JPH10500561A - ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発 - Google Patents

ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発

Info

Publication number
JPH10500561A
JPH10500561A JP7521977A JP52197795A JPH10500561A JP H10500561 A JPH10500561 A JP H10500561A JP 7521977 A JP7521977 A JP 7521977A JP 52197795 A JP52197795 A JP 52197795A JP H10500561 A JPH10500561 A JP H10500561A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
stranded
polynucleotide
double
fragment
sequence
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP7521977A
Other languages
English (en)
Inventor
ウィレム ピー． シー． ステマー，
アンドレアス クラメリ，
Original Assignee
アフィマックス テクノロジーズ エヌ． ブイ．
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=22733354&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=JPH10500561(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by アフィマックス テクノロジーズ エヌ． ブイ． filed Critical アフィマックス テクノロジーズ エヌ． ブイ．
Publication of JPH10500561A publication Critical patent/JPH10500561A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C40—COMBINATORIAL TECHNOLOGY
    • C40B—COMBINATORIAL CHEMISTRY; LIBRARIES, e.g. CHEMICAL LIBRARIES
    • C40B40/00—Libraries per se, e.g. arrays, mixtures
    • C40B40/02—Libraries contained in or displayed by microorganisms, e.g. bacteria or animal cells; Libraries contained in or displayed by vectors, e.g. plasmids; Libraries containing only microorganisms or vectors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/43504—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates
    • C07K14/43595—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from coelenteratae, e.g. medusae
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/54—Interleukins [IL]
    • C07K14/545—IL-1
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/102—Mutagenizing nucleic acids
    • C12N15/1027—Mutagenizing nucleic acids by DNA shuffling, e.g. RSR, STEP, RPR
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/1034—Isolating an individual clone by screening libraries
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/1034—Isolating an individual clone by screening libraries
    • C12N15/1037—Screening libraries presented on the surface of microorganisms, e.g. phage display, E. coli display
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2468—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1) acting on beta-galactose-glycoside bonds, e.g. carrageenases (3.2.1.83; 3.2.1.157); beta-agarase (3.2.1.81)
    • C12N9/2471—Beta-galactosidase (3.2.1.23), i.e. exo-(1-->4)-beta-D-galactanase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/78—Hydrolases (3) acting on carbon to nitrogen bonds other than peptide bonds (3.5)
    • C12N9/86—Hydrolases (3) acting on carbon to nitrogen bonds other than peptide bonds (3.5) acting on amide bonds in cyclic amides, e.g. penicillinase (3.5.2)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6811—Selection methods for production or design of target specific oligonucleotides or binding molecules
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01023—Beta-galactosidase (3.2.1.23), i.e. exo-(1-->4)-beta-D-galactanase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y305/00—Hydrolases acting on carbon-nitrogen bonds, other than peptide bonds (3.5)
    • C12Y305/02—Hydrolases acting on carbon-nitrogen bonds, other than peptide bonds (3.5) in cyclic amides (3.5.2)
    • C12Y305/02006—Beta-lactamase (3.5.2.6)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C40—COMBINATORIAL TECHNOLOGY
    • C40B—COMBINATORIAL CHEMISTRY; LIBRARIES, e.g. CHEMICAL LIBRARIES
    • C40B40/00—Libraries per se, e.g. arrays, mixtures
    • C40B40/04—Libraries containing only organic compounds
    • C40B40/06—Libraries containing nucleotides or polynucleotides, or derivatives thereof
    • C40B40/08—Libraries containing RNA or DNA which encodes proteins, e.g. gene libraries
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C40—COMBINATORIAL TECHNOLOGY
    • C40B—COMBINATORIAL CHEMISTRY; LIBRARIES, e.g. CHEMICAL LIBRARIES
    • C40B50/00—Methods of creating libraries, e.g. combinatorial synthesis
    • C40B50/06—Biochemical methods, e.g. using enzymes or whole viable microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

(57)【要約】 ランダムフラグメント化後のDNA再組立のための方法、およびインビトロまたはインビボにおける組換えによる核酸配列の変異誘発のためのその適用を開示する。詳細には、変異タンパク質をコードする核酸フラグメントまたはポリヌクレオチドの生成のための方法を開示する。本発明はまた、タンパク質のインビトロまたはインビボにおける直接的な分子進化を可能にする変異誘発、再編成および選択の反復サイクルの方法に関する。

Description

【発明の詳細な説明】 ランダムフラグメント化および再組立によるDNA変異誘発 発明の背景 発明の分野 本発明は、所望の表現型を与えるポリヌクレオチドおよび／または選択可能な 有利な予め決定された特質を有するタンパク質をコードするポリヌクレオチドの 生成のための方法に関する。１つの局面において、本方法は変異タンパク質をコ ードする核酸フラグメントを生成および選択するために使用される。関連技術の説明 生体高分子(例えば、タンパク質、DNAなど)の活性配列の複雑さは、その情報 内容(information content)(「IC」；５-９)と呼ばれている。タンパク質の情報内 容はアミノ酸配列変異に対する活性タンパク質の抵抗性として定義され、同様の 機能を有する関連配列のファミリーを記載するために必要な最少数の不変アミノ 酸(ビット)から算定される(９、10)。ランダムな変異誘発に感受性であるタンパ ク質は、高い情報内容を有する。1974年に、この定義が作製された際、タンパク 質の多様性は、分類上の多様性としてしか存在していなかった。 分子ライブラリーのような分子生物学の発達は、かなり多数の変異しやすい塩 基の同定、およびランダムなライブラリーからの機能配列の選択さえ可能にして きた。大部分の残基が、典型的に全てが同時にではないにしても、変異され得、 配列の前後関係(context)の変化を補うことに依存している。従って、100アミノ 酸のタンパク質は、2,000個の異なる変異しかを含まないが、20100通りの可能な 変異の組み合わせを包含する。 情報密度は、配列の単位長当たりの情報内容である。酵素の活性部位は高い情 報密度を有する傾向がある。対照的に、酵素における可変リンカー(flexible li nker)は低い情報密度を有する(８)。 実験室形式で変異タンパク質を作製するために現在広く用いられている方法は 、誤りがち(error-prone)ポリメラーゼ連鎖反応(11、12、19)およびカセット変 異 誘発(８、20、21、22、40、41、42)であり、これらの方法では最適化しようとす る特定の領域が、合成上で変異誘発されるオリゴヌクレオチドで置換される。ど ちらの場合も、「変異体曇り(mutant cloud)」(４)は、元の配列における特定の部 位の周囲で生成される。 誤りがちなPCRは、長い配列にわたってランダムに低レベルの点変異を誘導す るために、低適合性の重合条件を使用する。誤りがちなPCRは、未知の配列のフ ラグメントの混合物を変異誘発するために使用され得る。しかし、コンピュータ ーによるシュミレーションは、点変異単独では、しばしばあまりにも緩やかで、 連続した配列進化に必要とされるブロック変化が可能でない場合もあることを示 唆した。公表されている誤りがちなPCRプロトコルは、0.5kb〜1.0kbより大きい のDNAフラグメントの増幅が不可能で、それらの実際的な適用は限られている。 さらに、誤りがちなPCRの反復サイクルは、中立変異の蓄積を導き、これは例え ば、タンパク質を免疫原性にし得る。 オリゴヌクレオチド直接変異誘発では、短い配列が合成上で変異誘発されるオ リゴヌクレオチドで置換される。このアプローチは遠位変異の組み合わせを生成 せず、従って組み合わせではない。莫大な配列長に関する制限されたライブラリ ーサイズは、タンパク質の最適化のために多数回の選択が避けられないことを意 味する。合成オリゴヌクレオチドを用いる変異誘発には、各回の選択の後に、個 々のクローンの配列決定をし、次いでファミリーに分類して、単一のファミリー を任意に選択し、そしてファミリーをコンセンサスモチーフに縮小する必要があ る。このコンセンサスモチーフは再合成され、そして単一の遺伝子中へ再挿入さ た後にさらなる選択を行う。このプロセスは統計的なボトルネック(statistical bottleneck)を構成し、多数回の変異誘発のためにはこのプロセスは労働力を必 要とし、そして実際的でない。 従って、誤りがちなPCRおよびオリゴヌクレオチド直接変異誘発は、単一サイ クルの配列微調整には有用であるが、多数サイクルに適用する場合、直ちに制限 されるようになる。 誤りがちなPCRは未知の配列のフラグメントの混合物を変異誘発するために使 用され得る(11、12)。しかし、公表されている誤りがちなPCRプロトコル(11、1 2)は、ポリメラーゼの低いプロセシビティー(processivity)を受ける。従って、 このプロトコルは平均的なサイズの遺伝子のランダムな変異誘発を生じ得ない。 このように能力がないことによって、誤りがちなPCRの実際的な適用が制限され る。 誤りがちなPCRのもう１つの重大な制限は、配列の情報内容に伴って下流変異 の速度が増すことである。ある情報内容、ライブラリーのサイズ、および変異誘 発速度、下流変異の上流変異に対するバランスは、統計的に、さらなる改良の選 択を阻害する(統計的最高限度)。 最後に、誤りがちなPCRの反復サイクルはまた、中立変異の蓄積を導き、例え ば、免疫原性に影響し得るが、結合アフィニティーには影響しない。 従って、誤りがちなPCRは、あまりにも緩やかで連続した配列進化に必要とさ れるブロック変化が可能でないことが見出された(１、２)。 カッセット変異誘発において、単一の鋳型の配列ブロックは、代表的に、(部 分的に)ランダム化された配列により置換される。従って、得られる最大情報内 容は、ランダムな配列の数(すなわち、ライブラリーのサイズ)により統計学的に 制限される。このことは統計的なボトルネックを構成し、現在のところ最適では ないが、より長期間のポテンシャルを有し得る他の配列ファミリーを排除する。 さらに、合成オリゴヌクレオチドでの変異誘発は、各回の選択の後に個々のク ローンの配列決定を必要とする(20)。従って、このアプローチは時間がかかり、 そして多数回の変異誘発には実際的でない。 従って、誤りがちなPCRおよびカセット変異が最も適しており、そして比較的 低い情報内容の範囲を微調整するために広く使用されてきた。１つの明白な例外 は、誤りがちなPCRによる多数回の増幅および選択を用いる、ランダムライブラ リーからのRNAリガーゼリボザイムの選択である(13)。 直鎖状の生物学的組換え配列(例えば、タンパク質、RNAおよびDNA)の設計のた めの手段は、天然に発達してきた手段ほど強力ではないことが、ますます明らか になっている。より良い変異体を見出すことは、より広いライブラリー内でより 多くの配列をサーチすることに依存しており、変異誘発性の増幅および選択のサ イクルの数を増加することが必要である。しかし、上記のように、広く用いられ ている現在の変異誘発方法には、反復サイクルのために使用される場合、明らか に制限がある。 大部分の生物の進化は自然淘汰および有性生殖により生じる。有性生殖は選択 された個体の子孫の遺伝子を混合および結合することを確実にする。減数分裂の 間、親由来の相同染色体を互いに並べ、そしてそれらの長さに沿って交差するこ とによって、遺伝子物質を交換する。このようなDNAの交換(swapping)または再 編成(shuffling)は、生物体がより迅速に進化することを可能にする(１、２)。 有性生殖において、挿入される配列は同種環境内で有用性が証明された配列なの で、一旦配列が新しい配列中へ挿入されても、実質的な情報内容を有する傾向が ある。 Martonら(27)は、直線的な反復配列を有するプラスミドにおける組換えをモニ ターするための、インビトロにおけるPCRの使用について記載している。Marton らは、DNAの切断またはニッキング(nicking)の結果として、PCR中に組換えが生 じることを開示している。これにより組換え分子が生じる。Meyerhansら(23)も また、インビトロにおけるPCR中にDNA組換えが存在することを開示している。 用語、適用された分子進化(「AME」)は、進化上の設計アルゴリズムの特定の有 用な目的に対する適用を意味する。AMEのための多くの異なるライブラリー形式 が、ポリヌクレオチド(３、11-14)、ペプチドおよびタンパク質(ファージ(15-17 )、lacI(18)およびポリソームについて報告されてきたが、これらの形式におい は、いずれも、組み合わせライブラリーを故意に作製するためのランダムな交差 による組換えを使用していない。 理論的には、100アミノ酸のタンパク質には2,000通りの異なる個々の変異体が 存在する。100個アミノ酸からなるタンパク質は、20100通りの可能な変異の組み 合わせを有するが、数が多すぎるので、従来の方法では徹底的に調査し得ない。 これらの可能な結合変異(combination mutation)の全てを生成およびスクリーニ ングすること可能にするようなシステムを開発することは有益である。 Winterおよび共同研究者らは(43,44)は、ファージシステムでの発現のために 、インビボ部位特異的組換えシステムを利用してＬ鎖抗体の遺伝子とＨ鎖抗体の 遺伝子とを結合した。しかし、彼らのシステムは組換えの特異的部位に依存して お り、それゆえ制限される。Hayashiら(48)は、重複伸長およびPCRによる単鎖抗体 (scFv)における抗体CDR領域の同時変異誘発を報告している。 Carenら(45)はランダムなインビボ組換えを使用する大規模集団の多重変異体 を生成する方法を記載している。しかし、彼らの方法は、プラスミドの２つの異 なるライブラリーの組み換えを必要としており、各ライブラリーは異なる選択マ ーカーを有している。従って、方法は存在する選択マーカーの数に等しい限られ た数の組換えに制限され、そして選択された配列(１つまたは複数)に連結するマ ーカー遺伝子の数を同時に直線的に増加する。 Calogeroら(46)およびGalizziら(47)は、相同であるがプラスミド上で端を切 り取った２つの昆虫トキシン遺伝子でのインビボ組換えによりハイブリッド遺伝 子を生成し得ることを報告している。Radmanら(49)は、欠損型ミスマッチ修復酵 素を有する宿主細胞において、実質的にミスマッチなDNA配列のインビボ組換え によりハイブリッド分子が形成されることを報告している。 変異タンパク質を生成する方法を開発することは有益であり、本方法は容易に サーチされる変異核酸配列の大規模ライブラリーをの開発を可能にした。本明細 書に記載の発明は、点変異誘発、核酸再編成および選択の反復サイクルを使用す ることに関し、タンパク質のような高度に複雑な直線配列のインビトロにおける 直接的な分子進化を、ランダム組換えによって可能にする。 それゆえに、変異DNA、RNAまたはタンパク質の大規模ライブラリーの生成を可 能にする方法および所望の目的のために特定の変異体を選択することを可能にす る方法を開発することは有益である。本明細書中に記載の発明は、DNA、RNAまた はタンパク質のような高度に複雑な直線配列のインビボにおける直接分子進化を 、組換えによって可能にする変異誘発、インビボ組換えおよび選択の反復サイク ルの使用に関する。 本発明のさらなる利点については、添付の図面を参考にして、本発明の以下の 記載から明らかになろう。 発明の要旨 本発明は、選択されるポリヌクレオチド配列または選択されるポリヌクレオチ ド配列の集団を、代表的には増幅されたポリヌクレオチドおよび／またはクロー ニングされたポリヌクレオチドの形態において生成する方法に関し、それによっ て選択されたポリヌクレオチド配列(１つまたは複数)は、選択され得る所望の表 現型の特徴(例えば、ポリペプチドをコードする、連結されたポリヌクレオチド の転写を促進する、タンパク質に結合するなどの特徴)を有する。所望の構造ま たは機能的特性(例えば、予め決定された生体高分子(例えば、レセプター)への 結合)を有するポリペプチドを同定する１つの方法は、ポリペプチドの大規模ラ イブラリーを、ポリペプチドのアミノ酸配列により与えられる所望の構造または 機能的特性を有する個々のライブラリーメンバーについてスクリーニングするこ とを包含する。 本発明は、アフィニティー相互作用スクリーニングまたは表現型スクリーニン グに適切なディスプレイされたポリペプチドまたはディスプレイされた抗体のラ イブラリーを生成する方法を提供する。本方法は、(1)ディスプレイされたポリ ペプチドまたはディスプレイされた抗体、および上記のディスプレイされたポリ ペプチドまたはディスプレイされた抗体をコードする関連性ポリヌクレオチドを 含む第１の複数の選択されたライブラリーメンバーを得、そして上記の関連性ポ リヌクレオチドまたはそのコピーを得る工程であって、ここで上記の関連性ポリ ヌクレオチドが実質的に同一の配列の領域を包含し、必要に応じて上記のポリヌ クレオチドまたはコピーに変異を導入する工程、および(２)代表的にはランダム に上記の関連性ポリヌクレオチドまたはコピーをプールし、そしてフラグメント 化してPCR増幅に適する条件下でそのフラグメントを形成し、PCR増幅および必要 に応じて変異誘発を実施し、それにより上記フラグメントを相同的に組換えて、 組換えポリヌクレオチドの再編成プールを形成し、それによって上記再編成プー ルの組換えポリヌクレオチドの実質的画分(例えば、10%を超える)が、第１の複 数の選択されたライブラリーメンバー中に存在せず、上記再編成プールは、アフ ィニティー相互作用スクリーニングに適切であるディスプレイされたポリペプチ ドまたはディスプレイされた抗体のライブラリーを構成する工程を包含する。必 要に応じて、本方法は再編成プールのライブラリーメンバーをスクリーニングす るさらなる工程を包含し、予め決定された高分子(例えば、タンパク質性レセプ ター、ペプチド、オリゴ糖、ビリオン、または他の予め決定された化合物または 構造)と結合または相互作用する能力を有する個々の再編成ライブラリーメンバ ー(例えば、触媒性抗体)を同定する。このようなライブラリーから同定されるデ ィスプレイされたポリペプチド、抗体、ペプチド類似体(peptidomimetic)抗体、 および可変領域配列は、治療、診断、研究、および関連する目的(例えば、触媒 、水性溶液の浸透性を増加するための溶質など)のために使用され得、および／ または再編成選択および／またはアフィニティー選択の１回以上のさらなるサイ クルを受け得る。方法は、選択の工程が、予め決定された分子に対する結合アフ ィニティー以外の表現型の特徴(例えば、触媒活性、安定性、酸化抵抗性、薬物 耐性、または宿主細胞上で与えられる検出可能な表現型)を対象とするように改 変され得る。 １つの実施態様において、第１の複数の選択されたライブラリーのメンバーは 、フラグメント化され、そしてインビトロにおいてPCRにより相同的に組換えら れる。 １つの実施態様において、第１の複数の選択されたライブラリーのメンバーは 、インビトロにおいてフラグメント化され、得られるフラグメントを宿主細胞ま たは生物体へ移し、そして相同組換えされ、インビボにおける再編成ライブラリ ーのメンバーを形成する。 １つの実施態様において、第１の複数の選択されたライブラリーのメンバーは 、エピソーム的に複製可能なベクター上でクローニングまたは増殖され、上記多 様なベクターは細胞へ移され、そして相同組換えされ、インビボにおける再編成 ライブラリーのメンバーを形成する。 １つの実施態様において、第１の複数の選択されたライブラリーのメンバーは フラグメント化されないが、直線的な反復としてエピソーム的に複製可能なベク ター上でクローニングまたは増殖され、各反復は、選択されたライブラリーのメ ンバー配列の異なる種を包含しており、上記ベクターは細胞内へ移され、そして ベクター内の組換えにより相同組換えされ、インビボにおける再編成ライブラリ ーのメンバーを形成する。 ある実施態様において、インビトロにおける再編成およびインビボにおける再 編成の組み合わせが、組み合わせの多様性を増強するために提供される。 本発明はアフィニティー相互作用スクリーニングに適するディスプレイされた 抗体のライブラリーを生成する方法を提供する。本方法は、(１)ディスプレイさ れた抗体、および上記のディスプレイされた抗体をコードする関連性ポリヌクレ オチドを含む第１の複数の選択されるライブラリーメンバーを得、そして上記の 関連性ポリヌクレオチドまたはそのコピーを得る工程であって、ここで上記の関 連性ポリヌクレオチドが実質的に同一な可変領域のフレームワーク(frame work) 配列の領域を包含する工程、および(２)上記の関連性ポリヌクレオチドまたはコ ピーをプールし、そしてフラグメント化してPCRの増幅に適する条件下でそのフ ラグメントを形成し、それにより上記フラグメントを相同組換して、CDRの新規 な組み合わせを包含する組換えポリヌクレオチドの再編成プールを形成し、それ によってCDRの組み合わせを包含する上記再編成プールの組換えポリヌクレオチ ドの実質的画分(例えば、10%を超える)が、第１の複数の選択されるライブラリ ーメンバー中に存在せず、上記再編成プールは、CDRの並べ替えを含み、そして アフィニティー相互作用スクリーニングに適切であるディスプレイされた抗体の ライブラリーを構成する工程を包含する。必要に応じて、再編成プールは予め決 定されたエピトープ(抗原)に結合する再編成ライブラリーメンバーを選択するた めに、アフィニティースクリーニングを受け、それゆえ複数の選択される再編成 ライブラリーのメンバーを選択する。必要に応じて、複数の選択される再編成ラ イブラリーのメンバーは、１〜約1000サイクルまたは所望の結合アフィニティー を有するライブラリーメンバーが得られるまで、所望により、繰り返し再編成お よびスクリーニングされ得る。 従って、本発明の１つの局面では、１つ以上の変異を鋳型２本鎖ポリヌクレオ チド中へ導入する方法が提供される(ここて鋳型２本鎖ポリヌクレオチドは所望 のサイズのランダムフラグメントに切断される)。本方法は、１つ以上の１本鎖 または２本鎖オリゴヌクレオチドを、得られる２本鎖フラグメントの集団に添加 する工程であって、ここで上記オリゴヌクレオチドは鋳型ポリヌクレオチドに同 一な範囲および非相同な範囲含む、工程；２本鎖のランダムフラグメントおよび オリゴヌクレオチドの得られる混合物を１本鎖フラグメントに変性する工程；上 記１本鎖フラグメント間の同一の領域で上記１本鎖フラグメントがアニールし、 そして変異誘発された２本鎖ポリヌクレオチドを形成する条件下で、得られる１ 本鎖フラグメントの集団をポリメラーゼとともにインキュベートする工程；およ び所望により上記の工程を反復する工程によってなされる。 別の局面において、本発明は、野生型タンパク質をコードする２本鎖鋳型ポリ ヌクレオチドを含有するサンプルを、上記鋳型ポリヌクレオチドを所望のサイズ のランダムな２本鎖フラグメントに切断することを提供する条件下で処理する工 程；１つ以上の１本鎖または２本鎖オリゴヌクレオチドを、得られるランダムフ ラグメントの集団に添加する工程であって、ここで上記オリゴヌクレオチドは鋳 型ポリヌクレオチドに同一な範囲または非相同範囲を包含する、工程；２本鎖の フラグメントおよびオリゴヌクレオチドの得られる混合物を１本鎖フラグメント に変性する、工程；同一な範囲で上記１本鎖フラグメントがアニールし、そして 変異誘発された２本鎖ポリヌクレオチドを形成する条件下で、得られる１本鎖フ ラグメントの集団をポリメラーゼとともにインキュベートする工程；所望により 上記の工程を反復する工程；次いで、変異誘発された２本鎖ポリヌクレオチド配 列から組換えタンパク質を発現する工程により、生物学的活性を有する組換えタ ンパク質を生成する方法に関する。 本発明の第３の局面は、異なる２本鎖鋳型ポリヌクレオチドをを含有するサン プルを処理する工程であって、ここで上記の異なる鋳型ポリヌクレオチドが上記 鋳型ポリヌクレオチドを所望のサイズのランダムな２本鎖フラグメントに切断こ とを提供する条件下で、同一な範囲および非相同な範囲を包含する、工程；処理 サンプル中に含有の得られるランダムな２本鎖フラグメントを１本鎖フラグメン トに変性する工程；同一な範囲で該１本鎖フラグメントがアニールし、そして鋳 型ポリヌクレオチド配列を含有するキメラな２本鎖ポリヌクレオチド配列を形成 する条件下で、得られる１本鎖フラグメントの集団をポリメラーゼとともにイン キュベートする工程に；および所望により上記の工程を反復する工程により、キ メラなポリヌクレオチドを得る方法に関する。 本発明の第４の局面は、インビトロにおいて、１本鎖鋳型ポリヌクレオチドと 、鋳型ポリヌクレオチドを切断および変性することにより得られるランダムな１ 本 鎖小フラグメントとを結合することにより、鋳型ポリヌクレオチドを複製し、そ して２本鎖鋳型ポリヌクレオチドの集団が形成されるような条件下、核酸ポリメ ラーゼの存在下で上記核酸フラグメントの混合物をインキュベートする方法に関 する。 本発明はまた、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドおよび／または転 写調節配列を含有するポリヌクレオチドを再編成するために、インビトロおよび ／またはインビボにおけるポリヌクレオチド再編成の使用を提供する。 本発明はまた、ウイルス遺伝子(例えば、キャプシドタンパク質、スパイク糖 タンパク質、ポリメラーゼ、プロテアーゼなど)またはウイルスゲノム(例えば、 パラミキソウイルス(例えば、paramyxoviridae)、オルトミキソウイルス(orthom yxoviridae)、ヘルペスウイルス、レトロウイルス、レオウイルス、ライノウイ ルスなど)の集団を再編成するために、ポリヌクレオチド再編成の使用を提供す る。ある実施態様において、本発明は免疫原ウイルスタンパク質の全てまたは一 部をコードする配列を再編成して、新規の組み合わせのエピトープおよび組換え により作製される新規のエピトープを生成する方法を提供し、このような再編成 されたウイルスタンパク質は、ウイルス進化の結果として天然の環境において生 じがちなエピトープまたはエピトープの組み合わせを包含し得る(例えば、イン フルエンザウイルス株の組換えなど)。 本発明はまた、遺伝子治療ベクター、およびヒト遺伝子治療のために使用され 得る複製能欠損の遺伝子治療構築物(DNAに基づくワクチン注射のためのワクチン 注射ベクター、および抗新生物遺伝子治療ならびに他の遺伝子治療形式を含むが 、これらに限定されない)を生成するためのポリヌクレオチド配列の再編成に適 した方法を提供する。 図面の簡単な説明 図１は、変異誘発性の再編成と誤りがちなPCRとを比較する概略図である；(a) 初発ライブラリー；(b)１回目のアフィニティー選択において選択された配列の プール；(d)選択された配列のインビトロにおける組換え(「再編成」)；(f)再編成 後の２回目のアフィニティー選択において選択された配列のプール；(c)誤りが ちなPCR；(e)誤りがちなPCR後の２回目のアフィニティー選択において選択され た配列のプール。 図２は、10bp〜50bpのランダムフラグメントからの1.0kb LacZα遺伝子フラグ メントの再組立(reassembly)を示す。(a)LacZα遺伝子を有するPCR増幅したゲル DNAフラグメントの写真。(b)DNアーゼI消化後のDNAフラグメントのゲルの写真。 (c)消化されたLacZα遺伝子DNAフラグメントから精製した10bp〜50bpのDNAフラ グメントのゲルの写真；(d)指示された数のサイクルのDNA再組立後の10bp〜50bp のDNAフラグメントのゲルの写真；(e)プライマーを用いたPCRによる増幅後の組 換え混合物のゲルの写真。 図３は、LacZα遺伝子の終止コドン変異体およびそれらのDNA配列の概略図で ある。四角枠の領域は非相同範囲であり、マーカーとして働く。終止コドンは小 さな四角枠内に位置するかまたは下線を付している。「＋」は、野生型遺伝子を示 し、そして「−」は遺伝子における変異範囲を示す。 図４は、合成オリゴヌクレオチドをLacZα遺伝子の再組立プロセスへの導入ま たはスパイク(spiking)の概略図である。 図５は、E.coliの使用コドン(codon usage)を用いて、マウスIL1-B遺伝子(M) とヒトIL1-B遺伝子(H)との間の相同な領域を示す。非相同領域には四角枠を付す 。 図６は、抗ウサギIgG抗体(A10B)のscFvを使用した抗体CDR再編成モデルシステ ムの概略図である。 図７は、抗ウサギIgG抗体(A10B)のscFvの再編成DNAにおいて、観察されたCDR の特定の組み合わせが生じる頻度を示す。 図８は、DNA再編成および各サイクルの選択後のscFv抗ウサギIgG抗体の改良さ れた結合活性を示す。 図９は、pBR322-Sfi-BL-LA-Sfiおよびダイレクトリピートを介するインビボに おけるプラスミド内の組換え、および機能的なβラクタマーゼ遺伝子を再構築す るプラスミド内の組換えによるアンピシリン耐性コロニーの発生率を概略する。 図10は、pBR322-Sfi-2Bla-Sfiおよびダイレクトリピートを介するインビボに おけるプラスミド内の組換え、および機能的なβラクタマーゼ遺伝子を再構築す るインビボにおけるプラスミド内の組換えによるアンピシリン耐性コロニーの発 生率を概略する。 図11は、組換えタンパク質を生成するために、ポリヌクレオチドフラグメント を細胞に導入した後、多数回の相同組換えの効率を試験する方法を示す。 図12は、以下の座位でのカセットを再編成することによるベクターのライブラ リーの生成を概略する：プロモーター、リーダーペプチド、ターミネーター、選 択薬物耐性遺伝子、および複製開始点。各遺伝子座での複数の平行な線はそのカ セットについてのカセットの多様性を表す。 図13は、再編成により真核生物のベクターライブラリーを構築するために、種 々の遺伝子座における適切なカセットのいくつかの例を概略的に示す。 好ましい実施態様の説明 本発明は、DNA配列の変異誘発のためのランダムフラグメント化およびその適 用後に、核酸分子を再組立する方法に関する。増強される生物学的活性を有する 変異タンパク質をコードする核酸フラグメントを生成する方法もまた記載される 。特に、本発明はまた、増強された生物学的活性を有する変異タンパク質の作製 を可能にする変異誘発、核酸の再編成および選択の反復サイクルの方法に関する 。 本発明はDNA、RNA、またはタンパク質変異体の非常に大規模なライブラリーを 生成する方法に関する。この方法は、所望の核酸フラグメント(１つまたは複数) が選択され得る関連のあるDNAフラグメントの生成において特定の利点を有する 。特に本発明はまた、増強された生物学的活性を有する変異タンパク質作製を可 能にする変異誘発、相同組換えおよび選択の反復サイクルの方法に関する。 しかし、本発明をさらに詳細に考察する前に、まず以下の用語について定義す る。 定義 本明細書で使用される以下の用語は、以下の意味を有する： 用語「DNA再組立」は、同一の配列の間で組換えが生じる場合に使用される。 対照的に、用語「DNA再編成」は、実質的に相同であるが同一ではない配列の間 の組換えを示すために本明細書で使用され、いくつかの実施態様において、DNA 再編成は非相同な組換え(例えば、cre/loxおよび／またはflp/frtシステムなど) を介する交差を含み得る。 用語「増幅」は、核酸フラグメントのコピー数が増加されることを意味する。 用語「同一な」または「同一」は、２つの核酸配列が同じ配列または相補的な配列 を有することを意味する。従って、「同一の範囲」は、核酸フラグメントまたはポ リヌクレオチドの領域または範囲が別のポリヌクレオチドまたは核酸フラグメン トに同一または相補的であることを意味する。 用語「対応する」は、ポリヌクレオチド配列が参照ポリヌクレオチド配列の全て または一部分に相同である(すなわち同一であり、厳密には進化的に関連しない) こと、またはポリペプチド配列が参照ポリペプチド配列に同一であることを意味 するために本明細書において使用される。対照的に、用語「相補する」は、相補的 な配列が参照ポリヌクレオチド配列の全てまたは一部分に相同であることを意味 するために本明細書で使用される。例えば、核酸配列「TATAC」は、参照配列「TATA C」に対応し、そして参照配列「GTATA」に相補的である。 以下の用語は、２つ以上のポリヌクレオチド間での配列の関係を記載するため に使用される：「参照配列」、「比較領域(comparison window)」、「配列同一性」、「 配列同一性のパーセンテージ」、および「実質的同一性」。「参照配列」は、配列比 較のための基本として使用される規定の配列である；参照配列は、より大きな配 列のサブセット(例えば、配列表に示される全長cDNAまたは遺伝子配列のセグメ ント(例えば、図１または図２(b)のポリヌクレオチド配列))であり得、または参 照配列は完全なcDNAまたは遺伝子配列を含有し得る。一般的に、参照配列は少な くとも20ヌクレオチドの長さであり、頻繁には少なくとも25ヌクレオチドの長さ であり、そしてしばしば少なくとも50ヌクレオチドの長さである。２つのポリヌ クレオチドが、それぞれ(１)２つのポリヌクレオチド間で類似の配列(すなわち 、完全なポリヌクレオチド配列の一部分)を含有し得、そして(２)２つのポリヌ クレオチド間で互いに一致しない配列をさらに含有し得るので、２つ(またはそ れ以上)のポリヌクレオチド間の配列比較は、代表的には、「比較領域」にわたる ２つのポリヌクレオチドの配列を比較することにより実施され、配列が類似する 局 所領域を同定および比較する。 本明細書で使用される「比較領域」は、少なくとも20の隣接するヌクレオチドの 位置の概念のセグメントをいい、ここでポリヌクレオチド配列が少なくとも20の 隣接するヌクレオチドの参照配列と比較され得、そしてここでは比較領域におけ るポリヌクレオチド配列の部分が、２つの配列の最適アラインメントのために、 参照配列(付加または欠失を含まない)に比べて20%以下の付加または欠失(すなわ ちギャップ)を含み得る。比較領域を並べるための、配列の最適なアラインメン トは、SmithおよびWaterman（1981）Adv.Appl.Math. 2:482の局所相同性アルゴ リズムにより、NeedlemanおよびWunsch（1970）J.Mol.Biol. 48:443の相同性ア ラインメントアルゴリズムにより、PearsonおよびLipman（1988）Proc.Natl.Aca d.Sci. （U.S.A.）85:2444の類似度方法に関するサーチにより、これらのアルゴ リズム(Wisconsin Genetics Software Package Release 7.0，Genetics Compute r Group，575 Science Dr.,Madison，WIにおけるGAP、BESTFIT、FASTA、およびT FASTA)のコンピュータ実行により、または検査により行われ得、そして種々の方 法により生成される最も良いアラインメント(すなわち、比較領域にわたる最も 高い相同性パーセンテージを与える)が、選択される。 用語「配列同一性」は、２つのポリヌクレオチド配列が比較領域にわたって同一 である(すなわち、１ヌクレオチドずつに基づいて)ことを意味する。用語「配列 同一性のパーセンテージ」は、最適に並べられた２つの配列を比較領域にわたっ て比較し、同一の核酸塩基(例えば、A、T、C、G、U、またはI)が両方の配列にお いて生じる位置の数を測定し、一致した位置の数を得、一致した位置の数を比較 の領域における位置の全体数(すなわち、比較サイズ)で割り、そして結果に100 を掛けて、配列同一性のパーセンテージを得ることにより、算定される。本明細 書で使用される用語「実質的同一性」は、ポリヌクレオチド配列の特徴を示し、こ こではポリヌクレオチドは、少なくとも20の隣接するヌクレオチド位置の比較領 域にわたり、頻繁には少なくとも25〜50ヌクレオチドの領域にわたり参照配列と 比較して、少なくとも80%の配列同一性、好ましくは少なくとも85%の同一性、そ してしばしば90%〜95%パーセントの配列同一性、最も通常には少なくとも99%の 配列同一性を有する配列を包含し、ここでは配列同一性のパーセンテージは、ポ リヌクレオチド配列を参照配列と比べることにより算定され、このヌクレオチド 配列は、比較領域にわたり、全体で参照配列の20%以下の欠失または付加を含み 得る。 保存的アミノ酸置換は、類似側鎖を有する残基の互換性をいう。例えば、脂肪 族側鎖を有するアミノ酸のグループは、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン 、およびイソロイシンであり；脂肪族ヒドロキシル側鎖を有するアミノ酸のグル ープはセリンおよびスレオニンであり；アミド含有側鎖を有するアミノ酸のグル ープはアスパラギンおよびグルタミンであり；芳香族側鎖を有するアミノ酸のグ ループは、フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファンであり；塩基性 側鎖を有するアミノ酸のグループはリジン、アルギニン、およびヒスチジンであ り；そしてイオウ含有側鎖を有するアミノ酸のグループはシステインおよびメチ オニンである。好ましい保存的アミノ酸の置換グループは：バリン-ロイシン-イ ソロイシン、フェニルアラニン-チロシン、リジン-アルギニン、アラニン-バリ ン、およびアスパラギン-グルタミンである。 用語「相同」または「同種(homeologous)」は、ある１本鎖核酸配列が相補的な１ 本鎖核酸配列にハイブリダイズし得ることを意味する。ハイブリダイゼーション の程度は配列間の同一性の量およびハイブリダイゼーション条件(例えば、後述 するような温度および塩濃度)を包含する多数の要素に依存し得る。好ましくは 同一な領域は約５bpより多くであり、より好ましくは同一な領域は10bpより多く である。 用語「非相同」は、ある１本鎖核酸配列が別の１本鎖核酸配列またはその相補鎖 にハイブリダイズし得ないことをいう。従って非相同な範囲は、核酸フラグメン トまたはポリヌクレオチドが、別の核酸またはポリヌクレオチドにハイブリダイ ズし得ない範囲または領域を配列中に有することを意味する。このような領域ま たは範囲は、例えば、変異の範囲である。 本明細書で使用される用語「同族」は、種間で進化的におよび機能的に関連付け られる遺伝子配列をいう。これに限定されないが例えば、ヒトゲノムにおいては 、ヒトCD4遺伝子は、マウスCD4遺伝子の同族遺伝子である。なぜならこれらの２ つの遺伝子の配列および構造が、それらが高度に相同であることを示し、そして 両 方の遺伝子がMHCクラスII-制限抗原認識を介してＴ細胞活性化をシグナルするこ とに機能するタンパク質をコードしているからである。 用語「野生型」は、核酸フラグメントがいかなる変異も含まないことを意味する 。「野生型」タンパク質は、タンパク質が天然において見られる活性のレベルで活 性であり、そして天然において見られるアミノ酸配列を含有することを意味する 。 用語「関連ポリヌクレオチド」は、ポリヌクレオチドの領域または範囲が同一で あり、かつポリヌクレオチドの領域または範囲が非相同であることを意味する。 用語「キメラなポリヌクレオチド」は、ポリヌクレオチドが野生型である領域お よび変異を受けた領域を含むことを意味する。ポリヌクレオチドが、あるポリヌ クレオチドに由来する野生型領域および別の関連ポリヌクレオチドに由来する野 生型領域を含むこともまた意味する。 用語「切断」は、ポリヌクレオチドを酵素で消化することまたはポリヌクレオチ ドを切断することを意味する。 本明細書で使用される用語「集団」は、ポリヌクレオチド、核酸フラグメント、 またはタンパク質のような成分の集合を意味する。「混合集団」は、核酸またはタ ンパク質の同じファミリーに属する(すなわち関連する)が、それらの配列が異な り(すなわち同一ではない)、それゆえそれらの生物学的活性においても異なる成 分の集合を意味する。 用語「特定核酸フラグメント」は、特定の終点を有し、そして特定核酸配列を有 する核酸フラグメントを意味する。２つの核酸フラグメント(ここでは１つの核 酸フラグメントが第２の核酸フラグメントの一部分と同一の配列を有するが、異 なる末端を有する)は、２つの異なる特定核酸フラグメントを包含する。 用語「変異」は、野生型核酸配列の配列における変化、またはペプチドの配列に おける変化を意味する。このような変異は、塩基転位または塩基転換のような点 変異であり得る。変異は欠失、挿入、または重複であり得る。 本明細書で使用されるポリペプチド表記は、標準的な慣習および慣用に従い、 左側方向がアミノ末端方向であり、右側方向がカルボキシ末端方向である。同様 に、他で特定しないかぎり、１本鎖ポリヌクレオチド配列の左側の末端は5'末端 であり；２本鎖ポリヌクレオチド配列の左側方向は5'方向という。新生RNA転写 産物の5'から3'付加の方向を、転写方向といい；RNAと同じ配列を有し、およびR NA転写産物の5'末端の5'側にであるDNA鎖上の配列領域を「上流配列」といい；RNA と同じ配列を有し、およびコードRNAの転写産物の3'末端の3'側にあるDNA鎖上の 配列領域を「下流配列」という。 本明細書で使用される用語「天然に存在する」は、ある物体に適用されるように 、ある物体が天然において見出され得る事実をいう。例えば、供給源から天然に 単離され得、研究室においてヒトにより故意に改変されていない生物(ウイルス を含む)に存在するポリペプチドまたはポリヌクレオチド配列は、天然に存在す る配列である。一般的に、用語天然に存在するは、種に代表的であるような非病 的(非疾患)個体に存在する物体をいう。 本明細書で使用される用語「薬剤」は、化合物、化合物の混合物、場所的に局在 する化合物の配列(例えば、VLSIPSペプチド配列、ポリヌクレオチド配列、およ び／または結合小分子配列)、生体高分子、バクテリオファージのペプチドディ スプレイライブラリー、バクテリオファージ抗体(例えば、scFv)ディスプレイラ イブラリー、ポリソームペプチドディスプレイライブラリー、または細菌、植物 、真菌、または動物(特に哺乳動物)細胞または組織のような生体物質から作製さ れる抽出物を示す。薬剤は、本明細書の以下に記載されるスクリーニングアッセ イに含めることにより、抗新生物剤、抗炎症剤、またはアポトーシスモジュレー ターとしての潜在的活性について評価される。薬剤は、本明細書の以下に記載さ れるスクリーニングアッセイに含めることにより、特定のタンパク質相互作用の インヒビター(すなわち、２つの予め決定されたポリペプチド間の結合相互作用 を選択的に阻害するが、細胞の生存性を実質的に阻害しない薬剤)としての潜在 的活性について評価される。 本明細書て使用されるように、「実質的に純粋な」は、対象種が存在する優勢種 であること(すなわち、モル濃度に基づき、組成において他の任意の個々の高分 子種よりも豊富であること)を意味し、そして好ましくは実質的に精製された画 分は、対象種が、存在する全ての高分子種の少なくとも約50%(モルに基づき)を 含む組成である。一般的には、実質的に純粋な組成物は、組成物中に存在する全 高分子種の約80%〜90%より多くを含有する。最も好ましくは、対象種は本質的に 均質にまで精製され(汚染種が従来の検出方法により組成物中に検出され得ない) 、ここでは組成物は本質的に単一の高分子種からなる。溶媒種、小分子(＜500ダ ルトン)、および元素イオン種は高分子種とは見なさない。 本明細書で使用される用語「生理学的条件」は、温度、pH、イオン強度、粘性率 、および同様の生物学的パラメーターであって、これらは生存可能な生物に適合 する、および／または生存可能な酵母培養細胞または哺乳動物培養細胞において 細胞内に代表的に存在する。例えば、代表的な実験培養条件下で増殖される酵母 細胞における細胞内条件は、生理学的条件である。インビトロ転写反応混液に適 切なインビトロ反応条件は、一般的に生理学的条件である。一般に、インビトロ 生理学的条件は50〜200mM NaClまたはKCl、pH6.5〜8.5、20〜45℃、および0.001 〜10mM ２価イオン(例えば、Mg++、Ca++)；好ましくは約150mM NaClまたはKCl、 pH7.2〜7.6、５mM 二価カチオンを含有し、そしてしばしは0.01〜1.0%の非特異 的タンパク質(例えば、BSA)を含有する。非イオン性界面活性剤(Tween、NP-40、 Triton X-100)が、通常約0.001%〜２%、代表的には0.05%〜0.2%(v/v)でしばしば 存在し得る。特定の水性条件は従来の方法に従って当業者により選択され得る。 一般的な手引きのために、以下の緩衝化水性条件が適用可能であり得る：10〜25 0mM NaCl、５〜50mM Tris HCl、pH5-8、二価カチオン(１種類または複数)および ／または金属キレート剤および／または非イオン性界面活性剤および／または膜 画分および／または消泡剤および／または発光剤(scintillant)の最適な添加を 有する。 本明細書において、特異的ハイブリダイゼーションは、第１のポリヌクレオチ ドと第２のポリヌクレオチド(例えば、第１のポリヌクレオチドと区別されるが 実質的には同一の配列を有するポリヌクレオチド)との間のハイブリッドの形成 として定義され、ここでは、実質的に関連のないポリヌクレオチド配列が混合物 中でハイブリッドを形成しないストリンジェントなハイブリダイゼーション条件 下で、第１のポリヌクレオチドは優先して第２のポリヌクレオチド配列にハイブ リダイズする。 本明細書で使用される用語「単鎖抗体」は、ポリペプチド結合においてVHドメイ ンおよびVLドメインを含むポリペプチドをいい、一般的にスペーサーペプチド (例えば、[Gly- Gly- Gly- Gly-Ser]x)を介して連接され、アミノ末端および／ またはカルボキシ末端で付加的なアミノ酸配列を含み得る。例えば、単鎖抗体は コード化ポリヌクレオチドに結合するために、つなぎ(tether)セグメントを含み 得る。一例として、scFvは、単鎖抗体である。単鎖抗体は一般に、免疫グロブリ ンスーパーファミリーの遺伝子により実質的にコードされる、少なくとも10個の 隣接するアミノ酸の１つ以上のポリペプチドセグメントからなるタンパク質であ る(例えば、The Immunoglobulin Gene Superfamily, A.F.WilliamsおよびA.N.Ba rclay，Immunoglobulin Genes, T.Honjo，F.W．Alt,およびT.H.Rabbitts編（198 9）Academic Press：San Diego，CA，361-387頁(本明細書中に参考として援用さ れる)を参照のこと)。最も頻繁には単鎖抗体は、齧歯類、ヒト以外の霊長類、ト リ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、またはヒトのＨ鎖遺伝子配列またはＬ鎖遺伝子 配列によりコードされる。一般に機能的な単鎖抗体は、免疫グロブリンスーパー ファミリー遺伝子産物の十分な部分を含有しており、特定標的分子(代表的には レセプターまたは抗原(エピトープ))に対する結合特性を保有する。 本明細書で使用されるように、用語「相補性決定領域」および「CDR」は、Kabatお よびChothiaにより例証される技術認識用語である。一般に、CDRの定義は、高頻 度可変領域または高頻度可変ループ(ChothiaおよびLesk（1987）J.Mol.Biol. 19 6 ：901；Chothiaら（1989）Nature 342：877；E.A.Kabatら，Sequences of Prot eins Immunological Interest（National Institutes of Health，Bethesda，MD ）(1987)；およびTramontanoら（1990）J.Mol.Biol. 215：175)としてもまた知 られる。可変領域のドメインは、代表的に、天然に存在する免疫グロブリン鎖の アミノ末端の約105〜115アミノ酸(例えば、アミノ酸１〜110)を含むが、いくら か短いまたは長い可変ドメインはもまた、単鎖抗体の形成に適している。 免疫グロブリンのＬ鎖可変領域またはＨ鎖可変領域は、CDRとも呼ばれる３つ の高頻度可変領域により中断される「フレームワーク」領域からなる。フレームワ ーク領域およびCDRの範囲は正確に定義されている(「Sequences of Proteins of Immunological interset」E.Kabatら，第４版，U.S．Department of Health and Human Services，Bethesda，MD(1987)を参照のこと)。異なるＬ鎖またはＨ鎖の フレームワーク領域の配列は種内で比較的保存されている。本明細書で使用さ れる「ヒトフレームワーク領域」は、天然に存在するヒト免疫グロブリンのフレー ムワーク領域に実質的に同一(約85%以上、通常は90%〜95%以上)であるフレーム ワーク領域である。抗体のフレームワーク領域(すなわち、構成要素のＬ鎖およ びＨ鎖の結合フレームワーク領域)は、CDRの配置および配列に作用する。CDRが 主に、抗原のエピトープへの結合を担う。 本明細書で使用される用語「可変セグメント」は、ランダムな配列、偽似ランダ ムな配列、または規定の核配列を含む新生ペプチドの一部分をいう。可変セグメ ントは、可変領域位置および不変領域位置の両方を含み得、可変領域位置での残 基の変化の程度は制限され得る；両方の選択とも実施者の判断で選択される。代 表的に、可変セグメントは約５〜20アミノ酸残基の長さ(例えば、８〜10アミノ 酸)であるが、可変セグメントはより長くあり得、そして抗体位置またはレセプ ター位置(例えば、抗体フラグメント、核酸結合タンパク質、レセプタータンパ ク質など)を含み得る。 本明細書で使用される「ランダムペプチド配列」は、２つ以上のアミノ酸モノマ ーからなり、確率過程またはランダム過程により構築されるアミノ酸配列をいう 。ランダムなペプチドはフレームワークモチーフまたは骨組みモチーフを含み得 、不変配列を含み得る。 本明細書で使用される「ランダムペプチドライブラリー」は、一セットのランダ ムペプチドをコードするポリヌクレオチド配列のセットをいい、そしてこれらの ポリヌクレオチド配列によりコードされるランダムペプチドのセット、ならびに これらのランダムペプチドを含む融合タンパク質をいう。 本明細書で使用される用語「疑似ランダム」は、限定された可変性を有する配列 のセットをいい、これにより、例えば、ある位置の残基の可変性の程度が別の位 置の残基の可変性の程度と異なる。しかし任意の疑似ランダム位置は、ある程度 の残基の変化を可能にするが、制限される。 本明細書で使用される用語「規定の配列フレームワーク」は、一般的に実験デー タまたは構造データを基礎として、非ランダムに選択される規定の配列のセット をいい；例えば、規定の配列フレームワークは、βシート構造を形成すると予想 されるアミノ酸配列のセットを含み得、または他の変化の間にロイシンジッパー の７個の反復モチーフ、亜鉛フィンガードメインを含み得る。「規定の配列核」は 、可変性の制限範囲を含む配列のセットである。(1)20個の従来のアミノ酸の完 全にランダムな10マーの配列は、(20)10個の配列のいずれでもあり得、そして(2 )20個の従来のアミノ酸の疑似ランダムな10マーの配列は(20)10個の配列のいず れでもあり得るが、特定の位置および／または全体で特定の残基に偏りが表れる のに対し、一方(3)規定の配列核は、それぞれの残基位置が可能である20個の従 来のアミノ酸(および／または可能な比従来型のアミノ酸／イミノ酸)のいずれで もあることが可能とされた場合、可能な配列の最大数よりも少なくなる配列のサ ブセットである。一般に、規定の配列核は、個々の選択されたライブラリーメン バー配列のセグメントまたは全長のいずれかに、可変残基位置および不変残基位 置を含んだり、そして／またはアミノ酸残基の規定のサブセットから選択される 残基を含み得る可変残基位置を包んだりなどする。規定の配列核は、アミノ酸配 列またはポリヌクレオチド配列のいずれかをいい得る。これらに限定されないが 例えば、配列(NNK)10および(NNH)10は、配列核であると定義される(ここでNはA 、T、G、またはCを表し；Kは、GまたはTを表し；およびMはAまたはCを表す)。 本明細書で使用される「エピトープ」は、抗体の可変領域結合ポケットと相互作 用して結合相互作用を形成し得る抗原または他の高分子の一部分をいう。代表的 に、このような結合相互作用はCDRの１つ以上のアミノ酸残基の分子間接触とし て示される。 本明細書で使用される「レセプター」は、所定のリガンドにアフィニティーを有 する分子をいう。レセプターは天然に存在する分子または合成分子であり得る。 レセプターは不変状態においてまたは他の種とともに集合体として使用され得る 。レセプターは、共有結合的または非共有結合的に、直接または特異的な結合物 質を介してのいずれかで、結合メンバーに付着され得る。レセプターの例は、抗 体(特定の抗原決定基(例えば、ウイルス、細胞、または他の物質)と反応するモ ノクロール抗体および抗血清を包含する)、細胞膜レセプター、炭水化物および 糖タンパク質の複合体、酵素、およびホルモンレセプターを包含するがこれらに 限定されない。 本明細書で使用される「リガンド」は、ランダムペプチド配列または可変セグメ ント配列のような、特定のレセプターで認識される分子をいう。当業者の認識す るところによれば、分子(または高分子複合体)は、レセプターおよびリガンドの 両方であり得る。一般的に、小分子量を有する結合対をリガンドといい、そして 大きな分子量を有する結合対をレセプターという。 本明細書て使用される「リンカー」または「スペーサー」は、２つの分子(例えば 、DNA結合タンパク質およびランダムペプチド)を結合させる分子または分子のグ ループをいい、そして好ましい配置にその２つの分子を置くように供せられる。 これにより、例えば、ランダムペプチドは、DNA結合タンパク質から最少の立体 障害でレセプターに結合し得る。 本明細書で使用される用語「作動可能に連結される」は、機能的関係におけるポ リヌクレオチド要素の連結をいう。核酸が、別の核酸配列と機能的関係に置かれ る場合、核酸は「作動可能に連結される」。例えば、プロモーターまたはエンハン サーが、コード配列の転写に影響する場合、これはコード配列に作動可能に連結 される。作動可能に連結されるとは、代表的に、連結されるDNA配列が隣接され ることを意味し、２つのタンパク質コード領域を接続することが必要である場合 、隣接されかつリーディングフレーム内にある。方法論 核酸再編成は、インビトロまたはインビボにおいて核酸フラグメントまたはポ リヌクレオチドのプールを相同組換えする方法である。関連核酸配列またはポリ ヌクレオチドの混合物をランダムにフラグメント化し、そして再組立して、組換 え核酸分子またはポリヌクレオチドのライブラリーまたは混合集団を生じる。 カセット変異誘発とは対照に、再編成および誤りがちなPCRのみが、(プライマ ー以外の配列情報を用いずに)盲目的に配列のプールを変異させる。 反復選択について誤りがちなPCRのみよりも優れる本発明の変異性再編成の利 点は、抗体工学からの例を用いて最も良く説明され得る。図１に、本明細書で記 載されるDNA再編成の概略図が示される。開始ライブラリーは多様な起源の関連 配列(すなわち、天然mRNA由来の抗体)からなり得、または単一抗体遺伝子の任意 の型の変異誘発(再編成を包含する)により得られ得る。選択される相補性決定領 域(「CDR」)の集合は、一回目のアフィニティー選択後に得られる(図１)。図にお いて、太いCDRは、抗体分子に抗原への増加したアフィニティーを与える。再編 成は、全てのCDR1と全てのCDR２および全てのCDR３などとの自由な組み合わせの 結合を可能にする(図１)。 この方法は、逆鎖反応である点でPCRとは異なる。PCRでは、ポリメラーゼの開 始部位の数および分子の数は指数関数的に増加する。しかし、ポリメラーゼ開始 部位の配列および分子の配列は本質的に同じである。反対に、ランダムフラグメ ントの核酸再組立または再編成では、開始部位の数およびランダムフラグメント の数(サイズではない)は、時間がたつと減少する。全プラスミドに由来するフラ グメントについて、理論上の終点は、単一の大きな鎖状分子である。 相同な領域で交差が生じるので、組換えは主に同じ配列ファミリーのメンバー 間で生じる。このことは、ひどく不適合性である(例えば、同じ抗原の異なるエ ピトープに対する)CDRの組み合わせを防止する。配列の多数のファミリーが同じ 反応において再編成され得ることが意図される。さらに、再編成は相対的順位を 保存するので、例えば、CDR1は、CDR2の位置では見出されない。 優れた再編成体は多数の最も良い(例えば、最も高いアフィニティーの)CDRを 含み、そしてこれらの優れた再編成体はそれらの優れたアフィニティーに基づい て選択され得る(図１)。 100個の異なる選択される抗体配列のプールに由来するCDRは、1006通りまで順 序変えされ得る。この多数の順序変えはDNA配列の単一ライブラリーでは表し得 ない。従って、DNA再編成および選択の多数のサイクルは、配列の長さおよび所 望の配列の多様性に依存して要求され得ることが意図される。 反対に、誤りがちなPCRは全ての選択されるCDRを同じ関連配列中に保ち(図１) 、よりずっと小さな変異曇りを生成する。 本発明の方法において使用され得る鋳型ポリヌクレオチドはDNAまたはRNAであ り得る。それは、組換えまたは再組立される遺伝子またはDNAフラグメントの大 きさに依存して種々の長さであり得る。好ましくは、鋳型ポリヌクレオチドは50 bp〜50kbである。目的のタンパク質をコードする核酸を含有する完全なベクター が、本発明の方法において使用され得ることが意図され、そして実際に首尾良く 使用されている。 鋳型ポリヌクレオチドは、PCR反応(米国特許第4,683,202号および第4,683,195 号)または他の増幅方法またはクローニング方法を使用する増幅により得られ得 る。しかし、フラグメント化する前にPCR産物から遊離プライマーを除去すると 、より効率的な結果が提供される。プライマーの十分な除去を損なうと、低頻度 の交差クローンを導き得る。 鋳型ポリヌクレオチドはしばしば、２本鎖であるべきである。２本鎖核酸分子 は、得られる１本鎖核酸フラグメントの領域が互いに相補的で、従って、ハイブ リダイズして２本鎖分子を形成し得ることを確実にすることが要求される。 鋳型ポリヌクレオチドに同一な領域および鋳型ポリヌクレオチドに非相同な領 域を有する１本鎖または２本鎖核酸フラグメントが、この工程で、鋳型ポリヌク レオチドに添加され得ることが意図される。２つの異なるが関連したポリヌクレ オチド鋳型がこの工程で混合され得ることもまた意図される。 ２本鎖ポリヌクレオチド鋳型および任意の添加される２本鎖フラグメントまた は１本鎖フラグメントは、約５bp〜5kb以上のフラグメントにランダムに消化さ れる。好ましくは、ランダムフラグメントの大きさは10bp〜1000bpであり、より 好ましくはDNAフラグメントの大きさは約20bp〜500bpである。 あるいは、多数のニックを有する２本鎖核酸は、本発明の方法において使用さ れ得る。ニックは２本鎖核酸の１本鎖における切れ目である。このようなニック 間の距離は好ましくは５bp〜５kbであり、より好ましくは10bp〜1000bpの間であ る。 核酸フラグメントは多数の異なる方法により消化され得る。核酸フラグメント はヌクレアーゼ(例えは、DNアーゼIまたはRNアーゼ)を用いて消化され得る。核 酸は、超音波処理方法によりまたは小穴を有するチューブの通過によりランダム に剪断され得る。 核酸が１つ以上の制限酵素を用いて部分的に消化され得、これにより特定の交 差点が統計的に保持され得ることもまた意図される。 任意の１つの特定核酸フラグメントの濃度は、全核酸の１重量%より大きいこ とはなく、より好ましくは、任意の１つの特定核酸フラグメントの濃度は、全核 酸の0.1重量%より大きいことはない。 混合物における異なる特定核酸フラグメントの数は少なくとも約100個であり 、好ましくは少なくとも500個であり、そしてより好ましくは少なくとも約1000 個である。 この工程で、１本鎖核酸フラグメントまたは２本鎖核酸フラグメントは、合成 または天然のいずれかで、核酸フラグメントの混合物の不均一性を増加するため に、ランダムな２本鎖核酸フラグメントに添加され得る。 ２本鎖のランダムに切断された核酸フラグメントの集団が、この工程で混合さ れ得、または組み合わされ得ることもまた意図される。 鋳型ポリヌクレオチドへの変異の挿入が所望される場合、鋳型ポリヌクレオチ ドに同一な領域および鋳型ポリヌクレオチドに非相同な領域を有する１本鎖核酸 フラグメントまたは２本鎖核酸ラグメントは、全核酸に比べて20重量倍過剰に、 より好ましくは１本鎖核酸フラグメントが全核酸に比べて10重量倍過剰に添加さ れ得る。 異なるが関連した鋳型ポリヌクレオチドの混合物が所望される場合、鋳型のそ れぞれに由来する核酸フラグメントの集団が約1:100より少ない比率で組み合わ され得、より好ましくは、比率は約1:40より小さい。例えば、野生型ポリヌクレ オチドと変異ポリヌクレオチドの集団との戻し交雑が、中立変異(例えば、選択 される表現型の特性において実質のない変化を生じる変異)を除去するために所 望され得る。このような例では、ランダム消化変異ポリヌクレオチドフラグメン トに添加され得るランダム消化野生型ポリヌクレオチドフラグメントの比率は約 １:１から約100:1であり、そしてより好ましくは１:１から40:1である。 ランダム核酸フラグメントの混合集団は、変性されて１本鎖核酸フラグメント を形成し、次いで再びアニールされる。他の１本鎖核酸フラグメントに相同な領 域を有するこれらの１本鎖核酸フラグメントのみが、再びアニールされる。 ランダム核酸フラグメントは熱を加えることにより変性される。当業者は完全 に２本鎖核酸を変性するために必要な条件を決定し得る。好ましくは、温度は80 ℃〜100℃であり、より好ましくは温度は90℃〜96℃である。核酸フラグメント を変性するために使用され得る他の方法は、圧力(36)およびpHを包含する。 核酸フラグメントは冷却することにより再びアニールされ得る。好ましくは、 温度は20℃〜75℃であり、より好ましくは温度は40℃〜65℃である。高頻度の交 差が、平均して単に４つの連続した相同な塩基に基づいて必要される場合、組換 えは低いアニール温度を使用することにより増強され得るが、プロセスはより困 難になる。生じる再生の程度は、１本鎖核酸フラグメントの集団間の相同性の程 度に依存する。 再生はポリエチレングリコール(「PEG」)または塩の添加により加速され得る。 塩濃度は好ましくは0mM〜200mMであり、より好ましくは塩濃度は10mM〜100mMで ある。塩はKClまたはNo.Clであり得る。PEGの濃度は好ましくは０%〜20%であり 得、より好ましくは５%〜10%であり得る。 次に、アニールされた核酸フラグメントは、核酸ポリメラーゼおよびdNTP(す なわち、dATP、dCTP、dGTP、およびdTTP)の存在下でインキュベートされる。核 酸ポリメラーゼは、Klenowフラグメント、Taqポリメラーゼ、または当該分野に おいて知られる任意の他のDNAポリメラーゼであり得る。 再組立に使用されるアプローチは、それでもなお交差が生じるような最少の程 度の相同性に依存する。同一である範囲が広い場合、Taqポリメラーゼが45℃〜6 5℃の間のアニール温度を用いて使用され得る。同一である範囲が小さな場合、K lenowポリメラーゼが、20℃〜30℃の間のアニール温度を用いて使用され得る。 当業者は達成される交差の数を増加するためにアニールの温度を変化させ得る。 ポリメラーゼはアニーリングの前、アニーリングと同時に、またはアニーリン グの後にランダム核酸フラグメントに添加され得る。 ポリメラーゼの存在下での変性、再生、およびインキュベーションのサイクル は、本明細書では、核酸の再編成または再組立という。このサイクルは所望の回 数反復される。好ましくは、サイクルは２回〜50回反復され、より好ましくは10 回〜40回反復される。 得られる核酸は、約50bp〜約100kbのより大きな２本鎖ポリヌクレオチドであ り、好ましくはより大きなポリヌクレオチドは500bp〜50kbである。 このより大きなポリヌクレオチドフラグメントは、鋳型ポリヌクレオチドと同 じ大きさを有する核酸フラグメントの多くのコピーを直列して含有し得る。次い で、この鎖状フラグメントは鋳型ポリヌクレオチドの単一コピーに消化される。 結果は鋳型ポリヌクレオチドとほぼ同じ大きさの核酸フラグメントの集団である 。同一な範囲および非相同な範囲を有する１本鎖核酸フラグメントまたは２本鎖 核酸フラグメントが、再編成の前に鋳型ポリヌクレオチドに添加される場合、集 団は混合集団である。 次いで、これらのフラグメントは適切なベクターにクローン化され、そして細 菌を形質転換するためにライゲーション混合液が使用される。 単一の核酸フラグメントは、鎖状フラグメントを消化するのではなく、種々の 方法(PCR(米国特許第4,683,195号および4,683,202号)を包含する)によりクロー ン化される前に単一の核酸フラグメントを増幅することにより、より大きな鎖状 核酸フラグメントから得られ得ることが意図される。 クローン化に使用されるベクターは、ベクターが所望の大きさのDNAフラグメ ントを受容するのであれば決定的なものではない。DNAフラグメントの発現が所 望される場合、クローン化媒体は、宿主細胞におけるDNAフラグメントの発現を 可能にするように、DNAフラグメントの挿入部位の隣に転写シグナルおよび翻訳 シグナルをさらに含有する。好ましいベクターは、プラスミドのpUC系列およびp BR系列を包含する。 得られる細菌集団は、ランダムな変異を有する多くの組換えDNAフラグメント を含む。この混合集団は、所望の組換え核酸フラグメントを同定するために試験 され得る。選択の方法は所望のDNAフラグメントに依存する。 例えば、リガンドへの結合効率が増加されたタンパク質をコードするDNAフラ グメントが所望される場合、集団またはライブラリーにおいてそれぞれのDNAフ ラグメントにより発現されるタンパク質は、当該分野において公知の方法(すな わち、パンニング、アフィニティークロマトグラフィー)により、リガンドに結 合するそれらの能力について試験され得る。増加した薬物耐性を有するタンパク 質をコードするDNAフラグメントが所望される場合、集団またはライブラリーに おいてそれぞれのDNAフラグメントにより発現されるタンパク質は、宿主生物に 薬物耐性を与えるそれらの能力について試験され得る。所望されるタンパク質の 知識を与えられた当業者であれば、タンパク質に所望の特性を与えるDNAフラグ メントを同定するために、集団を容易に試験し得る。 当業者が、タンパク質のフラグメントがファージ表面上で融合タンパク質とし て発現されるようなファージディスプレイシステム(Pharmacia，Milwaukee WI) を使用し得ることが意図される。組換えDNA分子は、融合タンパク質(その一部分 は組換えDNA分子によりコードされる)の転写を生じるような部位で、ファージDN Aへクローン化される。組換え核酸分子を含有するファージは、細胞内で複製お よび転写を行う。融合タンパク質のリーダー配列は、融合タンパク質の輸送をフ ァージ粒子の先端部へと導く。従って、組換えDNA分子により部分的にコードさ れる融合タンパク質は、上記の方法による検出および選択のために、ファージ粒 子上にディスプレイされる。 核酸再編成の多くのサイクルが、第１の集団のサブ集団からの核酸フラグメン トを用いて実施され得ることがさらに意図され、サブ集団は所望の組換えタンパ ク質をコードするDNAを含む。このようにして、さらに高い結合アフィニティー または酵素活性を有するタンパク質が達成され得る。 核酸再編成の多くのサイクルが、サブ集団から任意のサイレント変異を取り除 くために、野生型核酸フラグメントおよび一回目のまたはそれに続く核酸再編成 に由来する核酸のサブ集団の混合物を用いて実施され得る。 核酸の任意の供給源が、精製された形態で出発核酸として利用される。従って 、プロセスはDNAまたはRNA(メッセンジャーRNAを含む)を使用し得、DNAまたはRN Aは、１本鎖または２本鎖であり得る。さらに、それぞれの片鎖を含むDNA-RNAの ハイブリッドが使用され得る。核酸配列は、変異される核酸配列の大きさに依存 して種々の長さであり得る。好ましくは、特定核酸配列は50〜50000塩基対であ る。目的のタンパク質をコードする核酸を含有する完全なベクターが本発明の方 法において使用され得ることが意図される。 核酸は任意の供給源から得られ得、例えば、pBR322のようなプラスミドから、 クローン化されたDNAまたはRNAから、または任意の供給源(細菌、酵母、ウイル スおよび植物または動物のような高等生物を含む)に由来する天然のDNAまたはRN Aから得られ得る。DNAまたはRNAは、血液または組織物質から抽出され得る。鋳 型ポリヌクレオチドはポリメラーゼ連鎖反応(PCR)(米国特許第4,683,202号およ び4,683,195号)を使用する増幅により得られ得る。あるいは、ポリヌクレオチド は細胞に存在するベクターに存在し得、そして十分な核酸が、細胞を培養し、そ して細胞から当該分野で公知の方法により核酸を抽出することにより得られ得る 。 任意の特定核酸配列が、本プロセスにより変異の集団を生成するために使用さ れ得る。特定核酸配列の変異配列の小さな集団が存在することまたは本プロセス の前に作製されることのみが必要とされる。 変異を有する特定核酸配列の初めの小さな集団が、多くの異なる方法により作 製され得る。変異は誤りがちなPCRにより作製され得る。誤りがちなPCRは、長い 配列にわたり、ランダムに低レベルで点変異を誘導するために、低忠実度の重合 条件を使用する。あるいは、オリゴヌクレオチドに特異的に変異を誘発すること により、変異は鋳型ポリヌクレオチドに導入され得る。オリゴヌクレオチドに特 異的に変異を誘発するにおいて、ポリヌクレオチドの短い配列が、制限酵素消化 を使用してポリヌクレオチドから除去され、そして種々の塩基が元の配列から変 化された合成オリゴヌクレオチドで置き換えられる。ポリヌクレオチド配列はま た、化学変異誘発により変化させられ得る。化学変異誘発物質は、例えば、重亜 硫酸ナトリウム、亜硝酸、ヒドロキシルアミン、ヒドラジン、またはギ酸を包含 する。ヌクレオチド前駆体のアナログである他の薬剤は、ニトロソグアニジン、 5-ブロモウラシル、2-アミノプリン、またはアクリジンを包含する。一般的に、 これらの薬剤はヌクレオチド前駆体の代わりにPCR反応に添加され、それゆえ配 列を変異させる。プロフラビン、アクリフラビン、キナクリンなどのような挿入 剤もまた使用され得る。ポリヌクレオチド配列のランダム変異誘発は、Ｘ線また は紫外線光を用いる照射によっても達成され得る。一般に、そのように変異が誘 発されたプラスミドDNAフラグメントまたはDNAフラグメントは、E.coliへ導入さ れ、そして変異のプラスミドのプールまたはライブラリーとして増殖される。 あるいは、特定核酸の小さな混合集団は、天然において見出され得うる。なぜ ならそれらが同じ遺伝子の異なる対立遺伝子、または異なる関連種に由来する同 じ遺伝子(すなわち、同族遺伝子)からなり得るからである。あるいは、特定核酸 配列の小さな混合集団は、１つの種(例えば、免疫グロブリン遺伝子)内に見出さ れる関連DNA配列であり得る。 一旦、特定核酸配列の混合集団が生成されたら、ポリヌクレオチドは、当業者 に周知の技術を使用して直接使用され得るか、または適切なクローニングベクタ ーに挿入され得る。 ベクターの選択はポリヌクレオチド配列の大きさ、および本発明の方法におい て使用される宿主細胞に依存する。本発明の鋳型はプラスミド、ファージ、コス ミド、ファージミド、ウイルス(例えば、レトロウイルス、パラインフルエンザ ウイルス、ヘルペスウイルス、レオウイルス、パラミキソウイルスなど)、また はその選択部分(例えば、コートタンパク質、スパイク糖タンパク質、キャプシ ドタンパク質)であり得る。例えば、変異特定核酸配列がより大きい場合、コス ミドおよびファージミドが好ましい。なぜならこれらのベクターは大きな核酸フ ラグメントを安定に増殖し得るからである。 特定核酸配列の混合集団がベクターにクローン化される場合、それぞれのベク ターを宿主細胞に挿入し、そして宿主細胞にベクターを増殖させることにより、 特定核酸配列の混合集団はクローン的に(clonally)増幅され得る。このことはク ローン増幅(clonal amplification)と呼ばれる。なぜなら核酸配列の絶対数は増 加されるが、変異体の数は増加しないからである。有用性 本発明のDNA再編成方法は、未知の配列のプール上で盲目的に実施され得る。 再組立の混合オリゴヌクレオチド(再組立される配列に相同である末端を有する) を添加することにより、任意の配列混合物が任意の特定位置で別の配列混合物中 に取り込まれ得る。従って、合成オリゴヌクレオチド、PCRフラグメント、また は全遺伝子の混合物が、規定の位置で別の配列ライブラリーへ混合され得る。１ つの配列(混合物)の挿入は、鋳型の別の部分における配列の挿入から独立する。 従って、組換えの程度、要求される相同性の程度、およびライブラリーの多様性 の程度は、再組立されるDNAの長さに従って独立してまたは同時に変化され得る 。 ２つの遺伝子を混合するこのアプローチは、マウスハイブリドーマ由来の抗体 をヒト化するために有用であり得る。２つの遺伝子を混合するアプローチまたは 変異配列を遺伝子へ挿入するアプローチは、任意の治療学的に使用されるタンパ ク質(例えば、インターロイキンI、抗体、tPA、成長ホルモンなど)のために有用 であり得る。このアプローチは、任意の核酸(例えば、プロモーター、またはイ ントロン、または遺伝子の3'非翻訳領域または5'非翻訳領域)において、発現を 増加するためにまたはタンパク質の発現特異性を変えるためにもまた有用であり 得る。このアプローチはまた、リボザイムまたはアプタマー(aptamer)を変異す るためにもまた使用され得る。 再編成は、多様な領域を分離する相同な領域の存在を要求する。スカホールド 様タンパク質構造は、特に再編成に適し得る。保存されるスカホールドは、自己 会合により全体の折り畳みを決定するが、特異的結合を媒介する相対的に制限さ れないループをディスプレイする。このようなスカホールドの例は、免疫グロブ リンβバレル、および４ヘリックス束である(24)。この再編成は、結合について 変異配列の種々の組み合わせを有するスカホールド様タンパク質を作製するため に、使用され得る。 インビトロにおける再編成 同等のいくつかの標準的な遺伝子交配もまた、インビトロにおける再編成によ り実施され得る。例えば、「分子戻し交雑」は、目的の変異について選択しながら 、変異体の核酸と野生型核酸との混合を反復することにより実施され得る。従来 の育種におけるように、このアプローチは異なる供給源に由来する表現型を選択 されたバックグランドに組み合わせるために使用され得る。これは、例えば、選 択されない特徴(すなわち、免疫原性)に影響する中立変異を除去するために有用 である。従って、このアプローチは、タンパク質におけるどの変異が増強される 生物学的活性に関連するか関連しないかを決定するために有用であり得、誤りが ちな変異誘発方法またはカセット変異誘発方法により達成され得ない利点を決定 するために有用であり得る。 大きな機能的遺伝子は、小さなランダムフラグメントの混合物から正確に組立 され得る。この反応は、化石の高度にフラグメント化されたDNAから遺伝子を再 組立するために有用であり得る(25)。さらに、化石に由来するランダムな核酸フ ラグメントは、関連種に由来する類似遺伝子からの核酸フラグメントとともに組 み合わせられ得る。 本発明の方法は、種々の研究および診断的適用に必要とされるように、単一の 細胞から全ゲノムを、インビトロにおいて増幅するために使用され得る。PCRに よるDNA増幅は、実際、約40kbの長さに制限される。PCRによりE.coli(5,000kb) のような全ゲノムを増幅することは、125個の40kbのフラグメントを生じる約250 のプライマーを必要とする。このアプローチは、十分な配列データが利用できな いために実用的ではない。反対に、DNアーゼIを用いるゲノムのランダムな消化 、それに続く小フラグメントのゲル精製は、多数の可能なプライマーを提供する 。PCR反応においてこのランダム小フラグメントの混合物をプライマーとして単 独でまたは鋳型としての全ゲノムと共に使用すると、理論上、ゲノムの多くのコ ピーを含む単一の鎖状体を終点とする逆鎖反応が生じる。 ランダムフラグメントのみが使用される場合、コピー数において100倍の増幅 および50kbより大きい平均フラグメントサイズが得られ得る(実施例２を参照の こと)。より大きな鎖状体が、多くの小フラグメントの重複により生成されると 考えられる。合成プライマーを使用して得られる特定PCR産物の質は、増幅され ないDNAから得られる産物と区別されない。このアプローチはゲノムのマッピン グに有用であると期待される。 再編成されるポリヌクレオチドは、実施者の判断で、ランダムにまたは非ラン ダムにフラグメント化され得る。 インビボにおける再編成 インビボにおける再編成の１つの実施態様において、特定核酸配列の混合集団 は、各宿主細胞において、少なくとも２つの異なる核酸配列が存在する条件下で 、細菌細胞または真核細胞へ導入される。フラグメントは種々の異なる方法によ り、宿主細胞へ導入され得る。宿主細胞は、当業者に公知の方法(例えば、塩化 カルシウムを用いる処理)を使用してフラグメントで形質転換され得る。フラグ メントがファージゲノムに挿入される場合、宿主細胞は特定核酸配列を有する組 換えファージゲノムを用いてトランスフェクトされ得る。あるいは、核酸配列は 、エレクトロポレーション、トランスフェクション、リポフェクション、バイオ リス ティック(biolistic)、接合などを用いて宿主細胞へ導入され得る。 一般的に、この実施態様において、特定核酸配列は、宿主細胞において配列を 安定に複製し得るベクター中に存在する。さらに、ベクターを有する宿主細胞が 選択され得るように、ベクターがマーカー遺伝子をコードすることが意図される 。このことは、変異特定核酸配列が、宿主細胞へ導入された後に回収され得るこ とを確実にする。しかし、特定核酸配列の完全な混合集団がベクター配列上に存 在する必要がないことが意図される。むしろ、宿主細胞にフラグメントを導入し た後に、各宿主細胞が、少なくとも１つのそこに存在する特定核酸配列を有する １つのベクターを含有することを確実にするために、十分な数だけの配列がベク ターにクローン化される必要がある。特定核酸配列の集団のサブセットをベクタ ーへクローン化させるよりも、このサブセットは宿主細胞に、すでに安定に組み 込まれ得ることもまた、意図される。 同一の領域を有する２つのフラグメントが、宿主細胞へ挿入される場合、２つ のフラグメント間に相同組換えが生じることが見出された。２つの変異特定核酸 配列間のこのような組換えで、いくつかの状況において二重変異体または三重変 異体を生じる。 いくつかの変異特定核酸配列が、直鎖上の核酸分子上に存在する場合、組換え の頻度が増加されることもまた見出された。従って、好ましい実施態様では、い くつかの特定核酸配列が直鎖状核酸フラグメント上に存在する。 形質転換の後に、宿主細胞形質転換体は、所望の特質を有する変異特定核酸配 列を含有するこれらの宿主細胞形質転換体を同定するために選択下におかれる。 例えば、特定の薬物に対して増加される耐性が所望される場合、形質転換された 宿主細胞は、特定の増加した薬物濃度を受け得、そして増加する薬物耐性を与え 得る変異タンパク質を産生する形質転換体が、選択され得る。特定タンパク質が レセプターに結合する能力の増強が所望される場合、タンパク質の発現は形質転 換体から誘導され得、そして得られるタンパク質は当業者に公知の方法によるリ ガンド結合アッセイにおいてアッセイされ、リガンドに対して増強される結合を 示す変異集団のサブセットを同定する。あるいは、タンパク質は、適切なプロセ シングを確実にするように、別のシステムにおいて発現され得る。 一旦、所望される特徴を有する第１の組換え特定核酸配列(娘配列)のサブセッ トが同定されると、次いで、それらは２回目の組換えを受ける。 組換えの２回目のサイクルにおいて、組換え特定核酸配列は、元の変異特定核 酸配列(親配列)とともに混合され得、そして上記のようにサイクルが反復され得 る。この方法では、増強される特性を有するかまたは増強される特性を有するタ ンパク質をコードする第２の組換え特定核酸配列のセットが同定され得る。この サイクルは所望される多数回反復され得る。 第２のまたはそれに続く組換えサイクルにおいて、戻し交雑が実施され得るこ ともまた意図される。分子の戻し交雑は、所望の特定核酸配列を多数の野生型配 列と混合することにより実施され得、それにより少なくとも１つの野生型核酸配 列および変異核酸配列が、形質転換後に、同じ宿主細胞中に存在する。野生型特 定核酸配列を用いる組換えは、免疫原性のような選択されない特徴に影響し得る が、選択される特徴には影響し得ないそれらの中立変異を除去する。 本発明の別の実施態様において、一回目の間、宿主細胞へ導入する前に、特定 核酸配列のサブセットがフラグメント化され得ることが意図される。フラグメン トの大きさは、他の配列と相同組換えできるように、他の配列に同一ないくつか の領域を含むのに十分な大きさでなくてはならない。フラグメントの大きさは0. 03kb〜100kbの範囲であり、より好ましくは0.2kb〜10kbの範囲である。それに続 くラウンドにおいて、以前のラウンドから選択される配列以外の全ての特定核酸 配列は、宿主細胞へ導入する前に切断されてフラグメント化され得る。 配列のフラグメント化は、当該分野において公知の種々の方法により達成され 得る。配列は、核酸配列中、ランダムにフラグメント化され得るか、または特定 部位でフラグメント化され得る。ランダムフラグメントは核酸の切断により、ま たは核酸を過酷な物理的処理(例えば、剪断または放射線照射)または過酷な化学 剤(例えば、遊離ラジカル；金属イオン；脱プリン；および切断するための酸処 理による)に核酸を曝露することにより得られ得る。DNAの場合、DNアーゼまたは 同様のヌクレアーゼを使用することによってもまた、ランダムフラグメントが得 られ得る。配列は、制限酵素の使用により、特定部位で切断され得る。フラグメ ント化配列は、１本鎖または２本鎖であり得る。配列が、本来１本鎖である場合 、 宿主細胞に挿入する前に、それらは熱、化学物質、または酵素で変性され得る。 核酸の鎖を分離するために適切な反応条件は、当該分野において周知である。 このプロセスの工程は、限界なく反復され得、達成され得る可能な変異体の数 によってのみ、制限される。一定の数のサイクル後、全ての可能な変異体が達成 され、そしてさらなるサイクルは余分になる。 ある実施態様において、同じ変異鋳型核酸が繰り返し組換えされて、そして得 られる組換え体が所望の特徴について選択される。 それゆえ、変異鋳型核酸の初めのプールまたは集団は、E.coliのような細菌に おいて複製可能なベクターへクローン化される。E.coliにおいて自律複製し得る かぎり、特定のベクターは必須ではない。好ましい実施態様において、ベクター は、ベクターに連結される変異特定核酸によりコードされる任意のタンパク質の 発現および生成を可能にするように設計される。ベクターが選択可能なマーカー をコードする遺伝子を含有することもまた、好ましい。 変異核酸配列のプールを含有するベクターの集団は、E.coli宿主細胞へ導入さ れる。ベクターの核酸配列は形質転換、トランスフェクションまたはファージの 場合は感染により導入され得る。細菌に形質転換するために使用されるベクター の濃度は、多くのベクターが各細胞へ導入され得る程度である。一旦、細胞中に 存在すると、相同組換えの効率は、相同組換えが種々のベクター間で生じる程度 である。このことにより、元の親変異配列と異なる変異の組み合わせを有する変 異体(娘)を生成する。 次いで、宿主細胞はクローン的に複製され、ベクター上に存在するマーカー遺 伝子について選択される。プラスミドを有するこれらの細胞のみが、選択下で増 殖する。 次いで、ベクターを含む宿主細胞は、好ましい変異の存在について試験される 。このような試験は、例えば、選択される遺伝子が改良される薬物耐性遺伝子で ある場合、細胞を選択圧下におくことからなり得る。ベクターが変異核酸配列に よりコードされるタンパク質の発現を可能にする場合、このような選択はコード されるタンパク質の発現を可能にし、タンパク質を単離し、そして、例えば、増 加された効率で目的のリガンドに結合するかどうかを決定するためにタンパク質 を 試験することを包含し得る。 一旦、所望の特徴を与える特定の娘変異核酸配列が同定されると、核酸は、す でにベクターに連結されているかまたはベクターから分離されているかのいずれ かで単離される。次いで、この核酸は核酸の第一集団または親集団と混合され、 そしてサイクルが反復される。 本方法により増強された所望の特性を有する核酸配列が選択され得ることが示 される。 別の実施態様において、変異体の第一世代は細胞内に保持され、親変異配列が 再び細胞に添加される。従って、実施態様Iの第一サイクルは上記のように実施 される。しかし、娘核酸配列が同定された後、これらの配列を含む宿主細胞が保 持される。 親の変異特定核酸集団は、フラグメントとしてまたは同じベクターへクローン 化されるかのいずれかで、既に娘核酸を含む宿主細胞へ導入される。組換えを細 胞において生じさせ、次世代の組換え体、または子孫が上記の方法により選択さ れる。 このサイクルは、所望の特徴を有する核酸またはペプチドが得られるまで、多 数回反復され得る。続くサイクルにおいて、好ましい変異体に添加される変異配 列の集団が、親変異体または任意の次の世代から生じ得る。 別の実施態様において、本発明は、任意の中立変異を除去するために、得られ る組換え特定核酸の「分子」戻し交雑を実施する方法を提供する。中立変異は、核 酸またはペプチドに所望の特性を与えない変異である。しかし、このような変異 は核酸またはペプチドに所望でない特徴を与え得る。従って、このような中立変 異を除去することが望ましい。本発明の方法は、そのように行う手段を提供する 。 この実施態様において、所望の特徴を有する変異体核酸が実施態様の方法によ り得られた後、核酸、核酸を有するベクター、またはベクターおよび核酸を含有 する宿主細胞が単離される。 次いで、核酸またはベクターはかなり過剰な野生型核酸とともに宿主細胞へ導 入される。変異体の核酸および野生型配列の核酸を、組換えに供する。得られる 組換え体は、変異体核酸と同じ選択下に置かれる。所望の特徴を有するこれらの 組換え体のみが選択される。所望の特徴を与えない任意のサイレント変異は野生 型DNAとの組換えを介して失われる。このサイクルは、全てのサイレント変異が 除去されるまで、多数回反復され得る。 従って、本発明の方法は、分子戻し交雑において、不必要な変異またはサイレ ント変異を除去するために使用され得る。有用性 本発明のインビボにおける組換え方法は、未知の変異体のプールまたは特定核 酸フラグメントまたは配列の対立遺伝子上で盲目的に実施され得る。しかし、特 定核酸フラグメントの実際のDNAまたはRNA配列を知る必要はない。 遺伝子の混合集団内で組換えを使用するアプローチは、任意の有用なタンパク 質(例えば、インターロイキンI、抗体、tPA、成長ホルモンなど)を生成するため に有用であり得る。本アプローチは、変化された特異性または活性を有するタン パク質を生成するために使用され得る。本アプローチは変異体核酸配列(例えば 、プロモーター領域、イントロン、エキソン、エンハンサー配列、遺伝子の3'非 翻訳領域または5'非翻訳領域)を生成するために有用であり得る。従って、本ア プローチは増加された発現率を有する遺伝子を生成するために使用され得る。本 アプローチは、反復性DNA配列の研究においてもまた有用であり得る。最後に本 アプローチは、リボザイムまたはアプタマーを変異させるのに有用であり得る。 タンパク質における多様性の領域を分離するスカホールド様領域は、本発明の 方法に特に適切であり得る。保存されたスカホールドは、自己結合により全体の 折り畳みを決定するが、特異的結合を媒介する比較的制限されていないループを ディスプレイする。このようなスカホールドの例は、免疫グロブリンβバレル、 および４へリックス束である。本発明の方法は、結合について変異配列の種々の 組み合わせを有するスカホールド様タンパク質を作製するために使用され得る。 いくつかの標準的な遺伝交配の等価物がまた、本発明の方法により実施され得 る。例えば、「分子」戻し交雑は、目的の変異を選択しながら、変異体の核酸を野 生型の核酸と繰り返し混合することにより実施され得る。従来の育種におけるよ うに、本アプローチは異なる供給源に由来する表現型を選択されるバックグラン ドへ組み合わせるために使用され得る。本アプローチでは、例えば、選択されな い特徴(例えば、免疫原性)に影響する中立変異を除去するために有用である。従 って、本アプローチは、タンパク質のどの変異が増強された生物学的活性に関連 するか、そしてどの変異が関連しないかを決定するために有用であり得る。 ペプチドディスプレイ法 本方法は、開示された方法のいずれかによるインビトロおよび／またはインビ ボにおける組換えにより、および任意の組み合わせで、ペプチドディスプレイ法 により選択されるポリヌクレオチド配列を再編成するために使用され得、ここで は会合されたポリヌクレオチドは、表現型(例えば、予め決定されたレセプター( リガンド)に対するアフィニティーについて)についてスクリーニングされるディ スプレイされたペプチドをコードする。 生物薬剤の開発および分子生物学の増々重要な局面は、生体高分子と相互作用 するペプチドまたはペプチド疑似体のペプチド構造(アミノ酸一次配列を包含す る)の同定である。所望の構造または所望の機能的特性(例えば、予め決定された 生体高分子(例えば、レセプター)に対する結合)を有するペプチドを同定する１ つの方法は、ペプチドのアミノ酸配列により与えられる所望の構造または所望の 機能的特性を有する個々のライブラリーメンバーについて、大規模なライブラリ ーまたはペプチドをスクリーニングすることを包含する。 ペプチドライブラリーを生成する直接化学合成方法に加えて、いくつかのDNA 組換え方法もまた報告されている。１つの型は、バクテリオファージ粒子または 細胞表面上のペプチド配列、抗体、または他のタンパク質のディスプレイを包含 する。一般に、これらの方法において、それぞれのバクテリオファージ粒子また は細胞は、天然のバクテリオファージまたは細胞のタンパク質配列に加えて、デ ィスプレイされたペプチドの単一種をディスプレイする個々のライブラリーメン バーとして供せられる。各バクテリオファージまたは細胞は、特定のディスプレ イされたペプチドの配列をコードする核酸配列情報を含有し；従って、ディスプ レイされたペプチド配列は、単離されたライブラリーメンバーのヌクレオチド配 列決定により確かめられ得る。 周知のペプチドディスプレイ方法は、繊維状バクテリオファージの表面上のペ プチド配列(代表的には、バクテリオファージコートタンパク質との融合物とし て)の提示を包含する。バクテリオファージライブラリーは固定化した予め決定 された高分子または小分子(例えば、レセプター)とともにインキュベートされ得 、それにより固定化高分子に結合するペプチド配列を提示するバクテリオファー ジ粒子が、予め決定された高分子に結合するペプチド配列を提示しないバクテリ オファージ粒子と差別的に区分され得る。次いで、固定化高分子に結合するバク テリオファージ粒子(すなわち、ライブラリーメンバー)は回収され、そして次の アフィニティー増強およびファージ複製ラウンドのため、複製されて、選択され るバクテリオファージサブ集団を増幅する。数ラウンドのアフィニティー増強お よびファージ複製の後、このように選択されたバクテリオファージライブラリー メンバーは単離され、そしてディスプレイされたペプチド配列をコードするヌク レオチド配列が決定され、これにより予め決定された高分子(例えば、レセプタ ー)に結合するペプチドの配列(１つまたは複数)を同定する。このような方法はP CT特許公開第91/17271号、同91/18980号、および同91/19818号ならびに93/08278 号においてさらに記載されている。 後者のPCT公開は、ペプチドリガンドのディスプレイのための組換えDNA方法が 、第１のポリペプチド部分(代表的には可変配列を含み、予め決定された高分子 への潜在的な結合に利用可能である)、および第２のポリペプチド部分(個々の融 合タンパク質をコードするDNAベクターのようなDNAに結合する)で構成される融 合タンパク質をそれぞれ有する融合タンパク質のライブラリーの生成を包含する ことを記載している。形質転換された宿主細胞が融合タンパク質の発現を可能に する条件下で培養される場合、融合タンパク質はそれをコードするDNAベクター に結合する。宿主細胞の溶解の際に、融合タンパク質／ベクターDNA複合体は、 バクテリオファージ粒子がファージに基づくディスプレイシステムにおいてスク リーニングされるのとほぼ同様にして、予め決定された高分子に対してスクリー ニングされ得、選択された融合タンパク質／ベクターDNA複合体におけるDNAベク ターの複製および配列決定が、選択されるライブラリーペプチド配列(１つまた は複数)の同定のための基礎として供せられる。 ペプチドおよび同様のポリマーのライブラリーを生成する他のシステムは、組 換え方法およびインビトロにおける化学合成方法の両方の局面を有する。これら のハイブリッド方法において、無細胞酵素機構がライブラリーメンバー(すなわ ち、ペプチドまたはポリヌクレオチド)のインビトロにおける合成を達成するた めに使用される。１つの型の方法において、予め決定されたタンパク質または予 め決定された色素分子を結合する能力を有するRNA分子が、選択およびPCR増幅を 交互に行うことにより選択された(TuerkおよびGold（1990）Science 249:505；E llingtonおよびSzostak（1990）Nature 346:818)。同様の技術が、予め決定され たヒト転写因子を結合するDNA配列を同定するために使用された(ThiesenおよびB ach（1990）Nucleic Acids Res. 18:3203；BeaudryおよびJoyce（1992）Science 257;635；PCT特許公開第92/05258号および第92/14843号)。同様の様式において 、インビトロにおける翻訳の技術が目的のタンパク質を合成するために使用され 、そしてペプチドの大規模なライブラリーを生成する方法として提案されてきた 。一般に安定化されたポリソーム複合体を含有するインビトロにおける翻訳に依 存するこれらの方法は、PCT特許出願第88/08453号、第90/05785号、第90/07003 号、第91/02076号、91/05058号、および92/02536号にさらに記載されている。出 願人らは、ライブラリーメンバーが、DNA結合活性を有する第１のポリペプチド 部分、およびライブラリーメンバーの独特のペプチド配列を有する第２のポリペ プチド部分を有する融合タンパク質を含む方法を記載し；このような方法は、無 細胞インビトロ選択形式における使用に、特に適切である。 ディスプレイされたペプチド配列は、代表的には３〜5000アミノ酸以上、頻繁 には５〜100アミノ酸、そしてしばしば約８〜15アミノ酸の種々の長さであり得 る。ライブラリーは、ディスプレイされたペプチド配列の種々の長さを有するラ イブラリーメンバーを含有し得るか、またはディスプレイされたペプチド配列の 固定した長さを有するライブラリーメンバーを含有し得る。ディスプレイされた ペプチド配列(１つまたは複数)の１部分または全ては、ランダムな配列、疑似ラ ンダムな配列、規定の核セットの配列、固定した配列などであり得る。本ディス プレイ方法は、ポリソーム上の新生scFvまたはファージ上に表示されたscFvのよ うな単鎖抗体のインビトロおよびインビボにおけるディスプレイの方法を包含し 、 広い多様性の可変領域配列および結合特異性を有するscFvライブラリーを、大規 模なスケールでスクリーニングし得る。 本発明はまた、ランダムな配列、疑似ランダムな配列、および規定の配列のフ レームワークペプチドライブラリーを提供し、および目的のレセプター分子また はエピトープ、またはペプチドを改変する遺伝子産物、またはRNAに所望の様式 で結合する有用な化合物(例えば、ペプチド、単鎖抗体を含む)を同定するために 、それらのライブラリーを生成し、スクリーニングする方法を提供する。ランダ ムな配列、疑似ランダムな配列、および規定の配列のフレームワークペプチドは 、ディスプレイされたペプチド、またはディスプレイされたペプチドが合成され たポリヌクレオチドの鋳型に付着するディスプレイされた単鎖抗体を含むペプチ ドライブラリーメンバーのライブラリーから生成される。付着の様式は、選択さ れた本発明の特定の実施態様に従って変化し得、そしてファージ粒子におけるキ ャプシドの包みこみ、または細胞における取り込みを包含し得る。 アフィニティー増強方法は、ペプチドおよび単鎖抗体のかなり大規模なライブ ラリーがスクリーニングされ、そして所望のペプチド(１つまたは複数)または単 鎖抗体をコードするポリヌクレオチド配列が選択されることを可能にする。次い で、ポリヌクレオチドは単離および再編成され得、選択されるペプチド(１つま たは複数)の(またはその予め決定された部分)または単鎖抗体(または、ちょうど そのVH、VL、またはCDR部分)のアミノ酸配列を組み合わせて組換えする。これら の方法を使用して、ペプチドまたは単鎖抗体を分子について所望の結合アフィニ ティーを有するとして同定し得、そして所望の高アフィニティーペプチドまたは scFvに迅速に集めるために再編成のプロセスを活用し得る。次いで、ペプチドま たは抗体は、任意の適切な使用(例えば、治療剤または診断剤として)のために、 従来の手段により大量に合成され得る。 本発明の著しい利点は、予想されるリガンド構造に関する以前の情報が目的の ペプチドリガンドまたは抗体を単離するために全く要求されないことである。同 定されたペプチドは、生物学的活性を有し得、このことは選択されるレセプター 分子に対する特異的な結合アフィニティーを少なくとも含むことが意味され、そ して、いくつかの例において、他の化合物の結合をブロックし、代謝経路を刺激 または阻害し、シグナルまたはメッセンジャーとして作用し、細胞活性を刺激ま たは阻害するなどの能力をさらに包含する。 本発明はまた、予め決定されたレセプター(例えば、哺乳動物タンパク質性レ セプター(例えば、ペプチド性ホルモンレセプター、細胞表面レセプター、他の タンパク質(１つまたは複数)に結合してヘテロダイマーのような細胞内タンパク 質複合体を形成する細胞内タンパク質など)、またはエピトープ(例えば、固定化 タンパク質、糖タンパク質、オリゴ糖など)に結合するライブラリーメンバーに ついて、新生ペプチド(単鎖抗体を包含する)をディスプレイするポリソームのラ イブラリーをアフィニティースクリーニングすることにより選択されるポリヌク レオチド配列のプールを再編成する方法もまた提供する。 これらの方法のいずれかにより、第１の選択ラウンド(代表的には、レセプタ ー(例えば、リガンド)に対する結合についてのアフィニティー選択による)にお いて選択されるポリヌクレオチド配列は、プールされ、そしてプール(単数また は複数)はインビトロおよび／またはインビボにおける組換えにより再編成され 、組換えられた選択ポリヌクレオチド配列の集団を含む再編成プールを生成する 。組換えられた選択ポリヌクレオチド配列は、少なくとも１回の続く選択ラウン ドにかけられる。続く選択ラウンド(１回または複数回)において選択されたポリ ヌクレオチド配列は、直接用いられ得、配列決定され得、そして／または、１回 以上のさらなるラウンドの再編成およびそれに続く選択にかけられ得る。選択さ れた配列は、中立配列(すなわち、結合において非実質的な機能的効果を有する) をコードするポリヌクレオチド配列と戻し交雑され(例えば、選択される配列に 実質的に同一な野生型または天然に存在する配列と戻し交雑することによる)、 免疫原性の低い天然様の機能的ペプチドを生成し得る。一般に、戻し交配の間、 続く選択は、予め決定されたレセプター(リガンド)への結合の特性を保有するよ うに適用される。 選択配列の再編成の前または同時に、配列が変異誘発され得る。１つの実施態 様において、選択されるライブラリーメンバーは、原核生物ベクター(例えば、 プラスミド、ファージミド、またはバクテリオファージ)中にクローン化され、 ここでは、別個のライブラリーメンバーを提示する個々のコロニー(またはプラ ーク)の集合が生成される。次いで、選択される個々のライブラリーメンバーは 操作され(例えば、部位特異的変異誘発、カセット変異誘発、化学変異誘発、PCR 変異誘発など)、選択されるライブラリーメンバーの配列に基づいて配列の多様 性のカーネル(kernal)を提示するライブラリーメンバーの集合を生成し得る。選 択される個々のライブラリーメンバーまたはプールの配列は操作され、ランダム 変異、疑似ランダムな変異、規定のカーネル変異(すなわち、可変残基位置およ び不変残基位置を含み、そして／またはアミノ酸残基の規定のサブセットから選 択される残基を含み得る可変残基位置を含む)、コドンに基づく変異などを、選 択される個々のライブラリーメンバー配列にセグメント的にまたは全長にわたっ てのいずれかで、組み込み得る。変異誘発された選択ライブラリーメンバーは、 次いで、本明細書で記載されるインビトロおよび／またはインビボにおける組換 え再編成により、再編成される。 本発明はまた、本発明の複数の個々のライブラリーメンバーを含むペプチドラ イブラリーを提供し、ここでは(１)上記複数のうち各個々のライブラリーメンバ ーが、選択される配列のプールの再編成により生成される配列を含有し、そして (２)各個々のライブラリーメンバーは、可変ペプチドセグメント配列または単鎖 抗体セグメント配列(これは、上記複数における他の個々のライブラリーメンバ ーの可変ペプチドセグメント配列または単鎖抗体配列から区別される)を含有す る(しかし、いくつかのライブラリーメンバーは、不均一な増幅、推計学的確率 などのために、ライブラリー当たり１コピー以上で存在し得る)。 本発明はまた、その方法によって作られるもの(product-by-prosess)を提供す る。ここでは、予め決定された結合特異性を有する(または予め決定された結合 特異性を有するペプチドをコードする)選択されたポリヌクレオチド配列が、以 下の工程により形成される：(1)ディスプレイペプチドまたはディスプレイ単鎖 抗体のライブラリーを予め決定されたレセプター(例えば、リガンド)またはエピ トープ(例えば、抗原高分子)に対してスクリーニングし、そして予め決定された レセプターまたはエピトープに結合するライブラリーメンバーを同定および／ま たは濃縮し、選択されたライブラリーメンバーのプールを生成する工程、(２)予 め決定されたエピトープを結合して、そしてそれによりライブラリーから単離お よび／または濃縮されて再編成ライブラリーを生成する選択されたライブラリー メンバー(または増幅またはクローン化されたそのコピー)を、組換えにより再編 成する工程、および(３)再編成ライブラリーを予め決定されたレセプター(例え ば、リガンド)またはエピトープ(例えば、抗原高分子)に対してスクリーニング し、そして予め決定されたレセプターまたはエピトープに結合する再編成ライブ ラリーメンバーを同定および／または濃縮し、選択された再編成ライブラリーメ ンバーのプールを生成する工程。 抗体ディスプレイおよびスクリーニング法 本発明の方法は、開示された方法のいずれかによるインビトロおよび/または インビボ組換えおよび任意の組み合わせにより、抗体ディスプレイ法により選択 されたポリヌクレオチド配列を再編成するために用いられ得る。ここで会合され たポリヌクレオチドは、表現型（例えば、予め決定された抗原（リガンド）への 結合についてのアフィニティー）についてスクリーニングされたディスプレイさ れた抗体をコードする。 種々の分子遺伝学的アプローチが、免疫グロブリン鎖中に存在し得る非常に多 数の異なる可変領域により表される広大な免疫学的レパートリーを捕獲するため に考案されている。天然に存在する生殖系列免疫グロブリンＨ鎖座位は、多様性 （D）セグメント遺伝子の直列の配列の上流に位置する可変性（V）セグメント遺 伝子の分離した直列の配列からなる。このDセグメント自身は、結合（J）領域遺 伝子の直列の配列の上流に位置し、J領域は、定常（CH）領域遺伝子の上流に位 置する。Bリンパ球の発達の間、V-D-J再配列が生じ、ここでＨ鎖可変領域遺伝子 （VH）は、融合したD-Jセグメントを形成するための再配列、それに続くV-D-J結 合産物遺伝子を形成するためのVセグメントとの再配列により形成され、生産的 に再配列される場合、このV-D-J結合産物遺伝子は、機能的なＨ鎖の可変領域（VH ）をコードする。同様に、Ｌ鎖座位は、いくつかのJセグメントの１つといくつ かのVセグメントの１つを再配列し、Ｌ鎖の可変領域（VL）をコードする遺伝子 を形成する。 免疫グロブリン中にあり得る可変領域の広範なレパートリーは、Ｂ細胞発達に おける再配列の間のVセグメントとJセグメント（とDセグメント(Ｈ鎖座位である 場合)）との結合の多数の組み合わせの可能性に部分的に由来する。Ｈ鎖可変領 域における付加的な配列多様性は、V-D-J結合の間のDセグメントの不均一な再配 列、およびN領域付加から生じる。さらに、特定のＢ細胞クローンの抗原選択は 、Ｈ鎖とＬ鎖の可変領域のいずれか１つまたは両方に非生殖系列変異を有する変 異体をより高いアフィニティーに関して選択する；この現象は、「アフィニティ ー成熟」または「アフィニティー鋭敏化（sharpening）」と呼ばれる。代表的に は、これらの「アフィニティー鋭敏化」変異は、可変領域の特定の範囲に、最も 一般的には相補性決定領域（CDR）中にクラスター形成する。 抗原刺激化Ｂ細胞の発達（すなわち、免疫化）を通して高アフィニティー免疫 グロブリンを産生および同定することにおける多くの制限を克服するために、特 異的な抗原に対する高アフィニティー抗体についてスクリーニングされ得る組み 合わせの抗体ライブラリーを作製するように操作され得る種々の原核生物の発現 システムが開発されている。Escherichia coliおよびバクテリオファージシステ ムにおける抗体の発現における最近の利点（以下の「別のペプチドディスプレイ 法」を参照のこと）は、実際に任意の特異性が、特徴づけられたハイブリドーマ から抗体遺伝子をクローニングするか、または抗体遺伝子ライブラリー（例えば 、Ig cDNAから）を用いる新規選択のいずれかにより得られ得るという可能性を 増加している。 抗体の組み合わせのライブラリーは、バクテリオファージプラークまたは溶原 菌のコロニーとしてスクリーニングされ得るバクテリオファージλ発現システム において生成されている（Huseら、(1989)Science 246: 1275; CatonおよびKopr owski（1990）Proc.Natl.Acad.Sci ．(U.S.A.) 87: 6450; Mullinaxら、(1990)Pr oc.Natl.Acad.Sci．(U.S.A.)87: 8095; Perssonら、(1991)Proc.Natl.Acad.Sci ．(U.S.A.) 88:2432）。バクテリオファージ抗体ディスプレイライブラリーおよ びλファージ発現ライブラリーの種々の実施様態が、記載されている（Kangら、 (1991)Proc.Natl.Acad.Sci ．(U.S.A.) 88: 4363；Clacksonら、(1991)Nature 35 2 : 624；McCaffertyら、(1990)Nature 348: 552；Burtonら、(1991)Proc.Natl.A cad.Sci ．(U.S.A.) 88: 10134；Hoogenboomら、(1991)Nucleic Acids Res. 19: 4133；Changら、(1991)J.Immunol. 147: 3610；Breitlingら、(1991) Gene 104: 147；Marksら、(1991)J.Mol.Biol. 222: 581；Barbasら、(1992)Proc .Natl.Acad.Sci ．(U.S.A.) 89: 4457；HawkinsおよびWinter（1992）J.Immunol. 22: 867; Marksら、(1992)Biotechnology 10: 779；Marksら、(1992)J.Biol.Ch em. 267: 16007; Lowmanら、(1991)Biochemistry 30: 10832；Lernerら、(1992)Science 258: 1313は、参考として本明細書中に援用される）。代表的には、バ クテリオファージ抗体ディスプレイライブラリーは、固定化（例えば、アフィニ ティークロマトグラフィーにより反応性ファージについて富化するためのクロマ トグラフィー樹脂への共有結合による）および/または標識（例えば、プラーク またはコロニーリフトをスクリーニングするために）されているレセプター（例 えば、ポリペプチド、炭水化物、糖タンパク質、核酸）でスクリーニングされる 。 １つの特に有利なアプローチは、いわゆる単鎖フラグメント可変（scFv）ライ ブラリーの使用である（Marksら、(1992)Biotechnology 10: 779； Winter Gお よびMilstein C（1991）Nature 349:293；Clacksonら、(1991)前出；Marksら、( 1991)J.Mol.Biol. 222: 581；Chaudharyら、(1990)Proc.Natl.Acad.Sci ．(USA) 87 : 1066；Chiswellら、(1992)TIBTECH 10: 80；McCaffertyら、(1990)前出；お よびHustonら、(1988)Proc.Natl.Acad.Sci ．(USA) 85: 5879）。バクテリオファ ージコートタンパク質においてディスプレイされるscFvライブラリーの種々の実 施様態が記載されている。 1988年のはじめ、Fvフラグメントの単鎖アナログおよびそれらの融合タンパク 質が、抗体工学法により確実に生成されている。第１の工程は、一般に、所望の 結合特性を有するVHおよびVLドメインをコードする遺伝子を得ることを包含する ；これらのV遺伝子は、特定のハイブリドーマ細胞株から単離され得るか、組み 合わせのV遺伝子ライブラリーから選択され得るか、またはV遺伝子合成により作 製され得る。単鎖Fvは、成分V遺伝子と適切に設計されたリンカーペプチド（例 えば、(Gly-Gly-Gly-Gly-Ser)3または等価のリンカーペプチド(１つまたは複数) ）をコードするオリゴヌクレオチドとを結合することにより形成される。リンカ ーは、VH-リンカー-VLまたはVL-リンカー-VHのいずれかの順序で第１のV領 域のC-末端、および第２のV領域のN-末端に橋を架ける。原則として、scFv結合 部位は、その親の抗体結合部位のアフィニティーおよび特異性の両方を正確に複 製し得る。 従って、scFvフラグメントは、柔軟なリンカーペプチドにより単一のポリペプ チド鎖に連結されたVHおよびVLドメインからなる。scFv遺伝子が組立てられた後 、それらは、ファージミド中にクローン化され、そしてバクテリオファージpIII （遺伝子３）コートタンパク質との融合タンパク質としてM13ファージ（または 類似の繊維状バクテリオファージ）の先端部で発現される。目的の抗体を発現す るファージの富化は、予め決定されたエピトープ（例えば、標的抗原、レセプタ ー）への結合についてscFv集団をディスプレイする組換えファージをパンニング することにより達成される。 ライブラリーメンバーの連結ポリヌクレオチドは、スクリーニング手順または 選択手順後のライブラリーメンバーの複製に関する基礎を提供し、そしてヌクレ オチド配列決定による、ディスプレイされたペプチド配列またはVHおよびVLアミ ノ酸配列の正体の決定のための基礎をも提供する。ディスプレイされたペプチド （１つまたは複数）または単鎖抗体（例えば、scFv）および／またはそのVHおよ びVLドメインあるいはそれらのCDRは、適切な発現システムにクローン化され得 、そして発現され得る。しばしば、単離されたVHおよびVLドメインをコードする ポリヌクレオチドは、定常領域（CHおよびCL）をコードするポリヌクレオチドに 連結され、完全な抗体（例えば、キメラ、または完全なヒトの抗体）、抗体フラ グメントなどをコードするポリヌクレオチドを形成する。しばしば、単離された CDRをコードするポリヌクレオチドは、適切な可変領域フレームワーク（および 随意に定常領域）をコードするポリヌクレオチドに融合され、完全な抗体（例え ば、ヒト化または完全なヒト抗体）、抗体フラグメントなどをコードするポリヌ クレオチドを形成する。抗体は、免疫アフィニティークロマトグラフィーにより 、調製量の抗原を単離するために用いられ得る。このような抗体の種々の他の使 用は、疾患（例えば、腫瘍形成）を診断／または段階づけすること、および治療 応用のために、疾患（例えば：腫瘍形成、自己免疫疾患、AIDS、心血管性疾患、 感染症など）を処置することである。 種々の方法が、scFvライブラリーの組み合わせの多様性の増加が、結合種のレ パートリー（イディオタイプスペクトル）を広げることについて報告されている 。PCRの使用は、可変領域を、特定のハイブリドーマ供給源からか、または非免 疫化細胞から遺伝子ライブラリーとして、迅速にクローン化することを可能にし 、これは組み合わされ得るVHおよびVLカセットの分類における組み合わせの多様 性を供給する。さらに、VHおよびVLカセットは、例えば、ランダムな変異誘発、 疑似ランダムな変異誘発、または定方向変異誘発（directed mutagenesis）によ り、それ自身多様化させられ得る。代表的には、VHおよびVLカセットは、相補性 決定領域（CDR）（しばしば第３のCDR、CDR3）内またはその近くにおいて多様化 される。酵素的インバースPCR変異誘発は、誤りがちなPCRおよび化学的変異誘発 がそうであるように（Dengら、(1994)J.Biol.Chem. 269:9533）、scFv部位特異 的変異体の比較的大きなライブラリーを構築することに関して単純かつ信頼し得 る方法であることが示されている（Stemmerら、(1993)Biotechniques 14: 256） 。Riechmannら、(1993)Biochemistry 32: 8848は、縮重オリゴヌクレオチドPCR および引き続いて結果として生じるscFv変異体のファージディスプレイによる部 位特異的ランダム化を用いる抗体scFvフラグメントの半合理的な設計を示した。 Barbasら、(1992)前出は、ヒト破傷風トキソイド結合Fabの合成CDR領域における 配列をランダム化することにより、偏った可変領域配列を用いることに起因する 制限されたレパートリーサイズの問題を回避することを試みた。 CDRランダム化は、Ｈ鎖CDR3のみについて約1×1020CDR、そしておおよそ類似 した数のH鎖CDR1およびCDR2の変異体、ならびにＬ鎖CDR1-3変異体を作製する潜 在力を有する。個々にまたは一緒に考慮すると、Ｈ鎖および／またはＬ鎖のCDR ランダム化の組み合わせは、全ての可能な組み合わせを提示するクローンライブ ラリーを作製するために、膨大な数のバクテリオファージクローン（それらのほ とんどは、非結合性である）の生成を必要とする。このような多数の初期形質転 換体の生成は、現在の形質転換技術およびバクテリオファージディスプレイシス テムでは、容易ではない。例えば、Barbasら、(1992)前出は、5×107の形質転換 体のみを生成し、これは、完全にランダム化されたCDRのライブラリーのごく小 さな割合の潜在的多様性のみを提示する。 これらの実質的な制限にも関わらず、scFvのバクテリオファージディスプレイ はすでに、種々の有用な抗体および抗体融合タンパク質を産生している。二特異 性の単鎖抗体は、効率的な腫瘍細胞溶解を仲介することが示されている（Gruber ら、(1994)J.Immunol. 152: 5368）。抗Rev scFvの細胞内発現は、インビトロで のHIV-1ウイルス複製を阻害することが示されており（Duanら、(1994)Proc.Natl .Acad.Sci ．(USA) 91: 5075）、そして抗p21ras scFvの細胞内発現は、Xenopus 卵母細胞の減数分裂の成熟を阻害することが示されている（Bioccaら、(1993)Bi ochem ．Biophys.Res.Commun. 197:422）。HIV感染を診断するために用いら得る 組換えscFvもまた、報告されており、scFvの診断上の利用性が示されている（Li lleyら、(1994)J.Immunol.Meth. 171;211）。scFvが第２のポリペプチド（例え ば、毒素または線維素溶解性活性化タンパク質）に連結している融合タンパク質 もまた報告されている（Holvostら、(1992)Eur.J.Biochem. 210: 945; Nicholls ら、(1993)J.Biol.Chem. 268: 5302）。 広範な抗体多様性を有し、そして潜在的な配列組み合わせの非常に小さい割合 のみをカバーし得る多くの従来のCDR変異誘発およびランダム化法の制限の多く を克服するscFvライブラリーを生成し得るならば、scFv抗体の数および質を治療 上および診断上の使用に適切に大幅に改善してもよい。これに取り組むために、 本発明のインビトロおよびインビボ再編成法が、選択されたディスプレイされた 抗体から得られた核酸から（代表的にPCR増幅またはクローン化により）得られ たCDRを組み換えるために用いられる。このようなディスプレイされた抗体は、 細胞、バクテリオファージ粒子、ポリソーム、または任意の適切な抗体ディスプ レイシステムにおいて、ディスプレイされ得る。ここで抗体が、それをコードす る核酸（１つまたは複数）と会合されている。ある改変例においては、CDRは最 初に、抗体産生細胞（例えば、第WO92/03918号、第WO93/12227号、および第WO94 /25585号に記載のように、免疫化した野生型マウス、ヒト、またはヒト抗体を作 製し得るトランスジェニックマウス由来の形質細胞／脾細胞）（これはそれに由 来するハイブリドーマを包含する）由来のmRNA（またはcDNA）から得られる。 これらの方法のいずれかにより第１の選択ラウンドにおいて選択された（代表 的には、ディスプレイされた抗体が抗原（例えば、リガンド）に結合することに 関するアフィニティー選択による）ポリヌクレオチド配列は、プールされ、そし てこのプール（１つまたは複数）は、インビトロおよび／またはインビボ組換え 、特にCDRの再編成により再編成され（代表的には、Ｈ鎖CDRが他のＨ鎖CDRで再 編成され、そしてＬ鎖CDRが他のＬ鎖CDRで再編成される）、組み換えられた選択 ポリヌクレオチド配列の集団を含有する再編成されたプールを作製する。組み換 えられた選択ポリヌクレオチド配列は、ディスプレイされた抗体のような選択様 式において発現され、そして少なくとも１回の引き続く選択ラウンドにかけられ る。引き続く選択ラウンド（１回または複数回）において選択されたポリヌクレ オチド配列は、直接使用され得、配列決定され得、そして／または所望の結合ア フィニティーを有する抗体が得られるまで１回またはそれ以上の更なる再編成お よび引き続く選択のラウンドにかけられ得る。選択された配列はまた、中立の抗 体フレームワーク配列をコードするポリヌクレオチド配列（すなわち、抗原結合 において非実質的な機能的効果を有する）と戻し交雑され（例えば、ヒト可変領 域フレームワークとの戻し交雑による）、ヒト様配列抗体を作製し得る。一般に 、戻し交雑の間、引き続く選択は、予め決定された抗原への結合の特性を保有す るように適用される。 あるいは、または公知の改変例との組み合わせにおいて、標的エピトープの結 合価は、選択されたscFvライブラリーメンバーの平均結合アフィニティーを調節 するように、改変され得る。標的エピトープは、例えば、競合エピトープを含有 すること、希釈、または当業者に公知の他の方法により、種々の密度で表面また は基質に結合され得る。予め決定されたエピトープの高密度（結合価）は、比較 的低いアフィニティーを有するscFvライブラリーメンバーについて富化するため に用いられ得る。一方、低密度（結合価）は、より高いアフィニティーについて scFvライブラリーメンバーを優先的に富化し得る。 多種多様な可変セグメントを生成するために、ペプチド配列のランダム、疑似 ランダム、または規定の配列のカーネルセットをコードする合成オリゴヌクレオ チドの集合は、予め決定された部位（例えば、CDR）への連結により挿入され得 る。同様に、単鎖抗体カセット（１つまたは複数）の１つまたはそれ以上のCDR の配列多様性は、部位特異的変異誘発、CDR置換などを用いてCDR（１つまたは複 数）を変異させることにより拡大され得る。生じるDNA分子は、再編成の前のク ローン化および増幅のために宿主において増殖され得るか、または直接使用され 得（すなわち、宿主細胞における増殖の際に生じ得る多様性の損失を回避し得る ）、そして選択されたライブラリーメンバーは、引き続いて再編成される。 目的の可変セグメントペプチド配列または目的の単鎖抗体をコードするディス プレイされたペプチド／ポリヌクレオチド複合体（ライブラリーメンバー）は、 アフィニティー富化技術により、ライブラリーから選択される。これは、目的の ペプチド配列に特異的な固定化された高分子またはエピトープ（例えは、レセプ ター、他の高分子、または他のエピトープ種）により達成される。アフィニティ ー選択手順を繰り返すことにより、所望の配列をコードするライブラリーメンバ ーの富化物が提供され、次いでこの富化物は、プールおよび再編成、配列決定、 および／または更なる増殖およびアフィニティー富化のために単離され得る。 所望の特異性を有しないライブラリーメンバーは、洗浄により除去される。要 求される洗浄の度合およびストリンジェンシーは、目的のそれぞれのペプチド配 列または単鎖抗体、および固定化された予め決定された高分子またはエピトープ に関して決定される。調節の所定の度合は、結合のインキュベーションおよび引 き続く洗浄の条件を調整することにより、回収された新生のペプチド／DNA複合 体の結合特性に影響を及ぼし得る。温度、pH、イオン強度、二価陽イオン濃度、 および洗浄の容量および持続時間は、固定化高分子に対するアフィニティーの特 別な範囲内で、新生のペプチド／DNA複合体について選択される。通常、高アフ ィニティーの指標となる緩徐な解離速度に基づく選択は、しばしば最も実践的な 経路である。これは、飽和量の遊離した予め決定された高分子の存在下における 継続的なインキュベーション、または洗浄の容量、回数、および長さを増加させ ることのいずれかにより実施され得る。それぞれの場合において、解離した新生 ペプチド／DNAまたはペプチド／RNA複合体の再結合は防止され、そして時間の増 加とともに、徐々にアフィニティーが高くなる新生のペプチド／DNAまたはペプ チド／RNA複合体が回収される。 結合および洗浄の手順のさらなる改変は、特別な特徴を有するペプチドを見い 出すために適用され得る。いくつかのペプチドのアフィニティーは、イオン強度 または陽イオン濃度に依存する。これは、ペプチドからこのタンパク質を除去す るのに穏やかな条件が要求される場合の種々のタンパク質のアフィニティー精製 において用いられるペプチドについて有用な特徴である。 １つの改変例は、scFvライブラリーが、異なる結合特異性を有するscFvの多重 性について同時にスクリーニングされ得るような、多重結合標的（多重エピトー プ種、多重レセプター種）の使用を包含する。scFvライブラリーのサイズが、し はしば潜在的なscFv配列の多様性を制限すると仮定すると、一般に、可能な限り の大きなサイズのscFvライブラリーが本発明者らにとって望ましい。多数の非常 に大きなポリソームscFv-ディスプレイライブラリーを生成することの時間性お よび経済性の考慮は、障害になり得る。この実質的な問題を回避するために、多 重性を有する予め決められたエピトープ種（レセプター種）が、単一のライブラ リーにおいて同時にスクリーニングされ得るか、または多数のエピトープ種に対 する逐次スクリーニングが用いられ得る。１つの改変例において、それぞれ別個 のビーズ（またはビーズのサブセット）にコードされる多重標的エピトープ種は 、適切な結合条件下でポリソームディスプレイscFvライブラリーと混合およびイ ンキュベートされ得る。次いで多重エピトープ種を含有するビーズの集合は、ア フィニティー選択により、scFvライブラリーメンバーを単離するために用いられ 得る。一般に、引き続くアフィニティースクリーニングラウンドは、ビーズの同 一の混合物、それのサブセット、または１つのみまたは２つの個々のエピトープ 種を含有するビーズを包含し得る。このアプローチは、効率的なスクリーニング を提供し、そして研究自動化法、バッチプロセシング法、および高処理能力スク リーニング法と適合する。 種々の技術は、予め決定された高分子またはエピトープに対する十分な結合活 性を有するように、ペプチドライブラリーまたは単鎖抗体ライブラリーを多様化 するために、あるいは再編成の前または同時に、周囲の可変セグメントペプチド またはVH、VL、あるいはパンニングの初期のラウンドにおいて見い出されるCDR を多様化するために本発明において用いられ得る。１つのアプローチにおいて、 ポジティブに選択されたペプチド／ポリヌクレオチド複合体（アフィニティー富 化の初期のラウンドにおいて同定される複合体）は、活性ペプチドの正体を決定 す るために配列決定される。次いてオリゴヌクレオチドは、これらの活性ペプチド 配列に基づいて合成され、これはそれぞれの工程で取り込まれる全ての塩基を低 レベルで使用し、一次オリゴヌクレオチド配列の僅かな改変例を生じる。次いで この（僅かに）縮重したオリゴヌクレオチドの混合物は、適切な位置で可変セグ メント配列中にクローン化される。この方法は、開始ペプチド配列の規則正しい 調節された改変例を生じ、次いでこれらは再編成され得る。しかしこの方法は、 個々のポジティブ新生ペプチド／ポリヌクレオチド複合体が、変異誘発の前に配 列決定されることを要求し、従って少数の回収された複合体の多様性を拡大し、 そしてより高い結合アフィニティーおよび／またはより高い結合特異性を有する 変異体を選択するために有用である。変種の、ポジティブに選択された（特に可 変領域配列の）ペプチド／ポリヌクレオチド複合体の変異性PCR増幅において、 その増幅産物は、インビトロおよび／またはインビボで再編成され、そして１回 以上のさらなるスクリーニングのラウンドが、配列決定の前に実施される。同一 の一般的なアプローチは、多様性を拡大し、そして結合アフィニティー／特異性 を増強するために、代表的には、再編成の前または同時にCDRまたは隣接のフレ ームワーク領域を多様化することにより、単鎖抗体とともに用いられ得る。所望 であれば、再編成反応は、選択されたライブラリーメンバーとインビトロ組換え し得る変異原性オリゴヌクレオチドでスパイクされ得る。従って、合成オリゴヌ クレオチドおよびPCRフラグメント（誤りがちな方法または高度に忠実な方法に より合成された）の混合物がインビトロ再編成混合物に添加され、そして結果と して生じる再編成されたライブラリーメンバー（再編成体）中に取り込まれ得る 。 本発明の再編成は、CDR変異体単鎖抗体の広大なライブラリーの生成を可能に する。このような抗体を生成する１つの方法は、再編成の前または再編成と同時 に、単鎖抗体および／またはCDRのランダム化中に合成CDRを挿入することである 。合成CDRカセットの配列は、ヒトCDRの公知の配列データを参照することにより 選択され、そして以下のガイドラインに従って実施者の判断により選択される： 合成CDRは、公知のCDR配列に対して少なくとも40％の位置的な配列同一性を有し 、そして好ましくは、公知のCDR配列に対して少なくとも50〜70パーセントの位 置的な配列同一性を有する。例えば、合成CDR配列の集合は、Kabatら、(1991)前 出 に列挙された天然に存在するヒトCDR配列に基づいてオリゴヌクレオチド配列 の集合を合成することにより生成され得る；合成CDR配列のプール（１つまたは 複数）は、少なくとも一つの公知の天然に存在するヒトCDR配列に対して少なく とも40％の配列同一性を有するCDRペプチド配列をコードするように計算される 。あるいは、天然に存在するCDR配列の集合が比較され得、ある残基位置に頻繁 に（すなわち、公知のCDR配列の少なくとも５％において）用いられるアミノ酸 が、相当する位置（１つまたは複数）で合成CDR中に取り込まれるように、コン センサス配列を生成し得る。代表的には、いくつか（例えば、３〜約50）の公知 のCDR配列が比較され、そして公知のCDRの間の観測された天然配列の改変例が一 覧表にされ、そして観測された天然配列の改変例の全てまたはほとんどの順列を 包含するCDRペプチド配列をコードするオリゴヌクレオチドの集合が合成される 。限定されないが、例えば、ヒトVH CDR配列の集合が、Tyr、Val、Phe、またはA spのいずれかであるカルボキシ末端アミノ酸を有する場合、合成CDRオリゴヌク レオチド配列のプール（１つまたは複数）は、カルボキシ末端のCDR残基がこれ らのアミノ酸のいずれかであるように設計される。いくつかの実施様態では、CD R配列の集合においてある残基位置に天然に存在する残基以外の残基が取り込ま れる：保存的なアミノ酸置換は、頻繁に取り込まれ、そして公知の天然に存在す るCDR配列と比較して５残基位置までが、非保存的なアミノ酸置換が取り込まれ るように変動し得る。このようなCDR配列は、（第１ラウンドのスクリーニング の前の）最初のライブラリーメンバーにおいて用いられ、そして／または選択さ れたライブラリーメンバー配列のインビトロの再編成反応をスパイクするために 用いられ得る。規定の配列および／または縮重配列のこのようなプールの構築は 、当業者により容易に達成される。 合成CDR配列の集合は、天然に存在するCDR配列であるとして知られていない、 少なくとも１つのメンバーを含む。Ｈ鎖CDRにおけるN領域付加に相当するランダ ムまたは疑似ランダムな配列の一部を含有するかまたは含有しないかは、実施者 の判断内にある；N領域配列は、V-DおよびD-J結合部に存在する１ヌクレオチド 〜約４ヌクレオチドの範囲である。合成Ｈ鎖CDR配列の集合は、少なくとも約100 のユニークなCDR配列を含み、代表的には少なくとも約1,000のユニークCDR配列 を含み、好ましくは、少なくとも約10,000のユニークなCDR配列を含み、しばし ば50,000より多いユニークなCDR配列を含む；しかし、特に、保存的なアミノ酸 置換が、保存的なアミノ酸置換基が天然に存在するヒトCDRにおけるその位置に 存在しないか、またはまれに存在する（すなわち、0.1％未満）位置において許 容される場合、ときには1×107〜1×108のユニークなCDR配列が存在することも あるが、通常、せいぜい約1×106のユニークなCDR配列が集合中に含まれる。一 般に、ライブラリーに含まれるユニークなCDR配列の数は、ライブラリー中の最 初の形質転換体の予測される数を10倍（a factor of 10）を超えて超過するべき でない。このような単鎖抗体は、一般に、少なくとも約1×107M-1のアフィニテ ィーで、好ましくは少なくとも約5×107M-1のアフィニティーで、より好ましく は少なくとも1×108M-1〜1×109M-1またはそれ以上のアフィニティーで、ときに は1×1010M-1またはそれ以上のアフィニティーで、予め決定された抗原（例えば 、免疫原）に結合する。頻繁には、予め決定された抗原は、例えばヒト細胞表面 抗原（例えば、CD4、CD8、IL-2レセプター、EGFレセプター、PDGFレセプター） のようなヒトタンパク質、他のヒト生体高分子（例えば、トロンボモジュリン、 プロテインＣ、糖質抗原、シアリルLewis抗原、L-セレクチン）、または非ヒト 疾患関連高分子（例えば、細菌LPS、ビリオンカプシドタンパク質、またはエン ベロープ糖タンパク質）などである。 所望の特異性を有する高アフィニティー単鎖抗体は、種々のシステムにおいて 改変および発現される。例えば、scFvは、植物中で産生されており（Firekら、( 1993)Plant Mol ．Biol. 23: 861）、そして原核生物系において容易に生成され 得る（Owens RJおよびYoung RJ（1994）J.Immunol.Meth. 168: 149; Johnson S およびBird RE（1991）Methods Enzymol. 203: 88）。さらに、単鎖抗体は、抗 体全体またはその種々のフラグメントを構築する基礎として用いられ得る（Kett leboroughら、(1994)Eur.J.Immunol. 24: 952）。可変領域をコードする配列は 、単離され得（例えば、PCR増幅またはサブクローン化により）、そして免疫原 性が好適に最小化されるヒトの治療的使用により適切なヒト配列抗体をコードす るように、所望のヒト定常領域をコードする配列にスプライシングされ得る。結 果として生じる完全なヒトコード配列（１つまたは複数）を有するポリヌクレオ チ ド（１つまたは複数）は、宿主細胞において発現され（例えば、哺乳動物細胞に おいて発現ベクターから）、そして製薬製造のために精製され得る。 DNA発現構築物は、代表的には、コード配列に作動可能に連結された発現調節D NA配列を含有し、この配列は、天然に会合したプロモーター領域、または異種の プロモーター領域を含む。好ましくは、発現調節配列は、真核生物宿主細胞を形 質転換またはトランスフェクトし得るベクターの真核生物プロモーターシステム である。一旦ベクターが適切な宿主中に取り込まれると、宿主は、ヌクレオチド 配列の高レベルの発現、ならびに変異「改変」抗体の収集および精製に適切な条件 下で維持される。 上述のように、DNA配列は、配列が発現調節配列に作動可能に連結された（す なわち、構造遺伝子の転写および翻訳を確実にするように位置された）後に、宿 主中で発現される。これらの発現ベクターは、代表的には、エピソームまたは宿 主の染色体DNAの必須部分として、この宿主生物において複製可能である。一般 に、発現ベクターは、所望のDNA配列で形質転換されたこれらの細胞の検出を可 能にするために、選択マーカー（例えば、テトラサイクリンまたはネオマイシン ）を含有する（例えば、米国特許第4,704,362号を参照のこと。これは、参考と して本明細書中に援用される）。 真核の微生物（例えば、酵母）に加えて、哺乳動物の組織細胞培養物もまた、 本発明のポリペプチドを生成するために用いられ得る（Winnacker、「From Genes to Clones,」 VCH Publishers，N.Y.，N.Y．(1987)を参照のこと。これは参考 として本明細書中に援用される）。真核細胞は、実際に好ましい。なぜなら、無 傷の免疫グロブリンを分泌し得る多数の適切な宿主細胞株が当該分野で開発され ており、そしてこれは、CHO細胞株、種々のCOS細胞株、HeLa細胞、ミエローマ細 胞株などを含むが、形質転換されたＢ細胞またはハイブリドーマが好ましい。こ れらの細胞のための発現ベクターは、発現調節配列(例えば、複製起点、プロモ ーター、エンハンサー)(Queenら、(1986)Immunol.Rev．89: 49)、および必要と されるプロセシング情報部位（例えば、リボソーム結合部位、RNAスプライシン グ部位、ポリアデニル化部位、および転写終結配列）を含有する。好ましい発現 調節配列は、免疫グロブリン遺伝子、サイトメガロウイルス、SV40、アデノウ イルス、ウシパピローマウイルスなどに由来するプロモーターである。 真核生物のDNA転写は、ベクター中にエンハンサー配列を挿入することにより 増加され得る。エンハンサーは、プロモーターによる転写を増加する10bpと300b pとの間のシス作用性配列である。エンハンサーは、転写単位に対して5'または3 'のいずれかにある場合、転写を効率的に増加し得る。それらはまた、イントロ ン内、またはコード配列自身の内部に位置される場合にも効果的である。代表的 には、ウイルスのエンハンサーが使用され、これは、SV40エンハンサー、サイト メガロウイルスエンハンサー、ポリオーマエンハンサーおよびアデノウイルスエ ンハンサーが含まれる。マウス免疫グロブリンＨ鎖エンハンサーのような、哺乳 動物系由来のエンハンサー配列もまた、一般に使用される。 哺乳動物の発現ベクターシステムはまた、代表的に選択マーカー遺伝子を含有 する。適切なマーカーの例は、ジヒドロ葉酸レダクターゼ遺伝子（DHFR）、チミ ジンキナーゼ遺伝子（TK）、または薬物耐性を与える原核生物遺伝子を包含する 。最初の２つのマーカー遺伝子は、生育培地へのチミジンの添加をともなわずに 生育する能力を欠如する変異体細胞株の使用を好む。次いで、形質転換された細 胞は、非補充培地における生育能により同定され得る。マーカーとして有用な原 核生物の薬物耐性遺伝子の例は、G418、ミコフェノール酸、およびヒグロマイシ ンへの耐性を与える遺伝子を包含する。 目的のDNAセグメントを含有するベクターは、細胞の宿主タイプに依存して周 知の方法により宿主細胞中に導入され得る。例えば、塩化カルシウムトランスフ ェクションが、原核細胞に一般に利用されるが、リン酸カルシウム処理、リポフ ェクション、またはエレクトロポレーションは、他の細胞の宿主に用いられ得る 。哺乳動物を形質転換するために用いられる他の方法は、ポリブレン、プロトプ ラスト融合、リポソーム、エレクトロポレーション、およびマイクロインジェク ションの使用を含む（一般に、Sambrookら、前出を参照のこと）。 一旦発現されると、抗体、個々の変異免疫グロブリン鎖、変異抗体フラグメン ト、および本発明の他の免疫グロブリンポリペプチドは、当該分野の標準的な手 順に従って精製され得る。この手順は、硫酸アンモニウム沈澱、フラクションカ ラムクロマトグラフィー、ゲル電気泳動などを包含する（一般に、Scopes，R.， Protein Purification，Springer-Verlag，N.Y．(1982)を参照のこと）。一旦部 分的にまたは所望の均一性まで精製されると、次いでポリペプチドは、治療的に 、またはアッセイ手順、免疫蛍光染色などの開発および実施において用いられ得 る（一般に、Immunological Methods、Iおよび11巻、LefkovitsおよびPernis編 、Academic Press，New York，N.Y．(1979および1981)を参照のこと）。 本発明の方法により生成される抗体は、診断および治療に用いられ得る。限定 のためではなく、説明のために、それらは、ガン、自己免疫疾患、またはウイル ス感染症を処置するために用いられ得る。ガンの処置について、抗体は、代表的 に癌細胞において優先的に発現される抗原（例えば、erbB-2、CEA、CD33、およ び当業者に周知の多数の他の抗原および結合メンバー）に結合する。 酵母ツーハイブリッドスクリーニングアッセイ 再編成はまたは、予め決定されたポリペプチド配列に結合するライブラリーメ ンバーを同定するためのツーハイブリッドスクリーニングシステムをスクリーニ ングすることにより得られた選択されたライブラリーメンバーのプールを組換え 的に多様化するために用いられ得る。選択されたライブラリーメンバーは、プー ルされ、そしてインビトロおよび／またはインビボ組換えにより再編成される。 次いで再編成されたプールは、前記の予め決定されたポリペプチド配列（例えば 、SH2ドメイン）に結合するライブラリーメンバー、または別の予め決定された ポリペプチド配列（例えば、他のタンパク質の種由来のSH2ドメイン）を選択す るために、酵母ツーハイブリッドシステムにおいてスクリーニングされ得る。 予め決定されたポリペプチド配列に結合するポリペプチド配列を同定するため の１つのアプローチは、予め決定されたポリペプチド配列が融合タンパク質中に 存在するいわゆる「ツーハイブリッド」システムを用いている（Chienら、（199 1）Proc.Natl.Acad.Sci ．(USA) 88:9578）。このアプローチは、転写のアクティ ベーター（Fields SおよびSong O（1989）Nature 340:245）、酵母Ga14転写タン パク質の再構成を通して、インビボでのタンパク質−タンパク質の相互作用を同 定する。代表的には、この方法は、酵母Ga14タンパク質の特性に基づく。このタ ンパク質は、DNA結合および転写の活性化に機能する分離可能なドメインからな る。２つのハイブリッドタンパク質（一方は、公知のタンパク質のポリペプチド 配列に融合された酵母Ga14 DNA結合ドメインからなり、他方は、第２のタンパク 質のポリペプチド配列に融合されたGa14活性化ドメインからなる）をコードする ポリヌクレオチドが構築され、酵母宿主細胞に導入される。２つの融合タンパク 質間の分子間の結合は、Ga14 DNA結合ドメインとGa14活性化ドメインとを再構成 し、これはGa14結合部位に作動可能に連結されたレポーター遺伝子（例えば、la cZ、HIS3）の転写の活性化を導く。代表的に、ツーハイブリッド法は、公知のタ ンパク質に相互作用する新規のポリペプチト配列を同定するために用いられる（ Silver SCおよびHunt SW（1993）Mol.Biol.Rep. 17: 155; Durfeeら、(1993)Gen es Devel. 7; 555; Yangら、(1992)Science 257: 680; Lubanら、(1993)Ce11 73 :1067; Hardyら、(1992)Genes Devel. 6; 801; Bartelら、(1993)Biotechniques 14: 920; およびVojtekら、(1993)Cell 74: 205）。しかし、ツーハイブリッド 法の変法が、第２の公知のタンパク質への結合に影響する公知のタンパク質の変 異を同定するために用いられている（Li BおよびFields S（1993）FASEB J. 7: 957; Laloら、(1993)Proc.Natl.Acad.Sci ．(USA) 90: 5524; Jacksonら、(1993)Mol.Cell.Biol. 13; 2899;およびMaduraら、(1993)J.Biol.Chem. 268: 12046） 。ツーハイブリッドシステムはまた、２つの公知のタンパク質の相互作用する構 造ドメインを同定するため（Bardwellら、(1993)Med.Microbiol. 8: 1177; Chak rabortyら、(1992)J.Biol.Chem. 267: 17498; Staudingerら、(1993)J.Biol.Che m. 268: 4608; およびMilne GTおよびWeaver DT（1993）Genes Devel. 7; 1755 ）、または単一のタンパク質のオリゴマー形成に機能するドメインを同定するた めにも用いられている（Iwabuchiら、(1993)Oncogene 8; 1693; Bogerdら、(199 3)J.Virol. 67: 5030）。ツーハイブリッドシステムの変法は、タンパク質分解 酵素のインビボでの活性を研究するために用いられている（Dasmahapatraら、(1 992)Proc.Natl.Acad.Sci. (USA) 89: 4159）。あるいは、E．coli/BCCP 相互作 用的スクリーニングシステム（Germinoら、(1993)Proc.Natl.Acad.Sci ．(U.S.A. ) 90: 933; Guarente L（1993）Proc.Natl.Acad.Sci.（U.S.A.）90: 1639）は、 相互作用するタンパク質配列（すなわち、ヘテロ二量体化するか、またはより高 次のヘテロ多量体を形成するタンパク質配列）を同定するため に用いられ得る。ツーハイブリッドシステムにより選択された配列は、プールお よび再編成され、そして予め決定された結合配列を含有するハイブリッドに結合 するポリペプチド配列を同定するためのスクリーニングの１つ以上の引き続くラ ウンドのために、ツーハイブリッドシステムに導入され得る。このようにして同 定された配列は、コンセンサス配列およびコンセンサス配列カーネルを同定する ために比較され得る。 上述の開示から理解され得るように、本発明は、広範な応用を有する。従って 、以下の実施例は、説明のために提供され、制限のためではない。 以下の実施例において、以下の略語は以下の意味を有する。以下に定義されな い場合、その略語は当該分野で理解される意味を有する。 ml ＝ ミリリットル μl ＝ マイクロリットル μM ＝ マイクロモル濃度 nM ＝ ナノモル濃度 PBS ＝ リン酸緩衝生理食塩水 ng ＝ ナノグラム μg ＝ マイクログラム IPTG ＝ イソプロピルチオ-β-D-ガラクトシド bp ＝ 塩基対 kb ＝ キロ塩基対 dNTP ＝ デオキシヌクレオシド３リン酸 PCR ＝ ポリメラーゼ連鎖反応 X-gal ＝ 5-ブロモ-4-クロロ-3-インドリル-β-D-ガラクトシド DNAseI ＝ デオキシリボヌクレアーゼ PBS ＝ リン酸緩衝生理食塩水 CDR ＝ 相補性決定領域 MIC ＝ 最小阻止濃度 scFv ＝ 抗体の単鎖Fvフラグメント 一般に、組換えDNA工学の標準的な技術は、種々の出版物（例えば、Sambrook ら、1989，Molecular Cloning: A Laboratory Manual，Cold Spring Harbor Lab oratory; Ausubelら、1987，Current Protocols in Molecular Biology、１巻お よび２巻ならびに増補、ならびにBergerおよびKimmel、Methods in Enzymology ，Volume 152，Guide to Molecular Cloning Techniques (1987)，Academic Pres s，Inc.，San Diego，CA、それぞれ参考として全体が本明細書中に援用される） に記載されている。制限酵素およびポリヌクレオチド修飾酵素を、製造業者の推 奨に従って用いた。オリゴヌクレオチドをApplied Biosystems Inc．Model 394 DNA合成機で、ABIの化学製品を用いて合成した。所望であれば、予め決定された DNA配列を増幅するためのPCRアンプリマー（amplimer）は、従事者の判断で選択 され得る。 実施例 実施例１．LacZα遺伝子の再組立 １）基質の調製 再組立反応のための基質は、pUC18由来の野生型LacZα遺伝子のdsDNAポリメラ ーゼ連鎖反応（「PCR」）産物であった(図２)(28; Gene Bank第XO2514号)。プラ イマー配列は、5'AAAGCGTCGATTTTTGTGAT3'（配列番号１）および5'ATGGGGTTCCGC GCACATTT3'（配列番号２）であった。遊離したプライマーを、製造業者の指示に 従い、Wizard PCR prep（Promega，Madison WI）によりPCR産物から除去した。 遊離したプライマーの除去は、重要であることが見い出された。 ２）DNAseI消化 約５μgのDNA基質を、10〜20分間室温にて、100μlの[50mM Tris-HCl pH 7.4 ，1mM MgCl2]中で、0.15単位のDNAseI（Sigma，St．Louis MO）で消化した。消 化されたDNAを、２％低融点アガロースゲルで泳動した。10〜70塩基対（bp）の フラグメントを、DE81イオン交換紙（Whatman，Hillsborough OR）上への電気泳 動により２％低融点アガロースゲルから精製した。DNAフラグメントを、1M NaCl を用いてこの紙から溶出してエタノール沈澱した。 ３）DNA再組立 精製されたフラグメントを、PCR Mix（0.2mM 各dNTP、2.2mM MgCl2、50mM KCl 、10mM Tris-HCl pH 9.0、0.1％ Triton X-100、0.3μl Taq DNAポリメラーゼ、 50μlの総容量）中に10〜30ng/μlの濃度で再懸濁させた。この時点では、プラ イマーを添加しなかった。94℃60秒間、[94℃30秒間、50〜55℃30秒間、72℃30 秒間]の30〜45サイクル、および72℃５分間の再組立プログラムを、MJ Research （Watertown MA）PTC-150サーマルサイクラーにおいて用いた。より大きな配列 への小さなフラグメントのPCR再組立に続いて、再組立の25、30、35、40、およ び45サイクル後の反応のサンプルを採取した（図２）。 100〜200bpのフラグメントの再組立は、正確なサイズの単一のPCR産物を産生 し得るが、10〜50塩基のフラグメントは、代表的に正確なサイズのいくらかの産 物および不均一な分子量の産物を産生する。制限酵素消化後、正確なサイズの単 一のバンドが得られるので、このサイズ不均一性のほとんどは、産物の末端での １本鎖配列に起因すると思われる。 ４）プライマーを用いたPCR それぞれ0.8μMの上記のプライマー（配列番号１および２）を有するPCR Mix への再組立産物の希釈、および約15サイクルのPCR（それぞれのサイクルは、[94 ℃30秒間、50℃30秒間、および72℃30秒間]からなる）の後、正確なサイズの単 一の産物が得られた（図２）。 ５）クローニングおよび分析 上記の工程４由来のPCR産物を、末端の制限酵素BamHIおよびEco0109で消化し 、そして上記の工程２に記載のようにゲル精製した。再組立されたフラグメント を、BamHIおよびEco0109で消化したpUC18に連結した。E．coliを、製造業者（St ratagene，San Diego CA）により推奨されるような標準的な条件下で、この連結 混合物を用いて形質転換し、そして100μg/mlアンピシリン、0.004％ X-galおよ び２mM IPTGを有するアガープレートに播いた。++組換え体と判定されるHinDIII -NheIフラグメントを有する得られたコロニーを、それが青く見えることにより 同定した。 この実施例は、LacZα遺伝子を保有する1.0kbの配列が、10〜70bpのフラグメ ントに消化され得ること、およびこれらのゲル精製された10〜70bpのフラグメン トが、正確なサイズの単一の産物に再組立され得ることを説明する。ここで、得 られたコロニーの84％（N＝377）がLacZ+である（再編成なしの場合の94％に対 して；図２）。 得られたLacZ-コロニー由来のLacZ遺伝子をコードするDNAを、製造業者の指示 に従い、配列決定キット（United States Biochemical Co.，Cleveland OH）で 配列決定し、そしてこの遺伝子が、再組立プロセスに起因する点変異を有するこ とを見い出した（表１）。11/12の型の置換が見い出され、そしてフレームシフ トは見い出されなかった。 10〜70bpの切片からのDNA再組立の間の点変異誘発率は、DNA配列決定から0.7 ％（N＝4,473）であると決定された。これは誤りがちなPCRと類似している。い かなる理論にも制限されることなく、より大きなフラグメントが再組立に用いら れる場合、または校正ポリメラーゼが添加される場合、点変異誘発率は、より低 くあり得ると考えられている。 14のこれらの点変異されたLacZ-コロニーのプラスミドDNAを、組合わせ、そし て再び上述の方法により再組立／再編成した場合、得られたコロニーの34％（N ＝291）がLacZ+であり、そしてこれらのコロニーは、おそらく異なるコロニー由 来のDNAの組換えにより生じたのであろう。 誤りがちなPCRによる単一の点変異の予測される回復率は、変異誘発率が0.7％ （10）であると仮定すると、＜１％であると予想される。 このようにして、大きなDNA配列は、驚くほど効率的および単純な反応により 、小さなフラグメントのランダムな混合物から再組立され得る。この技術の１つ の応用は、相同性に基づいた関連した配列の組換えまたは再編成である。実施例２．LacZ遺伝子およびプラスミドDNA全体の再編成 １）LacZ遺伝子再編成 ２つのLacZ遺伝子構築物を用いて、75塩基離れた２つのマーカー間のクロスオ ーバーを計測した。終止コドンを、LacZα遺伝子の２つの離れた範囲に挿入し、 ネガティブマーカーとして用いた。それぞれのマーカーは、４つの終止コドンを 有する25bpの非相同配列であり、終止コドンのうち２つは、LacZ遺伝子のリーデ ィングフレーム内にある。25bpの非相同配列を、大きな四角により図３に示す。 終止コドンは、四角で囲むか、または下線を付すかした。+-および-+型のLacZα 遺伝子（図３）を含有する２つの1.0kbのLacZテンプレートの1:1混合物を、DNAs eIで消化し、そして100〜200bpのフラグメントを実施例１に記載のように精製し た。再編成プログラムを、0.5μlのポリメラーゼを添加し、そして全容量が100 μlであった以外は、実施例１における再組立について記載された条件と同様の 条件下で実施した。 クローニング後、得られた青色のコロニーの数は、24％;(N＝386)であった。 これは青色のコロニーの理論的な最大数（すなわち25％）に近接しており、２つ のマーカー間の組換えが完全であったことを示した。10の青色のコロニーの全て は、予測されるHindIII-NheI制限フラグメントを含有した。 ２）プラスミドDNA全体の再編成 2.7kbプラスミド全体（pUC18-+およびpUC18+-）もまた、試験した。+-および- +型のLacZα遺伝子（図３）を含有する２つの2.9kbのプラスミドの1:1混合物を 、DNAseIで消化し、そして100〜200bpのフラグメントを実施例１に記載のように 精製した。プログラムが[94℃30秒間、55℃30秒間、72℃30秒間]の60サイクルで あった以外は、上記の工程（1）における再組立について記載された条件と同様 の条件下で再編成プログラムを実施した。ゲル分析は，再編成プログラム後、産 物のほとんどが20kbよりも大きいことを示した。このようにして、2.7kbのプラ スミド全体（pUC18-+およびpUC18+-）を、プライマーの添加なしにランダムな10 0〜200bpのフラグメントから効率的に再組立した。 プラスミド上に唯一の部位を有する制限酵素（EcoO109）での消化後、産物の ほとんどは、予測されるサイズの単一のバンドからなっていた。このバンドをゲ ル精製し、再連結し、そしてこのDNAをE.coliの形質転換に用いた。実施例１に 記載のように、形質転換体を0.004％ X-galプレート上に播いた。得られたプラ スミドの11％（N＝328）は、青色すなわち++組換え体であった。 ３）スパイクしたDNA再編成 再編成混合物中に混合されるオリゴヌクレオチドは、テンプレートDNAに対す るオリゴヌクレオチドのフランキング配列の相同性に基づき最終産物中に取り込 まれ得る（図４）。上述のLacZ-終止コドン変異体（pUC18-+）をDNAseI消化テン プレートとして用いた。両末端に野生型LacZ遺伝子に対する18塩基の相同性を含 有する66マーのオリゴヌクレオチドを、４倍モル濃度過剰量で反応物中に添加し 、本来の遺伝子中に存在する終止コドン変異を補正した。再編成反応を、上記の 工程２における条件と同様の条件下で実施した。得られた産物を消化し、連結し 、そして上述のようにE.coliに挿入した。 ssDNAは、dsDNAよりも効率的であるようであり、おそらくこれは競合的なハイ ブリダイゼーションに起因すると思われる。取り込みの度合は、モル濃度過剰量 、アニーリング温度、または相同性の長さを調整することにより、広範な範囲に 亘って変化し得る。実施例３．プライマーの完全な非存在下におけるDNA再組立 プラスミドpUC18を制限酵素EcoRI、Eco0109、XmnI、およびAlwNIで消化し、約 370、460、770、および1080bpのフラグメントを産生した。これらのフラグメン トを電気泳動し、そして２％低融点アガロースゲルから別々に精製した（370塩 基対のバンドと460塩基対のバンドは、分離され得なかった）。これにより、３ つの別個のチューブに、大きなフラグメント、中程度のフラグメント、および２ つの小さなフラグメントの混合物を得た。 それぞれのフラグメントを実施例１に記載のようにDNAseIで消化し、そして50 〜130bpのフラグメントを、それぞれの本来のフラグメントについて２％低融点 アガロースゲルから精製した。 PCR混合物（上述の実施例１に記載のような）を精製した消化フラグメントに 添加して、フラグメントの最終濃度を10ng/μlとした。プライマーを添加しなか った。再組立反応を、３つの消化したDNAフラグメント混合物それぞれについて 別々に[94℃30秒間、60℃30秒間]を75サイクル実施し、そして産物をアガロース ゲル電気泳動により分析した。 この結果は、1080bp、770bp、ならびに370bpおよび460bpのバンドが、精製さ れたフラグメントから効率的に再形成されたことを明確に示した。これは、再編 成がいかなるプライマーの使用をも全く必要としないことを示す。実施例４．IL-1β遺伝子再編成 この実施例は、15塩基よりも少ない相同性に基づいてクロスオーバーが得られ 得ることを説明する。例として、ヒトおよびマウスのIL-1β遺伝子を再編成した 。 マウスのIL-1β遺伝子（BBG49）およびE．coliのコドン使用頻度を有するヒト IL-1β遺伝子（BBG2; R&D Systems Inc.，Minneapolis MN）を再編成反応のテン プレートとして用いた。ヒトIL-1β配列とマウスIL-1β配列との間の完全に相同 な範囲は、平均してわずか4.1塩基の長さである（図５、非相同の領域を四角で 囲った）。 それぞれの遺伝子のdsDNA PCR産物の調製、プライマーの除去、10〜50bpフラ グメントのDNAseI消化および精製は、実施例１において上述されたものと同様で あった。PCR反応に用いられるプライマーの配列は、5'TTAGGCACCCCAGGCTTT3'（ 配列番号３）および5'ATGTGCTGCAAGGCGATT3'（配列番号４）であった。 再編成反応の最初の15のサイクルは、DNAポリメラーゼIのKlenowフラグメント を用いて、それぞれのサイクル毎に１単位の新たな酵素を添加しながら、実施し た。DNAをポリメラーゼを含まない実施例１のPCR混合物に添加した。手動のプロ グラムは、94℃１分間、および次いで[95℃１分間、ドライアイス／エタノール 上に10秒間（凍結するまで）、25℃にて約20秒間インキュベート、1UのKlenowフ ラグメントの添加、および25℃にて２分間インキュベート]の15サイクルであっ た。変性工程後のそれぞれのサイクルにおいて、チューブをドライアイス／エタ ノール中で迅速に冷却し、そしてアニール温度まで再加熱した。次いで、熱不安 定性ポリメラーゼを添加した。この酵素は、全てのサイクルごとの添加を必要と する。このアプローチを用いることにより、わずか数塩基の連続した相同性に基 づいて、高レベルのクロスオーバーが得られた（図５、クロスオーバーの位置 これらの15回の手動のサイクルの後、Taqポリメラーゼを添加し、そしてさら なる22サイクルの再編成反応[94℃30秒間、35℃30秒間]をプライマーなしで実施 した。 次いで反応物を20倍に希釈した。以下のプライマーを、0.8μMの最終濃度で添 加した：5'AACGCCGCATGCAAGCTTGGATCCTTATT3'（配列番号５）および5'AAAGCCCTC TAGATGATTACGAATTCATAT3'（配列番号６）。そしてPCR反応を実施例１における上 述のように実施した。第２のプライマーペアは、制限部位の変化が必要であると 考えられるためだけで第１のペアと異なった。 XbaIおよびSphIでのPCR産物の消化の後、このフラグメントをXbaI-SphI消化pU C18に連結した。いくつかのコロニー由来の挿入物の配列を、製造業者の指示に 従い、ジデオキシDNA配列決定キット（United States Biochemical Co.，Clevel and OH）により決定した。 全部て17のクロスオーバーが、９つのコロニーのDNA配列決定により見い出さ れた。いくつかのクロスオーバーは、わずか1〜2塩基の連続した相同性に基づい ていた。 短い相同性に基づく効率的なクロスオーバーを強いるために、非常に低い効率 的なアニーリング温度が要求されることが見い出された。任意の熱安定性ポリメ ラーゼを用いて、PCR機械の冷却時間（1〜2℃/秒の94℃から25℃への）は、効果 的なアニーリング温度を設定されたアニール温度よりも高くする。従って、Taq ポリメラーゼに基づくプロトコルのいずれもが、IL-1β遺伝子の一方の10倍過剰 量を用いてもクロスオーバーを産生しなかった。対照的に、熱不安定性ポリメラ ーゼ（例えば、DNAポリメラーゼIのKlenowフラグメント）は、低いアニーリング 温度を正確に得るために用いられ得る。実施例５．TEM-1βラクタマーゼ遺伝子のDNA再編成 直接分子進化のための変異誘発DNA再編成の利用性を、βラクタマーゼモデル システムにおいて試験した。TEM-1βラクタマーゼは、非常に効率的な酵素であ り、主に拡散によりその反応速度は限定される。この実施例は、その反応特異性 を変化すること、および通常加水分解しない薬物セフォタキシムに対して耐性を 得ることが可能であるかを決定する。 プラスミドを含まない細菌性細胞におけるセフォタキシムの最小阻止濃度（MI C）を、E．coli XL1-blue細胞（Stratagene，San Diego CA）の一夜細菌培養物 の10-2希釈の10μl（約1000cfu）を、異なるレベルのセフォタキシム（Sigma，S t．Louis MO）を有するプレートに播き、続いて37℃で24時間インキュベートす ることにより決定した。 セフォタキシム上での生育は、細胞の密度に対して敏感であり、それ故類似の 数の細胞がそれぞれのプレートに播かれる必要がある（添加物非含有LBプレート に播くことにより得られる）。1000個の細胞のプレートが一貫して行われた。 １）最初のプラスミド構築 細菌のTEM-1βラクタマーゼ遺伝子を保有するpUC18誘導体を用いた（28）。TE M-1βラクタマーゼ遺伝子は、細菌に約0.02μg/mlのセフォタキシムに対する耐 性を与える。２つのプライマー： を用いるベクター配列のPCRおよび２つの他のプライマー： を用いるβラクタマーゼ配列のPCRにより、プロモーターの5'および遺伝子の末 端の3'にSfi1制限部位を付加した。 ２つの反応産物をSfiIで消化し、混合し、連結し、そして細菌を形質転換する ために用いた。 得られたプラスミドは、pUC182Sfiであった。このプラスミドは、TEM-1遺伝子 およびP-3プロモーターを保有するSfi1フラグメントを含有する。 このプラスミドを保有するE．coli XL1-blue（Stratagene，San Diego CA）に 関するセフォタキシムの最小阻止濃度は、37℃で24時間後で0.02μg/mlであった 。 再編成なしに、セフォタキシムに対するβラクタマーゼ遺伝子の耐性を改変す る能力は、２倍に増加した薬物レベルへの細胞（約107cfu）の希釈したプールの 段階的な再プレートにより決定した。1.28μg/mlまでへの耐性が再編成なしに得 られ得た。これは、耐性の64倍の増加を表す。 ２）DNAseI消化 第１の再編成反応のための基質は、プライマーCおよびD（両方ともSfiI部位を 含有する）を用いるpUC182SfiのPCRにより得られた0.9kbのdsDNAであった。 各サイクルごとにPCR産物から遊離プライマーをWizard PCR prep（Promega，M adison WI）により除去した。 約５μgのDNA基質を、10分間室温で、100μlの50mM Tris-HCl pH7.4、１mM Mg Cl2中て0.15単位のDNAseI（Sigma，St．Louis MO）で消化した。100〜300bpのフ ラグメントを、DE81イオン交換紙（Whatman，Hillsborough OR）への電気泳動、 １M NaClでの溶出、およびエタノール沈澱により、実施例１に記載の方法によっ て２％低融点アガロースゲルから精製した。 ３）遺伝子再編成 精製したフラグメントを、10〜30ng/μlの濃度でPCR混合物（0.2mM 各dNTP、2 .2mM MgCl2、50mM KCl、10mM Tris-HCl pH 9.0、0.1％ Triton X-100）に再懸濁 した。この時点でプライマーを添加しなかった。94℃60秒間、次いで[94℃30秒 間、50〜55℃30秒間、72℃30秒間]の40サイクル、そして次いで72℃５分間の再 組立プログラムを、MJ Research（Watertown MA）PTC-150サーマルサイクラーに おいて使用した。 ４）プライマーを用いる再組立産物の増幅 0.8μMのそれぞれのプライマー（CおよびD）を有するPCR混合物への再組立産 物の希釈、および20のPCRサイクル[94℃30秒間、50℃30秒間、72℃30秒間]の後 、900bpのサイズの単一の産物を得た。 ５）クローニングおよび分析 末端の制限酵素SfiIでの900bp産物の消化、およびアガロースゲル精製の後、9 00bp産物を、T4 DNAリガーゼ（BRL，Gaithersburg MD）を用いて唯一のSfiI部位 でベクターpUC182Sfiに連結した。混合物を、E．coli XL1-blue細胞にエレクト ロポレートし、そして0.32〜0.64μg/mlのセフォタキシム（Sigma，St．Louis M O）を有するLBプレートに播いた。細胞を、37℃て24時間まで増殖させ、得られ たコロニーをプールとしてプレートから掻き取り、そして次のラウンドの再編成 のためのPCRテンプレートとして用いた。 ６）引き続く再組立ラウンド ３ラウンドの再編成のそれぞれの後に得られた形質転換体を、漸増するレベル のセフォタキシムに播いた。最も高いレベルのセフォタキシムを有するプレート 由来のコロニー（＞100、多様性を維持するために）をプールし、次のラウンド のPCR反応のためのテンプレートとして用いた。 上記の工程（５）において0.32〜0.64μg/mlで得られたセフォタキシム耐性コ ロニーの混合物を次のラウンドの再編成のためのテンプレートして用いた。LBブ ロス中の10μlの細胞を、上述のように、99℃10分間、次いで[94℃30秒間、52℃ 30秒間、72℃30秒間]の35サイクル、および次いで72℃５分の再組立プログラム においてテンプレートとして用いた。 再組立産物を消化し、そして上記の工程（５）に記載のようにpUC182Sfiに連 結した。混合物をE．coli XL1-blue細胞にエレクトロポレートし、そして5〜10 μg/mlのセフォタキシムを有するLBプレートに播いた。 5〜10μg/mlで得られたコロニーを、細胞を80〜160μg/mlのセフォタキシムを 含有するLBプレートに播いた以外は第１および第２のラウンドと同様である第３ のラウンドに用いた。第３のラウンドの後、コロニーを、80〜160μg/mlで得、 そして漸増する濃度のセフォタキシムに再プレートした後、コロニーは、37℃で 24時間後、320μg/mlまでで得られた（MIC＝320μg/ml）。 セフォタキシムにおける増殖は、細胞密度に依存し、全てのMICが規格化され ることを要求する（本発明者らの場合、プレートあたり約1,000細胞まで）。よ り高い細胞密度で、1280μg/mlまででの増殖が得られた。1,280μg/mlで増殖さ れた５つの最も大きいコロニーを、単一コロニーのために２回プレートし、そし てSfi1挿入物を、コロニーPCR産物の制限マッピングにより分析した。 セフォタキシムに対する耐性が16,000倍に増加した（MIC＝0.02μg/mlからMIC ＝320μg/ml）１つの変異体が得られた。 選択後、選択されたクローンのプラスミドを野生型E．coli XL1-blue細胞（St ratagene，San Diego CA）に戻し、測定された薬剤耐性の全てが、染色体の変異 に起因しないことを確認した。 再編成および選択の３つのサイクルは、TEM-1βラクタマーゼに関する伸展し た幅広いスペクトラムの抗生物質であるセフォタキシムの最小阻止濃度における 1.6×104倍の増加を生じた。対照的に、再編成なしの繰り返しのプレーティング は、耐性のわずか16倍の増加のみを生じた（誤りがちなPCRまたはカセット変異 誘発）。 ７）配列分析 1,280μg/mlで生育した５つの最も大きいコロニーの全ては、野生型TEM-1酵素 と同一な制限地図を有した。これらのコロニーの内の１つから得られたプラスミ ドのSfiI挿入物を、製造業者の指示に従い、ジデオキシDNA配列決定法（United States Biochemical Co.，Cleveland OH）により配列決定した。全ての塩基番号 は、改訂されたpBR322配列（29）に対応し、そしてアミノ酸番号は、ABL標準番 号付けスキーム（30）に対応する。アミノ酸は３文字表記で示され、そしてヌク レオチドは１文字表記で示される。用語G4205Aは、ヌクレトチド4205が、グアニ ジンからアデニンに変化したことを意味する。 ９つの１塩基置換が見い出された。G4205Aは、βラクタマーゼP3プロモーター （31）の-35と-10部位との間に位置される。ChenおよびClowes（31）により観察 されたプロモーター上方変異体（up-mutant）は、本発明で用いられたSfi1フラ グメントの外側に位置され、従って検出され得なかった。４つの変異は、サイレ ント変異であり（A3689G、G3713A、G3934A、およびT3959A）、そして４つがアミ ノ酸変化を生じた（Gly238Serを生じるC3448T、Met182Thrを生じるA3615G、Glu1 04Lysを生じるC3850T、およびAla18Valを生じるG4107A）。 ８）分子戻し交雑 次いで非必須変異を除去するために、過剰量の野生型DNAを用いた分子戻し交 雑を用いた。 分子戻し交雑は、DNAseI消化および再編成反応を40倍の過剰量の野生型TEM-1 遺伝子フラグメントの存在下で実施した以外は、上述したような通常の再編成と 同一な方法によりDNA再編成の第３のラウンドから選択されたプラスミドに対し て実施した。戻し交雑をより効率的にするために、非常に小さなDNAフラグメン ト（30〜100bp）を再編成反応に用いた。戻し交雑変異体を、80〜160μg/mlのセ フォタキシム（Sigma，St．Louis MO）を有するLBプレートで再び選択した。 この戻し交雑再編成を、40倍の過剰量の野生型TEM-1 DNAの存在下での第１の 戻し交雑ラウンドからのコロニー由来のDNAを用いて繰り返した。戻し交雑の効 率を増加させるために、小さなDNAフラグメント（30〜100bp）を用いた。第２の ラウンドの戻し交雑変異体を、80〜160μg/mlのセフォタキシムを有するLBプレ ートで再び選択した。 得られた形質転換体を160μg/mlのセフォタキシムに播き、そしてコロニーの プールを、1,280μg/mlまでの漸増するレベルのセフォタキシムに再プレートし た。1,280μg/mlで得られた最も大きなコロニーを、単一コロニーのために再プ レートした。 この戻し交雑変異体は、野生型よりも32,000倍高い耐性を示した（MIC＝640μ g/ml）。変異体株は、以前に報告された臨床的TEM-1由来株または加工されたTEM -1由来株よりもセフォタキシムに対して64倍高い耐性である。従って、DNA再編 成は、少なくともいくつかのサイクルの定方向性分子進化のための迅速で強力な 手段であるようである。 戻し交雑された変異体のSfiI挿入物のDNA配列を、製造業者の指示に従いジデ オキシDNA配列決定キット（United States Biochemical Co.，Cleveland OH）を 用いて決定した（表３）。変異体は、９つの１塩基対変異を有した。予測される ように、以前に同定した４つのサイレント変異の全てが消失し、野生型遺伝子の 配列に戻っていた。プロモーター変異（G4205A）および４つのアミノ酸変異の内 の３つ（Glu104Lys、Met182Thr、およびGly238Ser）は、戻し交雑されたクロー ンに残っていた。このことは、それらが高レベルのセフォタキシム耐性のために 必須であることを示唆する。しかし、２つの新規のサイレント変異（T3842Cおよ びA3767G）ならびにアミノ酸変化を生じる３つの新規の変異（Arg241Hisを生じ るC3441T、Gly92Serを生じるC3886T、およびAla42Glyを生じるG4035C）が見い出 された。これらの２つのサイレント変異は、タンパク質の１次配列に影響しない が、タンパク質の発現レベル（例えばmRNAの構造により）、およびおそらくタン パク質の折り畳みにさえに影響し得る（コドン使用頻度を変化すること、および それゆえタンパク質の折り畳みに関係する休止部位を変化することによる）。 戻し交雑変異体および非戻し交雑変異体は両方とも１つのプロモーター変異（ これは、単独または組み合わせにより発現レベルにおいて2〜3倍の増加を生じる ）および３つの共通したアミノ酸変化（Glu104Lys、Met182Thr、およびGly238Se r）を有する。Glu104LysおよびGly238Serは、いくつかのセフォタキシム耐性TEM -1誘導体または他のTEM-1誘導体（表４）において存在する変異である。 ９）発現レベル比較 野生型プラスミド、非戻し交雑変異体、および戻し交雑変異体におけるβラク タマーゼ遺伝子の発現レベルを、Witholt，B．(32)の方法に従い浸透圧ショック により調製された周辺質の抽出物のSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動（4〜2 0％；Novex，San Diego CA）により比較した。 精製されたTEM-1βラクタマーゼ（Sigma，St．Louis MO）を、分子量基準とし て用い、そしてプラスミドを含まないE．coli XL1-blue細胞をネガティブコント ロールとして用いた。 変異体および戻し交雑された変異体は、野生型遺伝子と比較して2〜3倍高いレ ベルのβラクタマーゼタンパク質を産生するようであった。プロモーター変異は 、βラクタマーゼの2〜3倍の増加を生じるようであった。実施例６．TEM-1βラクタマーゼ遺伝子の変異体組み合わせ体の構築 変異の異なる組み合わせの耐性を決定するため、そして発表された変異体と新 規の変異体とを比較するために、いくつかの変異体を、同一のプラスミドバック グラウンド中に構築した。２つの変異（Glu104LysおよびGly238Ser）は、セフォ タキシム変異体として知られている。構築した全ての変異体の組み合わせは、プ ロモーター変異を有しており、これは選択された変異体の比較を可能にした。結 果を図４に示す。 変異の特定の組み合わせは、１変異当たり２つのオリゴヌクレオチドを用いて 、PCRにより野生型pUC182Sfi中に導入された。 以下の変異を得るためのオリゴヌクレオチドは以下のようであった： これらの個々のPCRフラグメントを、合成オリゴヌクレオチドからゲル精製し た。10ngのそれぞれのフラグメントを組み合わせ、そして再組立反応を、94℃１ 分間、および次いで25サイクル；[94℃30秒間、50℃30秒間、および72℃45秒間] で実施した。PCRを、SfiI含有外側プライマー（実施例５のプライマーCおよびプ ライマーD）の存在下で25サイクルにわたって再組立産物に対して実施した。DNA をSfiIで消化し、そして野生型pUC182Sfiベクターに挿入した。以下の変異体組 み合わせが得られた（表４）。 保存された変異が、MICにおける15の倍加(doubling)の内の９つの原因である と結論づけられた。 Glu104Lys単独は、0.08μg/mlへのMICの倍加のみを生じることが示され、そし てGly238Ser（いくつかの状況において１つのさらなるアミノ酸変化を有する） は、0.16μg/mlのMICのみを生じた（26）。２重変異体Glu104Lys/Gly238Serは、 10μg/mlのMICを有する。この変異体は、TEM-15に相当する。 これらの同一のGlu104Lys変異およびGly238Ser変異は、Gln39Lys（TEM-3）ま たはThr263Met（TEM-4）と組み合わせて、高レベルの耐性（TEM-3について2〜32 μg/mlおよびTEM-4について8〜32μg/ml(34、35)）を生じる。 戻し交雑後に保存された３つのアミノ酸変化(Glu104Lys/Met182Thr/Gly238Ser )を含有する変異体もまた、10μg/mlのMICを有した。これは、新規の選択された 変異体のそれぞれが、３つの公知の変異に加えてさらに有する変異が、セフォタ キシムに対する遺伝子の耐性のさらなる32〜64倍の増加の原因であることを意味 した。 天然に存在する、臨床的TEM-1由来酵素（TEM-1〜19）のそれぞれは、5〜7つの みの同一の変異の異なる組み合わせを含有する（総説）。これらの変異は、遺伝 子において十分に分離した位置に存在するので、高度なセフォタキシム耐性を有 する変異体は、単一の範囲のカセット変異誘発によっては得られ得ない。これは 、標準的なカセット変異誘発アプローチにより得られる最大MICが、わずか0.64 μg/mlである理由を説明し得る（26）。例えば、Glu104Lys変異およびGly238Ser 変異は両方とも0.16μg/ml未満のMICを有することが本研究において個々に見い 出された。DNA再編成の使用は、組み合わせを可能にし、それ故10μg/mlのMICを 有するGlu104Lys/Gly238Serの組み合わせが見い出された。 この実施例の重要な制限は、開始点としての単一の遺伝子の使用である。多数 の関連した天然に存在する遺伝子が再編成される場合、より良好な組み合わせが 見い出され得ることが意図される。このような混合物に存在する多様性は、変異 誘発再編成により産生されるランダムな変異よりも有意義である。例えば、単一 の種由来の関連した遺伝子のレパートリー（例えば、免疫系の既存の多様性）、 または多くの異なる種から得られる関連した遺伝子を使用し得ることが意図され る。実施例７．６つの変異体CDR全てのライブラリーのDNA再編成による抗体A10Bの改 善。 A10B scFv抗体、マウス抗ウサギIgGは、Pharmacia（Milwaukee WI）から寄贈 された。pCANTAB5ファージディスプレイベクターを使用する市販のPharmaciaフ ァージディスプレイシステムを使用した。 本来のA10B抗体は、低いアビディティのみを再現性よく有した。というのは、 （ファージELISA(Pharmaciaアッセイキット)またはファージタイターにより測定 したところ）固定化抗原（ウサギIgG）に弱く結合するクローンのみが得られた からである。競合アッセイにおいてA10B抗体結合の50%阻害を生じたウサギIgGの 濃度は、13ピコモル濃度であった。観察された低いアビディティはまた、A10Bク ローンの不安定さに起因し得る。 A10B scFv DNAを製造業者の指示に従い配列決定した（United States Biochem ical Co.，Cleveland OH）。Kabat（33）との比較に基づくと、この配列は、既 存の抗体と同様であった。 １）ファージDNAの調製 A10B野生型抗体遺伝子を有するファージDNA（10μl）を、99℃にて10分間イン キュベートし、次いで72℃にて２分間インキュベートした。PCR混合物（50mM KC l、10mM Tris-HCl pH 9.0、0.1％ Triton X-100、200μM 各dNTP、1.9mM MgCl） 、0.6μmのそれぞれのプライマー、および0.5μl Taq DNAポリメラーゼ（Promeg a，Madison WI）をファージDNAに添加した。PCRプログラムを[94℃30秒間、45℃ 30秒間、72℃45秒間]の35サイクルにわたって実施した。用いたプライマーは： であった。 次いで850bpのPCR産物を電気泳動し、そして２％低融点アガロースゲルから精 製した。 ２）フラグメント化 300ngのゲル精製した850bpのバンドを、20分間室温にて、50mM Tris-HCl pH 7 .5、10mM MgCl中で0.18単位のDNAse I（Sigma，St．Louis MO）で消化した。消 化したDNAを、２％低融点アガロースゲルにおいて分離し、そして50〜200bp間の バンドをゲルから精製した。 ３）試験ライブラリーの構築 本実験の目的は、CDRの挿入が効果的であるか否かを試験することである。 内部に制限酵素部位を有する以下のCDR配列を合成した。「CDR H」は、抗体の Ｈ鎖におけるCDRを意味し、「CDR L」は、抗体のＬ鎖におけるCDRを意味する。 制限部位を有するCDRオリゴ： 上記工程(2)からの50〜200bpの精製A10B抗体DNAフラグメントにCDRオリゴを過 剰な10倍のモル量で添加した。PCR混合物(50mM KCl、10mM Tris-HCl pH9.0、0.1 % Triton X-100、1.9mM MgCl、200μmの各dNTP、0.3μl Taq DNAポリメラーゼ (Promega、Madison WI)、総容積50μl)を添加し、そして94℃で１分間、72℃で １分間、次いで35サイクル：94℃で30秒間、55℃で30秒間、72℃で30秒間の再編 成プログラムを行った。 １μlの再編成混合液を100μlのPCR混合物(50mM KCl、10mM Tris-HCl pH9.0、 0.1% Triton X-100、200μmの各dNTP、1.9mM MgCl、それぞれ0.6μMの２つの外 側プライマー(配列番号26および27、下記参照のこと)、0.5μl Taq DNAポリメラ ーゼ)に添加し、そしてPCRプログラムを30サイクル[94℃で30秒間、45℃で30秒 間、72℃で45秒間]行った。得られる850塩基対サイズのDNAフラグメントの混合 液をフェノール/クロロホルム抽出し、そしてエタノール沈殿させた。 外側プライマーは： 850bpのPCR生成物を制限酵素SfiIおよびNotIで消化し、低融点アガロースゲル から精製し、そしてPharmacia、Milwaukee WIから得たpCANTAB5発現ベクターに 連結した。Invitrogen(San Diego CA)により記載される方法に従って、連結した ベクターをTG1細胞(Pharmacia、Milwaukee WI)にエレクトロポレートし、そして 単一のコロニーについてプレートした。 得られるコロニー由来のDNAを100μlのPCR混合物(50mM KCl、10mM Tris-HCl p H9.0、0.1% Triton X-100、200μmの各dNTP、1.9mM MgCl、0.6μMの外側プライ マー１(配列番号27、下記参照のこと)および６つの内側プライマー(配列番号40 〜45；下記参照のこと)、および0.5μlのTaq DNAポリメラーゼ)に添加し、そし て35サイクル[94℃で30秒間、45℃で30秒間、72℃で45秒間]でPCRプログラムを 行った。PCR生成物のサイズを、アガロースゲル電気泳動により測定し、そして 制限部位を有するどのCDRが挿入されたのかを決定するために用いた。 CDR内側プライマー： ６つの合成CDRは、野生型A10B抗体DNAの予想された位置に挿入された(図７)。 これらの研究は、特定のクローン中の６つのCDRはそれぞれ制限部位を有するCDR になるわずかな可能性を有するが、ほとんどのクローンは少なくとも１つの制限 部位を有するCDRを保有し、そして制限部位を有するCDRの可能な任意の組み合わ せが生成されたことを示した。 ４）変異相補性決定領域(「CDR」)の構築 本発明者らの配列データに基づき、６つのCDRに対応する６オリゴヌクレオチ ドを作製した。CDR(Kabat定義)を70(個の存在塩基):10:10:10の比率で合成的に 変異を誘発し、そして約20塩基のフランキング配列により5'末端および3'末端側 に側面を接しさせた。このフランキング配列は、変異を誘発しない抗体遺伝子フ ラグメントの混合物に過剰なモル量で混合する場合、CDRの取り込みに対して相 同性を提供する。得られる変異配列を以下に示す。 CDRライブラリーのオリゴ 太字体かつ下線を付した配列は、70:10:10:10のヌクレオチド(ここで70％は野生 型ヌクレオチド)の混合物を用いて合成した変異配列であった。 過剰な10倍のモル量のCDR変異オリゴを、上記工程(2)からの長さ50〜200bpの 精製A10B抗体DNAフラグメントに添加した。PCR混合物(50mM KCl、10mM Tris-HCl pH9.0、0.1% Triton X-100、1.9mM MgCl、200μmの各dNTP、0.3μlのTaq DNAポ リメラーゼ(Promega、Madison WI)、総容積50μl)を添加し、そして94℃で１分 間、72℃で１分間、次いで35サイクル：[94℃で30秒、55℃で30秒、72℃で30秒] の再編成プログラムを行った。 １μlの再編成した混合物を100μlのPCR混合物(50mM KCl、10mM Tris-HCl pH9 .0、0.1% Triton X-100、200μmの各dNTP、1.9mM MgCl、それぞれ0.6μMの２つ の外側プライマー(配列番号26および27、下記参照のこと)、0.5μlのTaq DNAポ リメラーゼ)に添加し、そして30サイクル[94℃で30秒間、45℃で30秒間、72℃で 45 秒間]でPCRプログラムを行った。得られる850塩基対サイズのDNAフラグメントの 混合物をフェノール/クロロホルム抽出し、そしてエタノール沈殿させた。 外側プライマーは： ５）scFV抗体DNAのpCANTAB5へのクローニング 850bpのPCR生成物を制限酵素SfiIおよびNotIで消化し、低融点アガロースゲル から精製し、そしてPharmacia、Milwaukee WIから得たpCANTAB5発現ベクターに 連結した。Invitrogen(San Diego CA)により記載される方法に従って連結したベ クターをTG1細胞(Pharmacia Milwaukee WI)にエレクトロポレートし、そして製 造業者により推薦されるガイドラインに従ってヘルパーファージを用いてファー ジライブラリーを増殖させた。 この様式で生成したライブラリーを、６サイクルの選択を使用して、改善され た抗体の存在についてスクリーニングした。 ６）高親和性クローンの選択 96ウェルのマイクロタイタープレートの15ウェルを、ウサギIgG(Jackson Immu noresearch、Bar Harbor ME)で10μg/ウェル、37℃で１時間コートし、次いでPB S中の２%のノンファットドライミルクで37℃で１時間ブロックした。 100μlのファージライブラリー(１×1010cfu)を100μlの２%のミルクで室温で 30分間ブロックし、次いて15ウェルのそれぞれに添加し、37℃で１時間インキュ ベートした。 次いで、0.5%のTween-20を含有するPBSを用い、37℃で１回の洗浄あたり10分 間でウェルを３回洗浄した。結合したファージを100μlの溶出緩衝液(Glycine-H Cl、pH2.2)で溶出し、続いて2MのTris pH7.4で迅速に中和し、そしてファージ生 産のためにトランスフェクションした。この選択サイクルを６回反復した。 ６サイクルの後、個々のファージクローンを拾い、そしてファージELISAによ り相対的な親和性を比較し、そしてウサギIgGに対する特異性をPharmacia(Milwa ukee WI)製のキットを用いて製造業者により推薦される方法に従ってアッセイし た。 ウエスタンアッセイにより試験した場合、最良のクローンは、野生型A10Bと比 較して約100倍の改善された発現レベルを有した。最良のクローンを用いる競合 アッセイにおいて50%の阻害を生じたウサギIgGの濃度は１ピコモル濃度であった 。最良のクローンはウサギ抗原に対する特異性に再現性が認められた。ファージ によりディスプレイされる抗体のコピー数は増加するようてある。実施例８. 部分的遺伝子のダイレクトリピートによるインビボでの組換え プラスミドを２つの部分で構築した。この２つの部分は、これらの２つのダイ レクトリピートの共通範囲間の組換えが完全長の活性組換え遺伝子をもたらすこ とを示す同一遺伝子(β-ラクタマーゼ)の不活性コピーである。 細菌TEM-1βラクタマーゼ遺伝子を保有するpUC18誘導体を使用した(Yanish-Pe rronら、1985、Gene 33:103-119)。TEM-1βラクタマーゼ遺伝子(「Bla」)は、約 0.02μg/mlのセフォタキシムに対する耐性を細菌に与える。２つのプライマーを 用いるベクター配列のPCRにより、Sfi1制限部を、5'側のプロモーターとβラク タマーゼ遺伝子の3'末端とに加えた。 ２つのプライマーの配列： および他の２つのプライマーを用いるβラクタマーゼ遺伝子配列のPCRによる場 合： ２つの反応生成物をSfi1で消化し、混合し、連結し、そしてこれを用いて以下 に記載される手順によりコンピテントなE.coli菌を形質転換した。得られたプラ スミドをpUC182Sfi-Bla-Sfiとした。このプラスミドはBLA遺伝子およびP-3プロ モーターを保有するSfi1フラグメントを含む。 pUC182Sfi-Bla-Sfiを保有するE.coli XL1-blue(Stratagen、San Diego CA)に 対するセフォタキシムの最小阻害濃度は、37℃、24時間後で0.02μg/mlであった 。 pBR322のテトラサイクリン遺伝子を相同性範囲を用いてpUC18Sfi-Bla-Sfiにク ローニングし、pBR322TetSfi-Bla-Sfiを得た。次いでSspIおよびFspIを用いるpB R322TetSfi-Bla-Sfiの制限消化および平滑末端連結によりTEM-1遺伝子を欠失さ せ、pUC322TetSfi-Sfiを得た。 TEM-1遺伝子の重複領域を標準的なPCR技術および以下のプライマーを用いて増 幅した： ２つの得られるDNAフラグメントをSfi1およびBstX1で消化し、pBR322TetSfi-S fiのSfi部位に連結した。得られるプラスミドをpBR322Sfi-BL-LA-Sfiとした。プ ラスミドの地図ならびに機能的β-ラクタマーゼのプラスミド内組換えおよび再 形成のスキームを図９に示す。 このプラスミドをTG-1細胞またはJC8679 E.coli細胞のいずれかにエレクトロ ポレートした。E.coli JC8679はRecBC sbcA(Olinerら、1993、NAR 21:5192)であ る。この細胞をテトラサイクリンを含有する固体寒天プレート上にプレートした 。次いで、増殖したこれらのコロニーを100μg/mlのアンピリシンを含有する個 体寒天プレート上にプレートし、そして生存するコロニーの数をカウントした。 アンピリシン耐性を示したこれらの形質転換体中のβ-ラクタマーゼ遺伝子挿入 物を、 て標準的なPCR技術により増幅し、そして挿入物の長さを測定した。１kbの挿入 物の存在は、図９および表５に示されるように遺伝子がうまく組換えられたこと を示す。 約17%〜25%のテトラサイクリン耐性コロニーはアンピシリン耐性でもあり、そ してすべてのアンピシリン耐性コロニーは、コロニーPCRにより決定されるよう に、正確に組換えられた。それゆえ、同じプラスミドに位置する部分的遺伝子は うまく組換えられて機能的遺伝子を作製する。実施例９. 完全長遺伝子のダイレクトリピートによるインビボ組換え β-ラクタマーゼ遺伝子の異なる対立遺伝子の２つの完全長コピーを有するプ ラスミドを構築した。２つの遺伝子の相同組換えによりこの遺伝子の１つの組換 え完全長コピーを得た。 pBR322TetSfi-SfiおよびpBR322TetSfi-Bla-Sfiの構築については上で述べた。 β-ラクタマーゼ遺伝子の２つの対立遺伝子を以下のように構築した。２つのP CR反応をpUC18Sfi-Bla-Sfiをテンプレートとして用いて行った。１つの反応は以 下のプライマーを用いて行った。 第２のPCR反応を以下のプライマーを用いて行った： これにより２つのBla遺伝子(一方のBla遺伝子は5'末端Sfi1部位および3'末端B stX1部位を有し、他方のBla遺伝子は5'末端BstX1部位および3'末端Sfi1部位を有 する)を得た。 これらの２つの遺伝子をBstX1およびSfi1で消化し、そしてSfi1消化プラスミ ドpBR322TetSfi-Sfiに連結した後、Bla遺伝子のタンデムリピートを有するプラ スミド(pBR322-Sfi-2BLA-Sfi)を得た。（図10を参照のこと） このプラスミドをE.coli細胞内にエレクトロポレートした。この細胞を15μg/ mlのテトラサイクリンを含有する固体寒天プレート上にプレートした。次いで増 殖したこれらのコロニーを100μg/mlのアンピシリンを含有する固体寒天プレー ト上にプレートし、そして生存するコロニーの数をカウントした。アンピシンリ ン耐性を示すこれらの形質転換体中のBla挿入物を、実施例８に記載される方法 およびプライマーを使用する標準的なPCR技術により増幅した。１kbの挿入物の 存在は、表６に示されるように重複遺伝子(duplicate gene)が組換えられたこと を示す。 コロニーPCRにより、タンデムリピートが効率的に組換えられて、単一の組換 え遺伝子を形成することを確認した。実施例10. 多数サイクルのプラスミド内のダイレクトリピート組換え さらに迅速に耐性細胞を生産するために多数サイクルの組換えを用い得るか否 かを決定するために、実施例９に記載される多数サイクルの方法を行った。 マイナスの組換えコントロールは、β-ラクタマーゼ遺伝子の１つのコピーか らなり、一方プラスの組換え実験は、ダイレクトリピートとしてのβ-ラクタマ ーゼの２つのコピーを挿入する工程からなった。テトラサイクリンマーカーを用 いて、各ラウンドにおいてセフォタキシム耐性について選択されたコロニーの数 を等しくして連結効率に対して補正をした。 第１ラウンドにおいて、pBR322TetSfi-Bla-SfiをEcrIで消化し、誤りがちなPC Rのための正常なPCR混合物とCadwell PCR混合物(CadwellおよびJoyce(1992)PCR Methods and Applications 2:28-33)との１：１の混合物(１ml)を用いてPCRにか けた。PCRプログラムは、最初に70℃で２分間、次いで94℃で30秒間、52℃で30 秒間、および72℃で３分間＋６秒/１サイクルの30サイクルであり、続いて72℃ で10分間であった。 １つのBla遺伝子コントロールプラスミドを作製するためのPCR反応で使用され るプライマーは、プライマー2650(配列番号50)およびプライマー2719(配列番号5 5)5’TTAAGGGATTTTGGTCATGAGATT 3'であった。これはフラグメント＃59としてひ とまとめに消化され、増幅されたDNAフラグメントの混合された集団を生じた。 これらのフラグメントは多くの異なる変異を有した。 ２つのBla遺伝子プラスミドを作製するために２つの異なるPCR反応で使用され るプライマーは、第１の遺伝子についてはプライマー2650(配列番号50)およびプ ライマー2649(配列番号51)であり、そして第２の遺伝子についてはプライマー26 48(配列番号54)およびプライマー2719(配列番号55)であった。これは、２つの増 幅したDNAフラグメント：フラグメント＃89(プライマー2648および2719で増幅し た)およびフラグメント＃90(プライマー2650および2649で増幅した)それぞれの 混合された集団を生じた。それぞれの場合、多くの異なる変異体がそれぞれのフ ラグメントの混合された集団に導入された。 誤りがちなPCRの後、増幅されたDNAフラグメント＃59の集団をSfi1で消化し、 次いでpBR322TetSfi-Sfi内にクローニングしてプラスミドpBR322Sfi-Bla-Sfi1の 混合された集団を作製した。 誤りがちなPCRの後、増幅されたDNAフラグメント＃90および＃89の集団をSfiI およびBstXIで50℃で消化し、そしてpBR322TetSfi-Sfiに連結してプラスミドpBR 322TetSfi-2Bla-Sfi1の混合された集団を作製した(図10)。 プラスミドpBR322Sfi-Bla-Sfi1およびpBR322Sfi-2Bla-Sfi1をE.coli JC8679内 にエレクトロポレートし、そして異なる濃度のセフォタキシムを有する寒天プレ ートに置いて耐性株について選択し、そしてテトラサイクリンプレートに置いて 力価を測定した。 等しい数のコロニーを(テトラサイクリン上で増殖するコロニーの数に基づい て)拾い、LB-tet中で増殖させ、そしてコロニーからDNAを抽出した。これは組換 えの１ラウンドである。このDNAをEcrIで消化し、そして上記のように第２ラウ ンドの誤りがちなPCRに用いた。 ５ラウンド後、１つのフラグメントプラスミドに対するセフォタキシムのMIC( 最小阻害濃度)は0.32であったが、２つのフラグメントプラスミドについてのMIC は1.28であった。結果は、５サイクル後の組換えにより得られる耐性は、インビ ボ組換えの存在下では４倍高かったことを示す。実施例11. フラグメントのエレクトロポレーションによるインビボ組換え pUC18Sfi-Bla-Sfiを含む適切なE.coli細胞を記載のように調製した。プラスミ ドpUC18Sfi-Bla-Sfiは、前出に記載のような標準的なTEM-1 β-ラクタマーゼ遺 伝子を含有する。 pUC18Sfi-cef-Sfi(クローンST2)(Stemmer WPC（1994）Nature 370:389-91、本 明細書中で参考として援用される)由来のTEM-1由来セフォタキシム耐性遺伝子を 得た。このプラスミドは、このプラスミドを有するE.coliにセフォタキシムにつ いての640μg/mlのMICを与える。１つの実験において、完全なプラスミドpUC18S fi-cef-Sfi DNAを、プラスミドpUC18Sfi-Bla-Sfiを有するE.coli細胞内にエレク トロポレートした。 別の実験において、pUC18Sfi-cef-Sfi由来のセフォタキシム遺伝子を有するDN Aフラグメントを、プライマー2650(配列番号50)および2719(配列番号55)を用い るPCRにより増幅した。得られる１kbのPCR生成物をDNアーゼにより100bp未満のD NAフラグメントに消化し、そしてこれらのフラグメントをすでにpUC18Sfi-Bla-S fiを有するコンピテントなE.coli細胞内にエレクトロポレートした。 次いで、両方の実験からの形質転換された細胞を、セフォタキシムの種々の濃 度を有する寒天プレート上に形質転換された細胞をプレートすることによりその セフォタキシムに対する耐性についてアッセイした。結果を表７に示す。 結果から、エレクトロポレーション後、ST-2 Cef遺伝子全体が細菌ゲノムまた はプラスミドのいずれかに挿入されたように思われる。たいていの挿入物は相同 的であるため、この遺伝子がプラスミドに挿入され、野生型遺伝子を置換したこ とが予想される。ST-2由来のCef遺伝子のフラグメントはまた、効率的にプラス ミド中の野生型遺伝子内に挿入された。野生型遺伝子(全体またはフラグメント で)の導入を伴い、そして非DNAの導入を伴う場合は、セフォタキシム耐性の急激 な増加は観察されなかった。それゆえ、ST-2フラグメントが野生型フラグメント よりも極めて高いセフォタキシム耐性を生じることが示された。耐性を増加させ る遺伝子プールから調製されたフラグメントの反復された挿入物が、耐性の増加 をもたらすことが意図される。 従って、ST-2遺伝子フラグメントによりセフォタキシム耐性の増加を生じるこ れらのコロニーを単離し、そしてプラスミドDNAを抽出した。このDNAを上記の方 法によるPCRを用いて増幅した。増幅したDNAをDNアーゼで消化してフラグメント (＜100bp)にし、そして２〜４μgのフラグメントを上記のようにすでにpUC322Sf i-Bla-Sfiを含有するコンピテントなE.coli細胞内にエレクトロポレートした。 形質転換された細胞を種々の濃度のセフォタキシムを含有する寒天上にプレート した。 コントロールとしてpUC18Sfi-Kan-Sfiを有するコンピテントなE.coliも使用し た。pUC18Sfi-cef-SfiのPCR生成物の消化物からのDNAフラグメントをこれらの細 胞内にエレクトロポレートした。カナマイシン遺伝子とβ-ラクタマーゼ遺伝子 との間には相同性は存在せず、従って組換えは起こらない。 この実験を２ラウンド反復した。結果を表８に示す。 実施例12 組換え形式の決定 本実験は、どの組換え形式が1サイクルあたり最大の組換え体を生成するかを 決定するために設計された。 第１のアプローチにおいて、ベクターpUC185Sfi-Bla-SfiをPCRプライマーで増 幅して、大フラグメントおよび小フラグメントを生成した。大フラグメントはプ ラスミドおよびBla遺伝子部分を有する末端を有し、そして小フラグメントはBla 遺伝子の中間部分をコードした。完全なBla遺伝子を有する第３のフラグメント を実施例８の方法によりPCRを使用して作製した。より大きなプラスミドフラグ メントおよび完全なBla遺伝子を有するフラグメントを上記の方法により同時にE coli JC8679細胞内にエレクトロポレートし、そして形質転換体を異なる濃度の セフォタキシム上にプレートした。 第２のアプローチにおいて、ベクターpUC18Sfi-Bla-Sfiを増幅して、上記第１ のアプローチにおけるように単離された大プラスミドフラグメントを生成した。 ２つのフラグメントはそれぞれ完全なBla遺伝子の一部を有し、その結果２つの フラグメントが共になって完全なBla遺伝子にまたがる２つのフラグメントもま たPCRにより得た。大プラスミドフラグメントおよび２つのBla遺伝子フラグメン トをすべてコンピテントなE.coli JC8679細胞内にエレクトロポレートし、そし て形質転換体を種々の濃度のセフォタキシム上にプレートした。 第３のアプローチにおいて、ベクターとプラスミドとの両方をE.coli JC8679 細胞内にエレクトロポレートし、そして形質転換体を種々の濃度のセフォタキシ ム上にプレートした。 第４のアプローチにおいて、完全なBla遺伝子を、すでにベクターpUCSfi-Sfi を含むE.Coli JC8679細胞内にエレクトロポレートし、そして形質転換体を種々 の濃度のセフォタキシム上にプレートした。コントロールとしてE.coli JC8679 細胞を完全なBla遺伝子またはベクター単独のいずれかでエレクトロポレートし た。 結果を図11に表す。ベクターへの２つのフラグメントの挿入の効率は、完全な Bla遺伝子を有する１つのフラグメントが使用される場合より100倍低い。第３の アプローチは、挿入の効率は遊離DNA末端の存在に依存することを示した。なぜ なら、このアプローチでは組換え体が得られなかったからである。しかし、第３ のアプローチの結果もまた、ベクターのエレクトロポレーションの低効率による ものであった。発現ベクターがすでにコンピテントな細胞内にある場合、ベクタ ーのエレクトロポレーションの効率はもはや要因ではなく、効率的な相同組換え は非切断のベクターを用いてさえ達成され得る。実施例12. ベクターの性能を最適化するカセット再編成のためのキット 最適化された表現型(例えば、クローン化遺伝子のようなベクターがコードさ れる配列の最大の発現)を与え得るベクターを提供するために、再編成され得る 種々のカセットを含むキットが提供され、そして最適化された再編成体が選択さ れ得る。図12は、それぞれの遺伝子座が複数のカセットを有する１つの実施態様 を概略的に示す。例えば、細菌の発現システムにおいて、図13はそれぞれの遺伝 子座で使用される例示のカセットを示す。与えられた遺伝子座のそれぞれのカセ ット(例えば、本実施例のすべてのプロモーター)は、隣接する遺伝子座のカセッ トのフランキング配列に重複し得、そしてまた、好ましくは相同組換えまたは非 相同性組換えに関与し得る(例えば、lox/creまたはflp/frt系)実質的に同一な配 列と隣接し、遺伝子座内であるが実質的に遺伝子座間ではないカセットの再編成 を提供するようにする。 カセットはPCRフラグメントとしてキットに供給されるが、それぞれのタイプ のカセットまたは個々のカセットの種は個別のチューブにパッケージされる。ベ クターライブラリーは、それぞれの遺伝子座のカセットの重複フランキング配列 と隣接する遺伝子座のカセットとのハイブリダイゼーションによって、プラスミ ド全体またはその実質的な部分を組立てるチューブの内容物を組み合わせること により作製される。組立てられたベクターは目的の未定の遺伝子へ連結されてベ クターライブラリーを形成する。ここで、それぞれのライブラリーのメンバーは 目的の未決定の遺伝子およびカセットの結合により決定されるカセットの組み合 わせを含む。ベクターは適切な宿主細胞内に移され、そしてこの細胞は発現に適 切な条件下で培養され、そして所望の表現型が選択される。 本発明は、好適な実施例と考えられるものに関して記載されているが、本発明 が開示された実施例に制限されないことが理解されるべきである。反対に、本発 明は添付された請求の範囲の趣旨および範囲内に包含される種々の改変および同 等の組立てを包含することが意図されている。 すべての刊行物、特許、および特許出願は、それぞれ個々の刊行物、特許、ま たは特許出願が特別にかつ個々にその全体が参考として援用されると示される場 合と同じ程度に、本明細書中においてそれらの全体が参考として援用される。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)， ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，Ｃ Ｈ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ， ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，Ｍ Ｗ，ＭＸ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ， ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １．１つ以上の変異を鋳型２本鎖ポリヌクレオチドへ導入するための方法であっ て、ここで該鋳型２本鎖ポリヌクレオチドは、所望の大きさの２本鎖のランダム フラグメントに切断され、以下の工程： a)得られる２本鎖フラグメントの集団に１つ以上の１本鎖オリゴヌクレオチド または２本鎖オリゴヌクレオチドを添加する工程であって、ここで該オリゴヌク レオチドが、鋳型ポリヌクレオチドに対して同一な範囲および非相同な範囲を含 む、工程； b)得られる２本鎖のランダムフラグメントおよびオリゴヌクレオチドの混合物 を１本鎖フラグメントに変性する工程； c)得られる１本鎖フラグメントの集団を、該１本鎖フラグメント間の同一の領 域で該１本鎖フラグメントがアニールし、そして変異誘発された２本鎖ポリヌク レオチドを形成する条件下で、ポリメラーゼとともにインキュベートする工程； および d)(b)および(c)の工程を反復する工程； を包含する、方法。 ２．２本鎖フラグメントの混合物中の特定の２本鎖フラグメントの濃度が、全DN Aの１重量%よりも低い、請求項１に記載の方法。 ３．異なる特定の２本鎖フラグメントの数が、少なくとも約100である、請求項 １に記載の方法。 ４．２本鎖フラグメントの大きさが約５bp〜５kbである、請求項１に記載の方法 。 ５．変異誘発される２本鎖ポリヌクレオチドの大きさが50bp〜100kbを包含する 、請求項１に記載の方法。 ６．生物学的活性を有する組換えタンパク質を生成する方法であって、以下の工 程： a)野生型タンパク質をコードする２本鎖鋳型ポリヌクレオチドを含有するサン プルを、所望の大きさを有するランダムな２本鎖フラグメントへの該鋳型ポリヌ クレオチドの切断を提供するような条件下で処理する工程； b)得られるランダムフラグメントの集団に１つ以上の１本鎖オリゴヌクレオチ ドまたは２本鎖オリゴヌクレオチドを添加する工程であって、ここで該オリゴヌ クレオチドは鋳型ポリヌクレオチドに同一な範囲および非相同な範囲を含有する 、工程； c)得られる２本鎖のランダムフラグメントおよびオリゴヌクレオチドの混合物 を１本鎖フラグメントに変性する工程； d)得られる１本鎖フラグメントの集団を、該同一な範囲で該１本鎖フラグメン トがアニールし、そして変異誘発された２本鎖ポリヌクレオチドを形成する条件 下で、ポリメラーゼとともにインキュベートする工程； e)(c)および(d)の工程を反復する工程；および f)該変異誘発された２本鎖ポリヌクレオチドに由来する組換えタンパク質を発 現する工程； を包含する、方法。 ７．工程(a)における２本鎖フラグメントの混合物中の特定の２本鎖フラグメン トの濃度が、全DNAの１重量%よりも低い、請求項６に記載の方法。 ８．工程(a)における異なる特定の２本鎖フラグメントの数が、少なくとも約100 個である、請求項６に記載の方法。 ９．２本鎖フラグメントの大きさが約５bp〜５kbである、請求項６に記載の方法 。 １０．変異誘発される２本鎖ポリヌクレオチドの大きさが50bp〜100Kbである、 請求項６に記載の方法。 １１．組換えタンパク質の集団に由来する所望の組換えタンパク質を選択する工 程をさらに包含する、請求項６に記載の方法。 １２．キメラなポリペプチドを得る方法であって、以下の工程： a)異なる２本鎖鋳型ポリヌクレオチドを含有するサンプルを処理する工程、こ こで該異なる鋳型ポリヌクレオチドが、所望な大きさを有する２本鎖のランダム フラグメントへの該鋳型ポリヌクレオチドの切断を提供するような条件下で、同 一な範囲および非相同な範囲を含む、工程； b)工程(a)で生成される処理サンプルに含有の得られる２本鎖のランダムな鋳 型フラグメントを１本鎖フラグメントに変性する工程； c)該同一な範囲での標的１本鎖フラグメントのアニーリング、および鋳型ポリ ヌクレオチド配列を含有するキメラな２本鎖ポリヌクレオチド配列の形成を提供 する条件下で、得られる１本鎖フラグメントの集団をポリメラーゼとともにイン キュベートする工程；および d)所望により(b)および(c)の工程を反復する工程； を包含する、方法。 １３．工程(a)における２本鎖フラグメントの混合物中の特定の２本鎖フラグメ ントの濃度が、全DNAの１重量%よりも低い、請求項１２に記載の方法。 １４．工程(a)における異なる特定の２本鎖フラグメントの数が、少なくとも100 個である、請求項１２に記載の方法。 １５．２本鎖フラグメントの大きさが約５bp〜５kbである、請求項１２に記載の 方法。 １６．変異誘発される２本鎖ポリヌクレオチドの大きさが50bp〜100kbを包含す る、請求項１２に記載の方法。 １７．鋳型ポリヌクレオチドを複製する方法であって、インビトロにおける１本 鎖鋳型ポリヌクレオチドと鋳型ポリヌクレオチドの切断および変性から得られる 小さなランダムな１本鎖フラグメントとを結合する工程、および２本鎖鋳型ポリ ヌクレオチドの集団が形成される条件下、核酸ポリメラーゼの存在下で核酸フラ グメントの該混合物をインキュベートする工程、 を包含する、方法。 １８．アフィニティー相互作用スクリーニングまたは表現型のスクリーニングに 適切なディスプレイされたペプチドまたはディスプレイされた抗体のライブラリ ーを生成する方法であって、以下の工程： (１)ディスプレイされたペプチドまたはディスプレイされた抗体、および該デ ィスプレイされたペプチドまたはディスプレイされた抗体をコードする関連性ポ リヌクレオチドを包含する第１の複数の選択されるライブラリーメンバーを得、 そして該関連性ポリヌクレオチドまたはそのコピーを得る工程であって、ここで 該関連性ポリヌクレオチドが実質的に同一な配列の領域を含有する、工程、およ び (２)該関連性ポリヌクレオチドまたはコピーをプールし、そしてフラグメント 化して、PCR増幅に適切な条件下でそのフラグメントを形成し、PCR増幅を実施し 、そしてそれにより該フラグメントを相同組換えして組換えポリヌクレオチドの 再編成プールを形成する工程であって、それによって該再編成プールの組換えポ リヌクレオチドの実質画分が、該第１の複数の選択されるライブラリーメンバー に存在しない、工程、 を包含する方法。 １９．前記ポリヌクレオチドまたはコピーに変異を導入する工程をさらに包含す る、請求項１８に記載の方法。 ２０．前記変異がPCR増幅を実施することにより導入される、請求項１９に記載 の方法。 ２１．前記PCR増幅が誤りがちなPCRである、請求項２０に記載の方法 ２２．予め決定された高分子に結合する能力を有する個々の再編成ライブラリー メンバーを同定するために、再編成プールの前記ライブラリーメンバーをスクリ ーニングする、さらなる工程を包含する、請求項１８に記載の方法。 ２３．前記第１の複数の選択されるライブラリーメンバーが、予め決定された分 子に対する結合アフィニティー以外の表現型の特徴について選択されることによ り得られる、請求項１８に記載の方法。 ２４．前記第１の複数の選択されるライブラリーメンバーがプールされ、そして フラグメント化され、そしてインビトロにおけるPCRにより相同組換えされる、 請求項１８に記載の方法。 ２５．前記第１の複数の選択されるライブラリーメンバーが、インビトロにおい てプールされ、そしてフラグメント化されて、得られるフラグメントが宿主細胞 または生物体へ移され、そして相同組換えされて、インビボにおける再編成ライ ブラリーメンバーを形成する、請求項１８に記載の方法。 ２６．前記第１の複数の選択されるライブラリーメンバーがエピソーム的に複製 可能なベクターにクローニングされるかまたは増幅され、多数の該ベクターが細 胞内へ移され、そして相同組換えされて、インビボにおける再編成ライブラリー メンバーを形成する、請求項１８に記載の方法。 ２７．アフィニティー相互作用スクリーニングまたは表現型のスクリーニングに 適切なディスプレイされたペプチドまたはディスプレイされた抗体のライブラリ ーを生成する方法であって、以下の工程： (１)ディスプレイされたペプチドまたはディスプレイされた抗体、および該デ ィスプレイされたペプチドまたはディスプレイされた抗体をコードする関連性ポ リヌクレオチドを包含する第１の複数の選択されるライブラリーメンバーを得、 そして該関連性ポリヌクレオチドまたはそのコピーを得る工程であって、ここで 該関連性ポリヌクレオチドが実質的に同一な配列の領域を含有する、工程、およ び (２)該関連性ポリヌクレオチドまたはコピーを、エピソーム的に複製可能なベ クターにクローン化するかまたは増幅し、そして多数の該ベクターを細胞内へ移 し、そして相同組換えして、インビボにおける再編成ライブラリーメンバーを形 成する工程、 を包含する方法。 ２８．前記ポリヌクレオチドまたはそのコピーに変異を導入する工程をさらに包 含する、請求項２７に記載の方法。 ２９．前記エピソーム的に複製可能なベクターが、複数の関連性ポリヌクレオチ ドまたはそのコピーのダイレクトリピートを含有する、請求項２７に記載の方法 。 ３０．アフィニティー相互作用スクリーニングに適切なディスプレイされた抗体 のライブラリーを生成する方法であって、以下の工程： (１)ディスプレイされた抗体、および該ディスプレイされた抗体をコードする 関連性ポリヌクレオチドを包含する第１の複数の選択されるライブラリーメンバ ーを得、そして該関連性ポリヌクレオチドまたはそのコピーを得る工程であって 、ここで該関連性ポリヌクレオチドが、実質的に同一な可変領域のフレームワー ク配列の領域を含有する、工程、および (２)該関連性ポリヌクレオチドまたはコピーをプールし、そしてフラグメント 化して、PCR増幅に適切な条件下でそのフラグメントを形成し、PCR増幅を実施し 、そしてそれにより該フラグメントを相同組換えしてCDRの新規の組み合わせを 包含する組換えポリヌクレオチドの再編成プールを形成する工程であって、そ れによっCDRの組み合わせを含む該再編成プールの組換えポリヌクレオチドの実 質画分が、該第１の複数の選択ライブラリーメンバーに存在しない、工程、 を包含する方法。 ３１．前記再編成プールがアフィニティースクリーニングを受けて、予め決定さ れたエピトープに結合する再編成ライブラリーメンバーを選択し、そしてそれに よって複数の選択される再編成ライブラリーメンバーを選択するさらる工程を包 含する、請求項３０に記載の方法。 ３２．１〜約1000サイクルで、複数の選択される再編成ライブラリーメンバーを 再編成し、そしてスクリーニングする、さらなる工程を包含する、請求項３１に 記載の方法。
JP7521977A 1994-02-17 1995-02-17 ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発 Pending JPH10500561A (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/198,431 US5605793A (en) 1994-02-17 1994-02-17 Methods for in vitro recombination
US08/198,431 1994-02-17
PCT/US1995/002126 WO1995022625A1 (en) 1994-02-17 1995-02-17 Dna mutagenesis by random fragmentation and reassembly

Related Child Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2000201673A Division JP3393848B2 (ja) 1994-02-17 2000-07-03 ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発
JP2002206303A Division JP3485560B2 (ja) 1994-02-17 2002-07-15 ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JPH10500561A true JPH10500561A (ja) 1998-01-20

Family

ID=22733354

Family Applications (6)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP7521977A Pending JPH10500561A (ja) 1994-02-17 1995-02-17 ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発
JP2000201673A Expired - Fee Related JP3393848B2 (ja) 1994-02-17 2000-07-03 ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発
JP2002206303A Expired - Fee Related JP3485560B2 (ja) 1994-02-17 2002-07-15 ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発
JP2002365621A Withdrawn JP2003174881A (ja) 1994-02-17 2002-12-17 ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発
JP2004174720A Expired - Fee Related JP4067516B2 (ja) 1994-02-17 2004-06-11 ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発
JP2007180396A Withdrawn JP2007244399A (ja) 1994-02-17 2007-07-09 ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発

Family Applications After (5)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2000201673A Expired - Fee Related JP3393848B2 (ja) 1994-02-17 2000-07-03 ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発
JP2002206303A Expired - Fee Related JP3485560B2 (ja) 1994-02-17 2002-07-15 ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発
JP2002365621A Withdrawn JP2003174881A (ja) 1994-02-17 2002-12-17 ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発
JP2004174720A Expired - Fee Related JP4067516B2 (ja) 1994-02-17 2004-06-11 ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発
JP2007180396A Withdrawn JP2007244399A (ja) 1994-02-17 2007-07-09 ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発

Country Status (12)

Country Link
US (14) US5605793A (ja)
EP (4) EP1205547A3 (ja)
JP (6) JPH10500561A (ja)
CN (1) CN1145641A (ja)
AT (2) ATE211761T1 (ja)
AU (3) AU703264C (ja)
CA (1) CA2182393C (ja)
DE (5) DE1094108T1 (ja)
DK (2) DK0752008T3 (ja)
ES (2) ES2165652T3 (ja)
RU (1) RU2157851C2 (ja)
WO (1) WO1995022625A1 (ja)

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003519665A (ja) * 2000-01-14 2003-06-24 ニュー・ホライズンズ・ダイアグノスティックス・コーポレイション 細菌感染の治療処置における、細菌ファージに関連した溶菌酵素の非経口使用
JP2003521933A (ja) * 2000-02-10 2003-07-22 ゼンコー タンパク質ライブラリーに関するタンパク質設計オートメーション
JP2003524416A (ja) * 2000-01-11 2003-08-19 バイエル・バイオサイエンス・エヌ・ヴェー 生物学的サンプル中のエリートイベントｇａｔ−ｚｍ１を同定する方法およびキット
JP2003533228A (ja) * 2000-05-16 2003-11-11 カリフォルニア インスティテュート オブ テクノロジー オキシダーゼ酵素の指向的進化
JP2006500934A (ja) * 2002-10-04 2006-01-12 マックワリー ユニバーシティ ランダムドリフト突然変異誘発
JP2006502706A (ja) * 2002-07-25 2006-01-26 エムジェイ バイオワークス インコーポレーティッド ハイブリッドタンパク質方法および組成物
JP2006504438A (ja) * 2002-11-01 2006-02-09 エヴォジェニクス・ピーティーワイ・リミテッド リバビリンおよび／またはｒｎａレプリカーゼを使用した変異誘発方法
US7122310B2 (en) 2000-10-11 2006-10-17 Sanko Junyaku Co., Ltd. Methods of constructing self-assembly of probes and method of detecting the same
JP2011523555A (ja) * 2008-06-04 2011-08-18 モディクエスト べー．フェー． 抗炎症剤
JP4789271B2 (ja) * 2005-12-02 2011-10-12 シンセティック ゲノミクス、インク． エラーが最小化された核酸分子の合成

Families Citing this family (2410)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5547839A (en) 1989-06-07 1996-08-20 Affymax Technologies N.V. Sequencing of surface immobilized polymers utilizing microflourescence detection
DE69132905T2 (de) * 1990-12-06 2002-08-01 Affymetrix, Inc. (N.D.Ges.D.Staates Delaware) Detektion von Nukleinsäuresequenzen
US6150141A (en) * 1993-09-10 2000-11-21 Trustees Of Boston University Intron-mediated recombinant techniques and reagents
US6406855B1 (en) * 1994-02-17 2002-06-18 Maxygen, Inc. Methods and compositions for polypeptide engineering
US6117679A (en) 1994-02-17 2000-09-12 Maxygen, Inc. Methods for generating polynucleotides having desired characteristics by iterative selection and recombination
US6309883B1 (en) * 1994-02-17 2001-10-30 Maxygen, Inc. Methods and compositions for cellular and metabolic engineering
US6335160B1 (en) 1995-02-17 2002-01-01 Maxygen, Inc. Methods and compositions for polypeptide engineering
US6395547B1 (en) * 1994-02-17 2002-05-28 Maxygen, Inc. Methods for generating polynucleotides having desired characteristics by iterative selection and recombination
US5605793A (en) * 1994-02-17 1997-02-25 Affymax Technologies N.V. Methods for in vitro recombination
US6165793A (en) * 1996-03-25 2000-12-26 Maxygen, Inc. Methods for generating polynucleotides having desired characteristics by iterative selection and recombination
US6995017B1 (en) 1994-02-17 2006-02-07 Maxygen, Inc. Methods for generating polynucleotides having desired characteristics by iterative selection and recombination
US5837458A (en) * 1994-02-17 1998-11-17 Maxygen, Inc. Methods and compositions for cellular and metabolic engineering
US20060257890A1 (en) * 1996-05-20 2006-11-16 Maxygen, Inc. Methods and compositions for cellular and metabolic engineering
US6808904B2 (en) * 1994-06-16 2004-10-26 Syngenta Participations Ag Herbicide-tolerant protox genes produced by DNA shuffling
US7285416B2 (en) * 2000-01-24 2007-10-23 Gendaq Limited Regulated gene expression in plants
ATE524545T1 (de) 1994-08-20 2011-09-15 Gendaq Ltd Verbesserungen bei oder im zusammenhang mit bindeproteinen zur erkennung von dna
GB9824544D0 (en) 1998-11-09 1999-01-06 Medical Res Council Screening system
US7262055B2 (en) 1998-08-25 2007-08-28 Gendaq Limited Regulated gene expression in plants
US6063562A (en) * 1994-09-16 2000-05-16 Sepracor, Inc. In vitro method for predicting the evolutionary response of HIV protease to a drug targeted thereagainst
US7820798B2 (en) * 1994-11-07 2010-10-26 Human Genome Sciences, Inc. Tumor necrosis factor-gamma
US7597886B2 (en) * 1994-11-07 2009-10-06 Human Genome Sciences, Inc. Tumor necrosis factor-gamma
WO1996017932A1 (en) * 1994-12-09 1996-06-13 Wakunaga Seiyaku Kabushiki Kaisha Method of inhibiting non specific hybridization in primer extension
US20010053523A1 (en) * 1995-06-02 2001-12-20 M&E Biotech A/S. Method for identification of biologically active peptides and nucleic acids
US6720140B1 (en) * 1995-06-07 2004-04-13 Invitrogen Corporation Recombinational cloning using engineered recombination sites
US6964861B1 (en) * 1998-11-13 2005-11-15 Invitrogen Corporation Enhanced in vitro recombinational cloning of using ribosomal proteins
US6936289B2 (en) 1995-06-07 2005-08-30 Danisco A/S Method of improving the properties of a flour dough, a flour dough improving composition and improved food products
US6143557A (en) * 1995-06-07 2000-11-07 Life Technologies, Inc. Recombination cloning using engineered recombination sites
US6495357B1 (en) * 1995-07-14 2002-12-17 Novozyme A/S Lipolytic enzymes
US5958672A (en) 1995-07-18 1999-09-28 Diversa Corporation Protein activity screening of clones having DNA from uncultivated microorganisms
US6455254B1 (en) 1995-07-18 2002-09-24 Diversa Corporation Sequence based screening
US6004788A (en) 1995-07-18 1999-12-21 Diversa Corporation Enzyme kits and libraries
US6057103A (en) 1995-07-18 2000-05-02 Diversa Corporation Screening for novel bioactivities
WO1997007206A1 (en) * 1995-08-11 1997-02-27 Okkels, Jens, Sigurd Method for preparing polypeptide variants
AU725609C (en) 1995-08-18 2002-01-03 Morphosys Ag Protein/(poly)peptide libraries
US6713279B1 (en) 1995-12-07 2004-03-30 Diversa Corporation Non-stochastic generation of genetic vaccines and enzymes
US5939250A (en) * 1995-12-07 1999-08-17 Diversa Corporation Production of enzymes having desired activities by mutagenesis
US6352842B1 (en) 1995-12-07 2002-03-05 Diversa Corporation Exonucease-mediated gene assembly in directed evolution
US20030219752A1 (en) * 1995-12-07 2003-11-27 Diversa Corporation Novel antigen binding molecules for therapeutic, diagnostic, prophylactic, enzymatic, industrial, and agricultural applications, and methods for generating and screening thereof
US7018793B1 (en) * 1995-12-07 2006-03-28 Diversa Corporation Combinatorial screening of mixed populations of organisms
US6361974B1 (en) * 1995-12-07 2002-03-26 Diversa Corporation Exonuclease-mediated nucleic acid reassembly in directed evolution
US20020164580A1 (en) * 1995-12-07 2002-11-07 Diversa Corporation Combinatorial screening of mixed populations of organisms
GB9621295D0 (en) * 1995-12-07 1996-11-27 Cambridge Antibody Tech Specific binding members,materials and methods
US6790605B1 (en) * 1995-12-07 2004-09-14 Diversa Corporation Methods for obtaining a desired bioactivity or biomolecule using DNA libraries from an environmental source
US6537776B1 (en) 1999-06-14 2003-03-25 Diversa Corporation Synthetic ligation reassembly in directed evolution
US20020028443A1 (en) * 1999-09-27 2002-03-07 Jay M. Short Method of dna shuffling with polynucleotides produced by blocking or interrupting a synthesis or amplification process
US6939689B2 (en) 1995-12-07 2005-09-06 Diversa Corporation Exonuclease-mediated nucleic acid reassembly in directed evolution
US6238884B1 (en) 1995-12-07 2001-05-29 Diversa Corporation End selection in directed evolution
US6358709B1 (en) 1995-12-07 2002-03-19 Diversa Corporation End selection in directed evolution
US6740506B2 (en) 1995-12-07 2004-05-25 Diversa Corporation End selection in directed evolution
US6764835B2 (en) 1995-12-07 2004-07-20 Diversa Corporation Saturation mutageneis in directed evolution
US5965408A (en) 1996-07-09 1999-10-12 Diversa Corporation Method of DNA reassembly by interrupting synthesis
US20020031771A1 (en) * 1995-12-07 2002-03-14 Short Jay M. Sequence based screening
US5830696A (en) 1996-12-05 1998-11-03 Diversa Corporation Directed evolution of thermophilic enzymes
US6344328B1 (en) 1995-12-07 2002-02-05 Diversa Corporation Method for screening for enzyme activity
US6489145B1 (en) 1996-07-09 2002-12-03 Diversa Corporation Method of DNA shuffling
US7888466B2 (en) 1996-01-11 2011-02-15 Human Genome Sciences, Inc. Human G-protein chemokine receptor HSATU68
US5976846A (en) * 1996-01-13 1999-11-02 Passmore; Steven E. Method for multifragment in vivo cloning and mutation mapping
AU1874997A (en) * 1996-02-15 1997-09-02 Pangenetics B.V. Molecules for the induction of immunological tolerance
US6506602B1 (en) 1996-03-25 2003-01-14 Maxygen, Inc. Methods for generating polynucleotides having desired characteristics by iterative selection and recombination
US6096548A (en) 1996-03-25 2000-08-01 Maxygen, Inc. Method for directing evolution of a virus
US6372480B1 (en) 1996-04-19 2002-04-16 Mycogen Corporation Pesticidal proteins
US6242211B1 (en) 1996-04-24 2001-06-05 Terragen Discovery, Inc. Methods for generating and screening novel metabolic pathways
US7465571B1 (en) 1996-05-22 2008-12-16 Verenium Corporation Endoglucanases
US20020120118A1 (en) * 1996-05-22 2002-08-29 Short Jay M. Enzymes having endoglucanase activity and methods of use thereof
US5871917A (en) 1996-05-31 1999-02-16 North Shore University Hospital Research Corp. Identification of differentially methylated and mutated nucleic acids
US6617434B1 (en) * 1996-05-31 2003-09-09 North Shore Long Island Jewish Research Institute Identificiaton of differentially methylated and mutated nucleic acids
AU4113797A (en) 1996-07-10 1998-02-02 Lonza A.G. Method of preparing (s) - or (r) -3,3,3-trifluoro-2-hydroxy-2- methylpropionic acid
JPH1066576A (ja) * 1996-08-07 1998-03-10 Novo Nordisk As 突出末端を有する２本鎖ｄｎａ及びこれを用いたｄｎａのシャフリング方法
JPH1066577A (ja) * 1996-08-07 1998-03-10 Novo Nordisk As 核酸プールおよびその製造方法
GB9618960D0 (en) 1996-09-11 1996-10-23 Medical Science Sys Inc Proteases
AU4597197A (en) * 1996-09-27 1998-04-17 Introgene B.V. Methods for optimization of gene therapy by recursive sequence shuffling and selection
US7883872B2 (en) * 1996-10-10 2011-02-08 Dyadic International (Usa), Inc. Construction of highly efficient cellulase compositions for enzymatic hydrolysis of cellulose
US5811381A (en) * 1996-10-10 1998-09-22 Mark A. Emalfarb Cellulase compositions and methods of use
US6838238B1 (en) 1996-10-17 2005-01-04 Invitrogen Corporation Morphatides: novel shape and structure libraries
US6242669B1 (en) 1996-10-30 2001-06-05 Mycogen Corporation Pesticidal toxins and nucleotide sequences which encode these toxins
IL119586A (en) * 1996-11-07 2001-09-13 Univ Ramot Discontinuous library of a single biological unit and a method for its preparation
US20070009930A1 (en) * 1996-12-18 2007-01-11 Maxygen, Inc. Methods and compositions for polypeptide engineering
AU1022402A (en) * 1997-01-17 2002-03-14 Maxygen, Inc. Evolution of whole cells and organisms by recursive sequence recombination
US6326204B1 (en) 1997-01-17 2001-12-04 Maxygen, Inc. Evolution of whole cells and organisms by recursive sequence recombination
EP1717322B1 (en) * 1997-01-17 2012-07-18 Codexis Mayflower Holdings, LLC Evolution of whole cells and organisms by recursive sequence recombination
US6265201B1 (en) 1997-01-17 2001-07-24 Regents Of The University Of Minnesota DNA molecules and protein displaying improved triazine compound degrading ability
US7148054B2 (en) 1997-01-17 2006-12-12 Maxygen, Inc. Evolution of whole cells and organisms by recursive sequence recombination
US8207093B2 (en) * 1997-01-21 2012-06-26 The General Hospital Corporation Selection of proteins using RNA-protein fusions
US6261804B1 (en) 1997-01-21 2001-07-17 The General Hospital Corporation Selection of proteins using RNA-protein fusions
DK1712623T3 (da) 1997-01-21 2012-02-06 Gen Hospital Corp Udvælgelse af proteiner ved anvendelse af RNA-proteinfusioner
GB9701425D0 (en) * 1997-01-24 1997-03-12 Bioinvent Int Ab A method for in vitro molecular evolution of protein function
ATE239077T1 (de) * 1997-01-31 2003-05-15 Cosmix Molecular Biolog Gmbh Erzeugung von diversität in kombinatorischen banken
CN1251609A (zh) 1997-02-12 2000-04-26 尤金·Y·查恩 分析聚合物的方法和产品
WO1998038326A1 (en) 1997-02-28 1998-09-03 Nature Technology Corporation Self-assembling genes, vectors and uses thereof
US5851808A (en) 1997-02-28 1998-12-22 Baylor College Of Medicine Rapid subcloning using site-specific recombination
US6159687A (en) * 1997-03-18 2000-12-12 Novo Nordisk A/S Methods for generating recombined polynucleotides
US6291165B1 (en) * 1997-03-18 2001-09-18 Novo Nordisk A/S Shuffling of heterologous DNA sequences
JP4263248B2 (ja) * 1997-03-18 2009-05-13 ノボザイムス アクティーゼルスカブ Ｄｎａのシャッフリングによるライブラリーの作成方法
CA2284097A1 (en) 1997-03-18 1998-09-24 Novo Nordisk A/S Shuffling of heterologous dna sequences
US6159688A (en) 1997-03-18 2000-12-12 Novo Nordisk A/S Methods of producing polynucleotide variants
US5948653A (en) * 1997-03-21 1999-09-07 Pati; Sushma Sequence alterations using homologous recombination
US6153410A (en) * 1997-03-25 2000-11-28 California Institute Of Technology Recombination of polynucleotide sequences using random or defined primers
EP0985033A4 (en) * 1997-04-04 2005-07-13 Biosite Inc POLYVALENT AND POLYCLONAL LIBRARIES
EP1559788A1 (en) 1997-04-09 2005-08-03 Danisco A/S Use lipase for improving doughs and baked products
EP0974111B1 (en) 1997-04-11 2003-01-08 California Institute Of Technology Apparatus and method for automated protein design
IL124275A (en) * 1997-05-02 2002-03-10 Bio Merieux Vitek Inc A method to produce sequences of nucleic acids
US6558901B1 (en) * 1997-05-02 2003-05-06 Biomerieux Vitek Nucleic acid assays
GB9712512D0 (en) 1997-06-16 1997-08-20 Bioinvent Int Ab A method for in vitro molecular evolution of protein function
US7087420B1 (en) 1997-07-17 2006-08-08 Cambia Microbial β-glucuronidase genes, gene products and uses thereof
US6391547B1 (en) * 1997-09-09 2002-05-21 Center For The Application Of Molecular Biology To International Agriculture Microbial β-glucuronidase genes, gene products and uses thereof
DE19731990A1 (de) * 1997-07-25 1999-01-28 Studiengesellschaft Kohle Mbh Verfahren zur Herstellung und Identifizierung von neuen Hydrolasen mit verbesserten Eigenschaften
WO1999011818A1 (fr) * 1997-08-28 1999-03-11 Isao Karube Procede de detection d'acides nucleiques ou de polypeptides hautement fonctionnels
EP2860252A1 (en) 1997-09-19 2015-04-15 Promega Corporation Thermostable luciferases and methods of production
US6602677B1 (en) * 1997-09-19 2003-08-05 Promega Corporation Thermostable luciferases and methods of production
AR017331A1 (es) 1997-10-13 2001-09-05 Novozymes As Polipeptidos mutantes de alfa-amilasas, aditivo para detergentes y composiciones detergentes que los comprenden.
GB9722131D0 (en) 1997-10-20 1997-12-17 Medical Res Council Method
CN101125873A (zh) * 1997-10-24 2008-02-20 茵维特罗根公司 利用具重组位点的核酸进行重组克隆
EP1025217B1 (en) * 1997-10-24 2006-10-04 Invitrogen Corporation Recombinational cloning using nucleic acids having recombination sites
US7351578B2 (en) * 1999-12-10 2008-04-01 Invitrogen Corp. Use of multiple recombination sites with unique specificity in recombinational cloning
AU1124499A (en) 1997-10-28 1999-05-17 Maxygen, Inc. Human papillomavirus vectors
US6423299B1 (en) 1997-10-31 2002-07-23 Vincent Fischetti Composition for treatment of a bacterial infection of an upper respiratory tract
US6399097B1 (en) 1997-10-31 2002-06-04 New Horizons Diagnostics Corporation Composition for treatment of a bacterial infection of the digestive tract
US6277399B1 (en) 1997-10-31 2001-08-21 New Horizon Diagnostics Corporation Composition incorporating bacterial phage associated lysing enzymes for treating dermatological infections
US6752988B1 (en) * 2000-04-28 2004-06-22 New Horizons Diagnostic Corp Method of treating upper resiratory illnesses
US20030082110A1 (en) * 1997-10-31 2003-05-01 Vincent Fischetti Use of bacterial phage associated lysing proteins for treating bacterial dental caries
US20030129146A1 (en) * 1997-10-31 2003-07-10 Vincent Fischetti The use of bacterial phage associated lysing proteins for treating bacterial dental caries
US20020136712A1 (en) * 1997-10-31 2002-09-26 Fischetti Vincent Bacterial phage associated lysing enzymes for the prophylactic and therapeutic treatment of colonization and infections caused by streptococcus pneumoniae
US7232576B2 (en) 1997-10-31 2007-06-19 New Horizons Diagnostics Corp Throat lozenge for the treatment of Streptococcus Group A
US6432444B1 (en) 1997-10-31 2002-08-13 New Horizons Diagnostics Corp Use of bacterial phage associated lysing enzymes for treating dermatological infections
US6399098B1 (en) 1997-10-31 2002-06-04 New Horizons Diagnostics Corp Composition for treating dental caries caused by streptococcus mutans
WO1999023107A1 (en) 1997-10-31 1999-05-14 Maxygen, Incorporated Modification of virus tropism and host range by viral genome shuffling
US6428784B1 (en) 1997-10-31 2002-08-06 New Horizons Diagnostics Corp Vaginal suppository for treating group B Streptococcus infection
US6406692B1 (en) 1997-10-31 2002-06-18 New Horizons Diagnostics Corp Composition for treatment of an ocular bacterial infection
US20030129147A1 (en) * 1997-10-31 2003-07-10 Vincent Fischetti Use of bacterial phage associated lysing proteins for treating bacterial dental caries
US6056954A (en) 1997-10-31 2000-05-02 New Horizons Diagnostics Corp Use of bacterial phage associated lysing enzymers for the prophylactic and therapeutic treatment of various illnesses
US7321023B2 (en) * 1997-11-07 2008-01-22 Incyte Corporation SP16 protein
AU752105B2 (en) 1997-12-05 2002-09-05 Europaisches Laboratorium Fur Molekularbiologie (Embl) Novel dna cloning method
DK1036198T3 (da) 1997-12-08 2013-01-02 California Inst Of Techn Fremgangsmåde til fremstilling af polynukleotid- og polypeptidsekvenser
AR017831A1 (es) 1997-12-10 2001-10-24 Pioneer Hi Bred Int Metodo para alterar la composicion de aminoacidos de una proteina nativa de interes, proteina elaborada, y polinucleotido
US6426185B1 (en) 1998-01-16 2002-07-30 Large Scale Biology Corporation Method of compiling a functional gene profile in a plant by transfecting a nucleic acid sequence of a donor plant into a different host plant in an anti-sense orientation
US6468745B1 (en) 1998-01-16 2002-10-22 Large Scale Biology Corporation Method for expressing a library of nucleic acid sequence variants and selecting desired traits
US20020164585A1 (en) * 1998-01-16 2002-11-07 Sean Chapman Method for enhancing RNA or protein production using non-native 5' untranslated sequences in recombinant viral nucleic acids
US6303848B1 (en) 1998-01-16 2001-10-16 Large Scale Biology Corporation Method for conferring herbicide, pest, or disease resistance in plant hosts
US20030027173A1 (en) * 1998-01-16 2003-02-06 Della-Cioppa Guy Method of determining the function of nucleotide sequences and the proteins they encode by transfecting the same into a host
US20030166169A1 (en) * 1998-01-16 2003-09-04 Padgett Hal S. Method for constructing viral nucleic acids in a cell-free manner
US7390619B1 (en) * 1998-02-11 2008-06-24 Maxygen, Inc. Optimization of immunomodulatory properties of genetic vaccines
US6541011B2 (en) 1998-02-11 2003-04-01 Maxygen, Inc. Antigen library immunization
HUP0102051A2 (hu) * 1998-03-17 2001-10-28 Novartis Ag. MLO fehérjéket kódoló gének, és gombaellenes rezisztencia biztosítása növényekben
AU2003203147B2 (en) 1998-03-23 2008-05-29 Novozymes A/S Phytase variants
NZ507591A (en) 1998-05-01 2002-03-28 Maxygen Inc Optimization of pest resistance genes using DNA shuffling
US6287765B1 (en) * 1998-05-20 2001-09-11 Molecular Machines, Inc. Methods for detecting and identifying single molecules
US6902918B1 (en) 1998-05-21 2005-06-07 California Institute Of Technology Oxygenase enzymes and screening method
US20030207345A1 (en) * 1998-05-21 2003-11-06 California Institute Of Technology Oxygenase enzymes and screening method
EP2261359B1 (en) 1998-06-10 2014-08-20 Novozymes A/S Mannanases
US7153655B2 (en) * 1998-06-16 2006-12-26 Alligator Bioscience Ab Method for in vitro molecular evolution of protein function involving the use of exonuclease enzyme and two populations of parent polynucleotide sequence
WO1999065927A2 (en) 1998-06-17 1999-12-23 Maxygen, Inc. Method for producing polynucleotides with desired properties
US6365408B1 (en) 1998-06-19 2002-04-02 Maxygen, Inc. Methods of evolving a polynucleotides by mutagenesis and recombination
US6846655B1 (en) 1998-06-29 2005-01-25 Phylos, Inc. Methods for generating highly diverse libraries
ATE231186T1 (de) 1998-07-21 2003-02-15 Danisco Lebensmittel
US20030153042A1 (en) * 1998-07-28 2003-08-14 California Institute Of Technology Expression of functional eukaryotic proteins
US20030104417A1 (en) * 1998-08-12 2003-06-05 Proteus S.A. Template-mediated, ligation-oriented method of nonrandomly shuffling polynucleotides
WO2000009682A1 (en) 1998-08-12 2000-02-24 Maxygen, Inc. Dna shuffling of monooxygenase genes for production of industrial chemicals
US20030092023A1 (en) * 1998-08-12 2003-05-15 Daniel Dupret Method of shuffling polynucleotides using templates
US20040191772A1 (en) * 1998-08-12 2004-09-30 Dupret Daniel Marc Method of shuffling polynucleotides using templates
US6951719B1 (en) * 1999-08-11 2005-10-04 Proteus S.A. Process for obtaining recombined nucleotide sequences in vitro, libraries of sequences and sequences thus obtained
US20060242731A1 (en) * 1998-08-12 2006-10-26 Venkiteswaran Subramanian DNA shuffling to produce herbicide selective crops
US6991922B2 (en) * 1998-08-12 2006-01-31 Proteus S.A. Process for in vitro creation of recombinant polynucleotide sequences by oriented ligation
KR20010083077A (ko) * 1998-08-12 2001-08-31 추후제출 제초제 선택성 작물을 생성하는 ｄｎａ 재편성
EP1105360B1 (en) 1998-08-17 2009-07-29 Bristol-Myers Squibb Company Identification of compound-protein interactions using libraries of protein-nucleic acid fusion molecules
JP2002524087A (ja) * 1998-09-03 2002-08-06 ローマ リンダ ユニバーシティー インビボにおいてタンパク質相互作用を調べる方法
US20070178475A1 (en) * 1998-09-17 2007-08-02 Nehls Michael C Novel human polynucleotides and polypeptides encoded thereby
US7897843B2 (en) 1999-03-23 2011-03-01 Mendel Biotechnology, Inc. Transcriptional regulation of plant biomass and abiotic stress tolerance
US20050086718A1 (en) 1999-03-23 2005-04-21 Mendel Biotechnology, Inc. Plant transcriptional regulators of abiotic stress
ES2237159T3 (es) * 1998-10-06 2005-07-16 Mark Aaron Emalfarb Sistema de transformacion en el campo de los hongos micoticos filamentosos en chrysosporium.
CA2345203A1 (en) 1998-10-07 2000-04-13 Maxygen Inc. Dna shuffling to produce nucleic acids for mycotoxin detoxification
US6403312B1 (en) 1998-10-16 2002-06-11 Xencor Protein design automatic for protein libraries
US20020048772A1 (en) 2000-02-10 2002-04-25 Dahiyat Bassil I. Protein design automation for protein libraries
US7315786B2 (en) 1998-10-16 2008-01-01 Xencor Protein design automation for protein libraries
AU774334B2 (en) * 1998-10-16 2004-06-24 Xencor Protein design automation for protein libraries
EP1123305A1 (en) 1998-10-19 2001-08-16 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Dna-templated combinatorial library chemistry
DK1124949T3 (da) 1998-10-26 2006-11-06 Novozymes As Konstruktion og screening af et DNA-bibliotek af interesse i trådformede svampeceller
GB9823468D0 (en) 1998-10-28 1998-12-23 Secr Defence Novel enzyme
JP3267576B2 (ja) * 1998-11-09 2002-03-18 三光純薬株式会社 プローブ高分子の形成方法
EP1129184A1 (en) 1998-11-10 2001-09-05 Maxygen, Inc. Modified adp-glucose pyrophosphorylase for improvement and optimation of plant phenotypes
US6438561B1 (en) * 1998-11-19 2002-08-20 Navigation Technologies Corp. Method and system for using real-time traffic broadcasts with navigation systems
US6410301B1 (en) 1998-11-20 2002-06-25 Kosan Biosciences, Inc. Myxococcus host cells for the production of epothilones
NZ511722A (en) 1998-11-20 2004-05-28 Kosan Biosciences Inc Recombinant methods and materials for producing epothilone and epothilone derivatives
DE69933044T3 (de) * 1998-11-27 2016-11-24 Ucb Pharma, S.A. Zusammensetzungen und verfahren zur erhöhung der knochenmineralisierung
US20040009535A1 (en) 1998-11-27 2004-01-15 Celltech R&D, Inc. Compositions and methods for increasing bone mineralization
EP1803817B1 (en) 1998-12-18 2011-04-06 Novozymes A/S Subtilase enzymes of the I-S1 and I-S2 sub-groups having an additional amino acid residue in an active site loop region
US20020031802A1 (en) * 2000-05-12 2002-03-14 Yi Hu Novel seven transmembrane proteins and polynucleotides encoding the same
US20020038013A1 (en) * 2000-02-04 2002-03-28 Gregory Donoho Novel human membrane proteins and polynucleotides encoding the same
US20020061556A1 (en) * 2000-04-27 2002-05-23 Walke D. Wade Novel membrane proteins and polynucleotides encoding the same
US6570003B1 (en) * 2001-01-09 2003-05-27 Lexion Genetics Incorporated Human 7TM proteins and polynucleotides encoding the same
US6358712B1 (en) 1999-01-05 2002-03-19 Trustee Of Boston University Ordered gene assembly
WO2000040715A2 (en) * 1999-01-05 2000-07-13 Trustees Of Boston University Improved nucleic acid cloning
US20040005673A1 (en) * 2001-06-29 2004-01-08 Kevin Jarrell System for manipulating nucleic acids
US7070934B2 (en) 1999-01-12 2006-07-04 Sangamo Biosciences, Inc. Ligand-controlled regulation of endogenous gene expression
US6534261B1 (en) 1999-01-12 2003-03-18 Sangamo Biosciences, Inc. Regulation of endogenous gene expression in cells using zinc finger proteins
US7013219B2 (en) * 1999-01-12 2006-03-14 Sangamo Biosciences, Inc. Regulation of endogenous gene expression in cells using zinc finger proteins
US20030054390A1 (en) * 1999-01-19 2003-03-20 Maxygen, Inc. Oligonucleotide mediated nucleic acid recombination
US6917882B2 (en) * 1999-01-19 2005-07-12 Maxygen, Inc. Methods for making character strings, polynucleotides and polypeptides having desired characteristics
US6368861B1 (en) * 1999-01-19 2002-04-09 Maxygen, Inc. Oligonucleotide mediated nucleic acid recombination
US6436675B1 (en) 1999-09-28 2002-08-20 Maxygen, Inc. Use of codon-varied oligonucleotide synthesis for synthetic shuffling
WO2000042559A1 (en) * 1999-01-18 2000-07-20 Maxygen, Inc. Methods of populating data structures for use in evolutionary simulations
US6376246B1 (en) * 1999-02-05 2002-04-23 Maxygen, Inc. Oligonucleotide mediated nucleic acid recombination
US20070065838A1 (en) * 1999-01-19 2007-03-22 Maxygen, Inc. Oligonucleotide mediated nucleic acid recombination
US7873477B1 (en) * 2001-08-21 2011-01-18 Codexis Mayflower Holdings, Llc Method and system using systematically varied data libraries
US7024312B1 (en) 1999-01-19 2006-04-04 Maxygen, Inc. Methods for making character strings, polynucleotides and polypeptides having desired characteristics
EP1130093A1 (en) 1999-01-19 2001-09-05 Maxygen, Inc. Oligonucleotide mediated nucleic acid recombination
US6961664B2 (en) 1999-01-19 2005-11-01 Maxygen Methods of populating data structures for use in evolutionary simulations
US7702464B1 (en) 2001-08-21 2010-04-20 Maxygen, Inc. Method and apparatus for codon determining
US8457903B1 (en) 1999-01-19 2013-06-04 Codexis Mayflower Holdings, Llc Method and/or apparatus for determining codons
US20090130718A1 (en) * 1999-02-04 2009-05-21 Diversa Corporation Gene site saturation mutagenesis
JP2003524394A (ja) 1999-02-11 2003-08-19 マキシジェン， インコーポレイテッド ハイスループット質量分析法
EP2357192A1 (en) 1999-02-26 2011-08-17 Human Genome Sciences, Inc. Human endokine alpha and methods of use
EP2119788A1 (en) 1999-03-02 2009-11-18 Life Technologies Corporation Compositions and methods for use in recombinational cloning of nucleic acids
JP3399518B2 (ja) * 1999-03-03 2003-04-21 インターナショナル・ビジネス・マシーンズ・コーポレーション 半導体構造およびその製造方法
US6531316B1 (en) 1999-03-05 2003-03-11 Maxyag, Inc. Encryption of traits using split gene sequences and engineered genetic elements
CA2362737A1 (en) * 1999-03-05 2000-09-08 Maxygen, Inc. Recombination of insertion modified nucleic acids
ATE296310T1 (de) * 1999-03-08 2005-06-15 Metrigen Inc Syntheseverfahren zum ökonomischen aufbau langer dna-sequenzen und zusammensetzungen hierfür
JP2002537836A (ja) * 1999-03-09 2002-11-12 ディベルサ コーポレーション 定方向進化におけるエンドセレクション
US8148110B2 (en) * 1999-03-15 2012-04-03 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Detection of molecular interactions by β-lactamase reporter fragment complementation
KR100312070B1 (ko) * 1999-03-15 2001-11-03 박호군 고속 선별법을 포함하는 개선된 형질을 갖는 효소 변이체의 제조방법
US7105315B2 (en) * 1999-06-16 2006-09-12 Incyte Genomics, Inc. Transmembrane protein differentially expressed in cancer
US20030104526A1 (en) 1999-03-24 2003-06-05 Qiang Liu Position dependent recognition of GNN nucleotide triplets by zinc fingers
US7030215B2 (en) * 1999-03-24 2006-04-18 Sangamo Biosciences, Inc. Position dependent recognition of GNN nucleotide triplets by zinc fingers
DK2290060T3 (en) 1999-03-30 2017-03-06 Novozymes As The alpha-amylase variants
JP4745503B2 (ja) 1999-03-31 2011-08-10 ノボザイムス アクティーゼルスカブ アルカリα−アミラーゼ活性を有するポリペプチド及びそれらをコードする核酸
ATE422538T1 (de) 1999-03-31 2009-02-15 Novozymes As Polypeptide mit alkaliner alpha-amylase-aktivität und für diese kodierende nukleinsäuren
US6703240B1 (en) 1999-04-13 2004-03-09 Maxygar, Inc. Modified starch metabolism enzymes and encoding genes for improvement and optimization of plant phenotypes
US20020110809A1 (en) * 1999-04-30 2002-08-15 Nehls Michael C. Novel human polynucleotides and polypeptides encoded thereby
US20020095031A1 (en) * 1999-05-04 2002-07-18 Nehls Michael C. Novel human polynucleotides and polypeptides encoded thereby
EP1183341B2 (en) 1999-05-20 2012-05-02 Novozymes A/S Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additional amino acid residue between positions 127 and 128
DE60040282D1 (de) 1999-05-20 2008-10-30 Novozymes As SUBTILASE ENZYME DER I-S1 UND I-S2 UNTERGRUPPEN MIT MINDESTENS EINER ZUSäTZLICHEN AMINOSäURE ZWISCHEN POSITION 132 UND 133
EP1183339B2 (en) 1999-05-20 2013-03-13 Novozymes A/S Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additional amino acid residue between positions 129 and 130
WO2000071688A1 (en) 1999-05-20 2000-11-30 Novozymes A/S Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additional amino acid residue between positions 126 and 127
AU4393000A (en) 1999-05-20 2000-12-12 Novozymes A/S Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additionalamino acid residue between positions 128 and 129
EP1183343B2 (en) 1999-05-20 2013-11-27 Novozymes A/S Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additional amino acid residue between positions 125 and 126
US7332308B1 (en) 1999-05-21 2008-02-19 The Penn State Research Foundation Incrementally truncated nucleic acids and methods of making same
JP2003509010A (ja) * 1999-05-31 2003-03-11 ノボザイムス アクティーゼルスカブ ペプチドのスクリーニング方法
EP1067181A1 (en) * 1999-06-10 2001-01-10 Rijksuniversiteit te Groningen Enzyme selection
US6632636B1 (en) 1999-06-18 2003-10-14 Elitra Pharmaceuticals Inc. Nucleic acids encoding 3-ketoacyl-ACP reductase from Moraxella catarrahalis
EP1198565A1 (en) * 1999-07-07 2002-04-24 Maxygen Aps A method for preparing modified polypeptides
US6421613B1 (en) * 1999-07-09 2002-07-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Data processing of the maize prolifera genetic sequence
CN100510067C (zh) 1999-07-09 2009-07-08 诺维信公司 葡糖淀粉酶变体
US6387620B1 (en) * 1999-07-28 2002-05-14 Gilead Sciences, Inc. Transcription-free selex
US6713309B1 (en) 1999-07-30 2004-03-30 Large Scale Proteomics Corporation Microarrays and their manufacture
US7179638B2 (en) 1999-07-30 2007-02-20 Large Scale Biology Corporation Microarrays and their manufacture by slicing
US6653151B2 (en) 1999-07-30 2003-11-25 Large Scale Proteomics Corporation Dry deposition of materials for microarrays using matrix displacement
GB9918154D0 (en) * 1999-08-02 1999-10-06 Zeneca Ltd Expression system
CA2380872C (en) 1999-08-12 2007-11-27 Yan Chen Streptomyces avermitilis gene directing the ratio of b2:b1 avermectins
US6251604B1 (en) 1999-08-13 2001-06-26 Genopsys, Inc. Random mutagenesis and amplification of nucleic acid
US6720142B1 (en) * 1999-08-19 2004-04-13 University Of Rochester Method of determining evolutionary potential of mutant resistance genes and use thereof to screen for drug efficacy
US20050153323A1 (en) * 2000-07-28 2005-07-14 Yi Hu Novel human proteases and polynucleotides encoding the same
US7374933B2 (en) * 2000-04-12 2008-05-20 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Human metalloprotease and polynucleotides encoding the same
US20080003673A1 (en) * 1999-09-02 2008-01-03 Alejandro Abuin Novel human proteases and polynucleotides encoding the same
US6448388B1 (en) 2000-08-16 2002-09-10 Lexicon Genetics Incorporated Human proteases and polynucleotides encoding the same
US20030050464A1 (en) * 2000-07-28 2003-03-13 Yi Hu Novel human proteases and polynucleotides encoding the same
US20030166902A1 (en) * 2001-02-20 2003-09-04 Yi Hu Novel human protease and polynucleotides encoding the same
US6716614B1 (en) * 1999-09-02 2004-04-06 Lexicon Genetics Incorporated Human calcium dependent proteases, polynucleotides encoding the same, and uses thereof
US6472588B1 (en) * 1999-09-10 2002-10-29 Texas Tech University Transgenic cotton plants with altered fiber characteristics transformed with a sucrose phosphate synthase nucleic acid
US7063837B2 (en) * 1999-09-14 2006-06-20 New Horizons Diagnostics Corp Syrup composition containing phage associated lytic enzymes
US6790660B1 (en) 2001-09-18 2004-09-14 Lexicon Genetics Incorporated Human kielin-like proteins and polynucleotides encoding the same
US6867291B1 (en) * 2000-09-15 2005-03-15 Lexicon Genetics Incorporated Human hemicentin proteins and polynucleotides encoding the same
US20030028907A1 (en) * 2001-07-03 2003-02-06 Walke D. Wade Novel human kielin-like proteins and polynucleotides encoding the same
US20080050809A1 (en) * 1999-09-28 2008-02-28 Alejandro Abuin Novel human kinases and polynucleotides encoding the same
US6797510B1 (en) * 2001-05-24 2004-09-28 Lexicon Genetics Incorporated Human kinases and polynucleotides encoding the same
US6586230B1 (en) * 2000-10-27 2003-07-01 Lexicon Genetics Incorporated Human kinase and polynucleotides encoding the same
US6541252B1 (en) 2000-05-19 2003-04-01 Lexicon Genetics Incorporated Human kinases and polynucleotides encoding the same
US6841377B1 (en) 2001-06-13 2005-01-11 Lexicon Genetics Incorporated Human kinase and polynucleotides encoding the same
US6716616B1 (en) 1999-09-28 2004-04-06 Lexicon Genetics Incorporated Human kinase proteins and polynucleotides encoding the same
US6777545B2 (en) * 2001-04-06 2004-08-17 Lexicon Genetics Incorporated Human kinases and polynucleotides encoding the same
US6511840B1 (en) 2000-06-15 2003-01-28 Lexicon Genetics Incorporated Human kinase proteins and polynucleotides encoding the same
US20040002474A1 (en) * 1999-10-07 2004-01-01 Maxygen Inc. IFN-alpha homologues
WO2001027274A1 (en) 1999-10-12 2001-04-19 Lexicon Genetics Incorporated Human ldl receptor family proteins and polynucleotides encoding the same
US7430477B2 (en) 1999-10-12 2008-09-30 Maxygen, Inc. Methods of populating data structures for use in evolutionary simulations
WO2001027275A1 (en) * 1999-10-13 2001-04-19 Lexicon Genetics Incorporated Novel human membrane proteins
MXPA02003754A (es) 1999-10-13 2003-10-14 Univ Leland Stanford Junior Biosintesis de sustratos de policetido sintasa.
US20080213878A1 (en) * 1999-10-19 2008-09-04 Gregory Donoho Novel human membrane proteins and polynucleotides encoding the same
US6346249B1 (en) * 1999-10-22 2002-02-12 Ludwig Institute For Cancer Research Methods for reducing the effects of cancers that express A33 antigen using A33 antigen specific immunoglobulin products
GB9925161D0 (en) 1999-10-26 1999-12-22 Secr Defence Novel enzyme
US6635438B2 (en) * 1999-11-02 2003-10-21 Catch, Inc. Enzymatic cycling assays for homocysteine and cystathionine
EP1230269A2 (en) 1999-11-03 2002-08-14 Maxygen, Inc. Antibody diversity generation
DE19953854C2 (de) 1999-11-09 2002-01-17 Max Planck Gesellschaft Verfahren zur Herstellung von Biopolymeren mit veränderten Eigenschaften
JP2003513666A (ja) 1999-11-10 2003-04-15 ノボザイムス アクティーゼルスカブ フンガミル様アルファ−アミラーゼ変異体
US6686515B1 (en) 1999-11-23 2004-02-03 Maxygen, Inc. Homologous recombination in plants
CA2392470A1 (en) * 1999-11-26 2001-05-31 Basf Plant Science Gmbh Method for the mutagenesis of nucleotide sequences from plants algae or fungi
US7115712B1 (en) 1999-12-02 2006-10-03 Maxygen, Inc. Cytokine polypeptides
WO2001042287A2 (en) * 1999-12-07 2001-06-14 Lexicon Genetics Incorporated Putative human g-protein coupled receptors
JP2004504005A (ja) 1999-12-07 2004-02-12 レキシコン・ジェネティクス・インコーポレーテッド ヒト新規キナーゼタンパクおよびそれをコードするポリヌクレオチド
EP1235909A1 (en) 1999-12-09 2002-09-04 Lexicon Genetics Incorporated Human adam-ts proteases and polynucleotides encoding the same
EP2210948A3 (en) 1999-12-10 2010-10-06 Life Technologies Corporation Use of multiple recombination sites with unique specificity in recombinational cloning
WO2001046476A1 (en) * 1999-12-23 2001-06-28 Maxygen, Inc. Alteration of hydrolase genes and screening of the resulting libraries for the ability to catalyze specific reactions
DE60038132T2 (de) * 1999-12-27 2009-04-02 Crucell Holland B.V. Antikörper gegen Ep-Cam
US6927046B1 (en) * 1999-12-30 2005-08-09 Archer-Daniels-Midland Company Increased lysine production by gene amplification using coryneform bacteria
IL150291A0 (en) * 2000-01-11 2002-12-01 Maxygen Inc Integrated systems and methods for diversity generation and screening
JP2004504804A (ja) * 2000-01-18 2004-02-19 レキシコン・ジェネティクス・インコーポレーテッド ヒト新規キナーゼタンパクおよびそれをコードするポリヌクレオチド
WO2001053539A1 (en) 2000-01-24 2001-07-26 Phylos, Inc. Sensitive, multiplexed diagnostic assays for protein analysis
US7022479B2 (en) * 2000-01-24 2006-04-04 Compound Therapeutics, Inc. Sensitive, multiplexed diagnostic assays for protein analysis
EP1621617A1 (en) * 2000-02-10 2006-02-01 Xencor, Inc. Protein design automation for protein libraries
WO2001064864A2 (en) * 2000-02-28 2001-09-07 Maxygen, Inc. Single-stranded nucleic acid template-mediated recombination and nucleic acid fragment isolation
US20020155571A1 (en) * 2000-02-29 2002-10-24 Raillard Sun Ai Triazine degrading enzymes
US6436677B1 (en) * 2000-03-02 2002-08-20 Promega Corporation Method of reverse transcription
AU4352101A (en) 2000-03-10 2001-09-24 Lexicon Genetics Inc Novel human g-coupled protein receptor kinases and polynucleotides encoding the same
AU2001287273A1 (en) * 2000-03-24 2001-10-08 Maxygen, Inc. Methods for modulating cellular and organismal phenotypes
WO2001075108A1 (en) 2000-04-03 2001-10-11 Lexicon Genetics Incorporated Human ion channel protein and polynucleotides encoding the same
EP2206720A1 (en) 2000-04-12 2010-07-14 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
DK1360500T3 (da) * 2000-04-14 2010-05-25 Genencor Int Fremgangsmåde til selektiv målretning
US7129326B2 (en) * 2000-04-14 2006-10-31 Genencor International, Inc. Methods for selective targeting
AU2001259205A1 (en) * 2000-04-28 2001-11-12 New Horizons Diagnostic Corporation The use of bacterial phage associated lysing enzymes for treating various illnesses
US6534292B1 (en) 2000-05-08 2003-03-18 Genencor International, Inc. Methods for forming recombined nucleic acids
US20020107375A1 (en) * 2000-05-12 2002-08-08 Brian Mathur Novel human lipocalin homologs and polynucleotides encoding the same
AU2001263105A1 (en) * 2000-05-18 2001-11-26 Lexicon Genetics Incorporated Human semaphorin homologs and polynucleotides encoding the same
US7244560B2 (en) * 2000-05-21 2007-07-17 Invitrogen Corporation Methods and compositions for synthesis of nucleic acid molecules using multiple recognition sites
WO2001090179A2 (en) * 2000-05-23 2001-11-29 Lexicon Genetics Incorporated Novel human thrombospondin-like proteins and polynucleotides encoding the same
US20030032059A1 (en) * 2000-05-23 2003-02-13 Zhen-Gang Wang Gene recombination and hybrid protein development
US6790667B1 (en) * 2000-05-30 2004-09-14 Lexicon Genetics Incorporated Human mitochondrial proteins and polynucleotides encoding the same
US20030031675A1 (en) 2000-06-06 2003-02-13 Mikesell Glen E. B7-related nucleic acids and polypeptides useful for immunomodulation
AU2001275337A1 (en) * 2000-06-07 2001-12-17 Lexicon Genetics Incorporated Novel human transporter proteins and polynucleotides encoding the same
AU2001266844A1 (en) * 2000-06-09 2001-12-17 Lexicon Genetics Incorporated Novel human seven transmembrane proteins and polynucleotides encoding the same
US6465632B1 (en) * 2000-06-09 2002-10-15 Lexicon Genetics Incorporated Human phosphatases and polynucleotides encoding the same
FR2810339B1 (fr) * 2000-06-14 2004-12-10 Hoechst Marion Roussel Inc Banques combinatoires ameliorees par recombinaison dans la levure et procede d'analyse
CA2413160A1 (en) 2000-06-15 2001-12-20 Human Genome Sciences, Inc. Human tumor necrosis factor delta and epsilon
US7468475B2 (en) 2000-06-16 2008-12-23 Schmuelling Thomas Method for modifying plant morphology, biochemistry and physiology
AU2001268427B2 (en) 2000-06-16 2007-03-29 Glaxosmithkline Intellectual Property Limited Antibodies that immunospecifically bind to blys
CA2411828A1 (en) * 2000-06-23 2002-01-03 Maxygen, Inc. Novel co-stimulatory molecules
US6410271B1 (en) 2000-06-23 2002-06-25 Genetastix Corporation Generation of highly diverse library of expression vectors via homologous recombination in yeast
US6406863B1 (en) * 2000-06-23 2002-06-18 Genetastix Corporation High throughput generation and screening of fully human antibody repertoire in yeast
AU2001268716A1 (en) * 2000-06-23 2002-01-08 Maxygen, Inc. Novel chimeric promoters
US6410246B1 (en) 2000-06-23 2002-06-25 Genetastix Corporation Highly diverse library of yeast expression vectors
EP2287296A1 (en) 2000-06-26 2011-02-23 Novozymes A/S Lipolytic enzyme
US7846733B2 (en) 2000-06-26 2010-12-07 Nugen Technologies, Inc. Methods and compositions for transcription-based nucleic acid amplification
WO2002000720A2 (en) * 2000-06-27 2002-01-03 Lexicon Genetics Incorporated Novel human gaba receptors and polynucleotides encoding the same
US20020072097A1 (en) * 2000-07-07 2002-06-13 Delcardayre Stephen Molecular breeding of transposable elements
US6994963B1 (en) 2000-07-10 2006-02-07 Ambion, Inc. Methods for recombinatorial nucleic acid synthesis
US6858422B2 (en) * 2000-07-13 2005-02-22 Codexis, Inc. Lipase genes
WO2002006469A2 (en) * 2000-07-18 2002-01-24 Enchira Biotechnology Corporation Methods of ligation mediated chimeragenesis utilizing populations of scaffold and donor nucleic acids
US6878861B2 (en) * 2000-07-21 2005-04-12 Washington State University Research Foundation Acyl coenzyme A thioesterases
JP2004515220A (ja) * 2000-07-21 2004-05-27 インサイト・ゲノミックス・インコーポレイテッド プロテアーゼ
US7435562B2 (en) 2000-07-21 2008-10-14 Modular Genetics, Inc. Modular vector systems
US6887685B1 (en) * 2000-07-25 2005-05-03 Lexicon Genetics Incorporated Human thymosin protein and polynucleotides encoding the same
WO2002010183A1 (en) * 2000-07-31 2002-02-07 Menzel, Rolf Compositions and methods for directed gene assembly
EP1373889A2 (en) * 2000-07-31 2004-01-02 Maxygen, Inc. Biosensors, reagents and diagnostic applications of directed evolution
EP1370648A2 (en) 2000-08-01 2003-12-17 Novozymes A/S Alpha-amylase mutants with altered properties
JP3859947B2 (ja) * 2000-08-04 2006-12-20 独立行政法人理化学研究所 突然変異導入方法
WO2002014495A2 (en) 2000-08-14 2002-02-21 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Enhanced homologous recombination mediated by lambda recombination proteins
US7198924B2 (en) * 2000-12-11 2007-04-03 Invitrogen Corporation Methods and compositions for synthesis of nucleic acid molecules using multiple recognition sites
WO2002016547A2 (en) 2000-08-21 2002-02-28 Novozymes A/S Subtilase enzymes
EP1406483A4 (en) 2000-08-22 2005-05-25 Mendel Biotechnology Inc GENE FOR CHANGING THE PROPERTIES OF PLANTS
EP1311676A2 (en) * 2000-08-22 2003-05-21 Lexicon Genetics Incorporated Human 7tm proteins and polynucleotides encoding the same
WO2002016564A2 (en) * 2000-08-22 2002-02-28 Lexicon Genetics Incorporated Novel human proteases and polynucleotides encoding the same
US20030157643A1 (en) * 2000-08-24 2003-08-21 Almond Brian D Synthetic nucleic acids from aquatic species
US7879540B1 (en) 2000-08-24 2011-02-01 Promega Corporation Synthetic nucleic acid molecule compositions and methods of preparation
JP2004527215A (ja) * 2000-08-24 2004-09-09 マキシジェン， インコーポレイテッド 構築物、および代謝経路操作におけるそれらの使用
EP1349946B1 (en) 2000-08-25 2011-01-26 BASF Plant Science GmbH Plant polynucleotides encoding prenyl proteases
FR2813314B1 (fr) * 2000-08-25 2004-05-07 Biomethodes Procede de mutagenese dirigee massive
AU2001285326A1 (en) * 2000-08-31 2002-03-13 Lexicon Genetics Incorporated Human kinase proteins and polynucleotides encoding the same
US6395504B1 (en) 2000-09-01 2002-05-28 New Horizons Diagnostics Corp. Use of phage associated lytic enzymes for the rapid detection of bacterial contaminants
AU2001285327A1 (en) * 2000-09-01 2002-03-22 Lexicon Genetics Incorporated Human gaba transporter protein and polynucleotides encoding the same
WO2002022876A1 (en) * 2000-09-11 2002-03-21 University Of Rochester Method of identifying putative antibiotic resistance genes
US20040091886A1 (en) * 2000-09-21 2004-05-13 Moore Jeffrey C. Method for generating recombinant polynucleotides
US20020142324A1 (en) * 2000-09-22 2002-10-03 Xun Wang Fungal target genes and methods to identify those genes
EP2336339A3 (en) 2000-09-25 2011-09-14 The Regents of the University of Michigan Production of viral vectors
DE60119757T2 (de) * 2000-09-27 2007-04-26 Lexicon Genetics Inc., The Woodlands Menschliche ionenaustauschproteine und dafür kodierende polynukleotiden
WO2002026964A1 (fr) * 2000-09-27 2002-04-04 Mitsubishi Chemical Corporation Procede de construction d'une banque d'adn mutants et utilisation de celle-ci
AU2001293084A1 (en) * 2000-09-27 2002-04-08 Lexicon Genetics Incorporated Human protease inhibitor proteins and polynucleotides encoding the same
US20040091920A1 (en) * 2000-09-27 2004-05-13 Mitsubishi Chemical Corporation Method of constructing a mutant DNA library and use thereof
US6777232B1 (en) 2000-10-02 2004-08-17 Lexicon Genetics Incorporated Human membrane proteins and polynucleotides encoding the same
WO2002033089A2 (en) * 2000-10-05 2002-04-25 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Ixodes scapularis tissue factor pathway inhibitor
US20020155460A1 (en) * 2000-10-10 2002-10-24 Genencor International Inc. Information rich libraries
AU2002213183A1 (en) 2000-10-12 2002-04-22 Lexicon Genetics Incorporated Human kinases and polynucleotides encoding the same
AU2002210379A1 (en) 2000-10-13 2002-04-22 Novozymes A/S Subtilase variants
EP1975229A3 (en) 2000-10-13 2009-03-18 Novozymes A/S Alpha-amylase variant with altered properties
US7001763B1 (en) 2000-10-17 2006-02-21 Lexicon Genetics Incorporated Human semaphorin proteins and polynucleotides encoding the same
US7045283B2 (en) 2000-10-18 2006-05-16 The Regents Of The University Of California Methods of high-throughput screening for internalizing antibodies
EP1624062A3 (en) * 2000-10-27 2006-02-22 Lexicon Genetics Incorporated Human 7tm proteins and polynucleotides encoding them
US7060442B2 (en) * 2000-10-30 2006-06-13 Regents Of The University Of Michigan Modulators on Nod2 signaling
EP1330524A2 (en) * 2000-10-30 2003-07-30 Lexicon Genetics Incorporated Novel human 7tm proteins and polynucleotides encoding the same
AU3941002A (en) 2000-10-31 2002-06-03 Zycos Inc Cyp1b1 nucleic acids and methods of use
US7202070B2 (en) * 2000-10-31 2007-04-10 Biocatalytics, Inc. Method for reductive amination of a ketone using a mutated enzyme
WO2002036759A2 (en) * 2000-11-01 2002-05-10 Lexicon Genetics Incorporated Polynucleotides encoding human meltrin beta (adam19) metalloendopeptidases
CA2427928A1 (en) * 2000-11-02 2002-12-27 New Horizons Diagnostics Corporation The use of bacterial phage associated lytic enzymes to prevent food poisoning
AU2001274635A1 (en) * 2000-11-10 2002-05-21 Amicogen, Inc. Method for generating recombinant dna library using unidirectional single-stranded dna fragments
EP1349932A2 (en) * 2000-11-15 2003-10-08 Lexicon Genetics Incorporated Novel human secreted proteins and polynucleotides encoding the same
EP1340088B1 (en) * 2000-11-17 2007-01-17 University Of Rochester In vitro methods of producing and identifying immunoglobulin molecules in eukaryotic cells
EP1830190A3 (en) * 2000-11-17 2008-07-09 University Of Rochester In vitro methods of producing and identifying immunoglobulin molecules in eukaryotic cells
WO2002042438A2 (en) * 2000-11-20 2002-05-30 Lexicon Genetics Incorporated Human kinases and polynucleotides encoding the same
EP2412384A1 (en) 2000-11-28 2012-02-01 MedImmune, LLC Methods of administering/dosing anti-RSV antibodies for prophylaxis and treatment
US7211414B2 (en) 2000-12-01 2007-05-01 Visigen Biotechnologies, Inc. Enzymatic nucleic acid synthesis: compositions and methods for altering monomer incorporation fidelity
CA2431007A1 (en) * 2000-12-11 2002-07-18 Lexicon Genetics Incorporated Novel human kinase and polynucleotides encoding the same
US6958213B2 (en) * 2000-12-12 2005-10-25 Alligator Bioscience Ab Method for in vitro molecular evolution of protein function
AU2002232642B2 (en) * 2000-12-12 2007-02-01 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Novel human kinases and uses thereof
DE10062086A1 (de) * 2000-12-13 2002-07-04 Wella Ag Mittel und Verfahren zum Färben von Keratinfasern
WO2002048402A2 (en) 2000-12-13 2002-06-20 Nugen Technologies, Inc. Methods and compositions for generation of multiple copies of nucleic acid sequences and methods of detection thereof
US6583269B1 (en) * 2000-12-18 2003-06-24 Lexicon Genetics Incorporated Human protease inhibitor and polynucleotides encoding the same
US6852844B1 (en) 2000-12-20 2005-02-08 Lexicon Genetics Incorporated Human protocadherin proteins and polynucleotides encoding the same
JP2005502307A (ja) * 2000-12-20 2005-01-27 レキシコン・ジェネティクス・インコーポレーテッド 新規ヒトイオンチャンネルタンパクおよびそれをコードするポリヌクレオチド
US20020150895A1 (en) * 2000-12-22 2002-10-17 Raymond Wheeler Method and apparatus for filtering and extending RNA alignment coverage
US20020086292A1 (en) * 2000-12-22 2002-07-04 Shigeaki Harayama Synthesis of hybrid polynucleotide molecules using single-stranded polynucleotide molecules
US7070973B2 (en) 2000-12-26 2006-07-04 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Butyrylcholinesterase variants and methods of use
AU2002246858A1 (en) * 2000-12-27 2002-08-06 Lexicon Genetics Incorporated Human kinases and polynucleotides encoding the same
AU2001297533A1 (en) * 2000-12-28 2002-09-12 Lexicon Genetics Incorporated Novel human ion channel-related proteins and polynucleotides encoding the same
US20020115844A1 (en) * 2001-01-05 2002-08-22 Yu Xuanchuan Sean Novel human lipase and polynucleotides encoding the same
WO2002057294A2 (en) * 2001-01-22 2002-07-25 Sangamo Biosciences, Inc. Zinc finger proteins for dna binding and gene regulation in plants
EP1407029A2 (en) * 2001-01-23 2004-04-14 Lexicon Genetics Incorporated Novel human kinases and polynucleotides encoding the same
US20030104402A1 (en) * 2001-01-23 2003-06-05 University Of Rochester Methods of producing or identifying intrabodies in eukaryotic cells
CA2434897A1 (en) * 2001-01-24 2002-08-01 Lexicon Genetics Incorporated Human lipase and polynucleotides encoding the same
EP1683865A3 (en) 2001-02-02 2006-10-25 Eli Lilly & Company Mammalian proteins and in particular CD200
WO2002063002A2 (en) * 2001-02-02 2002-08-15 Lexicon Genetics Incorporated Novel human transporter protein and polynucleotides encoding the same
US20020192675A1 (en) * 2001-02-02 2002-12-19 The University Of Rochester Methods of identifying regulator molecules
JP2005503116A (ja) 2001-02-09 2005-02-03 ヒューマン　ジノーム　サイエンシーズ，　インコーポレイテッド ヒトｇタンパク質ケモカインレセプター（ｃｃｒ５）ｈｄｇｎｒ１０
US6849449B2 (en) * 2001-03-01 2005-02-01 Regents Of The University Of Michigan Orphanin FQ receptor nucleic acids
JP4542312B2 (ja) 2001-03-09 2010-09-15 ニューゲン テクノロジーズ， インコーポレイテッド Ｒｎａ配列の増幅のための方法および組成物
AU2002245593A1 (en) * 2001-03-12 2002-09-24 Lexicon Genetics Incorporated Novel human dectin proteins and polynucleotides encoding the same
WO2002072774A2 (en) * 2001-03-12 2002-09-19 Lexicon Genetics Incorporated Novel human transporter proteins and polynucleotides encoding the same
AU2002306696B2 (en) * 2001-03-12 2007-12-20 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Novel human EGF-family proteins and polynucleotides encoding the same
US6994995B1 (en) 2001-03-16 2006-02-07 Lexicon Genetics Incorporated Human synaptotagmin and polynucleotides encoding the same
US7807408B2 (en) * 2001-03-19 2010-10-05 President & Fellows Of Harvard College Directed evolution of proteins
EP1423400B2 (en) * 2001-03-19 2013-05-22 President and Fellows of Harvard College Evolving new molecular function
AU2002257076A1 (en) 2001-03-19 2002-10-03 President And Fellows Of Harvard College Nucleic acid shuffling
WO2002074932A2 (en) 2001-03-20 2002-09-26 Lexicon Genetics Incorporated Novel human kinase and polynucleotides encoding the same
US20030049619A1 (en) * 2001-03-21 2003-03-13 Simon Delagrave Methods for the synthesis of polynucleotides and combinatorial libraries of polynucleotides
AR035799A1 (es) 2001-03-30 2004-07-14 Syngenta Participations Ag Toxinas insecticidas aisladas de bacillus thuringiensis y sus usos.
JP2004528841A (ja) * 2001-04-06 2004-09-24 レキシコン・ジェネティクス・インコーポレーテッド 新規ヒトキナーゼおよびそれをコードするポリヌクレオチド
FR2823219B1 (fr) * 2001-04-10 2003-07-04 Pasteur Institut Mutants de la desoxycytidine kinase possedant une activite enzymatique elargie
US6644173B2 (en) * 2001-04-11 2003-11-11 Keuring, Incorporated Beverage filter cartridge holder
CA2444632A1 (en) 2001-04-13 2002-10-24 Human Genome Sciences, Inc. Vascular endothelial growth factor 2
AU2002307340A1 (en) * 2001-04-16 2002-10-28 California Institute Of Technology Peroxide-driven cytochrome p450 oxygenase variants
WO2002083706A1 (en) * 2001-04-16 2002-10-24 Lexicon Genetics Incorporated Nucleic acid encoding a human adenylosuccinate synthetase
JP2004531259A (ja) * 2001-04-19 2004-10-14 インヴィトロジェン コーポレーション 核酸分子の組換えクローニングのための組成物および方法
JP4533584B2 (ja) * 2001-04-25 2010-09-01 プロテウス ポリヌクレオチドを非ランダム的にシャッフルする、テンプレート調整ライゲーション方向定位の方法
FR2824073B1 (fr) * 2001-04-25 2003-12-19 Proteus Procede de creation in vitro de sequences polynucleotidiques recombinees par ligation orientee
US20030166893A1 (en) * 2001-04-30 2003-09-04 Yi Hu Novel human nuclear transporters and polynucleotides encoding the same
WO2002090496A2 (en) * 2001-05-03 2002-11-14 Rensselaer Polytechnic Institute Novel methods of directed evolution
JP2004537986A (ja) * 2001-05-09 2004-12-24 レキシコン・ジェネティクス・インコーポレーテッド 新規キナーゼおよびそれをコードするポリヌクレオチド
EP1950305A1 (en) 2001-05-09 2008-07-30 Monsanto Technology, LLC Tyr a genes and uses thereof
EP2159279A3 (en) 2001-05-15 2010-05-12 Novozymes A/S Alpha-amylase variant with altered properties
ATE401398T1 (de) * 2001-05-17 2008-08-15 Proteus Verfahren zur herstellung von polynukleotidfragmenten zur verwendung im shuffling
ES2284897T3 (es) 2001-05-18 2007-11-16 Danisco A/S Procedimiento para la preparacion de una masa con una enzima.
WO2002094992A2 (en) 2001-05-18 2002-11-28 Rigel Pharmaceuticals, Incorporated Directed evolution of protein in mammalian cells
EP1451344A4 (en) * 2001-05-21 2005-03-23 Invitrogen Corp COMPOSITIONS AND METHODS FOR USE IN ISOLATING NUCLEIC ACID MOLECULES
US20020193585A1 (en) * 2001-05-25 2002-12-19 Walke D. Wade Novel human transporter proteins and polynucleotides encoding the same
MXPA03010747A (es) 2001-05-25 2004-03-02 Human Genome Sciences Inc Anticuerpos que se unen inmunoespecificamente a receptores de ligando inductor de apoptosis relacionado con factor de necrosis tumoral.
DE60225064T2 (de) 2001-05-29 2009-01-29 Lexicon Pharmaceuticals, Inc., The Woodlands Neue menschliche hydroxylasen und diese codierende polynukleotide
AU2002314997A1 (en) * 2001-06-05 2002-12-16 Gorilla Genomics, Inc. Methods for low background cloning of dna using long oligonucleotides
AU2002311012A1 (en) 2001-06-06 2002-12-16 Novozymes A/S Endo-beta-1,4-glucanase from bacillus
JP2004531268A (ja) * 2001-06-14 2004-10-14 レキシコン・ジェネティクス・インコーポレーテッド 新規ヒトトランスポータータンパクおよびそれをコードするポリヌクレオチド
EP1401850A1 (en) 2001-06-20 2004-03-31 Nuevolution A/S Nucleoside derivatives for library preparation
BR0210593A (pt) 2001-06-22 2007-01-02 Pioneer Hi Bred Int polinucleotìdeos de defensina e métodos de uso
EP1925672A1 (en) 2001-06-22 2008-05-28 Syngeta Participations AG Abiotic stress responsive polynucleotides and polypeptides
ES2533923T3 (es) 2001-06-26 2015-04-16 Novozymes A/S Polipéptidos con actividad de celobiohidrolasa I y polinucleótidos que codifican los mismos
EP1404825A2 (en) * 2001-06-27 2004-04-07 Roche Diagnostics GmbH A WALK-THROUGH TECHNIQUE FOR i IN VITRO /i RECOMBINATION OF POLYNUCLEOTIDE SEQUENCES
GB0115841D0 (en) 2001-06-28 2001-08-22 Medical Res Council Ligand
DK200101090A (da) 2001-07-12 2001-08-16 Novozymes As Subtilase variants
US20040213765A1 (en) * 2001-07-13 2004-10-28 Vincent Fischetti Use of bacterial phage associated lytic enzymes to prevent food poisoning
WO2003008624A2 (en) * 2001-07-15 2003-01-30 Keck Graduate Institute Nucleic acid amplification using nicking agents
EP1277835A1 (en) * 2001-07-19 2003-01-22 Libragen Methods of creating genetic diversity
US7226768B2 (en) 2001-07-20 2007-06-05 The California Institute Of Technology Cytochrome P450 oxygenases
WO2003010183A2 (en) 2001-07-23 2003-02-06 Dsm Ip Assets B.V. Process for preparing variant polynucleotides
US6867189B2 (en) * 2001-07-26 2005-03-15 Genset S.A. Use of adipsin/complement factor D in the treatment of metabolic related disorders
CA2454319A1 (en) * 2001-07-26 2003-03-27 Stratagene Multi-site mutagenesis
US6833441B2 (en) * 2001-08-01 2004-12-21 Abmaxis, Inc. Compositions and methods for generating chimeric heteromultimers
US6943001B2 (en) * 2001-08-03 2005-09-13 Diversa Corporation Epoxide hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
CA2456229A1 (en) * 2001-08-03 2003-02-13 Diversa Corporation Epoxide hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US6987079B2 (en) 2001-08-14 2006-01-17 W.R. Grace & Co.-Conn. Supported catalyst systems
JP2005500060A (ja) * 2001-08-14 2005-01-06 レキシコン・ジェネティクス・インコーポレーテッド 新規ヒトコラーゲンタンパクおよびそれをコードするポリヌクレオチド
ATE365211T1 (de) * 2001-08-20 2007-07-15 Regenesis Bioremediation Produ Biosensor für kleinmolekulare analyten
US7647184B2 (en) * 2001-08-27 2010-01-12 Hanall Pharmaceuticals, Co. Ltd High throughput directed evolution by rational mutagenesis
PL368972A1 (en) 2001-08-29 2005-04-04 Genentech, Inc. Bv8 nucleic acids and polypeptides with mitogenic activity
US7635798B2 (en) * 2001-08-31 2009-12-22 Dow Agrosciences, Llc Nucleic acid compositions conferring altered metabolic characteristics
KR100428998B1 (ko) * 2001-09-10 2004-04-28 한국과학기술원 모체 단백질과는 크기와 서열이 다른 단백질의 변이집단을생산하는 방법
EP1436385A4 (en) * 2001-09-14 2005-12-14 Invitrogen Corp DNA POLYMERASES AND MUTANTS CORRESPONDING
WO2003025215A1 (en) * 2001-09-14 2003-03-27 The University Of Queensland Detection of dna methylation
US7582425B2 (en) * 2001-09-21 2009-09-01 The Regents Of The University Of Michigan Atlastin
US7108975B2 (en) * 2001-09-21 2006-09-19 Regents Of The University Of Michigan Atlastin
US20030104445A1 (en) * 2001-09-25 2003-06-05 Hayes Robert J. RNA dependent RNA polymerase mediated protein evolution
DE10147074A1 (de) * 2001-09-25 2003-05-08 Beru Ag Verfahren zum Betreiben einer aus mehreren Heizelementen bestehenden mehrstufigen elektrischen Heizung
DK1438400T3 (da) 2001-10-01 2009-10-05 Dyax Corp Flerkædede eukaryote display-vektorer og anvendelser deraf
US7173003B2 (en) * 2001-10-10 2007-02-06 Neose Technologies, Inc. Granulocyte colony stimulating factor: remodeling and glycoconjugation of G-CSF
EP2042196B1 (en) 2001-10-10 2016-07-13 ratiopharm GmbH Remodelling and glycoconjugation of Granulocyte Colony Stimulating Factor (G-CSF)
US7157277B2 (en) 2001-11-28 2007-01-02 Neose Technologies, Inc. Factor VIII remodeling and glycoconjugation of Factor VIII
US7214660B2 (en) 2001-10-10 2007-05-08 Neose Technologies, Inc. Erythropoietin: remodeling and glycoconjugation of erythropoietin
US8008252B2 (en) 2001-10-10 2011-08-30 Novo Nordisk A/S Factor VII: remodeling and glycoconjugation of Factor VII
US20040005709A1 (en) * 2001-10-24 2004-01-08 Hoogenboom Henricus Renerus Jacobus Mattheus Hybridization control of sequence variation
EP1440083B1 (en) 2001-10-25 2013-01-02 Medical Research Council Molecules
EP1840211A1 (en) 2001-10-31 2007-10-03 Danisco A/S Pyranosone dehydratase from phanerochaete chrysosporium
US7175983B2 (en) * 2001-11-02 2007-02-13 Abmaxis, Inc. Adapter-directed display systems
WO2003050914A1 (en) * 2001-12-05 2003-06-19 E-Tenna Corporation Capacitively-loaded bent-wire monopole on an artificial magnetic conductor
DE10162727A1 (de) 2001-12-20 2003-07-10 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease aus Bacillus gibsonii (DSM 14391) und Wasch-und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease
US7049121B2 (en) * 2001-12-20 2006-05-23 Applied Molecular Evolution Butyrylcholinesterase variant polypeptides with increased catalytic efficiency and methods of use
US6989261B2 (en) * 2001-12-20 2006-01-24 Eli Lilly And Company Butyrylcholinesterase variant polypeptides with increased catalytic efficiency and methods of use
DE10162728A1 (de) 2001-12-20 2003-07-10 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease aus Bacillus gibsonii (DSM 14393) und Wasch-und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease
DE10163884A1 (de) 2001-12-22 2003-07-10 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease aus Bacillus sp. (DSM 14392) und Wasch- und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease
MY139056A (en) * 2001-12-28 2009-08-28 Ab Enzymes Gmbh Microbially-expressed thermotolerant phytase for animal feed
KR100475305B1 (ko) * 2002-01-08 2005-03-10 주식회사 마이크로아이디 단일가닥 특이적인 ｄｎａ 절단효소 엑소뉴클리아제ⅶ을 이용하여 키메라 ｄｎａ 라이브러리를 만드는 방법
US20040009498A1 (en) * 2002-01-14 2004-01-15 Diversa Corporation Chimeric antigen binding molecules and methods for making and using them
JP2005523688A (ja) * 2002-01-18 2005-08-11 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー タンパク質チロシンキナーゼおよび／またはタンパク質チロシンキナーゼ経路と相互作用する化合物の活性を予測するためのポリヌクレオチドおよびポリペプチドの同定
US7262054B2 (en) * 2002-01-22 2007-08-28 Sangamo Biosciences, Inc. Zinc finger proteins for DNA binding and gene regulation in plants
DE20200926U1 (de) * 2002-01-23 2002-04-18 Hegenscheidt-MFD GmbH & Co. KG, 41812 Erkelenz Festwalzgerät einer Festwalzmaschine für Kurbelwellen
US20040096826A1 (en) * 2002-01-30 2004-05-20 Evans Glen A. Methods for creating recombination products between nucleotide sequences
US7255986B2 (en) * 2002-01-31 2007-08-14 The Board Of Trustees Operating Michigan State University Compositions for the diagnosis and treatment of epizootic catarrhal enteritis in ferrets
DK1476539T3 (da) * 2002-02-12 2009-05-11 Pfizer Prod Inc Streptomyces avermitilis gen dirigerende forholdet af B2:B1 avermectiner
MXPA04007886A (es) 2002-02-13 2004-10-15 Dow Global Technologies Inc Sobre-expresion de genes de extremozimo en pseudomonadas y bacterias estrechamente relacionadas.
US20030224404A1 (en) * 2002-02-25 2003-12-04 Manuel Vega High throughput directed evolution of nucleic acids by rational mutagenesis
WO2003072054A2 (en) * 2002-02-25 2003-09-04 Cabot Corporation Custom ligand design for biomolecular filtration and purification for bioseperation
EP1476563B1 (en) * 2002-02-26 2008-09-17 E.I. Du Pont De Nemours And Company Method for the recombination of genetic elements
WO2003072742A2 (en) * 2002-02-27 2003-09-04 California Institute Of Technology Novel glucose 6-oxidases
WO2003074740A1 (en) * 2002-03-01 2003-09-12 Ravgen, Inc. Rapid analysis of variations in a genome
US6977162B2 (en) 2002-03-01 2005-12-20 Ravgen, Inc. Rapid analysis of variations in a genome
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
EP1493027B1 (en) 2002-03-01 2014-10-15 Codexis Mayflower Holdings, LLC Methods, systems, and software for identifying functional bio-molecules
US7244592B2 (en) 2002-03-07 2007-07-17 Dyax Corp. Ligand screening and discovery
US7620500B2 (en) 2002-03-09 2009-11-17 Maxygen, Inc. Optimization of crossover points for directed evolution
WO2003078645A2 (en) * 2002-03-11 2003-09-25 Nugen Technologies, Inc. Methods for generating double stranded dna comprising a 3’ single stranded portion and uses of these complexes for recombination
US20050221318A1 (en) * 2002-03-15 2005-10-06 Gouliaev Alex H Building block forming a c-c bond upon reaction
AU2003218629A1 (en) * 2002-03-15 2003-09-29 Nuevolution A/S A building block forming a c-c or a c-hetero atom bond uponreaction
AU2003214033A1 (en) * 2002-03-15 2003-09-29 Nuevolution A/S A building block capable of transferring a functional entity
EP1487978B1 (en) * 2002-03-15 2008-11-19 Nuevolution A/S An improved method for synthesising templated molecules
US20050034188A1 (en) * 2002-03-20 2005-02-10 J. R. Simplot Company Refined plant transformation
AU2003230693B2 (en) * 2002-03-20 2010-09-30 J.R. Simplot Company Refined plant transformation
EP2213681A1 (en) 2002-03-22 2010-08-04 Bayer BioScience N.V. Novel Bacillus thuringiensis insecticidal proteins
US20030180781A1 (en) * 2002-03-25 2003-09-25 The Regents Of The University Of California Constructing very long DNA sequences from synthetic DNA molecules
US7452666B2 (en) * 2002-03-25 2008-11-18 Lawrence Livermore National Security, Llc Synthesis of DNA
US20030228598A1 (en) * 2002-03-25 2003-12-11 The Regents Of The University Of California DNA/RNA as a write/read medium
US20030186301A1 (en) * 2002-03-25 2003-10-02 The Regents Of The University Of California Constructing user-defined, long DNA sequences
CA2480052A1 (en) * 2002-04-01 2003-10-16 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies that specifically bind to gmad
US7799523B2 (en) 2002-04-03 2010-09-21 Celltech R & D, Inc. Association of polymorphisms in the SOST gene region with bone mineral density
US7371383B2 (en) 2002-04-12 2008-05-13 Medimmune, Inc. Recombinant anti-interleukin-9 antibodies
AU2003243157C1 (en) 2002-04-19 2008-09-04 Verenium Corporation Phospholipases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US7226771B2 (en) 2002-04-19 2007-06-05 Diversa Corporation Phospholipases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US6776751B2 (en) * 2002-04-22 2004-08-17 Kendor Laboratory Products, Lp Rotor cover attachment apparatus
US7442506B2 (en) 2002-05-08 2008-10-28 Ravgen, Inc. Methods for detection of genetic disorders
US7727720B2 (en) 2002-05-08 2010-06-01 Ravgen, Inc. Methods for detection of genetic disorders
US20070178478A1 (en) * 2002-05-08 2007-08-02 Dhallan Ravinder S Methods for detection of genetic disorders
ATE473284T1 (de) 2002-05-14 2010-07-15 Martek Biosciences Corp Carotinsynthase-gen und dessen verwendung
US7262012B2 (en) * 2002-05-17 2007-08-28 Alligator Bioscience Ab Method for in vitro molecular evolution of protein function using varied exonuclease digestion in two polynucleotide populations
DE10222858A1 (de) 2002-05-23 2003-12-04 Basf Ag Verfahren zur fermentativen Herstellung schwefelhaltiger Feinchemikalien
US7425618B2 (en) 2002-06-14 2008-09-16 Medimmune, Inc. Stabilized anti-respiratory syncytial virus (RSV) antibody formulations
DE60319259T2 (de) * 2002-06-14 2009-03-05 Dyax Corp., Cambridge Rekombination von nukleinsäurebibliotheksmitgliedern
US7132100B2 (en) 2002-06-14 2006-11-07 Medimmune, Inc. Stabilized liquid anti-RSV antibody formulations
AU2003247582A1 (en) * 2002-06-20 2004-01-06 Board Of Trustees Operating Michigan State University Plastid division and related genes and proteins, and methods of use
MXPA04012496A (es) * 2002-06-21 2005-09-12 Novo Nordisk Healthcare Ag Glicoformos del factor vii pegilados.
US20040110184A1 (en) 2002-06-28 2004-06-10 Dow Agrosciences Llc Pesticidally active proteins and polynucleotides obtainable from Paenibacillus species
US9321832B2 (en) 2002-06-28 2016-04-26 Domantis Limited Ligand
US20060002935A1 (en) 2002-06-28 2006-01-05 Domantis Limited Tumor Necrosis Factor Receptor 1 antagonists and methods of use therefor
ES2263984T3 (es) * 2002-06-28 2006-12-16 Domantis Limited Ligandos doble-especificos con una vida media serica aumentada.
JP2005532829A (ja) * 2002-07-18 2005-11-04 インヴィトロジェン コーポレーション 組換え部位を含むウイルスベクター
AU2003247962B2 (en) 2002-07-18 2008-06-12 Monsanto Technology Llc Methods for using artificial polynucleotides and compositions thereof to reduce transgene silencing
US7560260B2 (en) * 2002-07-25 2009-07-14 Bio-Rad Laboratories, Inc. Compositions with polymerase activity
WO2004013070A2 (en) 2002-08-01 2004-02-12 Nuevolution A/S Multi-step synthesis of templated molecules
WO2005003289A2 (en) 2002-08-06 2005-01-13 Verdia, Inc. Ap1 amine oxidase variants
US20040067532A1 (en) 2002-08-12 2004-04-08 Genetastix Corporation High throughput generation and affinity maturation of humanized antibody
EP1534335B9 (en) 2002-08-14 2016-01-13 Macrogenics, Inc. Fcgammariib-specific antibodies and methods of use thereof
AU2003263937B2 (en) * 2002-08-19 2010-04-01 The President And Fellows Of Harvard College Evolving new molecular function
US7361635B2 (en) * 2002-08-29 2008-04-22 Sangamo Biosciences, Inc. Simultaneous modulation of multiple genes
US20050202438A1 (en) * 2002-09-09 2005-09-15 Rene Gantier Rational directed protein evolution using two-dimensional rational mutagenesis scanning
US20060020396A1 (en) * 2002-09-09 2006-01-26 Rene Gantier Rational directed protein evolution using two-dimensional rational mutagenesis scanning
DE60332358D1 (de) * 2002-09-09 2010-06-10 Hanall Pharmaceutical Co Ltd Protease-resistente modifizierte interferon alpha polypeptide
US7563600B2 (en) * 2002-09-12 2009-07-21 Combimatrix Corporation Microarray synthesis and assembly of gene-length polynucleotides
DK1546336T3 (da) 2002-09-18 2012-04-10 Mendel Biotechnology Inc Polynukleotider og polypeptider i planter.
WO2004029207A2 (en) 2002-09-27 2004-04-08 Xencor Inc. Optimized fc variants and methods for their generation
GB0222846D0 (en) 2002-10-03 2002-11-06 Choo Yen Cell culture
US6863731B2 (en) * 2002-10-18 2005-03-08 Controls Corporation Of America System for deposition of inert barrier coating to increase corrosion resistance
JP3447009B1 (ja) * 2002-10-29 2003-09-16 實 平垣 構築物用構成体およびその製造方法
PT2348125T (pt) 2002-10-30 2017-08-29 Nuevolution As Método para a síntese de um complexo bifuncional
TWI319007B (en) 2002-11-06 2010-01-01 Novozymes As Subtilase variants
US7365186B2 (en) * 2002-11-22 2008-04-29 Arborgen, Llc Vascular-preferred promoter sequences and uses thereof
EP2581383A1 (en) 2002-11-25 2013-04-17 Genencor International, Inc. Skin or hair binding peptides
WO2004050041A2 (en) * 2002-12-04 2004-06-17 Applied Molecular Evolution, Inc. Butyrylcholinesterase variants that alter the activity of chemotherapeutic agents
AU2003291964A1 (en) 2002-12-19 2004-07-14 Nuevolution A/S Quasirandom structure and function guided synthesis methods
ES2534903T3 (es) 2002-12-20 2015-04-30 Novozymes A/S Variantes de galactanasas
EP1578964B2 (en) 2002-12-20 2013-09-04 Novozymes A/S Polypeptides having cellobiohydrolase ii activity and polynucleotides encoding same
US20060014248A1 (en) * 2003-01-06 2006-01-19 Xencor, Inc. TNF super family members with altered immunogenicity
US20050221443A1 (en) * 2003-01-06 2005-10-06 Xencor, Inc. Tumor necrosis factor super family agonists
US7553930B2 (en) * 2003-01-06 2009-06-30 Xencor, Inc. BAFF variants and methods thereof
US20050130892A1 (en) * 2003-03-07 2005-06-16 Xencor, Inc. BAFF variants and methods thereof
JP2006524039A (ja) 2003-01-09 2006-10-26 マクロジェニクス，インコーポレーテッド 変異型Ｆｃ領域を含む抗体の同定および作製ならびにその利用法
ES2661213T3 (es) 2003-01-17 2018-03-28 Dupont Nutrition Biosciences Aps Método para la producción in situ de un emulsionante en un producto alimenticio
US7955814B2 (en) 2003-01-17 2011-06-07 Danisco A/S Method
US20050196766A1 (en) 2003-12-24 2005-09-08 Soe Jorn B. Proteins
MXPA05007653A (es) 2003-01-17 2005-09-30 Danisco Metodo.
EP1585815A4 (en) * 2003-01-21 2006-02-22 Bristol Myers Squibb Co A NEW ACYL-COENZYME A, MONOCLYLGLYCERIN ACYLTRANSFERASE-3 (MGAT3), CODING POLYNUCLEOTIDE, AND USES THEREOF
US8709435B2 (en) 2003-01-21 2014-04-29 Biomay Ag Hypallergenic mosaic antigens and methods of making same
CA2516349C (en) 2003-02-20 2014-05-13 Athenix Corporation Delta-endotoxin genes and methods for their use
EP1597394A2 (en) * 2003-02-21 2005-11-23 Nuevolution A/S A method for obtaining structural information about an encoded molecule
US20070026397A1 (en) * 2003-02-21 2007-02-01 Nuevolution A/S Method for producing second-generation library
DK2194133T3 (en) 2003-03-06 2016-02-29 Basf Enzymes Llc Amylases, nucleic acids encoding them, and methods of making and using the same
EP2853593B1 (en) 2003-03-07 2017-10-04 DSM IP Assets B.V. Hydrolases, nucleic acids encoding them and mehods for making and using them
JP4912144B2 (ja) 2003-03-12 2012-04-11 ジェネンテック， インコーポレイテッド 造血促進のためのｂｖ８及び／又はｅｇ−ｖｅｇｆの使用
KR20060003862A (ko) * 2003-03-14 2006-01-11 네오스 테크놀로지스, 인크. 수용성분기폴리머 및 그 접합체
DE602004019764D1 (de) * 2003-03-20 2009-04-16 Nuevolution As Ligationsvermittelnde codierung von kleinen molekülen
WO2004087882A2 (en) * 2003-03-26 2004-10-14 Washington University Neuregulin protein regulation of synaptic proteins
WO2004087059A2 (en) 2003-03-26 2004-10-14 The University Of Texas Covalent attachment of ligands to nucleophilic proteins guided by non-covalent binding
US8017323B2 (en) * 2003-03-26 2011-09-13 President And Fellows Of Harvard College Free reactant use in nucleic acid-templated synthesis
CA2520381A1 (en) * 2003-03-26 2004-10-14 Sudhir Paul Proteolytic and covalent antibodies
EP1613643A4 (en) * 2003-03-27 2009-10-28 Sudhir Paul LUPUS ANTIBODIES FOR THE PASSIVE IMMUNE THERAPY OF HIV / AIDS
US7592434B2 (en) 2003-04-04 2009-09-22 Verenium Corporation Pectate lyases, nucleic encoding them and methods for making and using them
US8791070B2 (en) 2003-04-09 2014-07-29 Novo Nordisk A/S Glycopegylated factor IX
EP2055189A1 (en) 2003-04-09 2009-05-06 Neose Technologies, Inc. Glycopegylation methods and proteins/peptides produced by the methods
JP4764818B2 (ja) 2003-04-11 2011-09-07 メディミューン，エルエルシー 組換えｉｌ−９抗体およびその使用
JP2006523465A (ja) 2003-04-14 2006-10-19 ニューゲン テクノロジーズ， インコーポレイテッド ランダムにプライミングされる複合プライマーを用いる大規模増幅
US20040214194A1 (en) * 2003-04-17 2004-10-28 Mj Bioworks, Inc. Methods of making hybrid proteins
AU2004235346A1 (en) 2003-04-25 2004-11-11 North Carolina State University Lactobacillus acidophilus nucleic acid sequences encoding cell surface protein homologues and uses therefore
US7834147B2 (en) 2003-04-28 2010-11-16 Childrens Hospital Medical Center Saposin C-DOPS: a novel anti-tumor agent
CN1863914B (zh) 2003-04-29 2011-03-09 先锋高级育种国际公司 新的草甘膦-n-乙酰转移酶(gat)基因
DK1622921T3 (da) 2003-05-02 2010-09-13 Novozymes Inc Varianter af beta-glucosidaser
US20050009772A1 (en) * 2003-05-06 2005-01-13 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for the treatment of glaucoma and other retinal diseases
BRPI0409992A (pt) 2003-05-07 2006-05-09 Novozymes As enzima subtilase, polinucleotìdeo isolado, construção de ácido nucleico, vetor de expressão recombinante, célula hospedeira recombinante, método para produzir a subtilase, composição limpadora ou detergente, usos de uma subtilase e de uma composição limpadora ou detergente, e, métodos para limpar ou lavar louças, lavar uma superfìcie dura ou lavar roupas e para remover manchas de ovo de uma superfìcie dura ou de roupas para lavar
US7521242B2 (en) 2003-05-09 2009-04-21 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Host cells deficient for mismatch repair and their use in methods for inducing homologous recombination using single-stranded nucleic acids
AU2004240553A1 (en) * 2003-05-09 2004-12-02 Neose Technologies, Inc. Compositions and methods for the preparation of human growth hormone glycosylation mutants
US20070073048A1 (en) 2003-05-15 2007-03-29 Ying Lian Hiv polynucleotides and polypeptides derived from botswana mj4
US7173010B2 (en) * 2003-05-19 2007-02-06 Regents Of The University Of Michigan Orphanin FQ receptor
US7655833B2 (en) * 2003-05-29 2010-02-02 Brookhaven Science Associates, Llc ADS genes for reducing saturated fatty acid levels in seed oils
AU2004252481B2 (en) * 2003-06-06 2011-01-27 Arborgen Inc. Compositions and methods for regulating polysaccharides of a plant cell
MXPA05013190A (es) * 2003-06-06 2007-05-23 Arborgen Llc Factores de transcripcion.
EP1636270B1 (en) * 2003-06-16 2016-07-20 UCB Pharma S.A. Antibodies specific for sclerostin and methods for increasing bone mineralization
WO2005017105A2 (en) 2003-06-17 2005-02-24 California University Of Technology Regio- and enantioselective alkane hydroxylation with modified cytochrome p450
WO2005017106A2 (en) * 2003-06-17 2005-02-24 California Institute Of Technology Libraries of optimized cytochrome p450 enzymes and the optimized p450 enzymes
JP2006527590A (ja) 2003-06-18 2006-12-07 ディレボ・ビオテク・アーゲー 新規生物学的実体およびその使用
DE602004027376D1 (de) 2003-06-19 2010-07-08 Novozymes As Proteasen
DE602004032144D1 (de) 2003-06-23 2011-05-19 Univ North Carolina State Für fructooligosaccharid-nutzende verbindungen codierende nukleinsäuren aus lactobacillus acidophilus und verwendungen davon
WO2005028615A2 (en) * 2003-06-26 2005-03-31 Invitrogen Corporation Methods and compositions for detecting promoter activity and expressing fusion proteins
CN103484486B (zh) 2003-07-02 2018-04-24 维莱尼姆公司 葡聚糖酶，编码它们的核酸以及制备和使用它们的方法
WO2005012484A2 (en) 2003-07-25 2005-02-10 Neose Technologies, Inc. Antibody-toxin conjugates
WO2005017116A2 (en) * 2003-08-11 2005-02-24 California Institute Of Technology Thermostable peroxide-driven cytochrome p450 oxygenase variants and methods of use
EP1668113B1 (en) 2003-08-11 2013-06-19 Verenium Corporation Laccases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
EP1660186B1 (en) 2003-08-18 2013-12-25 MedImmune, LLC Humanization of antibodies
US20060228350A1 (en) * 2003-08-18 2006-10-12 Medimmune, Inc. Framework-shuffling of antibodies
US7326782B2 (en) * 2003-08-21 2008-02-05 Wisconsin Alumni Research Foundation Metabolic engineering of viomycin biosynthesis
CN103088001A (zh) 2003-08-25 2013-05-08 诺维信股份有限公司 糖苷水解酶的变体
WO2005019251A2 (en) 2003-08-25 2005-03-03 Funzyme Biotechnologies Sa Novel fungal proteins and nucleic acids encoding same
US20120202710A1 (en) 2003-09-09 2012-08-09 Integrigen, Inc. Methods and compositions for generation of germline human antibody genes
EP1670939B1 (en) 2003-09-18 2009-11-04 Nuevolution A/S A method for obtaining structural information concerning an encoded molecule and method for selecting compounds
WO2005035723A2 (en) * 2003-10-07 2005-04-21 United Therapeutics Corporation Tyrosinase mutant and methods of use thereof
EP1675871A2 (en) 2003-10-10 2006-07-05 Xencor Inc. Protein based tnf-alpha variants for the treatment of tnf-alpha related disorders
EP2308966A1 (en) 2003-10-10 2011-04-13 Novozymes A/S Protease variants
US20050084868A1 (en) * 2003-10-16 2005-04-21 Wolfgang Aehle Generation of stabilized proteins by combinatorial consensus mutagenesis
WO2005040372A1 (en) 2003-10-23 2005-05-06 Novozymes A/S Protease with improved stability in detergents
ES2437198T3 (es) 2003-10-28 2014-01-09 Novozymes Inc. Polipéptidos con actividad de beta-glucosidasa y polinucleótidos aislados que codifican los polipéptidos
US7659120B2 (en) 2003-11-12 2010-02-09 E. I. Du Pont De Nemours And Company Δ 15 desaturases suitable for altering levels of polyunsaturated fatty acids in oleaginous plants and yeast
US7985569B2 (en) 2003-11-19 2011-07-26 Danisco Us Inc. Cellulomonas 69B4 serine protease variants
WO2005052146A2 (en) 2003-11-19 2005-06-09 Genencor International, Inc. Serine proteases, nucleic acids encoding serine enzymes and vectors and host cells incorporating same
WO2005049831A1 (en) * 2003-11-20 2005-06-02 Agency For Science Technology And Research Method
US8633157B2 (en) * 2003-11-24 2014-01-21 Novo Nordisk A/S Glycopegylated erythropoietin
US20080305992A1 (en) * 2003-11-24 2008-12-11 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated erythropoietin
ES2445948T3 (es) * 2003-11-24 2014-03-06 Ratiopharm Gmbh Eritropoyetina glicopegilada
US8304189B2 (en) * 2003-12-01 2012-11-06 Life Technologies Corporation Nucleic acid molecules containing recombination sites and methods of using the same
US20060040856A1 (en) * 2003-12-03 2006-02-23 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated factor IX
KR101237884B1 (ko) * 2003-12-03 2013-02-27 바이오제너릭스 에이지 글리코 peg화 과립구 콜로니 자극인자
US7956032B2 (en) 2003-12-03 2011-06-07 Novo Nordisk A/S Glycopegylated granulocyte colony stimulating factor
ES2280891T3 (es) * 2003-12-04 2007-09-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Metodo para obtener polinucleotidos circulares mutados y/o quimericos.
US20070169227A1 (en) 2003-12-16 2007-07-19 Pioneer Hi-Bred International Inc. Dominant Gene Suppression Transgenes and Methods of Using Same
GB0716126D0 (en) 2007-08-17 2007-09-26 Danisco Process
US7718408B2 (en) 2003-12-24 2010-05-18 Danisco A/S Method
DK2119771T3 (en) 2003-12-24 2018-12-10 Dupont Nutrition Biosci Aps PROTEINS
US7338933B2 (en) * 2004-01-08 2008-03-04 Neose Technologies, Inc. O-linked glycosylation of peptides
ES2468366T3 (es) 2004-01-30 2014-06-16 Novozymes Inc. Polip�ptidos con actividad de mejora celulol�tica y polinucle�tidos que los codifican
US7432057B2 (en) * 2004-01-30 2008-10-07 Michigan State University Genetic test for PSE-susceptible turkeys
EP1715736A4 (en) 2004-02-12 2008-09-03 Novozymes Inc POLYPEPTIDES HAVING XYLANASE ACTIVITY AND POLYNUCLEOTIDES ENCODING SAME
CN101671680B (zh) 2004-02-25 2012-11-28 先锋高级育种国际公司 新的苏云金芽孢杆菌晶体多肽、多核苷酸及其组合物
JP4891220B2 (ja) 2004-02-25 2012-03-07 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 菌類細胞壁分解酵素
CA2558749A1 (en) * 2004-02-27 2005-09-29 President And Fellows Of Harvard College Polynucleotide synthesis
US7459289B2 (en) 2004-03-08 2008-12-02 North Carolina State University Lactobacillus acidophilus nucleic acid sequences encoding carbohydrate utilization-related proteins and uses therefor
GB0405637D0 (en) 2004-03-12 2004-04-21 Danisco Protein
US7569223B2 (en) * 2004-03-22 2009-08-04 The Rockefeller University Phage-associated lytic enzymes for treatment of Streptococcus pneumoniae and related conditions
DE602005017370D1 (de) * 2004-03-22 2009-12-10 Nuevolution As Ligationscodierung unter verwendung von oligonukleotidbausteinen
CA2560613C (en) 2004-03-22 2015-11-24 Solvay Pharmaceuticals Gmbh Oral pharmaceutical compositions of lipase-containing products, in particular of pancreatin, containing surfactants
US7973139B2 (en) * 2004-03-26 2011-07-05 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies against nogo receptor
EP1732650A4 (en) * 2004-03-27 2008-06-11 Univ Arizona COMPOSITION AND METHOD FOR CANCER TREATMENT
EP1732378B1 (en) 2004-04-02 2013-01-16 CropDesign N.V. Plants overexpressing a NAP1-like protein with increased seed yield a method for making the same
WO2005115477A2 (en) 2004-04-13 2005-12-08 Quintessence Biosciences, Inc. Non-natural ribonuclease conjugates as cytotoxic agents
PT2308977E (pt) 2004-04-30 2013-05-13 Dow Agrosciences Llc Novo gene de resistência a herbicida
US7622125B2 (en) 2004-05-05 2009-11-24 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Polycistronic HIV vector constructs
KR101083595B1 (ko) * 2004-05-14 2011-11-16 가톨릭대학교 산학협력단 단백질 형질도입 도메인 유전자를 함유하는 재조합베큘로바이러스 발현벡터
US7674621B2 (en) 2004-05-21 2010-03-09 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Plasmids and phages for homologous recombination and methods of use
US9045748B2 (en) 2004-05-27 2015-06-02 Novozymes, Inc. Methods for transforming and expression screening of filamentous fungal cells with a DNA library
US7825293B2 (en) 2004-05-28 2010-11-02 Cropdesign N.V. Plants having improved growth characteristics and a method for making the same
AU2005254993B2 (en) 2004-06-09 2009-08-06 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Plastid transit peptides
CN101432292B (zh) 2004-06-16 2013-03-13 维莱尼姆公司 对叶绿素进行酶促脱色的组合物和方法
US20060008844A1 (en) 2004-06-17 2006-01-12 Avidia Research Institute c-Met kinase binding proteins
EP2258839B1 (en) 2004-06-21 2015-06-03 Novozymes A/S Proteases
US7985892B1 (en) 2004-06-29 2011-07-26 Dow Agrosciences Llc Truncated Cry35 proteins
CN104195123A (zh) 2004-06-29 2014-12-10 诺维信股份有限公司 具有α-葡糖苷酶活性的多肽及编码其的多核苷酸
CA2571585C (en) 2004-06-30 2011-11-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Methods of protecting plants from pathogenic fungi
EP1763536B1 (en) 2004-07-02 2010-09-08 Pioneer-Hi-Bred International, Inc. Antifungal polypeptides
CN107151662B (zh) 2004-07-05 2021-06-29 诺维信公司 具有改变特性的α-淀粉酶变异体
WO2006005751A1 (en) 2004-07-12 2006-01-19 Cropdesign N.V. Plants having improved growth characteristics and method for making the same
WO2006010143A2 (en) 2004-07-13 2006-01-26 Neose Technologies, Inc. Branched peg remodeling and glycosylation of glucagon-like peptide-1 [glp-1]
CN102533440B (zh) 2004-07-16 2017-09-19 杜邦营养生物科学有限公司 用酶使油脱胶的方法
EP1778296B1 (en) 2004-07-20 2012-06-06 Isogenis, Inc. Specific inhibition of autoimmunity and diseases associated with autoantigens
WO2006020372A2 (en) * 2004-07-23 2006-02-23 Neose Technologies, Inc. Enzymatic modification of glycopeptides
WO2006012902A2 (en) 2004-08-02 2006-02-09 Novozymes A/S Creation of diversity in polypeptides
CA2576195A1 (en) * 2004-08-05 2006-02-16 Biosite Incorporated Compositions and methods for phage display of polypeptides
US7597884B2 (en) 2004-08-09 2009-10-06 Alios Biopharma, Inc. Hyperglycosylated polypeptide variants and methods of use
US7148051B2 (en) * 2004-08-16 2006-12-12 E. I. Du Pont De Nemours And Company Production of 3-hydroxycarboxylic acid using nitrilase
FI20050753A7 (fi) 2004-09-03 2006-03-04 Licentia Oy Uudet peptidit
WO2006031811A2 (en) * 2004-09-10 2006-03-23 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated interferon alpha
US7563443B2 (en) * 2004-09-17 2009-07-21 Domantis Limited Monovalent anti-CD40L antibody polypeptides and compositions thereof
US7728118B2 (en) 2004-09-17 2010-06-01 Promega Corporation Synthetic nucleic acid molecule compositions and methods of preparation
WO2006034292A2 (en) 2004-09-21 2006-03-30 Medimmune, Inc. Antibodies against and methods for producing vaccines for respiratory syncytial virus
US7799906B1 (en) 2004-09-22 2010-09-21 Arborgen, Llc Compositions and methods for modulating lignin of a plant
US7453025B2 (en) 2004-09-22 2008-11-18 Arborgen, Llc Reproductive ablation constructs
GB0421598D0 (en) 2004-09-29 2004-10-27 Cambridge Advanced Tech Modification of plant development and morphology
US7666616B2 (en) 2004-09-30 2010-02-23 Trustees Of Dartmouth College Nucleic acid sequences encoding luciferase for expression in filamentous fungi
EP2295555A3 (en) 2004-09-30 2011-08-10 Novozymes, Inc. Polypeptides having lipase activity and polynucleotides encodig same
AR050895A1 (es) 2004-10-04 2006-11-29 Novozymes As Polipeptidos que tienen actividad de fitasa y polinucleotidos que los codifican
EP1809747B1 (en) 2004-10-04 2016-12-14 Novozymes A/S Polypeptides having phytase activity and polynucleotides encoding same
GB0422052D0 (en) 2004-10-04 2004-11-03 Dansico As Enzymes
EP2163632A1 (en) 2004-10-05 2010-03-17 SunGene GmbH Constitutive expression cassettes for regulation of plant expression
KR20070084069A (ko) 2004-10-08 2007-08-24 도만티스 리미티드 Ｔｎｆｒ1에 대한 단일 도메인 항체 및 이의 사용 방법
EP3318121A1 (en) 2004-10-08 2018-05-09 Dow AgroSciences LLC Certain plants with "no saturate" or reduced saturate levels of fatty acids in seeds, and oil derived from the seeds
GB0423139D0 (en) 2004-10-18 2004-11-17 Danisco Enzymes
WO2006047791A2 (en) * 2004-10-27 2006-05-04 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Dna-templated combinatorial library device and method for use
WO2006047669A2 (en) * 2004-10-27 2006-05-04 Monsanto Technology Llc Non-random method of gene shuffling
US20060121042A1 (en) 2004-10-27 2006-06-08 Medimmune, Inc. Modulation of antibody specificity by tailoring the affinity to cognate antigens
US20080176790A1 (en) 2004-10-29 2008-07-24 Defrees Shawn Remodeling and Glycopegylation of Fibroblast Growth Factor (Fgf)
US20080108502A1 (en) 2004-10-29 2008-05-08 Cropdesign N.V. Plants Having Improved Growth Characteristics And Method For Making The Same
EP1655364A3 (en) 2004-11-05 2006-08-02 BASF Plant Science GmbH Expression cassettes for seed-preferential expression in plants
EP1817413B1 (en) 2004-11-11 2012-01-04 Modular Genetics, Inc. Oligonucleotide ladder assembly and system for generating molecular diversity
EP1814996A2 (en) 2004-11-19 2007-08-08 Novozymes A/S Polypeptides having antimicrobial activity and polynucleotides encoding same
EP1662000B1 (en) 2004-11-25 2011-03-30 SunGene GmbH Expression cassettes for guard cell-preferential expression in plants
EP1666599A3 (en) 2004-12-04 2006-07-12 SunGene GmbH Expression cassettes for mesophyll- and/or epidermis-preferential expression in plants
EP1669455B1 (en) 2004-12-08 2009-10-28 SunGene GmbH Expression cassettes for vascular tissue-preferential expression in plants
EP1669456A3 (en) 2004-12-11 2006-07-12 SunGene GmbH Expression cassettes for meristem-preferential expression in plants
EP2365068B1 (en) 2004-12-22 2017-03-01 Novozymes A/S Enzymes for starch processing
US7198927B2 (en) 2004-12-22 2007-04-03 E. I. Du Pont De Nemours And Company Enzymatic production of glycolic acid
EP1831376A1 (en) 2004-12-28 2007-09-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Improved grain quality through altered expression of seed proteins
JP2008526864A (ja) * 2005-01-06 2008-07-24 ネオス テクノロジーズ インコーポレイテッド 糖断片を用いる糖結合
US9029331B2 (en) * 2005-01-10 2015-05-12 Novo Nordisk A/S Glycopegylated granulocyte colony stimulating factor
DE602006013788D1 (de) 2005-01-13 2010-06-02 Du Pont Cyclo-1-gen aus mais und promoter
JP2008526259A (ja) * 2005-01-13 2008-07-24 コドン デバイシズ インコーポレイテッド 蛋白質デザインのための組成物及び方法
AR052101A1 (es) 2005-01-27 2007-02-28 Cropdesign Nv Plantas con aumento del rendimiento y un metodo para obtenerlas
KR101335798B1 (ko) 2005-02-15 2013-12-02 듀크 유니버시티 항-ｃｄ19 항체 및 종양학에서 이의 용도
EP3581024A1 (en) 2005-03-02 2019-12-18 Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria Herbicide-resistant rice plants, polynucleotides encoding herbicide-resistant acetohydroxyacid synthase large subunit proteins, and methods of use
EP2886658A1 (en) 2005-03-10 2015-06-24 BASF Enzymes LLC Lyase enzymes, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
MX300732B (es) 2005-03-15 2012-06-28 Verenium Corp Celulasas, acidos nucleicos que las codifican y metodos para hacerlas y usarlas.
CN100577805C (zh) * 2005-03-16 2010-01-06 中国科学院沈阳应用生态研究所 一种基因改组的方法及所获得的重组基因和编码蛋白
JP5153613B2 (ja) 2005-03-18 2013-02-27 メディミューン，エルエルシー 抗体のフレームワーク・シャッフル
EP1863836B1 (en) 2005-03-18 2012-07-11 Novozymes Adenium Biotech A/S Polypeptides having antimicrobial activity and polynucleotides encoding same
CA2601400A1 (en) 2005-03-19 2006-09-28 Medical Research Council Improvements in or relating to treatment and prevention of viral infections
US8715988B2 (en) * 2005-03-28 2014-05-06 California Institute Of Technology Alkane oxidation by modified hydroxylases
US11214817B2 (en) 2005-03-28 2022-01-04 California Institute Of Technology Alkane oxidation by modified hydroxylases
ATE548378T1 (de) 2005-04-01 2012-03-15 Athenix Corp Axmi-036 ein delta-endotoxin-gen und verfahren zur dessen verwendung
US20070154992A1 (en) * 2005-04-08 2007-07-05 Neose Technologies, Inc. Compositions and methods for the preparation of protease resistant human growth hormone glycosylation mutants
EP3479844B1 (en) 2005-04-15 2023-11-22 MacroGenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
AU2006236629B2 (en) 2005-04-15 2012-04-19 North Carolina State University Methods and compositions to modulate adhesion and stress tolerance in bacteria
ATE552343T1 (de) 2005-04-19 2012-04-15 Basf Plant Science Gmbh Endosperm-spezifische expression und/oder expression in keimenden embryos monokotyledoner pflanzen
CN101253263B (zh) 2005-04-27 2014-07-02 诺维信股份有限公司 具有内切葡聚糖酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
US7592429B2 (en) 2005-05-03 2009-09-22 Ucb Sa Sclerostin-binding antibody
US8003108B2 (en) 2005-05-03 2011-08-23 Amgen Inc. Sclerostin epitopes
CA2607281C (en) 2005-05-05 2023-10-03 Duke University Anti-cd19 antibody therapy for autoimmune disease
CN1861789B (zh) * 2005-05-13 2010-04-28 中国科学院沈阳应用生态研究所 一种综合的基因改组方法及所获得的重组基因和编码蛋白
AR053269A1 (es) 2005-05-16 2007-04-25 Monsanto Technology Llc Plantas y semillas de maiz con mejoramiento de asparagina y proteina
WO2006127423A2 (en) * 2005-05-18 2006-11-30 Codon Devices, Inc. Methods of producing polynucleotide libraries using scarless ligation
US20060263974A1 (en) * 2005-05-18 2006-11-23 Micron Technology, Inc. Methods of electrically interconnecting different elevation conductive structures, methods of forming capacitors, methods of forming an interconnect between a substrate bit line contact and a bit line in DRAM, and methods of forming DRAM memory cell
US20060271262A1 (en) * 2005-05-24 2006-11-30 Mclain Harry P Iii Wireless agricultural network
EP1888098A2 (en) * 2005-05-25 2008-02-20 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated erythropoietin formulations
EP1891231A4 (en) * 2005-05-25 2011-06-22 Novo Nordisk As GLYCOPEGYLATED FACTOR IX
US20110003744A1 (en) * 2005-05-25 2011-01-06 Novo Nordisk A/S Glycopegylated Erythropoietin Formulations
WO2006133013A2 (en) * 2005-06-03 2006-12-14 The Regents Of The University Of California Methods of generating protein variants with altered function
DK1899378T3 (da) 2005-06-21 2010-02-01 Xoma Technology Ltd IL-1 beta-bindende antistoffer og fragmenter deraf
EP1893647A2 (en) 2005-06-23 2008-03-05 MedImmune, Inc. Antibody formulations having optimized aggregation and fragmentation profiles
US7582291B2 (en) * 2005-06-30 2009-09-01 The Rockefeller University Bacteriophage lysins for Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium and other bacteria
CN101287836B (zh) 2005-07-01 2013-02-20 巴斯福股份公司 抗除草剂的向日葵植物、编码抗除草剂的乙酰羟酸合酶大亚基蛋白的多核苷酸和使用方法
WO2007003660A1 (en) 2005-07-06 2007-01-11 Cropdesign N.V. Plant yield improvement by ste20-like gene expression
JP2009500023A (ja) 2005-07-08 2009-01-08 ノボザイムス アクティーゼルスカブ サブチラーゼ変異体
WO2007008951A1 (en) * 2005-07-12 2007-01-18 Codon Devices, Inc. Compositions and methods for design of non-immunogenic proteins
JP2009501522A (ja) * 2005-07-12 2009-01-22 コドン デバイシズ インコーポレイテッド 生体触媒工学のための組成物及び方法
WO2007011722A2 (en) 2005-07-15 2007-01-25 President And Fellows Of Harvard College Reaction discovery system
BRPI0612862A2 (pt) 2005-07-18 2010-11-30 Pioneer Hi Bred Int polinucleotìdeo isolado, método para obtenção de uma célula transformada, método para obtenção de uma planta transformada, método de produção de recombinação de dna de sìtio especìfico, biblioteca isolada, método de geração de biblioteca de moléculas e método para selecionar sìtio de recombinação frt modificado
KR101555058B1 (ko) 2005-07-29 2015-09-22 애보트 래버러토리즈 게엠베하 살균된 판크레아틴 분말의 제조방법
RU2421462C2 (ru) 2005-07-29 2011-06-20 Таргитид Гроус, Инк. Защитное действие доминантно-негативного мутантного белка krp от ингибирования активного комплекса циклин-cdk krp дикого типа
DE102005037351B3 (de) * 2005-08-08 2007-01-11 Geneart Ag Verfahren für die kontinuierliche zielgerichtete Evolution von Proteinen in vitro
HUE029465T2 (en) 2005-08-10 2017-02-28 Macrogenics Inc Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
US20080193477A1 (en) * 2005-08-10 2008-08-14 Acambis Inc. Vaccination Against Dengue Virus Infection
US11266607B2 (en) 2005-08-15 2022-03-08 AbbVie Pharmaceuticals GmbH Process for the manufacture and use of pancreatin micropellet cores
US9198871B2 (en) 2005-08-15 2015-12-01 Abbott Products Gmbh Delayed release pancreatin compositions
US20070105755A1 (en) 2005-10-26 2007-05-10 Neose Technologies, Inc. One pot desialylation and glycopegylation of therapeutic peptides
EP2360248A1 (en) 2005-08-24 2011-08-24 The Rockefeller University Ply-GBS mutant lysins
CA2620125C (en) 2005-08-26 2013-08-20 Novozymes A/S Polypeptides having antimicrobial activity and polynucleotides encoding same
US7541431B2 (en) * 2005-09-07 2009-06-02 Maine Medical Center Cristin/R-spondin ligands active in the Wnt signaling pathway and methods, compositions and kits relating thereto
WO2007030759A2 (en) 2005-09-07 2007-03-15 Nugen Technologies, Inc. Improved nucleic acid amplification procedure
CN101268193A (zh) 2005-09-15 2008-09-17 克罗普迪塞恩股份有限公司 通过组3 lea表达的植物产量改良
US8173613B2 (en) * 2005-09-22 2012-05-08 Maine Medical Center Modulation of mesenchymal and metastatic cell growth
EP2385110A3 (en) 2005-09-30 2011-11-16 Novozymes, Inc. Methods for enhancing the degradation or conversion of cellulosic material
US7312079B1 (en) 2005-10-06 2007-12-25 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Variants of FAM3C
US7470532B2 (en) 2005-10-19 2008-12-30 E.I. Du Pont De Nemours And Company Mortierella alpina C16/18 fatty acid elongase
CN101553111B (zh) 2005-10-28 2013-06-26 美国陶氏益农公司 新除草剂抗性基因
WO2007056191A2 (en) 2005-11-03 2007-05-18 Neose Technologies, Inc. Nucleotide sugar purification using membranes
EP1948807B1 (en) 2005-11-07 2015-09-30 CropDesign N.V. Plants having improved growth characteristics and a method for making the same
US8853492B2 (en) 2005-11-07 2014-10-07 Cropdesign N.V. Plants having improved growth characteristics and a method for making the same
AU2006311005B2 (en) 2005-11-08 2013-06-06 Cropdesign N.V. Plants having improved growth characteristics and a method for making the same
US20070118920A1 (en) 2005-11-09 2007-05-24 Basf Agrochemical Products B.V. Herbicide-resistant sunflower plants, polynucleotides encoding herbicide-resistant acetohydroxyacid synthase large subunit proteins, and methods of use
EP2112223A3 (en) 2005-11-10 2010-01-27 Pioneer Hi-Bred International Inc. DOF (DNA binding with one finger) sequences and method of use
US20070199096A1 (en) 2005-11-14 2007-08-23 E.I. Du Pont De Nemours And Company Compositions and Methods for Altering Alpha- and Beta-Tocotrienol Content
EP1965824A4 (en) * 2005-11-18 2011-10-19 Gloucester Pharmaceuticals Inc METABOLITENE DERIVATIVES OF HDAC INHIBITOR FK228
GB2432366B (en) * 2005-11-19 2007-11-21 Alligator Bioscience Ab A method for in vitro molecular evolution of protein function
GB0526664D0 (en) * 2005-11-30 2006-02-08 Plasticell Ltd Method
HUE056836T2 (hu) 2005-12-01 2022-03-28 Nuevolution As Enzimatikus kódolási eljárások nagy könyvtárak hatékony szintéziséhez
AR057205A1 (es) 2005-12-01 2007-11-21 Athenix Corp Genes grg23 y grg51 que confieren resistencia a herbicidas
WO2007064724A2 (en) 2005-12-01 2007-06-07 Cropdesign N.V. Plants having improved growth characteristics and methods for making the same
KR100784478B1 (ko) 2005-12-05 2007-12-11 한국과학기술원 기능요소의 동시 삽입에 의한 신기능을 갖는 단백질을제조하는 방법
US20080313769A9 (en) 2006-01-12 2008-12-18 Athenix Corporation EPSP synthase domains conferring glyphosate resistance
US20090324574A1 (en) 2006-02-02 2009-12-31 Verenium Corporation Esterases and Related Nucleic Acids and Methods
WO2007094852A2 (en) 2006-02-10 2007-08-23 Verenium Corporation Cellulolytic enzymes, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
EP2548955A1 (en) 2006-02-14 2013-01-23 Verenium Corporation Xylanases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
AU2007223364B2 (en) 2006-03-02 2014-02-13 Athenix Corporation Methods and compositions for improved enzyme activity in transgenic plant
EP2650306A1 (en) 2006-03-06 2013-10-16 Aeres Biomedical Limited Humanized Anti-CD22 antibodies and their use in treatment of oncology, transplantation and autoimmune disease
MX2008011477A (es) 2006-03-07 2008-09-23 Cargill Inc Aldolasas, acidos nucleicos que las codifican y metodos para hacerlas y usarlas.
BRPI0708614A2 (pt) 2006-03-07 2011-06-07 Verenium Corp aldolases, ácidos nucléicos codificando as mesmas e métodos para produzir e usar as mesmas
US20070214515A1 (en) 2006-03-09 2007-09-13 E.I.Du Pont De Nemours And Company Polynucleotide encoding a maize herbicide resistance gene and methods for use
BRPI0708949B1 (pt) 2006-03-20 2017-04-04 Novozymes As métodos para degradar ou converter um material celulósico, para produzir uma susbtância, e para produzir um polipeptídeo tendo atividade endoglucanase, e, célula microbiana recombinante
US8703278B2 (en) * 2006-03-28 2014-04-22 Honeywell International Inc. Light weight printed wiring board
US8063267B2 (en) 2006-03-30 2011-11-22 Novozymes, Inc. Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
EP2439280A1 (en) 2006-03-31 2012-04-11 BASF Plant Science GmbH Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
DK2365064T3 (en) 2006-04-04 2015-03-30 Novozymes As Phytasevarianter
EP1842915A1 (en) 2006-04-04 2007-10-10 Libragen Method of in vitro polynucleotide sequences shuffling by recursive circular DNA molecules fragmentation and ligation
EP2251349A1 (en) 2006-04-19 2010-11-17 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Isolated polynucleotide molecules corresponding to mutant and wild-type alleles of the maize D9 gene and methods of use
WO2007145704A2 (en) * 2006-04-24 2007-12-21 Gloucester Pharmaceuticals Gemcitabine combination therapy
ATE497539T1 (de) 2006-05-16 2011-02-15 Pioneer Hi Bred Int Antimykotische polypeptide
WO2007137114A2 (en) 2006-05-17 2007-11-29 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Artificial plant minichromosomes
WO2007136834A2 (en) * 2006-05-19 2007-11-29 Codon Devices, Inc. Combined extension and ligation for nucleic acid assembly
US10072256B2 (en) 2006-05-22 2018-09-11 Abbott Products Gmbh Process for separating and determining the viral load in a pancreatin sample
CA2911267A1 (en) 2006-05-30 2007-12-06 Valerie Frankard Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
US8957027B2 (en) 2006-06-08 2015-02-17 Celgene Corporation Deacetylase inhibitor therapy
EP2035555A2 (en) 2006-06-08 2009-03-18 BASF Plant Science GmbH Plants having improved growth characteristics and method for making the same
EP2599869A3 (en) 2006-06-15 2013-09-11 CropDesign N.V. Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
EP2455391A3 (en) 2006-06-15 2012-08-22 Athenix Corporation A family of pesticidal proteins and methods for their use
BRPI0712507A2 (pt) 2006-06-15 2011-07-05 Cropdesign Nv método para intensificar caracterìsticas relacionadas ao rendimento em plantas, planta ou parte da mesma, contrução uso de uma construção planta, parte de planta ou célula vegetal, método para a produção de uma planta transgência, partes colhìveis de um planta, produtos, uso de um ácido nucleico, molécula isolada de ácido nucleico, e, polipeptìdeo isolado
EP2038406A2 (en) 2006-06-19 2009-03-25 National Research Council of Canada Nucleic acid encoding n-methylputrescine oxidase and uses thereof
EP2044097A4 (en) * 2006-06-23 2010-10-06 Quintessence Biosciences Inc Modified ribonucleases
HUE030269T2 (en) 2006-06-26 2017-04-28 Macrogenics Inc FC RIIB-specific antibodies and methods for their use
US20080004410A1 (en) * 2006-06-30 2008-01-03 Yu-Chin Lai Hydrophilic macromonomers having alpha,beta-conjugated carboxylic terminal group and medical devices incorporating same
US7572618B2 (en) 2006-06-30 2009-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Polynucleotides encoding novel PCSK9 variants
US7977535B2 (en) 2006-07-12 2011-07-12 Board Of Trustees Of Michigan State University DNA encoding ring zinc-finger protein and the use of the DNA in vectors and bacteria and in plants
BRPI0714241A2 (pt) 2006-07-13 2013-03-12 Dsm Ip Assets Bv uso de uma amilase bacteriana, mÉtodos para preparar uma composiÇço, para aumentar o produÇço de leite de animais da subfamÍlia bovinae, para aumentar a espessura de gordura no dorso de animais da sbufamÍlia bovinae, para aumenantar o ganho de peso e/ou proporÇço de conversço de raÇço de animais da subfamÍlia bovinae, e para melhorar a digestibilidade aparente e/ou desaparecimento de mÁteria seca de gÊneros alimentÍcios em animais da subfamÍlia bovinae, e, uso de uma amilase bacteriana, mÉtodos para preparar uma composiÇço, para aumentar o produÇço de leite de animais da subfamÍlia bovinae, para aumentar a espessura de gordura no dorso de animais da subfamÍlia bovinae, para aumentar o ganho de peso e/ou proporÇço de conversço de raÇço de animais da subfamÍlia bovinae, e para melhorar a digestibilidade aparente e/ou desaparecimento de matÉria seca de gÊneros alimenticÍcios em animais da subfamÍlia bovinae, e, composiÇço
US8298801B2 (en) 2006-07-17 2012-10-30 Quintessence Biosciences, Inc. Methods and compositions for the treatment of cancer
ES2516694T3 (es) * 2006-07-21 2014-10-31 Ratiopharm Gmbh Glicosilación de péptidos a través de secuencias de glicosilación con unión en O
US20100167040A1 (en) * 2006-07-25 2010-07-01 Bayer Bioscience N.V. Identification of a novel type of sucrose synthase and use thereof in fiber modification
MX2009001177A (es) 2006-08-02 2009-02-13 Cropdesign Nv Plantas con caracteristicas mejoradas y un metodo para producirlas.
CN104099368A (zh) 2006-08-02 2014-10-15 克罗普迪塞恩股份有限公司 具有改良特征的植物及其制备方法
US8252559B2 (en) * 2006-08-04 2012-08-28 The California Institute Of Technology Methods and systems for selective fluorination of organic molecules
BRPI0714876B1 (pt) 2006-08-04 2022-04-19 Verenium Corporation Ácido nucleico isolado, sintético ou recombinante, cassete de expressão, vetor ou veículo de clonagem, célula bacteriana, fúngica ou de levedura transformada, polipeptídeo isolado, sintético ou recombinante, composição, bem como métodos de produção e de usos dos mesmos
EP2069513A4 (en) * 2006-08-04 2012-03-21 California Inst Of Techn METHOD AND SYSTEMS FOR THE SELECTIVE FLUORINATION OF ORGANIC MOLECULES
US7968691B2 (en) 2006-08-23 2011-06-28 Danisco Us Inc. Pullulanase variants with increased productivity
ES2439994T3 (es) 2006-08-28 2014-01-27 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Anticuerpos antagonistas monoclonales humanos específicos de LIGHT humano
WO2008027558A2 (en) 2006-08-31 2008-03-06 Codon Devices, Inc. Iterative nucleic acid assembly using activation of vector-encoded traits
ATE536374T1 (de) 2006-09-01 2011-12-15 Therapeutic Human Polyclonals Inc Erhöhte expression von humanem oder humanisiertem immunglobulin bei nicht-humanen transgenen tieren
EP2061904A2 (en) 2006-09-06 2009-05-27 Ortho-McNeil Pharmaceutical, Inc. Biomarkers for assessing response to c-met treatment
KR101456728B1 (ko) 2006-09-08 2014-10-31 메디뮨 엘엘씨 인간화 항-ｃｄ19 항체, 및 이것의 종양학, 이식 및 자가면역 질환의 치료에서의 용도
JP5307013B2 (ja) 2006-09-21 2013-10-02 ヴェレニウム コーポレイション フィターゼ、フィターゼをコードする核酸、並びにフィターゼを製造および使用する方法
AR062947A1 (es) 2006-09-21 2008-12-17 Verenium Corp Fosfolipasas acidos nucleicos que las codifican y metodos para prepararlas y usarlas
CN104938794A (zh) 2006-09-29 2015-09-30 诺维信公司 用于动物饲料的木聚糖酶
US8969532B2 (en) 2006-10-03 2015-03-03 Novo Nordisk A/S Methods for the purification of polypeptide conjugates comprising polyalkylene oxide using hydrophobic interaction chromatography
US20100041872A1 (en) 2006-10-04 2010-02-18 Defrees Shawn Glycerol linked pegylated sugars and glycopeptides
GB0620715D0 (en) 2006-10-18 2006-11-29 Univ Durham Ethanol production
US20100162433A1 (en) 2006-10-27 2010-06-24 Mclaren James Plants with improved nitrogen utilization and stress tolerance
US20100036091A1 (en) * 2006-11-10 2010-02-11 Amgen Inc. Antibody-based diagnostics and therapeutics
US20110294782A1 (en) 2006-11-10 2011-12-01 Massachusetts Institute Of Technology Small molecule pak inhibitors
WO2008133722A2 (en) * 2006-11-10 2008-11-06 Ucb Pharma S.A. Anti human sclerostin antibodies
WO2008059048A1 (en) 2006-11-16 2008-05-22 Basf Plant Science Gmbh Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same using consensus sequences from the yabby protein family
BRPI0718977A2 (pt) 2006-11-24 2014-02-04 Cropdesign Nv Método para aumentar rendimento de sementes em plantas em relação às plantas de controle, construção, uso da mesma, planta, parte de planta ou célula de planta, método para a produção de uma planta transgênica tendo redimento aumentado de sementes em relação às plantas de controle, planta transgênica, partes colhíveis de uma planta, produtos, e, uso de um ácido nucleico
EP2089516B1 (en) 2006-11-29 2011-11-16 Novozymes Inc. Methods of improving the introduction of dna into bacterial cells
US20100064393A1 (en) 2006-11-29 2010-03-11 Novozymes, Inc. Bacillus liceniformis chromosome
SI2610334T1 (sl) * 2006-12-07 2017-04-26 Dow Agrosciences Llc Novi selektabilni markerski geni
US9862956B2 (en) 2006-12-10 2018-01-09 Danisco Us Inc. Expression and high-throughput screening of complex expressed DNA libraries in filamentous fungi
EP2505651A3 (en) 2006-12-10 2013-01-09 Dyadic International, Inc. Isolated fungus with reduced protease activity
EP2069504B1 (en) 2006-12-15 2015-06-03 CropDesign N.V. Plants having enhanced seed yield-related traits and a method for making the same
BRPI0720468A2 (pt) 2006-12-20 2014-01-14 Alellyx Sa Construtos de ácido nucleico e métodos para alterar o comprimento da fibra da planta e/ou a altura da planta
BRPI0721081A8 (pt) 2006-12-20 2015-12-15 Alellyx Sa Móleculas de ácidos nucléicos que codificam proteínas de plantas na família c3hc4 e processos para a alteração do conteúdo de celulose e lignina da planta
MX2009005524A (es) 2006-12-21 2009-06-08 Basf Plant Science Gmbh Plantas con rasgos relacionados con un rendimiento mejorado y un metodo para producirlas.
PL2069490T5 (pl) 2006-12-21 2018-09-28 Basf Enzymes Llc Amylazy i glukoamylazy, kwasy nukleinowe kodujące te związki oraz sposoby wytwarzania tych związków oraz stosowania ich
EP2450049A1 (en) * 2006-12-29 2012-05-09 Gloucester Pharmaceuticals, Inc. Romidepsin-based treatments for cancer
WO2008083288A2 (en) * 2006-12-29 2008-07-10 Gloucester Pharmaceuticals Purifiction of romidepsin
DE102007003143A1 (de) 2007-01-16 2008-07-17 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease aus Bacillus gibsonii und Wasch- und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease
MX2009008021A (es) 2007-01-25 2009-08-07 Danisco Produccion de una aciltransferasa de lipido de celulas de bacillus licheniformis transformadas.
NZ578309A (en) 2007-01-30 2012-06-29 Verenium Corp Enzymes for the treatment of lignocellulosics, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US8461413B2 (en) 2007-01-30 2013-06-11 Cropdesign N.V. Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
AU2008209677B2 (en) 2007-01-31 2013-05-23 Basf Plant Science Gmbh Plants having enhanced yield-related traits and/or increased abiotic stress resistance, and a method for making the same
WO2008121435A2 (en) * 2007-02-02 2008-10-09 The California Institute Of Technology Methods for generating novel stabilized proteins
US8143046B2 (en) 2007-02-07 2012-03-27 Danisco Us Inc., Genencor Division Variant Buttiauxella sp. phytases having altered properties
CN101627116B (zh) 2007-02-08 2013-07-10 科德克希思公司 酮还原酶及其用途
US20080268517A1 (en) * 2007-02-08 2008-10-30 The California Institute Of Technology Stable, functional chimeric cytochrome p450 holoenzymes
US20090118130A1 (en) 2007-02-12 2009-05-07 Codexis, Inc. Structure-activity relationships
CA2675926A1 (en) 2007-02-16 2008-08-21 Basf Plant Science Gmbh Nucleic acid sequences for regulation of embryo-specific expression in monocotyledonous plants
AR065552A1 (es) 2007-02-28 2009-06-17 Crop Functional Genomics Ct Plantas con rasgos aumentados relacionados con el rendimiento y un metodo para producirlas
JP5643083B2 (ja) 2007-03-26 2014-12-17 ノボザイムス アクティーゼルスカブ ハフニア・フィターゼ
WO2008118445A1 (en) * 2007-03-26 2008-10-02 Promega Corporation Methods to quench light from optical reactions
DE102007016139A1 (de) 2007-03-30 2008-10-02 Jenabios Gmbh Verfahren zur regioselektiven Oxygenierung von N-Heterozyklen
CA2682292A1 (en) 2007-03-30 2008-10-09 Medimmune, Llc Aqueous formulation comprising an anti-human interferon alpha antibody
KR20100016160A (ko) * 2007-04-03 2010-02-12 바이오제너릭스 에이지 글리코페길화 ｇ―ｃｓｆ를 이용하는 치료 방법
NZ597327A (en) 2007-04-04 2014-02-28 Basf Se Herbicide-resistant brassica plants and methods of use
ES2526646T3 (es) 2007-04-09 2015-01-14 Novozymes A/S Tratamiento enzimático para el desengrasado de pieles y pellejos
CA2685223A1 (en) 2007-05-03 2008-11-13 Basf Plant Science Gmbh Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
AU2008246442B2 (en) 2007-05-04 2014-07-03 Technophage, Investigacao E Desenvolvimento Em Biotecnologia, Sa Engineered rabbit antibody variable domains and uses thereof
EP2068925A4 (en) 2007-05-07 2011-08-31 Medimmune Llc ANTI-ICOS ANTIBODIES AND THEIR USE FOR THE TREATMENT OF CANCER, TRANSPLANTATIONS AND AUTOIMMUNE DISEASES
EP2155910A4 (en) * 2007-05-08 2010-06-02 Univ Duke COMPOSITIONS AND METHODS FOR CHARACTERIZING AND REGULATING ODOR PERCEPTION
CA2686835C (en) 2007-05-09 2020-04-21 Dow Agrosciences Llc Novel herbicide resistance genes
WO2008141190A1 (en) * 2007-05-11 2008-11-20 Wisconsin Alumni Research Foundation Heterologous production of capreomycin and generation of new capreomycin derivatives through metabolic engineering
HUE036885T2 (hu) 2007-05-14 2018-08-28 Astrazeneca Ab Eljárás a bazofil-szint csökkentésére
US8878006B2 (en) 2007-05-23 2014-11-04 Crop Design N.V. Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
CN110885834B (zh) 2007-05-25 2023-08-11 22世纪有限责任公司 编码调节生物碱合成之转录因子的核酸序列及其在改良植物代谢中的应用
US20100154076A1 (en) 2007-05-25 2010-06-17 Cropdesign N.V. Yield Enhancement In Plants By Modulation of Maize Alfins
EP2162535A4 (en) * 2007-06-04 2011-02-23 Novo Nordisk As O-linked glycosylation using N-acetylglucosamine transferases
WO2008154639A2 (en) 2007-06-12 2008-12-18 Neose Technologies, Inc. Improved process for the production of nucleotide sugars
US7625555B2 (en) * 2007-06-18 2009-12-01 Novagen Holding Corporation Recombinant human interferon-like proteins
EP3424951A1 (en) 2007-06-21 2019-01-09 MacroGenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
CN102027120A (zh) 2007-06-29 2011-04-20 巴斯夫植物科学有限公司 具有增强的产量相关性状的植物和用于制备该植物的方法
US7968811B2 (en) * 2007-06-29 2011-06-28 Harley-Davidson Motor Company Group, Inc. Integrated ignition and key switch
WO2009012357A2 (en) 2007-07-17 2009-01-22 The General Hospital Corporation Methods to identify and enrich for populations of ovarian cancer stem cells and somatic ovarian stem cells and uses thereof
EP2987861A1 (en) 2007-07-20 2016-02-24 BASF Plant Science GmbH Plants having increased yield-related traits and a method for making the same
AR067748A1 (es) 2007-07-31 2009-10-21 Basf Plant Science Gmbh Plantas que tienen rasgos mejorados relacionados con el rendimiento y un metodo para obtenerlas
WO2009016232A2 (en) 2007-07-31 2009-02-05 Basf Plant Science Gmbh Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
US7923236B2 (en) 2007-08-02 2011-04-12 Dyadic International (Usa), Inc. Fungal enzymes
WO2009021215A1 (en) * 2007-08-09 2009-02-12 Celula, Inc. Methods and devices for correlated, multi-parameter single cell measurements and recovery of remnant biological material
CN101784669B (zh) 2007-08-24 2015-02-18 科德克希思公司 用于(r)-3-羟基四氢噻吩的立体选择性制备的改善的酮还原酶多肽
US8207112B2 (en) * 2007-08-29 2012-06-26 Biogenerix Ag Liquid formulation of G-CSF conjugate
CA2736661A1 (en) 2007-09-07 2009-03-12 Dyadic International, Inc. Novel fungal enzymes
US7749708B2 (en) * 2007-09-12 2010-07-06 Transgenomic, Inc. Method for identifying the sequence of one or more variant nucleotides in a nucleic acid molecule
US7579155B2 (en) * 2007-09-12 2009-08-25 Transgenomic, Inc. Method for identifying the sequence of one or more variant nucleotides in a nucleic acid molecule
US8877688B2 (en) 2007-09-14 2014-11-04 Adimab, Llc Rationally designed, synthetic antibody libraries and uses therefor
WO2009034188A1 (en) 2007-09-14 2009-03-19 Basf Plant Science Gmbh Plants having increased yield-related traits and a method for making the same
US12529164B2 (en) 2007-09-14 2026-01-20 Adimab, Llc Rationally designed, synthetic antibody libraries and uses therefor
US8691730B2 (en) 2007-09-14 2014-04-08 Adimab, Llc Rationally designed, synthetic antibody libraries and uses therefor
CL2008002775A1 (es) * 2007-09-17 2008-11-07 Amgen Inc Uso de un agente de unión a esclerostina para inhibir la resorción ósea.
EP2193195B1 (en) 2007-09-18 2014-12-17 Novozymes A/S Polypeptides having tyrosinase activity and polynucleotides encoding same
UA103176C2 (ru) 2007-09-21 2013-09-25 Басф Плант Саенс Гмбх Растение с повышенными показателями урожайности и способ его получения
WO2009045627A2 (en) 2007-10-03 2009-04-09 Verenium Corporation Xylanases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
EP2205271B1 (en) * 2007-10-08 2014-05-21 Quintessence Biosciences, Inc. Compositions and methods for ribonuclease-based therapies
AR068847A1 (es) 2007-10-10 2009-12-09 Athenix Corp Genes sinteticos que codifican cry1ac
EA201070371A1 (ru) 2007-10-16 2011-02-28 Атеникс Корпорейшн Axmi-066 и axmi-076: дельта-эндотоксиновые белки и способы их применения
DE102007051092A1 (de) 2007-10-24 2009-04-30 Henkel Ag & Co. Kgaa Subtilisin aus Becillus pumilus und Wasch- und Reinigungsmittel enthaltend dieses neue Subtilisin
AU2008320931B2 (en) 2007-10-29 2014-09-25 Basf Plant Science Gmbh Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
US7618801B2 (en) * 2007-10-30 2009-11-17 Danison US Inc. Streptomyces protease
US7741088B2 (en) * 2007-10-31 2010-06-22 E.I. Dupont De Nemours And Company Immobilized microbial nitrilase for production of glycolic acid
US7871802B2 (en) * 2007-10-31 2011-01-18 E.I. Du Pont De Nemours And Company Process for enzymatically converting glycolonitrile to glycolic acid
KR20100088675A (ko) 2007-11-05 2010-08-10 다니스코 유에스 인크. 변경된 특성을 지닌 바실러스 종 ｔｓ-23 알파-아밀라아제의 변이체
EP2215201A2 (en) 2007-11-05 2010-08-11 Danisco US Inc. Alpha-amylase variants with altered properties
EP2225378B1 (en) 2007-11-22 2013-05-08 CropDesign N.V. Plants having increased yield-related traits and a method for making the same
DE112008003225T5 (de) 2007-11-26 2012-06-06 Basf Plant Science Gmbh Pflanzen mit gesteigerten ertragsbezogenen Eigenschaften und Verfahren zur Herstellung derselben
EP2215224B1 (en) 2007-11-27 2013-10-16 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-glucuronidase activity and polynucleotides encoding same
WO2009068554A1 (en) 2007-11-29 2009-06-04 Novozymes A/S Synthase inhibitor screening method
AU2008328726B2 (en) 2007-11-30 2014-06-12 Glaxo Group Limited Antigen-binding constructs
WO2009073709A1 (en) 2007-12-06 2009-06-11 Novozymes A/S Polypeptides having acetylxylan esterase activity and polynucleotides encoding same
US8318481B2 (en) * 2007-12-07 2012-11-27 Pfenex Inc. High copy number self-replicating plasmids in pseudomonas
US20110044978A1 (en) * 2007-12-14 2011-02-24 Amgen Inc. Method for treating bone fracture
EP2235173A2 (en) 2007-12-19 2010-10-06 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
CN101969759A (zh) 2007-12-20 2011-02-09 巴斯夫植物科学有限公司 具有增强的产量相关性状的植物及其制备方法
WO2009081094A2 (en) 2007-12-21 2009-07-02 Danisco A/S Process
DK2238261T3 (da) 2008-01-03 2014-02-10 Verenium Corp Isomeraser, nukleinsyrer der koder for dem og fremgangsmåder til fremstilling og anvendelse deraf
CA2710683A1 (en) 2008-01-03 2009-07-16 Verenium Corporation Transferases and oxidoreductases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
CA2711503A1 (en) * 2008-01-08 2009-07-16 Biogenerix Ag Glycoconjugation of polypeptides using oligosaccharyltransferases
JP2011509675A (ja) 2008-01-18 2011-03-31 メディミューン，エルエルシー 部位特異的コンジュゲーションのためのシステイン操作抗体
CN101965405B (zh) 2008-01-25 2014-03-05 巴斯夫植物科学有限公司 具有增强的产量相关性状的植物和用于制备该植物的方法
CA2713065A1 (en) 2008-01-31 2009-08-06 National Institute For Biological Sciences Plants having altered growth and/or development and a method for making the same
WO2009098229A2 (en) 2008-02-04 2009-08-13 Danisco Us Inc., Genencor Division A method of preparing food products using ts23 alpha-amylase
US20100049602A1 (en) * 2008-02-07 2010-02-25 Softky William R Systems and Methods for Measuring the Effectiveness of Advertising
HRP20160855T1 (hr) 2008-02-08 2016-09-23 Medimmune, Llc Anti-ifnar1 protutijela sa smanjenim afinitetom fc liganda
EP2088432A1 (en) * 2008-02-11 2009-08-12 MorphoSys AG Methods for identification of an antibody or a target
US8504498B2 (en) 2008-02-12 2013-08-06 Codexis, Inc. Method of generating an optimized, diverse population of variants
US20090203531A1 (en) 2008-02-12 2009-08-13 Nurith Kurn Method for Archiving and Clonal Expansion
US8768871B2 (en) * 2008-02-12 2014-07-01 Codexis, Inc. Method of generating an optimized, diverse population of variants
KR101582841B1 (ko) 2008-02-27 2016-01-11 노보 노르디스크 에이/에스 콘쥬게이트된 인자 ｖｉｉｉ 분자
GB2470672B (en) 2008-03-21 2012-09-12 Nugen Technologies Inc Methods of RNA amplification in the presence of DNA
EP2260102A1 (en) 2008-03-25 2010-12-15 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research Treating cancer by down-regulating frizzled-4 and/or frizzled-1
EP2285965A1 (en) * 2008-03-31 2011-02-23 Pfenex Inc A design for rapidly cloning one or more polypeptide chains into an expression system
MX2010010735A (es) 2008-04-16 2010-12-21 Basf Plant Science Gmbh Plantas que tienen rasgos mejorados relacionados con el rendimiento y un metodo para obtenerlas.
EP2281034B1 (en) 2008-04-30 2015-10-21 DuPont Nutrition Biosciences ApS Process using Pseudoglucanobacter saccharoketogenes alcohol dehydrogenase
JP2011521626A (ja) 2008-05-02 2011-07-28 エピセンター テクノロジーズ コーポレーション Ｒｎａポリホスファターゼの組成物、キットおよびそれらの使用
PL2274331T3 (pl) 2008-05-02 2014-04-30 Novartis Ag Ulepszone cząsteczki wiążące oparte na fibronektynie i ich zastosowanie
AU2009243552A1 (en) 2008-05-05 2009-11-12 Basf Plant Science Gmbh Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
SI2283034T1 (sl) 2008-05-08 2015-07-31 Monsanto Do Brasil Ltda. Geni in postopki za povečanje bolezenske odpornosti pri rastlinah
JP2010043063A (ja) 2008-05-09 2010-02-25 Agency For Science Technology & Research 川崎病の診断及び治療
WO2009143397A2 (en) 2008-05-23 2009-11-26 E. I. Du Pont De Nemours And Company Novel dgat genes for increased seed storage lipid production and altered fatty acid profiles in oilseed plants
CN104017789B (zh) 2008-06-06 2017-11-03 诺维信公司 家族44木葡聚糖酶变体
MX2010013276A (es) 2008-06-06 2010-12-21 Procter & Gamble Composicion detergente que comprende una variante de una xiloglucanasa de la familia 44.
CN102057040A (zh) 2008-06-06 2011-05-11 丹尼斯科美国公司 具有改良特性的嗜热脂肪土芽孢杆菌α-淀粉酶(AMYS)变体
US8383346B2 (en) 2008-06-13 2013-02-26 Codexis, Inc. Combined automated parallel synthesis of polynucleotide variants
US20090312196A1 (en) 2008-06-13 2009-12-17 Codexis, Inc. Method of synthesizing polynucleotide variants
EP3023494B1 (en) 2008-06-13 2018-11-28 Codexis, Inc. Method of synthesizing polynucleotide variants
MX2010012720A (es) 2008-06-20 2010-12-14 Basf Plant Science Gmbh Plantas que tienen rasgos mejorados relacionados con el rendimiento y un metodo para obtenerlas.
CN102816106A (zh) 2008-06-24 2012-12-12 默沙东公司 用于制备基本上立体异构纯的稠合二环脯氨酸化合物的生物催化方法
MX351227B (es) 2008-06-25 2017-09-14 Athenix Corp Genes de toxinas y métodos para su uso.
WO2009156360A1 (en) 2008-06-26 2009-12-30 Basf Plant Science Gmbh Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
WO2010003065A2 (en) 2008-07-02 2010-01-07 Athenix Corporation Axmi-115, axmi-113, axmi-005, axmi-163 and axmi-184: insecticidal proteins and methods for their use
EP2297192A1 (en) 2008-07-04 2011-03-23 BASF Plant Science GmbH Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same by overexpressing a polynucleotide encoding a tfl1-like protein
AU2009272815B2 (en) 2008-07-17 2016-05-12 Basf Plant Science Gmbh Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
AR072571A1 (es) 2008-07-18 2010-09-08 Bristol Myers Squibb Co Composiciones monovalentes para union a cd28 y procedimientos de uso
EA201170219A1 (ru) 2008-07-18 2011-08-30 Новозимс Эдениум Байотек А/С Лечение воспалительных заболеваний кишечника бета-дефенсинами млекопитающих
WO2010011600A2 (en) * 2008-07-22 2010-01-28 Northwestern University Method for removal or inactivation of heparin
AU2009275889A1 (en) 2008-07-31 2010-02-04 Basf Plant Science Gmbh Plants having modified growth characteristics and a method for making the same
PY09026846A (es) 2008-08-05 2015-09-01 Novartis Ag Composiciones y métodos para anticuerpos que se dirigen a la proteína de complemento c5
EP2441773A1 (en) 2008-08-20 2012-04-18 BASF Plant Science GmbH Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
HUE026181T2 (en) 2008-08-27 2016-05-30 Codexis Inc Ketoreductase polypeptide for the preparation of 3-aryl-3-hydroxypropanamine from 3-aryl-3-ketopropanamine
WO2010027710A2 (en) 2008-08-27 2010-03-11 Codexis, Inc. Ketoreductase polypeptides and uses thereof
US8288141B2 (en) 2008-08-27 2012-10-16 Codexis, Inc. Ketoreductase polypeptides for the production of 3-aryl-3-hydroxypropanamine from a 3-aryl-3-ketopropanamine
US8198062B2 (en) 2008-08-29 2012-06-12 Dsm Ip Assets B.V. Hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
CN102186972B (zh) 2008-08-29 2014-08-20 科德克希思公司 用于立体选择性生产(4s)-3-[(5s)-5-(4-氟苯基)-5-羟基戊酰基]-4-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮的酮还原酶多肽
US8357503B2 (en) 2008-08-29 2013-01-22 Bunge Oils, Inc. Hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US8153391B2 (en) 2008-08-29 2012-04-10 Bunge Oils, Inc. Hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US20100093563A1 (en) * 2008-09-22 2010-04-15 Robert Anthony Williamson Methods and vectors for display of molecules and displayed molecules and collections
US20100081575A1 (en) * 2008-09-22 2010-04-01 Robert Anthony Williamson Methods for creating diversity in libraries and libraries, display vectors and methods, and displayed molecules
EP2334797A1 (en) 2008-09-24 2011-06-22 BASF Plant Science GmbH Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
CN102224234B (zh) 2008-09-25 2014-04-16 丹尼斯科美国公司 α-淀粉酶混合物和使用所述混合物的方法
EP2733212B1 (en) 2008-09-26 2018-09-05 BASF Agrochemical Products, B.V. Herbicide-resistant ahas-mutants and methods of use
EP2933329B1 (en) 2008-09-26 2017-05-17 Novozymes A/S Hafnia phytase variants
CA2738472A1 (en) 2008-09-26 2010-04-22 Tocagen Inc. Gene therapy vectors and cytosine deaminases
US8029782B2 (en) 2008-10-01 2011-10-04 Quintessence Biosciences, Inc. Therapeutic ribonucleases
CA2736907C (en) 2008-10-03 2018-06-05 E.I. Du Pont De Nemours And Company Improved perhydrolases for enzymatic peracid generation
DK2364366T3 (da) * 2008-11-05 2014-03-31 Morphosys Ag Affoldningsmetode
DK2356270T3 (da) 2008-11-07 2016-12-12 Fabrus Llc Kombinatoriske antistofbiblioteker og anvendelser deraf
DE112009002731T5 (de) 2008-11-12 2013-05-08 Basf Plant Science Gmbh Pflanzen mit gesteigerter abiotischer Stresstoleranz und/oder gesteigerten ertragsbezogenen Eigenschaften und Verfahren zur Herstellung derselben
JP5933975B2 (ja) 2008-11-12 2016-06-15 メディミューン，エルエルシー 抗体製剤
CN102292444A (zh) 2008-11-20 2011-12-21 诺维信股份有限公司 具有淀粉分解增强活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
EP2373796A1 (en) 2008-12-03 2011-10-12 BASF Plant Science GmbH Plants having enhanced abiotic stress tolerance and/or enhanced yield-related traits and a method for making the same
CA2743707A1 (en) 2008-12-04 2010-06-10 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Methods and compositions for enhanced yield by targeted expression of knotted1
EP2373788A1 (en) 2008-12-04 2011-10-12 Novozymes Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
US9493759B2 (en) 2008-12-12 2016-11-15 Novozymes, Inc. Polypeptides having aspartic endopeptidase activity and polynucleotides encoding same
US20110296557A1 (en) 2008-12-12 2011-12-01 Novozymes, Inc. Polypeptides Having Lipase Activity And Polynucleotides Encoding Same
WO2010074972A1 (en) 2008-12-15 2010-07-01 Novozymes, Inc. Polypeptides having catalase activity and polynucleotides encoding same
BRPI0923334A2 (pt) 2008-12-15 2021-09-08 Athenix Corporation Gene que codifica toxinas de nematoide.
WO2010074955A1 (en) 2008-12-16 2010-07-01 Novozymes, Inc. Polypeptides having carboxypeptidase activity and polynucleotides encoding same
CA2746757A1 (en) 2008-12-16 2010-07-08 Novozymes, Inc. Polypeptides having alpha-mannosidase activity and polynucleotides encoding same
CA2745747A1 (en) 2008-12-17 2010-06-24 Basf Plant Science Gmbh Plants having enhanced yield-related traits and/or abiotic stress tolerance and a method for making the same
EP2376109B1 (en) 2008-12-19 2019-01-23 MacroGenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
WO2010070110A2 (en) 2008-12-19 2010-06-24 Novozymes A/S Use of enzymes having silicase activity
CA2747812A1 (en) 2008-12-22 2010-07-01 Athenix Corporation Pesticidal genes from brevibacillus and methods for their use
CA2747826A1 (en) 2008-12-23 2010-07-01 Athenix Corporation Axmi-150 delta-endotoxin gene and methods for its use
WO2010075574A2 (en) 2008-12-25 2010-07-01 Codexis, Inc. Enone reductases
US8470564B2 (en) 2009-01-08 2013-06-25 Codexis, Inc. Transaminase polypeptides
EP2206723A1 (en) 2009-01-12 2010-07-14 Bonas, Ulla Modular DNA-binding domains
US20110239315A1 (en) 2009-01-12 2011-09-29 Ulla Bonas Modular dna-binding domains and methods of use
JP2012515532A (ja) 2009-01-20 2012-07-12 ラモット アット テル アビブ ユニバーシティ， リミテッド Ｍｉｒ−２１プロモーター駆動性標的がん治療
ES2558698T3 (es) 2009-01-21 2016-02-08 Novozymes A/S Polipéptidos con actividad de esterasa y ácidos nucleicos que codifican los mismos
EP2391715A1 (en) 2009-01-28 2011-12-07 Novozymes Inc. Polypeptides having beta-glucosidase activity and polynucleotides encoding same
EA201170947A1 (ru) 2009-01-28 2012-07-30 Басф Плант Сайенс Компани Гмбх Растения, имеющие улучшенные характеристики урожайности, и способ их получения
US8629324B2 (en) 2009-01-30 2014-01-14 Novozymes, Inc. Polypeptides having expansin activity and polynucleotides encoding same
WO2010088447A1 (en) 2009-01-30 2010-08-05 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-amylase activity and polynucleotides encoding same
US8852608B2 (en) 2009-02-02 2014-10-07 Medimmune, Llc Antibodies against and methods for producing vaccines for respiratory syncytial virus
US8299217B2 (en) 2009-02-05 2012-10-30 Athenix Corp. Variant AXMI-R1 delta endotoxin genes and methods for their use
WO2010089302A1 (en) 2009-02-06 2010-08-12 University Of Chile Protein and dna sequence encoding a cold adapted xylanase
WO2010091221A1 (en) 2009-02-06 2010-08-12 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-amylase activity and polynucleotides encoding same
KR101722961B1 (ko) 2009-02-11 2017-04-04 알부메딕스 에이/에스 알부민 변이체 및 접합체
DK2398893T3 (en) 2009-02-19 2015-03-23 Novozymes As PROCESS FOR BREWING FOR USING fungal or Bacterial
MY189620A (en) * 2009-02-20 2022-02-21 Malaysian Palm Oil Board A constitutive promoter from oil palm
WO2010097386A1 (en) 2009-02-24 2010-09-02 Glaxo Group Limited Antigen-binding constructs
JP2012518398A (ja) 2009-02-24 2012-08-16 グラクソ グループ リミテッド 抗原結合性構築物
US20110305694A1 (en) 2009-02-24 2011-12-15 Paul Andrew Hamblin Multivalent and/or multispecific rankl-binding constructs
EP2401291A1 (en) 2009-02-25 2012-01-04 BASF Plant Science Company GmbH Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
EP2401369B1 (en) 2009-02-26 2014-12-24 Codexis, Inc. Beta-glucosidase variant enzymes and related polynucleotides
CN102414317B (zh) 2009-02-27 2014-11-05 诺维信公司 具有减少的金属肽酶表达、适于重组多肽产生的突变细胞
EP2401380B1 (en) 2009-02-27 2015-08-19 Athenix Corporation Pesticidal proteins and methods for their use
US20110311521A1 (en) 2009-03-06 2011-12-22 Pico Caroni Novel therapy for anxiety
EP2403948A1 (en) 2009-03-06 2012-01-11 Athenix Corporation Methods and compositions for controlling plant pests
MX2011009496A (es) 2009-03-11 2011-10-14 Athenix Corp Axmi-001, axmi-002, axmi-030, axmi-035 y axmi-045: genes de toxina y metodos para su uso.
WO2010106068A1 (en) 2009-03-17 2010-09-23 Novozymes A/S Polypeptides having tyrosinase activity and polynucleotides encoding same
WO2010107644A2 (en) 2009-03-17 2010-09-23 Codexis, Inc. Variant endoglucanases and related polynucleotides
CA2752007A1 (en) 2009-03-24 2010-09-30 Novozymes A/S Polypeptides having acetyl xylan esterase activity and polynucleotides encoding same
US20100261185A1 (en) 2009-03-27 2010-10-14 Life Technologies Corporation Labeled enzyme compositions, methods and systems
US20120093775A1 (en) 2009-03-27 2012-04-19 Proyecto De Biomedicina Cima, S.L. Methods and compositions for the treatment of cirrhosis and liver fibrosis
WO2010120557A1 (en) 2009-03-31 2010-10-21 Codexis, Inc. Improved endoglucanases
DK2414514T3 (en) 2009-04-01 2015-08-24 Danisco Us Inc FORMATIONS AND PROCEDURES COMPREHENSIVE Alpha- amylase variants WITH CHANGED PROPERTIES
EP2241323A1 (en) 2009-04-14 2010-10-20 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research Tenascin-W and brain cancers
GB0908770D0 (en) 2009-04-24 2009-07-01 Danisco Method
BRPI1014386A2 (pt) 2009-04-29 2015-08-25 Basf Plant Science Co Gmbh Métodos para intensificar traços relacionados com o rendimento em plantas com relação às plantas de controle, construção, uso de uma construção, planta, parte de planta ou célula de planta, método para a produção de uma planta transgênica, partes colhíveis de uma planta, produtos, uso de um ácido nucleico, molécula de ácido nucleico isolada, e, polipeptídeo.
CN102459614A (zh) 2009-04-29 2012-05-16 巴斯夫植物科学有限公司 具有增强的产量相关性状的植物和用于产生该植物的方法
MX2011011678A (es) 2009-05-04 2011-12-06 Pioneer Hi Bred Int Mejora de la produccion en plantas mediante la modulacion del factor de transcripcion ap2.
US20120096593A1 (en) 2009-05-06 2012-04-19 Yves Hatzfeld Plants Having Enhanced Yield-Related Traits And/Or Enhanced Abiotic Stress Tolerance And A Method For Making The Same
EP2248893A1 (en) 2009-05-06 2010-11-10 Novozymes A/S DFPase Enzymes from Octopus Vulgaris
MY186558A (en) * 2009-05-13 2021-07-27 Malaysian Palm Oil Board A constitutive promoter from oil palm type 2
AU2010250810B2 (en) 2009-05-19 2014-03-20 Dupont Nutrition Biosciences Aps Use
WO2010135588A2 (en) 2009-05-21 2010-11-25 Verenium Corporation Phytases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
CA2762987A1 (en) 2009-05-22 2010-11-25 Joseph Collard Treatment of transcription factor e3 (tfe3) and insulin receptor substrate 2 (irs2) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to tfe3
WO2010138709A1 (en) 2009-05-28 2010-12-02 Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Anti-tnf induced apoptosis (atia) diagnostic markers and therapies
SG175407A1 (en) 2009-05-29 2011-11-28 Morphosys Ag A collection and methods for its use
BRPI1011597B1 (pt) 2009-05-29 2019-08-20 Novozymes, Inc. Métodos para degradar um material celulósico, para produzir um produto de fermentação, e para fermentar um material celulósico, e, composição de enzima
WO2010141325A1 (en) 2009-06-02 2010-12-09 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
CA2765034A1 (en) 2009-06-09 2010-12-23 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Early endosperm promoter and methods of use
US20100317539A1 (en) * 2009-06-12 2010-12-16 Guo-Liang Yu Library of Engineered-Antibody Producing Cells
AR077042A1 (es) 2009-06-12 2011-07-27 Danisco Metodo para tratar una composicion que contiene pirofiofitina
CA2762616C (en) 2009-06-16 2015-08-18 Codexis, Inc. Beta-glucosidase variant enzymes and related polynucleotides
CN104762316A (zh) 2009-06-19 2015-07-08 巴斯夫植物科学有限公司 具有增强的产量相关性状的植物和用于产生该植物的方法
CN102482648B (zh) 2009-06-22 2014-12-10 科德克希思公司 酮还原酶介导的产生α氯代醇的立体选择性途径
AU2010270979B2 (en) 2009-06-22 2015-04-23 Medimmune, Llc Engineered Fc regions for site-specific conjugation
WO2010151787A1 (en) 2009-06-26 2010-12-29 Novozymes North America, Inc. Heat-stable carbonic anhydrases and their use
MX346215B (es) 2009-07-02 2017-03-10 Athenix Corp Gen plaguicida axmi-205 y metodos para su uso.
WO2011000924A1 (en) 2009-07-03 2011-01-06 Abbott Products Gmbh Spray-dried amylase, pharmaceutical preparations comprising the same and use
WO2011005867A1 (en) 2009-07-07 2011-01-13 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity activity and polynucleotides encoding same
US20120288914A1 (en) 2009-07-07 2012-11-15 Pioneer Hi Bred International Inc. Crystal structure of glyphosate acetyltransferase (glyat) and methods of use
WO2011011630A2 (en) 2009-07-23 2011-01-27 Codexis, Inc. Nitrilase biocatalysts
WO2011009182A2 (pt) 2009-07-24 2011-01-27 Embrapa - Empresa Brasileira De Pesquisa Agropecuária Molécula de ácido nucléico isolada, construção gênica, vetor, célula transgênica, método para obtenção de uma célula e de uma planta transgênica, polipeptídeo isolado e purificado, composição pesticida biodegradável, método para o controle de uma praga, método de obtenção de linhagens transgênicas resistentes a um inseto praga
MX2012001060A (es) 2009-07-24 2012-03-14 Novozymes As Carbohidrato-oxidasas.
WO2011014458A1 (en) 2009-07-28 2011-02-03 Novozymes, Inc. Polypeptides having phytase activity and polynucleotides encoding same
MX354219B (es) 2009-07-31 2018-02-19 Athenix Corp Familia de genes plaguicidas axmi-192 y metodos para su uso.
EP2464657B1 (en) 2009-08-10 2015-04-01 MorphoSys AG Novel screening strategies for the identification of antibodies or fragments thereof which bind an antigen that has an enzymatic activity
PL2464664T3 (pl) * 2009-08-13 2016-02-29 Crucell Holland Bv Przeciwciała przeciwko ludzkiemu syncytialnemu wirusowi oddechowemu (RSV) i sposoby zastosowania
ES2666152T3 (es) 2009-08-13 2018-05-03 The Johns Hopkins University Métodos de modulación de la función inmunitaria con anticuerpos anti-B7-H7CR
SG178456A1 (en) 2009-08-19 2012-04-27 Codexis Inc Ketoreductase polypeptides for the preparation of phenylephrine
MX2012002045A (es) 2009-08-19 2012-04-11 Basf Plant Science Co Gmbh Plantas que tienen mejores rasgos relacionados con el rendimiento y un metodo para producirlas.
IN2012DN01359A (ja) 2009-08-20 2015-06-05 Pioneer Hi Bred Int
US8409830B2 (en) 2009-08-21 2013-04-02 Novozymes A/S Polypeptides having isoamylase activity and methods of use
EP2292266A1 (en) 2009-08-27 2011-03-09 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Treating cancer by modulating copine III
CA2772695A1 (en) 2009-09-01 2011-03-10 Novozymes, Inc. Methods for improving malic acid production in filamentous fungi
WO2011028708A1 (en) 2009-09-04 2011-03-10 Codexis, Inc. Variant cbh2 cellulases and related polynucleotides
WO2011029166A1 (en) 2009-09-09 2011-03-17 Braskem S.A. Microorganisms and process for producing n-propanol
US8293483B2 (en) 2009-09-11 2012-10-23 Epitomics, Inc. Method for identifying lineage-related antibodies
WO2011035027A2 (en) 2009-09-17 2011-03-24 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
WO2011035205A2 (en) 2009-09-18 2011-03-24 Calmune Corporation Antibodies against candida, collections thereof and methods of use
EP2478095A1 (en) 2009-09-18 2012-07-25 Novozymes Inc. Polypeptides having beta-glucosidase activity and polynucleotides encoding same
EP3301208B1 (en) 2009-09-18 2020-11-04 Codexis, Inc. Reduced codon mutagenesis
WO2011036118A1 (en) 2009-09-22 2011-03-31 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research Treating cancer by modulating mex-3
CN104745608A (zh) 2009-09-25 2015-07-01 巴斯夫植物科学有限公司 具有增强的产量相关性状的植物及其制备方法
WO2011036232A1 (en) 2009-09-25 2011-03-31 Basf Plant Science Company Gmbh Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
CN102648277B (zh) 2009-09-25 2015-05-20 诺维信公司 蛋白酶变体的用途
WO2011036263A1 (en) 2009-09-25 2011-03-31 Novozymes A/S Subtilase variants
DK2483403T3 (en) 2009-09-29 2018-02-12 Novozymes Inc POLYPEPTIDES WITH XYLANASE ACTIVITY AND POLYNUCLEOTIDES CODING THEM
MX2012003473A (es) 2009-09-29 2012-05-22 Novozymes Inc Polipeptidos que tienen actividad celulitica mejorada y polinucleotidos que codifican para los mismos.
WO2011041504A1 (en) 2009-09-30 2011-04-07 Novozymes, Inc. Polypeptides derived from thermoascus crustaceus having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
EP2483402A1 (en) 2009-09-30 2012-08-08 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
US8222012B2 (en) * 2009-10-01 2012-07-17 E. I. Du Pont De Nemours And Company Perhydrolase for enzymatic peracid production
US9243262B2 (en) 2009-10-02 2016-01-26 Syngenta Participations Ag Insecticidal proteins
WO2011044368A1 (en) 2009-10-07 2011-04-14 Macrogenics, Inc. Fc region-containing polypeptides that exhibit improved effector function due to alterations of the extent of fucosylation, and methods for their use
WO2011045352A2 (en) 2009-10-15 2011-04-21 Novartis Forschungsstiftung Spleen tyrosine kinase and brain cancers
UA109884C2 (uk) 2009-10-16 2015-10-26 Поліпептид, що має активність ферменту фосфатидилінозитол-специфічної фосфоліпази с, нуклеїнова кислота, що його кодує, та спосіб його виробництва і застосування
UA111708C2 (uk) 2009-10-16 2016-06-10 Бандж Ойлз, Інк. Спосіб рафінування олії
KR20120126061A (ko) 2009-10-22 2012-11-20 재단법인 작물유전체기능연구사업단 향상된 수확량 관련 형질을 갖는 식물 및 이의 제조 방법
WO2011050037A1 (en) 2009-10-23 2011-04-28 Novozymes, Inc. Cellobiohydrolase variants and polynucleotides encoding same
US8778672B2 (en) 2009-10-26 2014-07-15 Pioneer Hi Bred International Inc Somatic ovule specific promoter and methods of use
WO2011059740A1 (en) 2009-10-29 2011-05-19 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
WO2011051327A2 (en) 2009-10-30 2011-05-05 Novartis Ag Small antibody-like single chain proteins
US20120213801A1 (en) 2009-10-30 2012-08-23 Ekaterina Gresko Phosphorylated Twist1 and cancer
CA2776241A1 (en) 2009-10-30 2011-05-05 Novozymes Biopharma Dk A/S Albumin variants
US9267148B2 (en) 2009-11-02 2016-02-23 Plant Sensory Systems, Llc Methods for the biosynthesis of taurine or hypotaurine in cells
WO2011051466A1 (en) 2009-11-02 2011-05-05 Novartis Ag Anti-idiotypic fibronectin-based binding molecules and uses thereof
US10207240B2 (en) 2009-11-03 2019-02-19 Gen9, Inc. Methods and microfluidic devices for the manipulation of droplets in high fidelity polynucleotide assembly
US9267125B2 (en) 2009-11-06 2016-02-23 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
CN104694517B (zh) 2009-11-06 2019-06-28 诺维信股份有限公司 具有木聚糖酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
CA2779988A1 (en) 2009-11-13 2011-05-19 Basf Plant Science Company Gmbh Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
GB0920089D0 (en) 2009-11-17 2009-12-30 Danisco Method
RU2413226C1 (ru) * 2009-11-20 2011-02-27 Дина Дамировна Гайнетдинова Способ определения нестабильности генома у детей, больных детским церебральным параличом с перивентрикулярной лейкомаляцией
US20130183326A9 (en) 2009-11-20 2013-07-18 St. Jude Children's Research Hospital Methods and compositions for modulating the activity of the interleukin-35 receptor complex
WO2011062748A1 (en) 2009-11-23 2011-05-26 E.I. Du Pont De Nemours And Company Sucrose transporter genes for increasing plant seed lipids
WO2011066187A1 (en) 2009-11-25 2011-06-03 Codexis, Inc. Recombinant thermoascus aurantiacus beta-glucosidase variants for production of fermentable sugars from cellulosic biomass
WO2011066185A1 (en) 2009-11-25 2011-06-03 Gen9, Inc. Microfluidic devices and methods for gene synthesis
RU2012126131A (ru) 2009-11-25 2013-12-27 Кодексис, Инк. РЕКОМБИНАНТНЫЕ ВАРИАНТЫ β-ГЛЮКОЗИДАЗЫ ДЛЯ ПРОДУКЦИИ РАСТВОРИМЫХ САХАРОВ ИЗ ЦЕЛЛЮЛОЗНОЙ БИОМАССЫ
EP2504449B1 (en) 2009-11-25 2016-03-23 Gen9, Inc. Methods and apparatuses for chip-based dna error reduction
US10316304B2 (en) 2009-11-27 2019-06-11 Basf Plant Science Company Gmbh Chimeric endonucleases and uses thereof
EP2504439B1 (en) 2009-11-27 2016-03-02 BASF Plant Science Company GmbH Optimized endonucleases and uses thereof
WO2011064751A1 (en) 2009-11-27 2011-06-03 Basf Plant Science Company Gmbh Chimeric endonucleases and uses thereof
WO2011066560A1 (en) 2009-11-30 2011-06-03 Novozymes A/S Polypeptides having glucoamylase activity and polynucleotides encoding same
MX2012006096A (es) 2009-11-30 2012-07-03 Novozymes North America Inc Polipeptidos que tienen actividad glucoamilasa y polinucleotidos que codifican para los mismos.
ES2534067T3 (es) 2009-12-01 2015-04-17 Novozymes A/S Polipéptidos que tienen actividad de glucoamilasa y polinucleótidos que codifican los mismos
EP2679234A3 (en) 2009-12-02 2014-04-23 Amgen Inc. Binding proteins that bind to human FGFR1C, human beta-klotho and both human FGFR1C and human beta-klotho
TW201125577A (en) 2009-12-02 2011-08-01 Novozymes As Use of defensins for treatment of infective endocarditis
WO2011067349A1 (en) 2009-12-03 2011-06-09 Novozymes A/S Variants of a polypeptide with lipolytic activity and improved stability
CN102884178B (zh) 2009-12-08 2014-12-03 科德克希思公司 拉唑化合物的合成
CN102753023A (zh) 2009-12-09 2012-10-24 诺维信公司 产生gh8木聚糖酶变体的方法
US8653024B2 (en) 2009-12-11 2014-02-18 Adenium Biotech Aps Use of AMPs for treatment of UTI/cystitis
CN102753680B (zh) 2009-12-11 2015-05-13 诺维信公司 蛋白酶变体
EP2501792A2 (en) 2009-12-29 2012-09-26 Novozymes A/S Gh61 polypeptides having detergency enhancing effect
US20110191903A1 (en) 2009-12-31 2011-08-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Engineering plant resistance to diseases caused by pathogens
US20120270267A1 (en) 2010-01-04 2012-10-25 Novozymes A/S Alpha-Amylases
WO2011085075A2 (en) 2010-01-07 2011-07-14 Gen9, Inc. Assembly of high fidelity polynucleotides
US20120295793A1 (en) 2010-01-22 2012-11-22 Proteus Methods of generating modified polynucleotide libraries and methods of using the same for directed protein evolution
BR112012018443A8 (pt) 2010-01-25 2019-01-29 Bayer Cropscience Nv métodos para a fabricação das paredes celulares das plantas compreendendo a quitina
WO2011092233A1 (en) 2010-01-29 2011-08-04 Novartis Ag Yeast mating to produce high-affinity combinations of fibronectin-based binders
TW201129384A (en) 2010-02-10 2011-09-01 Immunogen Inc CD20 antibodies and uses thereof
US9896673B2 (en) 2010-02-10 2018-02-20 Novozymes A/S Compositions of high stability alpha amylase variants
WO2011100265A2 (en) 2010-02-10 2011-08-18 Codexis, Inc. Processes using amino acid dehydrogenases and ketoreductase-based cofactor regenerating system
EP2357220A1 (en) 2010-02-10 2011-08-17 The Procter & Gamble Company Cleaning composition comprising amylase variants with high stability in the presence of a chelating agent
AU2011218130B2 (en) 2010-02-18 2016-03-03 Athenix Corp. AXMI218, AXMI219, AXMI220, AXMI226, AXMI227, AXMI228, AXMI229, AXMI230, and AXMI231 delta-endotoxin genes and methods for their use
CA2790029C (en) 2010-02-18 2019-09-03 Athenix Corp. Axmi221z, axmi222z, axmi223z, axmi224z, and axmi225z delta-endotoxin genes and methods for their use
AU2011219927A1 (en) 2010-02-24 2012-08-23 Basf Plant Science Company Gmbh Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
DE112011100641T5 (de) 2010-02-24 2012-12-20 Basf Plant Science Gmbh Pflanzen mit gesteigerten Ertragsmerkmalen und Verfahren zu deren Herstellung
MX2012009705A (es) 2010-02-25 2012-12-17 Novozymes As Variantes de lisozima y polinucleotidos que codifican la misma.
WO2011104284A1 (en) 2010-02-25 2011-09-01 Novozymes A/S Polypeptides having antimicrobial activity
EP2361985A1 (en) 2010-02-26 2011-08-31 BASF Plant Science Company GmbH Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
EP2361927A1 (en) 2010-02-26 2011-08-31 BASF Plant Science Company GmbH Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
CA2791353A1 (en) 2010-03-03 2011-09-09 Novozymes, Inc. Xylanase variants and polynucleotides encoding same
WO2011107586A1 (en) 2010-03-05 2011-09-09 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung, Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research, Smoc1, tenascin-c and brain cancers
MX2012010399A (es) 2010-03-12 2012-10-05 Dupont Nutrition Biosci Aps Proceso.
MX2012010221A (es) 2010-03-18 2013-02-26 Basf Plant Science Co Gmbh Plantas que tienen mejores rasgos relacionados con el rendimiento y un metodo para producirlas.
WO2011114251A1 (en) 2010-03-18 2011-09-22 Danisco A/S Foodstuff
BR112012023505A2 (pt) 2010-03-18 2015-09-01 Basf Plant Science Co Gmbh Método para intensificar traços relacionados a rendimento em plantas em relação a plantas de controle, planta ou parte da mesma, uso de um construto, método para a produção de uma planta transgênica dotada de rendimento aumentado, planta transgênica, partes colhíveis de uma planta, produtos derivados de uma planta e uso de um ácido nucleico
MX2012010635A (es) 2010-03-19 2012-11-29 Basf Plant Science Co Gmbh Plantas que tienen mejores rasgos relacionados con el rendimiento y un metodo para producirlas.
US9556248B2 (en) 2010-03-19 2017-01-31 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Hepatocyte growth factor fragments that function as potent met receptor agonists and antagonists
MX2012010749A (es) 2010-03-19 2012-10-15 Basf Plant Science Co Gmbh Plantas que tienen mejores rasgos relacionados con el rendimiento y un metodo para producirlas.
EP2371845A1 (en) 2010-03-22 2011-10-05 BASF Plant Science Company GmbH Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
ES2758795T3 (es) 2010-03-26 2020-05-06 Novozymes As Variantes de fitasa termoestables
EP2553109B1 (en) 2010-03-28 2018-10-24 Novozymes A/S Regioselective hydroxylation of aliphatic hydrocarbons employing a fungal peroxygenase
EP2553111B1 (en) 2010-03-30 2016-05-11 Novozymes A/S Methods for enhancing by-products from fermentation processes
WO2011123576A2 (en) 2010-03-31 2011-10-06 Codexis, Inc. Production of monoterpenes
CN102918151B (zh) 2010-03-31 2015-09-09 诺维信股份有限公司 纤维二糖水解酶变体及编码其的多核苷酸
US10233228B2 (en) 2010-04-09 2019-03-19 Albumedix Ltd Albumin derivatives and variants
MX338068B (es) 2010-04-14 2016-04-01 Novozymes As Polipeptidos que tienen actividad de glucoamilasa y polinucleotidos que codifican los mismos.
US8383793B2 (en) 2010-04-15 2013-02-26 St. Jude Children's Research Hospital Methods and compositions for the diagnosis and treatment of cancer resistant to anaplastic lymphoma kinase (ALK) kinase inhibitors
WO2011127933A1 (en) 2010-04-16 2011-10-20 Nuevolution A/S Bi-functional complexes and methods for making and using such complexes
WO2011131611A1 (en) 2010-04-19 2011-10-27 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research Modulating xrn1
WO2011140219A1 (en) 2010-05-04 2011-11-10 Codexis, Inc. Biocatalysts for ezetimibe synthesis
AR080745A1 (es) 2010-05-06 2012-05-02 Du Pont Gen y proteina acc (acido 1-aminociclopropano-1-carboxilico) sintasa 3 de maiz y sus usos
KR20130066631A (ko) 2010-05-06 2013-06-20 노파르티스 아게 치료적 저밀도 지단백질-관련 단백질 ６ （ｌｒｐ６） 다가 항체에 대한 조성물 및 사용 방법
EP4234698A3 (en) 2010-05-06 2023-11-08 Novartis AG Compositions and methods of use for therapeutic low density lipoprotein-related protein 6 (lrp6) antibodies
EP2569331A1 (en) 2010-05-10 2013-03-20 Perseid Therapeutics LLC Polypeptide inhibitors of vla4
SMT202000095T1 (it) 2010-05-14 2020-03-13 Amgen Inc Formulazioni di anticorpi anti-sclerostina ad alta concentrazione
US20130129676A1 (en) 2010-05-25 2013-05-23 Universite De Strasbourg Combination of anti-envelope antibodies and anti-receptor antibodies for the treatment and prevention of hcv infection
WO2011150313A1 (en) 2010-05-28 2011-12-01 Codexis, Inc. Pentose fermentation by a recombinant microorganism
EP2576606B1 (en) 2010-06-04 2014-12-10 Novozymes, Inc. C4 dicarboxylic acid production in filamentous fungi
WO2011154485A1 (en) 2010-06-10 2011-12-15 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research Treating cancer by modulating mammalian sterile 20-like kinase 3
CN102984961A (zh) 2010-06-11 2013-03-20 诺维信公司 减少食物中生物胺的方法
US8835604B2 (en) 2010-06-12 2014-09-16 Adenium Biotech Aos Antimicrobial peptide variants and polynucleotides encoding same
US20130085287A1 (en) 2010-06-17 2013-04-04 Dupont Nutrition Biosciences Aps Process
DK2582799T3 (en) 2010-06-17 2018-02-12 Codexis Inc BIOCATALATORS AND PROCEDURES FOR THE SYNTHESIS OF (S) -3- (1-AMINOETHYL) -PHENOL
MX2012014627A (es) 2010-06-21 2013-02-21 Novozymes Inc Polipeptidos derivados de aspergillus aculeatus con actividad transportadora de acido dicarboxilico c4 y polinucleotidos que los codifican.
US8497103B2 (en) 2010-06-21 2013-07-30 Novozymes, Inc. Methods for C4-dicarboxylic acid production in filamentous fungi
AU2011268559A1 (en) 2010-06-24 2013-02-14 Basf Plant Science Company Gmbh Plants having enhanced yield-related traits and method for making the same
WO2011163590A1 (en) 2010-06-25 2011-12-29 E. I. Du Pont De Nemours And Company Compositions and methods for enhancing resistance to northern leaf blight in maize
AU2011268562A1 (en) 2010-06-25 2013-01-10 Basf Plant Science Company Gmbh Plants with enhanced yield-related traits and producing method thereof
EP2585587B1 (en) 2010-06-28 2017-08-09 Codexis, Inc. Fatty alcohol forming acyl reductases (fars) and methods of use thereof
CA2803952C (en) 2010-06-30 2020-03-24 Codexis, Inc. Highly stable beta-class carbonic anhydrases useful in carbon capture systems
EP2588604B1 (en) 2010-06-30 2016-06-29 Novozymes, Inc. Polypeptides having beta-glucosidase activity and polynucleotides encoding same
GB201011513D0 (en) 2010-07-08 2010-08-25 Danisco Method
PH12012502244A1 (en) 2010-07-09 2016-09-30 Crucell Holland Bv Anti-human respiratory syncytial virus (rsv) antibodies and methods of use
SG10201505475XA (en) 2010-07-12 2015-09-29 Celgene Corp Romidepsin solid forms and uses thereof
DK2593594T3 (en) 2010-07-16 2017-12-11 Adimab Llc ANTIBODY LIBRARIES
EA201390111A1 (ru) 2010-07-16 2013-06-28 Басф Плант Сайенс Компани Гмбх Растения с улучшенными характеристиками урожайности и способ их получения
CN107903321A (zh) 2010-07-30 2018-04-13 诺华有限公司 纤连蛋白摇篮分子和其库
WO2012013197A2 (en) 2010-07-30 2012-02-02 Aalborg Universitet Aspergillus encoding beta-glucosidases and nucleic acids encoding same
EP2601216B1 (en) 2010-08-02 2018-01-03 MacroGenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
US9394555B2 (en) 2010-08-12 2016-07-19 Novozymes, Inc. Compositions comprising a polypeptide having cellulolytic enhancing activity and a dioxy compound and uses thereof
CN103237894A (zh) 2010-08-13 2013-08-07 先锋国际良种公司 包含具有羟基苯丙酮酸双加氧酶(hppd)活性的序列的组合物和方法
WO2012024100A2 (en) 2010-08-16 2012-02-23 Merck Sharp & Dohme Corp. Process for preparing aminocyclohexyl ether compounds
WO2012022734A2 (en) 2010-08-16 2012-02-23 Medimmune Limited Anti-icam-1 antibodies and methods of use
NZ607337A (en) 2010-08-20 2015-06-26 Novartis Ag Antibodies for epidermal growth factor receptor 3 (her3)
WO2012024662A2 (en) 2010-08-20 2012-02-23 Codexis, Inc. Expression constructs comprising fungal promoters
ES2623288T3 (es) 2010-08-20 2017-07-10 Codexis, Inc. Uso de proteínas de la familia de glicólido hidrolasa 61 en el procesamiento de celulosa
BR112013003223A2 (pt) 2010-08-23 2016-06-07 Pioneer Hi Bred Int "polinucleotídeo isolado, cassete de expressão, célula hospedeira, micro-organismo, planta ou parte de planta, método de obtenção de uma planta transformada, composição antipatogênica, método para proteger uma planta contra um patógeno ou uso de um polinucleotídeo isolado"
WO2012025577A1 (en) 2010-08-24 2012-03-01 Novozymes A/S Heat-stable persephonella carbonic anhydrases and their use
EP2835427A3 (en) 2010-08-24 2015-05-20 BASF Plant Science Company GmbH Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
KR20140008295A (ko) 2010-08-26 2014-01-21 이 아이 듀폰 디 네모아 앤드 캄파니 돌연변이 델타-9 연장효소 및 다중불포화 지방산의 제조에서의 그들의 용도
JP2013535988A (ja) 2010-08-26 2013-09-19 イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニー 変異ｈｐｇｇモチーフおよびｈｄａｓｈモチーフδ５デサチュラーゼおよび多価不飽和脂肪酸の製造におけるそれらの使用
US8624082B2 (en) 2010-08-30 2014-01-07 Novozymes A/S Polypeptides having xylanase activity and polynucleotides encoding same
US9303074B2 (en) 2010-08-30 2016-04-05 Novoyzmes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
WO2012030844A1 (en) 2010-08-30 2012-03-08 Novozymes A/S Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
US9187742B2 (en) 2010-08-30 2015-11-17 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
US8629325B2 (en) 2010-08-30 2014-01-14 Novozymes A/S Polypeptides having beta-glucosidase activity and polynucleotides encoding same
US20130212746A1 (en) 2010-08-30 2013-08-15 Novoyzmes A/S Polypeptides Having Hemicellulolytic Activity And Polynucleotides Encoding Same
US20130171159A1 (en) 2010-09-10 2013-07-04 Brian Arthur Hemmings Phosphorylated twist1 and metastasis
US8859502B2 (en) 2010-09-13 2014-10-14 Celgene Corporation Therapy for MLL-rearranged leukemia
WO2012035103A1 (en) 2010-09-16 2012-03-22 Novozymes A/S Lysozymes
CN103298341B (zh) 2010-09-22 2016-06-08 拜耳知识产权有限责任公司 活性成分在抗线虫作物中用于防治线虫的用途
DK2622068T3 (en) 2010-09-30 2016-10-17 Novozymes Inc Variants of polypeptides having cellulolytic enhancing ACTIVITY AND POLYNUCLEOTIDES ENCODING THEM
MX2013003237A (es) 2010-09-30 2013-05-30 Novozymes Inc Variantes de polipeptidos que tienen actividad potenciadora celulolitica y polinucleotidos que codifican a los mismos.
DK3023492T3 (en) 2010-10-01 2018-03-05 Novozymes Inc Beta-glucosidase variants and polynucleotides encoding them
CA2809916A1 (en) 2010-10-01 2012-04-05 Novozymes A/S Polypeptides having endopeptidase activity and polynucleotides encoding same
WO2012051055A2 (en) 2010-10-06 2012-04-19 Bp Corporation North America Inc. Variant cbh i polypeptides
WO2012058293A1 (en) 2010-10-26 2012-05-03 Novozymes North America, Inc. Methods of saccharifying sugarcane trash
JP2013544083A (ja) 2010-10-29 2013-12-12 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 組み換えｎ−プロパノール及びイソプロパノール生産
EP2632943A1 (en) 2010-10-29 2013-09-04 Novozymes A/S Polypeptides having succinyl-coa:aceto acetate transferase activity and polynucleotides encoding same
ES2541492T3 (es) 2010-11-02 2015-07-21 Novozymes, Inc. Métodos para pretratar material celulósico con polipéptido GH61
US9212354B2 (en) 2010-11-04 2015-12-15 Novozymes Inc. Polypeptides having cellobiohydrolase activitiy and polynucleotides encoding same
PL2635607T3 (pl) 2010-11-05 2020-05-18 Zymeworks Inc. Projekt stabilnego przeciwciała heterodimerowego z mutacjami w domenie FC
CN103298932B (zh) 2010-11-08 2016-08-10 诺维信公司 具有葡糖淀粉酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
EP2637515B1 (en) 2010-11-08 2017-09-06 Novozymes A/S Polypeptides having glucoamylase activity and polynucleotides encoding same
WO2012063200A1 (en) 2010-11-10 2012-05-18 Basf Plant Science Company Gmbh Plants having enhanced yield-related traits and method for making the same
EP2637780B1 (en) 2010-11-12 2022-02-09 Gen9, Inc. Protein arrays and methods of using and making the same
BR112013009026A2 (pt) 2010-11-12 2016-07-12 Novozymes Inc polipeptídeo isolado, célula hospedeira recombinante, métodos para produzir um polipeptídeo, um mutante de uma célula precursora, uma proteína, e um produto de fermentação, para inibir a expressão de um polipeptídeo, para degradar ou converter um material celulósico, e método para fermentar um material celulósico, planta transgênica, parte de planta ou célula de planta, molécula de rna inibidora de filamento duplo, polinucleotídeo isolado, e, formulação de caldo integral ou composição de cultura de célula
RU2013126882A (ru) 2010-11-12 2014-12-20 Новозимс А/С Полипептиды, обладающие активностью фосфолипазы с, и полинуклеотиды, кодирующие их
CN103502448B (zh) 2010-11-12 2017-03-29 Gen9股份有限公司 核酸合成的方法和设备
US20140093506A1 (en) 2010-11-15 2014-04-03 Marc Buehler Anti-fungal-agents
DK2640833T3 (en) 2010-11-18 2016-11-28 Novozymes Inc Chimeric polypeptides having cellulolytic enhancing ACTIVITY AND POLYNUCLEOTIDES ENCODING THEM
RU2603080C2 (ru) 2010-11-19 2016-11-20 МорфоСис АГ Коллекция и способы ее применения
US20130245233A1 (en) 2010-11-24 2013-09-19 Ming Lei Multispecific Molecules
US20130236467A1 (en) 2010-11-24 2013-09-12 Jeremy Griggs Multispecific antigen binding proteins targeting hgf
EP2649188A1 (en) 2010-12-06 2013-10-16 Novozymes North America, Inc. Methods of hydrolyzing oligomers in hemicellulosic liquor
HUE037616T2 (hu) 2010-12-08 2018-09-28 Codexis Inc Biokatalizátorok és eljárások armodafinil szintéziséhez
CN103261425B (zh) 2010-12-22 2015-07-15 先锋国际良种公司 病毒启动子、其截短物以及使用方法
CA2821154A1 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Viral promoter, truncations thereof, and methods of use
BR112013015515A2 (pt) 2010-12-28 2018-04-24 Pioneer Hi Bred Int molécula de ácido nucleico isolada, construto de dna, célula hospedeira, planta transgênica, semente transformada da planta, polipeptídeo isolado com atividade pesticida, composição, método para controlar uma população de praga de lepidóptero, método para matar uma praga de lepidóptero, método para produzir um polipeptídeo com atividade pesticida, planta que tem incorporado de maneira estável em seu genoma um construto de dna, método para proteger uma planta contra uma praga
AR084844A1 (es) 2011-01-14 2013-06-26 Jones Jeffrey B Arboles de citricos con resistencia a cancro de los citricos
BR112013018545A2 (pt) 2011-01-20 2019-02-05 Basf Plant Science Co Gmbh plantas com características melhoras relacionadas á produção e um método para produção das mesma
WO2012103322A1 (en) 2011-01-26 2012-08-02 Novozymes A/S Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
DK2668266T3 (en) 2011-01-26 2018-03-26 Novozymes Inc POLYPEPTIDES WITH CELLOBIO HYDROASE ACTIVITY AND POLYNUCLEOTIDES CODING THEM
CN103517986B (zh) 2011-01-26 2016-12-07 诺维信公司 具有纤维二糖水解酶活性的多肽及编码该多肽的多核苷酸
US9540443B2 (en) 2011-01-26 2017-01-10 Kolltan Pharmaceuticals, Inc. Anti-kit antibodies
US9353363B2 (en) 2011-01-26 2016-05-31 Novozymes A/S Glycoside hydrolases from thermophilic fungi
WO2012103350A1 (en) 2011-01-26 2012-08-02 Novozymes A/S Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
US9434972B2 (en) 2011-01-31 2016-09-06 Novozymes North America, Inc. Processes for enzymatic refining of pretreated cellulosic material for saccharification
WO2012106579A1 (en) 2011-02-03 2012-08-09 Bristol-Myers Squibb Company Amino acid dehydrogenase and its use in preparing amino acids from keto acids
EP2675900B1 (en) 2011-02-15 2017-09-06 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Root-preferred promoter and methods of use
CN103502418A (zh) 2011-02-16 2014-01-08 诺维信公司 包含金属蛋白酶的去污剂组合物
MX2013009178A (es) 2011-02-16 2013-08-29 Novozymes As Composiciones detergentes que comprenden metaloproteasas.
CN103476916A (zh) 2011-02-16 2013-12-25 诺维信公司 包含m7或m35金属蛋白酶的去污剂组合物
WO2012114234A1 (en) 2011-02-23 2012-08-30 Dupont Nutrition Biosciences Aps Process
CN103384678B (zh) 2011-02-23 2017-01-18 诺维信股份有限公司 具有纤维素水解增强活性的多肽及其编码多核苷酸
AR085251A1 (es) 2011-02-23 2013-09-18 Danisco Proceso para tratar aceite vegetal
EP2678427A2 (en) 2011-02-23 2014-01-01 DuPont Nutrition Biosciences ApS Method for producing recombinant enzymes capable of hydrolysing chlorophyll or a chlorophyll derivative
CN103502456A (zh) 2011-02-28 2014-01-08 巴斯夫植物科学有限公司 具有增强的产量相关性状的植物和用于制备该植物的方法
EP2681307A1 (en) 2011-02-28 2014-01-08 Novozymes, Inc. Microorganism for c4-dicarboxylic acid production
BR112013021836A2 (pt) 2011-02-28 2019-01-08 Basf Plant Science Co Gmbh plantas que possuem características relativas a rendimento aprimoradas e métodos de sua produção
EP2681242B1 (en) 2011-03-01 2018-01-24 Amgen Inc. Sclerostin and dkk-1 bispecific binding agents
AU2012222946A1 (en) 2011-03-01 2013-09-19 Basf Plant Science Company Gmbh Plants having enhanced yield-related traits and producing methods thereof
US9150842B2 (en) 2011-03-09 2015-10-06 Novozymes A/S Methods of increasing the cellulolytic enhancing activity of a polypeptide
US9409958B2 (en) 2011-03-10 2016-08-09 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
US8878007B2 (en) 2011-03-10 2014-11-04 Pioneer Hi Bred International Inc Bacillus thuringiensis gene with lepidopteran activity
WO2012127002A1 (en) 2011-03-23 2012-09-27 Novozymes A/S Sweet-tasting polypeptide from gram-positive bacteria
EP2689015B1 (en) 2011-03-23 2015-01-07 Novozymes A/S Methods for producing secreted polypeptides
WO2012130120A1 (en) 2011-03-25 2012-10-04 Novozymes A/S Method for degrading or converting cellulosic material
WO2012135035A1 (en) 2011-03-25 2012-10-04 Amgen Inc. Anti - sclerostin antibody crystals and formulations thereof
WO2012135110A1 (en) 2011-03-30 2012-10-04 Codexis, Inc. Pentose fermentation by a recombinant microorganism
WO2012135501A2 (en) 2011-03-30 2012-10-04 Athenix Corp. Axmi232, axmi233, and axmi249 toxin genes and methods for their use
WO2012135436A1 (en) 2011-03-30 2012-10-04 Athenix Corp. Axmi238 toxin gene and methods for its use
EP2691519A1 (en) 2011-03-31 2014-02-05 Novozymes, Inc. Cellulose binding domain variants and polynucleotides encoding same
WO2012135659A2 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Novozymes A/S Methods for enhancing the degradation or conversion of cellulosic material
UA120584C2 (uk) 2011-04-05 2020-01-10 Атенікс Корп. Варіантний інсектицидний ген axmi115 та способи його застосування
AU2012241055A1 (en) 2011-04-08 2013-08-15 Danisco Us, Inc. Compositions
US9102963B2 (en) 2011-04-13 2015-08-11 Codexis, Inc. Biocatalytic process for preparing eslicarbazepine and analogs thereof
WO2012142233A1 (en) 2011-04-14 2012-10-18 St. Jude Children's Research Hospital Methods and compositions for detecting and modulating a novel mtor complex
DK2699253T3 (en) 2011-04-21 2018-07-16 Univ Rockefeller STREPTOCOCCUS BACTERYPHAGIC LYSINES FOR THE DETECTION AND TREATMENT OF GRAM POSITIVE BACTERIES
CN103649308A (zh) 2011-04-28 2014-03-19 诺维信股份有限公司 具有内切葡聚糖酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
US9624518B2 (en) 2011-04-29 2017-04-18 Novozymes, Inc. Methods for enhancing the degradation or conversion of cellulosic material
RU2650784C2 (ru) 2011-05-05 2018-04-17 Альбумедикс А/С Варианты альбумина
US8993286B2 (en) 2011-05-19 2015-03-31 Novozymes, Inc. Methods for enhancing the degradation of cellulosic material with chitin binding proteins
WO2012159007A1 (en) 2011-05-19 2012-11-22 Novozymes, Inc. Methods for enhancing the degradation of cellulosic material with chitin binding proteins
CA2836873C (en) 2011-05-21 2019-10-22 Macrogenics, Inc. Deimmunized serum-binding domains and their use for extending serum half-life
EP2527432A1 (en) 2011-05-23 2012-11-28 Novozymes A/S Bi-directional cytosine deaminase-encoding selection marker
US9150625B2 (en) 2011-05-23 2015-10-06 E I Du Pont De Nemours And Company Chloroplast transit peptides and methods of their use
EP2527448A1 (en) 2011-05-23 2012-11-28 Novozymes A/S Simultaneous site-specific integrations of multiple gene-copies in filamentous fungi
EP2714738B1 (en) 2011-05-24 2018-10-10 Zyngenia, Inc. Multivalent and monovalent multispecific complexes and their uses
WO2012168259A1 (en) 2011-06-06 2012-12-13 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Protein tyrosine phosphatase, non-receptor type 11 (ptpn11) and triple-negative breast cancer
WO2012170742A2 (en) 2011-06-07 2012-12-13 University Of Hawaii Treatment and prevention of cancer with hmgb1 antagonists
US9244074B2 (en) 2011-06-07 2016-01-26 University Of Hawaii Biomarker of asbestos exposure and mesothelioma
WO2012172495A1 (en) 2011-06-14 2012-12-20 Novartis Ag Compositions and methods for antibodies targeting tem8
US20140216118A1 (en) 2011-06-14 2014-08-07 Synthon Biopharmaceuticals B.V. Compositions and Methods for Making and Biocontaining Auxotrophic Transgenic Plants
BR112013033176A2 (pt) 2011-06-21 2018-06-12 E I Du Pont De Nemouras And Company método para produzir uma modificação direcionada em um gene de fertilidade masculina, planta, molécula de ácido nucleio isolada, construto de expressão
EP2723858B1 (en) 2011-06-24 2017-04-12 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
EP2726651B1 (en) 2011-06-28 2018-11-07 Codexis, Inc. Protein variant generation by region shuffling
EP2540824A1 (en) 2011-06-30 2013-01-02 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising amylase variants reference to a sequence listing
ES2834102T3 (es) 2011-06-30 2021-06-16 Novozymes As Variantes de alfa-amilasa
WO2013003219A1 (en) 2011-06-30 2013-01-03 Codexis, Inc. Pentose fermentation by a recombinant microorganism
WO2013001087A2 (en) 2011-06-30 2013-01-03 Novozymes A/S Method for screening alpha-amylases
BR112014000143B1 (pt) 2011-07-06 2021-04-06 Novozymes A/S Variante de alfa-amilase, polinucleotídeo isolado, vetor de expressão, célula hospedeira, métodos de produzir uma variante de alfa-amilase, para produzir um produto de fermentação a partir de um material contendo amido, e, para a produção um derivado de amido enzimaticamente modificado
WO2013004639A2 (en) 2011-07-07 2013-01-10 Novozymes A/S Enzymatic preparation of diols
US9217021B2 (en) 2011-07-08 2015-12-22 Defensin Therapeutics Aps Oral treatment of inflammatory bowel disease
AR087167A1 (es) 2011-07-12 2014-02-26 Two Blades Foundation Genes de resistencia al tizon tardio
WO2013012643A1 (en) 2011-07-15 2013-01-24 Syngenta Participations Ag Polynucleotides encoding trehalose-6-phosphate phosphatase and methods of use thereof
WO2013010783A1 (en) 2011-07-15 2013-01-24 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
UA115768C2 (uk) 2011-07-15 2017-12-26 Сінгента Партісіпейшнс Аг Спосіб підвищення стійкості рослини до абіотичного стресу
EP2734633B1 (en) 2011-07-22 2019-05-01 Novozymes North America, Inc. Processes for pretreating cellulosic material and improving hydrolysis thereof
WO2013016207A2 (en) 2011-07-22 2013-01-31 California Institute Of Technology Stable fungal cel6 enzyme variants
EP2737069B1 (en) 2011-07-28 2017-08-23 Athenix Corp. Axmi205 variant proteins and methods for their use
BR112014001950B1 (pt) 2011-07-28 2021-01-12 Syngenta Participations Ag métodos para controle de uma praga de nemátodos e para produzir uma planta de soja protegida contra infestação de nemátodos
EP2736923A1 (en) 2011-07-28 2014-06-04 Athenix Corp. Axmi270 toxin gene and methods for its use
AR087366A1 (es) 2011-07-29 2014-03-19 Athenix Corp Gen plaguicida axmi 279 y sus metodos de empleo
US9951346B2 (en) 2011-08-03 2018-04-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Methods and compositions for targeted integration in a plant
BR112014002405A2 (pt) 2011-08-04 2017-04-04 Novozymes As polopeptídeo e polinucleotídeo isolados, composição, construto de ácido nucleico ou vetor de expressão, célula hospedeira recombinante, planta transgênica, parte da planta ou célula de planta, métodos para produzir um polipeptídeo e uma proteína, e, processos para degradar um material celulóssico, para produzir um produto de fermentação, e para fermentar um material celulósico
CA2842432C (en) 2011-08-04 2022-10-04 Amgen Inc. Method for treating bone gap defects
DK3382016T3 (da) 2011-08-04 2019-11-18 Novozymes Inc Polypeptider med xylanaseaktivitet og polynukleotider, der koder for dem
WO2013021064A1 (en) 2011-08-10 2013-02-14 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
US9382559B2 (en) 2011-08-10 2016-07-05 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
EP2742060B1 (en) 2011-08-10 2017-03-01 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
WO2013021062A1 (en) 2011-08-10 2013-02-14 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
WO2013021059A1 (en) 2011-08-10 2013-02-14 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
WO2013021065A1 (en) 2011-08-10 2013-02-14 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
WO2013021060A1 (en) 2011-08-10 2013-02-14 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
EP2744898A1 (en) 2011-08-15 2014-06-25 Novozymes A/S Polypeptides having cellulase activity and polynucleotides encoding same
WO2013024155A1 (en) 2011-08-17 2013-02-21 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Combinations of anti-hcv-entry factor antibodies and direct acting antivirals for the treatment and the prevention of hcv infection
WO2013024156A2 (en) 2011-08-17 2013-02-21 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Combinations of anti-hcv-entry factor antibodies and interferons for the treatment and the prevention of hcv infection
WO2013024157A2 (en) 2011-08-17 2013-02-21 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Combinations of host targeting agents for the treatment and the prevention of hcv infection
CN103917649A (zh) 2011-08-19 2014-07-09 诺维信股份有限公司 用于生产c4-二羧酸的重组微生物
US20140295027A1 (en) 2011-08-19 2014-10-02 Novozymes A/S Polypeptides Having Protease Activity
US20130052213A1 (en) 2011-08-19 2013-02-28 Novozymes A/S Novel immunomodulatory peptide
DK2748317T3 (en) 2011-08-22 2017-07-17 Codexis Inc GH61 glycoside hydrolase protein variants and cofactors that enhance GH61 activity
CA2846690A1 (en) 2011-08-26 2013-03-07 Novozymes A/S Polypeptides having glucoamylase activity and polynucleotides encoding same
LT2944693T (lt) 2011-08-26 2019-08-26 Gen9, Inc. Kompozicijos ir būdai, skirti nukleorūgščių didelio tikslumo sąrankai
US11377663B1 (en) 2011-08-30 2022-07-05 Monsanto Technology Llc Genetic regulatory elements
US12188028B1 (en) 2011-08-30 2025-01-07 Monsanto Technology, Llc Methods for making genetic regulatory elements
DK2751279T3 (da) 2011-08-31 2017-11-20 St Jude Children's Res Hospital Fremgangsmåder og sammensætninger til påvisning af niveauet af lysosomal exocytose-aktivitet og fremgangsmåder til anvendelse
EA201490568A1 (ru) 2011-09-06 2014-06-30 Новозимс А/С Варианты глюкоамилазы и кодирующие их полинуклеотиды
WO2013036861A1 (en) 2011-09-08 2013-03-14 Codexis, Inc Biocatalysts and methods for the synthesis of substituted lactams
CA2847236A1 (en) 2011-09-09 2013-03-14 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-amylase activity and polynucleotides encoding same
EP2753749B1 (en) 2011-09-09 2019-03-27 Novozymes A/S Improving properties of paper materials
US9670510B2 (en) 2011-09-13 2017-06-06 Novozymes A/S Methods of hydrolyzing and fermenting cellulosic material
WO2013043910A1 (en) 2011-09-20 2013-03-28 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
ES2628190T3 (es) 2011-09-22 2017-08-02 Novozymes A/S Polipéptidos con actividad de proteasa y polinucleótidos que codifican los mismos
EP2748372B1 (en) 2011-09-23 2019-04-17 Novozymes A/S Color modification of textile
CA2850070A1 (en) 2011-09-30 2013-04-04 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-amylase activity and polynucleotides encoding same
EP2760997A4 (en) 2011-09-30 2015-02-11 Codexis Inc MUSHROOM PROTEASE
US8728788B1 (en) 2011-09-30 2014-05-20 Novozymes A/S Dehydrogenase variants and polynucleotides encoding same
US9279118B2 (en) 2011-10-05 2016-03-08 The Rockefeller University Dimeric bacteriophage lysins
AU2012323316B2 (en) 2011-10-11 2017-08-10 Viela Bio, Inc. CD40L-specific Tn3-derived scaffolds and methods of use thereof
EA201490649A1 (ru) 2011-10-11 2014-07-30 Новозимс А/С Варианты глюкоамилазы и кодирующие их полинуклеотиды
EP2748316B1 (en) 2011-10-17 2018-12-19 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
HUE039835T2 (hu) 2011-10-17 2019-02-28 Novozymes As Alfa-amiláz variánsok és az azokat kódoló polinukleotidok
AR088562A1 (es) 2011-10-28 2014-06-18 Du Pont Metodos y composiciones para silenciar genes usando micro arn artificiales
DK2773656T3 (da) 2011-10-31 2019-09-09 Novozymes Inc Polypeptider med cellulolyseforbedrende aktivitet og polynukleotider, som koder for dem
AU2012332588B2 (en) 2011-11-01 2017-09-07 Bionomics, Inc. Methods of blocking cancer stem cell growth
WO2013067054A1 (en) 2011-11-01 2013-05-10 Bionomics, Inc. Antibodies and methods of treating cancer
EP2773664A1 (en) 2011-11-01 2014-09-10 Bionomics, Inc. Anti-gpr49 antibodies
US9221907B2 (en) 2011-11-01 2015-12-29 Bionomics Inc. Anti-GPR49 monoclonal antibodies
WO2013064195A1 (en) 2011-11-04 2013-05-10 Enel Ingegneria E Ricerca S.P.A. A new heat-stable carbonic anhydrase and uses thereof
CA2854233C (en) 2011-11-04 2020-05-12 Zymeworks Inc. Stable heterodimeric antibody design with mutations in the fc domain
US20140314787A1 (en) 2011-11-08 2014-10-23 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung, Friedrich Miescher Institute Treatment for neurodegenerative diseases
EP2776838A1 (en) 2011-11-08 2014-09-17 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research Early diagnostic of neurodegenerative diseases
CN103930544A (zh) 2011-11-08 2014-07-16 诺维信公司 酵母中生产古细菌蛋白酶的方法
EP2780448B1 (en) 2011-11-18 2019-09-11 Codexis, Inc. Biocatalysts for the preparation of hydroxy substituted carbamates
EP3409769A1 (en) 2011-11-18 2018-12-05 Novozymes A/S Polypeptides having beta-glucosidase activity, beta-xylosidase activity, or beta-glucosidase and beta-xylosidase activity and polynucleotides encoding same
EP2780364A2 (en) 2011-11-18 2014-09-24 Eleven Biotherapeutics, Inc. Proteins with improved half-life and other properties
DK3219794T3 (da) 2011-11-21 2019-12-16 Novozymes Inc GH61-polypeptidvarianter og polynukleotider, som koder for dem
WO2013075644A1 (en) 2011-11-22 2013-05-30 Novozymes, Inc. Polypeptides having beta-xylosidase activity and polynucleotides encoding same
RU2619051C2 (ru) 2011-11-25 2017-05-11 Новозимс А/С Полипептиды с лизоцимной активностью и полинуклеотиды, кодирующие их
WO2013076269A1 (en) 2011-11-25 2013-05-30 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
BR112014012417A2 (pt) 2011-12-01 2017-06-06 Novozymes Inc polipeptídeo e polinucleotídeo isolados, célula hospedeira recombinante, métodos para a produção de um polipeptídeo, de um mutante de uma célula de origem, e de uma proteína, e para a inibição da expressão de um polipeptídeo, planta transgênica, parte da planta ou célula de planta, molécula de rna, processos para degradar ou converter um material celulósico ou contendo xilano, para produzir um produto de fermentação, e de fermentação de um material celulósico ou contendo xilano, e, formulação de caldo integral ou composição de cultura de células
WO2013079531A2 (en) 2011-12-02 2013-06-06 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
US9404093B2 (en) 2011-12-02 2016-08-02 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity and polynucleotides encoding same
KR20140103135A (ko) 2011-12-05 2014-08-25 노파르티스 아게 Her3의 도메인 ii에 대해 지시된 표피 성장 인자 수용체 3 (her3)에 대한 항체
AU2012349735B2 (en) 2011-12-05 2016-05-19 Novartis Ag Antibodies for epidermal growth factor receptor 3 (HER3)
EP3272862A1 (en) 2011-12-16 2018-01-24 Novozymes, Inc. Polypeptides having laccase activity and polynucleotides encoding same
BR112014014697A2 (pt) 2011-12-19 2020-10-27 Novozymes, Inc. polipeptídeo isolado, composição, polinucleotídeo isolado, construto de ácido nucleico ou vetor de expressão, célula hospedeira recombinante, métodos para produzir um polipeptídeo e uma proteína, para gerar oxigênio molecular, e para remover peróxido de hidrogênio do tecido, processos para degradar ou converter um material celulósico, e para produzir um produto de fermentação, e, formulação de caldo integral ou composição de cultura de células
BR112014015030A2 (pt) 2011-12-20 2017-06-13 Codexis Inc variantes da endoflucanase 1b (eg1b)
CN104011204A (zh) 2011-12-20 2014-08-27 诺维信公司 枯草杆菌酶变体和编码它们的多核苷酸
EP2607468A1 (en) 2011-12-20 2013-06-26 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising subtilase variants
BR112014015228B1 (pt) 2011-12-20 2022-07-05 Novozymes, Inc. Variante de celobiohidrolase genitora, processos para degradação ou conversão de um material celulósico, para produção de um produto de fermentação, e de fermentação de um material celulósico, formulação de caldo inteiro ou composição de cultura celular, e, célula hospedeira microbiana transgênica
PE20150159A1 (es) 2011-12-21 2015-02-08 Novartis Ag Composiciones y metodos para anticuerpos que actuan sobre el factor p
CN104114707A (zh) 2011-12-22 2014-10-22 纳幕尔杜邦公司 使用大豆蔗糖合酶启动子来增加植物种子脂质含量
JP2015502397A (ja) 2011-12-23 2015-01-22 ファイザー・インク 部位特異的コンジュゲーションのための操作された抗体定常領域、ならびにそのための方法および使用
US10174301B2 (en) 2011-12-28 2019-01-08 Novozymes A/S Methods for improving the nutritional value of the animal feed using a protease
SG11201403718YA (en) 2011-12-28 2014-07-30 Amgen Inc Method of treating alveolar bone loss through the use of anti-sclerostin antibodies
WO2013102825A1 (en) 2012-01-02 2013-07-11 Novartis Ag Cdcp1 and breast cancer
US20130180005A1 (en) 2012-01-06 2013-07-11 Pioneer Hi Bred International Inc Method to Screen Plants for Genetic Elements Inducing Parthenogenesis in Plants
EP2800760A1 (en) 2012-01-06 2014-11-12 Pioneer Hi-Bred International Inc. Compositions and methods for the expression of a sequence in a reproductive tissue of a plant
BR112014016791A2 (pt) 2012-01-06 2019-09-24 Pioneer Hi Bred Int molécula de ácido nucléico isolada, cassete de expressão, vetor, célula vegetal, planta, semente transgénica, método para expressão de um polinucleotídeo em uma planta ou célula vegetal, método para expressão de um polinucleotídeo, preferencialmente em tecidos de óvulo de uma planta
US9006515B2 (en) 2012-01-06 2015-04-14 Pioneer Hi Bred International Inc Pollen preferred promoters and methods of use
WO2013104659A2 (en) 2012-01-13 2013-07-18 Dupont Nutrition Biosciences Aps Process
WO2013104660A1 (en) 2012-01-13 2013-07-18 Dupont Nutrition Biosciences Aps Process for treating a plant oil comprising hydrolysing chlorophyll or a chlorophyll derivative and involving partial caustic neutralisation
BR112014017919A2 (pt) 2012-01-26 2017-06-27 Novozymes As uso de um poliptídeo variante, composição, polinucleotídeo isolado, constructo de ácido nucleico ou vetor de expressão, célula hospedeira de expressão recombinante, métodos de produção do pilipeptídeo, para melhoria do valor nutricional de uma ração animal, e para o tratamento de proteínas, planta, parte de planta ou célula de planta transgênica, aditivo de ração animal, ração animal, e, composição de ração animal ou detergente
BR112014018294B1 (pt) 2012-01-26 2022-01-11 Norfolk Plant Sciences, Ltd Método para produzir uma planta, cassete de expressão, e, célula bacteriana
AR089793A1 (es) 2012-01-27 2014-09-17 Du Pont Metodos y composiciones para generar locus de rasgos transgenicos complejos
AU2013205606B2 (en) 2012-02-01 2015-05-21 Corteva Agriscience Llc Synthetic Brassica-derived chloroplast transit peptides
MX353896B (es) 2012-02-03 2018-02-01 Procter & Gamble Composiciones y metodos para el tratamiento de superficies con lipasas.
EP2809779B1 (en) 2012-02-03 2017-09-13 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
EP2628785B1 (en) 2012-02-17 2016-05-18 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising subtilase variants
JP2015509364A (ja) 2012-02-17 2015-03-30 ノボザイムス アクティーゼルスカブ サブチリシン変異体およびそれをコードするポリヌクレオチド
BR112014018876A2 (pt) 2012-02-20 2017-07-04 Novozymes As polipeptídeo isolado com atividade endoglicanase, composição, polinucleotídeo isolado, construto de ácido nucleico ou vetor de expressão, célula hospedeira recombinante, e, método de produção de um polipeptídeo
GB201203374D0 (en) 2012-02-28 2012-04-11 Univ Sheffield Alkane production
AR090274A1 (es) 2012-03-08 2014-10-29 Athenix Corp Gen de la toxina axmi335 de bacillus thuringiensis y sus metodos de empleo
MX362999B (es) 2012-03-08 2019-03-01 Athenix Corp Gen de la delta-endotoxina axmi345 y sus metodos de uso.
IN2014DN06908A (ja) 2012-03-14 2015-05-15 Du Pont
CA2867342A1 (en) 2012-03-14 2013-09-19 Iowa State University Research Foundation, Inc. Nucleotide sequences encoding fasciated ear4 (fea4) and methods of use thereof
CA2866628C (en) 2012-03-14 2023-03-07 E. I. Du Pont De Nemours And Company Nucleotide sequences encoding fasciated ear3 (fea3) and methods of use thereof
WO2013135896A1 (en) 2012-03-16 2013-09-19 Novozymes Biopharma Dk A/S Albumin variants
US9150853B2 (en) 2012-03-21 2015-10-06 Gen9, Inc. Methods for screening proteins using DNA encoded chemical libraries as templates for enzyme catalysis
HUE036985T2 (hu) 2012-03-23 2018-08-28 Codexis Inc Biokatalizátor és eljárások triptamin és triptamin-analógok származékainak szintetizálására
WO2013144240A1 (en) 2012-03-29 2013-10-03 Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research Inhibition of interleukin- 8 and/or its receptor cxcrl in the treatment her2/her3 -overexpressing breast cancer
WO2013144105A1 (en) 2012-03-31 2013-10-03 Novozymes A/S Epoxidation using peroxygenase
CN107988181A (zh) 2012-04-02 2018-05-04 诺维信公司 脂肪酶变体以及编码其的多核苷酸
EP2841569A2 (en) 2012-04-23 2015-03-04 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-glucuronidase activity and polynucleotides encoding same
US9394556B2 (en) 2012-04-23 2016-07-19 Novozymes A/S Polypeptides having glucuronyl esterase activity and polynucleotides encoding same
CN111876409A (zh) 2012-04-24 2020-11-03 Gen9股份有限公司 在体外克隆中分选核酸和多重制备物的方法
DK2840900T3 (da) 2012-04-25 2019-09-09 Novozymes As Fremgangsmåde til bagning
WO2013160374A1 (en) 2012-04-27 2013-10-31 Dupont Nutrition Biosciences Aps Process for refining crude plant oil involving enzymatic hydrolysis and gum recycling
WO2013160372A1 (en) 2012-04-27 2013-10-31 Dupont Nutrition Biosciences Aps Process for treating plant oil involving addition of serial doses of chlorophyll or chlorophyll derivative degrading enzyme
CA2868308A1 (en) 2012-04-27 2013-10-31 Novozymes, Inc. Gh61 polypeptide variants and polynucleotides encoding same
BR112014027468A2 (pt) 2012-05-04 2017-06-27 Du Pont polinucleotídeo isolado ou recombinante, construção de dna recombinante, célula, planta, explante vegetal, semente transgênica, polipeptídeo isolado, composição, métodos de produção de meganuclease, de introdução de rompimento e de integração de um polinucleotídeo.
DK2847308T3 (en) 2012-05-07 2017-10-23 Novozymes As Polypeptides with xanthan-degrading activity and polynucleotides encoding them
SG11201407295YA (en) 2012-05-08 2014-12-30 Codexis Inc Biocatalysts and methods for hydroxylation of chemical compounds
WO2013166594A1 (en) 2012-05-10 2013-11-14 Zymeworks Inc. Heteromultimer constructs of immunoglobulin heavy chains with mutations in the fc domain
EP2847214B1 (en) 2012-05-11 2017-12-27 Codexis, Inc. Engineered imine reductases and methods for the reductive amination of ketone and amine compounds
WO2013173711A1 (en) 2012-05-18 2013-11-21 Novozymes A/S Bacterial mutants with improved transformation efficiency
CN109234250A (zh) 2012-05-31 2019-01-18 诺维信公司 具有有机磷水解酶活性的多肽
WO2013178699A1 (en) 2012-05-31 2013-12-05 Novozymes A/S Isopropanol production by bacterial hosts
EP2855520B1 (en) 2012-06-04 2018-09-26 Novartis AG Site-specific labeling methods and molecules produced thereby
US8980578B2 (en) 2012-06-11 2015-03-17 Codexis, Inc. Fungal beta-xylosidase variants
US9347105B2 (en) 2012-06-15 2016-05-24 Pioneer Hi Bred International Inc Genetic loci associated with resistance of soybean to cyst nematode and methods of use
WO2013188291A2 (en) 2012-06-15 2013-12-19 E. I. Du Pont De Nemours And Company Methods and compositions involving als variants with native substrate preference
EP2861749A1 (en) 2012-06-19 2015-04-22 Novozymes Bioag A/S Enzymatic reduction of hydroperoxides
AU2013279440B2 (en) 2012-06-20 2016-10-06 Novozymes A/S Use of polypeptides having protease activity in animal feed and detergents
EP2677035A1 (en) 2012-06-22 2013-12-25 BASF Plant Science Company GmbH Plants having enhanced yield-related traits and a method for making the same
DK2864491T3 (en) 2012-06-22 2018-12-17 Phytogene Inc Enzymes and methods for styrene synthesis
AU2013280661A1 (en) 2012-06-25 2015-01-22 Gen9, Inc. Methods for nucleic acid assembly and high throughput sequencing
WO2014001482A1 (en) 2012-06-29 2014-01-03 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniererlassung, Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research Treating diseases by modulating a specific isoform of mkl1
CN103998610B (zh) 2012-06-29 2020-03-17 阿森尼克斯公司 Axmi277线虫毒素及其使用方法
WO2014006114A1 (en) 2012-07-05 2014-01-09 Novartis Forschungsstiftung, Zweigniederlassung Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research New treatment for neurodegenerative diseases
US9925260B2 (en) 2012-07-05 2018-03-27 Ucb Pharma S.A. Treatment for bone diseases
WO2014009473A1 (en) 2012-07-12 2014-01-16 Novozymes A/S Polypeptides having lipase activity and polynucleotides encoding same
BR112014032865A2 (pt) 2012-07-18 2017-08-01 Novozymes As método para tratamento de têxtil de poliéster, e, composição
WO2014015256A2 (en) 2012-07-20 2014-01-23 Novozymes A/S Enzymatic oxidation of 5-hydroxymethylfurfural and derivatives thereof
CN116574185A (zh) 2012-07-25 2023-08-11 塞尔德克斯医疗公司 抗kit抗体及其用途
EP3929289A1 (en) 2012-07-30 2021-12-29 Evolva, Inc. Sclareol and labdenediol diphosphate synthase polypeptides, encoding nucleic acid molecules and uses thereof
US10584381B2 (en) 2012-08-14 2020-03-10 10X Genomics, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
US9701998B2 (en) 2012-12-14 2017-07-11 10X Genomics, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
US10752949B2 (en) 2012-08-14 2020-08-25 10X Genomics, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
US9951386B2 (en) 2014-06-26 2018-04-24 10X Genomics, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
US10273541B2 (en) 2012-08-14 2019-04-30 10X Genomics, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
US10323279B2 (en) 2012-08-14 2019-06-18 10X Genomics, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
CA3216609C (en) 2012-08-14 2024-05-14 10X Genomics, Inc. Microcapsule compositions and methods
US10221442B2 (en) 2012-08-14 2019-03-05 10X Genomics, Inc. Compositions and methods for sample processing
US11591637B2 (en) 2012-08-14 2023-02-28 10X Genomics, Inc. Compositions and methods for sample processing
PL2885407T3 (pl) 2012-08-16 2018-09-28 Bangladesh Jute Research Institute Enzymy rozkładające pektynę z macrophomina phaseolina oraz ich zastosowania
CN104870640A (zh) 2012-08-16 2015-08-26 孟加拉朱特研究所 来自菜豆壳球孢菌的纤维素和/或半纤维素降解酶及其用途
BR112015001046B1 (pt) 2012-08-16 2022-06-14 Novozymes A/S Método para tratar um produto têxtil
US9828595B2 (en) 2012-08-17 2017-11-28 Novozymes A/S Thermostable asparaginase variants and polynucleotides encoding same
US20160145540A1 (en) 2012-08-22 2016-05-26 Novozymes A/S Detergent Compositions Comprising Metalloproteases
EP2888361A1 (en) 2012-08-22 2015-07-01 Novozymes A/S Metalloprotease from exiguobacterium
US9315791B2 (en) 2012-08-22 2016-04-19 Novozymes A/S Metalloproteases from alicyclobacillus
US9758793B2 (en) 2012-08-30 2017-09-12 Athenix Corp. AXMI-234 and AXMI-235 delta-endotoxin genes and methods for their use
WO2014033266A1 (en) 2012-08-31 2014-03-06 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Anti-sr-bi antibodies for the inhibition of hepatitis c virus infection
DK2893012T3 (en) 2012-09-05 2018-12-03 Novozymes As Polypeptides with protease activity
AU2013202506B2 (en) 2012-09-07 2015-06-18 Celgene Corporation Resistance biomarkers for hdac inhibitors
US9816102B2 (en) 2012-09-13 2017-11-14 Indiana University Research And Technology Corporation Compositions and systems for conferring disease resistance in plants and methods of use thereof
CN104685052A (zh) 2012-09-19 2015-06-03 诺维信股份有限公司 用于增强纤维素材料的降解或转化的方法
US20150218553A1 (en) 2012-09-20 2015-08-06 Novozymes A/S Screening Polynucleotide Libraries For Variants That Encode Functional Proteins
US20150218567A1 (en) 2012-09-27 2015-08-06 Novozymes A/S Bacterial Mutants with Improved Transformation Efficiency
US10005988B2 (en) 2012-10-05 2018-06-26 Novozymes A/S Reducing adhesion of bacteria to a surface or releasing bacteria from a surface to which they adhere using endo-beta-A,4-glucanases
US10035996B2 (en) 2012-10-08 2018-07-31 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
WO2014059028A1 (en) 2012-10-09 2014-04-17 Igenica, Inc. Anti-c16orf54 antibodies and methods of use thereof
US20150259696A1 (en) 2012-10-11 2015-09-17 Shane E. Abbitt Guard cell promoters and uses thereof
CN104704115B (zh) 2012-10-12 2018-11-02 诺维信公司 具有过氧合酶活性的多肽
US9499801B2 (en) 2012-10-12 2016-11-22 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity
CN104704116B (zh) 2012-10-12 2018-09-28 诺维信公司 具有过氧合酶活性的多肽
WO2014056920A2 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity
CN104718287B (zh) 2012-10-12 2018-02-06 诺维信公司 具有过氧合酶活性的多肽
WO2014056916A2 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity
EP2906689B1 (en) 2012-10-12 2018-12-12 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity
CA2887575A1 (en) 2012-10-15 2014-04-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Methods and compositions to enhance activity of cry endotoxins
US10226744B2 (en) 2012-10-19 2019-03-12 Danisco Us Inc Stabilization of biomimetic membranes
US9439447B2 (en) 2012-10-23 2016-09-13 Montana State University Production of high quality durum wheat having increased amylose content
US20150275194A1 (en) 2012-10-24 2015-10-01 Novozymes A/S Polypeptides Having Cellulolytic Enhancing Activity And Polynucleotides Encoding Same
WO2014070673A1 (en) 2012-10-29 2014-05-08 University Of Rochester Artemisinin derivatives, methods for their preparation and their use as antimalarial agents
WO2014068010A1 (en) 2012-10-31 2014-05-08 Novozymes A/S Isopropanol production by bacterial hosts
ES2911701T3 (es) 2012-11-01 2022-05-20 Univ British Columbia Polipéptidos de citocromo P450 y citocromo P450 reductasa, moléculas de ácido nucleico codificantes y usos de los mismos
MX2015005363A (es) 2012-11-08 2015-11-06 Novozymes Biopharma Dk As Variantes de albumina.
AU2013202507B9 (en) 2012-11-14 2015-08-13 Celgene Corporation Inhibition of drug resistant cancer cells
WO2014076232A2 (en) 2012-11-19 2014-05-22 Novozymes A/S Isopropanol production by recombinant hosts using an hmg-coa intermediate
BR112015011466A8 (pt) 2012-11-20 2018-05-02 Codexis Inc Célula hospedeira fúngica recombinante, constructo de ácido nucleico recombinante, sequência de polpeptídeo isolada, e, métodos para produzir um produto de fermentação e pelo menos um produto final a partir de pelo menos um substrato celulósico
UY35148A (es) 2012-11-21 2014-05-30 Amgen Inc Immunoglobulinas heterodiméricas
CN105209626B (zh) 2012-11-30 2019-09-03 诺维信股份有限公司 通过重组酵母生产3-羟基丙酸
WO2014084859A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Novartis Ag Molecules and methods for modulating tmem16a activities
HUE053669T2 (hu) 2012-12-05 2021-07-28 Novartis Ag Készítmények és eljárások EPO-t célzó antitestekre
JP6745599B2 (ja) 2012-12-06 2020-08-26 アジレント・テクノロジーズ・インクＡｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ， Ｉｎｃ． 分子の作製
US9738915B2 (en) 2012-12-07 2017-08-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Biocatalytic transamination process
EP2740840A1 (en) 2012-12-07 2014-06-11 Novozymes A/S Improving drainage of paper pulp
JP6514107B2 (ja) 2012-12-07 2019-05-15 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 細菌の付着防止
WO2014086706A1 (en) 2012-12-07 2014-06-12 Novozymes A/S Method for generating site-specific mutations in filamentous fungi
RU2015126866A (ru) 2012-12-11 2017-01-19 Новозимс А/С Полипептиды, обладающие активностью фосфолипазы с, и полинуклеотиды, кодирующие их
AR093909A1 (es) 2012-12-12 2015-06-24 Bayer Cropscience Ag Uso de ingredientes activos para controlar nematodos en cultivos resistentes a nematodos
WO2014093676A1 (en) 2012-12-14 2014-06-19 10X Technologies, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
WO2014093835A1 (en) 2012-12-14 2014-06-19 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
WO2014090940A1 (en) 2012-12-14 2014-06-19 Novozymes A/S Removal of skin-derived body soils
US10533221B2 (en) 2012-12-14 2020-01-14 10X Genomics, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
CA2894261C (en) 2012-12-17 2022-01-04 Novozymes A/S Alpha-amylases and polynucleotides encoding same
EP2935589A1 (en) 2012-12-18 2015-10-28 Novartis AG Compositions and methods that utilize a peptide tag that binds to hyaluronan
US20150337280A1 (en) 2012-12-19 2015-11-26 Novozymes A/S Polypeptides Having Cellulolytic Enhancing Activity And Polynucleotides Encoding Same
WO2014099730A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 Codexis, Inc. Engineered biocatalysts and methods for synthesizing chiral amines
EP2934177B1 (en) 2012-12-21 2017-10-25 Novozymes A/S Polypeptides having protease activiy and polynucleotides encoding same
WO2014101753A1 (en) 2012-12-24 2014-07-03 Novozymes A/S Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
CN103060279B (zh) 2012-12-25 2014-08-13 北京大北农科技集团股份有限公司 除草剂抗性蛋白质、其编码基因及用途
CN103013938B (zh) 2012-12-25 2014-12-17 北京大北农科技集团股份有限公司 除草剂抗性蛋白质、其编码基因及用途
US9902946B2 (en) 2013-01-03 2018-02-27 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
EP2946006B1 (en) 2013-01-18 2019-04-10 Codexis, Inc. Engineered biocatalysts useful for carbapenem synthesis
EP4414988A3 (en) 2013-01-31 2024-11-06 Codexis, Inc. Methods, systems, and software for identifying bio-molecules using models of multiplicative form
WO2014120916A1 (en) 2013-02-01 2014-08-07 Bristol-Myers Squibb Company Pegylated domain antibodies monovalent for cd28 binding and methods of use
WO2014122109A1 (en) 2013-02-05 2014-08-14 Novozymes A/S Enzymatic preparation of indigo dyes and intermediates
AU2014214032A1 (en) 2013-02-06 2015-07-09 Novozymes A/S Use of polypeptides having protease activity in animal feed
WO2014124258A2 (en) 2013-02-08 2014-08-14 Irm Llc Specific sites for modifying antibodies to make immunoconjugates
AU2014214682B2 (en) 2013-02-08 2018-07-26 10X Genomics, Inc. Polynucleotide barcode generation
KR102447350B1 (ko) 2013-02-08 2022-09-23 노파르티스 아게 면역접합체의 제조를 위한 항체의 변형에 사용되는 특정 부위
UA115896C2 (uk) 2013-02-13 2018-01-10 Атенікс Корп. Застосування токсину axmi184 для контролю кукурудзяного жука
EP3988671A1 (en) 2013-02-20 2022-04-27 Emory University Compositions for sequencing nucleic acids in mixtures
DK2961844T3 (da) 2013-02-28 2019-01-02 Codexis Inc Modificerede transaminasepolypeptider til industriel biokatalyse
US9487773B2 (en) * 2013-03-01 2016-11-08 Technophage, Investigacao E Desenvolvimento Em Biotecnologia, Sa Cell-based methods for coupling protein interactions and binding molecule selection
DK2964767T3 (da) 2013-03-07 2020-03-23 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Toksingener og fremgangsmåder til anvendelse deraf
CN110628749A (zh) 2013-03-08 2019-12-31 诺维信公司 纤维二糖水解酶变体和编码它们的多核苷酸
BR112015022742A2 (pt) 2013-03-11 2018-11-27 Pionner Hi Bred Int Inc métodos e composições que empregam um domínio de estabilização dependente de sulfonilureia
BR112015022737A2 (pt) 2013-03-11 2018-04-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc construto de polinucleotídeo recombinante, célula vegetal, planta, semente, método para regular expressão
US9803214B2 (en) 2013-03-12 2017-10-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Breeding pair of wheat plants comprising an MS45 promoter inverted repeat that confers male sterility and a construct that restores fertility
US9273322B2 (en) 2013-03-12 2016-03-01 Pioneer Hi Bred International Inc Root-preferred promoter and methods of use
US9243258B2 (en) 2013-03-12 2016-01-26 Pioneer Hi Bred International Inc Root-preferred promoter and methods of use
GB201308828D0 (en) 2013-03-12 2013-07-03 Verenium Corp Phytase
US9498532B2 (en) 2013-03-13 2016-11-22 Novartis Ag Antibody drug conjugates
EP2970479B1 (en) 2013-03-14 2019-04-24 Novartis AG Antibodies against notch 3
AU2014236154A1 (en) 2013-03-14 2015-09-17 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Compositions having dicamba decarboxylase activity and methods of use
GB201308843D0 (en) 2013-03-14 2013-07-03 Verenium Corp Phytase formulation
BR112015023286A2 (pt) 2013-03-14 2018-03-06 Arzeda Corp polipeptídeo recombinante com atividade da dicamba descarboxilase, construto de polinucleotídeo, célula, método de produção de uma célula hospedeira compreendendo um polinucleotídeo heterólogo que codifica um polipeptídeo tendo atividade da dicamba descarboxilase, método para descarboxilar dicamba, um derivado de dicamba ou um metabolito de dicamba, método para a detecção de um polipeptideo e método para a detecção da presença de um polinucleotideo que codifica um polipeptideo tendo atividade da dicamba descarboxilase
US10000749B2 (en) 2013-03-14 2018-06-19 Evolva, Inc. Valencene synthase polypeptides, encoding nucleic acid molecules and uses thereof
BR112015023752B1 (pt) 2013-03-15 2023-11-14 Zyngenia, Inc. Domínio de reconhecimento modular (mrd), complexo compreendendo mrd e cetuximabe, usos do complexo para inibir a angiogênese e tratar câncer e composição farmacêutica compreendendo o dito complexo
US9168290B2 (en) 2013-03-15 2015-10-27 Orpro Therapeutics, Inc. Product and process for mucus viscosity normalization
LT2970361T (lt) * 2013-03-15 2023-05-10 Gen9, Inc. Kompozicijos ir būdai, skirti dauginei nukleorūgščių sintezei
CA2901316A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Phi-4 polypeptides and methods for their use
NZ710929A (en) 2013-03-15 2018-02-23 Novartis Ag Antibody drug conjugates
EP3533866A1 (en) 2013-03-21 2019-09-04 Novozymes A/S Polypeptides having phospholipase a activity and polynucleotides encoding same
US9631164B2 (en) 2013-03-21 2017-04-25 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
KR102218930B1 (ko) 2013-04-18 2021-02-23 코덱시스, 인코포레이티드 조작된 페닐알라닌 암모니아 리아제 폴리펩티드
CN105378050A (zh) 2013-04-18 2016-03-02 诺维信公司 具有蛋白酶活性的多肽和编码它们的多核苷酸
WO2014173980A2 (en) 2013-04-23 2014-10-30 Novozymes A/S Liquid automatic dish washing detergent compositions
CA2904022C (en) 2013-04-30 2022-04-19 Novozymes A/S Glucoamylase variants and polynucleotides encoding same
WO2014177541A2 (en) 2013-04-30 2014-11-06 Novozymes A/S Glucoamylase variants and polynucleotides encoding same
EP3461881B1 (en) 2013-05-03 2024-10-09 Novozymes A/S Microencapsulation of detergent enzymes
CN105283546B (zh) 2013-05-10 2025-08-12 国投生物科技投资有限公司 具有木聚糖酶活性的多肽以及对其进行编码的多核苷酸
AR096270A1 (es) 2013-05-14 2015-12-16 Novozymes As Composiciones detergentes
US20160083703A1 (en) 2013-05-17 2016-03-24 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
SG11201509982UA (ja) 2013-06-06 2016-04-28 Igenica Biotherapeutics Inc
US10538751B2 (en) 2013-06-06 2020-01-21 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
EP2816115A1 (en) 2013-06-17 2014-12-24 BASF Plant Science Company GmbH Plants having one or more enhanced yield-related traits and a method for making the same
AR096601A1 (es) 2013-06-21 2016-01-20 Novartis Ag Anticuerpos del receptor 1 de ldl oxidado similar a lectina y métodos de uso
US9562101B2 (en) 2013-06-21 2017-02-07 Novartis Ag Lectin-like oxidized LDL receptor 1 antibodies and methods of use
US20160122772A1 (en) 2013-06-21 2016-05-05 Novozymes A/S Production of Polypeptides Without Secretion Signal in Bacillus
EP3013955A1 (en) 2013-06-27 2016-05-04 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
US10378001B2 (en) 2013-06-27 2019-08-13 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
US20160152925A1 (en) 2013-07-04 2016-06-02 Novozymes A/S Polypeptides Having Anti-Redeposition Effect and Polynucleotides Encoding Same
EP3019603A1 (en) 2013-07-09 2016-05-18 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
US11459579B2 (en) 2013-07-09 2022-10-04 Board Of Trustees Of Michigan State University Transgenic plants produced with a K-domain, and methods and expression cassettes related thereto
BR112015032956B1 (pt) 2013-07-09 2022-09-13 Board Of Trustees Of Michigan State University Método para produzir uma planta transgênica e cassete de expressão
HUE040545T2 (hu) 2013-07-17 2019-03-28 Novozymes As Pullulanáz kimérák és az azokat kódoló polinukleotidok
JP2016525354A (ja) 2013-07-25 2016-08-25 ビーエーエスエフ エンザイムズ エルエルシー フィターゼ
EP3339436B1 (en) 2013-07-29 2021-03-31 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising protease variants
WO2015014803A1 (en) 2013-07-29 2015-02-05 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
CN117904081A (zh) 2013-07-29 2024-04-19 诺维信公司 蛋白酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
CN105431520A (zh) 2013-07-31 2016-03-23 诺维信公司 利用表达昆虫天冬氨酸1-脱羧酶的重组酵母的3-羟基丙酸生产
EP3030902B1 (en) 2013-08-07 2019-09-25 Friedrich Miescher Institute for Biomedical Research New screening method for the treatment friedreich's ataxia
BR122022020536B1 (pt) 2013-08-08 2023-11-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Molécula de ácido nucleico isolada, construto de dna, célula hospedeira bacteriana, polipeptídeo isolado, composição, método para controlar uma população, método para matar uma praga, método para produzir um polipeptídeo, método para produzir uma planta ou célula vegetal, método para proteger uma planta
WO2015038262A2 (en) 2013-08-09 2015-03-19 Athenix Corp. Axmi281 toxin gene and methods for its use
UY35696A (es) 2013-08-09 2015-03-27 Athenix Corp ?molécula de adn recombinante que comprende al gen de toxina axmi440, vector, célula huésped, plantas, composiciones y métodos relacionados?.
WO2015022429A1 (en) 2013-08-15 2015-02-19 Novozymes A/S Polypeptides having beta-1,3-galactanase activity and polynucleotides encoding same
MX359026B (es) 2013-08-16 2018-09-12 Pioneer Hi Bred Int Proteinas insecticidas y metodos de uso.
US10395758B2 (en) 2013-08-30 2019-08-27 10X Genomics, Inc. Sequencing methods
EA201690560A1 (ru) 2013-09-11 2016-10-31 Пайонир Хай-Бред Интернэшнл, Инк. Регуляторные элементы растений и способы их применения
CA3223359A1 (en) 2013-09-13 2015-03-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
EP3046628B1 (en) 2013-09-19 2019-11-06 The Board of Trustees of the Leland Stanford Junior University Methods and compositions for producing hepatocyte-like cells
WO2015048016A2 (en) 2013-09-24 2015-04-02 E. I. Du Pont De Nemours And Company Fasciated inflorescence (fin) sequences and methods of use
US10696964B2 (en) 2013-09-27 2020-06-30 Codexis, Inc. Automated screening of enzyme variants
WO2015050959A1 (en) 2013-10-01 2015-04-09 Yale University Anti-kit antibodies and methods of use thereof
WO2015049370A1 (en) 2013-10-03 2015-04-09 Novozymes A/S Detergent composition and use of detergent composition
WO2015059133A1 (en) 2013-10-22 2015-04-30 Novozymes A/S Cellobiose dehydrogenase variants and polynucleotides encoding same
JP6643987B2 (ja) 2013-11-13 2020-02-12 コデクシス， インコーポレイテッド ケトン化合物およびアミン化合物の還元的アミノ化のための操作されたイミンレダクターゼおよび方法
CN105764343B (zh) 2013-11-25 2020-04-17 拜耳作物科学有限合伙公司 使用axmi-011控制半翅目昆虫
EP2876156A1 (en) 2013-11-26 2015-05-27 Commissariat A L'energie Atomique Et Aux Energies Alternatives New enzymes and method for preparing hydroxylated L-lysine or L-ornithine and analogs thereof
EP3943646A1 (en) * 2013-11-27 2022-01-26 Gen9, Inc. Libraries of nucleic acids and methods for making the same
CN105764330B (zh) 2013-11-27 2019-04-30 纳幕尔杜邦公司 与对非生物胁迫的响应相关联的基因座
CN105793418A (zh) 2013-11-29 2016-07-20 诺维信公司 过氧合酶变体
US9309314B2 (en) 2013-12-03 2016-04-12 Agency For Science, Technology And Research (A*Star) Polypeptides, nucleic acids and uses thereof
AU2014364119C1 (en) 2013-12-09 2021-05-27 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC AXMI477, AXMI482, AXMI486 and AXMI525 toxin genes from bacillus thuringiensis and methods for their use
WO2015085920A1 (en) 2013-12-11 2015-06-18 Novozymes A/S Cutinase variants and polynucleotides encoding same
US9824068B2 (en) 2013-12-16 2017-11-21 10X Genomics, Inc. Methods and apparatus for sorting data
EP2886656A1 (en) 2013-12-18 2015-06-24 Commissariat A L'energie Atomique Et Aux Energies Alternatives New enzyme and method for preparing 4-hydroxyl benzyl alcohol and derivatives thereof
DK3083936T3 (en) 2013-12-19 2018-10-22 Danisco Us Inc USE OF HYDROPHOBINES TO INCREASE GAS TRANSFER IN AEROBE FERMENTATION PROCESSES
EP3083954B1 (en) 2013-12-20 2018-09-26 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
EP3087088B1 (en) 2013-12-23 2022-05-25 University Of Rochester Methods and compositions for ribosomal synthesis of macrocyclic peptides
NZ630311A (en) 2013-12-27 2016-03-31 Celgene Corp Romidepsin formulations and uses thereof
EP2896698A1 (en) 2014-01-17 2015-07-22 BASF Plant Science Company GmbH Plants having one or more enhanced yield-related traits and a method for making the same
US10208297B2 (en) 2014-01-22 2019-02-19 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same for cleaning
EP3415624B1 (en) 2014-01-22 2021-08-04 Novozymes A/S Pullulanase variants and polynucleotides encoding same
PT3097122T (pt) 2014-01-24 2020-07-21 Ngm Biopharmaceuticals Inc Anticorpos de ligação de domínio 2 de beta klotho e métodos de utilização dos mesmos
CA2940526A1 (en) 2014-01-28 2015-08-06 Dice Molecules Sv, Llc Monoliths with attached recognition compounds, arrays thereof and uses thereof
WO2015116680A1 (en) 2014-01-30 2015-08-06 Two Blades Foundation Plants with enhanced resistance to phytophthora
WO2015120270A1 (en) 2014-02-07 2015-08-13 Pioneer Hi Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
CA3290904A1 (en) 2014-02-07 2026-03-02 E. I. Du Pont De Nemours And Company Insecticidal proteins and methods for their use
EP2910640B1 (en) 2014-02-25 2018-12-05 Biopract GmbH A method for improving substrate degradation in agricultural biogas plants
GB201403775D0 (en) 2014-03-04 2014-04-16 Kymab Ltd Antibodies, uses & methods
CA2940451A1 (en) 2014-03-12 2015-09-17 Novartis Ag Specific sites for modifying antibodies to make immunoconjugates
US10155935B2 (en) 2014-03-12 2018-12-18 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
BR112016021474B1 (pt) 2014-03-19 2022-10-04 Novozymes A/S Composição compreendendo uma fosfatidilinositol fosfolipase c e um polipeptídeo de fosfolipase c específica para fosfatidilcolina e fosfatidiletanolamina e método para reduzir o teor de fosfolipídeos em uma composição de óleo
WO2015143144A1 (en) 2014-03-19 2015-09-24 Novozymes A/S Method for enhancing activity of an x143 polypeptide
US20170015950A1 (en) 2014-04-01 2017-01-19 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
US20170121741A1 (en) 2014-04-01 2017-05-04 Dupont Nutrition Biosciences Aps Method for increasing crude palm oil yields
CA2944649C (en) 2014-04-04 2022-06-21 Bionomics, Inc. Humanized antibodies that bind lgr5
EP3129478B1 (en) 2014-04-10 2019-03-27 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
WO2015157567A1 (en) 2014-04-10 2015-10-15 10X Genomics, Inc. Fluidic devices, systems, and methods for encapsulating and partitioning reagents, and applications of same
BR112016023188A2 (pt) 2014-04-11 2018-01-16 Novozymes As uso de um polipeptídeo, composição detergente, métodos de lavagem para a lavagem de um item e de produção do polipeptídeo, polipeptídeo isolado, construção de ácido nucleico ou vetor de expressão, célula hospedeira recombinante, e, formulação de caldo inteiro ou composição de cultura de células
CN106715465B (zh) 2014-04-15 2021-10-08 诺维信公司 具有脂肪酶活性的多肽和编码它们的多核苷酸
WO2015161019A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Codexis, Inc. Engineered tyrosine ammonia lyase
EP3132039B1 (en) 2014-04-17 2019-07-24 Boehringer Ingelheim RCV GmbH & Co KG Recombinant host cell for expressing proteins of interest
BR112016023304A2 (pt) 2014-04-17 2017-10-17 Boehringer Ingelheim Rcv Gmbh célula hospedeira recombinante engendrada para superexpressar proteínas auxiliares
WO2015164457A1 (en) 2014-04-22 2015-10-29 E. I. Du Pont De Nemours And Company Plastidic carbonic anhydrase genes for oil augmentation in seeds with increased dgat expression
WO2015171603A1 (en) 2014-05-06 2015-11-12 Two Blades Foundation Methods for producing plants with enhanced resistance to oomycete pathogens
EP3139745B8 (en) 2014-05-09 2020-08-26 Board of Supervisors of Louisiana State University And Agricultural and Mechanical College Vaccines against genital herpes simplex infections
US20170058235A1 (en) 2014-05-15 2017-03-02 Novozymes A/S Compositions Comprising Polypeptides Having Phospholipase C Activity and Use Thereof
EP3760713A3 (en) 2014-05-27 2021-03-31 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
CA2950273C (en) 2014-05-30 2022-06-21 Novozymes A/S Variants of gh family 11 xylanase and polynucleotides encoding same
EP2952584A1 (en) 2014-06-04 2015-12-09 Boehringer Ingelheim RCV GmbH & Co KG Improved protein production
US20170121695A1 (en) 2014-06-12 2017-05-04 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
WO2015189816A1 (en) 2014-06-13 2015-12-17 Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research New treatment against influenza virus
ES2694296T3 (es) 2014-06-17 2018-12-19 Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) Anticuerpos monoclonales anti-pVHL y usos de los mismos
US10562946B2 (en) 2014-06-20 2020-02-18 Genentech, Inc. Chagasin-based scaffold compositions, methods, and uses
WO2015200659A1 (en) 2014-06-25 2015-12-30 Novozymes A/S Xylanase variants and polynucleotides encoding same
EP3160991A2 (en) 2014-06-25 2017-05-03 Novartis AG Compositions and methods for long acting proteins
WO2015198243A2 (en) 2014-06-25 2015-12-30 Novartis Ag Compositions and methods for long acting proteins
JP2017526046A (ja) 2014-06-26 2017-09-07 １０エックス ゲノミクス，インコーポレイテッド 核酸配列アセンブルのプロセス及びシステム
MX2016016904A (es) 2014-06-26 2017-03-27 10X Genomics Inc Analisis de secuencias de acidos nucleicos.
US12312640B2 (en) 2014-06-26 2025-05-27 10X Genomics, Inc. Analysis of nucleic acid sequences
CN113249435B (zh) 2014-06-26 2024-09-03 10X基因组学有限公司 分析来自单个细胞或细胞群体的核酸的方法
WO2016001319A1 (en) 2014-07-03 2016-01-07 Novozymes A/S Improved stabilization of non-protease enzyme
CN106661566A (zh) 2014-07-04 2017-05-10 诺维信公司 枯草杆菌酶变体以及编码它们的多核苷酸
EP3739029A1 (en) 2014-07-04 2020-11-18 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
US9708587B2 (en) 2014-07-09 2017-07-18 Codexis, Inc. P450-BM3 variants with improved activity
US10786578B2 (en) 2014-08-05 2020-09-29 Novartis Ag CKIT antibody drug conjugates
MA40094B1 (fr) 2014-08-06 2022-05-31 Univ Miami Protéines de fusion de l'interleukine-2/récepteur alpha de l'interleukine-2 et procédés d'utilisation
WO2016020880A2 (en) 2014-08-07 2016-02-11 Novartis Ag Angiopoietin-like 4 antibodies and methods of use
WO2016020882A2 (en) 2014-08-07 2016-02-11 Novartis Ag Angiopoetin-like 4 (angptl4) antibodies and methods of use
CA2955828A1 (en) 2014-08-08 2016-02-11 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Ubiquitin promoters and introns and methods of use
KR20170040249A (ko) 2014-08-12 2017-04-12 노파르티스 아게 항-cdh6 항체 약물 접합체
EP3183339A1 (en) 2014-08-20 2017-06-28 Novozymes A/S Xyloglucan endotransglycosylase variants and polynucleotides encoding same
JP6594955B2 (ja) 2014-08-27 2019-10-23 ニユー・イングランド・バイオレイブス・インコーポレイテツド シントン形成
US9963687B2 (en) 2014-08-27 2018-05-08 New England Biolabs, Inc. Fusion polymerase and method for using the same
EP3594335B1 (en) 2014-09-05 2024-05-01 Novozymes A/S Carbohydrate binding module variants and polynucleotides encoding same
US9732373B2 (en) 2014-09-11 2017-08-15 Promega Corporation Luciferase sequences utilizing infrared-emitting substrates to produce enhanced luminescence
CN108064129A (zh) 2014-09-12 2018-05-22 纳幕尔杜邦公司 玉米和大豆中复合性状基因座的位点特异性整合位点的产生和使用方法
US20170298360A1 (en) 2014-09-24 2017-10-19 Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research Lats and breast cancer
WO2016048891A1 (en) 2014-09-26 2016-03-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Wheat ms1 polynucleotides, polypeptides, and mehtods of use
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
CN106715691B (zh) * 2014-10-14 2020-06-02 深圳华大智造科技有限公司 一种转座酶打断核酸并加接头的方法和试剂
CA2963558C (en) 2014-10-16 2023-04-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
CN106852153B (zh) 2014-10-16 2023-06-06 先锋国际良种公司 具有广谱活性的杀昆虫多肽和其用途
RU2737538C2 (ru) 2014-10-16 2020-12-01 Пайонир Хай-Бред Интернэшнл, Инк. Инсектицидные полипептиды, обладающие улучшенным спектром активности, и их применения
GB201418713D0 (en) 2014-10-21 2014-12-03 Kymab Ltd Bindings Proteins
WO2016062875A2 (en) 2014-10-23 2016-04-28 Novozymes A/S Glucoamylase variants and polynucleotides encoding same
EP3172329A1 (en) 2014-10-24 2017-05-31 Danisco US Inc. Method for producing alcohol by use of a tripeptidyl peptidase
WO2016062855A1 (en) 2014-10-24 2016-04-28 Dupont Nutrition Biosciences Aps Proline tolerant tripeptidyl peptidases and uses thereof
MX2017005267A (es) 2014-10-29 2017-07-26 10X Genomics Inc Metodos y composiciones para la secuenciacion de acidos nucleicos seleccionados como diana.
BR112017009320A2 (pt) 2014-11-04 2017-12-19 Novozymes As ração animal ou aditivo de ração animal, uso de ração animal ou aditivo de ração animal, e, métodos para preparação de uma ração animal, para melhoria do valor nutricional de uma ração animal, para tratamento de proteínas aumento da digestibilidade e/ou solubilidade da proteína, para melhoria de um ou mais parâmetros de desempenho em um animal e para produção de um polipeptídeo.
US9975122B2 (en) 2014-11-05 2018-05-22 10X Genomics, Inc. Instrument systems for integrated sample processing
WO2016073610A1 (en) 2014-11-07 2016-05-12 Novozymes A/S Xylanase based bleach boosting
WO2016075670A1 (en) 2014-11-14 2016-05-19 Novartis Ag Antibody drug conjugates
US10287562B2 (en) 2014-11-20 2019-05-14 Novoszymes A/S Alicyclobacillus variants and polynucleotides encoding same
DK3224354T3 (da) 2014-11-25 2021-03-01 Codexis Inc Manipulerede iminreductaser og fremgangsmåder til den reduktive aminering af keton- og aminforbindelser
WO2016087327A1 (en) 2014-12-01 2016-06-09 Novozymes A/S Polypeptides having pullulanase activity comprising the x25, x45 and cbm41 domains
EP3227438B1 (en) 2014-12-02 2024-03-27 Novozymes A/S Laccase variants and polynucleotides encoding same
WO2016087619A1 (en) 2014-12-04 2016-06-09 Novozymes A/S Liquid cleaning compositions comprising protease variants
CN107075493B (zh) 2014-12-04 2020-09-01 诺维信公司 枯草杆菌酶变体以及编码它们的多核苷酸
EP4067485A3 (en) 2014-12-05 2023-01-04 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
PL3333191T3 (pl) 2014-12-11 2021-05-04 Pierre Fabre Médicament Przeciwciała przeciwko c10orf54 i ich zastosowania
MA41142A (fr) 2014-12-12 2017-10-17 Amgen Inc Anticorps anti-sclérostine et utilisation de ceux-ci pour traiter des affections osseuses en tant qu'élements du protocole de traitement
BR112017012362A2 (pt) 2014-12-12 2018-07-31 Syngenta Participations Ag composições e métodos para controle de pragas de plantas.
US20170369902A1 (en) 2014-12-16 2017-12-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Restoration of male fertility in wheat
WO2016096996A1 (en) 2014-12-16 2016-06-23 Novozymes A/S Polypeptides having n-acetyl glucosamine oxidase activity
MX383142B (es) 2014-12-19 2025-03-13 Novozymes As Composiciones que comprenden polipéptidos que tienen actividad xilanasa y polipéptidos que tienen actividad arabinofuranosidasa.
WO2016100910A1 (en) 2014-12-19 2016-06-23 Novozymes A/S Recombinant host cells for the production of 3-hydroxypropionic acid
UY36449A (es) 2014-12-19 2016-07-29 Novartis Ag Composiciones y métodos para anticuerpos dirigidos a bmp6
CN118497177A (zh) 2014-12-19 2024-08-16 诺维信公司 蛋白酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
EP3234093B1 (en) 2014-12-19 2020-05-27 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
FI3237621T3 (fi) 2014-12-22 2023-06-01 Codexis Inc Ihmisen alfa-galaktosidaasivariantteja
SG11201705615UA (en) 2015-01-12 2017-08-30 10X Genomics Inc Processes and systems for preparing nucleic acid sequencing libraries and libraries prepared using same
EP3245605B1 (en) 2015-01-13 2022-04-20 10X Genomics, Inc. Systems and methods for visualizing structural variation and phasing information
CN107635396B (zh) 2015-01-15 2021-12-24 先锋国际良种公司 杀昆虫蛋白及其使用方法
EP3262062A1 (en) 2015-02-04 2018-01-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Novel bt toxin receptors and methods of use
EP4147575A1 (en) 2015-02-09 2023-03-15 BioConsortia, Inc. Agriculturally beneficial microbes, microbial compositions, and consortia
WO2016130578A1 (en) 2015-02-09 2016-08-18 10X Genomics, Inc. Systems and methods for determining structural variation and phasing using variant call data
WO2016130412A1 (en) 2015-02-10 2016-08-18 Codexis, Inc. Ketoreductase polypeptides for the synthesis of chiral compounds
AU2016217852B2 (en) 2015-02-12 2019-01-17 Dsm Ip Assets B.V. A method for improving feed digestibility in bovine animals
DK3739045T3 (da) 2015-02-24 2024-10-21 Novozymes As Cellobiohydrolasevarianter og polynukleotider, som koder for dem
EP4286516A3 (en) 2015-02-24 2024-03-06 10X Genomics, Inc. Partition processing methods and systems
BR112017018054A2 (pt) 2015-02-24 2018-07-24 10X Genomics Inc métodos para a cobertura de sequências de ácidos nucleicos direcionadas
WO2016138315A1 (en) 2015-02-25 2016-09-01 Danisco Us Inc Alpha-glucosidase, compositions & methods
WO2016138303A1 (en) 2015-02-27 2016-09-01 Novozymes A/S Mutant host cells for the production of 3-hydroxypropionic acid
MX2017011194A (es) 2015-03-03 2018-04-10 Kymab Ltd Anticuerpos, usos y métodos.
US10266863B2 (en) 2015-03-11 2019-04-23 Genencor International B.V. Enzymatic activity of lytic polysaccharide monooxygenase
CN107529763B (zh) 2015-03-11 2021-08-20 先锋国际良种公司 Pip-72的杀昆虫组合及使用方法
EP3842451A1 (en) 2015-03-12 2021-06-30 MedImmune, LLC Method of purifying albumin-fusion proteins
EP3070103A1 (en) 2015-03-19 2016-09-21 Institut Hospitalier Universitaire De Strasbourg Anti-Claudin 1 monoclonal antibodies for the prevention and treatment of hepatocellular carcinoma
WO2016149352A1 (en) 2015-03-19 2016-09-22 Pioneer Hi-Bred International Inc Methods and compositions for accelerated trait introgression
WO2016146473A1 (en) 2015-03-19 2016-09-22 Novozymes A/S A brewing method
CN107667177A (zh) 2015-04-07 2018-02-06 诺维信公司 用于选择具有增强活性的酶的方法
CN107864658A (zh) 2015-04-07 2018-03-30 诺维信公司 用于选择具有脂肪酶活性的酶的方法
WO2016162556A1 (en) 2015-04-10 2016-10-13 Novozymes A/S Laundry method, use of dnase and detergent composition
EP3280800A1 (en) 2015-04-10 2018-02-14 Novozymes A/S Detergent composition
EP3283504A1 (en) 2015-04-17 2018-02-21 Agbiome, Inc. Pesticidal genes and methods of use
AU2016252027B9 (en) 2015-04-22 2022-07-14 AgBiome, Inc. Insecticidal genes and methods of use
CN104805508B (zh) * 2015-04-29 2017-07-14 江南大学 一种基于合成单链dna文库进化代谢途径的方法
EP3292205B1 (en) 2015-05-06 2023-08-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Methods and compositions for the production of unreduced, non-recombined gametes and clonal offspring
AU2016258091B2 (en) 2015-05-07 2020-10-01 Codexis, Inc. Penicillin-G acylases
US20180142224A1 (en) 2015-05-08 2018-05-24 Novozymes A/S Alpha-amylase variants having improved performance and stability
WO2016180749A1 (en) 2015-05-08 2016-11-17 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
CA2981409A1 (en) 2015-05-08 2016-11-17 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
CN107709564B (zh) 2015-05-09 2021-11-02 双刃基金会 来自少花龙葵的抗晚疫病基因及使用方法
CN116333064A (zh) 2015-05-19 2023-06-27 先锋国际良种公司 杀昆虫蛋白及其使用方法
EP3297661B1 (en) 2015-05-21 2021-06-30 Full Spectrum Genetics, Inc. Method of improving characteristics of proteins
CN116676293A (zh) 2015-05-27 2023-09-01 国投生物科技投资有限公司 具有纤维二糖水解酶活性的多肽以及对其进行编码的多核苷酸
WO2016196202A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
CN114805503A (zh) 2015-06-03 2022-07-29 农业生物群落股份有限公司 杀虫基因和使用方法
WO2016193420A1 (en) 2015-06-04 2016-12-08 Novozymes A/S Use of m4 metalloprotease in wort production
CA2982237A1 (en) 2015-06-05 2016-12-08 Novartis Ag Antibodies targeting bone morphogenetic protein 9 (bmp9) and methods therefor
CN108012543B (zh) 2015-06-16 2022-01-04 诺维信公司 具有脂肪酶活性的多肽和编码它们的多核苷酸
EP3310813A1 (en) 2015-06-17 2018-04-25 Novartis AG Antibody drug conjugates
EP3310921B8 (en) 2015-06-17 2023-03-15 Corteva Agriscience LLC Plant regulatory elements and methods of use thereof
CN108012544A (zh) 2015-06-18 2018-05-08 诺维信公司 枯草杆菌酶变体以及编码它们的多核苷酸
US10676727B2 (en) 2015-06-18 2020-06-09 Novozymes A/S Polypeptides having trehalase activity and the use thereof in process of producing fermentation products
EP3106508B1 (en) 2015-06-18 2019-11-20 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising subtilase variants
BR112017027821A2 (pt) 2015-06-22 2019-05-14 AgBiome, Inc. genes pesticidas e métodos de uso
ES2879249T3 (es) 2015-06-24 2021-11-22 Genencor Int Bv Polipéptidos que tienen actividad de desmetilación
US10851399B2 (en) 2015-06-25 2020-12-01 Native Microbials, Inc. Methods, apparatuses, and systems for microorganism strain analysis of complex heterogeneous communities, predicting and identifying functional relationships and interactions thereof, and selecting and synthesizing microbial ensembles based thereon
US10632157B2 (en) 2016-04-15 2020-04-28 Ascus Biosciences, Inc. Microbial compositions and methods of use for improving fowl production
MX388995B (es) 2015-06-25 2025-03-20 Native Microbials Inc Métodos, aparatos y sistemas para analizar cepas de microorganismos de comunidades heterogéneas complejas, predecir e indentificar sus relaciones funcionales e interacciones y seleccionar y sintetizar conjuntos microbianos basados en estos.
WO2017120495A1 (en) 2016-01-07 2017-07-13 Ascus Biosciences, Inc. Methods for improving milk production by administration of microbial consortia
US9938558B2 (en) 2015-06-25 2018-04-10 Ascus Biosciences, Inc. Methods, apparatuses, and systems for analyzing microorganism strains from complex heterogeneous communities, predicting and identifying functional relationships and interactions thereof, and selecting and synthesizing microbial ensembles based thereon
EP3313990A4 (en) 2015-06-26 2019-01-23 Novozymes A/S BIO-finishing system
UY36751A (es) 2015-06-26 2017-01-31 Novartis Ag Anticuerpos de factor xi y métodos de uso
WO2016207373A1 (en) 2015-06-26 2016-12-29 Novozymes A/S Polypeptides having peroxygenase activity
BR112017028063B1 (pt) 2015-06-26 2022-05-17 Novozymes A/S Método para produção de um extrato de café
EP3314004A1 (en) 2015-06-26 2018-05-02 DuPont Nutrition Biosciences ApS Aminopeptidases for protein hydrolyzates
CN107922930A (zh) 2015-07-01 2018-04-17 诺维信公司 减少气味的方法
AU2016286612B2 (en) 2015-07-02 2021-01-28 Novozymes A/S Animal feed compositions and uses thereof
CN107969136B (zh) 2015-07-06 2021-12-21 诺维信公司 脂肪酶变体以及编码它们的多核苷酸
CA2991195C (en) 2015-07-07 2021-06-29 Codexis, Inc. Novel p450-bm3 variants with improved activity
BR112018001041A2 (pt) 2015-07-24 2018-09-11 Novozymes Inc polipeptídeo isolado, composição, formulação de caldo inteiro ou composição de cultura de células, célula hospedeira recombinante, métodos para produção de um polipeptídeo e para produção de uma proteína, planta, parte de planta ou célula de planta transgênica, e, processos para degradação de um material celulósico ou hemicelulósico, para produção de um produto de fermentação e para fermentação de um material celulósico ou hemicelulósico.
US20180216089A1 (en) 2015-07-24 2018-08-02 Novozymes, Inc. Polypeptides Having Beta-Xylosidase Activity And Polynucleotides Encoding Same
BR112018001522A2 (pt) 2015-07-25 2018-10-09 Bioconsortia Inc micróbios agricolamente benéficos, composições microbianas e consórcios
CA3185706C (en) 2015-08-03 2025-11-18 Novartis Ag METHOD FOR TREATMENT OF DISORDERS ASSOCIATED WITH FGF21
CA3268091A1 (en) 2015-08-06 2026-03-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Plant derived insecticidal proteins and methods for their use
WO2017029407A1 (en) 2015-08-20 2017-02-23 Albumedix A/S Albumin variants and conjugates
US20180265902A1 (en) 2015-08-24 2018-09-20 Novozymes A/S Beta-Alanine Aminotransferases For The Production of 3-Hydroxypropionic Acid
WO2017044609A1 (en) 2015-09-08 2017-03-16 Cold Spring Harbor Laboratory Genetic copy number determination using high throughput multiplex sequencing of smashed nucleotides
JP6516925B2 (ja) 2015-09-09 2019-05-22 ノバルティス アーゲー 胸腺間質性リンパ球新生因子（ｔｓｌｐ）結合性抗体および抗体を使用する方法
TWI799366B (zh) 2015-09-15 2023-04-21 美商建南德克公司 胱胺酸結骨架平臺
WO2017050722A1 (en) 2015-09-22 2017-03-30 Genia Technologies, Inc. Ompg variants
CN108350044B (zh) 2015-09-22 2022-05-24 诺维信公司 具有纤维二糖水解酶活性的多肽以及对其进行编码的多核苷酸
EA201890790A1 (ru) 2015-09-29 2018-10-31 Селджин Корпорейшн Связывающие pd-1 белки и способы их применения
EP3763818A1 (en) 2015-10-06 2021-01-13 Pierce Biotechnology, Inc. Devices and methods for producing proteins
CN116064474A (zh) 2015-10-07 2023-05-05 诺维信公司 多肽
WO2017062790A1 (en) 2015-10-09 2017-04-13 Two Blades Foundation Cold shock protein receptors and methods of use
US10494685B2 (en) 2015-10-14 2019-12-03 Novozymes A/S Glucoamylase variants and polynucleotides encoding same
US10479981B2 (en) 2015-10-14 2019-11-19 Novozymes A/S DNase variants
JP2018531783A (ja) 2015-10-14 2018-11-01 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 水濾過膜の洗浄
US20180171318A1 (en) 2015-10-14 2018-06-21 Novozymes A/S Polypeptides Having Protease Activity and Polynucleotides Encoding Same
WO2017070219A1 (en) 2015-10-20 2017-04-27 Novozymes A/S Lytic polysaccharide monooxygenase (lpmo) variants and polynucleotides encoding same
WO2017072669A1 (en) 2015-10-28 2017-05-04 Friedrich Miescher Institute For Biomedical Research Tenascin-w and biliary tract cancers
MX388896B (es) 2015-10-28 2025-03-20 Novozymes As Composicion detergente que comprende variantes de amilasa y proteasa.
ITUB20155272A1 (it) 2015-11-02 2017-05-02 Scuola Normale Superiore Intracellular antibody
WO2017079286A1 (en) 2015-11-03 2017-05-11 Two Blades Foundation Wheat stripe rust resistance genes and methods of use
WO2017079026A1 (en) 2015-11-06 2017-05-11 E. I. Du Pont De Nemours And Company Generation of complex trait loci in soybean and methods of use
CN108473974A (zh) 2015-11-24 2018-08-31 诺维信公司 具有蛋白酶活性的多肽以及编码其的多核苷酸
EP3384031A1 (en) 2015-11-30 2018-10-10 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Plant regulatory elements and methods of use thereof
CN108431217B (zh) 2015-12-01 2022-06-21 诺维信公司 用于产生脂肪酶的方法
SG11201804086VA (en) 2015-12-04 2018-06-28 10X Genomics Inc Methods and compositions for nucleic acid analysis
ES2932192T3 (es) 2015-12-07 2023-01-16 Henkel Ag & Co Kgaa Composiciones para el lavado de vajilla que comprenden polipéptidos que tienen actividad beta-glucanasa y sus usos
JP6821598B2 (ja) 2015-12-07 2021-01-27 ザイマージェン インコーポレイテッド Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ由来のプロモーター
JP6605042B2 (ja) 2015-12-07 2019-11-13 ザイマージェン インコーポレイテッド Ｈｔｐゲノム操作プラットフォームによる微生物株の改良
US9988624B2 (en) 2015-12-07 2018-06-05 Zymergen Inc. Microbial strain improvement by a HTP genomic engineering platform
US10035995B2 (en) 2015-12-07 2018-07-31 Eastman Chemical Company CALB variants
US11208649B2 (en) 2015-12-07 2021-12-28 Zymergen Inc. HTP genomic engineering platform
WO2017105987A1 (en) 2015-12-18 2017-06-22 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
EP3389711A1 (en) 2015-12-18 2018-10-24 Novartis AG Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
EP3394268B1 (en) 2015-12-22 2023-07-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Tissue-preferred promoters and methods of use
EP3394243A1 (en) 2015-12-22 2018-10-31 Albumedix Ltd. Improved protein expression strains
BR112018012893A2 (pt) 2015-12-22 2018-12-04 AgBiome, Inc. genes pesticidas e métodos de uso
JP7146637B2 (ja) 2015-12-22 2022-10-04 アルブミディクス リミティド 改善されたタンパク質発現株
JP7626576B2 (ja) 2015-12-30 2025-02-07 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 酵素変異体およびこれをコードするポリヌクレオチド
WO2017125897A1 (en) 2016-01-21 2017-07-27 Novartis Ag Multispecific molecules targeting cll-1
MX2018008051A (es) 2016-01-29 2018-08-23 Novozymes As Variantes de beta-glucanasa y polinucleotidos que las codifican.
JP6735348B2 (ja) 2016-02-11 2020-08-05 １０エックス ジェノミクス， インコーポレイテッド 全ゲノム配列データのデノボアセンブリのためのシステム、方法及び媒体
GB201602535D0 (en) 2016-02-12 2016-03-30 Univ Edinburgh Improved flu vaccine yield
US11685911B2 (en) 2016-02-16 2023-06-27 Monaghan Mushroom S Group Fungal polypeptides having lysozyme activity
DK3419992T3 (da) 2016-02-22 2021-02-15 Danisco Us Inc Svampesystem til proteinproduktion med højt udbytte
US10988749B2 (en) 2016-02-23 2021-04-27 Da Volterra Beta-lactamase variants
BR112018016889A2 (pt) 2016-02-23 2019-02-12 Da Volterra variantes de beta-lactamase
US20210120845A1 (en) 2016-02-25 2021-04-29 Dupont Nutrition Biosciences Aps Method for producing a protein hydrolysate employing an aspergillus fumigatus tripeptidyl peptidase
WO2017148862A1 (en) 2016-02-29 2017-09-08 Genia Technologies, Inc. Polymerase variants
US10738293B2 (en) 2016-03-02 2020-08-11 Novozymes A/S Cellobiohydrolase variants and polynucleotides encoding same
GB201604124D0 (en) 2016-03-10 2016-04-27 Ucb Biopharma Sprl Pharmaceutical formulation
EP3432925A4 (en) 2016-03-22 2019-11-06 Bionomics Limited ADMINISTRATION OF A MONOCLONAL ANTI-LGR5 ANTIBODY
DK3433358T3 (da) 2016-03-24 2022-09-26 Novozymes As Cellobiohydrolasevarianter og polynukleotider, der koder for dem
US9988641B2 (en) 2016-04-05 2018-06-05 Corn Products Development, Inc. Compositions and methods for producing starch with novel functionality
EP3440207A1 (en) 2016-04-07 2019-02-13 Novozymes A/S Methods for selecting enzymes having protease activity
CN108699117B (zh) 2016-04-14 2023-06-23 先锋国际良种公司 具有改善的活性谱的杀昆虫多肽及其用途
CN116474004A (zh) 2016-04-15 2023-07-25 原生微生物股份有限公司 通过施用微生物聚生体或其纯化菌株来提高禽类的农业生产的方法
CA3021391A1 (en) 2016-04-19 2017-10-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal combinations of polypeptides having improved activity spectrum and uses thereof
WO2017189724A1 (en) 2016-04-27 2017-11-02 Novartis Ag Antibodies against growth differentiation factor 15 and uses thereof
CA3022497A1 (en) 2016-04-29 2017-11-02 Defensin Therapeutics Aps Treatment of liver, biliary tract and pancreatic disorders
EP3693449A1 (en) 2016-04-29 2020-08-12 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
EP3452497B1 (en) 2016-05-03 2021-02-17 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding the same
MX387077B (es) 2016-05-04 2025-03-19 Pioneer Hi Bred Int Proteinas insecticidas y metodos para sus usos.
SG11201808957UA (en) 2016-05-05 2018-11-29 Codexis Inc Penicillin-g acylases
EP3455352B1 (en) 2016-05-09 2026-03-18 Novozymes A/S Variant polypeptides with improved performance and use of the same
WO2017197343A2 (en) 2016-05-12 2017-11-16 10X Genomics, Inc. Microfluidic on-chip filters
WO2017197338A1 (en) 2016-05-13 2017-11-16 10X Genomics, Inc. Microfluidic systems and methods of use
EP3246401A1 (en) 2016-05-20 2017-11-22 Commissariat À L'Énergie Atomique Et Aux Énergies Alternatives New fatty acid decarboxylase and its uses
DK3462904T3 (da) 2016-05-24 2025-01-02 Novozymes As Polypeptider med alfa-galactosidaseaktivitet og polynukleotider, der koder for samme
CN109312321A (zh) 2016-05-24 2019-02-05 诺维信公司 包含具有半乳聚糖酶活性的多肽和具有β-半乳糖苷酶活性的多肽的组合物
BR112018073875A2 (pt) 2016-05-24 2019-02-26 Novozymes As polipeptídeo isolado, composição, grânulo, aditivo de ração animal, formulação líquida, ração animal, métodos para liberar galactose de material à base de planta, para melhorar um ou mais parâmetros de desempenho de um animal e o valor nutricional de uma ração animal, para preparar uma ração animal e para produzir o polipeptídeo, uso, polinucleotídeo, construto de ácido nucleico ou vetor de expressão, e, célula hospedeira recombinante.
WO2017202997A1 (en) 2016-05-24 2017-11-30 Novozymes A/S Compositions comprising polypeptides having galactanase activity and polypeptides having beta-galactosidase activity
TW201802121A (zh) 2016-05-25 2018-01-16 諾華公司 抗因子XI/XIa抗體之逆轉結合劑及其用途
WO2017205535A1 (en) 2016-05-27 2017-11-30 Novozymes, Inc. Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
WO2017210188A1 (en) 2016-05-31 2017-12-07 Novozymes A/S Stabilized liquid peroxide compositions
CN109715792A (zh) 2016-06-03 2019-05-03 诺维信公司 枯草杆菌酶变体和对其进行编码的多核苷酸
WO2017211803A1 (en) 2016-06-07 2017-12-14 Novozymes A/S Co-expression of heterologous polypeptides to increase yield
IL263448B2 (en) 2016-06-09 2023-10-01 Codexis Inc Biological catalysts and methods for hydroxylation of chemical compounds
JP2019517801A (ja) 2016-06-15 2019-06-27 コデクシス， インコーポレイテッド 操作されたβ−グルコシダーゼおよびグルコシル化方法
EP3471759A1 (en) 2016-06-15 2019-04-24 Novartis AG Methods for treating disease using inhibitors of bone morphogenetic protein 6 (bmp6)
WO2017215790A1 (en) 2016-06-17 2017-12-21 National Hellenic Research Foundation Systems for recombinant protein production
ES2924552T3 (es) 2016-06-24 2022-10-07 Pioneer Hi Bred Int Elementos reguladores de las plantas y métodos de uso de los mismos
EP3478827B1 (en) 2016-06-30 2024-06-19 Novozymes A/S Lipase variants and compositions comprising surfactant and lipase variant
JP2019519241A (ja) 2016-06-30 2019-07-11 ザイマージェン インコーポレイテッド グルコース透過酵素ライブラリーを生成するための方法およびその使用
EP3478833A4 (en) 2016-06-30 2019-10-02 Zymergen, Inc. METHOD FOR PRODUCING A BACTERIAL HEMOGLOBIN LIBRARY AND ITS USE
WO2018002379A2 (en) 2016-07-01 2018-01-04 Novozymes A/S Enzymatic preparation of indigo dyes and in situ dyeing process
CA3026113A1 (en) 2016-07-01 2018-01-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins from plants and methods for their use
WO2018002261A1 (en) 2016-07-01 2018-01-04 Novozymes A/S Detergent compositions
WO2018007435A1 (en) 2016-07-05 2018-01-11 Novozymes A/S Pectate lyase variants and polynucleotides encoding same
CN109415710A (zh) 2016-07-08 2019-03-01 诺维信公司 木聚糖酶变体和对其编码的多核苷酸
WO2018007573A1 (en) 2016-07-08 2018-01-11 Novozymes A/S Detergent compositions with galactanase
BR112019000125A2 (pt) 2016-07-08 2019-07-09 Novozymes As grânulo, polipeptídeo isolado, composição, aditivo de ração animal, ração animal peletizada, métodos de aprimoramento de um ou mais parâmetros de desempenho de um animal, de preparação de uma ração animal, para aprimorar o valor nutricional de uma ração animal, de solubilização de xilana a partir do material à base de planta e de produção do polipeptídeo, polinucleotídeo, construto de ácido nucleico ou vetor de expressão, célula hospedeira recombinante, e, uso do grânulo
ES3000090T3 (en) 2016-07-13 2025-02-27 Procter & Gamble Bacillus cibi dnase variants and uses thereof
EP3485008B1 (en) 2016-07-18 2024-01-31 Novozymes A/S Lipase variants, polynucleotides encoding same and the use thereof
WO2018017792A1 (en) 2016-07-20 2018-01-25 Novozymes A/S Heat-stable metagenomic carbonic anhydrases and their use
CA3028875A1 (en) 2016-07-21 2018-01-25 Novozymes A/S Serine protease variants and polynucleotides encoding same
MX2019000743A (es) 2016-07-21 2019-05-20 Novozymes As Variantes de serinproteasa y polinucleotidos que las codifican.
WO2018015444A1 (en) 2016-07-22 2018-01-25 Novozymes A/S Crispr-cas9 genome editing with multiple guide rnas in filamentous fungi
WO2018026868A1 (en) 2016-08-01 2018-02-08 Novozymes, Inc. Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
CA3031609A1 (en) 2016-08-24 2018-03-01 Novozymes A/S Gh9 endoglucanase variants and polynucleotides encoding same
US10988747B2 (en) 2016-08-24 2021-04-27 Henkel Ag & Co. Kgaa Detergent composition comprising GH9 endoglucanase variants I
KR102483218B1 (ko) 2016-08-24 2023-01-02 헨켈 아게 운트 코. 카게아아 크산탄 리아제 변이체 i을 포함하는 세제 조성물
US11512300B2 (en) 2016-08-24 2022-11-29 Novozymes A/S Xanthan lyase variants and polynucleotides encoding same
WO2018038906A1 (en) 2016-08-26 2018-03-01 Codexis, Inc. Engineered imine reductases and methods for the reductive amination of ketone and amine compounds
EP4219528A3 (en) 2016-09-06 2023-09-13 AgBiome, Inc. Pesticidal genes and methods of use
EP3509616A1 (en) 2016-09-09 2019-07-17 H. Hoffnabb-La Roche Ag Selective peptide inhibitors of frizzled
CA3037083A1 (en) 2016-09-16 2018-03-22 Dupont Nutrition Biosciences Aps Acetolactate decarboxylase variants having improved specific activity
EP3515943A4 (en) 2016-09-19 2020-05-06 Celgene Corporation METHODS OF TREATING VITILIGO WITH PD-1 BINDING PROTEINS
BR112019004733A2 (pt) 2016-09-19 2019-05-28 Celgene Corp métodos de tratamento de distúrbios imunes usando proteínas de ligação a pd-1
SG10201913280UA (en) 2016-09-20 2020-03-30 22Nd Century Limited Llc Trichome specific promoters for the manipulation of cannabinoids and other compounds in glandular trichomes
CN109996859B (zh) 2016-09-29 2021-11-30 诺维信公司 含孢子的颗粒
CN110035662B (zh) 2016-09-30 2022-09-30 美国陶氏益农公司 二元杀虫cry毒素
EP3532592A1 (en) 2016-10-25 2019-09-04 Novozymes A/S Detergent compositions
MX387927B (es) 2016-11-01 2025-03-19 Pioneer Hi Bred Int Proteinas insecticidas y metodos para su uso.
WO2018085370A1 (en) 2016-11-02 2018-05-11 Novozymes A/S Processes for reducing production of primeverose during enzymatic saccharification of lignocellulosic material
EP3534947A1 (en) 2016-11-03 2019-09-11 Kymab Limited Antibodies, combinations comprising antibodies, biomarkers, uses & methods
KR102709829B1 (ko) 2016-11-11 2024-09-24 바이오 래드 래버러토리스 인코오포레이티드 핵산 샘플을 프로세싱하는 방법
CN110168102A (zh) * 2016-11-15 2019-08-23 基因组影像公司 利用分子梳理监测经修饰的核酸酶诱导的基因编辑事件的方法
US20210284991A1 (en) 2016-11-21 2021-09-16 Novozymes A/S Yeast Cell Extract Assisted Construction of DNA Molecules
WO2018098124A1 (en) 2016-11-23 2018-05-31 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
CA3043493A1 (en) 2016-11-23 2018-05-31 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Axmi669 and axmi991 toxin genes and methods for their use
EP3548615A1 (en) 2016-11-29 2019-10-09 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
CA3045071A1 (en) 2016-11-30 2018-06-07 Novozymes A/S Method of baking
CN110168095A (zh) 2016-12-06 2019-08-23 诺维信公司 用于使用工程化酵母菌株从含有木糖的纤维素基质生产乙醇的改善方法
CN110290799A (zh) 2016-12-13 2019-09-27 防御素治疗学公司 用于治疗肺部炎性病症的方法
EP3555118B1 (en) 2016-12-14 2021-08-18 Pioneer Hi-Bred International Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
WO2018112356A1 (en) 2016-12-16 2018-06-21 Two Blades Foundation Late blight resistance genes and methods of use
EP3559234B1 (en) 2016-12-20 2021-10-27 Novozymes A/S Recombinant yeast strains for pentose fermentation
BR112019012107B1 (pt) 2016-12-20 2023-03-14 Colgate-Palmolive Company Composição para higiene bucal e método para clarear dentes
AU2017379733B2 (en) 2016-12-20 2020-08-27 Colgate-Palmolive Company Two-phase oral care whitening compositions
US10413500B2 (en) 2016-12-20 2019-09-17 Colgate-Palmolive Company Oral care compositions and methods for whitening teeth
AU2017380488B2 (en) 2016-12-21 2023-09-14 Novozymes A/S Polypeptides having lysozyme activity, polynucleotides encoding same and uses and compositions thereof
US10550429B2 (en) 2016-12-22 2020-02-04 10X Genomics, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
US10011872B1 (en) 2016-12-22 2018-07-03 10X Genomics, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
WO2018118811A1 (en) 2016-12-22 2018-06-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
US10815525B2 (en) 2016-12-22 2020-10-27 10X Genomics, Inc. Methods and systems for processing polynucleotides
JP2020504609A (ja) 2016-12-22 2020-02-13 ビーエーエスエフ アグリカルチュラル ソリューションズ シード ユーエス エルエルシー 有害線虫の防除のためのｃｒｙ１４の使用
IL267538B2 (en) 2016-12-23 2024-05-01 Novartis Ag Antibodies against factor XI and methods for use in preventing, treating, managing or reducing the risk of thromboembolic disorder or stroke in a patient
CN110325211A (zh) 2016-12-23 2019-10-11 诺华股份有限公司 采用抗因子XI/XIa抗体治疗的方法
JP2020503048A (ja) 2016-12-28 2020-01-30 アスカス バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド トレーサー分析論による複雑な不均一コミュニティの微生物株の解析、その機能的関連性及び相互作用の決定、ならびに微生物アンサンブル（投与される微生物アンサンブル及び接種される微生物アンサンブルを含む）の合成、のための方法、装置、及びシステム
CN110366596A (zh) 2016-12-28 2019-10-22 埃斯库斯生物科技股份公司 用于对复杂异质群落中的完整微生物株系进行分析、确定其功能关系及相互作用以及基于此来识别和合成生物活性改性剂的方法、设备和系统
WO2018129029A1 (en) 2017-01-04 2018-07-12 Immunogen, Inc. Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof
MX2019008096A (es) 2017-01-05 2019-09-04 Codexis Inc Penicilina g acilasas.
BR112019014720A2 (pt) 2017-01-18 2020-04-07 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC métodos para conferir resistência a doença em uma planta e para aumentar o rendimento em uma planta
UY37571A (es) 2017-01-18 2018-08-31 Bayer Cropscience Lp Gen de toxina bp005 y procedimientos para su uso
WO2018140214A1 (en) 2017-01-24 2018-08-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Nematicidal protein from pseudomonas
US12264411B2 (en) 2017-01-30 2025-04-01 10X Genomics, Inc. Methods and systems for analysis
CN110214186B (zh) 2017-01-30 2023-11-24 10X基因组学有限公司 用于基于微滴的单细胞条形编码的方法和系统
WO2018140859A2 (en) 2017-01-30 2018-08-02 AgBiome, Inc. Pesticidal genes and methods of use
CN110234747B (zh) 2017-02-01 2021-11-09 宝洁公司 包含淀粉酶变体的清洁组合物
BR112019015943A2 (pt) 2017-02-01 2020-04-07 Novozymes A/S variantes de alfa-amilase
JOP20190187A1 (ar) 2017-02-03 2019-08-01 Novartis Ag مترافقات عقار جسم مضاد لـ ccr7
KR102905512B1 (ko) 2017-02-03 2025-12-29 테이트 앤드 라일 솔루션스 유에스에이 엘엘씨 조작된 글리코실트랜스퍼라제 및 스테비올 글리코시드 글루코실화 방법
MX2019009371A (es) 2017-02-08 2019-09-23 Pionner Hi Bred Int Inc Combinaciones insecticidas de proteinas insecticidas derivadas de plantas y metodos para su uso.
US10899844B2 (en) 2017-02-08 2021-01-26 Novartis Ag FGF21 mimetic antibodies and uses thereof
AU2018217495B2 (en) 2017-02-13 2021-03-04 Codexis, Inc. Engineered phenylalanine ammonia lyase polypeptides
BR112019017271A2 (pt) 2017-02-20 2020-04-14 Novozymes As enzima lipolítica para uso em panificação
EP3363900A1 (en) * 2017-02-21 2018-08-22 ETH Zurich Evolution-guided multiplexed dna assembly of dna parts, pathways and genomes
WO2018164737A1 (en) 2017-03-07 2018-09-13 Danisco Us Inc. Thermostable glucoamylase and methods of use, thereof
SG11201908079SA (en) 2017-03-29 2019-10-30 Boehringer Ingelheim Rcv Gmbh Recombinant host cell with altered membrane lipid composition
EP3601551A1 (en) 2017-03-31 2020-02-05 Novozymes A/S Polypeptides having rnase activity
WO2018177203A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Novozymes A/S Polypeptides having dnase activity
WO2018177938A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Novozymes A/S Polypeptides having dnase activity
US11053483B2 (en) 2017-03-31 2021-07-06 Novozymes A/S Polypeptides having DNase activity
WO2018185618A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Novartis Ag Anti-cdh6 antibody drug conjugates and anti-gitr antibody combinations and methods of treatment
WO2018185181A1 (en) 2017-04-04 2018-10-11 Novozymes A/S Glycosyl hydrolases
US20200109354A1 (en) 2017-04-04 2020-04-09 Novozymes A/S Polypeptides
US20200109352A1 (en) 2017-04-04 2020-04-09 Novozymes A/S Polypeptide compositions and uses thereof
CN110651048A (zh) 2017-04-11 2020-01-03 诺维信公司 葡糖淀粉酶变体和编码它们的多核苷酸
BR112019021380A2 (pt) 2017-04-11 2020-05-05 AgBiome, Inc. genes pesticidas e métodos de uso
KR102582624B1 (ko) 2017-04-24 2023-09-22 테사로, 인코포레이티드 니라파립의 제조 방법
EP3615552A1 (en) 2017-04-24 2020-03-04 DuPont Nutrition Biosciences ApS Methods and compositions of anti-crispr proteins for use in plants
CA3061133A1 (en) 2017-04-27 2018-11-01 Codexis, Inc. Ketoreductase polypeptides and polynucleotides
US11044924B2 (en) 2017-04-28 2021-06-29 Native Microbials, Inc. Methods for supporting grain intensive and or energy intensive diets in ruminants by administration of a synthetic bioensemble of microbes or purified strains therefor
US11078445B2 (en) 2017-05-05 2021-08-03 Novozymes A/S Compositions comprising lipase and sulfite
US11492605B2 (en) 2017-05-08 2022-11-08 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
WO2018206302A1 (en) 2017-05-08 2018-11-15 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
WO2018206535A1 (en) 2017-05-08 2018-11-15 Novozymes A/S Carbohydrate-binding domain and polynucleotides encoding the same
MX2019013289A (es) 2017-05-08 2020-01-15 Codexis Inc Variantes de ligasa modificadas geneticamente.
MX2019013321A (es) 2017-05-11 2020-02-10 Pioneer Hi Bred Int Proteinas insecticidas y metodos para su uso.
EP3625715A4 (en) 2017-05-19 2021-03-17 10X Genomics, Inc. DATA SET ANALYSIS SYSTEMS AND METHODS
WO2018213796A1 (en) 2017-05-19 2018-11-22 Zymergen Inc. Genomic engineering of biosynthetic pathways leading to increased nadph
EP3630162A1 (en) 2017-05-24 2020-04-08 Novartis AG Antibody-cytokine engrafted proteins and methods of use
WO2018215937A1 (en) 2017-05-24 2018-11-29 Novartis Ag Interleukin-7 antibody cytokine engrafted proteins and methods of use in the treatment of cancer
JOP20190271A1 (ar) 2017-05-24 2019-11-21 Novartis Ag بروتينات مطعّمة بسيتوكين- الجسم المضاد وطرق الاستخدام للاضطرابات المتعلقة بالمناعة
BR112019024556A2 (pt) 2017-05-24 2020-06-23 Novartis Ag Proteínas enxertadas com citocina de anticorpo e métodos para uso no tratamento de câncer
CA3064884A1 (en) 2017-05-26 2018-11-29 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal polypeptides having improved activity spectrum and uses thereof
US10844372B2 (en) 2017-05-26 2020-11-24 10X Genomics, Inc. Single cell analysis of transposase accessible chromatin
CN109526228B (zh) 2017-05-26 2022-11-25 10X基因组学有限公司 转座酶可接近性染色质的单细胞分析
US11091753B2 (en) 2017-05-31 2021-08-17 Novozymes A/S Xylose fermenting yeast strains and processes thereof for ethanol production
WO2018222990A1 (en) 2017-06-02 2018-12-06 Novozymes A/S Improved yeast for ethanol production
KR20200026874A (ko) 2017-06-06 2020-03-11 지머젠 인코포레이티드 대장균 개량을 위한 htp 게놈 공학 플랫폼
KR20200026878A (ko) 2017-06-06 2020-03-11 지머젠 인코포레이티드 균류 균주를 개량하기 위한 htp 게놈 공학 플랫폼
CN110914425B (zh) 2017-06-06 2024-06-25 齐默尔根公司 用于改良刺糖多孢菌的高通量(htp)基因组工程改造平台
EP3635111A1 (en) 2017-06-06 2020-04-15 Zymergen, Inc. High throughput transposon mutagenesis
WO2018224544A1 (en) 2017-06-08 2018-12-13 Novozymes A/S Compositions comprising polypeptides having cellulase activity and amylase activity, and uses thereof in cleaning and detergent compositions
WO2018224035A1 (en) 2017-06-09 2018-12-13 Novozymes A/S Polypeptide, use and method for hydrolysing protein
CN111032682B (zh) 2017-06-14 2024-04-12 科德克希思公司 用于工业生物催化的工程化转氨酶多肽
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
JP7282693B2 (ja) 2017-06-20 2023-05-29 アルブミディクス リミティド 改良されたタンパク質発現株
WO2018234465A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novozymes A/S Xylanase variants and polynucleotides encoding same
US11643642B2 (en) 2017-06-27 2023-05-09 Codexis, Inc. Penicillin-g acylases
ES2908190T3 (es) 2017-06-28 2022-04-28 Novozymes As Polipéptidos con actividad de trehalasa y polinucleótidos que los codifican
CN111417724A (zh) 2017-06-30 2020-07-14 科德克希思公司 T7 rna聚合酶变体
EP3645692B1 (en) 2017-06-30 2025-12-31 Novozymes A/S ENZYMATIC SUSPENSION COMPOSITION
US10793841B2 (en) 2017-06-30 2020-10-06 Codexis, Inc. T7 RNA polymerase variants
US11530413B2 (en) 2017-07-21 2022-12-20 Novartis Ag Compositions and methods to treat cancer
WO2019023222A1 (en) 2017-07-24 2019-01-31 Novozymes A/S GH5 AND GH30 IN WET MILLING
EP3658675A1 (en) 2017-07-28 2020-06-03 Two Blades Foundation Potyvirus resistance genes and methods of use
CN111247164A (zh) 2017-08-03 2020-06-05 农业生物群落股份有限公司 杀有害生物基因及其使用方法
CA3070281A1 (en) 2017-08-08 2019-02-14 Novozymes A/S Polypeptides having trehalase activity and the use thereof in process of producing fermentation products
US11634400B2 (en) 2017-08-19 2023-04-25 University Of Rochester Micheliolide derivatives, methods for their preparation and their use as anticancer and antiinflammatory agents
US20210130744A1 (en) 2017-08-24 2021-05-06 Henkel Ag & Co. Kgaa Detergent composition comprising xanthan lyase variants ii
WO2019038057A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Novozymes A/S VARIANTS OF XANTHANE LYASE AND POLYNUCLEOTIDES ENCODING THE SAME
US11624059B2 (en) 2017-08-24 2023-04-11 Henkel Ag & Co. Kgaa Detergent compositions comprising GH9 endoglucanase variants II
US11525128B2 (en) 2017-08-24 2022-12-13 Novozymes A/S GH9 endoglucanase variants and polynucleotides encoding same
WO2019042971A1 (en) 2017-08-29 2019-03-07 Novozymes A/S BAKERY YEAST EXPRESSING ANTI-RESTORATION / FRESHNESS AMYLASES
EP3676388B1 (en) 2017-08-31 2025-05-21 Novozymes A/S Polypeptides having d-psicose 3-epimerase activity and polynucleotides encoding same
WO2019046703A1 (en) 2017-09-01 2019-03-07 Novozymes A/S METHODS OF ENHANCING GENOME EDITION IN FUNGI
CN111050565A (zh) 2017-09-01 2020-04-21 诺维信公司 包含具有蛋白酶活性的多肽的动物饲料添加剂及其用途
AR112955A1 (es) 2017-09-01 2020-01-08 Novozymes As Aditivos de alimento animal que comprenden polipéptidos que tienen actividad proteasa y usos de los mismos
WO2019052907A2 (en) 2017-09-07 2019-03-21 Total Raffinage Chimie METHOD FOR DETECTING THE HYDROGEN PEROXIDE CONVERSION ACTIVITY OF AN ENZYME
WO2019047199A1 (en) 2017-09-11 2019-03-14 Danisco Us Inc. GLUCOAMYLASE AND METHODS OF USE THEREOF
JP2020536515A (ja) 2017-09-25 2020-12-17 パイオニア ハイ−ブレッド インターナショナル， インコーポレイテッド 組織優先的プロモーター及びその使用方法
BR112020005803A2 (pt) 2017-09-25 2020-12-01 Agrospheres, Inc. composições e métodos para produção e administração moduláveis de produtos biológicos
EP3461892A3 (en) 2017-09-27 2019-06-12 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising lipases
JP7317811B2 (ja) 2017-09-27 2023-07-31 ノボザイムス アクティーゼルスカブ リパーゼ変異体及びかかるリパーゼ変異体を含むマイクロカプセル組成物
WO2019068715A1 (en) 2017-10-02 2019-04-11 Novozymes A/S POLYPEPTIDES HAVING MANNANASE ACTIVITY AND POLYNUCLEOTIDES ENCODING THESE POLYPEPTIDES
US11746310B2 (en) 2017-10-02 2023-09-05 Novozymes A/S Polypeptides having mannanase activity and polynucleotides encoding same
CN111148830A (zh) 2017-10-04 2020-05-12 诺维信公司 具有蛋白酶活性的多肽和编码其的多核苷酸
US20200165626A1 (en) 2017-10-13 2020-05-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Virus-induced gene silencing technology for insect control in maize
CN111970933A (zh) 2017-10-18 2020-11-20 埃斯库斯生物科技股份公司 通过施用微生物或其纯化菌株的合成生物集合体来提高禽类产量
WO2019083818A1 (en) 2017-10-23 2019-05-02 Novozymes A/S IMPROVING EXPRESSION OF PROTEASE BY CO-EXPRESSION WITH PROPEPTIDE
EP3700933A1 (en) 2017-10-25 2020-09-02 Novartis AG Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
JP7223015B2 (ja) 2017-10-25 2023-02-15 ダ・ヴォルテッラ β－ラクタマーゼ変異体
MX2020004145A (es) 2017-10-27 2020-08-03 Novozymes As Variantes de desoxirribonucleasa (dnasa).
PL3476935T3 (pl) 2017-10-27 2022-03-28 The Procter & Gamble Company Kompozycje detergentowe zawierające odmiany polipeptydowe
CN111295093B (zh) 2017-10-30 2024-06-11 美国陶氏益农公司 用于转基因表达的植物启动子
DE102017125559A1 (de) 2017-11-01 2019-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigungszusammensetzungen, die dispersine ii enthalten
DE102017125558A1 (de) 2017-11-01 2019-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigungszusammensetzungen, die dispersine i enthalten
DE102017125560A1 (de) 2017-11-01 2019-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigungszusammensetzungen, die dispersine iii enthalten
SG11202003094PA (en) 2017-11-07 2020-05-28 Codexis Inc Transglutaminase variants
RU2020115758A (ru) 2017-11-10 2021-12-10 Дефенсин Терапьютикс Апс Созревание защитной функции слизистых оболочек и функции кишечника/легких у недоношенного ребенка
EP3707252A1 (en) 2017-11-10 2020-09-16 Novozymes A/S Temperature-sensitive cas9 protein
EP3710580A1 (en) 2017-11-14 2020-09-23 Danisco US Inc. Alpha-amylase, composition and method
EP3954782A1 (en) 2017-11-15 2022-02-16 10X Genomics, Inc. Functionalized gel beads
US10829815B2 (en) 2017-11-17 2020-11-10 10X Genomics, Inc. Methods and systems for associating physical and genetic properties of biological particles
WO2019096903A1 (en) 2017-11-20 2019-05-23 Novozymes A/S New galactanases (ec 3.2.1.89) for use in soy processing
EP3713590B1 (en) 2017-11-24 2025-05-07 Defensin Therapeutics ApS Human beta 2 defensin for use in the prevention and treatment of graft-versus-host-disease
WO2019108619A1 (en) 2017-11-28 2019-06-06 Two Blades Foundation Methods and compositions for enhancing the disease resistance of plants
CN111670248A (zh) 2017-12-04 2020-09-15 诺维信公司 脂肪酶变体以及编码其的多核苷酸
CN111492054A (zh) 2017-12-08 2020-08-04 诺维信公司 α-淀粉酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
ES2955269T3 (es) 2017-12-08 2023-11-29 Novozymes As Variantes de alfa-amilasa y polinucleótidos que codifican las mismas
BR112020011881A2 (pt) 2017-12-13 2020-11-24 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited biocatalisadores de carboxiesterase
WO2019118557A1 (en) 2017-12-13 2019-06-20 Codexis, Inc. Carboxyesterase polypeptides for amide coupling
WO2019125651A1 (en) 2017-12-19 2019-06-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal polypeptides and uses thereof
EP3728574A1 (en) 2017-12-20 2020-10-28 Basf Se Nucleases and methods for making and using them
CN111511771A (zh) 2017-12-22 2020-08-07 诺维信公司 小麦研磨方法和gh8木聚糖酶
WO2019126479A1 (en) 2017-12-22 2019-06-27 AgBiome, Inc. Pesticidal genes and methods of use
CA3087269A1 (en) 2018-01-10 2019-07-18 Brightseed, Inc. Method for modulating metabolism
EP3737226A1 (en) 2018-01-12 2020-11-18 Two Blades Foundation Stem rust resistance genes and methods of use
CA3089135A1 (en) 2018-01-29 2019-08-01 Novozymes A/S Microorganisms with improved nitrogen utilization for ethanol production
WO2019154952A1 (en) 2018-02-08 2019-08-15 Novozymes A/S Lipase variants and compositions thereof
EP3749761A1 (en) 2018-02-08 2020-12-16 Novozymes A/S Lipases, lipase variants and compositions thereof
WO2019157522A1 (en) 2018-02-12 2019-08-15 Curators Of The University Of Missouri Small auxin upregulated (saur) gene for the improvement of plant root system architecture, waterlogging tolerance, drought resistance and yield
WO2019168650A1 (en) 2018-02-28 2019-09-06 The Procter & Gamble Company Methods of cleaning
BR112020018294A2 (pt) 2018-03-09 2020-12-29 Danisco Us Inc. Glucoamilases e métodos de uso dos mesmos
EP4549576A3 (en) 2018-03-12 2025-07-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Methods for plant transformation
US20210002588A1 (en) 2018-03-13 2021-01-07 Novozymes A/S Microencapsulation Using Amino Sugar Oligomers
CN111867377B (zh) 2018-03-14 2023-05-23 先锋国际良种公司 来自植物的杀昆虫蛋白及其使用方法
AU2019234566B2 (en) 2018-03-14 2024-09-26 Hexima Limited Insecticidal proteins from plants and methods for their use
CA3091228A1 (en) 2018-03-20 2019-09-26 Zymergen Inc. A htp platform for the genetic engineering of chinese hamster ovary cells
JP7464530B2 (ja) 2018-03-28 2024-04-09 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー インターロイキン－２／インターロイキン－２受容体アルファ融合タンパク質および使用方法
WO2019185726A1 (en) 2018-03-29 2019-10-03 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
EP3774879B1 (en) 2018-03-30 2026-01-28 Amgen Inc. C-terminal antibody variants
CN112262218B (zh) 2018-04-06 2024-11-08 10X基因组学有限公司 用于单细胞处理中的质量控制的系统和方法
EP3775178B1 (en) 2018-04-06 2025-08-06 Braskem S.A. Novel nadh-dependent enzyme mutants to convert acetone into isopropanol
CN112105729B (zh) 2018-04-09 2024-05-14 诺维信公司 具有α-淀粉酶活性的多肽以及编码它们的多核苷酸
EP3781680A1 (en) 2018-04-19 2021-02-24 Novozymes A/S Stabilized cellulase variants
EP3781679A1 (en) 2018-04-19 2021-02-24 Novozymes A/S Stabilized cellulase variants
US11021717B2 (en) 2018-04-20 2021-06-01 AgBiome, Inc. Pesticidal genes and methods of use
WO2019222226A2 (en) 2018-05-17 2019-11-21 Bp Corporation North America Inc. Production of 2-keto-3-deoxy-d-gluconic acid in filamentous fungi
US11702668B2 (en) 2018-05-22 2023-07-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Plant regulatory elements and methods of use thereof
AR126019A1 (es) 2018-05-30 2023-09-06 Novartis Ag Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación
CN112313378A (zh) 2018-05-31 2021-02-02 诺维信公司 使用溶解性多糖单加氧酶处理溶解浆的方法
UY38251A (es) 2018-06-01 2019-12-31 Novartis Ag Moléculas de unión contra bcma y usos de las mismas
BR112020024863A2 (pt) 2018-06-05 2022-02-01 Lifeedit Inc Nucleases guiadas por rna, fragmentos ativos e variantes das mesmas e métodos de uso
BR112020024839A2 (pt) 2018-06-06 2021-05-18 Zymergen Inc. manipulação de genes envolvidos em transdução de sinal para controlar a morfologia fúngica durante a fermentação e produção
US10900055B2 (en) 2018-06-12 2021-01-26 Codexis, Inc. Engineered tyrosine ammonia lyase
US20210269811A1 (en) 2018-06-27 2021-09-02 Boehringer Ingelheim Rcv Gmbh & Co Kg Means and methods for increased protein expression by use of transcription factors
WO2020002575A1 (en) 2018-06-28 2020-01-02 Novozymes A/S Polypeptides having pectin lyase activity and polynucleotides encoding same
US20210277409A1 (en) 2018-06-28 2021-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Methods for selecting transformed plants
WO2020010101A2 (en) 2018-07-04 2020-01-09 Danisco Us Inc Glucoamylases and methods of use, thereof
SG11202012136YA (en) 2018-07-09 2021-01-28 Codexis Inc Engineered pantothenate kinase variant enzymes
CA3103514A1 (en) 2018-07-09 2020-01-16 Codexis, Inc. Engineered galactose oxidase variant enzymes
MX2021000326A (es) 2018-07-09 2021-03-25 Codexis Inc Desoxirribosa-fosfato aldolasas modificadas geneticamente.
EP3821026A4 (en) 2018-07-09 2022-06-01 Codexis, Inc. MANIPULATED ENZYME VARIANTS OF PHOSPHOPENTOMUTASE
IL279886B2 (en) 2018-07-09 2026-03-01 Codexis Inc Engineered variant purine nucleoside phosphorylase enzymes
WO2020014306A1 (en) 2018-07-10 2020-01-16 Immunogen, Inc. Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof
JP2021531749A (ja) 2018-07-12 2021-11-25 コデクシス， インコーポレイテッド 操作されたフェニルアラニンアンモニアリアーゼポリペプチド
KR102767692B1 (ko) 2018-07-20 2025-02-17 피에르 파브르 메디카먼트 Vista의 수용체
BR112021001282A2 (pt) 2018-07-25 2021-04-27 Novozymes A/S levedura expressando enzimas para produção de etanol
IL280302B2 (en) 2018-07-30 2025-09-01 Codexis Inc Engineered glycosyltransferases and methods for glycosylation of steviol glycoside
US11975057B2 (en) 2018-08-01 2024-05-07 Board of Supervisors of Louisiana State University Agriculture And Mechanical College Compositions comprising herpes simplex virus-i for use in methods of treating and preventing cancer
US11878999B2 (en) 2018-08-29 2024-01-23 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
US11473076B2 (en) 2018-08-31 2022-10-18 Novozymes A/S Animal feed additives and compositions comprising an S8 serine protease
US12460221B2 (en) 2018-09-07 2025-11-04 Basf Plant Science Company Gmbh Method for the production of high levels of PUFA in plants
CA3110656A1 (en) 2018-09-07 2020-03-12 Basf Plant Science Company Gmbh Improved method for the production of high levels of pufa in plants
WO2020049159A1 (en) 2018-09-07 2020-03-12 Basf Plant Science Company Gmbh Improved method for the production of high levels of pufa in plants
SG11202102851XA (en) 2018-09-27 2021-04-29 Celgene Corp SIRPa BINDING PROTEINS AND METHODS OF USE THEREOF
EP3861008A1 (en) 2018-10-03 2021-08-11 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-mannan degrading activity and polynucleotides encoding same
CA3114783A1 (en) 2018-10-08 2020-04-16 Novozymes A/S Enzyme-expressing yeast for ethanol production
UY38407A (es) 2018-10-15 2020-05-29 Novartis Ag Anticuerpos estabilizadores de trem2
IL282456B2 (en) 2018-10-29 2025-07-01 Codexis Inc Engineered dna polymerase variants
EP3874037A4 (en) 2018-10-31 2021-12-15 Zymergen, Inc. DETERMINIST MULTIPLEXED SET OF DNA LIBRARIES
CN113039278A (zh) 2018-10-31 2021-06-25 诺维信公司 通过指导的内切核酸酶和单链寡核苷酸进行基因组编辑
EP3873532A1 (en) 2018-10-31 2021-09-08 Novartis AG Dc-sign antibody drug conjugates
US20210395758A1 (en) 2018-10-31 2021-12-23 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Compositions and methods for ochrobactrum-mediated plant transformation
CN113302293A (zh) 2018-12-12 2021-08-24 诺维信公司 具有木聚糖酶活性的多肽以及编码这些多肽的多核苷酸
SG11202105668PA (en) 2018-12-14 2021-06-29 Codexis Inc Engineered tyrosine ammonia lyase
SG11202106348QA (en) 2018-12-20 2021-07-29 Codexis Inc Human alpha-galactosidase variants
JP7607564B2 (ja) 2018-12-21 2024-12-27 ノバルティス アーゲー Ｐｍｅｌ１７に対する抗体及びその結合体
CN113366103A (zh) 2018-12-21 2021-09-07 诺维信公司 具有肽聚糖降解活性的多肽以及编码其的多核苷酸
ES2970169T3 (es) 2018-12-27 2024-05-27 Lifeedit Therapeutics Inc Polipéptidos útiles para edición génica y métodos de uso
EP3883537A1 (en) 2018-12-27 2021-09-29 Colgate-Palmolive Company Oral care compositions
AU2019418750A1 (en) 2019-01-02 2021-07-22 Intima Bioscience, Inc. Modified adeno-associated viral vectors for use in genetic engineering
JP2022518212A (ja) 2019-01-15 2022-03-14 コデクシス， インコーポレイテッド 操作されたトランスアミナーゼポリペプチド
SG11202107720UA (en) 2019-01-31 2021-08-30 Agency Science Tech & Res Cnx/erp57 inhibitor for use in the treatment or prevention of cancer
WO2020160126A1 (en) 2019-01-31 2020-08-06 Novozymes A/S Polypeptides having xylanase activity and use thereof for improving the nutritional quality of animal feed
US11053515B2 (en) 2019-03-08 2021-07-06 Zymergen Inc. Pooled genome editing in microbes
CN113728106A (zh) 2019-03-08 2021-11-30 齐默尔根公司 微生物中的迭代基因组编辑
BR112021017998A2 (pt) 2019-03-11 2021-11-16 Pioneer Hi Bred Int Métodos para a produção de plantas clonais
AU2020242303B2 (en) 2019-03-21 2026-01-08 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
KR20220004979A (ko) 2019-03-27 2022-01-12 유엠씨 우트레크트 홀딩 비.브이. 조작된 iga 항체 및 사용 방법
US20220170033A1 (en) 2019-03-27 2022-06-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Plant explant transformation
EP3947696A1 (en) 2019-03-28 2022-02-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Modified agrobacterium strains and use thereof for plant transformation
CN113874392B (zh) 2019-03-28 2025-10-21 丹尼斯科美国公司 工程化抗体
MX2021011981A (es) 2019-04-03 2021-11-03 Novozymes As Polipeptidos que tienen actividad de beta-glucanasa, polinucleotidos que los codifican y usos de los mismos en composiciones de limpieza y de detergente.
EP3953462A1 (en) 2019-04-10 2022-02-16 Novozymes A/S Polypeptide variants
CN113795576A (zh) 2019-04-12 2021-12-14 诺维信公司 稳定化的糖苷水解酶变体
EP3963058A4 (en) 2019-05-01 2024-01-03 Codexis, Inc. MODIFIED GLUCOSE DEHYDROGENASES AND PROCESSES FOR THE REDUCTIVE AMINATION OF KETONE AND AMINO COMPOUNDS
JP7584804B2 (ja) 2019-05-01 2024-11-18 コデクシス， インコーポレイテッド 操作されたイミンレダクターゼ、ならびにケトンおよびアミン化合物の還元的アミノ化のための方法
WO2020229191A1 (en) 2019-05-15 2020-11-19 Novozymes A/S Temperature-sensitive rna-guided endonuclease
EP3972993A1 (en) 2019-05-21 2022-03-30 Novartis AG Variant cd58 domains and uses thereof
CN118994397A (zh) 2019-05-21 2024-11-22 诺华股份有限公司 针对bcma的三特异性结合分子及其用途
PE20220568A1 (es) 2019-05-21 2022-04-20 Novartis Ag Moleculas de union a cd19 y usos de las mismas
EP3987022A1 (en) 2019-06-24 2022-04-27 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
MX2021015382A (es) 2019-06-24 2022-01-24 Procter & Gamble Composiciones de limpieza que comprenden variantes de amilasa.
BR112021026248A2 (pt) 2019-06-27 2022-03-03 Two Blades Found Molécula de ácido nucleico isolada que codifica uma proteína atrlp23 engenheirada, proteína atrlp23 engenheirada, cassete de expressão, vetor, célula hospedeira, planta ou célula vegetal, métodos para fazer uma proteína atrlp23 engenheirada, para fazer uma molécula de ácido nucleico que codifica uma proteína atrlp23 engenheirada e para intensificar a resistência de uma planta
WO2021003132A1 (en) 2019-07-02 2021-01-07 Codexis, Inc. Engineered sucrose phosphorylase variant enzymes
EP3994255A1 (en) 2019-07-02 2022-05-11 Novozymes A/S Lipase variants and compositions thereof
JP7726528B2 (ja) 2019-07-02 2025-08-20 コデクシス， インコーポレイテッド 操作された酢酸キナーゼバリアント酵素
EP4004211A1 (en) 2019-07-25 2022-06-01 Novozymes A/S Filamentous fungal expression system
EP4004279A1 (en) 2019-07-26 2022-06-01 Novozymes A/S Enzymatic treatment of paper pulp
EP4004029A1 (en) 2019-07-26 2022-06-01 Novozymes A/S Microorganisms with improved nitrogen transport for ethanol production
CN114929033A (zh) 2019-07-29 2022-08-19 布莱特西德公司 改善消化健康的方法
MX2021015818A (es) 2019-08-06 2022-02-03 Novozymes As Proteinas de fusion para mejorar la expresion de enzimas.
KR20220062289A (ko) 2019-08-12 2022-05-16 라이프에디트 테라퓨틱스, 인크. Rna-가이드된 뉴클레아제 및 그의 활성 단편 및 변이체 및 사용 방법
CN114364795A (zh) 2019-08-22 2022-04-15 巴斯夫欧洲公司 淀粉酶变体
EP4501403A3 (en) 2019-08-30 2025-05-14 Société des Produits Nestlé S.A. Engineered lipase variants
WO2021050348A1 (en) 2019-09-12 2021-03-18 Codexis, Inc. Peroxidase activity towards 10-acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine
CA3152952A1 (en) 2019-09-16 2021-03-25 Novozymes A/S Polypeptides having beta-glucanase activity and polynucleotides encoding same
TW202124446A (zh) 2019-09-18 2021-07-01 瑞士商諾華公司 與ｅｎｔｐｄ２抗體之組合療法
US20220348651A1 (en) 2019-09-18 2022-11-03 Novartis Ag Entpd2 antibodies, combination therapies, and methods of using the antibodies and combination therapies
MX2022004017A (es) 2019-10-02 2022-05-02 Abbott Diabetes Care Inc Deteccion de analitos por medio de interruptores de proteinas.
US20220340843A1 (en) 2019-10-03 2022-10-27 Novozymes A/S Polypeptides comprising at least two carbohydrate binding domains
BR112022007119A2 (pt) 2019-10-14 2022-07-05 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Molécula de ácido nucleico, ácido nucleico, polipeptídeos, vetor, célula hospedeira, planta transgênica, semente transgênica, composição, métodos para controlar uma população de pragas, para matar uma praga, para produzir um polipeptídeo, para proteger uma planta e para aumentar o rendimento em uma planta, planta, uso do ácido nucleico e produto básico
AU2020367523A1 (en) 2019-10-14 2022-04-28 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Novel insect resistant genes and methods of use
EP4058007A4 (en) 2019-11-11 2024-01-03 Brightseed, Inc. Extract, consumable product and method for enriching bioactive metabolite in an extract
EP3821946A1 (en) 2019-11-12 2021-05-19 Université de Strasbourg Anti-claudin-1 monoclonal antibodies for the prevention and treatment of fibrotic diseases
WO2021108209A1 (en) 2019-11-26 2021-06-03 Codexis, Inc. Biocatalysts and methods for hydroxylation of chemical compounds
AU2020402990A1 (en) 2019-12-10 2022-06-09 Novozymes A/S Microorganism for improved pentose fermentation
CN114945664A (zh) 2019-12-19 2022-08-26 诺维信公司 α-淀粉酶变体
CN114829565A (zh) 2019-12-19 2022-07-29 宝洁公司 包含具有α淀粉酶活性的多肽的清洁组合物
JP7793519B2 (ja) 2019-12-19 2026-01-05 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア ファインケミカルを生成する際の空時収率、炭素変換効率、及び炭素基質適応性の増加
WO2021122867A2 (en) 2019-12-19 2021-06-24 Novozymes A/S Xylanase variants and polynucleotides encoding same
KR20220119408A (ko) 2019-12-20 2022-08-29 바스프 에스이 터펜의 독성 감소 및 미생물에서 생산 잠재성 증가
WO2021123307A2 (en) 2019-12-20 2021-06-24 Novozymes A/S Polypeptides having proteolytic activity and use thereof
KR20220129547A (ko) 2019-12-20 2022-09-23 코덱시스, 인코포레이티드 조작된 산성 알파-글루코시다제 변이체
US20230203463A1 (en) 2019-12-30 2023-06-29 LifeEDIT Therapeutics, Inc. Rna-guided nucleases and active fragments and variants thereof and methods of use
MX2022008463A (es) 2020-01-10 2022-10-18 Univ California Plataforma biosintética para la producción de ácido olivetólico y análogos del ácido olivetólico.
US20230056396A1 (en) * 2020-01-17 2023-02-23 Asklepios Biopharmaceutical, Inc. Systems and methods for synthetic regulatory sequence design or production
BR112022014573A2 (pt) 2020-01-24 2022-10-04 Novozymes As Mutantes de uma célula fúngica filamentosa com produtividade aumentada na produção de um polipeptídeo
US12497606B2 (en) 2020-01-31 2025-12-16 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
JP7731360B2 (ja) 2020-01-31 2025-08-29 ノボザイムス アクティーゼルスカブ マンナナーゼバリアント及びそれをコードするポリヌクレオチド
WO2021158686A1 (en) 2020-02-04 2021-08-12 Codexis, Inc. Engineered leucine decarboxylases
US20230142991A1 (en) 2020-02-10 2023-05-11 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
US20240228996A1 (en) 2020-02-10 2024-07-11 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-amylase activity and polynucleotides encoding same
US20230235367A1 (en) 2020-02-10 2023-07-27 Novozymes A/S Process for producing ethanol from raw starch using alpha-amylase variants
WO2021163212A1 (en) 2020-02-10 2021-08-19 Native Microbials, Inc. Microbial compositions and methods of use for canine enteropathy and dysbiosis
IL294909A (en) 2020-02-13 2022-09-01 Zymergen Inc Metagenomic library and natural product discovery platform
CN115428088A (zh) 2020-02-13 2022-12-02 10X基因组学有限公司 用于基因表达和dna染色质可及性的联合交互式可视化的系统和方法
WO2021168399A1 (en) * 2020-02-21 2021-08-26 Regents Of The University Of Minnesota Novel methods for creating alpha-n-methylated polypeptides
EP4110909A1 (en) 2020-02-26 2023-01-04 Novozymes A/S Polypeptide variants
WO2021202463A1 (en) 2020-03-30 2021-10-07 Danisco Us Inc Anti-rsv antibodies
WO2021202473A2 (en) 2020-03-30 2021-10-07 Danisco Us Inc Engineered antibodies
US20230143128A1 (en) 2020-04-08 2023-05-11 Novozymes A/S Carbohydrate binding module variants
CN115427557A (zh) 2020-04-10 2022-12-02 科德克希思公司 工程化转氨酶多肽
CA3175633A1 (en) 2020-04-17 2021-10-21 Danisco Us Inc. Glucoamylase and methods of use thereof
WO2021214059A1 (en) 2020-04-21 2021-10-28 Novozymes A/S Cleaning compositions comprising polypeptides having fructan degrading activity
TW202208626A (zh) 2020-04-24 2022-03-01 美商生命編輯公司 Rna引導核酸酶及其活性片段與變體，以及使用方法
US20230181756A1 (en) 2020-04-30 2023-06-15 Novartis Ag Ccr7 antibody drug conjugates for treating cancer
EP4143224A1 (en) 2020-05-01 2023-03-08 Novartis AG Immunoglobulin variants
CN116096758A (zh) 2020-05-01 2023-05-09 诺华股份有限公司 工程化免疫球蛋白
CA3173882A1 (en) 2020-05-11 2021-11-18 Alexandra Briner CRAWLEY Rna-guided nucleic acid binding proteins and active fragments and variants thereof and methods of use
BR112022024475A2 (pt) 2020-06-04 2022-12-27 Isobionics B V Beta santaleno sintase sintética, ácido nucleico sintético, cassete de expressão, método para produzir uma composição, célula hospedeira não humana, composição, e, uso de qualquer uma das santaleno sintases sintéticas
MX2022016222A (es) 2020-06-17 2023-04-04 Bioconsortia Inc Microbios, composiciones microbianas y consorcios beneficiosos para la agricultura.
WO2022003142A1 (en) 2020-07-03 2022-01-06 Engenes Biotech Gmbh PYRROLYSYL-tRNA SYNTHETASE VARIANTS AND USES THEREOF
US12168774B2 (en) 2020-07-14 2024-12-17 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
JP2023534693A (ja) 2020-07-15 2023-08-10 ライフエディット セラピューティクス，インコーポレイティド ウラシル安定化タンパク質並びにその活性断片及びバリアント並びに使用方法
JP7846667B2 (ja) 2020-07-16 2026-04-15 レジェンド バイオテック アイルランド リミテッド Ｃｄ２０結合分子及びその使用
US11479779B2 (en) 2020-07-31 2022-10-25 Zymergen Inc. Systems and methods for high-throughput automated strain generation for non-sporulating fungi
EP4188960A4 (en) 2020-08-03 2024-09-11 Janssen Biotech, Inc. MATERIALS AND METHODS FOR MULTIDIRECTIONAL BIOTRANSPORTATION IN VIROTHERAPEUTIC PRODUCTS
BR112023002603A2 (pt) 2020-08-10 2023-04-04 Pioneer Hi Bred Int Elementos reguladores de plantas e métodos de uso dos mesmos
WO2022035653A2 (en) 2020-08-10 2022-02-17 E. I. Du Pont De Nemours And Company Compositions and methods for enhancing resistance to northern leaf blight in maize
CA3189083A1 (en) 2020-08-13 2022-02-17 Novozymes A/S Phytase variants and polynucleotides encoding same
EP4200424A1 (en) 2020-08-18 2023-06-28 Novozymes A/S Dispersins expressed with amylase signal peptides
BR112023003468A2 (pt) 2020-08-25 2023-04-11 Novozymes As Variantes de uma xiloglucanase da família 44
US20230265408A1 (en) 2020-08-28 2023-08-24 Novozymes A/S Protease variants with improved solubility
EP4204554A4 (en) 2020-08-28 2024-08-21 Codexis, Inc. MODIFIED PROTEASE VARIANTS
MX2023002421A (es) 2020-08-28 2023-05-18 Codexis Inc Variantes de amilasa modificadas geneticamente.
TWI910226B (zh) 2020-09-11 2026-01-01 美商生命編輯治療學公司 Ｄｎａ修飾酶及活性片段，及其變異體與使用方法
WO2022053706A1 (en) 2020-09-14 2022-03-17 Aesculus Bio Aps Defensin fragment derived lipopeptides for treatment of drug-resistant microorganisms
IL301685A (en) 2020-09-30 2023-05-01 Corteva Agriscience Llc Rapid transformation of monocot leaf explants
CN116507725A (zh) 2020-10-07 2023-07-28 诺维信公司 α-淀粉酶变体
EP4229189A1 (en) 2020-10-13 2023-08-23 Novozymes A/S Glycosyltransferase variants for improved protein production
EP4237525A1 (en) 2020-10-28 2023-09-06 Novozymes A/S Use of lipoxygenase
BR112023008326A2 (pt) 2020-10-29 2023-12-12 Novozymes As Variantes de lipase e composições compreendendo tais variantes de lipase
CN116583534A (zh) 2020-11-02 2023-08-11 诺维信公司 前导肽和编码其的多核苷酸
WO2022090564A1 (en) 2020-11-02 2022-05-05 Novozymes A/S Glucoamylase variants and polynucleotides encoding same
US20250215081A1 (en) 2020-11-06 2025-07-03 Novartis Ag Anti-cd19 agent and b cell targeting agent combination therapy for treating b cell malignancies
US20240025993A1 (en) 2020-11-06 2024-01-25 Novartis Ag Cd19 binding molecules and uses thereof
WO2022106400A1 (en) 2020-11-18 2022-05-27 Novozymes A/S Combination of immunochemically different proteases
WO2022106404A1 (en) 2020-11-18 2022-05-27 Novozymes A/S Combination of proteases
CA3200858A1 (en) 2020-11-24 2022-06-02 Novartis Ag Anti-cd48 antibodies, antibody drug conjugates, and uses thereof
WO2022115524A2 (en) 2020-11-24 2022-06-02 AgBiome, Inc. Pesticidal genes and methods of use
WO2022125960A1 (en) 2020-12-11 2022-06-16 Willow Biosciences, Inc. Recombinant acyl activating enzyme (aae) genes for enhanced biosynthesis of cannabinoids and cannabinoid precursors
US20240052000A1 (en) 2020-12-15 2024-02-15 Novozymes A/S Mutated host cells with reduced cell motility on
WO2022133289A2 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Codexis, Inc. Engineered uridine phosphorylase variant enzymes
EP4015626A1 (en) 2020-12-18 2022-06-22 Isobionics B.V. Enzymes and methods for fermentative production of monoterpene esters
WO2023288294A1 (en) 2021-07-16 2023-01-19 Novozymes A/S Compositions and methods for improving the rainfastness of proteins on plant surfaces
JP2024502832A (ja) 2020-12-31 2024-01-23 アラマー バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド 高親和性及び／または特異性を有する結合剤分子ならびにその製造及び使用方法
CN112725331B (zh) * 2021-01-25 2021-07-20 深圳市狂风生命科技有限公司 一种高通量突变体文库的构建方法
EP4284905A1 (en) 2021-01-28 2023-12-06 Novozymes A/S Lipase with low malodor generation
EP4291646A2 (en) 2021-02-12 2023-12-20 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
AR124921A1 (es) 2021-02-18 2023-05-17 Novozymes As Polipéptidos inactivos que contienen hemo
MX2023009756A (es) 2021-02-22 2023-09-04 Basf Se Variantes de amilasa.
EP4047088A1 (en) 2021-02-22 2022-08-24 Basf Se Amylase variants
EP4305146A1 (en) 2021-03-12 2024-01-17 Novozymes A/S Polypeptide variants
CN116615536A (zh) 2021-03-15 2023-08-18 宝洁公司 含有多肽变体的清洁组合物
EP4060036A1 (en) 2021-03-15 2022-09-21 Novozymes A/S Polypeptide variants
US20240060061A1 (en) 2021-03-15 2024-02-22 Novozymes A/S Dnase variants
CN117295817A (zh) 2021-03-22 2023-12-26 生命编辑制药股份有限公司 Dna修饰酶及其活性片段和变体以及使用方法
US20240218300A1 (en) 2021-03-26 2024-07-04 Novozymes A/S Detergent composition with reduced polymer content
US11913036B2 (en) 2021-04-02 2024-02-27 Codexis, Inc. Engineered acetate kinase variant enzymes
WO2022212828A1 (en) 2021-04-02 2022-10-06 Codexis, Inc. Engineered guanylate kinase variant enzymes
CN117120600A (zh) 2021-04-02 2023-11-24 科德克希思公司 工程化腺苷酸激酶变体酶
US12180483B2 (en) 2021-04-02 2024-12-31 Codexis, Inc. Engineered cyclic GMP-AMP synthase (cGAS) variant enzymes
EP4322761A1 (en) 2021-04-12 2024-02-21 Novozymes A/S Method for producing a meat analogue product
CA3235132A1 (en) 2021-04-16 2022-10-20 Novartis Ag Antibody drug conjugates and methods for making thereof
CA3214227A1 (en) 2021-05-06 2022-11-10 Rebekah Deter Kelly Pesticidal genes and methods of use
BR112023023667A2 (pt) 2021-05-11 2024-01-30 Two Blades Found Métodos para preparar uma biblioteca de genes de resistência à doença de planta e à praga de planta, para identificar um gene de resistência à doença de planta e à praga de planta, para produzir uma planta com resistência aprimorada a uma doença de planta e para limitar uma doença de planta na produção de safras agrícolas, biblioteca de genes de resistência candidatos, planta transgênica, coleção de plantas transgênicas, planta ou célula de planta resistente compreendendo um gene de resistência, gene de resistência isolado, célula hospedeira, molécula de ácido nucleico, cassete de expressão, vetor, planta de trigo, semente de trigo ou célula de trigo, planta ou semente transgênica, planta, semente da planta, uso da planta ou semente, produto alimentício humano ou animal, e, polipeptídeo
TW202313969A (zh) 2021-05-21 2023-04-01 美商克迪科思股份有限公司 經工程化的甲硫胺酸γ解離酶變異體
BR112023024706A2 (pt) 2021-05-27 2024-02-15 Novozymes As Reguladores da transcrição e polinucleotídeos que os codificam
BR112023025624A2 (pt) 2021-06-07 2024-02-27 Novozymes As Célula de levedura recombinante, célula hospedeira recombinante, composição, cocultura, métodos de produção de um derivado de uma célula hospedeira recombinante e de produção de um produto de fermentação, e, uso de uma célula hospedeira recombinante
AU2022290278A1 (en) 2021-06-11 2024-01-04 LifeEDIT Therapeutics, Inc. Rna polymerase iii promoters and methods of use
EP4355868A1 (en) 2021-06-16 2024-04-24 Novozymes A/S Method for controlling slime in a pulp or paper making process
CN117730090A (zh) 2021-07-13 2024-03-19 诺维信公司 重组角质酶表达
WO2023010083A2 (en) 2021-07-30 2023-02-02 Willow Biosciences, Inc. Recombinant prenyltransferase polypeptides engineered for enhanced biosynthesis of cannabinoids
BR112024001952A2 (pt) 2021-08-02 2024-04-30 Basf Se Usos de alfa-ionilidenoetano, de uma alfa-ionilidenoetano sintase e de uma célula hospedeira, métodos para preparar um ou mais compostos aromáticos, para perfumar um produto, conferir e/ou intensificar um odor ou sabor e para produzir alfa-ionona, composto ou composição aromática e/ou composição de fragrância e/ou produto perfumado ou com fragrância, produto perfumado ou com fragrância, e, célula hospedeira para produzir alfa-ionona
CA3227236A1 (en) 2021-08-19 2023-02-23 Trish Choudhary Recombinant olivetolic acid cyclase polypeptides engineered for enhanced biosynthesis of cannabinoids
AU2022356378A1 (en) 2021-09-30 2024-05-02 Two Blades Foundation Plant disease resistance genes against stem rust and methods of use
EP4416257A1 (en) 2021-10-12 2024-08-21 Novozymes A/S Endoglucanase with improved stability
CN119487187A (zh) 2021-10-15 2025-02-18 丹尼斯科美国公司 葡糖淀粉酶变体及其使用方法
AU2022367525A1 (en) 2021-10-15 2024-05-02 Amgen Inc. Activatable polypeptide complex
WO2023064955A1 (en) 2021-10-15 2023-04-20 Cytomx Therapeutics, Inc. Activatable anti-cd3, anti-egfr, heteromultimeric bispecific polypeptide complex
JP2024539650A (ja) 2021-10-15 2024-10-29 シートムエックス セラピューティクス，インコーポレイテッド 活性化可能なポリペプチド複合体
EP4416278A4 (en) 2021-10-15 2026-01-14 Codexis Inc MODIFIED DNA POLYMERASE VARIANTS
KR20240100491A (ko) 2021-10-15 2024-07-01 코덱시스, 인코포레이티드 조작된 말단 데옥시뉴클레오티딜 트랜스퍼라제 변이체
WO2023069921A1 (en) 2021-10-19 2023-04-27 Epimeron Usa, Inc. Recombinant thca synthase polypeptides engineered for enhanced biosynthesis of cannabinoids
CN118475692A (zh) 2021-11-01 2024-08-09 森蒂斯生物公司 工程化亮氨酸脱羧酶
US20250354160A1 (en) 2021-12-07 2025-11-20 AgBiome, Inc. Pesticidal genes and methods of use
EP4444859A1 (en) 2021-12-10 2024-10-16 Novozymes A/S Improved protein production in recombinant bacteria
US20250331529A1 (en) 2021-12-22 2025-10-30 Novozymes A/S Method of Producing a Milk-Based Product
WO2023118565A1 (en) 2021-12-23 2023-06-29 Novozymes A/S Reduction of residual dna in microbial fermentation products
UY40097A (es) 2022-01-07 2023-07-14 Johnson & Johnson Entpr Innovation Inc Materiales y métodos de proteínas de unión a il-1b
CN119317713A (zh) 2022-01-24 2025-01-14 生命编辑制药股份有限公司 Rna引导核酸酶、其活性片段与变体，及使用方法
US20250382601A1 (en) 2022-02-10 2025-12-18 Novozymes A/S Improved expression of recombinant proteins
CN118742287A (zh) 2022-02-22 2024-10-01 诺维信公司 包含酶的口腔护理组合物
US20250179393A1 (en) 2022-03-02 2025-06-05 Novozymes A/S Use of xyloglucanase for improvement of sustainability of detergents
EP4242303A1 (en) 2022-03-08 2023-09-13 Novozymes A/S Fusion polypeptides with deamidase inhibitor and deamidase domains
WO2023170177A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Novozymes A/S Fusion polypeptides with deamidase inhibitor and deamidase domains
WO2023173084A1 (en) 2022-03-11 2023-09-14 University Of Rochester Cyclopeptibodies and uses thereof
CN116891839A (zh) 2022-03-31 2023-10-17 青岛清原化合物有限公司 一种单胺氧化酶及其应用
US20230357381A1 (en) 2022-04-26 2023-11-09 Novartis Ag Multispecific antibodies targeting il-13 and il-18
CN119630280A (zh) 2022-05-14 2025-03-14 诺维信公司 用于预防、处理、抑制和/或消除植物病原性侵染和感染的组合物和方法
US20250263755A1 (en) 2022-05-17 2025-08-21 Novozymes A/S Process for reducing free fatty acids
WO2023247348A1 (en) 2022-06-21 2023-12-28 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
WO2023247514A1 (en) 2022-06-22 2023-12-28 Novozymes A/S Recombinant mannanase expression
EP4544015A2 (en) 2022-06-24 2025-04-30 Novozymes A/S Lipase variants and compositions comprising such lipase variants
EP4547210A1 (en) 2022-06-30 2025-05-07 Novozymes A/S Mutanases and oral care compositions comprising same
WO2024012912A1 (en) 2022-07-15 2024-01-18 Novozymes A/S Polypeptides having deamidase inhibitor activity
CA3262035A1 (en) 2022-07-15 2024-01-18 Janssen Biotech, Inc. BIOLOGICALLY ENGINEERED IMPROVED MATERIAL AND PAIRING METHODS FOR VARIABLE ANTIGEN-BINDING REGIONS
WO2024015953A1 (en) 2022-07-15 2024-01-18 Danisco Us Inc. Methods for producing monoclonal antibodies
EP4311430A1 (en) 2022-07-28 2024-01-31 Limagrain Europe Chlorotoluron tolerance gene and methods of use thereof
WO2024026406A2 (en) 2022-07-29 2024-02-01 Vestaron Corporation Next Generation ACTX Peptides
EP4569096A2 (en) 2022-08-11 2025-06-18 Basf Se Enzyme compositions comprising an amylase
EP4569099A1 (en) 2022-08-11 2025-06-18 Basf Se Enzyme compositions comprising protease, mannanase, and/or cellulase
CA3264752A1 (en) 2022-08-12 2024-02-15 Life Edit Therapeutics, Inc. RNA-GUIDED NUCLEASE AND ACTIVE FRAGMENTS, ASSOCIATED VARIANTS AND METHODS OF USE
EP4573553A1 (en) 2022-08-15 2025-06-25 ABSCI Corporation Quantitative affinity activity specific cell enrichment
WO2024044596A1 (en) 2022-08-23 2024-02-29 AgBiome, Inc. Pesticidal genes and methods of use
TW202424186A (zh) 2022-08-25 2024-06-16 美商生命編輯治療學公司 Rna引導核酸酶中介基因編輯用之具鎖核酸引導 rna之化學修飾
CN119948159A (zh) 2022-09-15 2025-05-06 诺维信公司 真菌信号肽
EP4612284A2 (en) 2022-11-04 2025-09-10 Life Edit Therapeutics, Inc. Evolved adenine deaminases and rna-guided nuclease fusion proteins with internal insertion sites and methods of use
AU2023400641A1 (en) 2022-11-30 2025-05-01 Novozymes A/S Carbonic anhydrase variants and polynucleotides encoding same
WO2024120767A1 (en) 2022-12-05 2024-06-13 Novozymes A/S Modified rna polymerase activities
CN120265742A (zh) 2022-12-05 2025-07-04 诺维信公司 蛋白酶变体以及编码其的多核苷酸
CN120456823A (zh) 2022-12-06 2025-08-08 诺维信公司 涉及蛋白质-脱酰胺酶的肉类类似物产品的生产方法
EP4629838A1 (en) 2022-12-08 2025-10-15 Novozymes A/S Polypeptide having lysozyme activity and polynucleotides encoding same
CN120112175A (zh) 2022-12-08 2025-06-06 诺维信公司 用于包含油籽材料的动物饲料的纤维降解酶
WO2024129674A1 (en) 2022-12-13 2024-06-20 AgBiome, Inc. Pesticidal genes and methods of use
CN120265743A (zh) 2022-12-14 2025-07-04 诺维信公司 改善的脂肪酶（gcl1）变体
CN120322453A (zh) 2022-12-14 2025-07-15 诺维信公司 高强度液体蛋白酶配制品
EP4634383A1 (en) 2022-12-16 2025-10-22 Life Edit Therapeutics, Inc. Guide rnas that target foxp3 gene and methods of use
CN120813696A (zh) 2022-12-16 2025-10-17 勃林格殷格翰 Rcv 两合公司 通过使用转运蛋白与分子伴侣或转录因子的组合来增加蛋白质表达的手段和方法
CA3277009A1 (en) 2022-12-16 2024-06-20 Life Edit Therapeutics, Inc. RNA GUIDELINES TARGETING THE TRAC GENE AND METHODS OF USE
CN120344673A (zh) 2022-12-16 2025-07-18 巴斯夫欧洲公司 新型乙二胺-n,n'-二琥珀酸(edds)合酶
AU2023408197A1 (en) 2022-12-19 2025-06-26 Basf Agricultural Solutions Us Llc Insect toxin genes and methods for their use
EP4638768A2 (en) 2022-12-19 2025-10-29 Novozymes A/S Processes for producing fermentation products using fiber-degrading enzymes with engineered yeast
EP4638725A1 (en) 2022-12-19 2025-10-29 Novozymes A/S Carbohydrate esterase family 3 (ce3) polypeptides having acetyl xylan esterase activity and polynucleotides encoding same
EP4638758A1 (en) 2022-12-19 2025-10-29 BASF Agricultural Solutions US LLC Single-cell methods for the discovery of disease resistance leads
CN120380140A (zh) 2022-12-19 2025-07-25 诺维信公司 具有阿魏酸酯酶和/或乙酰木聚糖酯酶活性的碳水化合物酯酶家族1（ce1）多肽和编码其的多核苷酸
EP4389864A1 (en) 2022-12-20 2024-06-26 Basf Se Cutinases
WO2024133344A1 (en) 2022-12-20 2024-06-27 Novozymes A/S A method for providing a candidate biological sequence and related electronic device
EP4389865A1 (en) 2022-12-21 2024-06-26 Novozymes A/S Recombinant protease for cell detachment
JP2025542263A (ja) 2022-12-21 2025-12-25 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 細胞剥離のための微生物プロテアーゼ
EP4638684A1 (en) 2022-12-21 2025-10-29 Novozymes A/S Recombinant protease for cell detachment
EP4389886A1 (en) 2022-12-22 2024-06-26 Novozymes A/S Lactase enzymes and method of producing a milk-based product
IL322082A (en) 2023-01-12 2025-09-01 Novartis Ag Engineered ketoreductase polypeptides
CN120435539A (zh) 2023-01-23 2025-08-05 诺维信公司 清洁组合物及其用途
KR20250155024A (ko) 2023-02-22 2025-10-29 노보자임스 에이/에스 인버타제를 포함하는 구강 관리 조성물
TW202507006A (zh) 2023-04-12 2025-02-16 美商生命編輯治療學公司 藉由編輯突變亨廷頓基因治療亨廷頓氏病之組合物及方法
AU2024303961A1 (en) 2023-06-13 2025-12-11 Novozymes A/S Processes for producing fermentation products using engineered yeast expressing a beta-xylosidase
CN121358834A (zh) 2023-06-28 2026-01-16 诺维信公司 包含脂肪酶的洗涤剂组合物
CN121443151A (zh) 2023-07-05 2026-01-30 诺维信公司 可发泡乳制品
AU2024290001A1 (en) 2023-07-05 2025-12-04 Novozymes A/S Methods for obtaining plant-based ready-to-drink coffee or tea beverages
WO2025111030A2 (en) 2023-07-07 2025-05-30 Basf Agricultural Solutions Us Llc Use of novel genes for the control of nematode pests
EP4273249A3 (en) 2023-07-07 2024-05-22 Novozymes A/S Improved expression of recombinant proteins
CN121464215A (zh) 2023-07-10 2026-02-03 诺维信公司 人工信号肽
WO2025019221A1 (en) 2023-07-15 2025-01-23 Two Blades Foundation Broad-spectrum polerovirus resistance gene
WO2025022367A2 (en) 2023-07-27 2025-01-30 Life Edit Therapeutics, Inc. Rna-guided nucleases and active fragments and variants thereof and methods of use
WO2025034544A1 (en) 2023-08-04 2025-02-13 Genective Sa Insecticidal proteins compositions and methods of use
WO2025032096A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 Novozymes A/S Methods for obtaining a plant-based food ingredient
WO2025036988A2 (en) 2023-08-15 2025-02-20 Novozymes A/S Polypeptides having alkaline phosphatase activity for animal feed
CN121620590A (zh) 2023-09-01 2026-03-06 诺维信公司 稳定的液体脱酰胺酶组合物
WO2025056701A1 (en) 2023-09-13 2025-03-20 Novozymes A/S Stabilized deamidase compositions
WO2025061262A1 (en) 2023-09-19 2025-03-27 Novozymes A/S Methods for evaluating protein substrate gelling by microbial transglutaminase
WO2025061911A1 (en) 2023-09-22 2025-03-27 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Methods of producing nucleotide triphosphates (ntps)
WO2025068117A1 (en) 2023-09-26 2025-04-03 Novozymes A/S Using protein deamidase in processes for obtaining a seed-based dairy alternative beverage with improved stability
US20250109187A1 (en) 2023-09-28 2025-04-03 Novavax, Inc. ANTI-SARS-CoV-2 SPIKE (S) ANTIBODIES AND THEIR USE IN TREATING COVID-19
WO2024240965A2 (en) 2023-09-29 2024-11-28 Novozymes A/S Droplet-based screening method
WO2025083619A1 (en) 2023-10-18 2025-04-24 Life Edit Therapeutics, Inc. Rna-guided nucleases and acive fragments and variants thereof and methods of use
WO2025088003A1 (en) 2023-10-24 2025-05-01 Novozymes A/S Use of xyloglucanase for replacement of optical brightener
WO2025090606A1 (en) 2023-10-27 2025-05-01 Basf Agricultural Solutions Us Llc Use of novel genes for the control of nematode pests
WO2025103765A1 (en) 2023-11-17 2025-05-22 Novozymes A/S Lytic polysaccharide monooxygenases and their use in detergent
WO2025111274A2 (en) 2023-11-20 2025-05-30 Novozymes A/S Epimerase variants and polynucleotides encoding same
WO2025113371A2 (en) 2023-11-30 2025-06-05 Novozymes A/S Oral care composition comprising peptidase or lactonase
WO2025132815A1 (en) 2023-12-20 2025-06-26 Novozymes A/S Novel cas nucleases and polynucleotides encoding the same
WO2025132872A1 (en) 2023-12-20 2025-06-26 Novozymes A/S Modified leguminous protein with improved colloidal stability
WO2025133162A1 (en) 2023-12-20 2025-06-26 Novozymes A/S Recombinant protein expression
WO2025132905A1 (en) 2023-12-22 2025-06-26 Novozymes A/S Fermentation method
WO2025144700A1 (en) 2023-12-27 2025-07-03 Absci Corporation Nanobody library screening using bacterial surface display
WO2025140303A1 (en) 2023-12-28 2025-07-03 Novozymes A/S Enzymatic treatment of a material comprising corn protein
WO2025155518A1 (en) 2024-01-18 2025-07-24 Pivot Bio, Inc. Host cells for enhanced plant growth
WO2025155521A1 (en) 2024-01-18 2025-07-24 Pivot Bio, Inc. Host cells for enhanced plant growth
WO2025168806A1 (en) 2024-02-08 2025-08-14 Novozymes A/S Polypeptides having carbonic anhydrase activity and polynucleotides encoding same
TW202546224A (zh) 2024-02-12 2025-12-01 美商生命編輯治療學公司 新穎的ｒｎａ引導之核酸酶及用於聚合酶編輯之蛋白質
WO2025178772A1 (en) 2024-02-23 2025-08-28 Genective Sa Insecticidal proteins compositions and methods of use
WO2025189007A1 (en) 2024-03-07 2025-09-12 The Regents Of The University Of California Defining a caffeine demethylation system for improved decaffeination
WO2025191164A2 (en) 2024-03-12 2025-09-18 Novozymes A/S Use of chymopapain in cell detachment
WO2025193453A1 (en) 2024-03-14 2025-09-18 Genective Sa Insecticidal proteins compositions and methods of use
WO2025196175A1 (en) 2024-03-22 2025-09-25 Novozymes A/S Oral care compositions comprising dnases
WO2025217017A1 (en) 2024-04-08 2025-10-16 Novozymes A/S Compositions and methods for increasing phosphorous availability
WO2025226596A1 (en) 2024-04-24 2025-10-30 Novozymes A/S Methods for producing secreted polypeptides
WO2025229230A1 (en) 2024-05-03 2025-11-06 Novozymes A/S Combined carbon capture and soda ash process
WO2025235515A1 (en) 2024-05-07 2025-11-13 Cytomx Therapeutics, Inc. Activatable polypeptide complex formulations
WO2025235589A1 (en) 2024-05-08 2025-11-13 Codexis, Inc. Dna polymerase variants
WO2025235220A1 (en) 2024-05-08 2025-11-13 Genective Sa Insecticidal proteins compositions and methods of use
WO2025233389A1 (en) 2024-05-09 2025-11-13 Novozymes A/S Stabilized liquid deamidase compositions
WO2025233391A1 (en) 2024-05-09 2025-11-13 Novozymes A/S Stabilized liquid deamidase compositions
EP4650443A1 (en) 2024-05-13 2025-11-19 Novozymes A/S Stabilized liquid deamidase compositions
WO2025242320A1 (en) 2024-05-21 2025-11-27 Novozymes A/S Stabilized ready-to-drink coffee beverages
WO2025242702A1 (en) 2024-05-23 2025-11-27 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Enzymatic process for producing n-acetyl galactosamine clusters
WO2025247765A1 (en) 2024-05-30 2025-12-04 Chr. Hansen A/S Non-heated fermented meat analogue product prepared with vegetable protein transglutaminase and pediococcus strains
WO2025257254A1 (en) 2024-06-12 2025-12-18 Novozymes A/S Lipases and lipase variants and the use thereof
WO2025264577A1 (en) 2024-06-20 2025-12-26 Genective Sa Insecticidal proteins, compositions and methods of use
WO2025264584A1 (en) 2024-06-20 2025-12-26 Genective Sa Insecticidal proteins, compositions and methods of use
WO2026003754A1 (en) 2024-06-25 2026-01-02 Life Edit Therapeutics, Inc. Novel reverse transcriptases and uses thereof
WO2026006045A1 (en) 2024-06-25 2026-01-02 Genective Sa Insecticidal proteins, compositions and methods of use
WO2026010930A1 (en) 2024-07-05 2026-01-08 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Use of axmi277 for the control of rotylenchulus reniformis nematode pests
WO2026017381A1 (en) 2024-07-17 2026-01-22 Novozymes A/S Optimized bacillus host cells
WO2024254620A2 (en) 2024-08-01 2024-12-12 Novozymes A/S Protease for diagnostics
WO2026043743A1 (en) 2024-08-21 2026-02-26 Genective Sa Insecticidal proteins compositions and methods of use
WO2026055006A2 (en) 2024-09-03 2026-03-12 Genective Sa Insecticidal proteins compositions and methods of use
WO2026058155A1 (en) 2024-09-11 2026-03-19 Novartis Ag Antibodies targeting il-31
WO2026068782A1 (en) 2024-09-30 2026-04-02 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
WO2026076007A1 (en) 2024-10-04 2026-04-09 Genective Sa Insecticidal proteins compositions and methods of use
WO2026076952A1 (en) 2024-10-08 2026-04-16 Novozymes A/S Processes for obtaining dairy protein-based ready-to-drink beverages

Family Cites Families (154)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4994379A (en) * 1983-03-09 1991-02-19 Cetus Corporation Modified signal peptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US5422266A (en) 1984-12-31 1995-06-06 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Recombinant DNA vectors capable of expressing apoaequorin
US5176995A (en) * 1985-03-28 1993-01-05 Hoffmann-La Roche Inc. Detection of viruses by amplification and hybridization
US4965188A (en) * 1986-08-22 1990-10-23 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences using a thermostable enzyme
US4683202A (en) * 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US6492107B1 (en) 1986-11-20 2002-12-10 Stuart Kauffman Process for obtaining DNA, RNA, peptides, polypeptides, or protein, by recombinant DNA technique
GB2183661B (en) * 1985-03-30 1989-06-28 Marc Ballivet Method for obtaining dna, rna, peptides, polypeptides or proteins by means of a dna recombinant technique
US4959312A (en) 1985-05-31 1990-09-25 The University Of Tennessee Research Corporation Full spectrum mutagenesis
EP0208491B1 (en) * 1985-07-03 1993-08-25 Genencor International, Inc. Hybrid polypeptides and process for their preparation
US5866363A (en) 1985-08-28 1999-02-02 Pieczenik; George Method and means for sorting and identifying biological information
US4800159A (en) * 1986-02-07 1989-01-24 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences
DK311186D0 (da) * 1986-06-30 1986-06-30 Novo Industri As Enzymer
US5824469A (en) * 1986-07-17 1998-10-20 University Of Washington Method for producing novel DNA sequences with biological activity
US4994368A (en) * 1987-07-23 1991-02-19 Syntex (U.S.A.) Inc. Amplification method for polynucleotide assays
US4994367A (en) 1988-10-07 1991-02-19 East Carolina University Extended shelf life platelet preparations and process for preparing the same
FR2641793B1 (fr) * 1988-12-26 1993-10-01 Setratech Procede de recombinaison in vivo de sequences d'adn presentant des mesappariements de bases
DD282028A5 (de) 1989-02-16 1990-08-29 Akad Wissenschaften Ddr Verfahren zur herstellung einer thermostabilen, hybriden bacillus-beta-1,3-1,4-glukanase
US5043272A (en) 1989-04-27 1991-08-27 Life Technologies, Incorporated Amplification of nucleic acid sequences using oligonucleotides of random sequence as primers
US5106727A (en) * 1989-04-27 1992-04-21 Life Technologies, Inc. Amplification of nucleic acid sequences using oligonucleotides of random sequences as primers
US5556750A (en) * 1989-05-12 1996-09-17 Duke University Methods and kits for fractionating a population of DNA molecules based on the presence or absence of a base-pair mismatch utilizing mismatch repair systems
CA2016841C (en) * 1989-05-16 1999-09-21 William D. Huse A method for producing polymers having a preselected activity
CA2016842A1 (en) * 1989-05-16 1990-11-16 Richard A. Lerner Method for tapping the immunological repertoire
IT1231157B (it) * 1989-07-20 1991-11-19 Crc Ricerca Chim Nuovi geni ibridi funzionali di bacillus thuringiensis ottenuti mediante ricombinazione in vivo.
US5574205A (en) 1989-07-25 1996-11-12 Cell Genesys Homologous recombination for universal donor cells and chimeric mammalian hosts
US5023171A (en) * 1989-08-10 1991-06-11 Mayo Foundation For Medical Education And Research Method for gene splicing by overlap extension using the polymerase chain reaction
WO1991006570A1 (en) * 1989-10-25 1991-05-16 The University Of Melbourne HYBRID Fc RECEPTOR MOLECULES
US5071743A (en) 1989-10-27 1991-12-10 Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By The National Research Council Of Canada Process for conducting site-directed mutagenesis
DE3936258C1 (ja) 1989-10-31 1991-04-25 Max-Planck-Gesellschaft Zur Foerderung Der Wissenschaften Ev, 3400 Goettingen, De
AU6886991A (en) * 1989-11-08 1991-06-13 United States of America, as represented by the Secretary, U.S. Department of Commerce, The A method of synthesizing double-stranded dna molecules
ES2078518T3 (es) * 1990-04-05 1995-12-16 Roberto Crea Mutagenesis por desplazamiento completo.
WO1991016427A1 (en) 1990-04-24 1991-10-31 Stratagene Methods for phenotype creation from multiple gene populations
US5877402A (en) 1990-05-01 1999-03-02 Rutgers, The State University Of New Jersey DNA constructs and methods for stably transforming plastids of multicellular plants and expressing recombinant proteins therein
US5851813A (en) * 1990-07-12 1998-12-22 President And Fellows Of Harvard College Primate lentivirus antigenic compositions
US5571208A (en) 1990-07-13 1996-11-05 Caspers; Carl A. Reinforced prosthetic polyurethane hypobaric sleeve
WO1992001814A2 (en) 1990-07-24 1992-02-06 F. Hoffmann-La-Roche Ag The reduction of non-specific amplification during in vitro nucleic acid amplification using modified nucleic acid bases
US5169764A (en) 1990-08-08 1992-12-08 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Multitrophic and multifunctional chimeric neurotrophic factors, and nucleic acids and plasmids encoding the chimeras
US5264563A (en) * 1990-08-24 1993-11-23 Ixsys Inc. Process for synthesizing oligonucleotides with random codons
JP3306063B2 (ja) * 1990-08-24 2002-07-24 イグジス， インコーポレイテッド ランダムコドンを有するオリゴヌクレオチドを合成する方法
US5698426A (en) * 1990-09-28 1997-12-16 Ixsys, Incorporated Surface expression libraries of heteromeric receptors
US5770434A (en) * 1990-09-28 1998-06-23 Ixsys Incorporated Soluble peptides having constrained, secondary conformation in solution and method of making same
IL99553A0 (en) * 1990-09-28 1992-08-18 Ixsys Inc Compositions containing oligonucleotides linked to expression elements,a kit for the preparation of vectors useful for the expression of a diverse population of random peptides and methods utilizing the same
US5871974A (en) * 1990-09-28 1999-02-16 Ixsys Inc. Surface expression libraries of heteromeric receptors
US5858725A (en) * 1990-10-10 1999-01-12 Glaxo Wellcome Inc. Preparation of chimaeric antibodies using the recombinant PCR strategy
US5234824A (en) * 1990-11-13 1993-08-10 Specialty Laboratories, Inc. Rapid purification of DNA
US5187083A (en) * 1990-11-13 1993-02-16 Specialty Laboratories, Inc. Rapid purification of DNA
US5489523A (en) * 1990-12-03 1996-02-06 Stratagene Exonuclease-deficient thermostable Pyrococcus furiosus DNA polymerase I
EP0563296B1 (en) * 1990-12-20 1999-03-17 Ixsys, Inc. Optimization of binding proteins
DE4112440C1 (ja) * 1991-04-16 1992-10-22 Diagen Institut Fuer Molekularbiologische Diagnostik Gmbh, 4000 Duesseldorf, De
US5795747A (en) * 1991-04-16 1998-08-18 Evotec Biosystems Gmbh Process for manufacturing new biopolymers
JPH06510116A (ja) * 1991-04-17 1994-11-10 ベミス・マニファクチュアリング・カンパニー データ点解析の方法及び装置
US5514568A (en) * 1991-04-26 1996-05-07 Eli Lilly And Company Enzymatic inverse polymerase chain reaction
US5512463A (en) * 1991-04-26 1996-04-30 Eli Lilly And Company Enzymatic inverse polymerase chain reaction library mutagenesis
ES2091976T3 (es) 1991-06-20 1996-11-16 Hoffmann La Roche Metodos perfeccionados para la amplificacion del acido nucleico.
WO1993000103A1 (en) * 1991-06-21 1993-01-07 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Chimeric envelope proteins for viral targeting
JP3442774B2 (ja) 1991-07-01 2003-09-02 バーレックス ラボラトリーズ，インコーポレイティド 新規な突然変異誘発法および組成物
US6071889A (en) 1991-07-08 2000-06-06 Neurospheres Holdings Ltd. In vivo genetic modification of growth factor-responsive neural precursor cells
US5223408A (en) * 1991-07-11 1993-06-29 Genentech, Inc. Method for making variant secreted proteins with altered properties
GB9115364D0 (en) * 1991-07-16 1991-08-28 Wellcome Found Antibody
US5279952A (en) * 1991-08-09 1994-01-18 Board Of Regents, The University Of Texas System PCR-based strategy of constructing chimeric DNA molecules
AU665025B2 (en) * 1991-09-23 1995-12-14 Cambridge Antibody Technology Limited Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach
GB9125979D0 (en) * 1991-12-06 1992-02-05 Wellcome Found Antibody
FR2685004A1 (fr) * 1991-12-11 1993-06-18 Pasteur Institut Procede de generation d'une diversite structurale et fonctionnelle dans une sequence peptidique.
AU674137B2 (en) * 1992-01-30 1996-12-12 Genzyme Limited Chiral synthesis with modified enzymes
US5773267A (en) 1992-02-07 1998-06-30 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University, A Division Of Yeshiva University D29 shuttle phasmids and uses thereof
GB9202796D0 (en) * 1992-02-11 1992-03-25 Wellcome Found Antiviral antibody
US5843643A (en) 1992-02-21 1998-12-01 Ratner; Paul L. Site-specific transfection of eukaryotic cells using polypeptide-linked recombinant nucleic acid
CA2131389A1 (en) * 1992-03-02 1993-09-16 John M. Maraganore Thrombin receptor antagonists
CA2132306C (en) 1992-03-16 2012-07-10 Jacob N. Wohlstadter Selection methods
DE69333823T2 (de) 1992-03-24 2006-05-04 Cambridge Antibody Technology Ltd., Melbourn Verfahren zur herstellung von gliedern von spezifischen bindungspaaren
US5316935A (en) 1992-04-06 1994-05-31 California Institute Of Technology Subtilisin variants suitable for hydrolysis and synthesis in organic media
DK0643772T3 (da) 1992-06-03 1998-02-02 Genentech Inc Glycosyleringsvarianter af vævsplasminogenaktivator med forbedrede terapeutiske egenskaber
WO1993025237A1 (en) * 1992-06-15 1993-12-23 City Of Hope Chimeric anti-cea antibody
MX9304135A (es) * 1992-07-10 1995-01-31 Energy Biosystems Corp Adn recombinante que codifica un biocatalizador de desulfuracion.
US6107062A (en) * 1992-07-30 2000-08-22 Inpax, Inc. Antisense viruses and antisense-ribozyme viruses
FR2694754B1 (fr) 1992-08-12 1994-09-16 Bio Merieux Fragments d'ADN de mycobactéries, amorces d'amplification, sondes d'hybridation, réactifs et procédé de détection de détection de mycobactéries.
US5837821A (en) * 1992-11-04 1998-11-17 City Of Hope Antibody construct
EP0675953B1 (en) * 1992-11-10 2009-01-28 Applied Molecular Evolution, Inc. Soluble peptides having constrained, secondary conformation in solution and method of making same
US5360728A (en) * 1992-12-01 1994-11-01 Woods Hole Oceanographic Institution (W.H.O.I.) Modified apoaequorin having increased bioluminescent activity
ATE199392T1 (de) * 1992-12-04 2001-03-15 Medical Res Council Multivalente und multispezifische bindungsproteine, deren herstellung und verwendung
US5571708A (en) 1993-04-19 1996-11-05 Bristol-Myers Squibb Company Thrombin-activatable plasminogen activator
IT1264712B1 (it) * 1993-07-13 1996-10-04 Eniricerche Spa Metodo di sintesi biologica di peptidi
US5498531A (en) 1993-09-10 1996-03-12 President And Fellows Of Harvard College Intron-mediated recombinant techniques and reagents
US5474920A (en) 1993-11-23 1995-12-12 State Of Oregon, Acting By And Through The Oregon State Board Of Higher Education On Behalf Of The Oregon Health Sciences University Modified thermo-resistant DNA polymerases
US5556772A (en) * 1993-12-08 1996-09-17 Stratagene Polymerase compositions and uses thereof
DE4343591A1 (de) * 1993-12-21 1995-06-22 Evotec Biosystems Gmbh Verfahren zum evolutiven Design und Synthese funktionaler Polymere auf der Basis von Formenelementen und Formencodes
US5605793A (en) 1994-02-17 1997-02-25 Affymax Technologies N.V. Methods for in vitro recombination
US6165793A (en) 1996-03-25 2000-12-26 Maxygen, Inc. Methods for generating polynucleotides having desired characteristics by iterative selection and recombination
US6395547B1 (en) * 1994-02-17 2002-05-28 Maxygen, Inc. Methods for generating polynucleotides having desired characteristics by iterative selection and recombination
US6335160B1 (en) * 1995-02-17 2002-01-01 Maxygen, Inc. Methods and compositions for polypeptide engineering
US5834252A (en) 1995-04-18 1998-11-10 Glaxo Group Limited End-complementary polymerase reaction
US5837458A (en) * 1994-02-17 1998-11-17 Maxygen, Inc. Methods and compositions for cellular and metabolic engineering
US5928905A (en) * 1995-04-18 1999-07-27 Glaxo Group Limited End-complementary polymerase reaction
US6117679A (en) 1994-02-17 2000-09-12 Maxygen, Inc. Methods for generating polynucleotides having desired characteristics by iterative selection and recombination
US6995017B1 (en) * 1994-02-17 2006-02-07 Maxygen, Inc. Methods for generating polynucleotides having desired characteristics by iterative selection and recombination
US5521077A (en) * 1994-04-28 1996-05-28 The Leland Stanford Junior University Method of generating multiple protein variants and populations of protein variants prepared thereby
EP0714980A1 (en) 1994-12-02 1996-06-05 Institut Pasteur Hypermutagenesis
WO1996017056A1 (en) 1994-12-02 1996-06-06 Institut Pasteur Hypermutagenesis
US5514588A (en) 1994-12-13 1996-05-07 Exxon Research And Engineering Company Surfactant-nutrients for bioremediation of hydrocarbon contaminated soils and water
US5629179A (en) * 1995-03-17 1997-05-13 Novagen, Inc. Method and kit for making CDNA library
KR100501838B1 (ko) * 1995-04-24 2005-07-21 큐비스트 파마슈티컬즈 인코포레이티드 새로운 대사 경로를 만들고 이를 스크리닝하는 방법
US6030779A (en) 1995-07-18 2000-02-29 Diversa Corporation Screening for novel bioactivities
US6057103A (en) 1995-07-18 2000-05-02 Diversa Corporation Screening for novel bioactivities
US6004788A (en) 1995-07-18 1999-12-21 Diversa Corporation Enzyme kits and libraries
US5958672A (en) * 1995-07-18 1999-09-28 Diversa Corporation Protein activity screening of clones having DNA from uncultivated microorganisms
US6168919B1 (en) 1996-07-17 2001-01-02 Diversa Corporation Screening methods for enzymes and enzyme kits
WO1997007206A1 (en) * 1995-08-11 1997-02-27 Okkels, Jens, Sigurd Method for preparing polypeptide variants
US5962258A (en) 1995-08-23 1999-10-05 Diversa Corporation Carboxymethyl cellulase fromthermotoga maritima
FR2738840B1 (fr) 1995-09-19 1997-10-31 Rhone Poulenc Rorer Sa Souches de levures genetiquement modifiees
US6051409A (en) 1995-09-25 2000-04-18 Novartis Finance Corporation Method for achieving integration of exogenous DNA delivered by non-biological means to plant cells
US5756316A (en) * 1995-11-02 1998-05-26 Genencor International, Inc. Molecular cloning by multimerization of plasmids
US6171820B1 (en) 1995-12-07 2001-01-09 Diversa Corporation Saturation mutagenesis in directed evolution
US5830696A (en) * 1996-12-05 1998-11-03 Diversa Corporation Directed evolution of thermophilic enzymes
US5965408A (en) * 1996-07-09 1999-10-12 Diversa Corporation Method of DNA reassembly by interrupting synthesis
US20030215798A1 (en) 1997-06-16 2003-11-20 Diversa Corporation High throughput fluorescence-based screening for novel enzymes
US6352842B1 (en) 1995-12-07 2002-03-05 Diversa Corporation Exonucease-mediated gene assembly in directed evolution
US6361974B1 (en) 1995-12-07 2002-03-26 Diversa Corporation Exonuclease-mediated nucleic acid reassembly in directed evolution
US6238884B1 (en) 1995-12-07 2001-05-29 Diversa Corporation End selection in directed evolution
US5939250A (en) 1995-12-07 1999-08-17 Diversa Corporation Production of enzymes having desired activities by mutagenesis
US6358709B1 (en) 1995-12-07 2002-03-19 Diversa Corporation End selection in directed evolution
US5814473A (en) 1996-02-09 1998-09-29 Diversa Corporation Transaminases and aminotransferases
US5962283A (en) 1995-12-07 1999-10-05 Diversa Corporation Transminases and amnotransferases
JP2000502568A (ja) * 1996-01-10 2000-03-07 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ 細胞内での突然変異ライブラリーの ｉｎ ｖｉｖｏ製造のための方法
US5942430A (en) 1996-02-16 1999-08-24 Diversa Corporation Esterases
US5958751A (en) 1996-03-08 1999-09-28 Diversa Corporation α-galactosidase
US6096548A (en) * 1996-03-25 2000-08-01 Maxygen, Inc. Method for directing evolution of a virus
US5783431A (en) * 1996-04-24 1998-07-21 Chromaxome Corporation Methods for generating and screening novel metabolic pathways
US5789228A (en) 1996-05-22 1998-08-04 Diversa Corporation Endoglucanases
US5877001A (en) 1996-06-17 1999-03-02 Diverso Corporation Amidase
US5763239A (en) 1996-06-18 1998-06-09 Diversa Corporation Production and use of normalized DNA libraries
US5939300A (en) 1996-07-03 1999-08-17 Diversa Corporation Catalases
US6093873A (en) 1996-08-19 2000-07-25 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale Genetically engineered mice containing alterations in the gene encoding RXR
US5834458A (en) 1996-10-09 1998-11-10 Eli Lilly And Company Heterocyclic compounds and their use
WO1998028416A1 (en) * 1996-12-20 1998-07-02 Novo Nordisk A/S In vivo recombination
US6326204B1 (en) * 1997-01-17 2001-12-04 Maxygen, Inc. Evolution of whole cells and organisms by recursive sequence recombination
EP1717322B1 (en) * 1997-01-17 2012-07-18 Codexis Mayflower Holdings, LLC Evolution of whole cells and organisms by recursive sequence recombination
EP0973940B1 (en) * 1997-03-18 2008-07-02 Novozymes A/S An in vitro method for the construction of a dna library
CA2284097A1 (en) * 1997-03-18 1998-09-24 Novo Nordisk A/S Shuffling of heterologous dna sequences
JP4263248B2 (ja) * 1997-03-18 2009-05-13 ノボザイムス アクティーゼルスカブ Ｄｎａのシャッフリングによるライブラリーの作成方法
US5948653A (en) 1997-03-21 1999-09-07 Pati; Sushma Sequence alterations using homologous recombination
US6153410A (en) * 1997-03-25 2000-11-28 California Institute Of Technology Recombination of polynucleotide sequences using random or defined primers
US6051049A (en) 1997-05-29 2000-04-18 Exothermic Distribution Corporation Utilization of strontium aluminate in steelmaking
US5948666A (en) 1997-08-06 1999-09-07 Diversa Corporation Isolation and identification of polymerases
US5876997A (en) 1997-08-13 1999-03-02 Diversa Corporation Phytase
DK1036198T3 (da) 1997-12-08 2013-01-02 California Inst Of Techn Fremgangsmåde til fremstilling af polynukleotid- og polypeptidsekvenser
US6087341A (en) 1998-02-12 2000-07-11 The Board Of Trustees Of The Leland Standford Junior University Introduction of nucleic acid into skin cells by topical application
US6365408B1 (en) 1998-06-19 2002-04-02 Maxygen, Inc. Methods of evolving a polynucleotides by mutagenesis and recombination
KR20010083086A (ko) 1998-07-28 2001-08-31 추후제출 기능적 진핵세포 단백질의 발현
KR20010083077A (ko) 1998-08-12 2001-08-31 추후제출 제초제 선택성 작물을 생성하는 ｄｎａ 재편성
CA2331335A1 (en) 1998-09-29 2000-04-06 Maxygen, Inc. Shuffling of codon altered genes
US6376246B1 (en) * 1999-02-05 2002-04-23 Maxygen, Inc. Oligonucleotide mediated nucleic acid recombination
US6397053B1 (en) * 1999-12-30 2002-05-28 Koninklijke Philips Electronics N.V. (Kpenv) Reduction of power consumption with increased standby time in wireless communications device
US20050084907A1 (en) * 2002-03-01 2005-04-21 Maxygen, Inc. Methods, systems, and software for identifying functional biomolecules
US20090312196A1 (en) * 2008-06-13 2009-12-17 Codexis, Inc. Method of synthesizing polynucleotide variants

Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003524416A (ja) * 2000-01-11 2003-08-19 バイエル・バイオサイエンス・エヌ・ヴェー 生物学的サンプル中のエリートイベントｇａｔ−ｚｍ１を同定する方法およびキット
JP2003519665A (ja) * 2000-01-14 2003-06-24 ニュー・ホライズンズ・ダイアグノスティックス・コーポレイション 細菌感染の治療処置における、細菌ファージに関連した溶菌酵素の非経口使用
JP2003521933A (ja) * 2000-02-10 2003-07-22 ゼンコー タンパク質ライブラリーに関するタンパク質設計オートメーション
JP2003533228A (ja) * 2000-05-16 2003-11-11 カリフォルニア インスティテュート オブ テクノロジー オキシダーゼ酵素の指向的進化
US7122310B2 (en) 2000-10-11 2006-10-17 Sanko Junyaku Co., Ltd. Methods of constructing self-assembly of probes and method of detecting the same
JP2006502706A (ja) * 2002-07-25 2006-01-26 エムジェイ バイオワークス インコーポレーティッド ハイブリッドタンパク質方法および組成物
JP2006500934A (ja) * 2002-10-04 2006-01-12 マックワリー ユニバーシティ ランダムドリフト突然変異誘発
JP2006504438A (ja) * 2002-11-01 2006-02-09 エヴォジェニクス・ピーティーワイ・リミテッド リバビリンおよび／またはｒｎａレプリカーゼを使用した変異誘発方法
JP4789271B2 (ja) * 2005-12-02 2011-10-12 シンセティック ゲノミクス、インク． エラーが最小化された核酸分子の合成
JP2011523555A (ja) * 2008-06-04 2011-08-18 モディクエスト べー．フェー． 抗炎症剤
US9718877B2 (en) 2008-06-04 2017-08-01 Modiquest B.V. Anti-inflammatory agents
US10703822B2 (en) 2008-06-04 2020-07-07 Modiquest B.V. Anti-inflammatory agents

Also Published As

Publication number Publication date
US6277638B1 (en) 2001-08-21
EP0752008B1 (en) 2002-04-24
AU2010200270A1 (en) 2010-02-18
JP2003174881A (ja) 2003-06-24
EP1094108A3 (en) 2001-05-09
ATE216722T1 (de) 2002-05-15
AU2006202542A1 (en) 2006-07-13
CA2182393C (en) 2005-05-17
DK0934999T3 (da) 2002-02-18
DE1094108T1 (de) 2002-10-17
JP4067516B2 (ja) 2008-03-26
US6602986B1 (en) 2003-08-05
US20040241853A1 (en) 2004-12-02
RU2157851C2 (ru) 2000-10-20
JP2003033180A (ja) 2003-02-04
US6287861B1 (en) 2001-09-11
DK0752008T3 (da) 2002-06-17
AU703264C (en) 2003-06-12
WO1995022625A1 (en) 1995-08-24
US6132970A (en) 2000-10-17
DE934999T1 (de) 2001-04-05
US20100222237A1 (en) 2010-09-02
US6576467B1 (en) 2003-06-10
ES2165652T3 (es) 2002-03-16
US20080261833A1 (en) 2008-10-23
DE69526497T2 (de) 2002-11-21
US5605793A (en) 1997-02-25
DE69525084T2 (de) 2002-07-11
DE69525084D1 (de) 2002-02-28
JP2007244399A (ja) 2007-09-27
US7981614B2 (en) 2011-07-19
EP0752008A1 (en) 1997-01-08
US5830721A (en) 1998-11-03
JP2004254709A (ja) 2004-09-16
US6420175B1 (en) 2002-07-16
JP2001057893A (ja) 2001-03-06
EP0934999B1 (en) 2002-01-09
EP0934999A1 (en) 1999-08-11
EP0752008A4 (en) 1999-03-17
AU703264B2 (en) 1999-03-25
EP1205547A3 (en) 2002-07-24
ES2176324T3 (es) 2002-12-01
DE69526497D1 (de) 2002-05-29
CN1145641A (zh) 1997-03-19
EP1094108A2 (en) 2001-04-25
EP0752008B2 (en) 2013-04-10
US5811238A (en) 1998-09-22
US6444468B1 (en) 2002-09-03
US7288375B2 (en) 2007-10-30
EP1205547A2 (en) 2002-05-15
US6297053B1 (en) 2001-10-02
JP3485560B2 (ja) 2004-01-13
ATE211761T1 (de) 2002-01-15
CA2182393A1 (en) 1995-08-24
JP3393848B2 (ja) 2003-04-07
DE752008T1 (de) 2001-04-05
AU2971495A (en) 1995-09-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP4067516B2 (ja) ランダムフラグメント化および再組立によるｄｎａ変異誘発
JP4015193B2 (ja) 反復的選択および組換えにより所望の特徴を有するポリヌクレオチドを作製する方法
US20120252701A1 (en) Methods for generating polynucleotides having desired characteristics by iterative selection and recombination
JP2000514651A (ja) 合成または増幅過程をブロックまたは中断することにより製造されたポリヌクレオチドによるｄｎａのシャッフリング方法
JP2002505845A (ja) Ｄｎａシャッフリング方法
KR100491810B1 (ko) 무작위단편화및재조립에의한dna돌연변이유발방법
CA2497384C (en) Dna mutagenesis by random fragmentation and reassembly
AU744681B2 (en) Methods for generating polynucleotides having desired characteristics by iterative selection and recombination
AU747034B2 (en) DNA mutagenesis by random fragmentation and reassembly
AU2747302A (en) DNA mutagenesis by random fragmentation and reassembly
AU2747402A (en) DNA mutagenesis by random fragmentation and reassembly