosmithkline Biologicals Sa Composiciones y métodos para evaluar la inmunogenicidad funcional de vacunas contra parvovirus
US20130028857A1 (en) 2011-07-29 2013-01-31 Selecta Biosciences, Inc. Synthetic nanocarriers comprising polymers comprising multiple immunomodulatory agents
US9556281B2 (en) 2011-08-15 2017-01-31 The University Of Chicago Compositions and methods related to antibodies to staphylococcal protein A
KR20140051357A (ko) 2011-08-26 2014-04-30 애로우헤드 리서치 코오포레이션 Ｉｎ Ｖｉｖｏ 핵산 전달용 폴리(비닐 에스테르) 고분자
SG11201400250UA (en) 2011-08-31 2014-03-28 Novartis Ag Pegylated liposomes for delivery of immunogen-encoding rna
US9126966B2 (en) 2011-08-31 2015-09-08 Protiva Biotherapeutics, Inc. Cationic lipids and methods of use thereof
US8889657B2 (en) 2011-08-31 2014-11-18 Mallinckrodt Llc Nanoparticle PEG modification with H-phosphonates
JP2014525462A (ja) 2011-09-01 2014-09-29 アイアールエム・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー Ｐｄｇｆｒキナーゼ阻害剤としての化合物および組成物
CN103930547A (zh) 2011-09-02 2014-07-16 诺华股份有限公司 用于治疗hsf1相关疾病的有机组合物
WO2013039857A1 (en) 2011-09-12 2013-03-21 modeRNA Therapeutics Engineered nucleic acids and methods of use thereof
WO2013039861A2 (en) 2011-09-12 2013-03-21 modeRNA Therapeutics Engineered nucleic acids and methods of use thereof
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
EP2755683B1 (en) 2011-09-14 2019-04-03 GlaxoSmithKline Biologicals SA Methods for making saccharide-protein glycoconjugates
US10421960B2 (en) 2011-09-16 2019-09-24 The Trustees Of The University Of Pennsylvania RNA engineered T cells for the treatment of cancer
EP2747761A1 (en) 2011-09-22 2014-07-02 Bind Therapeutics, Inc. Methods of treating cancers with therapeutic nanoparticles
US9375388B2 (en) 2011-09-23 2016-06-28 Indian Institute Of Technology, Bombay Nanoparticle based cosmetic composition
UY34346A (es) 2011-09-26 2013-04-30 Novartis Ag Proteínas de fusión para tratar trastornos metabólicos
UY34347A (es) 2011-09-26 2013-04-30 Novartis Ag Proteínas de función dual para tratar trastornos metabólicos
EP2760477B1 (en) 2011-09-27 2018-08-08 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Di-aliphatic substituted pegylated lipids
WO2013045505A1 (en) 2011-09-28 2013-04-04 Novartis Ag Biomarkers for raas combination therapy
EP2763701B1 (en) 2011-10-03 2018-12-19 Moderna Therapeutics, Inc. Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
WO2013055971A1 (en) 2011-10-11 2013-04-18 Arizona Board Of Regents For And On Behalf Of Arizona State University Polymers for delivering a substance into a cell
US20140271829A1 (en) 2011-10-11 2014-09-18 Anders Lilja Recombinant self-replicating polycistronic rna molecules
WO2013055331A1 (en) 2011-10-12 2013-04-18 The Curators Of The University Of Missouri Pentablock polymers
AU2012323937A1 (en) 2011-10-14 2014-06-05 Stc.Unm Porous nanoparticle-supported lipid bilayers (protocells) for targeted delivery including transdermal delivery of cargo and methods thereof
EP2766033B1 (en) 2011-10-14 2019-11-20 Novartis AG Antibodies and methods for wnt pathway-related diseases
AU2012326010B2 (en) 2011-10-18 2017-05-11 Micell Technologies, Inc. Drug delivery medical device
ES2745373T3 (es) 2011-10-18 2020-03-02 Dicerna Pharmaceuticals Inc Lípidos catiónicos de amina y uso de los mismos
US20140248320A1 (en) 2011-10-20 2014-09-04 Novartis Ag Adjuvanted influenza b virus vaccines for pediatric priming
KR102043077B1 (ko) 2011-10-20 2019-11-11 노파르티스 아게 알파 ７ 니코틴성 아세틸콜린 수용체 활성화제 치료에 대한 반응성을 예측하는 바이오마커
US20140328759A1 (en) 2011-10-25 2014-11-06 The University Of British Columbia Limit size lipid nanoparticles and related methods
WO2013061290A1 (en) 2011-10-26 2013-05-02 Nanopass Technologies Ltd. Microneedle intradermal drug delivery device with auto-disable functionality
MX343262B (es) 2011-10-27 2016-10-28 Kimberly Clark Co Administración transdérmica de agentes bioactivos de alta viscosidad.
KR20150000461A (ko) 2011-10-27 2015-01-02 메사추세츠 인스티튜트 오브 테크놀로지 약물 캡슐화 마이크로스피어를 형성할 수 있는, ｎ-말단 상에 관능화된 아미노산 유도체
WO2013062140A1 (en) 2011-10-28 2013-05-02 Kyoto University Method for efficiently inducing differentiation of pluripotent stem cells into hepatic lineage cells
AU2012328457A1 (en) 2011-10-28 2014-04-24 Presage Biosciences, Inc. Methods for drug delivery
WO2013063510A1 (en) 2011-10-28 2013-05-02 Integritybio Inc. Protein formulations containing amino acids
WO2013066903A1 (en) 2011-10-31 2013-05-10 Mallinckrodt Llc Combinational liposome compositions for cancer therapy
AR088579A1 (es) 2011-10-31 2014-06-18 Genentech Inc Formulaciones de anticuerpos
ES2721325T3 (es) 2011-11-04 2019-07-31 Nitto Denko Corp Método para producir de manera estéril partículas de lípido-ácido nucleico
WO2013066274A1 (en) 2011-11-04 2013-05-10 Agency For Science, Technology And Research Self-assembled composite ultrasmall peptide-polymer hydrogels
US9579338B2 (en) 2011-11-04 2017-02-28 Nitto Denko Corporation Method of producing lipid nanoparticles for drug delivery
US9872870B2 (en) 2011-11-04 2018-01-23 University Of Notre Dame Du Lac Multifunctional micellar nanoparticle-based drug and targeting agent system
KR20140091031A (ko) 2011-11-04 2014-07-18 노파르티스 아게 저밀도 지단백질-관련 단백질 6 (lrp6) - 반감기 연장제 구축물
US20130115247A1 (en) 2011-11-05 2013-05-09 Aura Biosciences, Inc. Virion Derived Protein Nanoparticles For Delivering Radioisotopes For The Diagnosis And Treatment Of Malignant And Systemic Disease And The Monitoring Of Therapy
US20130116408A1 (en) 2011-11-05 2013-05-09 Aura Biosciences, Inc. Virion Derived Protein Nanoparticles For Delivering Radioisotopes For The Diagnosis And Treatment Of Malignant And Systemic Disease And The Monitoring Of Therapy
US9849087B2 (en) 2011-11-08 2017-12-26 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Methods and compositions for X-ray induced release from pH sensitive liposomes
US20140294732A1 (en) 2011-11-08 2014-10-02 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung, Friedrich Miescher Institute Early diagnostic of neurodegenerative diseases
EP2776022A1 (en) 2011-11-08 2014-09-17 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research New treatment for neurodegenerative diseases
EP2776459A1 (en) 2011-11-08 2014-09-17 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research Rod cell-specific promoter
WO2013070653A1 (en) 2011-11-09 2013-05-16 Board Of Trustees Michigan State University Metallic nanoparticle synthesis with carbohydrate capping agent
WO2013071047A1 (en) 2011-11-11 2013-05-16 Children's Medical Center Corporation Compositions and methods for in vitro transcription of rna
CN107875382B (zh) 2011-11-11 2024-03-08 变异生物技术公司 用于治疗巨细胞病毒的组合物和方法
CA2855826A1 (en) 2011-11-14 2013-05-23 Novartis Ag Immunogenic complexes of polyanionic carbomers and env polypeptides and methods of manufacture and use thereof
WO2013072392A1 (en) 2011-11-15 2013-05-23 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research Combination of a phosphoinositide 3-kinase inhibitor and a modulator of the janus kinase 2-signal transducer and activator of transcription 5 pathway
RU2768492C2 (ru) 2011-11-18 2022-03-24 Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. Полимерные белковые микрочастицы
KR20140097178A (ko) 2011-11-21 2014-08-06 노파르티스 아게 IL-17 길항제 및 건선성 관절염 (PsA) 반응 또는 비-반응 대립유전자를 이용하여 PsA를 치료하는 방법
WO2013078199A2 (en) 2011-11-23 2013-05-30 Children's Medical Center Corporation Methods for enhanced in vivo delivery of synthetic, modified rnas
US20150037428A1 (en) 2011-11-29 2015-02-05 The University Of North Carolina At Chapel Hill Geometrically engineered particles and methods for modulating macrophage or immune responses
AU2012345768B2 (en) 2011-11-30 2016-05-12 Kindeva Drug Delivery L.P. Microneedle device having a peptide therapeutic agent and an amino acid, methods of making and using the same
US9364549B2 (en) 2011-11-30 2016-06-14 Andreas Voigt Hydrophobic drug-delivery material, method for manufacturing thereof and methods for delivery of a drug-delivery composition
WO2013082529A1 (en) 2011-12-02 2013-06-06 Yale University Enzymatic synthesis of poly(amine-co-esters) and methods of use thereof for gene delivery
US20130142781A1 (en) 2011-12-02 2013-06-06 Invivo Therapeutics Corporation Peg based hydrogel for peripheral nerve injury applications and compositions and method of use of synthetic hydrogel sealants
JP2015500241A (ja) 2011-12-02 2015-01-05 ペガサス ラボラトリーズ インコーポレイテッド 両親媒性脂質をベースとする徐放性組成物
RU2691027C2 (ru) 2011-12-05 2019-06-07 Фэктор Байосайенс Инк. Способы и препараты для трансфекции клеток
US8497124B2 (en) 2011-12-05 2013-07-30 Factor Bioscience Inc. Methods and products for reprogramming cells to a less differentiated state
KR102055772B1 (ko) 2011-12-05 2019-12-13 나노 프리시전 메디컬, 인코포레이티드 약물 전달을 위한 티타니아 나노튜브 멤브레인을 갖는 디바이스
WO2013086373A1 (en) 2011-12-07 2013-06-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipids for the delivery of active agents
US9463247B2 (en) 2011-12-07 2016-10-11 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Branched alkyl and cycloalkyl terminated biodegradable lipids for the delivery of active agents
GB201121070D0 (en) 2011-12-07 2012-01-18 Isis Innovation composition for delivery of biotherapeutics
ES3065854T3 (en) 2011-12-07 2026-05-08 Alnylam Pharmaceuticals Inc Biodegradable lipids for the delivery of active agents
US9725687B2 (en) 2011-12-09 2017-08-08 President And Fellows Of Harvard College Integrated human organ-on-chip microphysiological systems
WO2013086502A1 (en) 2011-12-09 2013-06-13 President And Fellows Of Harvard College Organ chips and uses thereof
WO2013086526A1 (en) 2011-12-09 2013-06-13 The Regents Of The University Of California Liposomal drug encapsulation
EP2791362B1 (en) 2011-12-12 2019-07-03 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Proteins comprising mrsa pbp2a and fragments thereof, nucleic acids encoding the same, and compositions and their use to prevent and treat mrsa infections
JP6182457B2 (ja) 2011-12-12 2017-08-16 協和発酵キリン株式会社 カチオン性脂質を含有するドラックデリバリーシステムのための脂質ナノ粒子
AU2012353463B2 (en) 2011-12-12 2017-08-24 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Lipid nanoparticles containing combinations of cationic lipids
KR20140102294A (ko) 2011-12-13 2014-08-21 엔진아이씨 몰레큘러 딜리버리 피티와이 리미티드 뇌 종양에 대한 치료제의 전달을 위한 박테리아 유래된, 무손상 미니세포
EP2604253A1 (en) 2011-12-13 2013-06-19 Otto Glatter Water-in-oil emulsions and methods for their preparation
US20150000936A1 (en) 2011-12-13 2015-01-01 Schlumberger Technology Corporation Energization of an element with a thermally expandable material
EP2791159A4 (en) 2011-12-14 2015-10-14 Moderna Therapeutics Inc MODIFIED NUCLEIC ACIDS AND ACUTE TREATMENT USES THEREOF
WO2013130161A1 (en) 2011-12-14 2013-09-06 modeRNA Therapeutics Methods of responding to a biothreat
WO2013087083A1 (en) 2011-12-15 2013-06-20 Biontech Ag Particles comprising single stranded rna and double stranded rna for immunomodulation
WO2013090897A1 (en) 2011-12-15 2013-06-20 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Using adaptive immunity to detect drug resistance
EA201491185A1 (ru) 2011-12-16 2015-05-29 Массачусетс Инститьют Оф Текнолоджи Полимеры альфа-аминоамидинов и их применение
EP2790673B1 (en) 2011-12-16 2017-07-05 Allergan, Inc. Ophthalmic compositions comprising polyvinyl caprolactam-polyvinyl acetate-polyethylene glycol graft copolymers (soluplus)
JP2015501844A (ja) 2011-12-16 2015-01-19 モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドＭｏｄｅｒｎａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ． 修飾ヌクレオシド、ヌクレオチドおよび核酸組成物
WO2013090601A2 (en) 2011-12-16 2013-06-20 Massachusetts Institute Of Technology Compact nanoparticles for biological applications
EP2790761B1 (en) 2011-12-16 2022-05-11 Novartis AG Passive powder aerosolization apparatus
EP2791171A1 (en) 2011-12-16 2014-10-22 Synthon Biopharmaceuticals B.V. EXPRESSION OF SECRETORY IgA ANTIBODIES IN DUCKWEED
US9546235B2 (en) 2011-12-19 2017-01-17 The University Of Sydney Peptide-hydrogel composite
US9241829B2 (en) 2011-12-20 2016-01-26 Abbott Medical Optics Inc. Implantable intraocular drug delivery apparatus, system and method
CN104968354A (zh) 2011-12-21 2015-10-07 现代治疗公司 增加器官或器官外植体的活力或寿命的方法
EP2793941A1 (en) 2011-12-23 2014-10-29 F.Hoffmann-La Roche Ag Articles of manufacture and methods for co-administration of antibodies
KR101963230B1 (ko) 2011-12-26 2019-03-29 삼성전자주식회사 복수개의 단일 항체를 포함하는 단백질 복합체
WO2013101908A1 (en) 2011-12-27 2013-07-04 Massachusetts Institute Of Technology Microneedle devices and uses thereof
WO2013101690A1 (en) 2011-12-29 2013-07-04 modeRNA Therapeutics Modified mrnas encoding cell-penetrating polypeptides
AU2011384634A1 (en) 2011-12-29 2014-06-19 Novartis Ag Adjuvanted combinations of meningococcal factor H binding proteins
EP4721752A2 (en) 2011-12-30 2026-04-08 Cellscript, Llc Herstellung und verwendung von in vitro-synthetisierter ssrna zur einführung in säugetierzellen zur induktion einer biologischen oder biochemischen wirkung
CN110025608A (zh) 2012-01-06 2019-07-19 燿石治疗公司 降低心血管疾病风险的方法
WO2013106496A1 (en) 2012-01-10 2013-07-18 modeRNA Therapeutics Methods and compositions for targeting agents into and across the blood-brain barrier
SG11201404361UA (en) 2012-01-26 2014-09-26 Life Technologies Corp Methods for increasing the infectivity of viruses
AU2013212066B2 (en) 2012-01-26 2018-11-08 Life Technologies Corporation Methods for increasing the infectivity of viruses
WO2013113326A1 (en) 2012-01-31 2013-08-08 Curevac Gmbh Pharmaceutical composition comprising a polymeric carrier cargo complex and at least one protein or peptide antigen
EP2623121A1 (en) 2012-01-31 2013-08-07 Bayer Innovation GmbH Pharmaceutical composition comprising a polymeric carrier cargo complex and an antigen
WO2013113325A1 (en) 2012-01-31 2013-08-08 Curevac Gmbh Negatively charged nucleic acid comprising complexes for immunostimulation
KR102081560B1 (ko) 2012-02-09 2020-02-25 라이프 테크놀로지스 코포레이션 친수성 중합체성 입자 및 그의 제조 방법
US20140037573A1 (en) 2012-02-22 2014-02-06 Cerulean Pharma Inc. Conjugates, particles, compositions, and related methods
US20130243867A1 (en) 2012-02-23 2013-09-19 University Of South Florida (A Florida Non-Profit Corporation) Micelle compositions and methods for their use
WO2013130535A1 (en) 2012-02-27 2013-09-06 Newgen Biopharma Corporation Topical delivery of hormonal and non hormonal nano formulations, methods of making and using the same
ES2680151T3 (es) 2012-03-01 2018-09-04 Amgen Research (Munich) Gmbh Moléculas de unión de polipéptidos de larga duración
WO2013136234A1 (en) 2012-03-13 2013-09-19 University Of Kwazulu-Natal Transdermal delivery devices
US10322089B2 (en) 2012-03-14 2019-06-18 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Nanoparticles, nanoparticle delivery methods, and systems of delivery
NZ631034A (en) 2012-03-16 2016-06-24 Merck Patent Gmbh Targeting aminoacid lipids
AU2013232297B2 (en) 2012-03-16 2016-01-14 The Johns Hopkins University Controlled release formulations for the delivery of HIF-1 inhibitors
EP2825207B1 (en) 2012-03-16 2020-08-19 The Johns Hopkins University Non-linear multiblock copolymer-drug conjugates for the delivery of active agents
WO2013142349A1 (en) 2012-03-23 2013-09-26 University Of Chicago Compositions and methods related to staphylococcal sbi
US9610346B2 (en) 2012-03-23 2017-04-04 International Aids Vaccine Initiative Recombinant viral vectors
WO2013143555A1 (en) 2012-03-26 2013-10-03 Biontech Ag Rna formulation for immunotherapy
EP2830991A1 (en) 2012-03-26 2015-02-04 President and Fellows of Harvard College Lipid-coated nucleic acid nanostructures of defined shape
CA2859452C (en) 2012-03-27 2021-12-21 Curevac Gmbh Artificial nucleic acid molecules for improved protein or peptide expression
CA2867323C (en) 2012-03-27 2020-07-07 Sirna Therapeutics, Inc. Diether based biodegradable cationic lipids for sirna delivery
MX357803B (es) 2012-03-27 2018-07-24 Curevac Ag Moléculas de ácido nucleico artificiales.
SG11201405545XA (en) 2012-03-27 2014-11-27 Curevac Gmbh Artificial nucleic acid molecules comprising a 5'top utr
EP3865123A1 (en) 2012-03-29 2021-08-18 Translate Bio, Inc. Lipid-derived neutral nanoparticles
US20140275229A1 (en) 2012-04-02 2014-09-18 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides encoding udp glucuronosyltransferase 1 family, polypeptide a1
WO2013151663A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 modeRNA Therapeutics Modified polynucleotides for the production of membrane proteins
US20150050354A1 (en) 2012-04-02 2015-02-19 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the treatment of otic diseases and conditions
US9254311B2 (en) 2012-04-02 2016-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of proteins
CN108949772A (zh) 2012-04-02 2018-12-07 现代泰克斯公司 用于产生与人类疾病相关的生物制剂和蛋白质的修饰多核苷酸
WO2013151771A1 (en) 2012-04-05 2013-10-10 Massachusetts Institute Of Technology Immunostimulatory compositions and methods of use thereof
WO2013151650A1 (en) 2012-04-05 2013-10-10 University Of Florida Research Foundation, Inc. Neurophilic nanoparticles
WO2013152351A2 (en) 2012-04-06 2013-10-10 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Fusion polypeptides and methods of use thereof
DK2836200T3 (da) 2012-04-08 2020-09-21 Urogen Pharma Ltd Termoreversible hydrogelpræparater til anvendelse i behandlingen af lidelser i urothelium
ES2560235T3 (es) 2012-04-11 2016-02-18 Intezyne Technologies Inc. Copolímeros en bloque para micelas estables
WO2013155487A1 (en) 2012-04-12 2013-10-17 Yale University Vehicles for controlled delivery of different pharmaceutical agents
WO2013154766A1 (en) 2012-04-13 2013-10-17 New York University Microrna control of ldl receptor pathway
WO2013155513A1 (en) 2012-04-13 2013-10-17 President And Fellows Of Harvard College Devices and methods for in vitro aerosol delivery
AU2012377385A1 (en) 2012-04-18 2014-01-23 Arrowhead Research Corporation Poly(acrylate) polymers for in vivo nucleic acid delivery
US9402816B2 (en) 2012-04-19 2016-08-02 Sima Therapeutics, Inc. Diester and triester based low molecular weight, biodegradeable cationic lipids for oligonucleotide delivery
EP2841056A4 (en) 2012-04-23 2015-09-16 Massachusetts Inst Technology STABLE LAYER COATED PARTICLES
EP2841579B1 (en) 2012-04-25 2018-10-10 Regulus Therapeutics Inc. Microrna compounds and methods for modulating mir-21 activity
HK1208162A1 (en) 2012-05-03 2016-02-26 Kala Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical nanoparticles showing improved mucosal transport
CA2872519C (en) 2012-05-04 2017-09-05 The Johns Hopkins University Lipid-based drug carriers for rapid penetration through mucus linings
US20150087671A1 (en) 2012-05-16 2015-03-26 Micell Technologies, Inc. Low burst sustained release lipophilic and biologic agent compositions
US9399672B2 (en) 2012-05-17 2016-07-26 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Hepatitis C virus neutralizing antibody
WO2013173693A1 (en) 2012-05-18 2013-11-21 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Nanoparticles with enhanced entry into cancer cells
AU2013266238B2 (en) 2012-05-23 2017-07-27 The Ohio State University Lipid-coated albumin nanoparticle compositions and methods of making and method of using the same
ES2719598T3 (es) 2012-05-25 2019-07-11 Curevac Ag Inmovilización reversible y/o liberación controlada de ácidos nucleicos contenidos en nanopartículas mediante revestimientos poliméricos (biodegradables)
NZ702283A (en) 2012-06-06 2016-09-30 Loma Vista Medical Inc Inflatable medical devices
US20150126589A1 (en) 2012-06-08 2015-05-07 Ethris Gmbh Pulmonary Delivery of Messenger RNA
EP2858974B9 (en) 2012-06-08 2022-07-20 Nitto Denko Corporation Lipids for therapeutic agent delivery formulations
WO2013185069A1 (en) 2012-06-08 2013-12-12 Shire Human Genetic Therapies, Inc. Pulmonary delivery of mrna to non-lung target cells
EP2863892B1 (en) 2012-06-20 2017-11-08 University Of Waterloo Mucoadhesive nanoparticle delivery system
US20150218252A1 (en) 2012-06-20 2015-08-06 President And Fellows Of Harvard College Self-assembling peptides, peptide nanostructures and uses thereof
EP2866833B1 (en) 2012-06-27 2019-05-15 Merck Sharp & Dohme Corp. Crystalline anti-human il-23 antibodies
US9150841B2 (en) 2012-06-29 2015-10-06 Shire Human Genetic Therapies, Inc. Cells for producing recombinant iduronate-2-sulfatase
US9415109B2 (en) 2012-07-06 2016-08-16 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Stable non-aggregating nucleic acid lipid particle formulations
US9956291B2 (en) 2012-07-10 2018-05-01 Shaker A. Mousa Nanoformulation and methods of use of thyroid receptor beta1 agonists for liver targeting
WO2014014890A1 (en) 2012-07-16 2014-01-23 Nanoderm Sciences, Inc. Targeted therapeutic nanoparticles
EP2687252A1 (en) 2012-07-17 2014-01-22 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Drug delivery device
EP2687251A1 (en) 2012-07-17 2014-01-22 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Drug delivery device
CN103566377A (zh) 2012-07-18 2014-02-12 上海博笛生物科技有限公司 癌症的靶向免疫治疗
WO2014015334A1 (en) 2012-07-20 2014-01-23 Brown University System and methods for nanostructure protected delivery of treatment agent and selective release thereof
JP6596336B2 (ja) 2012-07-24 2019-10-23 プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ 核酸ナノ構造の自己集合
WO2014015422A1 (en) 2012-07-27 2014-01-30 Ontario Institute For Cancer Research Cellulose-based nanoparticles for drug delivery
GB201213624D0 (en) 2012-07-27 2012-09-12 Univ Ulster The Method and system for production of conjugated nanoparticles
WO2014024193A1 (en) 2012-08-07 2014-02-13 Prodel Pharma Ltd. Compositions and methods for rapid transmucosal delivery of pharmaceutical ingredients
US9931418B2 (en) 2012-08-07 2018-04-03 Northeastern University Compositions for the delivery of RNA and drugs into cells
CN104582747B (zh) 2012-08-08 2016-12-21 南洋理工大学 用于制造具有活细胞的水凝胶微粒的方法和用于制造组织工程支架的组合物
AU2013299537A1 (en) 2012-08-08 2015-02-19 Presage Biosciences, Inc. Extrusion methods and devices for drug delivery
CN104736181A (zh) 2012-08-10 2015-06-24 北德克萨斯大学健康科学中心 包含靶向聚氨基酸与脂肪酸之缀合物的药物递送载剂
WO2014027006A1 (en) 2012-08-13 2014-02-20 Edko Pazarlama Tanitim Ticaret Limited Sirketi Bioadhesive formulations for use in drug delivery
EP2882706A1 (en) 2012-08-13 2015-06-17 Massachusetts Institute of Technology Amine-containing lipidoids and uses thereof
WO2014028429A2 (en) 2012-08-14 2014-02-20 Moderna Therapeutics, Inc. Enzymes and polymerases for the synthesis of rna
US9827321B2 (en) 2012-08-14 2017-11-28 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Stabilizing shear-thinning hydrogels
CA2881605A1 (en) 2012-08-14 2014-02-20 Aaron FROESE Internal structured self assembling liposomes
WO2014028763A1 (en) 2012-08-15 2014-02-20 The University Of Chicago Exosome-based therapeutics against neurodegenerative disorders
WO2014039185A1 (en) 2012-09-05 2014-03-13 Creighton University Polymeric nanoparticles in a thermosensitive gel for coital-independent vaginal prophylaxis of hiv
US8703197B2 (en) 2012-09-13 2014-04-22 International Business Machines Corporation Branched polyamines for delivery of biologically active materials
EP2895156B1 (en) 2012-09-17 2019-05-08 Pfizer Inc. Process for preparing therapeutic nanoparticles
WO2014047649A1 (en) 2012-09-24 2014-03-27 The Regents Of The University Of California Methods for arranging and packing nucleic acids for unusual resistance to nucleases and targeted delivery for gene therapy
US20150246137A1 (en) 2012-09-27 2015-09-03 The University Of North Carolina At Chapel Hill Lipid coated nanoparticles containing agents having low aqueous and lipid solubilities and methods thereof
WO2014053882A1 (en) 2012-10-04 2014-04-10 Centre National De La Recherche Scientifique Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules
WO2014053879A1 (en) 2012-10-04 2014-04-10 Centre National De La Recherche Scientifique Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules
WO2014053881A1 (en) 2012-10-04 2014-04-10 Centre National De La Recherche Scientifique Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules
CN104812372A (zh) 2012-10-04 2015-07-29 约翰内斯堡金山大学 脂质体药物递送系统
WO2014053880A1 (en) 2012-10-04 2014-04-10 Centre National De La Recherche Scientifique Cell penetrating peptides for intracellular delivery of molecules
EP2716655A1 (en) 2012-10-04 2014-04-09 Institut Pasteur Neutralizing antibodies directed against Hepatitis C virus ectodomain glycoprotein E2
US20140100178A1 (en) 2012-10-04 2014-04-10 Aslam Ansari Composition and methods for site-specific drug delivery to treat malaria and other liver diseases
EP2716689A1 (en) 2012-10-05 2014-04-09 National University of Ireland, Galway Polymer comprising a plurality of branches having at least one disulfide group and/or at least one vinyl group
WO2014064534A2 (en) 2012-10-05 2014-05-01 Chrontech Pharma Ab Injection needle, device, immunogenic compositions and method of use
US9931410B2 (en) 2012-10-09 2018-04-03 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Nanoparticles for targeted delivery of multiple therapeutic agents and methods of use
US20140106260A1 (en) 2012-10-11 2014-04-17 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Core-shell nanoparticulate compositions and methods
JP2015536323A (ja) 2012-10-16 2015-12-21 エンドサイト・インコーポレイテッドＥｎｄｏｃｙｔｅ， Ｉｎｃ． 非天然アミノ酸を含む薬物送達結合体および使用方法
EA035012B1 (ru) 2012-10-18 2020-04-17 Рокфеллер Юниверсити (Дзе) Нейтрализующие анти-вич-антитела широкого спектра действия
AU2013336237A1 (en) 2012-10-22 2015-06-11 Sabag-Rfa Ltd A system for delivering therapeutic agents into living cells and cells nuclei
US10172956B2 (en) 2012-10-26 2019-01-08 Vanderbilt University Polymeric nanoparticles
WO2014066898A1 (en) 2012-10-26 2014-05-01 The Johns Hopkins University A layer-by-layer approach to co-deliver dna and sirna via aunps: a potential platform for modifying release kinetics
EP2911697A1 (en) 2012-10-26 2015-09-02 Nlife Therapeutics S.L. Compositions and methods for selective delivery of oligonucleotide molecules to cell types
EP2912180A1 (en) 2012-10-29 2015-09-02 Technische Universität Dortmund T7 rna polymerase variants and methods of using the same
EP2914728B1 (en) 2012-11-01 2020-07-08 Factor Bioscience Inc. Methods and products for expressing proteins in cells
WO2014071072A2 (en) 2012-11-02 2014-05-08 Pungente Michael D Novel cationic carotenoid-based lipids for cellular nucleic acid uptake
US10017767B2 (en) 2012-11-05 2018-07-10 Fondazione Centro San Raffaele Targets in multiple myeloma and other disorders
US9975916B2 (en) 2012-11-06 2018-05-22 President And Fellows Of Harvard College Compositions and methods relating to complex nucleic acid nanostructures
NZ707855A (en) 2012-11-06 2018-11-30 Rochal Ind Llc Delivery of biologically-active agents using volatile, hydrophobic solvents
US9669104B2 (en) 2012-11-07 2017-06-06 Council Of Scientific And Industrial Research Nanocomplex containing amphipathic peptide useful for efficient transfection of biomolecules
WO2014072999A1 (en) 2012-11-07 2014-05-15 Council Of Scientific And Industrial Research Nanocomplex containing cationic peptide for biomolecule delivery
WO2014072481A1 (en) 2012-11-08 2014-05-15 Novozymes Biopharma Dk A/S Albumin variants
KR102467714B1 (ko) 2012-11-08 2022-11-16 클리어사이드 바이오메디컬, 인코포레이드 인간 대상체에서 안구 질병을 치료하기 위한 방법 및 장치
TW201920677A (zh) 2012-11-08 2019-06-01 美商武田疫苗股份有限公司 登革熱病毒血清型４型之建構物的組成物、方法及用途
EP2917238A1 (en) 2012-11-08 2015-09-16 Eleven Biotherapeutics, Inc. Il-6 antagonists and uses thereof
WO2014071963A1 (en) 2012-11-09 2014-05-15 Biontech Ag Method for cellular rna expression
JP6353846B2 (ja) 2012-11-09 2018-07-04 バイオエヌテック アーゲーＢｉｏＮＴｅｃｈ ＡＧ 細胞のｒｎａ発現方法
WO2014072468A1 (en) 2012-11-09 2014-05-15 Velin-Pharma A/S Compositions for pulmonary delivery
US9200119B2 (en) 2012-11-09 2015-12-01 Momentive Performance Materials Inc. Silicon-containing zwitterionic linear copolymer composition
WO2014074218A1 (en) 2012-11-12 2014-05-15 Redwood Bioscience, Inc. Compounds and methods for producing a conjugate
US9833502B2 (en) 2012-11-12 2017-12-05 Genvec, Inc. Malaria antigens and methods of use
GB201220354D0 (en) 2012-11-12 2012-12-26 Medpharm Ltd Dermal compositions
US9943608B2 (en) 2012-11-13 2018-04-17 Baylor College Of Medicine Multi-arm biodegradable polymers for nucleic acid delivery
WO2014078636A1 (en) 2012-11-16 2014-05-22 President And Fellows Of Harvard College Nucleic acid hydrogel self-assembly
US9310374B2 (en) 2012-11-16 2016-04-12 Redwood Bioscience, Inc. Hydrazinyl-indole compounds and methods for producing a conjugate
US9655848B2 (en) 2012-11-19 2017-05-23 Technion Research & Development Foundation Limited Liposomes for in-vivo delivery
EP2732825B1 (en) 2012-11-19 2015-07-01 Invivogen Conjugates of a TLR7 and/or TLR8 agonist and a TLR2 agonist
US20150290328A1 (en) 2012-11-20 2015-10-15 Phasebio Pharmaceuticals, Inc. Formulations of active agents for sustained release
US20140141037A1 (en) 2012-11-20 2014-05-22 Novartis Ag Rsv f prefusion trimers
WO2014081300A1 (en) 2012-11-22 2014-05-30 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Channel protein activatable liposomes
EP2922574B1 (en) 2012-11-22 2023-05-17 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Chemically cleavable group
WO2014081299A1 (en) 2012-11-22 2014-05-30 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Activatable liposomes
ES2921623T3 (es) 2012-11-26 2022-08-30 Modernatx Inc ARN modificado terminalmente
US20150315541A1 (en) 2012-12-13 2015-11-05 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for altering cell phenotype
EP2931319B1 (en) 2012-12-13 2019-08-21 ModernaTX, Inc. Modified nucleic acid molecules and uses thereof
WO2014108515A1 (en) 2013-01-10 2014-07-17 Novartis Ag Influenza virus immunogenic compositions and uses thereof
JP2016504050A (ja) 2013-01-17 2016-02-12 モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドＭｏｄｅｒｎａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ． 細胞表現型の改変のためのシグナルセンサーポリヌクレオチド
US20160022840A1 (en) 2013-03-09 2016-01-28 Moderna Therapeutics, Inc. Heterologous untranslated regions for mrna
WO2014158795A1 (en) 2013-03-12 2014-10-02 Moderna Therapeutics, Inc. Diagnosis and treatment of fibrosis
US20160024181A1 (en) 2013-03-13 2016-01-28 Moderna Therapeutics, Inc. Long-lived polynucleotide molecules
US10258698B2 (en) 2013-03-14 2019-04-16 Modernatx, Inc. Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions
EP2971033B8 (en) 2013-03-15 2019-07-10 ModernaTX, Inc. Manufacturing methods for production of rna transcripts
WO2014144711A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Moderna Therapeutics, Inc. Analysis of mrna heterogeneity and stability
US10077439B2 (en) 2013-03-15 2018-09-18 Modernatx, Inc. Removal of DNA fragments in mRNA production process
EP2971161B1 (en) 2013-03-15 2018-12-26 ModernaTX, Inc. Ribonucleic acid purification
WO2014144039A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Moderna Therapeutics, Inc. Characterization of mrna molecules
EP2983804A4 (en) 2013-03-15 2017-03-01 Moderna Therapeutics, Inc. Ion exchange purification of mrna
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
HUE056760T2 (hu) 2013-07-11 2022-03-28 Modernatx Inc A CRISPR-hez kapcsolódó fehérjéket és a szintetikus SGRNS-ket kódoló szintetikus polinukleotidokat tartalmazó készítmények és felhasználási módjaik
WO2015034925A1 (en) 2013-09-03 2015-03-12 Moderna Therapeutics, Inc. Circular polynucleotides
US20160194625A1 (en) 2013-09-03 2016-07-07 Moderna Therapeutics, Inc. Chimeric polynucleotides
US9925277B2 (en) 2013-09-13 2018-03-27 Modernatx, Inc. Polynucleotide compositions containing amino acids
WO2015048744A2 (en) 2013-09-30 2015-04-02 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
KR20160067219A (ko) 2013-10-03 2016-06-13 모더나 세라퓨틱스, 인코포레이티드 저밀도 지단백질 수용체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드
US20160243221A1 (en) 2013-10-18 2016-08-25 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods for tolerizing cellular systems
EP3092250A4 (en) 2014-01-08 2017-05-24 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides for the in vivo production of antibodies

Also Published As

Publication number Publication date
ES2737960T3 (es) 2020-01-17
DK4108671T3 (da) 2025-01-06
CA3162352A1 (en) 2012-04-05
EP2622064B1 (en) 2019-05-29
SG10201508149TA (en) 2015-10-29
RU2013120302A (ru) 2014-11-20
ES2862955T5 (en) 2025-01-29
NZ608972A (en) 2015-09-25
EP4108671A1 (en) 2022-12-28
AU2017202958A1 (en) 2017-05-25
WO2012045075A1 (en) 2012-04-05
US20120237975A1 (en) 2012-09-20
ZA201403666B (en) 2016-03-30
PL4108671T3 (pl) 2025-02-24
US20130244282A1 (en) 2013-09-19
LT3590949T (lt) 2022-07-25
CN103429606A (zh) 2013-12-04
EP2625189B1 (en) 2018-06-27
EP4435100A2 (en) 2024-09-25
EP4108671B1 (en) 2024-11-20
HRP20220796T1 (hr) 2022-10-14
EP3431485B2 (en) 2024-09-04
WO2012045082A2 (en) 2012-04-05
US20180112221A1 (en) 2018-04-26
SI3590949T1 (sl) 2022-09-30
EP3590949A1 (en) 2020-01-08
EP3431485B1 (en) 2020-12-30
US20240033379A1 (en) 2024-02-01
US12496358B2 (en) 2025-12-16
US12357708B2 (en) 2025-07-15
ZA201303161B (en) 2014-10-29
SMT202200321T1 (it) 2022-09-14
US20160264975A1 (en) 2016-09-15
EP3431485A1 (en) 2019-01-23
EP2625189A2 (en) 2013-08-14
PL3590949T3 (pl) 2022-08-29
HRP20241701T1 (hr) 2025-02-14
EP2625189A4 (en) 2014-04-30
SG190679A1 (en) 2013-07-31
US9701965B2 (en) 2017-07-11
US20170239374A1 (en) 2017-08-24
EP2622064A1 (en) 2013-08-07
ES2862955T3 (es) 2021-10-08
EP2622064A4 (en) 2014-04-16
US20210236655A1 (en) 2021-08-05
SMT202400513T1 (it) 2025-01-14
CN104531812A (zh) 2015-04-22
US20190160185A1 (en) 2019-05-30
EP3590949B1 (en) 2022-05-18
EP2857413A1 (en) 2015-04-08
ES2925251T3 (es) 2022-10-14
EP4435100A3 (en) 2025-01-15
US9334328B2 (en) 2016-05-10
HUE069586T2 (hu) 2025-03-28
DE19177059T1 (de) 2021-10-07
MX2013003681A (es) 2013-11-20
AU2011308496A1 (en) 2013-05-02
DK3590949T3 (da) 2022-07-11
FI4108671T3 (fi) 2024-12-27
JP2013543381A (ja) 2013-12-05
CN104531671A (zh) 2015-04-22
CA2813466A1 (en) 2012-04-05
EP2857499A1 (en) 2015-04-08
CY1125421T1 (el) 2025-05-09
PT3590949T (pt) 2022-08-02
CA2821992A1 (en) 2012-04-05
PT4108671T (pt) 2024-12-23
US10064959B2 (en) 2018-09-04
ES3005233T3 (en) 2025-03-14
IL225493A0 (en) 2013-06-27
SI4108671T1 (sl) 2025-02-28
LT4108671T (lt) 2025-01-10
US9657295B2 (en) 2017-05-23
US20250090692A1 (en) 2025-03-20
WO2012045082A3 (en) 2012-06-07
US20150064725A1 (en) 2015-03-05
BR112013007862A2 (pt) 2019-09-24
AU2011308496A2 (en) 2014-10-02
HUE058896T2 (hu) 2022-09-28
RS63430B1 (sr) 2022-08-31
US20130203115A1 (en) 2013-08-08
US20130102034A1 (en) 2013-04-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US12357708B2 (en) Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
US20230416324A1 (en) Alternative nucleic acid molecules containing reduced uracil content and uses thereof
JP7019639B2 (ja) 修飾型のヌクレオシド、ヌクレオチドおよび核酸、ならびにそれらの使用方法
US10385088B2 (en) Polynucleotide molecules and uses thereof
US20140371302A1 (en) Modified mrnas encoding cell-penetrating polypeptides
US20160022774A1 (en) Diagnosis and treatment of fibrosis
HK40086418B (en) Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
HK40086418A (en) Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof